JPH0810321A - 細胞分取方法および細胞集団 - Google Patents
細胞分取方法および細胞集団Info
- Publication number
- JPH0810321A JPH0810321A JP6167565A JP16756594A JPH0810321A JP H0810321 A JPH0810321 A JP H0810321A JP 6167565 A JP6167565 A JP 6167565A JP 16756594 A JP16756594 A JP 16756594A JP H0810321 A JPH0810321 A JP H0810321A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell
- cells
- monocytes
- blood
- monocyte
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 医療現場において、簡便かつ安全に使用でき
る、血液などの単球を含有する細胞集団からの単球除去
方法とその結果得られる目的細胞含有率の高い細胞集団
を提供する。 【構成】 少なくとも単球及び目的細胞を含有する血液
または骨髄由来の細胞集団を、前記目的細胞を分取する
に先立ち、滅菌されたナイロンウール塊に接触させて予
め単球を除去する細胞分取方法。
る、血液などの単球を含有する細胞集団からの単球除去
方法とその結果得られる目的細胞含有率の高い細胞集団
を提供する。 【構成】 少なくとも単球及び目的細胞を含有する血液
または骨髄由来の細胞集団を、前記目的細胞を分取する
に先立ち、滅菌されたナイロンウール塊に接触させて予
め単球を除去する細胞分取方法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は血液など、単球を含有す
る細胞集団から種々の方法を用いて目的細胞を分離する
際に、分離操作の妨害となる単球を選択的に除去する方
法に関するものである。
る細胞集団から種々の方法を用いて目的細胞を分離する
際に、分離操作の妨害となる単球を選択的に除去する方
法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】近年、モノクローナル抗体を用いた細胞
分離技術が発達し、生化学、免疫学、細胞生物学、血液
学等の分野で広範に用いられており（たとえば、Ｍｏｒ
ｅｃｋｉ他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｍｏ
ｄ．Ｖｏｌ．９，Ｎｏ．５，１９９０）、多くのものは
臨床応用が行われている。細胞分離技術を用いた治療と
しては、１）患者血液等の細胞集団から体外循環で病因
細胞を除去、２）患者血液等の細胞集団を体外に取り出
し、必要細胞だけを分離採取し、活性化等種々の操作を
行い、患者に再輸注する、などが行われており、１）は
主に自己免疫疾患等の治療に、２）は養子免疫療法によ
る癌治療等に用いられている。２）の一形態として自家
骨髄移植における造血幹細胞および／または造血前駆細
胞の選択的採取がある。これは、大量抗癌剤および／ま
たは放射線療法の副作用である骨髄荒廃により致死的造
血障害を、冷凍保存していた本人の骨髄などから採取し
た造血細胞（骨髄など）を再輸注することで回避しよう
というもので、乳癌などにおいて有効性が確認されてい
る（たとえば、向山雄人、日常診療と血液、３巻、８
号、１９９３）。ところが、癌患者の骨髄には癌細胞が
浸潤しており、これが再輸注されることによる再発も問
題となっている。この再発を減少させるため造血幹細胞
および／または造血前駆細胞の抗原「ＣＤ３４」に対す
るモノクローナル抗体を用いた細胞分離器で、患者骨髄
などから造血回復に必要な造血幹細胞および／または造
血前駆細胞のみを選択採取して腫瘍細胞の含まれない骨
髄等を患者に戻すと、再発の低減が期待できることか
ら、近年、盛んに検討が行われている。また、他の２）
の形態として同種骨髄移植における造血幹細胞および／
または造血前駆細胞の選択的採取がある。これは、同種
移植の大きな問題点である移植片対宿主病（移植された
健康なドナーのリンパ球が患者を異物として認識し、攻
撃してしまうことにより消火器、皮膚、肝臓などが障害
