JPH07506574A - 基準殺菌終点（ｒｂｅ）リモネンおよびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

基準殺菌終点（ＲＢＥ）リモネン およびその製造法 技術分野 本発明は貯蔵時にも持続する強力で速やかに作用する抗微生物活性を有する酸化 リモネン、およびその生成物の経済的な製造法に関する。 ハンドクリーナーとして新鮮なリモネンの研究中に、本出願人らは、新鮮なリモ ネンは優れた溶媒であるが、殺菌性でないことを発見した。逆に、自動酸化（ａ ｕｔｏ−ｏｘｉｄａｔｌｏｎ　）をうけたリモネンは、バッチ毎に効力は異なる が、わずかな−貫しない抗菌活性を有することを意外にも発見した。したがって 、リモネンの抗微生物性質を高めて安定化させるために、意図的にリモネンを酸 化することとした。 本出願人らは、油状物を意図的に酸化する（またはリモネンに酸素付加する）た めにリモネン中に空気（または酸素）を吹込むことにより、それが徐々に低い濃 度で殺菌性になり、更に酸化するとその殺菌活性を減少させてしまう点に達する ことを発見した。リモネンの意図的な酸化が進行すると、リモネンの物理的性質 は、その抗微生物１１り性の増加につれて変化することが注目された。 リモネンはａ図的に酸化されると、細菌、酵母および真菌を殺す土てａ効である ことが４つかり、意図的に酸化されたリモネンが暗所中２〜４℃で１年を超える 期間にわたり貯蔵されたときに、その杭機１１物活性は未変化のままで１ｊ１続 した。 安定な抗微生物メ、−汁のあるリモネンが１１産されうることはｒ以外てあり、 従来技術では認識も把握もされていない。１幕人、従来技術では、テルペン類へ の空気（マタは酸素）の（・付加により、抗菌効果はあるが急速殺菌性ではない 酸化物および過酸化物の揮発性混合物が生じることが認識されていた。人きｔλ 表曲積の油状物全体で自動酸化がおきてａ効な抗微生物性になる前に、それは蒸 発して４１”ｊ’：な使用しえないゲルになってしまう。他方、意図的に酸化さ れたリモネンは、殺菌および殺真菌濃度で殺菌および投真閑性である優れた安定 な殺菌剤および殺↓゛↓菌剤になり、その語注は短期間隔適用てあっても証明で きる。 このため、本発明の目的は：　（１）強力て速やかに作物活性を留め、そ

【２て （３）自動酸化リモネンの抗微生物〆１η性よりもその抗微生物活性が優れてい る、酸化リモネンを紅済的に生Ｎ？−することである。 リモネンは下記式のテルペンである： リモネンはテルペン系芳香のある油状物である。それはアルコールに可溶性で、 浦に混和性であるが、それはグリセリンに不溶性である。リモネンは通常マツま たはントラス源いずれかに由来する。１−異性体はマツに由来し、特徴的なマツ 芳香を有し、一方ｄ−異性体はシトラスに由来し、特徴的なントラス芳香を有す る。ｌ−異性体は合成もてきるが、合成ｌ−リモネンは特徴的な芳香を何しない 。 市販リモネンは通’；’；ｌ、ントラスフルーツの果皮がら得られる。圧搾液は あらゆるシトラスフルーツの果皮、ａも一般的にはオレンジおよびグレープフル ーツから得られ、その後それは大気圧条ｒ’ｌ’　ト’　２４　（］丁でフラッ シュ蒸発に付される。リモネンはフラッシュ蒸気の１縮から集められる。リモネ ンは風味剤として商業上用いられ、スペアミントフレーバーをａするカルボンを 生産する上で多量に用いられ、溶媒として用いられ、石鹸またはδ１川のベース として使用でき、ゴムの製造に用いられ、浸透油として白°用である。 リモネンは、空気または酸素にさらされたときに、自動酸化をうける。室温で空 気に１〜２週間さらした後、リモネ／はむかつく臭いのある腐臭になる。