JPH08119943A

JPH08119943A - 免疫抑制剤

Info

Publication number: JPH08119943A
Application number: JP26006294A
Authority: JP
Inventors: Isami Takahashi; 勇美高橋; Tamio Mizukami; 民夫水上; Yasushi Nishiie; 靖西家; Yasushi Oda; 康司小田; Keiko Ochiai; 恵子落合
Original assignee: Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd
Current assignee: KH Neochem Co Ltd
Priority date: 1994-10-25
Filing date: 1994-10-25
Publication date: 1996-05-14

Abstract

(57)【要約】【目的】優れた免疫抑制剤を提供する。【構成】式（Ｉ）（式中、Ｒは水素またはヒドロキシを表す）で表される
化合物を有効成分として含有する免疫抑制剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は新規な免疫抑制剤に関す
る。本発明の免疫抑制剤は自己免疫疾患、アレルギー性
疾患、臓器移植などの治療に有用である。さらに本発明
は、抗菌、抗腫瘍作用および免疫抑制作用を有し、抗
菌、抗腫瘍および免疫抑制剤として有用である化合物 G
T32-B に関する。

【０００２】

【従来の技術】マクロサイクリックラクタム骨格を有す
る生理活性物質として、式

【０００３】

【化３】

【０００４】で表されるvicenistatinが抗菌活性および
抗癌活性を有することが報告されている[ジャーナル・
オブ・アンチバイオチックス（J.Antibiotics), 46,107
6-1081(1993)]。また、式（Ｉａ）

【０００５】

【化４】

【０００６】で表される化合物GT32-Aと同一化合物（BE
-14106）が抗真菌作用および抗癌作用を有することが知
られている [ジャーナル・オブ・アンチバイオチックス
（J.Antibiotics), 45，868-874(1992) 、特開平４−１
１７９号公報] 。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】免疫抑制剤としては、
副腎皮質ホルモン、代謝拮抗剤、アルキル化剤、アルカ
ロイド、抗生物質、抗リンパ球グロブリン、抗CD3モノ
クローナル抗体などが知られており、自己免疫疾患、ア
レルギー性疾患、臓器移植などの治療薬として用いられ
ている。しかしながら、有効性、持続性、副作用などの
点で必ずしも満足されるものではなく、さらに優れた免
疫抑制剤の開発が求められている。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明により式（Ｉ）

【０００９】

【化５】

【００１０】（式中、Ｒは水素またはヒドロキシを表
す）で表される化合物 [以下、化合物(I) という。他の
式番号についても同様である]を有効成分として含有す
る免疫抑制剤が提供される。化合物（Ｉ）の具体例とし
ては、式（Ｉａ）

【００１１】

【化６】

【００１２】で表される化合物 GT32-A 、および式（Ｉ
ｂ）

【００１３】

【化７】

【００１４】で表される化合物 GT32-B があげられる。
GT32-Aは、ストレプトマイセス属である放線菌( Strept
omyces sp. A14106 株) を培地に培養し、培養物中に生
成蓄積させ、該培養物中から単離精製することにより得
られる [ジャーナル・オブ・アンチバイオチックス（J.
Antibiotics),45，868-874(1992)]。

【００１５】化合物GT32-Bは、ストレプトマイセス属に
属し、GT32-B生産能を有する微生物を培地に培養し、培
養物中にGT32-Bを生成蓄積させ、該培養物から GT32-B
を採取することにより得られる。GT32-B生産能を有する
微生物としては、ストレプトマイセス属に属し、GT32-B
生産能を有する菌株であればいずれの菌株でも用いるこ
とができる。また、これらの菌株の人工的変異方法、た
とえば紫外線照射、X 線照射、変異誘起剤処理などによ
って変異させた変異株あるいは自然的に変異した変異株
でも GT32-B 生産能を有するものであれば本発明に用い
ることができる。

【００１６】具体的に好敵な例としては、ストレプトマ
イセス・スピーシーズ（Streptomyces sp.） GT32 株が
あげられる。ストレプトマイセス・スピーシーズ（Stre
ptomyces sp.）GT32株の菌学的性質について以下に述べ
る。

