JPH09281036A - Ｎｏ検出方法および装置 - Google Patents
Ｎｏ検出方法および装置Info
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- JPH09281036A JPH09281036A JP8825396A JP8825396A JPH09281036A JP H09281036 A JPH09281036 A JP H09281036A JP 8825396 A JP8825396 A JP 8825396A JP 8825396 A JP8825396 A JP 8825396A JP H09281036 A JPH09281036 A JP H09281036A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 ＮＯのほか、ＮＯ2 - やＮＯ3 - が混合して
いることが予想される液体もしくは気体（被測定試料）
中のＮＯを、ＮＯ2 - やＮＯ3 - と区別して高感度に検
出する。 【解決手段】 赤血球を含有する溶液にＮＯを含有する
可能性のある液体もしくは気体を混合し、その混合の前
後において、その溶液中の赤血球の、少なくともある一
つの波長に対する吸光度を測定し、測定された混合前後
の吸光度の変化に基づいてＮＯを検出する。
いることが予想される液体もしくは気体（被測定試料）
中のＮＯを、ＮＯ2 - やＮＯ3 - と区別して高感度に検
出する。 【解決手段】 赤血球を含有する溶液にＮＯを含有する
可能性のある液体もしくは気体を混合し、その混合の前
後において、その溶液中の赤血球の、少なくともある一
つの波長に対する吸光度を測定し、測定された混合前後
の吸光度の変化に基づいてＮＯを検出する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ＮＯのほか、ＮＯ
2 -やＮＯ3 - が混合していることが予想される液体もし
くは気体（被測定試料）中のＮＯを、ＮＯ2 -やＮＯ3 -と
区別して検出するＮＯ検出方法および装置に関する。
2 -やＮＯ3 - が混合していることが予想される液体もし
くは気体（被測定試料）中のＮＯを、ＮＯ2 -やＮＯ3 -と
区別して検出するＮＯ検出方法および装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】ＮＯは生体内における生理作用に直接関
与するラジカルであり、細胞活動の調節に重要な作用を
示し、細胞内物質や遺伝子に悪影響を及ぼす。これを簡
易に検出することは、医学上、あるいは環境問題等を考
える上からも強く求められるところである。
与するラジカルであり、細胞活動の調節に重要な作用を
示し、細胞内物質や遺伝子に悪影響を及ぼす。これを簡
易に検出することは、医学上、あるいは環境問題等を考
える上からも強く求められるところである。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】ＮＯを検出する方法と
して、従来からいくつかの方法が提案されてきている。
例えば、試薬（トラップ剤）を使う方法、あるいは、Ｎ
Ｏ電極を用いる方法等が従来提案されているが、これら
の方法では、煩雑な前作業が必要である。また、上記試
薬を使う方法のうち、試薬（トラップ剤）としてヘモグ
ロビンを使う方法も試みられているが、ヘモグロビンを
使った場合、ＮＯがヘモグロビンと反応する際にＮ
Ｏ2 -，ＮＯ3 -もヘモグロビンと反応し、やはり、ＮＯ
を、ＮＯ 2 -あるいはＮＯ3 -と区別して検出することは難
しい。
して、従来からいくつかの方法が提案されてきている。
例えば、試薬（トラップ剤）を使う方法、あるいは、Ｎ
Ｏ電極を用いる方法等が従来提案されているが、これら
の方法では、煩雑な前作業が必要である。また、上記試
薬を使う方法のうち、試薬（トラップ剤）としてヘモグ
ロビンを使う方法も試みられているが、ヘモグロビンを
使った場合、ＮＯがヘモグロビンと反応する際にＮ
Ｏ2 -，ＮＯ3 -もヘモグロビンと反応し、やはり、ＮＯ
を、ＮＯ 2 -あるいはＮＯ3 -と区別して検出することは難
しい。
【０００４】本発明は、上記事情に鑑み、ＮＯを、ＮＯ
2 -あるいはＮＯ3 -と区別して検出することのできるＮＯ
検出方法、およびその検出方法の実施に好適なＮＯ検出
装置を提供することを目的とする。
2 -あるいはＮＯ3 -と区別して検出することのできるＮＯ
検出方法、およびその検出方法の実施に好適なＮＯ検出
装置を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記目的を達成する本発
明のＮＯ検出方法のうち第１のＮＯ検出方法は、赤血球
を含有する溶液にＮＯを含有もしくは産生する可能性の
ある物質を混合し、その混合の後において、その溶液中
の、例えば１つもしくは数個等、比較的少数個の赤血球
の、少なくともある一つの波長に対する吸光度を測定