温度は 自動酸化か起こる上で約４０丁以上でなければならず、一方９０゛Ｅ以上の温度 だと蒸発速度を増してしまう。自動酸化はリモネンをむかつく臭いのある腐臭に させることてその商業的価値を限定させてしまうため、リモネンはテルペン類用 に特に処方されたフェノール系樹脂ベースエナメルで内部を塗装した５５ガロン ドラムに通常貯蔵される。トラムは自動酸化を起こす空気（および酸素）への！ ！露を制限するために、完全に充填して蓋が付される。 自動酸化されたリモネンは自動酸化中に抗菌活性を発現するが、速やかに作用す る殺菌剤にはならない。自動酸化では、この特λ′［明細書に記載された強力な 急速殺菌性リモネンを生しない。 （２）従来技術の説明 リモネンの酸化は、いくつかの異なるり］究者により列挙されたいくつかの化合 物を生しる。例えば、＋３ａｉｎ　（米国特シ′「第２．）（６’う、８８２号 および第３．　（１１４，０４７号）はテルペン系酸化生成物を生産およびｌ１ ｉｌ収するノｊ法を示し、波はリモネンの酸化生成物をリモネン−１゜２−オキ シド、リモネン−８，９・オキシド、１−メンテン−９−オール、−２，８−ｐ −メンタジェン−１−オール、−２，８−ｐ−メンタジェン−１−オール、ジヒ ドロカルボン、−シメノール、カルボン、シス−カルベオールおよびトランス− カルベオールとして示した。 波は酸化リモネンの抗微生物活性についてｔＩｒ究しなかったたけてなく、それ が強力な抗微生物活性を有して安定になるｌｌ！点までリモネンを酸化させなか った。事実、リモネンはその酸化中化学的に不安定であるため、Ｂａ１ｎはリモ ネンから最大数の酸化生成物を得るためには、過酸化物値が１０００〜２０００ になるまでリモネンにアルカリを加えて、リモネンへの空気または酸素の付加を やめるべきたと考えた。彼は過酸化物値がリモネン酸化生成物（酸化物および過 酸化物）の形成の唯一の指標であり、リモネンの酸化が止まって、過酸化物値が その最大に達したときのみ、これらの生成物が１！ｌられると考えた。 彼は、リモネンを酸化し続けることによって、最大過酸化物形成がおきる前に、 リモネンの酸化で達しつる最大殺＋ＪＨ＾性が得られるとは認識していなかった 。 Ｂｌｕｓａｎｎ　はＣｈｅｍｉｃａｌ　ＡｈｓＬｒａｃＬｓ、Ｖｏｌｕｓｃ　ｆ １３．１９６５．ｐａｇｅ１８１９でリモネンの自動酸化により形成された化合 物を掲載し、少量のシスおよびトランス−カルベオール、トランス−菖】−メン テ−８−エン−１，２−ジオール、リモネン−１，２−エポキシド、リモネン− ８，９−エポキシド、シスおよびトランス−ｐ−メンタ−２，８−ジエン−１− オールおよびペリリルアルコールを発見したが、彼は意図的にリモネンを酸化し ようとはせず、しかも安定な急速殺菌活性のあるリモネンを開発しようともしな かった。 １１ａｒｄｙｓｈｃｖは光開始で自動酸化されたｌ−リモネンで化合物を研究し 、Ｃｈｃｓｉｃａｌ＾ｌ＋５ＬｒａｃＬｓ、Ｖｏｌｕｍｅ　８Ｇ、Ｉ９７Ｌｐａ ｇｅ　３５９て示されたように、少量の下記化合物二カルボン、カルベオール、 トランス−ｐ−メンタ−８−エン−１，２−ジオ−ルミヒドロペルオキシド、ｐ −メンタン、ｐ、シメン、テルビルン、ｐ−メンタ−２，４（８）−ジエン、シ クロヘキセン、クミンアルデヒド、ジヒドロカルボン、ピペリトン、ｐ−メンタ −２，８−ジエン−１−オール、ブレボン、カルボメントン、ＰｈＣＯＭｅ、４ −ＭｅＣ６Ｈ４ＣＯＭｅ、シクロヘキサノン、ぺ’Ｊリルフル：Ｊ−ルおよびｐ −ＣＨ：ＣＭｅＣ６Ｈ４Ｃリモネンを意図的には酸化せず、更には新鮭なものだ けでなく、自動酸化されたリモネンの抗微生物活性についてもｔｌｔ究しなかっ た。 