JPH0827017A

JPH0827017A - ヘリコバクター・ピロリの成長阻害用薬剤組成物

Info

Publication number: JPH0827017A
Application number: JP6187699A
Authority: JP
Inventors: Niman Yitzhak; ニーマンイトザク; Tabak Mina; タバクミナ; Almon Robert; アーモンロバート
Original assignee: Dimotech Ltd
Current assignee: Dimotech Ltd
Priority date: 1994-07-18
Filing date: 1994-07-18
Publication date: 1996-01-30

Abstract

(57)【要約】（修正有）【目的】ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃ
ｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）の成長およびヘリコバクター・
ピロリのウレアーゼ活性を阻害するのに有用な薬剤組成
物の提供。【構成】植物の肉桂の有機抽出物またはこの植物中に存
在する化学成分を含有する薬剤組成物。最も好ましい化
学成分は、シンナムアルデヒドおよびメトキシシンナム
アルデヒドである。本抽出物は、付加的なフレーバー成
分を含むかまたは含まないドリンク剤として使用する
か、またはカプセル剤に変えることができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、病原菌の成長を阻害す
るのに有用な薬剤組成物を製造するための、特定の化合
物またはこれらを含有する植物の抽出物の新規治療用途
に関する。さらに詳細には、本発明は、ヘリコバクター
・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）の
成長およびヘリコバクター・ピロリのウレアーゼ活性を
阻害するのに有用な薬剤組成物を製造するための、上記
化合物または上記抽出物の使用法に関する。

【０００２】

【従来の技術】１９８２年に胃炎病変および消化性潰瘍
のある患者の胃から単離された細菌であるヘリコバクタ
ー・ピロリは、先にカンフィローバクター（Ｃａｍｐｈ
ｙｌｏｂａｃｔｅｒ）に関係づけられた属である。ヘリ
コバクター・ピロリ菌は、消化性潰瘍の最も普通の公知
の原因であり、大部分の症例の説明となる。これは、十
二指腸潰瘍のある患者の９５％以上の腔中および胃潰瘍
の患者の少なくとも７５％において発見された。この細
菌が慢性および消化性潰瘍疾患と関連し、そして胃癌胃
炎についてさえ可能であることは、今や一般的に受け入
れられている［ガブリエル・ゲイゼル（Ｇａｂｒｉｅｌ
ｅＧｅｉｓｅｌ）外、ジャーナル・オブ・クリニカル
・ミクロバイオロジー（ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉ
ｎｉｃａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ），５月，１９９
０，９３０−２］。このものはまた、大量のウレアゼー
をも産生し、このウレアーゼがこの細菌の微環境のｐＨ
を増大させる。

【０００３】ヘリコバクター・ピロリは曲線状であるか
またはＳ形をしたグラム陰性菌として現われ、その細胞
壁は細胞質膜にぴったりとなめらかに付着している。今
日、ヘリコバクター・ピロリ集落形成度が慢性胃炎およ
び消化性潰瘍と関連することは十分に理解されている。
ヘリコバクター・ピロリ集落形成の存在が消化性胃潰瘍
疾患の発生および慢性化の両方において非常に重要であ
ることは、一般的な結論である。マーシャル・ビー・ジ
ェイ（ＭａｒｓｈａｌｌＢ．Ｊ．）外（Ｍｅｄ．Ｊ．
Ａｕｓｔｙ．１９８５，４３９−４４３）に従えば、慢
性胃炎および十二指腸潰瘍の症例の８０％以上は、同時
に存在するヘリコバクター・ピロリ感染と関連し、両者
が潰瘍疾患の発生に関係がある。ヘリコバクター・ピロ
リに対する常套的な治療は、次クエン酸ビスマスおよび
抗生物質の使用を基本にしている。しかしながら、この
方法はヘリコバクター・ピロリ感染を根絶せず、ある期
間後に感染が再び起こる。

