JPH09502986A

JPH09502986A - コンホメーションが固定されたヌクレオシド類縁体

Info

Publication number: JPH09502986A
Application number: JP7509961A
Authority: JP
Inventors: イー．マルケス、ヴィクター; ビー．ロドリゲス、ジュアン; シー．ニックラウス、マーク; ジェイ．ジュニア．バーチ、ジョセフ; エイ．シッディキ、マクブール
Original assignee: US Department of Health and Human Services
Current assignee: US Department of Health and Human Services
Priority date: 1993-09-24
Filing date: 1994-09-23
Publication date: 1997-03-25
Anticipated expiration: 2018-12-22
Also published as: DK0720604T3; GR3026166T3; AU677441B2; US5629454A; EP0720604B1; ATE160340T1; US5869666A; ES2111960T3; AU7842094A; EP0720604A1; DE69406943D1; JP3481945B2; DE69406943T2; WO1995008541A1

Abstract

(57)【要約】コンホメーションが固定された４’，６’−シクロプロパン融合炭素環ヌクレオシド類縁体。この化合物は、シクロプロパン融合炭素環アリルアルコールを、置換プリン又はピリミジン塩基で縮合することによって調製される。次に、その縮合生成物は、変性されて、アデノシン、グアノシン、シチジン、チミヂン、ウラシルヌクレオシド類縁体を生成する。これらの化合物は、抗代謝剤として又は抗代謝試薬の調製に、治療上有効である。

Description

【発明の詳細な説明】コンホメーションが固定されたヌクレオシド類縁体発明の分野本発明はヌクレオシド類縁体、ならびにその合成法に関わる。より具体的には本発明はシクロプロパン融合環状炭素環を含むヌクレオシド類縁体に関する。発明の背景天然のヌクレオシド類縁体中、３’水酸基または２’および３’両方の水酸基が欠失したヌクレオシド類縁体は、それらが組み込まれているＤＮＡのチェーン・ターミネーターとして作用することができる。ウイルス複製の抑制剤としてのこれらの物質の設計および使用法に焦点を当てた精力的な検討が行われてきた（ヴァン・ロージイ(Van Rosy)ら（１９９０年）、Ａｎｎ．ＮＹＡｃａｄ．Ｓｃｉ．、５１６：２９）。これら類縁体の糖部分のコンホメーション（立体配座）は、３’−アジド−３’−デオキシチミジン（ＡＺＴ）およびジデオキシイノシン（ｄｄＩ）を始めとする誘導体によって仲介される抗ＨＩＶ１活性などの生物学的活性の変調に決定的な役割を果たすものと信じられているが、特定のタイプの糖コンホメーションとヌクレオシド類縁体の生物学的活性を相関させようとする場合に直面する大きな問題は、糖リング（環）が極めて柔軟で変形しやすく、溶液におけるコンホメーションが固体状態のコンホメーションと著しく異なったものとなることがあることである（ジャガナード(Jagannadh)ら、（１９９１年）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、１７９：３８６；プラベック(Plavec)ら、（１９９２年）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、２５：２５３）。したがって、固相のコンホメーションパラメータだけに基づいた構造−機能分析はいかなるものも、あらかじめ溶液と固体状態のコンホメーションが同一であると判明しているものでない限り、不正確なものとなる。ある［３．１．０］−融合２’，３’−修飾シクロプロパン−融合ジデオキシヌクレオシド（図１Ａ；ウー(Wu)およびチャトパヂャーヤ(Chattopadhyaya)、（１９９０年）ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．、４６：２５８７；オカベおよびサン(Sun)、（１９８９年）ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．、３０：２２０３；ビアード(Beard)ら、（１９９０年）Ｃａｒｂｏｈｙｄ．Ｒｅｓ．、２０５：８７；コディントン(Codington)ら、（１９６２年）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、２７：１６３）は非常に強固であり、それらの改変された糖部分は溶液中において固相と同じコンホメーション選好性を有するようである。しかしながら、これらの化合物のフラノース環のコンホメーションは、ヌクレオシドの特徴であるノーザン（Ｎ）またはサザン（Ｓ）型の幾何学的コンホメーションの典型的な範囲からははるか外にはずれている（クールス(Kools)ら、（１９９１年）、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、５６：６８６４）。別のタイプの[３．１．０]−融合物で、４’および６’炭素の間にエポキシド環を有するものが天然の炭素環式ヌクレオシド類縁体ネプラノシンＣにおいて発見（キノシタら、（１９８５年）、Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ＆Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ、４：６６１）されているが、この化合物はそのため強固なＮ−構造をとることが可能となっている。溶液中においてはＮおよびＳ型のフラノースコンホーマーの間に動的な平衡がある（テイラー(Taylor)ら、（１９９０年）、ＡｎｔｉｖｉｒａｌＣｈｅｍ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、１：１６３〜１７３）。ヌクレオシドおよびそれらの類縁体のコンホメーションは、グリコシル結合鎖の幾何学的形状（ｓｙｎまたはａｎｔｉ）、エキソサイクリックＣ４’−Ｃ５’結合の周りの回転、ならびにねじれコンホメーションおよびエンベロープコンホメーションの形成をもたらす糖環のパッカリング（縮み、puckering）によって説明することができる。リボース環のパッカリングとしてはＣ３’−エンド（Ｎ）およびＣ２’−エンド（Ｓ）の２つのコンホメーションが好ましい。エンド（ｅｎｄｏ）およびエキソ（ｅｘｏ）とはそれぞれ、リボース環の平面の上方または下方への原子の変位を意味する。ねじれ角χ[Ｃ２−Ｎ１−Ｃ１’−Ｏ４’（ピリミジン類）またはＣ４−Ｎ９ −Ｃ１’−Ｏ４’（プリン類）]およびγ（Ｃ３’−Ｃ４’−Ｃ５’−Ｏ５’）はそれぞれ、リボース環に対する塩基および５’−水酸基の配向を表す。リボヌクレオシドおよび２’−デオキシリボヌクレオシドにおいては、２つのタイプの糖パッカリング、すなわちＣ３’−エンド（Ｎ）およびＣ２’−エンド（Ｓ）コンホメーションが、通常エネルギー的に好ましい。ＤＮＡ複合体においては、ヌクレオシドの繰り返し単位の２’−エンド（Ｓ）コンホメーションが二重らせんにＢ型コンホメーションを与え、一方３’−エンド（Ｎ）コンホメーションがＡ型コンホメーションの二重らせんをもたらす。ＤＮＡのＡおよびＢ型はらせん１巻き当りの塩基対の数、１塩基対当りの回転量、１塩基対当りの立ち上がり量(Vertical rise)およびらせん直径が異なる。さらに、別のプリン類およびピリミジン類を含むＤＮＡ鎖においてはＺ−ＤＮＡと呼ばれる左巻きらせんを形成することがある。ＤＮＡは溶液中でいくつかの異なったコンホメーションで存在しうるため、本発明はＤＮＡを特定のコンホメーションに固定(lock)する手段を提供するものである。これは、ＤＮＡ−タンパク、ＤＮＡ−ＤＮＡおよびＤＮＡ−ＲＮＡ間の相互作用に影響を及ぼす構造的要件を解明するのに有用であり、またこれらの相互作用を特異的に遮断することができる高価値の薬剤の開発に役立つものである。発明の要旨本発明は下記式を有するコンホメーションが固定された化合物を提供する。［式中、Ｒ₁はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシルまたはそれらの誘導体であり、またＲ₂およびＲ₃はそれぞれ独立にＨまたはＯＨである］。好ましい一実施態様においては、これらの化合物はノーザン構造に固定される。本発明の種々の実施態様においては、Ｒ₂＝Ｒ₃＝Ｈ、Ｒ₃＝ＯＨかつＲ₃＝Ｈ、またはＲ₂＝Ｒ₃＝ＯＨのうちのいずれかとされる。本発明の好ましい実施態様においては、ジデオキシプリン、ジデオキシピリミジン、デオキシプリン、デオキシピリミジン、プリンリボヌクレオシド、およびピリミジンリボヌクレオシドの炭素環式４’，６’−シクロプロパン−融合−２’，３’−誘導体が提供される。本発明はまたコンホメーションが固定された対応ヌクレオチド類も含む。本発明は、別の様相においては、１以上の前記化合物を含むオリゴヌクレオチド類、および本質的に前記化合物からなるオリゴヌクレオチド類も提供する。本発明は、さらに別の様相においては、上記化合物のアデノシンおよびグアノシン種を製造するプロセスを提供し、このプロセスにはシクロプロパン化アリルアルコールを含む炭素環式アルコールを用い、そのアリルアルコールを６−ハロプリンまたは２−アミノ−６−ハロプリンと縮合させて、前記アリルアルコールに前記プリン誘導体をＣ１’−Ｎ９結合を介して結合させた縮合物を得、次にこの２−アミノ−６−ハロプリンのハロ基をアミノ基に置換してアデノシン類縁体を形成するか、または水酸基と置換してグアノシン類縁体を形成することが含まれるものである。この製法の特定の１つの実施態様においては、炭素環式アルコールがジヒドロキシシクロプロパン化アリルアルコールであり、縮合物はプリンリボヌクレオシド類縁体である。