【００１７】なお、該性質の決定は、国際ストレプトマ
イセス（Streptomyces）プロジェクト（ISP）がストレ
プトマイセス種の特性決定のために推奨する方法 [E.B.
シェリング（E.B. Shirling）および D.ゴットリーブ
（D.Gottlieb）、インターナショナル・ジャーナル・シ
ステマティック・バクテリオロジー（Int. J. Syst. Ba
cteriol.），16, 313-340（1966）] に従った。全細胞
の加水分解物中のジアミノピメリン酸の異性体はビー・
ベッカー（B.Becker）らの方式 [アプライド・ミクロバ
イオロジー(Appl. Microbiol.），12,421-423（1964）]
によって確認した。形態学的検討は、光学顕微鏡を用
いて行い、とくに胞子表面の形態については走査型電子
顕微鏡を用いて行った。色の名称の割当てには、カラー
・ハーモニー・マニュアル（Color Harmony Manual）
[コンティナー・コーポレーション・オブ・アメリカ（C
ontainer Corporation of America）、第４版（1985）]
を使用した。

【００１８】GT32株の菌学的性質は次のとおりである。 1.形態的性質 1)菌糸：気菌糸形成；有気菌糸の分断および運動性；無基生菌糸の分断および運動性；無

【００１９】2)胞子：胞子の形成の有無および着生位置；気菌糸に形成胞子嚢の形成の有無および着生位置；無胞子柄上で連鎖する胞子の数；１０個以上多数の胞子が連鎖する場合の形状；曲状または螺旋状胞子の特徴表面構造；平滑形状および大きさ；桿形、約0.4〜0.6 μm × 0.8 〜1.
2 μm 運動性および鞭毛の存在；無

【００２０】3)その他：厚膜胞子；無集束菌糸；無疑似胞子嚢；無菌糸の分裂様式；単純分枝

【００２１】2.培養的性質 GT32株は、一般に使用されている合成および天然培地で
普通もしくは旺盛な成育を示し、基生菌糸は黄色から茶
色系を示す。培地により茶色系統の可溶性色素が産生さ
れることもある。各種培地上で28℃、14日間培養したと
きの生育および色の特徴を以下に示す。

【００２２】1)シュクロース・硝酸塩寒天培地生育状態；旺盛基生菌糸の色調；オートミール(2ec)〜バンブー(2gc) 気菌糸の着生状態とその色調；旺盛、ホワイト(a) 可溶性色素；無

【００２３】2)グルコース・アスパラギン寒天培地生育状態；旺盛基生菌糸の色調；ライトシトロングレー(1ec)〜ペール
レモンイエロー(1ea）気菌糸の着生状態とその色調；普通、ホワイト(a) 可溶性色素；無

【００２４】3)グリセリン・アスパラギン寒天培地生育状態；旺盛基生菌糸の色調；クリーム(1 1/2ca)〜ライトメイズ(2e
a) 気菌糸の着生状態とその色調；旺盛、ホワイト(a) 可溶性色素；無

【００２５】4)スターチ・無機塩寒天培地生育状態；旺盛基生菌糸の色調；バンブー(2gc) 気菌糸の着生状態とその色調；旺盛、ホワイト(a) 可溶性色素；産生（茶色）

【００２６】5)チロシン寒天培地生育状態；旺盛基生菌糸の色調；バンブー(2gc)〜ライトゴールド(2ic) 気菌糸の着生状態とその色調；旺盛、ホワイト(a) 可溶性色素；無

【００２７】6)栄養寒天培地生育状態；貧弱基生菌糸の色調；ライトメイズ(2ea) 気菌糸の着生状態とその色調；貧弱、ホワイト(a) 可溶性色素；無

【００２８】7)イースト・麦芽寒天培地生育状態；旺盛基生菌糸の色調；ライトマスタードタン(2ie)〜バター
スコッチ(3ne) 気菌糸の着生状態とその色調；旺盛、ホワイト(a) 可溶性色素；産生（黄土色）

【００２９】8)オートミール寒天培地生育状態；旺盛基生菌糸の色調；クリーム(1 1/2ca) 気菌糸の着生状態とその色調；旺盛、ホワイト(a) 可溶性色素；無

【００３０】3.生理学的性質生育温度範囲は10日後の、その他の事項については28
℃、２〜３週間後の結果を示す。 1)生育温度範囲；6.0〜 34.0℃ 2)ゼラチンの液化；有 3)スターチの加水分解；有 4)脱脂粉乳の凝固およびペプトン化；ペプトン化する

【００３１】5)メラニン様色素の生成 (i) ペプトン・イースト・鉄寒天培地；無 (ii)チロシン寒天培地；無

【００３２】6)炭素源の利用性（基礎培地：プリードハ
ム・ゴトリーブ寒天培地）以下、＋は利用することを、−は利用しないことを示
す。 L-アラビノース；＋ D-キシロース；＋ D-グルコース；＋シュクロース；＋ラフィノース；− D-フルクトース；＋ L-ラムノース；＋イノシトール；− D-マンニトール；＋