し、測定された吸光度に基づいてＮＯを検出することを
特徴とする。
明のＮＯ検出方法のうち第１のＮＯ検出方法は、赤血球
を含有する溶液にＮＯを含有もしくは産生する可能性の
ある物質を混合し、その混合の後において、その溶液中
の、例えば１つもしくは数個等、比較的少数個の赤血球
の、少なくともある一つの波長に対する吸光度を測定
し、測定された吸光度に基づいてＮＯを検出することを
特徴とする。
【０００６】ここで、上記「ＮＯを含有もしくは産生す
る可能性のある物質」は特定の物質に限定されるもので
はなく、例えばＮＯを含有する可能性のある液体、気
体、あるいはＮＯを産生する可能性のある生体組織等が
含まれる。以下同様である。また、上記目的を達成する
本発明のＮＯ検出方法のうち第２のＮＯ検出方法は、赤
血球を含有する溶液にＮＯを含有もしくは産生する可能
性のある物質を混合し、その混合の前後において、その
溶液中の赤血球の、少なくともある一つの波長に対する
吸光度を測定し、測定された混合前後の吸光度の変化に
基づいてＮＯを検出することを特徴とする。
る可能性のある物質」は特定の物質に限定されるもので
はなく、例えばＮＯを含有する可能性のある液体、気
体、あるいはＮＯを産生する可能性のある生体組織等が
含まれる。以下同様である。また、上記目的を達成する
本発明のＮＯ検出方法のうち第２のＮＯ検出方法は、赤
血球を含有する溶液にＮＯを含有もしくは産生する可能
性のある物質を混合し、その混合の前後において、その
溶液中の赤血球の、少なくともある一つの波長に対する
吸光度を測定し、測定された混合前後の吸光度の変化に
基づいてＮＯを検出することを特徴とする。
【０００７】ここで、上記本発明の第２のＮＯ検出方法
において、混合の前後双方において、溶液中の赤血球
の、所定の１つもしくは複数の第１の波長における第１
の吸光度と、所定の１つもしくは複数の第２の波長にお
ける第２の吸光度との双方を測定し、上記混合の前後に
おける、上記第１の吸光度と上記第２の吸光度との差の
変化もしくは比の変化に基づいて、ＮＯの存在の有無を
検出してもよい。
において、混合の前後双方において、溶液中の赤血球
の、所定の１つもしくは複数の第１の波長における第１
の吸光度と、所定の１つもしくは複数の第２の波長にお
ける第２の吸光度との双方を測定し、上記混合の前後に
おける、上記第１の吸光度と上記第２の吸光度との差の
変化もしくは比の変化に基づいて、ＮＯの存在の有無を
検出してもよい。
【０００８】具体的には、例えば、上記混合の前後にお
いて、溶液中の赤血球の、５４０ｎｍもしくは５４０ｎ
ｍ近傍の波長と、５５５ｎｍもしくは５５５ｎｍ近傍の
波長の各吸光度Ｑ1 ，Ｑ2 を測定し、上記混合の前後に
おける、判別式 Ｄ1 ＝Ｑ1 −Ｑ2 の値の変化に基づいて、ＮＯの存在の有無を検出しても
よい。あるいは、５４０ｎｍもしくは５４０ｎｍ近傍の
波長の吸光度に代えて、５７０ｎｍもしくは５７０ｎｍ
近傍の波長の吸光度、ないし、５４０ｎｍもしくは５４
０ｎｍ近傍の波長の吸光度と５７０ｎｍもしくは５７０
ｎｍ近傍の波長の吸光度との平均の吸光度を用いてもよ
い。
いて、溶液中の赤血球の、５４０ｎｍもしくは５４０ｎ
ｍ近傍の波長と、５５５ｎｍもしくは５５５ｎｍ近傍の
波長の各吸光度Ｑ1 ，Ｑ2 を測定し、上記混合の前後に
おける、判別式 Ｄ1 ＝Ｑ1 −Ｑ2 の値の変化に基づいて、ＮＯの存在の有無を検出しても
よい。あるいは、５４０ｎｍもしくは５４０ｎｍ近傍の
波長の吸光度に代えて、５７０ｎｍもしくは５７０ｎｍ
近傍の波長の吸光度、ないし、５４０ｎｍもしくは５４
０ｎｍ近傍の波長の吸光度と５７０ｎｍもしくは５７０
ｎｍ近傍の波長の吸光度との平均の吸光度を用いてもよ
い。
【０００９】あるいは、上記混合の前後において、溶液
中の赤血球の、４００ｎｍもしくは４００ｎｍ近傍の波
長と、３９０ｎｍもしくは３９０ｎｍ近傍の波長の各吸
光度Ｑ3 ，Ｑ4 を測定し、上記混合の前後における、判
別式 Ｄ2 ＝Ｑ1 −Ｑ2 の値の変化に基づいて、ＮＯの存在の有無を検出しても
よい。
中の赤血球の、４００ｎｍもしくは４００ｎｍ近傍の波
長と、３９０ｎｍもしくは３９０ｎｍ近傍の波長の各吸
光度Ｑ3 ，Ｑ4 を測定し、上記混合の前後における、判
別式 Ｄ2 ＝Ｑ1 −Ｑ2 の値の変化に基づいて、ＮＯの存在の有無を検出しても
よい。
【００１０】本発明は以下の二つの事実の組み合わせを
基礎としている。 （ａ）生きた赤血球のような、生理的に完全な状態にあ
る細胞の膜は、一般にＮＯ2 -やＮＯ3 -のような電荷をも
った分子（イオン）を透過しないことが知られている
（例えば、Ｂ．Ａｌｂｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．ｅｄ．
“Ｔｈｅ Ｃｅｌｌ”３ｒｄ ｅｄｓ．Ｃｈａｐ．１
１，Ｃａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈ Ｉｎｃ．，Ｎｅ
ｗ Ｙｏｒｋ ＆ Ｌｏｎｄｏｎ １９ 参照）。