【０００４】ビスマス製剤は、種々の胃腸病とたたかう
ために有効に使用された。最も一般的に使用されるのは
次サリチル酸−ビスマスおよびコロイド状次クエン酸ビ
スマスである。後に、ビスマス塩とアモキシシリンおよ
びメトロジナゾール（ｍｅｔｒｏｄｉｎａｚｏｌｅ）の
ような抗生物質との組み合わせも示唆された。コロイド
状次クエン酸ビスマスが、細菌を取除くことにより、そ
して胃腸管へのその薬の何か別の効果によってではな
く、消化不良を改善することが証明された。今日、大部
分の患者におけるヘリコバクター・ピロリ感染を根絶す
る際には、（１）ビスマス化合物；（２）ニトロイミダゾール抗生物質；および（３）テトラサイクリンまたはアモキシシリン、より成る三重治療法が有効であると考えられている［ジ
ョージ，エル・エル（ＧｅｏｒｇｅＬ．Ｌ．）外、Ｍ
ｅｄ．Ｊ．Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ，１９９０，１５３，
１４５−９］。しかしながら、著者らが指摘したよう
に、組織学的胃炎症状の再発が現われないであろうかど
うかを決定するためには長期の追跡が必要である。とも
かく、著者らは、クロストリジウム・ディフィシル・コ
リチス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｄｉｆｆｉｃｉｌｅ
ｃｏｌｉｔｉｓ）によるいくつかの下痢効果が報告さ
れたことを指摘した。これに対して、次クエン酸ビスマ
ス単独を用いた治療後にはいくらかの便秘の病訴も報告
された。

【０００５】極く最近の報告ロスバーグ・ケイ（Ｒｏｓ
ｂｅｒｇＫ．）外，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅ
ｎｔｅｒｏｌ１９９１，第２６ページ，１１７９−１
１８７］に従えば、豚について実施された試験は、同じ
菌株を用いて生体内および試験管内感染させた標本にお
いて、ヘリコバクター・ピロリの胃の上皮への付着と胃
炎との間に良好な相互関係が存在することを示す。これ
は、ヘリコバクター・ピロリの豚の胃粘膜標本への付着
がヒトの条件と全く同様であるという事実を考えると、
非常に重要な発見である。

【０００６】もう一つの最近の論文［デサイ・エイチ・
ジー（ＤｅｓａｉＨ．Ｇ．）外，ＳｃａｎｄＪ．Ｇ
ａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ１９９１，２６，１２０５
−８］には、ヘリコバクター・ピロリの２つの貯蔵庫、
すなわち歯垢および胃の間に関係があることが報告され
ている。カンフィロバクター（Ｃａｍｐｈｙｌｏｂａｃ
ｔｅｒ）様微生物試験を用いると、ヘリコバクター・ピ
ロリは、多くの消化不良の患者の歯垢中および胃の腔お
よび体粘膜中に検出された。ヘリコバクター・ピロリの
濃度（ｄｅｎｓｉｔｙ）は、歯垢中で最も高く、胃の体
粘膜中ではこれより少ないことがわかった。三重薬剤系
（ビスマス，ニトロイミダゾールおよびアモキシシリ
ン）による治療は、細菌が、治療された２４人の患者の
全員において胃の粘膜からは除去されたが、彼ら全員に
おいて歯垢中には存続したことを示す。著者らは、歯垢
はヘリコバクター・ピロリの主要貯蔵庫であって、その
数は胃中よりも大きく、胃の体粘膜における治療の停止
後の感染の再発の原因となり得る、と結論した。しかし
ながら、「抗生物質で治療した患者には副作用がある」
ことを述べる多数の報告がある。事実、ザ・ニュー・イ
ングランド・ジャーナル・オブ・メディシン（Ｔｈｅ
ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅ
ｄｉｃｉｎｅ）（第３２２巻，第１３号，第９０９−９
１５ページ）中で公開された２つの最近の報告は、ヘリ
コバクター・ピロリ菌の根絶に関係し、ビスマスおよび
抗生物質の不利を議論している。