【００３３】4.化学分類的性質菌体中のジアミノピメリン酸の光学異性体；LL型以上、形態的には気中菌糸に胞子鎖が形成されること、
化学分類的には細胞壁が I型（LL−ジアミノピメリン
酸、グリシン）であることから、本菌株は放線菌の中で
ストレプトマイセス属に分類される。

【００３４】本菌株は、ストレプトマイセス・スピーシ
ーズ( Streptomyces sp.）GT32と命名され、ブダペスト
条約に基づいて、平成６年９月２９日付けで工業技術院
生命工学工業技術研究所にＦＥＲＭＢＰ−４８０８と
して寄託してある。本発明の GT32-B 生産菌の培養に際
しては、放線菌の培養に用いられる通常の培養方法が適
用される。用いられる培地は、微生物の資化し得る炭素
源、窒素源、無機物などを程よく含有する培地であれば
合成培地、天然培地いずれでも用いることができる。

【００３５】炭素源としては、グルコース、マンノー
ス、フラクトース、シュクロース、ラクトース、キシロ
ース、アラビノース、マンニトール、澱粉、デキストリ
ン、糖蜜などの炭水化物、クエン酸、リンゴ酸、酢酸、
フマール酸などの有機酸、メタノール、エタノールなど
のアルコール、メタン、エタン、プロパン、ｎ−パラフ
ィンなどの炭化水素などが単独または組合せて用いられ
る。

【００３６】窒素源としては、塩化アンモニウム、硝酸
アンモニウム、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウム
などのアンモニウム塩、アスパラギン酸、グルタミン、
シスチン、アラニンなどのアミノ酸、尿素、ペプトン、
肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、コーン・スチープ・
リカー、大豆粉、カザミノ酸などが単独または組合せて
用いられる。

【００３７】無機物としては、リン酸一水素カリウム、
リン酸二水素カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン
酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄、硫酸
マンガン、硫酸ニッケル、硫酸亜鉛、硫酸銅、塩化ナト
リウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化コバル
ト、炭酸カルシウム、炭酸バリウムなどが用いられる。
その他必要に応じて培地にビタミン、たとえばサイアミ
ンなどの菌体の増殖あるいは GT32-B の生産を促進する
物質を加える。また用いる微生物が特定の物質を要求す
る場合は、該物質を加える。

【００３８】培養は、液体培養法、特に深部攪拌培養法
などにより、16〜37℃の温度、好ましくは25〜32℃の温
度で、pH 4〜10、好ましくはpH 6〜8 で行われる。通常
１〜７日の培養によって、目的化合物 GT32-B が培養物
中および菌体中に生成蓄積される。なお、培地の pH 調
整には、アンモニア水や炭酸アンモニウム溶液などが用
いられる。培養物中の GT32-B 生成量が最大に達したと
きに培養を停止する。

【００３９】培養物中に蓄積した GT32-B を培養物から
単離採取するに際しては、通常の生理活性物質を培養物
から採取する通常の方法が適用される。たとえば、培養
物を濾過により培養濾液と菌体とに分け、菌体をクロロ
ホルム、アセトンなどで抽出する。ついで、抽出液と培
養濾液とを併せて、ポリスチレン系吸着剤、例えばダイ
ヤイオン HP20（三菱化成社製）などに通塔して活性成
分を吸着させ、ついで酢酸エチル、アセトン、メタノー
ルなどで溶出する。溶出液を濃縮し、シリカゲルによる
カラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィ
ーなどにより、目的化合物GT32-Bを得る。なお、培養、
精製操作中のGT32-Bの検出は、シリカゲル薄層クロマト
グラフィー、または、高速液体クロマトグラフィー(HPL
C)による GT32-B の紫外部吸収を目安として追跡するこ
とができる。

【００４０】次に化合物（Ｉ）の生物活性について試験
例で説明する。試験例１．マウスリンパ球混合反応におけるＴ細胞増殖
抑制試験無菌的にAKRマウス [日本エス・エル・シー（株)]より
脾臓を摘出し、単細胞浮遊液とした。この浮遊液にマイ
トマイシンC (MMC)[協和発酵工業 (株)]を添加し（終濃
度50μg/ml）、37℃で30分間培養した。培養後、ハンク
スの平衡塩溶液(HBSS 、ギブコ社) 中に2.5%の牛胎児血
清(FCS、ギブコ社) を加えた溶液で３回洗浄を行ない、
1 x 10⁷cells/mlに調製した。