Ｚｕｃｋｃｒ−ａｎは細菌に対するｄ−リモネンの効果を研究し、新鮭なリモネ ンは細菌に効果をＨしないことを発見した。彼は、リモネンが自動酸化されたと きに、それが最小の一貫しない弱い阻害（殺菌性ではない）性質を示すことを発 見した。彼は、“対数期の細菌増殖でいかなる影響もなく対数期の細菌増殖の時 間をシフトさせる”たけであるという点で、せいぜい自動酸化されたリモネンは 弱い阻害性を有するにすぎないと記した。彼はＮａｔｕｒｅ、１６８：　５１７ （＋９５１）で示したように、自動酸化されたリモネンが不安定で、その静菌効 果を持続しえないと記した。彼は、リモネンを酸化する方法に関してＩＩ　ａ　 Ｉ　ｎにより提唱されたようなアルカリの添加が自動酸化されたリモネンの静菌 性質を壊すことも認めた。彼は、貯蔵時にその抗微生物活性を留める強力で安定 な抗微生物剤になる時点まで、リモネンを意図的に酸化しうろことを認識してい なかった。即ち、彼は安定な急速殺菌活性のある酸化リモネンを得ることができ なかった。 米国特許第３．５９５．９７５号明細書において、Ｇａｕｖｒｃａｕは防腐剤を 形成するためにセチルピリジニウムをテルペン類と組み合わせることで消毒組成 物を生産する手段を示したが、彼は意図的に酸化されたリモネンが強力で安定な 殺菌剤および殺真菌剤になることを知らなかった。彼の消毒組成物中における活 性成分はセチルピリジニウムクロリド（テルペン類ではない）であった。 発明の開示 本発明は、強力で安定な抗微生物１．ζ性をｆｉシて、それが貯蔵時にも留めら れる酸化リモネンを１１産する経済的で安全な方法に関する。その抗微生物活性 は自動酸化リモネンの抗微生物活性よりも優れ、しかもそれとは異なる。一つの 好ましい用途において、本発明による酸化リモネンは殺微生物剤である。本明細 書において中独でまたは殺微生物剤および抗微生物剤のような誘導剤において用 いられる“微生物°という用語は、微細な１物、例えは細菌、真菌、酵ｌす、胚 芽、ウィルスおよびリケッチアを意味する。 リモネンの意図的な酸化中に、酸化されたリモネンは酸化が進行するにつれて殺 菌性になることがわかった。 酸化リモネンの殺Ｉ＃活性が：　（ａ）リモネンの自動酸化で得られる場合より も大きくなり、しかも（ｂ）６０分間インキュベートされたときに５Ｌａｐｈｙ ｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ＾ＴＣＣ２５９２３に対して０．０６以下の濃 度で証明できた場合に、その酸化リモネンは基県殺菌終点リモネン（即ちＲＢＥ リモネン：　ｒａｒｃｒｅｎｃｅ　ｂａｃＬｅｒｉｃｉｄａｌ　ｃｎｄｐｏｉｎ ｔ　Ｉｆｓｏｎｅｎｅ）と定義された。ＲＢＥリモネンは強力で安定な急速殺菌 化合物である。 ６０分間インキュベー１・されたときに５Ｌａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｃ ｕｓ　ＡＴＣＣ２５９２３に対して０．０６以下の濃度で殺菌性である酸化リモ ネンの生産は、室温で３〜８週間にわたりリモネンに連続的に空気を吹込む（方 法１）または酸素を吹込む（方ＩＬ２　）ことにより１１える。本出願人らはリ モネンに空気を吹込む方を好むが、その理由は酸素は使用」二高皓であり、そし て酸素は爆発する可能性が大きく、取扱いがかなり危険だからである。リモネン が酸化されて、強力で安定な殺菌剤になった後、それが空気によるかまたは酸素 の付加により生産されているかにかかわらず、それは貯蔵時にその抗微生物７１ −性を留め、（自動酸化リモネンの腐臭とは反対に）その快い芳香を維ｔ！ｊ　 Ｌ、物理的特性を変化させ、粘度増加および比重増加を起こす。