本発明は、別の様相においては、本発明によるコンホメーションが固定されたピリミジンヌクレオシド類縁体を製造するプロセスを提供し、このプロセスにはシクロプロパン化アリルアルコールを包含する炭素環式アルコールを用い、この炭素環式アルコールをＮ３−保護チミンまたはＮ３保護ウラシルと縮合させ、炭素環式アルコールにチミンまたはウラシル誘導体をＣ１’−Ｎ１結合を介して結合させた縮合物を形成する段階を含むものである。対応するシチジン類縁体は、本発明のウラシル類縁体の水酸基を保護する段階を加えることにより生成されるが、これは上記のようにして調製された類縁体を処理してウラシルのＣ４にトリアゾール中間体を形成し、アミノ分解によりトリアゾール基を置換してシチジン類縁体を調製する。本発明のこの様相に関する特定の実施態様においては、炭素環式アルコールは保護されたジヒドロキシシクロプロパン化アリルアルコールであり、縮合物はピリミジンリボヌクレオシド類縁体を包含する。本発明によるコンホメーションが固定されたヌクレオシド類縁体のデオキシヌクレオシド類縁体は、対応するリボースヌクレオシド類縁体のＣ−２’ヒドロキシル官能基に対するラジカル誘導脱酸素によって調製される。本発明はまた下記の化合物をも提供する：［式中、Ｒはアルキル基、アリール基、アルキルアリール基およびアロイル基からなる群から選択される］。本発明のさらに別の実施態様は下記の各段階を含む上記化合物の製造方法である。（ａ）下記の化合物：を用意し、（ｂ）段階（ａ）で得られる化合物をトリメチルアルミニウムと反応させて、４ ’および５’位それぞれにｔｅｒｔ−ブチロキシ置換基およびヒドロキシ置換基を形成し；（ｃ）段階（ｂ）で得られる化合物をバルキーな基(bulky group)を用いてシリル化することにより１’位の水酸基を保護し；（ｄ）Ｏ−（メチルチオ）チオカルボニロキシ基を５’位に形成し；（ｅ）当該Ｏ−（メチルチオ）チオカルボニロキシ基を除去し；（ｆ）前記シリル基を１’位から除去してアリルアルコールを形成し；そして（ｇ）前記アリルアルコールを環状プロパン化して、炭素環式アルコールを生成させる。図面の簡単な説明図１は本発明に基づく４’，６’シクロプロパン−融合炭素環式ジデオキシヌクレオシド類縁体を示す：アデノシン（５）、グアノシン（６）、チミジン（７）、ウラシル（８）、およびシチジン（９）。図２は¹Ｈ−ＮＭＲにより導き出された化合物１２のコンホメーションを示す。両方向矢印は１−Ｄ核オーバーハウザー効果（ＮＯＥ）差異実験における相互強化を示したものである。図３はＨＩＶ１感染ＡＴＨ８細胞を使用した細胞変性効果検定を示す。薬剤濃度はＸ軸に、また生存細胞数はｘ１０，０００倍でＹ軸に示されている。８０Ａ１０は化合物（５）に相当し、ｄｄＩはジデオキシイノシンである。白抜きの棒は薬剤処理した感染していない細胞を示す。黒ベタの棒は薬剤処理した感染細胞を示す。発明の詳細な説明本発明の化合物は炭素環式ジデオキシヌクレオシドの最初の例を示すもので、これは従来のありふれたヌクレオシドに典型的な、規定のＮ型（Ｃ３’−エンド）コンホメーションに固定された形で溶液中に存在するものである。これらの類縁体は、リボース環内の酸素の炭素置換および環状プロパン融合基によって安定性の増進が見られる。このジデオキシアデノシン類縁体はインビトロにおいて抗ＨＩＶ活性を示す。本明細書及び請求の範囲においては、オリゴヌクレオシドおよびオリゴヌクレオシドという用語は、３’−５’ホスホジエステル結合している２つ以上の隣接したヌクレオシドまたはヌクレオチドを指す。化学合成において、“保護”という用語は、反応によって基に置換物が付着するのを防ぐために、反応に先立って化学的置換物を添加することを意味する。“脱保護”とは保護基を外すことを意味する。本発明は４’，６’−シクロプロパン−融合炭素環式ジデオキシヌクレオシド、２’−デオキシヌクレオシドおよびリボヌクレオシド、ならびにこれらの類縁体から誘導されたオリゴヌクレオチド類も含む。これらのオリゴヌクレオチド類はもっぱら本発明のヌクレオシド類縁体から合成することができる。さらに、１つ以上のヌクレオシド類縁体から誘導され、天然のヌクレオシドと組み合わされたものもまた本発明の範疇に入る。これらの化合物は５つの天然窒素系塩基であるアデニン、グアニン、シトシン、チミンおよびウラシルを含む。本発明はまた、これらのジデオキシヌクレオシド類縁体とともに、対応する２’−デオキシリボヌクレオシド類およびリボヌクレオシド類の合成法も含む。本発明のアデノシン、グアノシン、シチジン、チミジン、およびウリジンジデオキシヌクレオシド類縁体を調製する合成反応式は以下の実施例中に記述されている。これら類縁体はＤＮＡおよびＲＮＡに認められる天然の窒素系塩基を、シクロプロパン融合炭素環式リボース環に対するＮ９（プリン）またはＮ１（ピリミジン）結合のいずれかに含んでいる。プリンおよびピリミジン環の置換による修飾塩基を含むシクロプロパン融合炭素環式ヌクレオシド類縁体の合成および利用もまた本発明の範疇に入る。例示したヌクレオシド類縁体の合成反応式の際だった特徴は、５’−ＯＨ−保護アリルアルコール１０および２９の“水酸基を指向した”環状プロパン化を、サマリウム（２＋）カルベノイド中間体を経由して行い（モランダー(Molander) およびエッター(Etter)、（１９８７年）、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５２：３９４２；モランダーおよびハーリング(Harring)、（１９８９年）、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５４：３５２５）、４’，６’−シクロプロパン置換炭素環式アルコール１１および３０（実施例１、２、２１）を形成することを含んでいることである。この化学反応は２’、３’、５’−ＯＨ保護炭素環式化合物を使用して同様に行うことができる。２’−デオキシヌクレオシド類縁体は、炭素環式アルコールがｔｅｒｔ−ブチル基を４位に含み（対応するデオキシヌクレオシドの３’位に相当）反応段階中ＯＨ基を保護すること以外は、ジデオキシヌクレオシド類縁体と同じ合成反応式により調製することができる。このｔｅｒｔ−ブチル置換炭素環式アルコール３０はカイラル物質であるため、ラセミ混合体からの活性異性体を分離するための合成物質の光学的分割は必要とされない。ｔｅｒｔ−ブチル炭素環式アルコールの合成について以下に簡単に説明し、詳細を実施例１６〜２２に記述する。（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−３−[（ベンジロキシ）メチル]−４，５−Ｏ−イソプロピリデン−２−シクロペンテン−１−オール（２４）は、１−カルボニル（２３）からマルケス(Marquez)ら、（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、５３：５７０９、１９８８年）の方法に基づいて調製される。ベンジロキシ基が３位にあるが、以下の合成段階に３−アリールオキシ、アルキルオキシ、アルキルアリールオキシまたはアロイルオキシ基を使用することはいずれも本発明の範疇に入る。次に化合物２４はトリメチルアルミニウムとの反応により、４位および５位にそれぞれｔｅｒｔ−ブチルオキシ置換基およびヒドロキシ置換基を含む化合物２５を生成する。このｔｅｒｔ−ブチル基は以下のすべての合成段階において４−ヒドロキシ基を効果的に保護する。化合物２５は次に１位のヒドロキシ基を保護するためにシリル化されて化合物２６を形成する。シリル化剤はｔｅｒｔ−ブチル基を効果的に排除するために、大きな、バルキーな化学基であることが重要であり、これによって次の合成段階が効率的に進行する。化合物２６はヨードメチルおよび二硫化炭素と反応し、５位に（メチルチオ）カルボニルオキシ基を形成する（化合物２７）。このバルキーな基は、バルキーな基間に働く反発力によってシリル基とｔｅｒｔ−ブチル基の間に収まることができる。次にＯ−（メチルチオ）カルボニルオキシ基全体がトリ−ｎ−ブチルスズ水素化物により除去され、化合物２８を形成する。シリル基は次にフッ化テトラブチルアンモニウムにより除去され、アリルアルコール２９を形成する。次にこのアリルアルコールは前記のようにシクロプロパン化され、ｔｅｒｔ−ブチル置換基を４位に含んでこの位置の水酸基を保護するシクロプロパン化炭素環式アルコール３０を形成する。次にプリンヌクレオシド類縁体は実施例３〜１０に記述されているように調製される。炭素環式アルコール１１および３０はともに、プリン合成のための出発原料として使用される。炭素環式アルコール１１はミツノブ型縮合（ミツノブ、（１９８０年）、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ１；ジェニー(Jenny)ら、（１９９１年）、ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．、３２：７０２９；ジェニーら、（１９９２年）、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．７５：１９４４年）で６−ハロ−置換プリン環と反応して、ハロゲン化中間体１３（実施例５）および１４（実施例６）を形成する。６−クロロプリンおよび２−アミノ−６−クロロプリンが使用されているが、修飾プリン類縁体を作るために６位の他の置換基もこの合成反応式に組み込むことも想定されている。さらに、その他のハロゲン置換プリンの使用もまた企図されている。置換塩素基は次いでアンモニアと置換されて５’−ＯＨ保護アデノシン１６（実施例７）、またはベンジル塩と置換されて５ ’−ＯＨおよび６−ＯＨ保護グアノシン１７（実施例８）誘導体を形成し、これらは次にアデノシンおよびグアノシン誘導体５（実施例９）および６（実施例１０）を形成するために脱ブロックされる。ピリミジン類縁体の合成反応式の主な特徴を実施例１１〜１５に記載する。この反応式には、Ｎ−３保護ウラシルまたはＮ−３保護チミンと炭素環式アルコール１１または３０との縮合が含まれ、保護されたミツノブ縮合物１８（実施例１１）および１９（実施例１２）が形成される。置換Ｎ−３保護塩基の使用もまた本発明の範疇に入る。化合物１８および１９は次いで保護が外され、チミジン類縁体７（実施例１３）およびウラシル類縁体８（実施例１４）が形成される。化合物８の５’−ＯＨ基は次にアセチル基で保護され、中間体２１（実施例１５）を形成し、その化合物にはピリミジン環のＣ４にトリアゾール基が導入されるが、この誘導には多くの基を使用することも考慮されている。