【００４１】96穴マイクロタイタープレートの各ウエル
にB10.BRマウス[日本エス・エル・シー（株）]のリンパ
節細胞浮遊液 50μl(1.5 x 10⁵cells 含有）、AKRマウ
スの脾臓細胞浮遊液 50μl(5 x 10⁵cells 含有）および
各試験濃度の化合物（Ｉ）を含む培養液 100μlを添加
し、37℃のCO₂インキュベーター内で72時間培養した。
尚、培養終了18時間前に[³H]-チミジン1.0μCiを添加し
た。培養終了後、セルハーベスターで濾紙上に細胞を補
集し、乾燥後トルエン系シンチレーターを加え、液体シ
ンチレーションカウンターで細胞に取り込まれた[³H]-
チミジンの放射能量を測定した（試験群）。

【００４２】対照群として、化合物（Ｉ）を含まない培
養液を添加し、以下上記と同様に培養を行ない、細胞に
取り込まれた[³H]-チミジンの放射能量を測定した。Ｔ
細胞増殖抑制率は、次式に従って算出した。

【００４３】

【数１】

【００４４】（式中、 MMC処理 AKRマウス放射能量は、
MMC処理した AKRマウスの脾臓細胞に取り込まれた[³H]
-チミジンの放射能量を、またB10.BRマウス放射能量
は、B10.BRマウスのリンパ節細胞に取り込まれた[³H]-
チミジンの放射能量を表す) 試験結果を第１表に示す。

【００４５】

【表１】

【００４６】

【表２】

【００４７】第１表によれば、化合物（Ｉ）はマウスリ
ンパ球混合反応におけるT細胞増殖を抑制し、明らかな
免疫抑制作用を示した。以上の試験結果より、化合物
（Ｉ）は、優れた免疫抑制作用を有し、自己免疫疾患、
アレルギー性疾患、臓器移植などの治療剤として有用で
あることが確認された。

【００４８】試験例２．各種細菌に対する抗菌作用抗菌活性は、バクトトリプトン（Difco 社製）3g/l、肉
エキス 3g/l 、酵母エキス 1g/l 、グルコース 1g/l 、
寒天 16g/lの組成からなる培地（pH 7.0）を用いて寒天
希釈法により測定した。

【００４９】各種細菌に対する最小生育阻止濃度(MIC)
を第２表に示す。

【００５０】

【表３】

【００５１】試験例３． BALB3T3/H-ras 細胞に対する
生育阻害 96穴マイクロタイタープレートに 10 ％牛胎児血清およ
び 2 mM グルタミンを含む MEM培地（日本製薬社製；以
下、培地Ａと称す）で 1.5 X 10⁴個 /mlに調製した HeL
aS3 細胞（ATCC HTB22）を0.1 mlずつ該プレートの各穴
に分注した。該プレートを炭酸ガスインキュベータ内で
37 ℃、20時間培養後、これに培地Ａにより適宜希釈し
た試験化合物 0.1 ml ずつを加え、炭酸ガスインキュベ
ーター内で 37 ℃、1 時間培養した。培養上清を除去
後、残渣に培地Ａおよび 0.02 ％ニュートラルレッドか
らなる培地を 0.1 ml ずつ加え、37℃で 1時間炭酸ガス
インキュベータ内で培養し、細胞を染色した。培養上清
を除去後、残渣を生理食塩水で 1回洗浄した。ついで
0.001Ｎ塩酸 / 30 ％エタノールで色素を抽出後、マイ
クロプレートリーダーにより 550 nm の吸光度を測定し
た。無処理細胞と既知濃度の試験化合物で処理した細胞
の吸光度を比較することにより細胞の増殖を 50％阻害
する試験化合物濃度（IC₅₀）を算出した。

【００５２】その結果、GT32-BのIC₅₀は、0.8 μM であ
った。化合物（Ｉ）は、そのままあるいは各種の医薬組
成物として経口的または非経口的に投与することができ
る。このような医薬組成物の剤形としては、たとえば錠
剤、丸薬、散剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤、
点滴剤などがあげられる。