意図的に酸化さ れたリモネン標品の大部分は強力な急速殺菌活性を生じるが、時にはリモネン標 品は酸化の長さまたは方法にかかわらず酸化で殺菌性にならない。このため、（ ＲＢＥリモネンを生産するために）意図的に酸化されたリモネンの全バッチにつ いて個々に殺菌活性に関して試験しなければならない。即ち、強力で安定な殺菌 活性のある酸化リモネンを生産する本出願人らの好ましい方法は、リモネン中に 空気を吹込むことであるが、その理由はリモネン中に空気を吹込むことが酸素を 用いる場合よりも安価であり、酸素よりも使用上危険性が少ないからである。 酸化されたリモネンはやや粘稠性であり、ガラス、金属、木、４１１　ローブ、 ブックカバー、セメント、キャンパス、セラミックタイル、植物表面、皮膚、粘 膜および歯に容品に付性して、油膜を残す。実際上、細菌または真菌を役すかま たはその増殖を防ぐことが望まれる表面はいずれも、６０分間インキュベートさ れたときに５Ｌａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｃｕｓ＾１’ＣＣ２５９２３ にえ１して少くともｒｌ、ｆ１６またはそれ以下の最小殺菌濃度になるまで酸化 された殺菌または殺真菌濃度のリモネンと直接接触される。それは塗布、ふきと り、ペイント、洗浄、ブラッシング、スプレーまたはいずれか他の直接適用技術 により適用できる。一方、それはクリーム、軟青、チンキ、ゲル、串刺、ペイン ト、スプレー、エアゾール、ｍ磨削、溶液、エマルジョン、外科用石鹸、洗口液 または防腐剤リーに配合てき、細菌、真菌または酵母を殺すかまたはその増Ｍを 防くことが望まれるあらゆるところに適用できる。 最良の実施態様 Ｆ２例は本発明を実施する土での最良の態様を示したものである。様々な他の態 様がここで示された開示からみて容易に考えうろことから、これらは本発明を制 限するものとして解釈されるべきてない。 例　１ 例１ては、意図的に酸化されたリモネンを生産するいくつかの方法が示されてい る。第一の例において、６０う）間インキュベートされたときに５Ｌａｐｈｙｌ ｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒＯｕｓ＾ＴＣＣ２５９２３に対して０．０６以下の濃度 で殺菌性である酸化リモネンを生産するためにリモネン中に空気を吹込む方法は 、ド記表Ａに小されている。自動酸化リモネンの生産ノｊ法は表Ｂに示されてい る。 酸化リモネンおよび自動酸化リモネンの生産方性は下記のとおりてあった。４ガ ロン（約１５ｇ）の新釘なｄ、リモネン（Ｐｌｏｒｉ＋Ｉａ　Ｃ１＋ｅｍｉｃａ ｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｉｎｃ、、ｌ、ａｋｃ　Ａｌｒｒｃｄ、口ｏ　ｒ　ｉ　ｄ 　ａ　）を口の小さな金属容器に１ガロンずついれた。そのうち２つは室７！！ （〜２５℃）で処理し、２つは（水ｉ６中）５（１”ｃて処理した。各４Ｌ度で 、第一の部分は室内の空気に開放（自動酸化）し、第二の部分はＳ　ａ　ｃ　ｏ 　ｎ　（ＩＮａｔｕｒｅ　Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｒ　ｌ　ｌ’ｕｍｐ　ｄ気器でそ れに空気を連続的に吹込むことにより能動的に酸化（意図的に酸化）した。一部 をＯ１２，４，６，８，１０，１２，１４および１６週１に４つの部分の各々か ら取り出した。各々について、粘度、比重、過酸化物値と５Ｌａｐｈｙｌｏｃｏ ｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ＡＴＣＣ２５９２３および１シｓｃｌ＋ｃｒｉｃｈｉ ａ　ｃｏｌｉ　ＡＴＣＣ２５９２２にり、！