JPH08334701A - 照明光学系 - Google Patents

照明光学系

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JPH08334701A
JPH08334701A JP14330295A JP14330295A JPH08334701A JP H08334701 A JPH08334701 A JP H08334701A JP 14330295 A JP14330295 A JP 14330295A JP 14330295 A JP14330295 A JP 14330295A JP H08334701 A JPH08334701 A JP H08334701A
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JP
Japan
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optical system
diffraction grating
light
illumination
grating
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JP14330295A
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Shingo Kashima
鹿島伸悟
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Olympus Corp
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Olympus Optical Co Ltd
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Publication date
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Abstract

(57)【要約】 【目的】 光量を損失することなく、共焦点型レーザ走
査顕微鏡用には光学素子を変換することなく対物レンズ
の瞳径に応じた輪帯照明が得られる照明光学系。 【構成】 コリメートされたレーザ光を所定角度で円錐
状に拡がる光束に変換する同心円状で等間隔の回折格子
1と、その円錐状に拡がる光束を同心状の平行光若しく
は収束光に成形する成形光学系2とからなる。回折格子
1としては、矩形状位相回折格子であり、その位相差Δ
が0.8πより大きく、1.2πより小さいことが望ま
しい。成形光学系2としては、例えば、アキシコンプリ
ズム、両面に角度を持った円錐プリズムを設けたもの、
ブレーズ化された同心円状で等間隔の格子、収束レンズ
を用いる。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は照明光学系に関し、特
に、レーザを用いた照明光学系、さらに詳しくは、共焦
点型のレーザ走査顕微鏡(CLSM)やレーザ暗視野顕
微鏡に用いる輪帯照明光学系に関するものである。
【0002】
【従来の技術】円形開口を有する光学系や輪帯開口を有
する光学系の点像強度分布関数(PSF)は、例えば、
Max Born,Emil Wolf著『Prnciples of Optics 』(PERGA
MON PRESS)に詳しいが、簡単にその特徴を以下に記す。
図10に回折像の強度分布を示すが、輪帯開口にする
と、1次暗環の径は円形開口の場合より小さくなるが、
1次極大強度が大きくなり、2点解像力は上がるが、低
周波のコントラストが落ちるため、像としては良くない
ものとなる。
【0003】一方、CLSMにおける結像理論に関して
は、例えば、T.Wilson Ed.『CONFOCAL MICROSCOPY 』(A
CADEMIC PRESS)に詳しいが、簡単に記すと、CLSMで
は、得られるPSFは照明系(コンデンサレンズ)のP
SFと検出系(対物レンズ)のPSFの積で表される。
現在のCLSMは落射型が殆どであり、対物レンズがコ
ンデンサレンズを兼ねるため、CLSMでのPSFは対
物レンズのPSFの自乗となる。そのため、PSFの1