基礎としている。 （ａ）生きた赤血球のような、生理的に完全な状態にあ
る細胞の膜は、一般にＮＯ2 -やＮＯ3 -のような電荷をも
った分子（イオン）を透過しないことが知られている
（例えば、Ｂ．Ａｌｂｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．ｅｄ．
“Ｔｈｅ Ｃｅｌｌ”３ｒｄ ｅｄｓ．Ｃｈａｐ．１
１，Ｃａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈ Ｉｎｃ．，Ｎｅ
ｗ Ｙｏｒｋ ＆ Ｌｏｎｄｏｎ １９ 参照）。
【００１１】このことから、赤血球を用いることによ
り、通常、ヘモグロビンとＮＯとの反応を観察するとき
に伴う、ヘモグロビンとＮＯ2 -やＮＯ3 -との反応による
妨害の発生が防止される。 （ｂ）ヘモグロビンの光吸収スペクトルは、ＮＯを反応
させる前後で変化する。
り、通常、ヘモグロビンとＮＯとの反応を観察するとき
に伴う、ヘモグロビンとＮＯ2 -やＮＯ3 -との反応による
妨害の発生が防止される。 （ｂ）ヘモグロビンの光吸収スペクトルは、ＮＯを反応
させる前後で変化する。
【００１２】図１は、ＮＯ濃度による赤血球吸収スペク
トルの変化を示す図である。横軸は波長、縦軸は吸光
度、奥行きはＮＯの濃度の相違を表わしている。この吸
収スペクトルの変化は、ヘモグロビンとＮＯとの反応に
よるものである。ヘモグロビンの光吸収スペクトルは、
ＮＯを反応させる前には、４００ｎｍ付近、５４０ｎｍ
ならびに５７０ｎｍに吸収のピークがあるが、反応後に
は５４０ｎｍならびに５７０ｎｍのピークは平坦化し、
また、４００ｎｍ付近のピークは短波長側に移動する。
これについては、例えば、Ｍ．Ｋｅｌｍ ｅｔａｌ．，
Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｖｏｌ．
６６，Ｎｏ．６，ｐｐ．１５６１−１５７５（１９９
０）を参照されたい。
トルの変化を示す図である。横軸は波長、縦軸は吸光
度、奥行きはＮＯの濃度の相違を表わしている。この吸
収スペクトルの変化は、ヘモグロビンとＮＯとの反応に
よるものである。ヘモグロビンの光吸収スペクトルは、
ＮＯを反応させる前には、４００ｎｍ付近、５４０ｎｍ
ならびに５７０ｎｍに吸収のピークがあるが、反応後に
は５４０ｎｍならびに５７０ｎｍのピークは平坦化し、
また、４００ｎｍ付近のピークは短波長側に移動する。
これについては、例えば、Ｍ．Ｋｅｌｍ ｅｔａｌ．，
Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｖｏｌ．
６６，Ｎｏ．６，ｐｐ．１５６１−１５７５（１９９
０）を参照されたい。
【００１３】本発明は、以上の（ａ），（ｂ）の２点を
基礎として完成されたものであり、本発明は、ヒト、
豚、他の小動物等の極微量の血液から容易に得られる、
例えば１個もしくは数個等、比較的少数個の赤血球を用
いるだけで、他に特別の試薬を使う必要がなく、ＮＯを
ＮＯ2 -およびＮＯ3 -と区別して検出できるため、実用上
の効果は大きい。
基礎として完成されたものであり、本発明は、ヒト、
豚、他の小動物等の極微量の血液から容易に得られる、
例えば１個もしくは数個等、比較的少数個の赤血球を用
いるだけで、他に特別の試薬を使う必要がなく、ＮＯを
ＮＯ2 -およびＮＯ3 -と区別して検出できるため、実用上
の効果は大きい。
【００１４】また、本発明は赤血球を用いることから、
その赤血球の細胞膜の特性を利用できる点に加えて、Ｎ
Ｏ検出に赤血球内の高濃度のヘモグロビン（２２ｍＭ）
を使用できるため、高感度の検出が期待でき、さらに個
々の赤血球の大きさ程度の位置分解能を持った検出が期
待できる。赤血球を用いてＮＯを検出にあたっては、Ｎ
Ｏを含有もしくは産生する可能性のある物質を混合する
前の赤血球の吸光度はあらかじめわかっている場合が多
く、その場合は、上記の物質を混合した後の吸光度を測
定しその測定した吸光度に基づいてＮＯを検出してもよ
い。ただし、上記物質を混合する前後において吸光度を
測定し、それらの吸光度に基づいてＮＯを検出すること
がより好ましい。
その赤血球の細胞膜の特性を利用できる点に加えて、Ｎ
Ｏ検出に赤血球内の高濃度のヘモグロビン（２２ｍＭ）
を使用できるため、高感度の検出が期待でき、さらに個
々の赤血球の大きさ程度の位置分解能を持った検出が期
待できる。赤血球を用いてＮＯを検出にあたっては、Ｎ
Ｏを含有もしくは産生する可能性のある物質を混合する
前の赤血球の吸光度はあらかじめわかっている場合が多
く、その場合は、上記の物質を混合した後の吸光度を測
定しその測定した吸光度に基づいてＮＯを検出してもよ
い。ただし、上記物質を混合する前後において吸光度を
測定し、それらの吸光度に基づいてＮＯを検出すること
がより好ましい。
【００１５】また、上記目的を達成する本発明のＮＯ検
出装置のうち第１のＮＯ検出装置は、赤血球を含有する
溶液中の赤血球の、少なくともある一つの波長に対する