される）を予防できることから、近年非常に注目されて
いる。これらの造血幹細胞および／または造血前駆細胞
の選択的採取に用いられる細胞分離器具としては、磁気
ビーズ、抗体結合フラスコ、アビジン−ビオチンカラム
等があるが（ＨｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃＳｔｅｍ Ｃ
ｅｌｌ，Ａｌｐｈａｍｅｄ Ｐｒｅｓｓ，１９９４）、
いずれもＣＤ３４抗原陽性細胞（造血幹細胞および／ま
たは造血前駆細胞、以下ＣＤ３４+細胞と呼ぶ）の回収
率および純度が満足いくものではなかった。この原因と
して、細胞集団中の単球の存在が指摘されており、さら
にはその解決方法も明示されている（Ｈｅｍａｔｏｐｏ
ｉｅｔｉｃ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ，ＡｌｐｈａｍｅｄＰ
ｒｅｓｓ，１９９４、１８６〜１８７ページ）。しかし
ながら、本法は単球の抗原「ＣＤ１４」に対するモノク
ローナル抗体と磁気ビーズ、さらにはウシ血清等の試薬
を用いなければならず、コスト高で、煩雑なものであっ
た。また、滅菌を行うことは不可能であった。
分離技術が発達し、生化学、免疫学、細胞生物学、血液
学等の分野で広範に用いられており（たとえば、Ｍｏｒ
ｅｃｋｉ他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｍｏ
ｄ．Ｖｏｌ．９，Ｎｏ．５，１９９０）、多くのものは
臨床応用が行われている。細胞分離技術を用いた治療と
しては、１）患者血液等の細胞集団から体外循環で病因
細胞を除去、２）患者血液等の細胞集団を体外に取り出
し、必要細胞だけを分離採取し、活性化等種々の操作を
行い、患者に再輸注する、などが行われており、１）は
主に自己免疫疾患等の治療に、２）は養子免疫療法によ
る癌治療等に用いられている。２）の一形態として自家
骨髄移植における造血幹細胞および／または造血前駆細
胞の選択的採取がある。これは、大量抗癌剤および／ま
たは放射線療法の副作用である骨髄荒廃により致死的造
血障害を、冷凍保存していた本人の骨髄などから採取し
た造血細胞（骨髄など）を再輸注することで回避しよう
というもので、乳癌などにおいて有効性が確認されてい
る（たとえば、向山雄人、日常診療と血液、３巻、８
号、１９９３）。ところが、癌患者の骨髄には癌細胞が
浸潤しており、これが再輸注されることによる再発も問
題となっている。この再発を減少させるため造血幹細胞
および／または造血前駆細胞の抗原「ＣＤ３４」に対す
るモノクローナル抗体を用いた細胞分離器で、患者骨髄
などから造血回復に必要な造血幹細胞および／または造
血前駆細胞のみを選択採取して腫瘍細胞の含まれない骨
髄等を患者に戻すと、再発の低減が期待できることか
ら、近年、盛んに検討が行われている。また、他の２）
の形態として同種骨髄移植における造血幹細胞および／
または造血前駆細胞の選択的採取がある。これは、同種
移植の大きな問題点である移植片対宿主病（移植された
健康なドナーのリンパ球が患者を異物として認識し、攻
撃してしまうことにより消火器、皮膚、肝臓などが障害
される）を予防できることから、近年非常に注目されて
いる。これらの造血幹細胞および／または造血前駆細胞
の選択的採取に用いられる細胞分離器具としては、磁気
ビーズ、抗体結合フラスコ、アビジン−ビオチンカラム
等があるが（ＨｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃＳｔｅｍ Ｃ
ｅｌｌ，Ａｌｐｈａｍｅｄ Ｐｒｅｓｓ，１９９４）、
いずれもＣＤ３４抗原陽性細胞（造血幹細胞および／ま
たは造血前駆細胞、以下ＣＤ３４+細胞と呼ぶ）の回収
率および純度が満足いくものではなかった。この原因と
して、細胞集団中の単球の存在が指摘されており、さら
にはその解決方法も明示されている（Ｈｅｍａｔｏｐｏ
ｉｅｔｉｃ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ，ＡｌｐｈａｍｅｄＰ
ｒｅｓｓ，１９９４、１８６〜１８７ページ）。しかし
ながら、本法は単球の抗原「ＣＤ１４」に対するモノク
ローナル抗体と磁気ビーズ、さらにはウシ血清等の試薬
を用いなければならず、コスト高で、煩雑なものであっ