する抗菌活性を、下記表Ａ、Ｂ、Ｃ ，ＤおよびＥに示したように調べた。 室温（表ＡおよびＢ）で試験された部分では、ｄ−リモネンの意図的な酸化およ び自動酸化で生じた抗菌活性のタイプおよび効力に明らかな差異があった。意図 的に酸化されたリモネン（表Ａ）は、６〜８週間の処理で最大の殺菌活性を示し た。それはＳ、ａｕｒｃｕｓ　ＡＴＣＣ２５９２３の場合１６２５およびｌＥ、 ｃｏｌｉ＾ＴＣＣ２５９２２の場合１−８　Ｅｌ　（１以内の希釈で急速殺菌性 （１０分間暴露）であった。それは１　：　１６　（］　０の希釈で双方の生物 に対して更に長いソ露時間（２４時間）のとき殺菌性であった。 Ｑ） 逆に、室温で自動酸化されたリモネン（表Ｂ）は、１４〜１６週間の処理で最大 殺菌活性を示したが、意図的に酸化された油状物の効力には達しなかった。Ｓ、 ａｕｒＯｕｓ　ＡＴＣＣ２５９２３にに４する急速殺菌活性（１０分間）ハイか なる花釈倍率の自動酸化油状物でもみられず、わずかに昂釈された油状物（１： ２．５〜１：１０）のみが１、ｃｏｌｌＡＴＣＣ２５９２２に灯して急速殺菌性 であった。長時間インキュベート（２４時間）であっても、自動酸化油状物の殺 菌効力はＳ、ａｕｒａｕｓ　ＡＴＣＣ２５９２３に灼して意図的に酸化された油 状物の場合よりも１７倍低く　、Ｅ、ｃｏｌｌＡＴＣＣ２５９２２に対しては４ 倍低かった。油状物の処理時間を増やしても、１６週間を超えると、効力が全体 的に減少した。 意図的に酸化されたリモネン（表Ａ）では、最高過酸化物値だけでなく、動粘度 も最大抗菌効力と灼応しなかった。これは、抗菌？＋’ｊ性が処理中に生じた蒸 発による抗菌物質の単なる濃縮のためではないことを示唆していた。 １゛１動酸化リモネンでは、抗菌活性は１６ａ１間以内で過酸化物値および動粘 度に追随した。これは、抗菌性が一部は処理中における過酸化物と抗菌物質の濃 縮のためであるらしいことを示唆した。各々が同様の過酸化物値をａするときに おける２つの油状物の抗菌効果の比較は、意図的に酸化されたリモネンの活性の 独特な性質を明らかに示す（表Ｃ）。自動酸化油状物は短期雪露（１（）分間） 後にどんな希釈倍率でも両方の試験生物に対して殺菌性てなく、怠１４的に酸化 された／Ｉｌｔ状物は３．ａｕｒＯｕＳ＾１’ＣＣ２Ｆ＋９２３の場合に希釈１ ：４゜２て、ｌシ、ｃｏｌｌ＾１’ＣＣ２５９２２の場合に１　：８ｏｎで殺菌 性であった。長期！１露（２４時間）であっても、自動酸化油状物の殺菌効力は 、意図的に酸化された油状物の場合よりも４〜８倍低かった。 酸化温度を室温（〜２５℃）から５０℃に上げても、油状物で強力な抗菌１ｌＩ ｌ性を生しさせるために必要な時間を均一に減少させることはなかった（表りお よびＥ）。 意図的に酸化されたリモネンでは、最大細菌効力はわずか３週間の酸化後に達し た（表Ｄ）。これは室温で意図的な酸化にすした６〜８週間とに・１１１α的で あった（表Ａ）。 しかしながら、急速細菌効力（１（）分間暴ｎ）は、室温で意図的に酸化された ものと比較して、５０℃で意図的に酸化された油状物のとき６〜８３倍低かった 。このため、その２つの方法では独特な抗菌効果のある油状物を形成しているよ ってあった。５０℃で意図的に酸化された油状物は６週間て非′に〜に粘稠にな り、アンセイでブロス希釈物と混合できないため、それは抗微生物活性に関して 更に試験できなかった。 ５０℃におけるリモネンの自動酸化では、より一層独特Ｉム抗菌ｌ占性のある油 状物を生じた（表Ｅ）。１４１間の処理がその急速細菌効果（１０分間暴露）を 最大にする上で要求され、一方２〜４週間の処理がその長期間隔（２４時間）殺 菌性を最大にする上で要求された。