吸光度を測定する顕微分光手段と、赤血球を含有する溶
液中の赤血球の、その溶液にＮＯを含有もしくは産生す
る可能性のある物質を混合した後の吸光度に基づいてＮ
Ｏの有無を判定する判定手段とを備えたことを特徴とす
る。
出装置のうち第１のＮＯ検出装置は、赤血球を含有する
溶液中の赤血球の、少なくともある一つの波長に対する
吸光度を測定する顕微分光手段と、赤血球を含有する溶
液中の赤血球の、その溶液にＮＯを含有もしくは産生す
る可能性のある物質を混合した後の吸光度に基づいてＮ
Ｏの有無を判定する判定手段とを備えたことを特徴とす
る。
【００１６】また、上記目的を達成する本発明のＮＯ検
出装置のうち第２のＮＯ検出装置はは、赤血球を含有す
る溶液中の赤血球の、少なくともある一つの波長に対す
る吸光度を測定する顕微分光手段と、赤血球を含有する
溶液中の赤血球の、該溶液にＮＯを含有もしくは産生す
る可能性のある物質を混合する前後の吸光度の変化に基
づいてＮＯの有無を判定する判定手段とを備えたことを
特徴とする。
出装置のうち第２のＮＯ検出装置はは、赤血球を含有す
る溶液中の赤血球の、少なくともある一つの波長に対す
る吸光度を測定する顕微分光手段と、赤血球を含有する
溶液中の赤血球の、該溶液にＮＯを含有もしくは産生す
る可能性のある物質を混合する前後の吸光度の変化に基
づいてＮＯの有無を判定する判定手段とを備えたことを
特徴とする。
【００１７】ここで、上記本発明の第１のＮＯ検出装置
ないし第２の検出装置において、上記溶液中の赤血球の
中から被測定用の赤血球を指定する指定手段を備え、上
記顕微分光手段が、指定手段により指定された赤血球の
吸光度を測定するものであることが好ましい。本発明の
ＮＯ検出装置は、顕微鏡下で赤血球を捉えてその赤血球
の吸光度を測定するものであり、本発明のＮＯ検出方法
を効果的に実施することができる。また、本発明のＮＯ
検出装置によれば、赤血球の大きさ程度の位置分解能を
もったＮＯ検出を行なうことができる。
ないし第２の検出装置において、上記溶液中の赤血球の
中から被測定用の赤血球を指定する指定手段を備え、上
記顕微分光手段が、指定手段により指定された赤血球の
吸光度を測定するものであることが好ましい。本発明の
ＮＯ検出装置は、顕微鏡下で赤血球を捉えてその赤血球
の吸光度を測定するものであり、本発明のＮＯ検出方法
を効果的に実施することができる。また、本発明のＮＯ
検出装置によれば、赤血球の大きさ程度の位置分解能を
もったＮＯ検出を行なうことができる。
【００１８】
【発明の実施の形態】以下、本発明の実施形態について
説明する。図２は、本発明のＮＯ検出装置の一実施形態
を示す模式ブロック図である。測定物容器１中に赤血球
を含有する溶液（ここでは血液）や、その溶液に加え、
ＮＯを含有する可能性のある被測定溶液が注入されて、
その注入された溶液が顕微分光部５によって観測され
る。
説明する。図２は、本発明のＮＯ検出装置の一実施形態
を示す模式ブロック図である。測定物容器１中に赤血球
を含有する溶液（ここでは血液）や、その溶液に加え、
ＮＯを含有する可能性のある被測定溶液が注入されて、
その注入された溶液が顕微分光部５によって観測され
る。
【００１９】この測定物容器１には、第１および第２の
２つの注入口２，３が設けられており、第１の注入口２
からは、微量の血液が測定物容器１の内部に注入され、
顕微分光部５でその注入された血液中の赤血球が分光分
析される。本実施形態では、顕微分光部５は、その注入
された血液中の、指定されたあるいは自動認識されたい
ずれか１個もしくは複数個の赤血球の、波長範囲３９０
ｎｍ〜６００ｎｍの吸光度を測定することができるもの
である。第２の注入口３からは、ＮＯを含有する可能性
のある被測定溶液が注入され、撹拌機４により、既に注
入されている血液と撹拌混合される。その混合の後、再
度、顕微分光部５によって、測定物容器１中に注入され
ている溶液中の赤血球について分光分析が行なわれる。
２つの注入口２，３が設けられており、第１の注入口２
からは、微量の血液が測定物容器１の内部に注入され、
顕微分光部５でその注入された血液中の赤血球が分光分
析される。本実施形態では、顕微分光部５は、その注入
された血液中の、指定されたあるいは自動認識されたい
ずれか１個もしくは複数個の赤血球の、波長範囲３９０
ｎｍ〜６００ｎｍの吸光度を測定することができるもの
である。第２の注入口３からは、ＮＯを含有する可能性
のある被測定溶液が注入され、撹拌機４により、既に注
入されている血液と撹拌混合される。その混合の後、再
度、顕微分光部５によって、測定物容器１中に注入され
ている溶液中の赤血球について分光分析が行なわれる。
【００２０】被測定溶液を注入する前後の赤血球の分光
分析結果は、分光データ処理部６に送られる。図３は、
図２に１つのブロックで示す分光データ処理部の構成を
示すブロック図である。入力インターフェイス部６１を
経由して顕微分光部５から分光データを受けた後、その