【０００７】上記の短い評論は、ヘリコバクター・ピロ
リによって与えられる可能な病気およびこの細菌とたた
かうために示唆された種々の方法（これらは不幸にして
この必要に応ずるのには有効でなかった）を明確に説明
している。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】ヘリコバクター・ピロ
リ菌の成長を阻害するための化学組成物または薬剤抽出
物を提供することが、本発明の目的である。公知の薬剤
または抗生物質のいずれをも使用することなくヘリコバ
クター・ピロリの成長を阻害するための化合物または薬
剤抽出物を提供することが、本発明のもう一つの目的で
ある。何ら望ましくない作用を与えることのない、ヘリ
コバクター・ピロリ菌の成長を阻害するための化合物ま
たは薬剤抽出物を提供することが、本発明のさらにもう
一つの目的である。

【０００９】

〔発明の詳細な説明〕

【００１０】第一の観点に従えば、本発明は、それを含
有する、宿主におけるＨ．ピロリの成長を阻害するのに
有用な薬剤組成物を製造するための植物肉桂（シナモ
ン）の有機抽出物の使用法に関する。

【００１１】宿主に投与される上記組成物は、シンナム
アルデヒドまたはメトキシシンナムアルデヒドまたは植
物肉桂の有機抽出物溶液を含有し、その宿主における細
菌の成長を阻害するのに十分な量である。シンナムアル
デヒドまたはメトキシシンナムアルデヒドまたは上記有
機抽出物の溶液は、ドリンク剤またはカプセル剤の形で
提供される。

【００１２】肉桂は多くの場所で成育する周知の植物で
ある。驚くべきことに、カモミレ（Ｃａｍｏｍｉｌ
ｅ）、にんにく、オリーブアブラナ（Ｏｌｉｖｅｒａ
ｐｅ）のような薬用植物として公知であり、肉桂に非常
に類似した多くの他の植物は、この性質を全く有してい
ないかまたは非常に限定された程度にのみこの性質を有
することがわかった。さらに、上記の薬用植物の抽出物
は医学的特性を有することが文献中に記述されており、
そして消化系における障害に対抗して示唆されてさえい
ることは指摘されるべきである。

【００１３】我々の欧州特許出願Ｎｏ．９３．４０１６
３８．７には、同じ目的のための植物タイムの水または
有機抽出物を含有する薬剤組成物が記載された。驚くべ
きことに、本発明に従えば、肉桂の植物の主要成分であ
るシンナムアルデヒドおよびメチキシシンナムアルデヒ
ドの他に、肉桂の有機抽出物のみが、Ｈ．ピロリ菌の成
長を予防するために有用であることが見出された。

【００１４】第二の観点に従えば、本発明は、その菌を
植物肉桂の有機抽出物溶液およびこの植物の上記主要成
分と接触させることによってＨ．ピロリ菌の成長を試験
管内で阻害する方法に関する。

【００１５】第三の観点に従えば、本発明は、肉桂植物
中に存在する主要化学成分、そして最も好ましくはシン
ナムアルデヒドおよびメトキシシンナムアルデヒドを、
Ｈ．ピロリの成長を阻害するのに十分な量含有する宿主
において、その成長を阻害するのに有用な組成物として
使用する方法に関する。

【００１６】

【効果】本方法は、Ｉ₁，Ｉ₂およびＩ₃として記述さ
れた種々の患者から単離されたヘリコバクター・ピロリ
の種々の単離物に関して試験管内で試験され、そしてこ
れらのすべてについて同じ成長阻害という有利な効果が
見出された。これは、図１からはっきりと見られるが、
この図１にはヘリコバクター・ピロリの３つの主要単離
物に対する肉桂のアルコール抽出物の阻害作用が具体的
に示されている。このことは、すべてのこれらの細菌に
対して活性ではない特定の抗生物質を超える付加的な利
点である。