た。また、滅菌を行うことは不可能であった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】以上述べてきたよう
に、モノクローナル抗体を用いた単球除去法はコスト
高、煩雑であり、少量試料の処理ですむ基礎的研究にお
いてはやむなく用いられることもあるだろうが、大量の
細胞数を処理する医療現場における臨床用途としては甚
だ不適であった。また、滅菌が不可能という臨床用途と
して安全面で致命的な欠陥をもっていた。そこで、本発
明の目的は医療現場において簡便かつ安全に使用できる
単球除去法を提供することにある。
に、モノクローナル抗体を用いた単球除去法はコスト
高、煩雑であり、少量試料の処理ですむ基礎的研究にお
いてはやむなく用いられることもあるだろうが、大量の
細胞数を処理する医療現場における臨床用途としては甚
だ不適であった。また、滅菌が不可能という臨床用途と
して安全面で致命的な欠陥をもっていた。そこで、本発
明の目的は医療現場において簡便かつ安全に使用できる
単球除去法を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは鋭意研究を
重ねた結果、ナイロンウールを容器に充填し、滅菌後、
単球を含む細胞液と接触させたところ、後の分取工程の
目的細胞である造血幹細胞および／または造血前駆細胞
に対してよりも単球に対してナイロンウールが強い相互
作用をもち、結果として単球が選択的に除去された細胞
集団が得られることを見いだした。そして得られた細胞
集団をさらなる分取工程に供し、目的細胞である造血幹
細胞および／または造血前駆細胞の分取を行ったとこ
ろ、ナイロンウールを使用しなかったものと比べたとこ
ろ、分取成績が格段に向上していることを見いだした。
更に、あらかじめガンマグロブリン溶液を該器具内に導
入してから細胞集団を導入することにより、単球のさら
なる除去率向上、目的細胞の回収率向上の結果、分取成
績のさらなる向上が達成されることも見いだし、本発明
の完成に至った。
重ねた結果、ナイロンウールを容器に充填し、滅菌後、
単球を含む細胞液と接触させたところ、後の分取工程の
目的細胞である造血幹細胞および／または造血前駆細胞
に対してよりも単球に対してナイロンウールが強い相互
作用をもち、結果として単球が選択的に除去された細胞
集団が得られることを見いだした。そして得られた細胞
集団をさらなる分取工程に供し、目的細胞である造血幹
細胞および／または造血前駆細胞の分取を行ったとこ
ろ、ナイロンウールを使用しなかったものと比べたとこ
ろ、分取成績が格段に向上していることを見いだした。
更に、あらかじめガンマグロブリン溶液を該器具内に導
入してから細胞集団を導入することにより、単球のさら
なる除去率向上、目的細胞の回収率向上の結果、分取成
績のさらなる向上が達成されることも見いだし、本発明
の完成に至った。
【０００５】本発明による細胞分取方法は、少なくとも
単球及び目的細胞を含有する血液または骨髄由来の細胞
集団から、前記細胞集団を滅菌されたナイロンウール塊
に接触させて予め単球を除去させてから、さらなる細胞
分離に共することを特徴とする。また、本発明による細
胞集団は、少なくとも単球及び目的細胞を含有する血液
または骨髄由来の細胞集団から、前記細胞集団を滅菌さ
れたナイロンウール塊に接触させて単球が除去されてい
ることを特徴とする。
単球及び目的細胞を含有する血液または骨髄由来の細胞
集団から、前記細胞集団を滅菌されたナイロンウール塊
に接触させて予め単球を除去させてから、さらなる細胞
分離に共することを特徴とする。また、本発明による細
胞集団は、少なくとも単球及び目的細胞を含有する血液
または骨髄由来の細胞集団から、前記細胞集団を滅菌さ
れたナイロンウール塊に接触させて単球が除去されてい
ることを特徴とする。
【０００６】本発明に用いるナイロンウールは特に限定
されないが、生化学用としてＴリンパ球／Ｂリンパ球分
離用として市販されているものが好適に用いられる。容
器としては特に限定されないが、市販の医療用ディスポ
ーザブルシリンジや市販の血液バッグが好適に用いられ
る。滅菌法としては高圧蒸気滅菌、ガンマ線滅菌法等が
あるが特に限定されるものではない。また、本発明にお
ける、少なくとも単球及び目的細胞を含有する血液由来