このトリアゾール基は次にアンモニアで置換され、シチジン誘導体９（実施例１５）が形成される。コンホメーションが固定されたリボヌクレオシドの合成本発明のリボヌクレオシド種は、実施例３、４、９、および１０の炭素環式アリルアルコールを、マルケス(marquez)，Ｖ．らの方法によりＤ−リボースから形成される当量のイソプロピリデン−保護炭素環式アリルアルコールで置換して調製される（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、５３：５７０９（１９９８年）の化合物８ａ）。この化合物は次に実施例１記載のようにシクロプロパン化される。残りの合成段階は、実施例３、４、９、および１０に記載のミツノブ型カップリング反応に始まるものと同じものである。当業者は周知の反応を使用して本発明の合成段階を実施する数多くの別法があることを承知しているであろう。本発明のジデオキシヌクレオシド類縁体化合物は鎖延長に必要な３’水酸基が存在しないために、オリゴヌクレオチド、ＤＮＡまたはＲＮＡを形成する能力が無い。ただし、３’−水酸基が存在するリボヌクレオシドおよびデオキシリボヌクレオシド種は、天然のヌクレオシド種と同様に反応してポリヌクレオシドを形成することができる。これらの２’−デオキシリボヌクレオシドおよびリボヌクレオシド類縁体が合成され、かつ普通のリンアミドと同様に反応する塩基類縁体のリンアミドが合成されると、当業者は当業界周知の自動式合成法を利用してオリゴデオキシリボヌクレオチドおよびオリゴリボヌクレオチドを合成することができる（Ｇａｉｔ、Ｍ．Ｊ．編、ＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ：ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ、ワシントンＤ．Ｃ．：ＩＲＬＰｒｅｓｓ、１９８４年）。さらに、周知の化学的方法を使用してホスフェート基を含む対応ヌクレオチドを調製することもまた本発明の範疇に入る。これらの２’−デオキシリボヌクレオシドおよびリボヌクレオシド類縁体は溶液中において強固なＮ型コンホメーションをとるものと考えられている。この２ ’−デオキシリボヌクレオシドおよびリボヌクレオシド類縁体は普通のヌクレオシドと同じ目的で有用なものである。たとえば、核酸コード配列、ＤＮＡ結合タンパクと相互作用することが知られている調節配列を合成するのに使用でき、またハイブリダイゼーション分析用の合成プローブを作るのに使用できる。これらのオリゴヌクレオチド類縁体はまた発現ベクターに挿入することもでき、それらから機能配列が転写されることになる。このようにそれぞれの類縁体は機能ＤＮＡまたはＲＮＡオリゴヌクレオチド類縁体を形成するのに有用である。２’−デオキシヌクレオシドおよびリボヌクレオシド類縁体を含むＤＮＡおよびＲＮＡオリゴヌクレオチドは安定性が増し、対象遺伝子のｍＲＮＡ転写を抑制するアンチセンス分子として有用である。さらに、このヌクレオシド類縁体はＤＮＡを合成して、Ａ−コンホメーションに固定することができ、これによりさらなる発見のための科学的ツールとして使用することができる。２’−デオキシリボヌクレオシドおよびリボヌクレオシド類縁体の合成により、基質としてノーザンコンホーマーを必要とするタンパクおよび酵素とより強力に反応する分子を調製することが可能となる。個々の核酸のコンホメーションは平衡コンホメーションであるため、ＤＮＡおよびＲＮＡとそれぞれに結合するＤＮＡおよびＲＮＡタンパクの全体的な相互作用は各種のコンホメーションの相互作用を合計したものである。Ｎ型コンホメーションに固定されたヌクレオチド単位を有するＤＮＡおよびＲＮＡは、核酸と核酸結合タンパクの相互作用を解明するのに有用である。これは特異的なＤＮＡ−タンパク相互作用を抑制することができる新しい治療法に結び付くものであり、有害な遺伝子産物の合成の抑制および /または有益な遺伝子産物の合成を増加させることができる。またこの技術を使用して調製される他のタイプのシクロプロパン融合ヌクレオシド類は、塩基およびヒドロキシメチル基の相対位置を単に変えるだけで、反対（Ｓ）の構造に固定された化合物を創製できることも想定されている。本発明のヌクレオシド類縁体を使用して合成されたオリゴヌクレオチドは従来のオリゴヌクレオチドに比べて、それらの構造が強固であるために複合体の形成においてエントロピー変化が極めて小さいものとなる。このことは従来のＤＮＡフラグメントに比べてハイブリダイゼーションにおいてより好ましい負の自由エネルギー変化で済むことになる。この新しい方法を使用し、天然ヌクレオシドを本発明の類縁体と組み合わせることにより、二重鎖らせん中にタンパクおよび/ または核酸に対する結合能力を増強または減少させる特定の“ｂｅｎｄ（屈曲） ”を作りだすＤＮＡフラグメントを構築することができる。上記の例は、以下に添付の請求の範囲で規定される本発明の全容を限定するものではなく、説明に供するためのものである。すべての化学試薬は市販供給源から入手した。シリカゲル・カラムクロマトグラフィーはシリカゲル６０、２３０〜４００メッシュ（メルク）で行った。分析用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）はアナルテック・ユニプレート（ＡｎａｌｔｅｃｈＵｎｉｐｌａｔｅｓ）のシリカゲルＧＦで行った。プロトンおよび¹³ Ｃ−ＮＭＲスペクトルはブルッカー（Ｂｒｕｃｋｅｒ）ＡＣ−２５０装置により、２５０および６２．９ＭＨｚでそれぞれ記録した。ＮＭＲによるコンホメーションの検討はブルッカーＡＭＸ−５００装置により５００ＭＨｚで行った。化学シフトはテトラメチルシランとの対比でδ値で示した。正イオン高速衝撃（ＦＡＢ）質量スペクトルはＦＡＢイオン源を備えたＶＧ７０７０Ｅ質量分光計で測定した。サンプルはグリセリンマトリックス中に溶解し、イオン化はキセノン原子ビームにより行った。元素分析はアトランティック・マイクロラボ社（Ｎｏｒｃｒｏｓｓ、ＧＡ）により行った。紫外線スペクトルは島津ＵＶ−２１０１ＰＣ型分光光度計により測定した。これらの測定値は以下に記述する各合成段階の後に記載した。プリンおよびピリミジン塩基を炭素環部分に一工程で組み込むために収斂方式 (convergent approach)を用いた。適当な塩基とのミツノブ型の縮合は、普通の炭素環式アルコール中間体である（＋/−）−５−[（ベンジロキシ）メチル]− ２−ヒドロキシ−シス−ビシクロ[３．１．０]ヘキサン（１１、反応式１および２）を使用して行われた。本発明は下記の実施例により詳細に説明されているが、記述されている方法は本明細書記載のヌクレオシド類縁体すべての調製に幅広く使用されるものであり、下に挙げた実施例に限定されるものではない。実施例１中間体、炭素環式アルコール１−ベンジロキシメチル−シス− ビシクロ［３．１．０］ヘキサン−４−オール１１の合成乾燥した丸底フラスコに金属サマリウム（５．０４ｇ、３３．６ｍｍｏｌ）を入れ、同時にアルゴンを勢いよく通し、炎を当てて乾燥した。次いで無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ；５０ｍｌ）を添加し、さらに１０ｍｌのＴＨＦに溶解させた塩化第二水銀（ＨｇＣｌ₂；０．８８ｇ、３．２ｍｍｏｌ）溶液を加えた。得られた混合物を１０分間攪拌し、アリルアルコール１０（１．５２ｇ、７．４５ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を−７８℃に冷却し、クロロヨードメタン（ＣＨ₂ＩＣｌ；２．３２ｍｌ、３２ｍｍｏｌ）を加え、−７８℃で一夜攪拌した。混合物を室温まで加温し、１時間攪拌した。反応液を３００ｍｌの飽和炭酸ナトリウムでクエンチし、塩化メチレンで数回抽出した。有機層を合一し、生理食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、濾過・留去することにより、純粋な化合物１１を無色油状物としてほぼ理論収率で得た。この油状物をさらに精製することなく次工程で用いた。実施例２４−アセトキシ−１−ベンジロキシ−シス− ビシクロ［３．１．０］ヘキサン１２化合物１１（１０９ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を３ｍｌの無水ピリジンに溶解し、この溶液を２ｍｌの無水酢酸で処理した。得られた混合物を室温で一夜攪拌した。溶媒を留去し、残渣をフラッシュ・クロマトグラフィー（溶離剤：ヘキサン −酢酸エチル＝４：１）で精製して、安定な酢酸誘導体１２をｍｇ得た。酢酸塩１２（図２）のＮＯＥ差異一¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、シクロプロパン化の様式から推定される二環系の特徴とよく一致した。プリン・ジデオキシヌクレオシド類縁体の合成実施例３５’−ベンジロキシ−４’，６’−シクロプロピル− ２’，３’−ジデオキシ−６−クロロアデノシン１３３ｍｌの無水ＴＨＦに懸濁させた６−クロロプリン（１４８ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）懸濁液に、ジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ；２０６ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を１０分間激しく攪拌した。次いで、アルコール１１（２１８ｍｇ、５ｍｌのＴＨＦ中に１ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で一夜攪拌した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルに吸着させてカラムクロマトグラフィーにより精製した。ヘキサン：酢酸エチル（＝３：２）で溶出し、７５ｍｇの純粋な化合物１３（収率２１％）を白色固体として、また、２４ｍｇの７−Ｎ誘導体１５を淡黄色油状物として得た。実施例４炭素環式−５’−ベンジル−４’，６’−シクロプロピル− ２’，３’−ジデオキシ−６−クロログアニン１４トリフェニルフォスフィン（Ｐｈ₃Ｐ；２．６７２ｇ、１０．