【００１７】肉桂の有機抽出物の阻害活性を、種々の患
者から得たヘリコバクター・ピロリの３つの単離物（Ｉ
₁，Ｉ₂およびＩ₃）について試験し、そしてこの３つ
の単離物に対して事実上同程度の有意な阻害作用が認め
られた。これに対して、表１においては、これらの型の
細菌のいくつかは、いくつかの公知の抗生物質によって
影響を受けることが見出されなかったことを認めること
ができる。

【００１８】

【表１】これから認められるように、細菌のこれらの単離体は、
これらが他のものによって影響を受けることが公知であ
るけれども、いくつかの抗生物質によって影響をうけな
いことがわかった。

【００１９】阻害効果は、ローラ・エル・ザイカ（Ｌａ
ｕｒａＬ．Ｚａｉｋａ），［ジャーナル・オブ・フー
ド・セーフティ（ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＳ
ａｆｅｔｙ）９，１９８８，第９７−１１８ページ］に
よって開示されたような「濾紙ディスク拡散法（Ｆｉｌ
ｔｅｒｐａｐｅｒｄｉｓｃｄｉｆｆｕｓｉｏｎｍ
ｅｔｈｏｄ）」を用いて試験管内で測定された。使用し
た方法に従えば、植物の抽出物を直径０．５ｃｍの小さ
な濾紙ディスク上に沈着させ、次に試験細菌を接種した
寒天成長培地を含むペトリ皿の中央に置いた。この皿を
無酸素ジャー中の微好気性条件下で３７℃で３ないし４
日間培養して、細菌の成長を観察した。もし肉桂の抽出
物が抗菌活性を示すならば、この細菌は濾紙ディスクを
囲む領域では成長しないであろう。「阻害域」と定義し
たこの清浄な領域を測定し、ｍｍで記録した。この方法
は、試験されるべき抗菌化合物の試料を含むディスクの
まわりの阻害域を測定することにより抗生物質の活性を
決定するためにも周知である。

【００２０】細菌成長阻害のために使用した評価分析は
下記の通りであった。：夫々０．０５ｍｇおよび０．１
ｍｇの濃度の、２つの有機肉桂抽出物、塩化メチレンお
よびエタノールを、標準ディスク上に点状にたらして、
先に濃度１０⁷ＣＦＵｍｌをもつ細菌懸濁液０．１ｍｌ
で層にした卵黄エマルジョン寒天平板中央上に置いた。

【００２１】必要な培養の後、阻害域を記録した。図２
には、抗生物質：アンピシリン（０．０１ｍｇ）、テト
ラサイクリン（０．０３ｍｇ）、エリスロマイシン
（０．０１５ｍｇ）、ナリジクス酸（０．０３ｍｇ）、
コトリモキサゾール（ｃｏｔｒｉｍｏｘａｚｏｌｅ）
（０．０２５ｍｇ）と比較した、肉桂の２つの有機抽出
物（０．０５ｍｇおよび０．１ｍｇ乾量）を使用して阻
害直径によって測定したときのヘリコバクター・ピロリ
の感受性が示されている。これらの試験ではＨ．ピロリ
の２つの単離物を使用した。

【００２２】驚くべきことに、Ｈ．ピロリの成長の阻害
は、肉桂の有機抽出物によってのみ得られ、この効果は
その薬効活性によって公知のその他の植物の有機抽出物
によっては得られないことがわかった。下記の表２に
は、いくつかの植物による上記細菌の阻害の結果が要約
されている。

【００２３】

【表２】上記の表から見られるように、肉桂以外の植物の抽出物
のいずれにおいても、この細菌の有意の阻害はない。肉
桂の有機抽出物についてのみこの阻害が存在し、水抽出
物を用いた結果生じたものよりもはるかに高いことも認
めることができる。また、この植物の水抽出物の阻害域
が、その他のこの活性を有していない植物の水および有
機抽出物と全く同様であることも明らかに示されてい
る。