の細胞集団としては、末梢血（全血）、末梢血（全血）
を遠心分離器で分離した末梢血単核球画分、また近年注
目を集めている臍帯血などがあげられる。また骨髄由来
としては未処理骨髄あるいは骨髄を遠心分離器で分離し
た骨髄単核球画分などがあげられる。
されないが、生化学用としてＴリンパ球／Ｂリンパ球分
離用として市販されているものが好適に用いられる。容
器としては特に限定されないが、市販の医療用ディスポ
ーザブルシリンジや市販の血液バッグが好適に用いられ
る。滅菌法としては高圧蒸気滅菌、ガンマ線滅菌法等が
あるが特に限定されるものではない。また、本発明にお
ける、少なくとも単球及び目的細胞を含有する血液由来
の細胞集団としては、末梢血（全血）、末梢血（全血）
を遠心分離器で分離した末梢血単核球画分、また近年注
目を集めている臍帯血などがあげられる。また骨髄由来
としては未処理骨髄あるいは骨髄を遠心分離器で分離し
た骨髄単核球画分などがあげられる。
【０００７】本器具を用いた単球除去後に行う、さらな
る目的細胞分取方法としては、造血幹細胞および／また
は造血前駆細胞の抗原に対するモノクローナル抗体を用
いる方法が好適に用いられ、中でも磁気ビーズを用いる
方法、抗体結合フラスコを用いる方法、アビジン−ビオ
チンカラムによる方法が特に好ましい。
る目的細胞分取方法としては、造血幹細胞および／また
は造血前駆細胞の抗原に対するモノクローナル抗体を用
いる方法が好適に用いられ、中でも磁気ビーズを用いる
方法、抗体結合フラスコを用いる方法、アビジン−ビオ
チンカラムによる方法が特に好ましい。
【０００８】本発明における実質的に単球を含まない細
胞集団とは単球が処理前と比較して８０％以上除去され
ている状態のことであり、さらに望ましくは９０％以上
除去されている状態を言う。分取した造血幹細胞および
／または造血前駆細胞はこのまま、あるいは培養により
細胞数を増幅させてから自家造血幹細胞移植または同種
造血幹細胞移植に、更に、遺伝子導入して遺伝子治療に
用いられる。
胞集団とは単球が処理前と比較して８０％以上除去され
ている状態のことであり、さらに望ましくは９０％以上
除去されている状態を言う。分取した造血幹細胞および
／または造血前駆細胞はこのまま、あるいは培養により
細胞数を増幅させてから自家造血幹細胞移植または同種
造血幹細胞移植に、更に、遺伝子導入して遺伝子治療に
用いられる。
【０００９】本発明に用いるガンマグロブリンは、本発
明で分離した細胞集団を治療用途に用いる場合には、ウ
イルスの混入の無い、医薬品グレードのものを使用しな
ければならない。ガンマグロブリン処理により単球のナ
イロンウールへの吸着率が上昇し、目的細胞の回収率が
上昇する理由は明かではないが、目的細胞表面上に存在
するナイロンウールへの吸着部位をブロックするためと
考えられる。以下に実施例により本発明を詳細に説明す
るが、本発明はこれらにより限定されるものではない。
明で分離した細胞集団を治療用途に用いる場合には、ウ
イルスの混入の無い、医薬品グレードのものを使用しな
ければならない。ガンマグロブリン処理により単球のナ
イロンウールへの吸着率が上昇し、目的細胞の回収率が
上昇する理由は明かではないが、目的細胞表面上に存在
するナイロンウールへの吸着部位をブロックするためと
考えられる。以下に実施例により本発明を詳細に説明す
るが、本発明はこれらにより限定されるものではない。
【００１０】
【実施例１】 ナイロンウールカラムの作製 和光純薬製ナイロンウール１ｇを高圧蒸気滅菌を行った
後、無菌下で滅菌済みディスポーザブルシリンジ（２５
ｍｌ）に均一に詰め、ナイロンウールカラムとした。 実験用検体 自家末梢血幹細胞移植を目的とした担癌患者（悪性リン
パ種、卵巣癌）からＣＯＢＥ社製成分採血器ＣＯＢＥ−
Ｓｐｅｃｔｒａを用い常法により採取した後、公知のＦ
ｉｃｏｌｌ−Ｃｏｎｒａｙ比重遠心法にて単核球分画に
分離後、１％ヒトアルブミン添加ＲＰＭＩ−１６４０培
地（以下ＨＳＡ／ＲＰＭＩ）にて３回洗浄し、実験用検
体とした。なお、本検体の総細胞数、ＣＤ３４+ 細胞含
有率、単球含有率は以下のとおりであった。 単球除去操作 あらかじめガンマグロブリンをシリンジに充填し、ＨＳ
Ａ／ＲＰＭＩで軽くリンスした後、で調製した実験用