２４ｍｍｏｌ）と２−アミノ−６−クロロプリンを６０ｍｌの無水ＴＨＦに懸濁させて得た懸濁液にＤＥＡＤ（１．７６ｍｌ、１１．２６ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で加え、得られた黄色の混合物を室温で１０分間攪拌した。化合物１１（６７０ｍｇ、３．０７ｍｍｏｌ）を５ｍｌのＴＨＦに溶解して得た溶液を添加し、この混合物を室温で１８時間攪拌した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルに吸着させてカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、４３５ｍｇの化合物１４を白色固体として得た（収率３８％）。実施例５炭素環式−５’−ベンジロキシ−４’，６’−シクロプロピル− ２’，３’−ジデオキシアデノシン１６化合物１３（２１５ｍｇ）を密封管中でメタノールに溶解させた飽和アンモニア溶液（５ｍｌ）で処理し、７０℃で一夜攪拌した。得られた混合物を室温まで冷却し、溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（溶離剤：ＣＨＣｌ₃−イソプロパノール＝９：１）し、１０９ｍｇの純粋な化合物１６を白色固体として得た（収率：５４％）。実施例６炭素環式−５’−ベンジル−４’，６’−シクロプロピル− ２’，３’−ジデオキシ−６−ベンジルグアニジン１７無水ベンジルアルコール（ＰｈＣＨ₂ＯＨ）を１００ｍｇのナトリウムで処理し、得られた懸濁液をアルゴン雰囲気中でナトリウム金属が残存しなくなるまで激しく攪拌した。化合物１４を１．５ｍｌのベンジル化ナトリウムで処理し、１０分間攪拌した。反応液を２５ｍｌの水でクエンチし、３０ｍｌの塩化メチレンを添加した。有機層をｐＨが７になるまで水洗し、硫酸マグネシウムで乾燥、蒸させた。残渣をフラッシュ・クロマトグラフィー（溶離剤：ヘキサン−酢酸エチル＝１：１）に付し、１６１ｍｇの純粋な化合物１７を白色固体として得た（収率：７７％）。実施例７炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’− ジデオキシアデノシン５パラジウム−１０％木炭（３００ｍｇ）をアルゴンガスで１５分間パージし、次いでこれに５ｍｌのメタノールに溶解させた５０ｍｇの化合物１６を添加した。得られた混合物を１ｇのギ酸アンモニウムで処理し、３時間還流した。この混合物を室温で放冷し、濾過して、溶媒を留去した。残渣を逆相カラム（溶離剤：水）で精製し、１２ｍｇの純粋な化合物５を淡黄色固体として得た（収率：３３％）。実施例８炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’− ジデオキシグアノシン６３５ｍｌの無水塩化メチレンに溶解させた化合物１７（１５４ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下−７８℃で冷却し、３．０ｍｌの１．０Ｍ三塩化ホウ素（ＢＣｌ₃）で処理して、−７８℃で６時間攪拌した。溶媒を留去し、残渣を３０ｍｌの塩化メチレン中に溶解させた。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム（３×３０ｍｌ）および水（２×３０ｍｌ）で洗浄して、硫酸マグネシウム上で乾燥、蒸発させた。残渣を逆相カラム（溶離剤：水）で精製し、５０ｍｇの純粋な化合物６を白色固体として得た（収率：５５％）。ピリミジン誘導体についても、以下の実施例９〜１３に記載するように、保護されたＮ−３−ベンゾイルチミン若しくはＮ−３−ベンゾイルウラシル［クルイクシャンク(Cruickshank)ら（１９８４年）、ｓ．テトラヘドロン・レターズ、６８１］をミツノブの条件下で用いて合成し、同等の収率を得た。ピリミジンジデオキシヌクレオシド類縁体の合成実施例９炭素環式−５’−ベンゾイロキシ−４’，６’−シクロプロピル− ２’，３’−ジデオキシ−３−ベンゾイルチミジン１８トリフェニルフォスフィン（Ｐｈ₃Ｐ；１．３４０ｇ、５．１０ｍｍｏｌ）を１６ｍｌの無水ＴＨＦに溶解させた溶液にＤＥＡＤ（８６０μｌ、５．０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を０℃で３０分間攪拌し、次いで４５℃に冷却した。得られた懸濁液に、１６ｍｌのＴＨＦに溶解させた３−Ｎ−ベンゾイルチミン（Ｎ−３−ＢｚＴｈｙ；９２０ｍｇ、４ｍｍｏｌ）と炭素環式アルコール１１（４６０ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を４５分かけて加え、混合物を４５℃で一夜攪拌した。この混合物を室温に温め、溶媒を蒸発させた。残渣をフラッシュ・クロマトグラフィー（溶離剤：ヘキサン−酢酸エチル＝７：３）に付し、Ｎ−アルキル化物とＯ−アルキル化物の混合物を得た。この混合物をシリカゲル・カラムクロマトグラフィー（溶離剤：塩化メチレン−エーテル＝９７．５：２．５）に付して再精製すると、３３０ｍｇ（収率：３６％）の目的Ｎ−アルキル化物１８を白色固体として、また、４００ｍｇ（収率：４４％）の目的物ではないＯ−アルキル化物２０を油状物として得た。この溶媒系においては化合物１８は化合物２０よりもより速く溶出した。実施例１０炭素環式−５’−ベンジロキシ−４’，６’−シクロプロピル− ２’，３’−ジデオキシ−３−ベンゾイルウリジン１９Ｐｈ₃Ｐ（８５７ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌ）を１０ｍｌの無水ＴＨＦに溶解させて得た溶液に、ＤＥＡＤ（０．５００ｍｌ、３．２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を０℃で３０分間攪拌し、次いで−７８℃に冷却した。反応液に、２５ｍｌのＴＨＦに溶解させた３−Ｎ−ベンゾイルウラシル（Ｎ−３−ＢｚＵｒ；５５０ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）と炭素環式アルコール１１（２８０ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を１０分かけて加えた。この混合物を５０℃で一夜攪拌し、室温まで温め、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤：塩化メチレン−エーテル＝９８：２）に付して精製し、１５０ｍｇ（収率：２８％）の純粋な化合物１９を無色油状物として得た。実施例１１炭素環式−４’，５’−シクロプロピル−２’，３’− ジデオキシチミジン７化合物１８（１５０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を１００ｍｌのメタノールに懸濁させた。次いで濃アンモニア（４ｍｌ）を加え、混合物を室温で１６時間攪拌した。溶媒を留去し、残渣を３０ｍｌの塩化メチレンに溶解させた。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム（３×３０ｍｌ）および水（２×３０ｍｌ）で洗浄して、硫酸マグネシウム上で乾燥、蒸発させた。残渣を、溶離剤として塩化メチレン− イソプロパノール（９７：３）を用いるフラッシュ・クロマトグラフィー（シリカゲル）に付して精製すると、１０５ｍｇのＮ−３脱ブロック(deblocked)中間体を白色固体として得た（収率：９２％）。このＮ−３脱ブロック中間体（２０ｍｌの無水塩化メチレン中、８５ｍｇ）の溶液をアルゴン雰囲気下で−７８℃に冷却し、三塩化ホウ素（ヘキサン中１．０Ｍ、１．８０ｍｌ）で処理して、−７８℃で６時間攪拌した。同温度でメタノール（４．０ｍｌ）を加え、室温に至るまで放置した。溶媒を留去し、再び４ｍｌのメタノールを加えて、さらに溶媒を蒸発させた。この手続を６回繰り返した。残渣をＣ−１８逆相クロマトグラフィー（溶離剤：水）で精製し、２８ｍｇの純粋な化合物７を白色固体として得た（収率：４６％）。実施例１２炭素環式−４’，６’−シクロプロピル− ２’，３’−ジデオキシウリジン８６０ｍｌのメタノールに溶解させた化合物１９（１２０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）の溶液を濃アンモニアで処理し、得られた混合物を室温で１６時間攪拌した。溶媒を留去し、残渣をフラッシュ・クロマトグラフィー（溶離剤：塩化メチレン−イソプロパノール＝９７：３）に付して精製して、７７ｍｇのＮ−３脱ブロック中間体を白色固体として得た（収率：８６％）。１６ｍｇの無水塩化メチレンに溶解させたこのＮ−３脱ブロック中間体（６７ｍｌ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で−７８℃に冷却し、ヘキサンに溶解させた１．０Ｍ三塩化ホウ素１．５０ｍｌで処理して、−７８℃で６時間攪拌した。反応液を、化合物７について記載したようにしてクエンチした。残渣をフラッシュ・クロマトグラフィー（溶離剤：塩化メチレン−イソプロパノール＝９：１）に付して精製し、４１ｍｇの純粋な化合物８を白色固体として得た（収率：８７％）。実施例１３炭素環式−４’，６’−シクロプロピル− ２’，３’−ジデオキシシチジン９化合物８（１２０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を３ｍｌの無水ピリジンに溶解して２ｍｌの無水酢酸で処理し、一夜攪拌した。溶媒を留去すると、ほぼ理論収率で５’−モノアセチル誘導体２１が得られた。この化合物をさらなる精製工程に付すことなく、次工程で使用した。１，２，４−トリアゾール（２８０ｍｇ、４．０５ｍｍｏｌ）、オキシ塩化リン（ＰＯＣｌ₃；８１μｌ、０．８６７ｍｍｏｌ）、および無水アセトニトリル（２．３ｍｌ）の混合物に、トリエチルアミン（Ｅｔ₃Ｎ；５４０μｌ、３．８８ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気で加えた。次いで２．０ｍｌのアセトニトリル中に溶解させた化合物２１（１００ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で２４時間攪拌した。さらにＥｔ₃Ｎ（３７５μｌ、２．