これは、室温で自動酸化されたリモネンの急 速および長期間隔殺菌効果を最大にする上で要求された時間間隔と類似していた （表Ｂ）。しかしながら、５（）℃で自動酸化されたリモネンの場合には、長期 間隔部ｎ（２４時間）後に、Ｍべた殺１２Ｉ１１ζ性は、試験１１物がｌＥ、ｃ ｏｌ　ｉ　ＡＴＣＣ２Ｆ＋９２２ではなく　、Ｓ、ａｕｒｅｕｓ　ＡＴＣＣ２５ ９２３のときに、４週間の処理後に減少した。これらの結果は、５０℃における リモネンの自動酸化が、室温におけるリモネンの意図的な酸化と同様の細菌活性 を生しないことを示した。 前段落に記載された４つの方法によるリモネンの処理後に得られた最大殺菌活性 の要約は表Ｆで示されている。 この活性は、室温でリモネンの意図的な酸化により生じた活性の独特な性質を明 らかにするために、急速殺菌効果（１ｆ）分間１ｊｉ）と長期間隔殺菌効果（２ ４時間ａｎ＞に分けた。この要約から、急速殺菌活性が室温でリモネンの意図的 な酸化のみで生じうろことは明白である。急速殺菌活性に関与する油状物中の物 質は熱不安定であるらしく（それらは５０℃で彩成されなかったため）、明らか に過酸化物ではない。長期間隔殺）２ｉ効果は様々な処理によりリモネンで生じ ることがてき、これらも油状物の過酸化物含有量と無関係であるらしい。しかし ながら、室温でのリモネンの意図的な酸化のみが、低濃度で急速および長期間隔 双方の殺菌活性のある油状物を生じる。 ４処理法の６週間後における油状物の外観は全く異なる。意図的に酸化されたリ モネンの場合、５０℃で処理された油状物は室温で処理されたものよりも暗い黄 色でかつ粘稠であった。自動酸化リモネンの場合、室温で処理された油状物は未 処理（新鮮）リモネンとその外観上木質的に嚢わっでいなかった。５【】℃で自 動酸化されたリモネンは、室温で、０図的に酸化されたものと外観上類似してい た。 表ＡＳＢ、ＤおよびＥで示されたデータから、将来酸化されるいかなるリモネン も“十分に酸化された”ことを示す基準点として甲−のポイントを選択した。選 択された基準殺菌終点（ＲＢ　Ｅ）では、Ｓ、ａｕｒｃｕｓ　ＡＴＣＣ２５９２ ３に対し６０分間暴露して試験されたときに、少くとも１　：１６．７　（０， ０６）の希釈で殺菌活性であった。 この終点は、それが（ａ）高い再現性を在し、いかなる１０分間Ｉｎ終点よりも 大きな油状物の希釈を要することが見い出され、（ｂ　）　Ｓ、ａｕｒｅｕｓお よびＥ、ｃｏｌｌに対する急速殺菌効果の存在に関する指標であり、そして（Ｃ ）室温での意図的な酸化を除いて、ｄ−リモネンのいかなる処理でも得られなか ったことから、選択された。このため、以下では、この基準殺菌終点に達したす べての酸化リモネンはＲＢＥリモネンと呼ぶ。 表Ａ、Ｂ、Ｃ，Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ，Ｉ＆Ｊで５ＬａｐｈｙＩｏｃｏｃｃｕｓ　 ａｕｒａｕｓ　ＡＴＣＣ２５９２３に対する殺菌１．−性を試験するために用い られた標準アッセイはド記のとおりであった：様々な容量の所望リモネンをＭｕ ｏｌ　ｆａｒ−＋１１ｎＬｏｎブロスに加え、激しく混合しくＶｏｒｔｅｘ　Ｃ ａｎｔｏ　Ｍｌｘｏｒ、５ｃｌｏｎＬＩｆｌｃＰｒｏｄｕｃＬｓ、ＩｖａｎｓＬ ｏｎ、　ＩＩｌ、）、１０６コロニー形成ｔｌｔ位（ＣＦＵ）／ｓｌの５Ｌａｐ ｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ＡＴＣＣ２５９２３または１：ｓｃｌ＋ ｃｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｌ　Ａ１”ＣＣ２５９２２て接杆し、再混合して、空気 中３７℃でインキュベートした。