検体をナイロンウールカラムに加え、３７℃で３０分間
インキュベーションを行った。その後ＨＳＡ／ＲＰＭＩ
にて非付着細胞を流出させた。この操作によって総細胞
数、ＣＤ３４+ 細胞含有率、単球含有率は以下のとおり
となった。 ＣＤ３４+ 細胞分取 で得られた細胞を抗ＣＤ３４モノクローナル抗体と反
応後、抗マウスＩｇＧｌ感作磁気ビーズを利用したバク
スター社製Ｉｓｏｌｅｘ５０により、ＣＤ３４陽性細胞
を分取した。分取結果は以下のとおりでＣＤ３４陽性細
胞が高純度かつ高収率で回収できた。
後、無菌下で滅菌済みディスポーザブルシリンジ（２５
ｍｌ）に均一に詰め、ナイロンウールカラムとした。 実験用検体 自家末梢血幹細胞移植を目的とした担癌患者（悪性リン
パ種、卵巣癌）からＣＯＢＥ社製成分採血器ＣＯＢＥ−
Ｓｐｅｃｔｒａを用い常法により採取した後、公知のＦ
ｉｃｏｌｌ−Ｃｏｎｒａｙ比重遠心法にて単核球分画に
分離後、１％ヒトアルブミン添加ＲＰＭＩ−１６４０培
地（以下ＨＳＡ／ＲＰＭＩ）にて３回洗浄し、実験用検
体とした。なお、本検体の総細胞数、ＣＤ３４+ 細胞含
有率、単球含有率は以下のとおりであった。 単球除去操作 あらかじめガンマグロブリンをシリンジに充填し、ＨＳ
Ａ／ＲＰＭＩで軽くリンスした後、で調製した実験用
検体をナイロンウールカラムに加え、３７℃で３０分間
インキュベーションを行った。その後ＨＳＡ／ＲＰＭＩ
にて非付着細胞を流出させた。この操作によって総細胞
数、ＣＤ３４+ 細胞含有率、単球含有率は以下のとおり
となった。 ＣＤ３４+ 細胞分取 で得られた細胞を抗ＣＤ３４モノクローナル抗体と反
応後、抗マウスＩｇＧｌ感作磁気ビーズを利用したバク
スター社製Ｉｓｏｌｅｘ５０により、ＣＤ３４陽性細胞
を分取した。分取結果は以下のとおりでＣＤ３４陽性細
胞が高純度かつ高収率で回収できた。
【００１１】
【実施例２】 ナイロンウールバッグの作製 川澄化学製６００ｍｌ血液バッグの底部から約２ｃｍを
水平に切断し、和光純薬製ナイロンウール１０ｇを均一
に詰め、切断部を熱融着により密閉後、高圧蒸気滅菌を
行った。 実験用検体 自家末梢血幹細胞移植を目的とした担癌患者からＣＯＢ
Ｅ社製成分採血器ＣＯＢＥ−Ｓｐｅｃｔｒａを用い常法
により採取した後、ＣＯＢＥ社製血球洗浄器ＣＯＢＥ−
２９９１を用いて比重遠心法にて単核球分画に分離後、
０．５％ヒトアルブミン添加ＲＰＭＩ−１６４０培地
（以下ＨＳＡ／ＲＰＭＩ）にて３回洗浄し、実験用検体
とした。なお、本検体の総細胞数、ＣＤ３４+ 細胞含有
率、単球含有率は以下のとおりであった。 単球除去操作 あらかじめガンマグロブリンをシリンジに充填し、ＨＳ
Ａ／ＲＰＭＩで軽くリンスした後、で調製した実験用
検体をナイロンウールバッグに注入、３７℃で３０分間
インキュベーションを行った。その後ＨＳＡ／ＲＰＭＩ
にて非付着細胞を流出させた。この操作で総細胞数、Ｃ
Ｄ３４+ 細胞含有率、単球含有率は以下のとおりとなっ
た。 得られた細胞をさらに新しいナイロンウールバッグで同
様な操作を繰り返したところ、総細胞数、ＣＤ３４+ 細
胞含有率、単球除去率は以下のとおりとなった。 総細胞数（×１０9 ） ＣＤ３４+ 細胞含有率 単球含有率 ３．０ ２０．２％ ４．２％ ＣＤ３４+ 細胞分取 で得られた細胞を実施例１のと同様な方法でＣＤ３
４+ 細胞分取を行ったところ、得られた分取結果は以下
のとおりで、ＣＤ３４+ 細胞が高純度かつ高収率で回収
できた。
水平に切断し、和光純薬製ナイロンウール１０ｇを均一
に詰め、切断部を熱融着により密閉後、高圧蒸気滅菌を
行った。 実験用検体 自家末梢血幹細胞移植を目的とした担癌患者からＣＯＢ
Ｅ社製成分採血器ＣＯＢＥ−Ｓｐｅｃｔｒａを用い常法
により採取した後、ＣＯＢＥ社製血球洗浄器ＣＯＢＥ−
２９９１を用いて比重遠心法にて単核球分画に分離後、
０．５％ヒトアルブミン添加ＲＰＭＩ−１６４０培地
（以下ＨＳＡ／ＲＰＭＩ）にて３回洗浄し、実験用検体
とした。なお、本検体の総細胞数、ＣＤ３４+ 細胞含有
率、単球含有率は以下のとおりであった。 単球除去操作 あらかじめガンマグロブリンをシリンジに充填し、ＨＳ
Ａ／ＲＰＭＩで軽くリンスした後、で調製した実験用
検体をナイロンウールバッグに注入、３７℃で３０分間
インキュベーションを行った。その後ＨＳＡ／ＲＰＭＩ
にて非付着細胞を流出させた。この操作で総細胞数、Ｃ