６７ｍｍｏｌ）と水（９７μｌ）を加え、混合物を１０分間攪拌し、溶媒を蒸発させた。残渣を塩化メチレン（５０ｍｌ）と飽和炭酸水素ナトリウム（５０ｍｌ）に分配した。有機層を除き、水層を塩化メチレンで抽出した（２×５０ｍｌ）。有機層を合一後、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を蒸発させて化合物２２を得た。この化合物は、精製することなく次工程で用いた。残渣を１０モルのジオキサンに溶解し、１．６ｍｌのアンモニア水で処理して、一夜攪拌した。溶媒を留去し、残渣をメタノール性アンモニア（−７０℃で飽和）で処理し、室温で２０時間攪拌した。溶媒を留去し、残渣を分取ＴＬＣ（溶離剤：塩化メチレン／イソプロパノール／Ｅｔ₃Ｎ＝７０：３０：１）に付して精製し、３１ｍｇの純粋な化合物９を白色固体として得た（収率：３７％）。実施例１４ジデオキシヌクレオシド類縁体のコンホメーション分析各アグリコンに対応する信号を除けば、化合物５〜９の¹ＨＮＭＲスペクトルはほぼ同様で、２５℃と８０℃の間で結合定数の明白な変化は見られなかった。これによって、これらの化合物が溶液状態では高度に似通った強固なコンホメーションを有していたことが示された。プロトタイプとして化合物５を用いると、擬アノマー(pseudo anomic)信号が、δ＝４．９０を中心として結合定数６．０Ｈｚの二重線として出現した。この信号の多重性を理解するために、化合物５のＮ−およびＳ−コンホーマー（配座異性体）のモデルを構築した。この構築は、標準パラメーターセットを有するＣＨＡＲＭｍ（バージョン２１）を用いたＱＵＡＮＴＡプログラム（バージョン３．２．４）によって行った。系統的なコンホメーションの探索によって各構造体を最小にし、関連する回転角を両コンホーマーについて測定した。Ｎ−コンホーマーの値は次の通りである：Ｈ６’−Ｃ６ ’−Ｃ１’−Ｈ１’（−８６．１°）、Ｈ１’−Ｃ１’−Ｃ２’−Ｈ２’β（９１．３°）、およびＨ１’−Ｃ１’−Ｃ２’−Ｈ２’α９（−２３．９°）。Ｈ−Ｃ１−Ｃ２−Ｈ系におけるＨ／Ｈ相互作用に関する結合定数Ｊと、Ｈ−Ｃ１−Ｃ２およびＣ１−Ｃ２−Ｈを含む複数の平面の間のジヘドラル角（θ）との間に、経験的に知られている相関関係として定義されるカープラスの等式は、シクロプロパン環が融合することによってねじれが生じる故に完全には当てはまらないかもしれないが、Ｎ−コンホーマーについて測定されたねじれ角の値が示唆するところによれば、３つの結合定数のうち２つはゼロに非常に近いはずである。逆に、Ｓ−コンホーマーについて測定された同じねじれ角（複数）のいずれも９０°には接近しなかった（−１３４．７°、１７５．７℃、および６０．９°）。このように、Ｎ型(N-geometry)で測定されたねじれ角は、¹ＨＮＭＲスペクトルにおいては５（二重線、Ｊ＝６Ｈｚ）の擬アノマー信号について観察された多重性と一層よく一致する。これらのねじれ角は、ネプラノシンＣの結晶構造で測定された角度に近似もしており、このことは、構造体５〜９が溶液中で等価なＮ型をとっていることを示唆している。化合物５〜９のこのＮ型は、ビシクロ［３．１．０］ヘキサン系が擬舟形体として存在する場合にのみ達成され得る。なぜなら、擬いす形コンホメーションはＳ型に対応するであろうからである。ケンブリッジ構造データベース［アレン(Allen)ら、１９７９年、Ａｃｔａ．Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ．、Ｂ３５、２３３１］において無制限ビシクロ［３．１．０．］ヘキサン含有化合物を探索した結果、見いだされた７つの例において、唯一観察された縮んだ形態は擬舟形であった。実施例１５ジデオキシヌクレオシドの抗−ＨＩＶ活性の評価不死化されたＯＫＴ４⁺Ｔ細胞（ＡＴＨ８細胞）中において、化合物５〜９がＨＩＶ−１に及ぼす効果を細胞変性効果試験によって調べた（ミツヤとブローダー(Broder)、（１９８６年）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．、８３、１９１１年）。アデノシン誘導体である化合物５が抗ＨＩＶ活性を示した唯一の類縁体であった。用量依存的に生存可能細胞の数が増加することが５〜５０μＭにおいて観察された。ただし、この薬剤自身はこの範囲では幾分毒性を示した（図３）。化合物５はラセミ混合物であるので、２つのエナンチオマーが分離できれば、毒性を担うものと、抗ウイルス効果を担うものとに分けられることが判る。２’−ｔｅｒｔ−ブチル−置換炭素環式アルコール３０の合成手法を、反応式３に示すとともに下記の実施例１６〜２１に記載する。実施例１６（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−３−［（ベンジロキシ）メチル］−４，５−Ｏ− イソプロピリデン−２−シクロペンテン−１−オール２４マークウェッツ（Marquez）らによるＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、５３：５７０９（１９８８年）記載の方法に従って化合物２４を化合物２３から調製した。実施例１７（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−３−［（ベンジロキシ）メチル］−４−ｔｅｒｔ− ブチロキシ−５−ヒドロキシ−２−シクロペンテン−１−オール２５２４（０．６１ｇ、２．２０ｍｍｏｌ）の溶液を無水塩化メチレン（２５ｍｌ）中で−７８℃で攪拌し、トリメチルアルミニウムのトルエン（２Ｍ、７．８ｍｌ、１５．６ｍｍｏｌ）溶液で処理した。溶液の添加後、反応液が室温になるまで放置し、攪拌を更に１８時間継続した。反応液を再び−７８℃に冷却し、塩化アンモニウム（１０ｍｌ）の飽和水溶液でクエンチした。これは非常に発熱を伴う処理であるので、塩化アンモニウムの添加はゆっくりと行った。混合液は室温まで下がった後に濾過し、固形物をＣＨＣｌ₃で洗浄した。濾液をＣＨＣｌ₃（３ｘ５０ｍｌ）で抽出し、有機抽出液を合一して水（５０ｍｌ）で洗浄、乾燥（硫酸ナトリウム）し、真空下濃縮した。粗生成物を、０〜５０％勾配の酢酸エチルのヘキサン溶液を溶離液としてシリカゲルでフラッシュ・カラムクロマトグラフィーによって精製し、０．３４９ｇ（５４％）の化合物２５を濃い油状物として得た。分析計算値（Ｃ₁₇Ｈ₂₄Ｏ₄として）：Ｃ，６９．８３；Ｈ，８．２７実測値：Ｃ，６９．５７；Ｈ，８．２７実施例１８（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリロキシ）−３− ［（ベンゾイロキシ）メチル］−４−ｔｅｒｔ−ブチロキシ−５−ヒドロキシ− ２−シクロペンテン２６２５（８．０４ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）とイミダゾール（７．０５ｇ、１０３．５５ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（８０ｍｌ）溶液を塩化ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（６．７０ｇ、４４．４５ｍｍｏｌ）で処理した。混合液をアルゴン雰囲気下、室温で４０分攪拌し、水（１００ｍｌ）を加えてクエンチした。反応液を酢酸エチル（３ｘ１００ｍｌ）で抽出し、有機抽出液を合一して生理食塩水（２ｘ１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を蒸発させ、シリカゲルによるフラッシュ・カラムクロマトグラフィーで精製して９．７７ｇ（８７．４％）の純粋な２６を油状物として得た。分析計算値（Ｃ₂₃Ｈ₃₂Ｏ₄Ｓｉ・０．５Ｈ₂Ｏとして）：Ｃ，６６．４６；Ｈ，９．４６実測値：Ｃ，６６．４１；Ｈ，９．３１実施例１９（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリロキシ）−３− ［（ベンジロキシ）メチル］−４−ｔｅｒｔ−ブチロキシ−５− ［（メチルチオ）チオカルボニロキシ−２−シクロペンテン２７２６（９．７７ｇ、２４．０２ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液を二硫化炭素（１０．２ｍｌ、１６８．８ｍｍｏｌ）で処理した。混合液を０℃で５分間攪拌し、ＮａＨ（８０％油中懸濁液、２．２ｇ、７３．３ｍｍｏｌ）を複数回に分けて添加した。混合液を室温で３０分攪拌した。ヨウ化メチル（１９．５ｍｌ、３１３．２ｍｍｏｌ）を添加し、更に３０分攪拌後、反応液を０℃に冷却し、水をゆっくり加えて余剰ＮａＨを破壊した（非常な発熱を伴う処理）。有機層を分離し、水性抽出液を硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下濃縮した。粗生成物を０〜５％勾配の酢酸エチルのヘキサン溶液を使用してシリカゲルによるフラッシュ・カラムクロマトグラフィーで精製し、９．８３ｇ（８２．４％）の純粋な２７を油状物として得た。分析計算値（Ｃ₂₃Ｈ₄₀Ｏ₄Ｓ₂Ｓｉ・０．２５Ｈ₂Ｏとして）：Ｃ，５９．９０；Ｈ，８．１０；Ｓ，１２．７７実測値：Ｃ，５９．８４；Ｈ，８．１０；Ｓ，１２．７２実施例２０（１Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリロキシ）−３−［（ベンジロキシ）メチル］−４−ｔｅｒｔ−ブチル−２−シクロペンテン２８２７（９．８２ｇ、１９．７６ｍｍｏｌ）とアゾビス（イソブチロニトリル）（ＡＩＢＮ、２．０４ｇ、１２．４２ｍｍｏｌ）の無水トルエン（１００ｍｌ）溶液をアルゴン雰囲気下、約５０℃に加熱し、水素化トリ−ｎ−ブチルスズ（２２ｍｌ、８１．８ｍｍｏｌ）でゆっくり処理した。添加完了後、混合液を１．５時間加熱（油浴、１２０℃）し、室温まで冷却した。溶剤を蒸発させ、粗生成物を０〜５％勾配の酢酸エチルのヘキサン溶液を用いてシリカゲルを用いたフラッシュ・カラムクロマトグラフィーで精製し、化合物２８（５．９４ｇ、７７％）を油状物として得た。分析計算値（Ｃ₂₃Ｈ₃₈Ｏ₃Ｓｉ・０．５Ｈ₂Ｏとして）：Ｃ，６９．１２；Ｈ，９．８３実測値：Ｃ，６９．２１；Ｈ，９．７１実施例２１（１Ｓ，４Ｒ）−３−［（ベンジロキシ）メチル］−４−ｔｅｒｔ−ブチロキシ −２−シクロペンテン−１−オール２９２８（４．８２ｇ、１２．