ブロスに対する所望リモネンの容量を変えて、 １（未希釈）〜０．０１（１：　１００希釈）の濃度を１〜５−１の最終容量で 試験することができた（表Ｇ）。それより／Ｄ＋いリモネン希釈（１：　’）１ ．２（］００以内は０．０１希釈から連続２倍希釈液を調製することにより試験 した（即ち、等容量のリモネン：Ｅａブロスとブロスを連続混合した）。様々な 時間間隔て、各チューブを激しく混合し、０．０１部分を取出し、５％ヒツジ血 液寒天プレートで継代培養して、各チューブで大体の生存ＣＰＵ／ｍｌ数を調べ た。これらアッセイの結果は、継代培養で生存コロニーが検出しえないリモネン の最高希釈、即ち殺菌濃度として表示した。これは原接種物の９９．９９％を殺 す最低濃度を表した。 表Ｇ 固定８ｍアッセイで用いられたリモネンの箱釈試験界釈　リモネン濃度 未届釈　１ １：１６．２５　０．０６ １：５１１　０．０２ １：１００　ｏ、旧 その方法を大きな表面積の油状物で起こしたときにもっと強力な段閑剤がｄ−リ モネンの自動酸化で生しうるかについて確かめるために、下記実験を行った：　 ５００１の新鮮ｄ−リモネノ（ｌｎＬｅｒｃ口Ｉｎｃ、　、５ａｒｅＬｙ　１ｌ ａｒｂｏｒ。 １’　ｌ　ｏ　ｒ　ｉ　ｄ　ａ　）を２５（１１ずつ均等に分けた。一方の部分 を５０〔）ｓｌエルレンマイヤーフラスコにいれ、第二の部分は５００ｍ１ビー カーにいれた。ビーカーを開放して室温で空気にさらしく自動酸化する）、−カ フラスコ内のサンプルは５ｅｃｏｎｄ　ＮａＬｕｒｃ　Ｃｌ＋ａｌｌｃｎｇａｒ 　Ｉ　Ｐｕｍｐ通気器でそれに空気を連続的に吹込むことにより室温で意図的に 酸化させた（リモネンを意図的に酸化する）。一部の５１を１．２および３週１ １に各々（ビーカーまたはフラスコ）から取出した。各部分の粘度、比重、過酸 化物値およびＳ、ａｕｒｃｕｓ　ＡＴＣＣ２５９２３に対する殺菌Ｉ；−性を前 記のように調べた。この実験において、１１動酸化は（［１の小さな容器で行わ れた）先の実験の場合よりも大きな表面積の油状物で行った。意図的な酸化は、 いかなる副次的な自動酸化ら防ぐために、この実験でも依然として口の小さな容 ゛器で行った。 表Ｈて示されたように、大きな表面積の油状物における室温でのｄ−リモネンの 自動酸化は、高度に殺菌性の油状物を牛しなかった。’（ａｌ＋にわかったその 油状物の特徴は、６週間後に小さな表面積で自動酸化されたリモネンの場合と最 も類似していた（表８）。しかしながら、大きな表面積での酸化は、油状物の蒸 発のために殺菌活性について試験しえないほど粘稠すぎる生成物を生じたため、 長期間続けることができなかった。このため、大きな表面積におけるリモネンの 自動酸化では急速殺菌性油状物を生ぜず、蒸発がこれらの条件下における長期酸 化を妨げた。 この実験で意図的に酸化されたリモネンの殺菌活性は表１で示されている。既に みられたように、急速殺菌性油状物はこの方法で生産された。／１１１状物源は 表Ａで示された場合と完全に異１Ａす、基準終点（即り、８．ａｕｒａｕｓ＾Ｔ ＣＣ２５９２３の場合には（］、０６以下の濃度で殺菌性）には前実験よりも早 く達した。これらの結果は、異なるロゾトのリモネンが規定基準終点に達する上 で意図的な酸化に異なる処理時間を要することを示唆した。 表Ｉ。 室温での油状物の意図的な酸化におけるｄ−リモネン　の物理的パラメーター、 過酸化物値および殺菌１ＩＩｌ性に関する変化室温ての　殺菌濃度３ ｆ！因的な　Ｓ、ａｕｒｃｕｑ＾ＴＩＥ　２５９２３酸化２１０ｓｉｎ　６０ｍ １ｎ　２４ｈｒ１　０．１　Ｇ、１　０．１　＋３１．２　０．８４３８１．０ ３６２　０．