Ｄ３４+ 細胞含有率、単球含有率は以下のとおりとなっ
た。 得られた細胞をさらに新しいナイロンウールバッグで同
様な操作を繰り返したところ、総細胞数、ＣＤ３４+ 細
胞含有率、単球除去率は以下のとおりとなった。 総細胞数（×１０9 ） ＣＤ３４+ 細胞含有率 単球含有率 ３．０ ２０．２％ ４．２％ ＣＤ３４+ 細胞分取 で得られた細胞を実施例１のと同様な方法でＣＤ３
４+ 細胞分取を行ったところ、得られた分取結果は以下
のとおりで、ＣＤ３４+ 細胞が高純度かつ高収率で回収
できた。
【００１２】
【比較例】単球除去器具で検体を処理する以外は実施例
１と同様な操作を行ったところ、分取成績は以下のとお
りで、ＣＤ３４+ 細胞の純度、回収率とも低く、またバ
ラツキが大きかった。
１と同様な操作を行ったところ、分取成績は以下のとお
りで、ＣＤ３４+ 細胞の純度、回収率とも低く、またバ
ラツキが大きかった。
【００１３】
【発明の効果】以上示したように、本発明による細胞分
取方法は、必要な細胞を喪失することなく、簡便に単球
を除去でき、その結果、必要な細胞が濃縮された細胞集
団が得られるので、さらなる分取工程により、目的とす
る必要細胞が高純度かつ高収率で得られる。更に本発明
による細胞分取方法は滅菌された構成要素を用いるの
で、本発明により得られた細胞集団は、医療現場におい
て、造血幹細胞移植等に安全に用いることができる。
取方法は、必要な細胞を喪失することなく、簡便に単球
を除去でき、その結果、必要な細胞が濃縮された細胞集
団が得られるので、さらなる分取工程により、目的とす
る必要細胞が高純度かつ高収率で得られる。更に本発明
による細胞分取方法は滅菌された構成要素を用いるの
で、本発明により得られた細胞集団は、医療現場におい
て、造血幹細胞移植等に安全に用いることができる。
Claims (4)
- 【請求項１】 少なくとも単球及び目的細胞を含有する
血液または骨髄由来の細胞集団から、前記目的細胞を分
取するに先立ち、前記細胞集団を滅菌されたナイロンウ
ール塊に接触させて予め単球を除去することを特徴とす
る細胞分取方法。 - 【請求項２】 前記ナイロンウールがガンマブリンで表
面処理されている請求項１記載の細胞分取方法。 - 【請求項３】 少なくとも単球及び目的細胞を含有する
血液または骨髄由来の細胞集団から、滅菌されたナイロ
ンウール塊を用いて単球が除去されていることを特徴と
する実質的に単球を含まない細胞集団。 - 【請求項４】 目的細胞がＣＤ３４抗原陽性細胞であ
り、ナイロンウール塊がシリンジまたは輸血用バッグに
充填されていることを特徴とする請求項２の細胞分取方
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6167565A JPH0810321A (ja) | 1994-06-28 | 1994-06-28 | 細胞分取方法および細胞集団 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6167565A JPH0810321A (ja) | 1994-06-28 | 1994-06-28 | 細胞分取方法および細胞集団 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0810321A true JPH0810321A (ja) | 1996-01-16 |
Family
ID=15852095
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6167565A Pending JPH0810321A (ja) | 1994-06-28 | 1994-06-28 | 細胞分取方法および細胞集団 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0810321A (ja) |
-
1994
- 1994-06-28 JP JP6167565A patent/JPH0810321A/ja active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5663051A (en) | Separation apparatus and method | |