次暗環の径は同じだが、その幅が狭くなる。また、1次
極大の強度も小さくなり、解像・コントラスト共に向上
する。さらに、CLSMでは、照明系か検出系のどちら
かを輪帯開口とする(一般には、照明系を輪帯照明とす
る。)ことにより、そのPSFは円形開口のPSFと輪
帯開口のPSFの積となるため、1次暗環の径は小さく
なりその幅も狭くなる。かつ、1次極大の強度もあまり
大きくならないため、通常のCLSMよりさらに高解像
・高コントラストを得られる(照明系と検出系の両方を
輪帯開口にすると、1次極大の強度が大きくなり、像と
しては望ましくない。図11参照。)。
【0004】また、通常の顕微鏡で照明にレーザを用い
ると、スペックルノイズや干渉縞が出て望ましくない
が、暗視野照明では散乱光を検出するため、上記のよう
な不具合はない。逆に、散乱光は弱いため照明光を強く
した方が良く、レーザ暗視野顕微鏡が世に知られてい
る。
【0005】
【発明が解決しようとする課題】上記何れの場合でも輪
帯照明を必要とするが、従来は、レーザからの光をビー
ムエクスパンダで拡大し、センタストップを配して輪帯
照明としていた。
【0006】顕微鏡の照明系に用いるレーザは、TEM
00モード(強度分布がガウス分布をしている。)であ
り、上記手法による輪帯照明では、図12に示すよう
に、最も強度の高い中心部をセンタストップで阻止し、
強度の低い周辺部の光だけしか使わないため、効率が非
常に悪い。CLSMの場合は、用いる対物レンズの瞳径
に応じた輪帯照明を得るために、ビームエクスパンダの
拡大倍率を変えたり、センタストップの径を変えたりし
なければならない。
【0007】本発明は従来技術のこのような問題点に鑑
みてなされたものであり、その目的は、レーザの光量を
損失することなく輪帯照明を得られるようにし、また、
CLSM用には光学素子を変換することなく対物レンズ
の瞳径に応じた輪帯照明が得られる照明光学系を提供す
ることである。
【0008】
【課題を解決するための手段】上記目的を達成する本発
明の照明光学系は、コリメートされたレーザ光を所定角
度で円錐状に拡がる光束に変換する手段と、その円錐状
に拡がる光束を同心状の平行光若しくは収束光に成形す
る成形光学系とからなる照明光学系において、前記光束
変換手段として、同心円状で等間隔の回折格子を用いた
ことを特徴とするものである。
【0009】この場合、回折格子として矩形状位相回折
格子を用い、その位相差Δが以下の条件を満たすように
することが望ましい。 0.8π<Δ<1.2π また、回折格子と成形光学系の間の距離を光軸に沿って
可変にする構成にすることが望ましい。
【0010】以上の何れかにおいて、回折格子を、同心
円の半径方向に伸縮するピエゾ素子、あるいは、位相差
が可変な液晶素子より構成することもできる。
【0011】
【作用】以上の本発明の照明光学系の概念図を図1に示
す。なお、図1を含め、以下の構成を示す図は全て断面
図である。
【0012】図1(a)に示すように、図示しないコリ
メートされたレーザ光源から出た光束を同心円状で等間
隔の回折格子1に入射させると、その光は光軸の周りで
回転対称の0次光、±1次光、±2次光等に回折されて
分かれるが、それらの回折角は波長と溝間隔のみに依存
する。ここで、±1次光に着目すると、回折格子1の溝
間隔をd、レーザの波長をλとすると、±1次光が光軸
となす角θは、sinθ=λ/dを満たすものとなる。
光軸と角度θをなす回転対称のコリメート光を、回折格
子1から距離Lをおいて配置された成形光学系2により
再び光軸と平行なコリメータ光とすることにより、図1
(b)に示すような断面の輪帯照明光を得ることができ
る。また、透過型の暗視野照明用等には、成形光学系2
により輪帯状に集光する光束に変換してもよい。
【0013】通常の回折格子では、0次光の強度が強
く、高次光になる程その強度が弱くなる。そのため、上
記のように±1次光を用いたものでは、綺麗な輪帯照明
光にならず、また、輪帯照明光の強度が弱くなる。そこ
で、上記回折格子1として矩形状の位相回折格子を用
い、その位相差Δが下記の条件を満たすようにする。
【0014】0.8π<Δ<1.2π 位相回折格子は、図2に示すように、屈折率n、厚さt
の少なくとも一方が格子面状で周期的に変化する構造の