【００５３】上記剤形の製剤化には、通常知られている
方法が適用され、たとえば各種の賦形剤、潤滑剤、結合
剤、崩壊剤、懸濁化剤、等張化剤、乳化剤、吸収促進剤
などを含有していてもよい。医薬組成物に使用される担
体としては、たとえば水、注射用蒸留水、生理食塩水、
グルコース、フラクトース、白糖、マンニット、ラクト
ース、澱粉、コーン・スターチ、ポテト・スターチ、セ
ルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロ
ースカルシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、アル
ギン酸、タルク、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウ
ム、リン酸水素カルシウム、ステアリン酸マグネシウ
ム、尿素、シリコーン樹脂、ソルビタン脂肪酸エステ
ル、グリセリン脂肪酸エステルなどがあげられ、これら
は製剤の種類に応じて適宜選択される。

【００５４】化合物（Ｉ）の投与量は、目的とする治療
効果、投与方法、治療期間、患者の年齢、体重などによ
り決められるが、経口もしくは非経口（たとえば、注
射、点滴、座剤による直腸投与あるいは皮膚貼付など）
的投与方法により、通常成人１日当り0.01〜2 mg/kgで
ある。以下に実施例をあげて本発明の態様を説明する。

【００５５】

【実施例】

実施例１．化合物 GT32-B の製造法種菌として、ストレプトマイセス・スピーシーズ GT32
株（FERM BP-4808）を用いた。該菌株を 2 L容量の三角
フラスコ中のバクトトリプトン（Difco 社製）5g/L、酵
母エキス 5g/L 、肉エキス 3g/L 、可溶性澱粉 10g/L、
グルコース 10g/L、炭酸カルシウム 5g/L の組成からな
る種培地（殺菌前 pH 7.2）300ml に植菌し、30℃で 72
時間振盪（200 rpm）培養した。得られた種培養液を 3
0L容量のジャーファーメンター中の下記組成の発酵培地
15Lに 3％（容量）の割合で移し、28℃で通気攪拌（回
転数 300 rpm, 通気量 15 L/分）方式により培養を行っ
た。

【００５６】発酵培地組成：可溶性澱粉 40g/L、大豆粉
10g/L、乾燥酵母 50g/L、コーン・スチープ・リカー 5
g/L 、リン酸二水素カリウム 0.5g/L 、硫酸亜鉛 10mg/
L、塩化コバルト 10mg/L 、硫酸ニッケル 10mg/L 、リ
ン酸マグネシウム 0.5g/L(殺菌前 pH7.0、NaOHで調整）

【００５７】培養中、培地の pH は特に制御しないで、
106 時間培養した。培養液から菌体を分離し、菌体にイ
ソプロパノール 10Lを添加して攪拌した後、濾液 15Lを
得た。濾液を濃縮後、水で希釈し、ポリスチレン系吸着
ダイヤイオンHP20（三菱化成社製）カラム 2L に通塔し
て活性物質を吸着させた。脱イオン水および60％メタノ
ールで不純物を溶出し、メタノールで活性物質を溶出し
た。活性画分を濃縮し、シリカゲルカラム（Wakogel C-
200,和光純薬社製）を用い、クロロホルム：酢酸エチ
ル：メタノール（60:10:5 v/v）で展開した。溶出され
た活性画分を濃縮し、下記の高速液体クロマトグラフィ
ー(HPLC)分取条件により単離精製を行なって、白色粉末
の GT32-B を 10 mg得た。

【００５８】HPLC分取条件カラム：YMC-Pack SH363 (YMC社製) 溶出液：80% メタノール流速：10 ml/min 検出：254 nmまたは 293 nm の紫外吸収

【００５９】GT32-Bの理化学的性質は以下に示すとおり
である。 (1)性状：白色粉末 (2)分子量：407 (3)分子式：C₂₇H₃₇NO₂

【００６０】(4)質量分析 FABMSスペクトル：m/z amu positive mode （matrix :
NBA） 408（M+H)⁺ 高分解能FABMSスペクトル：m/z amu positive mode
（matrix : NBA）測定値 408.2878 （M+H)⁺ 計算値 408.2902 [C₂₇H₃₈NO₂として]

【００６１】(5)紫外部吸収スペクトル（メタノール溶
液）：λ_maxnm (ε) 280 (74,000), 289 (92,000), 310 sh (20,000), 325 s
h (15,000) (6)赤外吸収スペクトル（KBr 錠剤）：ν_max cm^-1 3365, 3273, 2954, 2924, 1647, 1608, 1539, 1011, 99
1, 966