分光データは第１の一時メモリ６２に一旦格納される。
分析結果は、分光データ処理部６に送られる。図３は、
図２に１つのブロックで示す分光データ処理部の構成を
示すブロック図である。入力インターフェイス部６１を
経由して顕微分光部５から分光データを受けた後、その
分光データは第１の一時メモリ６２に一旦格納される。
【００２１】第１の一時メモリ６２から順次取り出され
た分光データは、演算部６３において、後述するデータ
演算処理により、被測定溶液中にＮＯが含まれていたか
否かが判定される。その判定結果は、第２の一時メモリ
６４に格納される。その第２の一時メモリ６４の内容
は、表示部６５によって、ＮＯの有無の判定結果として
表示される。
た分光データは、演算部６３において、後述するデータ
演算処理により、被測定溶液中にＮＯが含まれていたか
否かが判定される。その判定結果は、第２の一時メモリ
６４に格納される。その第２の一時メモリ６４の内容
は、表示部６５によって、ＮＯの有無の判定結果として
表示される。
【００２２】ここで、演算部６３におけるデータ演算処
理例について説明する。演算部６３では、５４０ｎｍも
しくはその近傍の波長の吸光度をＱ1 、５５５ｎｍある
いはその近傍の波長の吸光度をＱ2+としたとき、判別式 Ｄ1 ＝Ｑ1 −Ｑ2 −Ｑ（Ｑは一定量） ・・・（１） の正負が判別される。被測定溶液を血液に撹拌混合する
前後における判別式Ｄ1の値が正から負に変化したとき
に、被測定溶液中にＮＯが存在していたと判定される。
一定量Ｑは、被測定溶液を撹拌混合する前および被測定
溶液中にＮＯが存在しなかったときに判別式Ｄ1+が正、
被測定溶液中にＮＯが存在していたときに負になるよう
に、あらかじめ実験データ等によりその値が求められ
る。
理例について説明する。演算部６３では、５４０ｎｍも
しくはその近傍の波長の吸光度をＱ1 、５５５ｎｍある
いはその近傍の波長の吸光度をＱ2+としたとき、判別式 Ｄ1 ＝Ｑ1 −Ｑ2 −Ｑ（Ｑは一定量） ・・・（１） の正負が判別される。被測定溶液を血液に撹拌混合する
前後における判別式Ｄ1の値が正から負に変化したとき
に、被測定溶液中にＮＯが存在していたと判定される。
一定量Ｑは、被測定溶液を撹拌混合する前および被測定
溶液中にＮＯが存在しなかったときに判別式Ｄ1+が正、
被測定溶液中にＮＯが存在していたときに負になるよう
に、あらかじめ実験データ等によりその値が求められ
る。
【００２３】尚、上記（１）式中の吸光度Ｑ1+として、
５４０ｎｍもしくはその近傍の波長の吸光度に代えて、
５７０ｎｍもしくはその近傍の波長の吸光度を用いても
よく、あるいはそれら双方の吸光度の平均値を用いても
よい。また、演算部６３では、上記（１）式を判別式と
して用いるのではなく、あるいはその判別式とともに、
４００ｎｍあるいはその近傍の波長の吸光度をＱ3 、３
９０ｎｍあるいはその近傍の波長の吸光度をＱ4 とした
とき、判別式 Ｄ2 ＝Ｑ4 −Ｑ5 ・・・（２） の正負を求め、血液に被測定溶液を撹拌混合する前後に
おける判別式Ｄ2 の値が正から負に変化したときに、そ
の被測定溶液中にＮＯが存在していたと判定してもよ
い。
５４０ｎｍもしくはその近傍の波長の吸光度に代えて、
５７０ｎｍもしくはその近傍の波長の吸光度を用いても
よく、あるいはそれら双方の吸光度の平均値を用いても
よい。また、演算部６３では、上記（１）式を判別式と
して用いるのではなく、あるいはその判別式とともに、
４００ｎｍあるいはその近傍の波長の吸光度をＱ3 、３
９０ｎｍあるいはその近傍の波長の吸光度をＱ4 とした
とき、判別式 Ｄ2 ＝Ｑ4 −Ｑ5 ・・・（２） の正負を求め、血液に被測定溶液を撹拌混合する前後に
おける判別式Ｄ2 の値が正から負に変化したときに、そ
の被測定溶液中にＮＯが存在していたと判定してもよ
い。
【００２４】尚、演算部６３におけるデータ演算処理に
ついては、５４０ｎｍ、５７０ｎｍ、４００ｎｍあるい
はその近傍の波長の吸光度が、他の波長領域の吸光度に
比べて、被測定溶液を加える前後において比較的大きく
変化することを検出できればよいのであって、上記のデ
ータ処理方法に限定されるものではない。図４は、本発
明のＮＯ検出装置のもう１つの実施形態を示す模式ブロ
ック図である。
ついては、５４０ｎｍ、５７０ｎｍ、４００ｎｍあるい
はその近傍の波長の吸光度が、他の波長領域の吸光度に
比べて、被測定溶液を加える前後において比較的大きく
変化することを検出できればよいのであって、上記のデ
ータ処理方法に限定されるものではない。図４は、本発
明のＮＯ検出装置のもう１つの実施形態を示す模式ブロ
ック図である。
【００２５】測定容器１０には、血液が保持され、その
測定容器１０が光学顕微鏡５１にセットされ、白色光で
照明され、その測定容器１０中の溶液の拡大像が作られ
る。その拡大像は、音響光可変分波器（ＡＯＴＦ；Ａｃ
ｏｕｓｔｓ−ＯｐｔｉｃａｌＴｕｎａｂｌｅ Ｆｉｌｔ
ｅｒ）５２に導かれる。このＡＯＴＦ５２を通過した、