回折格子1であり、この位相回折格子1に入射する光の
波長がλのとき、2πnt/λが位相回折格子1の位相
差Δである。理論的には、位相差Δがπのとき、0次光
を含めた偶数次数光は発生せず、また、3次以上の回折
光強度は著しく弱くなるため、実質的に±1次光のみと
なり、レーザの光量損失のない綺麗な輪帯照明光が得ら
れるが、上記条件を満たしていれば、ほぼ理論通りとな
り、実用上問題はない。
【0015】また、回折格子1と成形光学系2の間の距
離が光軸に沿って可変とすることにより、輪帯照明光の
大きさを変えることができる。すなわち、回折格子1に
入射するコリメートされたレーザ光の光束径をφ、回折
格子1と成形光学系2の間の距離をL、成形光学系2に
より再び光軸と平行な輪帯照明光とされた光束の外径を
Φとすると(図1(a))、Φ=2Ltanθ+φとな
り、図1(c)のように、LをL’に変えることによ
り、Φを対物レンズの瞳径に応じたものとすることがで
きる(図1(d))。なお、レーザ暗視野顕微鏡では、
落射型と透過型共に必要とされる輪帯照明光の外径と内
径は決まっているため、Lを可変とする必要はない。
【0016】また、上記回折格子1を、溝間隔方向に同
心円状に積層された透明なピエゾ素子で形成しておけ
ば、電圧をかけることにより、溝間隔を任意に変えるこ
とができ、光軸と回折光のなす角θを任意に可変にで
き、様々なレーザ波長においても同様な輪帯照明を得る
ことができる。また、上記回折格子1を液晶素子で形成
し、電圧をかけて、屈折率nを変えることにより、ある
範囲内の波長において位相回折格子の位相差Δを正確に
πとすることが可能となり、レーザが代わりその波長が
変化しても、位相回折格子の位相差Δをπにすることが
できる。
【0017】
【実施例】以下、本発明の照明光学系のいくつかの実施
例を図面を参照にして説明する。 第1実施例 図3は本発明の第1実施例である輪帯照明系の構成を示
す断面図(a)とその輪帯照明光の断面図(b)であ
る。図(a)に示してないコリメートされたレーザから
の光束を、その波長における位相差がπの同心円状で等
間隔の矩形状位相回折格子1に導く。波長及び格子間隔
で決まる回折角θで曲げられた光束は、アキシコンプリ
ズム3で屈折され、再び光軸と平行な輪帯照明光(図
(b))となる。ここで、位相回折格子1とアキシコン
プリズム3の距離Lを光軸に沿って変えることにより、
輪帯照明の外径と輪帯度(輪帯照明域の外径と内径の
比)が変わる。また、アキシコンプリズム3は位相回折
格子1により回折角θで曲げられた光束を光軸と平行に
戻すためのものであるから、同等の作用をするもの、例
えば、両面に角度を持った円錐プリズムを設けたもの
や、ブレーズ化された同心円状で等間隔の格子からなる
回折型光学素子であってもよいことは言うまでもない。
【0018】より具体的に数値例であげる。コリメート
されたレーザ光の光束径φ=1mm、波長λ=0.63
28μm、位相回折格子1の格子間隔d=12.7μm
のとき、1次光の回折角θ≒2.86°となる。この回
折格子1からアキシコンプリズム3までの距離L=25
mmのとき、輪帯照明光の外径はΦ=2Ltanθ+φ
≒3.5mmとなり、内径はΦ−2φ≒1.5mmとな
る。これはCLSMに適した例である。また、φ=3m
m、λ=0.6328μm、d=5μmのとき、θ≒
7.28°となり、L=90mmとすると、Φ≒26m
m、内径≒20mmとなる。これは、図4に光軸に沿っ
た断面図を示すような落射型のレーザ暗視野顕微鏡用の
輪帯照明に適した例である。
【0019】第2実施例 図5は、本発明の第2実施例である輪帯照明系の構成図
(a)とその輪帯照明光の断面図(b)である。第1実
施例の構成に、さらに2枚のレンズ4、5を共軸で配置
してなるビームエクスパンダをその射出側に配したもの
であり、これにより輪帯度を一定としたまま、輪帯照明
の外径を変えることができる。
【0020】第3実施例 図6は、本発明の第3実施例として収束型の輪帯照明を
用いた透過型暗視野照明系の構成図である。図示しない
コリメートされたレーザからの光束をその波長における
位相差がπ、同心円状で等間隔の矩形状位相回折格子1
に導く。波長及び格子間隔で決まる回折角θで曲げられ
た光束は、収束レンズ6によって輪帯状に収束され、そ