３６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（８０ｍｌ）溶液をフッ化テトラブチルアンモニウムのＴＨＦ（１Ｍ、５１ｍｌ）溶液で処理した。得られた混合液を室温で一夜攪拌した。溶剤を蒸発させ、残渣を水で処理し、酢酸エチル（３ｘ１００ｍｌ）で抽出した。有機抽出液を合一して生理食塩水（２ｘ１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶剤を減圧下留去し、粗生成物を５０〜６６％勾配の酢酸エチルのヘキサン溶液を用いて、シリカゲルによるフラッシュ・カラムクロマトグラフィーで精製し、化合物２９（３．１５２ｇ、９２％）を清澄な油状物として得た。分析計算値（Ｃ₁₇Ｈ₂₄Ｏ₃・０．７５Ｈ₂Ｏとして）：Ｃ，７０．４３；Ｈ，８．８６実測値：Ｃ，７０．６２；Ｈ，８．５４実施例２２（１Ｒ，２Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）−１−［（ベンゾイロキシ）メチル］−２−ｔｅｒｔ−ブチロキシ−４−ヒドロキシビシクロ［３，１，０］ヘキサン３０金属サマリウム（４．４０ｇ、２９．３ｍｍｏｌ）をフラスコにとり、アルゴン流のもとで火炎により乾燥した。無水ＴＨＰ（３０ｍｌ）と塩化第二水銀（０．７６ｇ、２．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）溶液を加え、この混合液を１０分間攪拌してから化合物２９（１．８０ｇ、６．５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍｌ）溶液を加えた。反応液を−７８℃に冷却し、クロロヨードメタン（２．２０ｍｌ、３０ｍｍｏｌ）で処理した。混合液を継続して攪拌し、−７８℃からスタートして一晩かけて室温にした。翌日、反応を炭酸カリウム（２００ｍｌ）の飽和溶液でクエンチし、塩化メチレン（３ｘ１００ｍｌ）で抽出した。有機抽出液を合一して生理食塩水（１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過・蒸発して、ほぼ純粋な化合物３０を無色油状物として定量的に得た。この生成物を上記プリンおよびピリミジン合成工程で説明した濃縮工程において使用した。チミジンおよびアデノシンの類縁体にそれぞれ対応する化合物３１と３２とを、シクロプロパン化に続く工程から始まる反応式２と１とにそれぞれ従って、化合物３０を原材料として合成した。（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ，５Ｓ）−１−ヒドロキシメチル−４−（５−メチル）−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオキソピリミジン−１−イル）ビシクロ［３，１，０］ヘキサン３１チミジン類縁体３１を、以下の特性を有する白色結晶生成物として得た。融点＝２３９−２４１℃、［α］_D２５＝＋４７．１４、ＦＡＢＭＳｍ／ｚ（相対強度）２５３（ＭＨ＋、１００）、１２７（ｂ＋２Ｈ、４０）。分析計算値（Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｏ₄Ｎ₂・０．３３Ｈ₂Ｏとして）：Ｃ，５５．８１；Ｈ，６．５０；Ｎ，１０．８５実測値：Ｃ，５５．９１；Ｈ、６．５１；Ｎ，１０．７３（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ，５Ｓ）−１−ヒドロキシメチル−４−（６−アミノ−９− プリニル）ビシクロ［３．１．０］ヘキサン３２アデノシン類縁体３２を、以下の特性を有する白色固形物として得た。融点２５９〜２６１℃、ＦＡＢＭＳｍ／ｚ（相対強度）２６２（ＭＨ＋、１００）、１３６（ｂ＋２Ｈ、５８）。プリン合成反応式（反応式１）の最終工程において、またピリミジン合成反応式（反応式２）のチミジン／ウラシル合成工程において、ベンジル保護基をＢＣｌ₃で開裂除去する。化合物３０をヌクレオシド類縁体の合成用原材料として使用する場合、これと同じ処理により２’位のｔｅｒｔ−ブチル基を除去して２’ −ＯＨ基を残す。以上の記載は説明のためであり、本発明はこれに限定されるものではない。従って、本発明の各種変形は本開示を検討すれば当業者には明らかであり、本発明をその精神または本質的特性から逸脱することなくこれら各種特定の形態で実施することが可能である。例えば、実施例において各種プリンおよびピリミジン類縁体を他のものと置き換えて同様の結果を得ることができることは、上記より明らかである。本発明の範囲は従って以下の請求の範囲により示されるものであって、上記説明により規定されるものではない。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年５月１７日【補正内容】タイプの糖パッカリング、すなわちＣ３’−エンド（Ｎ）およびＣ２’−エンド（Ｓ）コンホメーションが、通常エネルギー的に好ましい。ＤＮＡ複合体においては、ヌクレオシドの繰り返し単位の２’−エンド（Ｓ）コンホメーションが二重らせんにＢ型コンホメーションを与え、一方３’−エンド（Ｎ）コンホメーションがＡ型コンホメーションの二重らせんをもたらす。ＤＮＡのＡおよびＢ型はらせん１巻き当りの塩基対の数、１塩基対当りの回転量、１塩基対当りの立ち上がり量(Vertical rise)およびらせん直径が異なる。さらに、別のプリン類およびピリミジン類を含むＤＮＡ鎖においてはＺ−ＤＮＡと呼ばれる左巻きらせんを形成することがある。ＤＮＡは溶液中でいくつかの異なったコンホメーションで存在しうるため、本発明はＤＮＡを特定のコンホメーションに固定(lock)する手段を提供するものである。これは、ＤＮＡ−タンパク、ＤＮＡ−ＤＮＡおよびＤＮＡ−ＲＮＡ間の相互作用に影響を及ぼす構造的要件を解明するのに有用であり、またこれらの相互作用を特異的に遮断することができる高価値の薬剤の開発に役立つものである。発明の要旨本発明は下記式を有するコンホメーションが固定された化合物を提供する。［式中、Ｒ₁はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシルまたはそれらの誘導体であり、またＲ₂およびＲ₃はそれぞれ独立にＨまたはＯＨである］。好ましい一実施態様においては、これらの化合物はノーザン構造に固定される。本発明の種々の実施態様においては、Ｒ₂＝Ｒ₃＝Ｈ、Ｒ₃＝ＯＨかつＲ₃＝Ｈ、またはＲ₂＝Ｒ₃＝ＯＨのうちのいずれかとされる。本発明の好ましい実施態様においては、ジデオキシプリン、ジデオキシピリミジン、デオキシプリン、デオキシピリミジン、プリンリボヌクレオシド、およびピリミジンリボヌクレオシドの炭素環式４’，６’−シクロプロパン−融合−２’，３’−誘導体が提供される。本発明はまたコンホメーションが固定された対応ヌクレオチド類も含む。本発明は、別の様相においては、前記化合物を含む上記化合物（ここでＲ₂＝ＯＨかつＲ₃＝Ｈ、またはＲ₂＝Ｒ₃＝ＯＨ）、および本質的に前記化合物からなるオリゴヌクレオチド類（ここでＲ₂＝ＯＨかつＲ₃＝Ｈ、またはＲ₂＝Ｒ₃＝ＯＨ）も提供する。本発明は、さらに別の様相においては、上記化合物のアデノシンおよびグアノシン種を製造するプロセスを提供し、このプロセスにはシクロプロパン融合シクロペンタン化合物を用い、そのシクロプロパン融合シクロペンタン化合物を６− ハロプリンまたは２−アミノ−６−ハロプリンと縮合させて、前記シクロペンタン化合物に前記プリン誘導体をＣ１’−Ｎ９結合を介して結合させた縮合物を得、次にこの２−アミノ−６−ハロプリンのハロ基をアミノ基に置換してグアノシン類縁体を形成することが含まれるものである。この製法の特定の１つの実施態様においては、シクロプロパン融合シクロペンタン化合物がジヒドロキシシクロプロパン化アリルアルコールであり、縮合物はプリンリボヌクレオシド類縁体である。本発明は、別の様相においては、本発明によるコンホメーションが固定されたピリミジンヌクレオシド類縁体を製造するプロセスを提供し、このプロセスにはシクロプロパン融合シクロペンタン化合物を用い、このシクロペンタン化合物をＮ３−保護チミンまたはＮ３保護ウラシルと縮合させ、シクロペンタン化合物にチミンまたはウラシル誘導体をＣ１’−Ｎ１結合を介して結合させた縮合物を形成する段階を含むものである。対応するシチジン類縁体は、本発明のウラシル類縁体または水酸基を保護する段階を加えることにより生成されるが、これは上記のようにして調製された類縁体を処理してウラシルのＣ４にトリアゾール中間体を形成し、アミノ分解によりトリアゾール基を置換してシチジン類縁体を調製する。本発明のこの様相に関する特定の実施態様においては、シクロプロパン融合シクロペンタン化合物は保護されたジヒドロキシシクロプロパン化アリルアルコールであり、生成物はピリミジンリボヌクレオシド類縁体を包含する。本発明によるコンホメーションが固定されたヌクレオシド類縁体のデオキシヌクレオシド類縁体は、対応するリボースヌクレオシド類縁体のＣ−２’ヒドロキシル官能性に対するラジカル誘導脱酸素によって調製される。本発明はまた下記の化合物をも提供する：［式中、Ｒはアルキル基、アリール基、アルキルアリール基およびアロイル基からなる群から選択される］。本発明のさらに別の実施態様は下記の各段階を含む上記化合物の製造方法である。（ａ）下記の化合物：を用意し、（ｂ）段階（ａ）で得られる化合物をトリメチルアルミニウムと反応させて、４ ’および５’位それぞれにｔｅｒｔ−ブチロキシ置換基およびヒドロキシ置換基を形成し；（ｃ）段階（ｂ）で得られる化合物をバルキーな基(bulky group)を用いてシリル化することにより１’位の水酸基を保護し；（ｄ）Ｏ−（メチルチオ）チオカルボニロキシ基を５’位に形成し；（ｅ）当該Ｏ−（メチルチオ）チオカルボニロキシ基を除去し；（ｆ）前記シリル基を１’位から除去してアリルアルコールを形成し；そして（ｇ）前記アリルアルコールを環状プロパン化して、炭素環式アルコールを生成させる。実施例１４ジデオキシヌクレオシド類縁体のコンホメーション分析各アグリコンに対応する信号を除けば、化合物５〜９の¹ＨＮＭＲスペクトルはほぼ同様で、２５℃と８０℃の間で結合定数の明白な変化は見られなかった。