０次回折光（白色光で照明されたままの像）と一次回折
光（特定波長による像）はテレビカメラ５２１に導か
れ、そのテレビカメラ５２１により撮像される。尚、こ
の実施形態では光学顕微鏡５１とＡＯＴＦ５２との組合
せが、本発明にいう顕微分光手段の一例である。
測定容器１０が光学顕微鏡５１にセットされ、白色光で
照明され、その測定容器１０中の溶液の拡大像が作られ
る。その拡大像は、音響光可変分波器（ＡＯＴＦ；Ａｃ
ｏｕｓｔｓ−ＯｐｔｉｃａｌＴｕｎａｂｌｅ Ｆｉｌｔ
ｅｒ）５２に導かれる。このＡＯＴＦ５２を通過した、
０次回折光（白色光で照明されたままの像）と一次回折
光（特定波長による像）はテレビカメラ５２１に導か
れ、そのテレビカメラ５２１により撮像される。尚、こ
の実施形態では光学顕微鏡５１とＡＯＴＦ５２との組合
せが、本発明にいう顕微分光手段の一例である。
【００２６】ＡＯＴＦ５２の分光特性（選択波長）は高
周波発振器５２４の出力周波数によって制御される。従
って、分光波長（一次回折光の波長）は高周波発振器５
２４の発振周波数を指定することによって決定される。
また、高周波発振器５２４の出力周波数を掃引すると分
光波長は連続的に変化する。高周波発振器５２４の出力
周波数はコンピュータ６０によって制御される。
周波発振器５２４の出力周波数によって制御される。従
って、分光波長（一次回折光の波長）は高周波発振器５
２４の発振周波数を指定することによって決定される。
また、高周波発振器５２４の出力周波数を掃引すると分
光波長は連続的に変化する。高周波発振器５２４の出力
周波数はコンピュータ６０によって制御される。
【００２７】画像処理装置６０１は、コンピュータ６０
の指示を受けて、テレビカメラ５２１で撮られた像を記
憶し、その像をモニタ装置６０２に表示し、さらにコン
ピュータ６０に接続された座標指示器６０３の操作に連
動してモニタ装置６０２の画面上の特定点を指定し、そ
の指定された特定点の分光特性データをコンピュータ６
０に出力する等の機能をもつ。
の指示を受けて、テレビカメラ５２１で撮られた像を記
憶し、その像をモニタ装置６０２に表示し、さらにコン
ピュータ６０に接続された座標指示器６０３の操作に連
動してモニタ装置６０２の画面上の特定点を指定し、そ
の指定された特定点の分光特性データをコンピュータ６
０に出力する等の機能をもつ。
【００２８】表示器６５はモニタ装置６０２とは別に備
えられており、この表示器６５には、コンピュータ６０
によって処理された各種の分光データが表示される。測
定容器１０の内容物を、モニタ装置６０２上に表示され
る白色光照明の画像として見ながら、座標指示器６０３
によって、測定すべき赤血球上の点を指定する。そうす
ると、赤血球上の画面上の位置データがコンピュータ６
０に送られ記憶される。
えられており、この表示器６５には、コンピュータ６０
によって処理された各種の分光データが表示される。測
定容器１０の内容物を、モニタ装置６０２上に表示され
る白色光照明の画像として見ながら、座標指示器６０３
によって、測定すべき赤血球上の点を指定する。そうす
ると、赤血球上の画面上の位置データがコンピュータ６
０に送られ記憶される。
【００２９】尚、図４に示すモニタ装置６０２の表示画
面中の○印は赤血球を表わし、□印は、分光データ取得
用に指定された点を表わしている。赤血球（○印）が存
在しない点も分光データ取得用に指定（□印）されてい
るのは、測定容器１０の内容物の、赤血球ではない部分
（背景部）の分光データを取得し、その分光データで赤
血球の部分の分光データを補正するためであり、この補
正により、赤血球の、より正確な分光データを得ること
ができる。
面中の○印は赤血球を表わし、□印は、分光データ取得
用に指定された点を表わしている。赤血球（○印）が存
在しない点も分光データ取得用に指定（□印）されてい
るのは、測定容器１０の内容物の、赤血球ではない部分
（背景部）の分光データを取得し、その分光データで赤
血球の部分の分光データを補正するためであり、この補
正により、赤血球の、より正確な分光データを得ること
ができる。
【００３０】次いで、コンピュータ６０は、高周波発振
器５２４の発振周波数を掃引し、上記のようにして指定
された点についての、ＡＯＴＦ５２で分光された結果を
画像処理装置６０１を経由して取り込む。その分光デー
タは表示器６５に表示される。さらに、測定容器１０に
被測定溶液を注入し、赤血球と混和させた後、上記と同
様にして赤血球の分光データを得る。
器５２４の発振周波数を掃引し、上記のようにして指定
された点についての、ＡＯＴＦ５２で分光された結果を
画像処理装置６０１を経由して取り込む。その分光デー
タは表示器６５に表示される。さらに、測定容器１０に
被測定溶液を注入し、赤血球と混和させた後、上記と同
様にして赤血球の分光データを得る。
【００３１】コンピュータ６０では、被測定溶液を注入
する前後の血液中の赤血球の分光データを基に、上記
（１）式、あるいは上記（２）式、あるいは他のデータ