【００２４】肉桂の抽出のために使用される溶媒は：エ
タノール，二塩化メチレン、石油エーテルなどのような
極性または非極性溶媒から選択されることができる。特
に適するものは、味を改善するために加えられる何か付
加的なフレーバー成分を含むかまたは含んでいないドリ
ンク剤として摂ることができるエタノール抽出物であろ
う。

【００２５】使用する溶媒が二塩化メチレンまたは石油
エーテルであるときは、全部の溶媒を抽出物から蒸発さ
せ、続いて乾燥物質をエタノールによって抽出すること
が示唆される。

【００２６】下記の表３には、種々の濃度の２つの肉桂
抽出物：抽出物１（塩化メチレンおよびその除去後エタ
ノール添加）および抽出物２（エタノール）、によって
得られたＨ．ピロリの成長の阻害に関する結果が要約さ
れている。

【００２７】試験は、卵黄エマルジョン寒天平板上で実
施し、ディスク上の肉桂濃度は１２ｍｇないし８００ｍ
ｇの範囲内であった。

【００２８】

【表３】上記表３から明らかであるように、濃度１００μｇ以上
のメチレン抽出物はＨ．ピロリの完全な阻害を与える。

【００２９】肉桂抽出物を、 −固体形、卵黄エマルジョン寒天、および −液体形、１０％胎児の子ウシ血清（ＦＣＳ）を含む脳
心臓浸出肉汁（ＢＨＩＢ）、より成る成長培地に加えた。

【００３０】異なる単離物に対する最小阻止濃度（ＭＩ
Ｃ）は０．００５ｍｇであり、一方０．０１５ないし
０．０５ｍｇの範囲では完全な阻害が達成された。この
ことは添付した図３および４からはっきりわかる。

【００３１】人はまたカプセル剤の形にプレスした肉桂
乾燥植物を製造することを考えるであろうが、これもま
た同じ阻害直径効果を与えるであろう。

【００３２】上述したように、肉桂植物の有機抽出物を
使用する代りに、この植物の主要成分であるシンナムア
ルデヒドおよびこれより少ない程度にはメトキシシンナ
ムアルデヒドもＨ．ピロリの成長の有意の阻害を生じさ
せていることがわかった。いくつかの主要成分を用いて
得た結果を、下記の表４に示す。

【００３３】

【表４】上に示したような阻害域の結果からわかるように、シン
ナムアルデヒドのみが、濃度０．２ｍｇ／ディスクでさ
え実質的に完全な阻害を生じさせる。メトキシシンナム
アルデヒドも阻害について有利な作用を有するが、より
高い濃度を用いた場合である。シンナムアルコールまた
はアルファーテルピネンのようないくつかの他の化学成
分は、はるかに高い濃度でさえより低い阻害域しか生じ
ない。

【００３４】この細菌の病原機構に関係するもう一つの
因子は、ヘリコバクター・ピロリのウレアーゼである。
公知のように、尿素の加水分解およびアンモニアの形成
により、細菌は胃の中で優勢である酸性度に抵抗するこ
とが可能になる。ヘリコバクター・ピロリのウレアーゼ
は病原因子として周知であり、このためその阻害はほん
とうに長い間必要とされている。ヘリコバクター・ピロ
リのウレアーゼに対して阻害効果を有することが文献中
に記載されている、公知のいくつかの化学物質がある。
これらの化学物質の中で、下記の試薬：アセト−ヒドロ
キサミム酸、ヒドロキシ尿素、エチレンジアミン四酢酸
およびリジンヒドロキサメート（Ｌｙｓｉｎｅｈｙｄ
ｒｏｘａｍａｔｅ）を挙げることができるが、これらの
うちのいずれも肉桂植物中には存在しない。