これによって、これらの化合物が溶液状態では高度に似通った強固なコンホメーションを有していたことが示された。プロトタイプとして化合物５を用いると、擬アノマー(pseudo anomic)信号が、δ＝４．９０を中心として結合定数６．０Ｈｚの二重線として出現した。この信号の多重性を理解するために、化合物５のＮ−およびＳ−コンホーマー（配座異性体）のモデルを構築した。この構築は、標準パラメーターセットを有するＣＨＡＲＭｍ（バージョン２１）を用いたＱＵＡＮＴＡプログラム（バージョン３．２．４）によって行った。系統的なコンホメーションの探索によって各構造体を最小にし、関連する回転角を両コンホーマーについて測定した。Ｎ−コンホーマーの値は次の通りである：Ｈ６’−Ｃ６ ’−Ｃ１’−Ｈ１’（−８６．１°）、Ｈ１’−Ｃ１’−Ｃ２’−Ｈ２’β（９１．３°）、およびＨ１’−Ｃ１’−Ｃ２’−Ｈ２’α９（−２３．９°）。Ｈ−Ｃ１−Ｃ２−Ｈ系におけるＨ／Ｈ相互作用に関する結合定数Ｊと、Ｈ−Ｃ１−Ｃ２およびＣ１−Ｃ２−Ｈを含む複数の平面の間のジヘドラル角（θ）との間に、経験的に知られている相関関係として定義されるカープラスの等式は、シクロプロパン環が融合することによってねじれが生じる故に完全には当てはまらないかもしれないが、Ｎ−コンホーマーについて測定されたねじれ角の値が示唆するところによれば、３つの結合定数のうち２つはゼロに非常に近いはずである。逆に、Ｓ−コンホーマーについて測定された同じねじれ角（複数）のいずれも９０°には接近しなかった（−１３４．７°、１７５．７°、および６０．９°）。このように、Ｎ型(N-geometry)で測定されたねじれ角は、¹ＨＮＭＲスペクトルにおいては５（二重線、Ｊ＝６Ｈｚ）の擬アノマー信号について観察された多重性と一層よく一致する。これらのねじれ角は、ネプラノシンＣの結晶構造で測定された角度に近似もしており、このことは、構造体５〜９が溶液中で等価なＮ型をとっていることを示唆している。化合物５〜９のこのＮ型は、ビシクロ［３．１．０］ヘキサン系が擬舟形体として存在する場合にのみ達成され得る。なぜなら、擬いす形コンホメーションはＳ型に対応するであろうからである。ケンブリッジ構造データベース［アレン(Allen)ら、１９７９年、Ａｃｔａ．Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ．、Ｂ３５、２３３１］において無制限ビシクロ［３．１．０．］ヘキサン含有化合物を探索した結果、見いだされた７つの例において、唯一観察された縮んだ形態は擬舟形であった。実施例１５ジデオキシヌクレオシドの抗−ＨＩＶ活性の評価不死化されたＯＫＴ４⁺Ｔ細胞（ＡＴＨ８細胞）中において、化合物５〜９がＨＩＶ−１に及ぼす効果を細胞変性効果試験によって調べた（ミツヤとブローダー(Broder)、（１９８６年）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．、８３、１９１１年）。アデノシン誘導体である化合物５が抗ＨＩＶ活性を示した唯一の類縁体であった。用量依存的に生存可能細胞の数が増加することが５〜５０μＭにおいて観察された。ただし、この薬剤自身はこの範囲では幾分毒性を示した（図３）。化合物５はラセミ混合物であるので、２つのエナンチオマーが分離できれば、毒性を担うものと、抗ウイルス効果を担うものとに分けられることが判る。２’−ｔｅｒｔ−ブチル−置換炭素環式アルコール３０の合成手法を、反応式３に示すとともに下記の実施例１６〜２１に記載する。請求の範囲１．次の式：［式中、Ｒ₁はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、またはそれらの誘導体を示し、Ｒ₂およびＲ₃は独立してＨまたはＯＨを示す］で表される、コンホメーションが固定されたヌクレオシド類縁体。２．ノーザン（Ｎ）型のコンホメーションで固定されている、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。３．Ｒ₂＝Ｒ₃＝Ｈである、請求項１に記載の化合物。４．Ｒ₂＝ＯＨで、Ｒ₃＝Ｈである、請求項１に記載の化合物。５．Ｒ₂＝Ｒ₃＝ＯＨである、請求項１に記載の化合物。６．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシプリンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。７．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシピリミジンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。８．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシアデノシンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。９．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシグアノシンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１０．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ウリジンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１１．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−シチジンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１２．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−チミジンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１３．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’−デオキシプリンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１４．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’−デオキシピリミジンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１５．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−プリン・リボヌクレオシドである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１６．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−ピリミジン・リボヌクレオシドである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１７．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−リボヌクレオシド５’−モノ− 、ジ−、またはトリ−フォスフェート。１８．請求項１７に記載の炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−リボヌクレオシド５’−モノ−、ジ−、またはトリ−フォスフェートであって、前記炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−リボヌクレオシド５’−モノ−、ジ−、またはトリ−フォスフェートは炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−リボヌクレオシド５’−モノフォスフェートである、炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−リボヌクレオシド５’−モノ−、ジ−、またはトリ−フォスフェート。１９．請求項４または５に記載の一以上の化合物を含有するオリゴヌクレオチド。２０．本質的に請求項４または５に記載の化合物から構成されるオリゴヌクレオチド。２１．コンホメーションが固定された、請求項１に記載のアデノシンまたはグアノシンヌクレオシド類縁体を調製するためのプロセスであって、（ａ）シクロプロパン融合シクロペンタン化合物を用意する段階と、（ｂ）前記シクロプロパン融合シクロペンタン化合物を６−ハロプリンまたは２−アミノ−６−ハロプリンで縮合させて縮合物［ここにおいて当該プリン誘導体はＣ１’−Ｎ９結合を介して前記シクロペンタン化合物に結合している］を形成する段階と、さらに（ｃ）前記６−ハロプリン縮合物のハロ基をアミノ基で置換してアデノシン類縁体を得るか、あるいは前記２−アミノ−６−ハロプリンのハロ基を水酸基で置換してグアノシン類縁体を形成する段階と、を包含するプロセス。２２．前記シクロプロパン融合シクロペンタン化合物がジヒドロキシシクロプロパン化アリルアルコールであり、前記縮合物がプリンリボヌクレオシド類縁体を含有するものである、請求項２１のプロセス。２３．コンホメーションが固定された請求項１に記載のシチジン、チミジン、またはウリジンヌクレオシド類縁体を調製するためのプロセスであって、（ａ）シクロプロパン融合シクロペンタン化合物を用意する段階と、（ｂ）前記シクロペンタン化合物をＮ−３が保護されたチミンまたはＮ−３が保護されたウラシルで縮合させて縮合物［ここにおいて当該チミン若しくはウラシルの誘導体はＣ１’−Ｎ１結合を介して前記シクロペンタン化合物に結合している］を形成する段階と、を包含するプロセス。２４．前記シクロペンタン化合物が保護されたジヒドロキシシクロプロパン化アリルアルコールであり、前記縮合物がピリミジンリボヌクレオシド類縁体を含有するものである、請求項２３に記載のプロセス。２５．コンホメーションが固定された請求項１に記載のシチジンヌクレオシド類縁体を調製するためのプロセスであって、（ａ）請求項２３に記載のコンホメーションが固定されたウラシルヌクレオシド類縁体を調製する段階と、（ｂ）前記ウラシル類縁体の水酸基を保護する段階と、（ｃ）前記段階（ｂ）で得られる保護された類縁体を処理してウラシルのＣ４においてトリアゾール中間体を形成する段階と、さらに（ｄ）前記トリアゾール基を変位させてシチジン類縁体を得る段階と、を包含するプロセス。