演算処理方法により、被測定溶液中のＮＯの有無の判定
が行なわれる。その判定結果は、表示器６５に表示され
る。尚、上記各実施形態では、赤血球を含有する養液に
比測定溶液を混合する前後における赤血球の分光データ
を得、それら混合前後における分光データに基づいて被
測定を溶液中のＮＯの有無を検出しているが、赤血球を
含有する溶液に被測定溶液を混合した後のみの分光デー
タに基づいて被測定溶液中のＮＯの有無を検出してもよ
い。
する前後の血液中の赤血球の分光データを基に、上記
（１）式、あるいは上記（２）式、あるいは他のデータ
演算処理方法により、被測定溶液中のＮＯの有無の判定
が行なわれる。その判定結果は、表示器６５に表示され
る。尚、上記各実施形態では、赤血球を含有する養液に
比測定溶液を混合する前後における赤血球の分光データ
を得、それら混合前後における分光データに基づいて被
測定を溶液中のＮＯの有無を検出しているが、赤血球を
含有する溶液に被測定溶液を混合した後のみの分光デー
タに基づいて被測定溶液中のＮＯの有無を検出してもよ
い。
【００３２】また、各実施形態では、被測定溶液中のＮ
Ｏの有無のみを問題にしているが、例えば混合前後の分
光スペクトルの変化の程度に基づいてＮＯの含有量もし
くは産生量を検出してもよい。さらに、上記各実施形態
は、ＮＯを含有する可能性のある溶液をＮＯの検出対象
としたが、液体ではなく気体中のＮＯを検出対象として
もよく、あるいはＮＯを産生する可能性のある生体組織
等を検出対象としてもよい。
Ｏの有無のみを問題にしているが、例えば混合前後の分
光スペクトルの変化の程度に基づいてＮＯの含有量もし
くは産生量を検出してもよい。さらに、上記各実施形態
は、ＮＯを含有する可能性のある溶液をＮＯの検出対象
としたが、液体ではなく気体中のＮＯを検出対象として
もよく、あるいはＮＯを産生する可能性のある生体組織
等を検出対象としてもよい。
【００３３】
【発明の効果】以上説明したように、本発明によれば、
ＮＯを、ＮＯ2 -，ＮＯ3 -とは区別して高精度に検出する
ことができる。
ＮＯを、ＮＯ2 -，ＮＯ3 -とは区別して高精度に検出する
ことができる。
【図１】ＮＯ濃度による赤血球吸収スペクトルの変化を
示す図である。
示す図である。
【図２】本発明のＮＯ検出装置の一実施形態を示す模式
ブロック図である。
ブロック図である。
【図３】図２に１つのブロックで示す分光データ処理部
の構成を示すブロック図である。
の構成を示すブロック図である。
【図４】本発明のＮＯ検出装置のもう１つの実施形態を
示す模式ブロック図である。
示す模式ブロック図である。
１ 測定物容器 ２ 第１の注入口 ３ 第２の注入口 ４ 撹拌機 ５ 顕微分光部 ６ 分光データ処理部 １０ 測定容器 ５１ 光学顕微鏡 ５２ ＡＯＴＦ ６０ コンピュータ ６１ 入力インターフェイス部 ６２ 第１の一時メモリ ６３ 演算部 ６４ 第２の一時メモリ ６５ 表示器 ５２１ テレビカメラ ５２４ 高周波発振器 ６０１ 画像処理装置 ６０２ モニタ装置 ６０３ 座標指示器
Claims (9)
- 【請求項１】 赤血球を含有する溶液にＮＯを含有もし
くは産生する可能性のある物質を混合し、 該混合の後において、該溶液中の赤血球の、少なくとも
ある一つの波長に対する吸光度を測定し、 測定された吸光度に基づいてＮＯを検出することを特徴
とするＮＯ検出方法。 - 【請求項２】 赤血球を含有する溶液にＮＯを含有もし
くは産生する可能性のある物質を混合し、 該混合の前後において、該溶液中の赤血球の、少なくと
もある一つの波長に対する吸光度を測定し、 測定された混合前後の吸光度の変化に基づいてＮＯを検
出することを特徴とするＮＯ検出方法。 - 【請求項３】 前記混合の前後双方において、前記溶液
中の赤血球の、所定の１つもしくは複数の第１の波長に
おける第１の吸光度と、所定の１つもしくは複数の第２
の波長における第２の吸光度との双方を測定し、 前記混合の前後における、前記第１の吸光度と前記第２
の吸光度とのの変化差もしくは比の変化に基づいて、Ｎ
Ｏの存在の有無を検出することを特徴とする請求項２記
載のＮＯ検出方法。 - 【請求項４】 前記混合の前後において、前記溶液中の
赤血球の、５４０ｎｍもしくは５４０ｎｍ近傍の波長
と、５５５ｎｍもしくは５５５ｎｍ近傍の波長の各吸光
度Ｑ1 ，Ｑ2 を測定し、 前記混合の前後における、判別式 Ｄ1 ＝Ｑ1 −Ｑ2 の値の変化に基づいて、ＮＯの存在の有無を検出するこ
とを特徴とする請求項２記載のＮＯ検出方法。 - 【請求項５】 ５４０ｎｍもしくは５４０ｎｍ近傍の波
長の吸光度に代えて、５７０ｎｍもしくは５７０ｎｍ近
傍の波長の吸光度、ないし、５４０ｎｍもしくは５４０
ｎｍ近傍の波長の吸光度と５７０ｎｍもしくは５７０ｎ
ｍ近傍の波長の吸光度との平均の吸光度を用いることを
特徴とする請求項４記載のＮＯ検出方法。 - 【請求項６】 前記混合の前後において、前記溶液中の
赤血球の、４００ｎｍもしくは４００ｎｍ近傍の波長