| US5474687A (en) | Methods for enriching CD34+ human hematopoietic progenitor cells | |
| US5081030A (en) | Release of cells from affinity matrices | |
| JP3537443B2 (ja) | マクロファージを調製する方法、ならびにそのためのキットおよび組成物 | |
| US20050250204A1 (en) | Methods and apparatus for separation of particles | |
| EP0807168A1 (en) | Enrichment of hematopoietic stem cells from blood or bone marrow | |
| US20220412973A1 (en) | Methods of analysis of blood from deceased donors | |
| EP0653062A1 (en) | Continuous centrifugation process for the separation of biologic components from heterogeneous cell populations | |
| CN113164517A (zh) | 源自死亡供体的用于促进移植物耐受性的细胞组合物及其制造和用途 | |
| Yannelli et al. | Enhancement of human lymphokine-activated killer cell cytolysis and a method for increasing lymphokine-activated killer cell yields to cancer patients | |
| US20150320918A1 (en) | Point of care isolation and concentration of blood cells | |
| US10406181B2 (en) | Method for reducing the inflammatory activity of a stem cell transplant and use thereof | |
| JPH0810321A (ja) | 細胞分取方法および細胞集団 | |
| Beaujean | Methods of CD34+ cell separation: comparative analysis | |
| JP4110285B2 (ja) | 血清の製造方法 | |
| WO2018039810A1 (en) | Provision of a therapeutically active cell product | |
| US11813376B2 (en) | Cellular compositions derived from deceased donors to promote graft tolerance and manufacture and uses thereof | |
| WO2003004616A2 (en) | Dendritic cell isolation methods | |
| US20200087627A1 (en) | Methods of extracting hematopoietic cells from bone marrow ex vivo | |
| JPH09322758A (ja) | 体外増幅に適した細胞分離システムおよび分離方法 | |
| CN110628715B (zh) | 体外扩增自然杀手细胞及自然杀手t细胞的方法及其医药组成物 | |
| CN1213143C (zh) | 同源异型的造血系统重构细胞的制药应用 | |
| Kawano et al. | Clinically applicable bulk isolation of blood CD34+ cells for autografting in children | |
| CN117660330A (zh) | 密度梯度离心分离细胞的方法及car-t细胞的制备方法 | |
| CN117660329A (zh) | 快速制备基因修饰免疫细胞的方法 |