２６．コンホメーションが固定された炭素環式−４’，６’−シクロプロピル− ２’−デオキシピリミジンまたは炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’ −デオキシプリンを調製する方法であって、（ａ）請求項２２または２４に記載の炭素環式−４’，６’−シクロプロピル −プリン・リボヌクレオシドまたは炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−ピリミジンリボヌクレオシドを調製する段階と、（ｂ）前記段階（ａ）で得られる生成物のＣ−２’ヒドロキシル官能基に対するラジカル誘導脱酸素によってデオキシヌクレオシド誘導体を形成する段階と、を包含する方法。２７．次の式：［式中、Ｒはアルキル基、アリール基、アルキルアリール基、およびアロイル基からなる群から選択される基を示す］で表される化合物。２８．請求項２７に記載の化合物を調製する方法であって、次の各段階、（ａ）次の式：［式中、Ｒはアルキル基、アリール基、アルキルアリール基、およびアロイル基からなる群から選択される基を示す］で表される化合物を用意する段階と、（ｂ）段階（ａ）で得られる化合物をトリメチルアルミニウムと反応させて４ ’位と５’位にそれぞれｔｅｒｔ−ブチロキシ置換基およびヒドロキシ置換基を形成する段階と、（ｃ）段階（ｂ）で得られる化合物をバルキーな試薬でシリル化して１’位の水酸基を保護する段階と、（ｄ）５’位にＯ−（メチルチオ）チオカルボニロキシ基を形成する段階と、（ｅ）Ｏ−（メチルチオ）チオカルボニロキシ基を除去する段階と、（ｆ）１’位からシリル基を除去してアリルアルコールを形成する段階と、さらに（ｇ）前記アリルアルコールをシクロプロパン化して炭素環式アルコールを形成する段階と、を包含する方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者マルケス、ヴィクターイー. アメリカ合衆国 20879 メリーランド州ゲイサースブルグドゥーリトルストリート 20020 (72)発明者ロドリゲス、ジュアンビー. アメリカ合衆国 20852 メリーランド州ロックヴィルコングレッショナルレーン 261 アパートメント 305 (72)発明者ニックラウス、マークシー. アメリカ合衆国 21227 メリーランド州エルクリッジダッケッツレーン 6386 (72)発明者バーチ、ジョセフジェイ．ジュニア. アメリカ合衆国 20814 メリーランド州ビセスダパークウッドドライヴ 10110 (72)発明者シッディキ、マクブールエイ. アメリカ合衆国 20852 メリーランド州ロックヴィルエプシロンドライヴ 7840

Claims

【特許請求の範囲】１．次の式：［式中、Ｒ₁はアデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、またはそれらの誘導体を示し、Ｒ₂およびＲ₃は独立してＨまたはＯＨを示す］で表される、コンホメーションが固定されたヌクレオシド類縁体。２．ノーザン（Ｎ）型のコンホメーションで固定されている、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。３．Ｒ₂＝Ｒ₃＝Ｈである、請求項１に記載の化合物。４．Ｒ₂＝ＯＨで、Ｒ₃＝Ｈである、請求項１に記載の化合物。５．Ｒ₂＝Ｒ₃＝ＯＨである、請求項１に記載の化合物。６．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシプリンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。７．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシピリミジンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。８．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシアデノシン。９．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシグアノシン。１０．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシウリジン。１１．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシシチジン。１２．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’，３’−ジデオキシチミジン。１３．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’−デオキシプリンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１４．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’−デオキシピリミジンである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１５．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−プリン・リボヌクレオシドである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１６．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−ピリミジン・リボヌクレオシドである、請求項１に記載のヌクレオシド類縁体。１７．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−リボヌクレオシド５’−モノフォスフェート。１８．炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−リボヌクレオシド５’−モノ− 、ジ−、またはトリ−フォスフェート。１９．請求項４または５に記載の一以上の化合物を含有するオリゴヌクレオチド。２０．本質的に請求項４または５に記載の化合物から構成されるオリゴヌクレオチド。２１．コンホメーションが固定されたプリンヌクレオシド類縁体を調製するためのプロセスであって、（ａ）シクロプロパン化されたアリルアルコールを含有する炭素環式アルコールを提供する段階と、（ｂ）前記炭素環式アルコールを６−ハロプリンまたは２−アミノ−６−ハロプリンで縮合させて縮合物［ここにおいて当該プリン誘導体はＣ１’−Ｎ９結合を介して前記炭素環式アルコールに結合している］を形成する段階と、さらに（ｃ）前記６−ハロプリン縮合物のハロ基をアミノ基で置換してアデノシン類縁体を得るか、あるいは前記２−アミノ−６−ハロプリンのハロ基を水酸基で置換してグアノシン類縁体を形成する段階と、を包含するプロセス。２２．前記炭素環式アルコールがジヒドロキシシクロプロパン化アリルアルコールであり、前記縮合物がプリンリボヌクレオシド類縁体を含有するものである、請求項２１のプロセス。２３．コンホメーションが固定されたピリミジンヌクレオシド類縁体を調製するためのプロセスであって、（ａ）シクロプロパン化されたアリルアルコールを含有する炭素環式アルコールを用意する段階と、（ｂ）前記炭素環式アルコールをＮ−３が保護されたチミンまたはＮ−３が保護されたウラシルで縮合させて縮合物［ここにおいて当該チミン若しくはウラシルの誘導体はＣ１’−Ｎ１結合を介して前記炭素環式アルコールに結合している］を形成する段階と、を包含するプロセス。２４．前記炭素環式アルコールが保護されたジヒドロキシシクロプロパン化アリルアルコールであり、前記縮合物がピリミジンリボヌクレオシド類縁体を含有するものである、請求項２３に記載のプロセス。２５．コンホメーションが固定されたシチジンヌクレオシド類縁体を調製するためのプロセスであって、（ａ）請求項２３に記載のコンホメーションが固定されたウラシルヌクレオシド類縁体を調製する段階と、（ｂ）前記ウラシル類縁体の水酸基を保護する段階と、（ｃ）前記段階（ｂ）で得られる保護された類縁体を処理してウラシルのＣ４においてトリアゾール中間体を形成する段階と、さらに（ｄ）アミノ分解によって前記トリアゾール基を置換させてシチジン類縁体を得る段階と、を包含するプロセス。２６．コンホメーションが固定された炭素環式−４’，６’−シクロプロピル− ２’−デオキシピリミジンまたは炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−２’ −デオキシプリンを調製する方法であって、（ａ）請求項２２または２４に記載の炭素環式−４，６’−シクロプロピル− プリン・リボヌクレオシドまたは炭素環式−４’，６’−シクロプロピル−ピリミジンリボヌクレオシドを調製する段階と、（ｂ）前記段階（ａ）で得られる生成物のＣ−２’ヒドロキシル官能基に対するラジカル誘導脱酸素によってデオキシヌクレオシド誘導体を形成する段階と、を包含する方法。２７．次の式：［式中、Ｒはアルキル基、アリール基、アルキルアリール基、およびアロイル基からなる群から選択される基を示す］で表される化合物。２８．請求項２７に記載の化合物を調製する方法であって、（ａ）次の式：［式中、Ｒはアルキル基、アリール基、アルキルアリール基、およびアロイル基からなる群から選択される基を示す］で表される化合物を用意する段階と、（ｂ）段階（ａ）で得られる化合物をトリメチルアルミニウムと反応させて４ ’位と５’位にそれぞれｔｅｒｔ−ブチロキシ置換基およびヒドロキシ置換基を形成する段階と、（ｃ）段階（ｂ）で得られる化合物をバルキーな試薬でシリル化して１’位の水酸基を保護する段階と、（ｄ）５’位にＯ−（メチルチオ）チオカルボニロキシ基を形成する段階と、（ｅ）Ｏ−（メチルチオ）チオカルボニロキシ基を除去する段階と、（ｆ）１’位からシリル基を除去してアリルアルコールを形成する段階と、さらに（ｇ）前記アリルアルコールをシクロプロパン化して炭素環式アルコールを形成する段階と、を包含する方法。