【００３５】肉桂の有機抽出物はまた、全細胞および酵
素の両方についてウレアーゼ・ヘリコバクター・ピロリ
の活性を阻害するための能力をもつために有用であるこ
ともわかった。３．８ｍｇ／ｍｌの肉桂のアルコール抽
出物でさえ、全細菌細胞の増大活性を５２．６％までそ
して細菌の溶解産物を同程度に阻害することがわかっ
た。これは、下記のようなコンウェイ（Ｃｏｎｗａｙ）
の変法を用いて測定した：反応混合物は、次のものを含
有していた：リン酸塩緩衝剤（３ｍＭ）、ｐＨ＝６．
８、２．０ｍｌ；尿素（３３０ｍＭ）０．４ｍｌ、お
よび全細胞の懸濁液（１０⁷ＣＦＵ／ｍｌ）、または酵
素の溶液（特別活性４８３μｇＮＨ₄／分／ｍｇ蛋白
質）０．１ｍｌ。

【００３６】肉桂抽出物を、異なる濃度で反応混合物に
添加した。反応を３０分間続けた。炭酸カリウムの飽和
溶液の添加後に、発生したアンモニアはホウ酸によって
吸収させ、最後にベルトレット（Ｂｅｒｔｈｏｌｅｔ）
反応を用いる方法に従って検出した。

【００３７】

【表５】添付した図５には、肉桂のアルコール抽出物による全細
胞および酵素に関するＨ．ピロリウレアーゼの阻害速度
論のグラフが示されている。

【００３８】肉桂抽出物は、全細胞に対しては８ｍｇ／
ｍｌそして酵素溶液に対しては２ｍｇ／ｍｌ（乾燥物質
に関して）の濃度で反応混合物に添加した。反応時間は
６０分であった。炭酸カリウムの飽和溶液の添加後に、
アンモニアをホウ酸の溶液によって吸収させ、ベルトレ
ット（Ｂｅｒｔｈｏｌｅｔ）反応に従って検出した。観
察することができる通り、肉桂のアルコール抽出物が全
細胞に相当するものよりもはるかに高い阻害を酵素に対
して与えることが明らかである。

【図面の簡単な説明】

【図１】Ｈ．ピロリの３つの単離物に関するアルコール
肉桂抽出物の阻害作用を示す。

【図２】いくつかの抗生物質および肉桂植物抽出物に対
するＨ．ピロリの感受性を説明する。

【図３】肉桂の有機抽出物を含む卵黄エマルジョン寒天
上でのＨ．ピロリの成長を説明する。

【図４】肉桂の有機抽出物を含む液体培地中でのＨ．ピ
ロリの２つの単離物の成長を説明する。

【図５】肉桂のアルコール抽出物による全細胞および酵
素に関するＨ．ピロリウレアーゼの阻害速度論を説明す
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ロバートアーモンイスラエル国ラモト− イトザクハヌリヨトストリート２

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏ
ｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）の成長を阻害するのに十
分な量の、植物肉桂の有機抽出物より成る物質および該
植物中に存在する主要化学成分から選択される物質を含
有する、宿主におけるヘリコバクター・ピロリの成長を
阻害するのに有用な薬剤組成物。
【請求項２】化学成分がシンナムアルデヒドである、
請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項３】化学成分がメトキシシンナムアルデヒド
である、請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項４】有機抽出物がエチルアルコールを用いる
ことによって得られる、請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項５】ドリンク剤として使用するための、請求
項１ないし４に記載の薬剤組成物。
【請求項６】所望の味を与えるためにドリンク剤に付
加的なフレーバー成分を加える、請求項５に記載の薬剤
組成物。
【請求項７】カプセル剤の形で投与するための請求項
１ないし４に記載の薬剤組成物。
【請求項８】活性を阻害するのに十分な量の、有機抽
出物または上記植物中に存在する主要化学成分より成
る、ウレアーゼ・ヘリコバクター・ピロリの活性を阻害
するのに有用な薬剤組成物。
【請求項９】化学成分がシンナムアルデヒドである、
請求項８に記載の薬剤組成物。
【請求項１０】化学成分がメトキシシンナムアルデヒ
ドである、請求項９に記載の薬剤組成物。
【請求項１１】阻害が全細胞および酵素について達成
される、請求項８ないし１０に記載の薬剤組成物。