の後リング絞り7を通過し、暗視野コンデンサ8を経て
物体面9を暗視野照明する。
【0021】第4実施例 本実施例の構成は、基本的には上記の第1あるいは第2
実施例と同じであるが、回折格子として、位相回折格子
1の代わりにピエゾ素子10を用いた点に特徴がある。
このピエゾ素子10は、図7に示すように、電圧を印加
する前(同図(a))と電圧を印加した後(同図
(b))とでは、ピエゾ素子10自体の厚みLがL’に
変化する物質である。本実施例では、透明のピエゾ素子
10を図8(a)に示すように、溝間隔方向に同心円状
に積層させることにより位相回折格子1を形成してい
る。そして、本実施例では、このエピゾ素子10からな
る位相回折格子1に電圧をかける(図8(b))ことに
より、溝間隔を任意に変えることができ、光軸と回折光
のなす角θを任意に可変でき、様々なレーザ波長におい
て、アキシコンプリズム2を通過した後の光束を光軸と
平行にすることができる。
【0022】第5実施例 この実施例も、構成は、第1あるいは第2実施例と同じ
であるが、位相回折格子1が図9に示すように、同心円
状で等間隔の透明電極と対向透明電極が設けられた液晶
素子11からできており(当然、軸方向は光軸方向と一
致させ、複屈折は起きないようにする。)、電極間に電
圧をかけることによって液晶の屈折率そのものを変化さ
せ、波長が変わっても位相回折格子1の位相差Δが常に
πになるようにできる。
【0023】以上、本発明の照明光学系をいくつかの実
施例に基づいて説明してきたが、本発明はこれら実施例
に限定されず種々の変形が可能である。
【0024】
【発明の効果】以上の説明から明らかなように、本発明
の照明光学系によれば、レーザの光量を殆ど損失するこ
となく、また、様々な外径、輪帯度の輪帯照明を得るこ
とができる。
【図面の簡単な説明】
【図1】本発明の照明光学系の概念図である。
【図2】本発明の照明光学系で使用する位相回折格子の
断面図である。
【図3】本発明の第1実施例である輪帯照明系の構成を
示す断面図と輪帯照明光の断面図である。
【図4】落射型レーザ暗視野顕微鏡の光軸に沿った断面
図である。
【図5】本発明の第2実施例である輪帯照明系の構成図
と輪帯照明光の断面図である。
【図6】本発明の第3実施例の透過型暗視野照明系の構
成図である。
【図7】ピエゾ素子の作用を説明するための図である。
【図8】本発明の第4実施例で用いる位相回折格子の説
明図である。
【図9】本発明の第5実施例で用いる位相回折格子の説
明図である。
【図10】円形開口と輪帯開口とを経た点像の回折像の
強度分布を示す図である。
【図11】顕微鏡とその瞳形状に応じた点像の回折像の
強度分布を示す図である。
【図12】従来のセンタストップで輪帯照明を得る照明
系の問題点を説明するための図である。
【符号の説明】
1…回折格子(位相回折格子) 2…成形光学系 3…アキシコンプリズム 4、5…レンズ 6…収束レンズ 7…リング絞り 8…暗視野コンデンサ 9…物体面 10…エピゾ素子 11…液晶素子

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 コリメートされたレーザ光を所定角度で
    円錐状に拡がる光束に変換する手段と、その円錐状に拡
    がる光束を同心状の平行光若しくは収束光に成形する成
    形光学系とからなる照明光学系において、前記光束変換
    手段として、同心円状で等間隔の回折格子を用いたこと
    を特徴とする照明光学系。
  2. 【請求項2】 前記回折格子が矩形状位相回折格子であ
    り、その位相差Δが以下の条件を満たすことを特徴とす
    る請求項1記載の照明光学系。 0.8π<Δ<1.2π
  3. 【請求項3】 前記回折格子と前記成形光学系の間の距
    離が光軸に沿って可変に構成されていることを特徴とす
    る請求項1又は2記載の照明光学系。
JP14330295A 1995-06-09 1995-06-09 照明光学系 Withdrawn JPH08334701A (ja)

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Effective date: 20020903