と、３９０ｎｍもしくは３９０ｎｍ近傍の波長の各吸光
度Ｑ3 ，Ｑ4 を測定し、 前記混合の前後における、判別式 Ｄ2 ＝Ｑ1 −Ｑ2 の値の変化に基づいて、ＮＯの存在の有無を検出するこ
とを特徴とする請求項２記載のＮＯ検出方法。 - 【請求項７】 赤血球を含有する溶液中の赤血球の、少
なくともある一つの波長に対する吸光度を測定する顕微
分光手段と、 赤血球を含有する溶液中の赤血球の、該溶液にＮＯを含
有もしくは産生する可能性のある物質を混合した後の吸
光度に基づいてＮＯの有無を判定する判定手段とを備え
たことを特徴とするＮＯ検出装置。 - 【請求項８】 赤血球を含有する溶液中の赤血球の、少
なくともある一つの波長に対する吸光度を測定する顕微
分光手段と、 赤血球を含有する溶液中の赤血球の、該溶液にＮＯを含
有もしくは産生する可能性のある物質を混合する前後の
吸光度の変化に基づいてＮＯの有無を判定する判定手段
とを備えたことを特徴とするＮＯ検出装置。 - 【請求項９】 前記溶液中の赤血球の中から被測定用の
赤血球を指定する指定手段を備え、 前記顕微分光手段が、前記指定手段により指定された赤
血球の吸光度を測定するものであることを特徴とする請
求項７又は８記載のＮＯ検出装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8825396A JPH09281036A (ja) | 1996-04-10 | 1996-04-10 | Ｎｏ検出方法および装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8825396A JPH09281036A (ja) | 1996-04-10 | 1996-04-10 | Ｎｏ検出方法および装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09281036A true JPH09281036A (ja) | 1997-10-31 |
Family
ID=13937711
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8825396A Pending JPH09281036A (ja) | 1996-04-10 | 1996-04-10 | Ｎｏ検出方法および装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH09281036A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001022064A1 (fr) * | 1999-09-17 | 2001-03-29 | Kowa Kabushiki Kaisha | Dispositif d'imagerie à particules fluorescentes |
| WO2003010513A1 (fr) * | 2001-07-26 | 2003-02-06 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Procede de mesure de densite de solution, cellule d'echantillon utilisee pour ledit procede et dispositif de mesure de densite de solution |
| WO2012124269A1 (ja) * | 2011-03-11 | 2012-09-20 | パナソニックヘルスケア株式会社 | 窒素酸化物濃度測定装置 |
-
1996
- 1996-04-10 JP JP8825396A patent/JPH09281036A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001022064A1 (fr) * | 1999-09-17 | 2001-03-29 | Kowa Kabushiki Kaisha | Dispositif d'imagerie à particules fluorescentes |
| WO2003010513A1 (fr) * | 2001-07-26 | 2003-02-06 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Procede de mesure de densite de solution, cellule d'echantillon utilisee pour ledit procede et dispositif de mesure de densite de solution |
| WO2012124269A1 (ja) * | 2011-03-11 | 2012-09-20 | パナソニックヘルスケア株式会社 | 窒素酸化物濃度測定装置 |
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