【００６２】(7)¹H-NMRスペクトル（400 MHz, DMSO-
d₆）：δppm 7.23(1H), 6.63(1H), 6.19(1H), 6.13(1H), 6.12(1H),
6.06(1H), 5.97(1H),5.96(1H), 5.87(1H), 5.83(1H),
5.43(1H), 5.41(1H), 5.39(1H), 5.31(1H), 5.27(1H),
4.43(1H), 3.82(1H), 3.30(1H), 2.69(1H), 2.32(1H),
2.14(2H), 1.98(1H), 1.94(2H), 1.82(3H), 1.80(1H),
1.60(3H), 1.33(2H), 0.85(3H)

【００６３】(8)¹³C-NMRスペクトル（100 MHz, DMSO-
d₆）：δppm 166.6(s), 143.1(d), 139.7(d), 136.0(d), 134.8(s),
134.1(d), 132.9(s),132.3(d), 131.7(d), 130.6(d), 1
30.3(d), 130.0(d), 128.0(d), 127.1(d), 124.0(d), 1
23.9(d), 123.6(d), 66.7(d), 49.3(d), 39.6(t), 38.0
(t), 35.9(t),34.0(t), 22.0(t), 13.3(q), 11.9(q), 1
1.5(q)

【００６４】(9)溶解性：ジメチルスルホキシド(DMSO),
メタノールに可溶。ヘキサン、クロロホルムに不溶。 (10)呈色反応：ヨード試薬に陽性。

【００６５】実施例２．錠剤 GT32-A 100g 、ラクトース 40g、コーンスターチ 18gお
よびカルボキシメチルセルロースカルシウム 10gを混合
し、10% ヒドロキシプロピルセルロース溶液を加えて練
合する。この練合液を1.0 mmのバスケットを取り付けた
押しだし造粒機で造粒し、ステアリン酸マグネシウムを
加えて整粒して打錠用顆粒とし、常法により打錠を行っ
て、１製剤（170 mg) 中にGT32-Aを100 mg含む8 mm径の
錠剤を得る。

【００６６】実施例３．カプセル剤 GT32-A 50g、ラクトース 80gおよびポテトスターチ 38g
からなる混合物に、10%ヒドロキシプロピルセルロース
溶液を加えて練合し、以下実施例１と同様に造粒し、ス
テアリン酸マグネシウムを加えてカプセル充填機により
ハードカプセルに充填し、常法により１カプセル（170
mg) 中GT32-Aを 50mg 含むカプセル剤を得る。

【００６７】実施例４．ソフトカプセル剤 10g のGT32-Aを100gの大豆油に溶かし、得られる溶液を
常法によりカプセルに注入することにより、１カプセル
当り10mgのGT32-Aを含むソフトカプセル剤を得る。

【００６８】実施例５．錠剤 GT32-B 100g 、ラクトース 40g、コーンスターチ 18gお
よびカルボキシメチルセルロースカルシウム 10gを混合
し、10% ヒドロキシプロピルセルロース溶液を加えて練
合する。この練合液を1.0 mmのバスケットを取り付けた
押しだし造粒機で造粒し、ステアリン酸マグネシウムを
加えて整粒して打錠用顆粒とし、常法により打錠を行っ
て、１製剤（170 mg) 中にGT32-Bを100 mg含む8 mm径の
錠剤を得る。

【００６９】実施例６．カプセル剤 GT32-B 50g、ラクトース 80gおよびポテトスターチ 38g
からなる混合物に、10%ヒドロキシプロピルセルロース
溶液を加えて練合し、以下実施例１と同様に造粒し、ス
テアリン酸マグネシウムを加えてカプセル充填機により
ハードカプセルに充填し、常法により１カプセル（170
mg) 中GT32-Bを 50mg 含むカプセル剤を得る。

【００７０】実施例７．ソフトカプセル剤 10g のGT32-Bを100gの大豆油に溶かし、得られる溶液を
常法によりカプセルに注入することにより、１カプセル
当り10mgのGT32-Bを含むソフトカプセル剤を得る。

【００７１】

【発明の効果】本発明により優れた免疫抑制剤が提供さ
れる。さらに本発明により抗菌、抗腫瘍作用および免疫
抑制作用を有する化合物 GT32-B が提供される。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（Ｉ）【化１】（式中、Ｒは水素またはヒドロキシを表す）で表される
化合物を有効成分として含有する免疫抑制剤。
【請求項２】式（Ｉｂ）【化２】で表される化合物 GT32-B。