１　０゜Ｉ　Ｏ，００２６１７０，５０，８４３４１，０５２３Ｇ 、１　０．１　０．００１２５　２３１．３　０．８４５４　１．０７１’Ｉｎ ＬｃｒｃｉＬ　Ｉｎｃ、、５ａｒａＬｙ　１１ａｒｂｏｒ、Ｆｌｏｒｉｄａ、ｌ ｏＬ　５０９ＲＯ１２空気を室温にお（：て５００ｓｌエルレンマイヤーフラス コ内のリモネン２５０＠ｌ中に通気器（Ｓｏｅｏ＋ｘｌ　Ｎａｔｕｒｅ　Ｃｂａ ｌ　Ｉａｎｇｅｒ　Ｉ　ＰＬＩＩＩ））で連続的に吹込んだ。 ３殺菌濃度は原接種物のＳ、ａｕｒｅμｓＡπ：Ｃ２５９２３の少くとも９９． ９９％を殺す最高希釈（即ら、最低濃度）として示した。 ４過酸化物ミリ当Ｊｉｍ／ｋｇサンプル７未希釈油状物は殺菌性でなかった。 急速殺菌性油状物を生産しうるリモネンの意図的な酸化の能力は、峰々な供給元 からのリモネンを用いて調べ　□た。表Ｊで示されたように、リモネンのすべて のサンプルが室温での意図的な酸化で殺菌性になったわけではなかった。＾Ｉｄ ｒｌｃｈからの２つのサンプルは、５週間の意図的な酸化後であっても殺菌活性 を獲得せず、この供給元から得られた１つのサンプルは３週間はどの短さでも急 速殺菌性になった。しかも、表Ｊで示されたように、リモネンのｄ−およびｌ− 異性体双方は、急速殺菌剤になるように意図的に酸化できる。これらのデータは 、基準殺菌終点に確実に達するように、３〜８週間の処理後に、意図的に酸化さ れたリモネンの全バッチを試験する必要性を強調している。 表Ｋ ＳＬａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒａｕｓ＾丁ＣＣ２５９２３に対して測定 された２５℃での酸化におけるｄ−リモネン１の殺菌活性２５℃で酸化３　殺菌 濃度２ されたｄ−リモネン　１ＯｓＩｎ　６０ｓｌｎ　２４ｈｒ２１１　＞Ｉ　＞Ｉ　 Ｏ，０１ ３目　＞Ｉ　＞Ｉ　Ｏ，０１ ４ｒＪ　＞　ｌ　＞　Ｉ　Ｏ、０１ ７０）Ｉ　）Ｉ　Ｏ，００５ ９１＋　）Ｉ　）Ｉ　Ｏ，００５ １５００，５０，５０，００５ １Ｉ口　０．５　０．５　０．００１ ２４０　）１　０．１６　０．００５ ３６０　０．５　Ｇ、１０　０．０００８４５０　０、１６　０．０８　０．０ ０１４９０　０、１６　０．０６　０．０００３５３０　０．３　０．０Ｂ　０ ．０００３５９０　０、１０　０．０２　Ｇ、ＱＯ０３６６１１０，１６０，０ １０，０００３１新鮮ｄ−リモネン（ｌｎＬｃｒｃｉＬ　ｌｎｃ、、５ａｒｏｔ ｙ　１ｌａｒｂｏｒ、ｌコ１０ｒｉｄａ、　ｌｏＬ　５０９８０１） ２結県は原接種物の少くとも９９．９９！’６を殺す１ノモネノの最高希釈とし て示した。 ３酸素を２５℃において３リットル／ｗｉｎの速＋ｆｆｉでｄ　−ＩＪモネン申 に連続的に吹込んだ。 ４末希釈涌状物は殺菌性でなｈ・つた。 例２ 例２ては、ＲＢＥ　ｄ・リモネンおよびＲＢＥ　Ｉ−リモネンの殺菌および殺真 菌活性を、下記表Ｌ　＆　Ｍて示されるように、細菌、酵母および真菌に対して 調べた。 表Ｌ ＲＢＥ　ｄ−リモネンの殺菌活性 生物　殺菌濃度 ｌｏｇｉｎ　６０ｓｉｎ　２４ｈｒ Ａ　細菌　のインキュベート後 ２・銭融ム与郵限 ｇコ　１．００　０．１０　０．００１３・銭融五競重匹 ａｕｒｅｕｓ　２７　１．００　０．１０　０．００１５・銭融ム匹辱歪 ａｕｒ＝ｕｓ　コ９　０．３０　０．０６　０．００１．！１０、鉦＝瓜１１ｕ ｔｅａ　１．００　０．０１　０．００１１６、に匹シ北ｇｇｊよム臣？じ工Ｍ ７　０．０１　０．０１　０．０１１９、シ匹据匡シ功ｅｒａ　ＣＩ呂ニア　０ ．０１　０．０１　０．０１２０、　乙Ｊ坊鎚旦■１ＳＰ　１２　０．０１　０ ．０１　０．００１２１、　５ａｌｙｈｏｎｅｌｌａ　１４　（ｐａｒａ　Ｂ） 　０．０１　０．０１　０．０１２２、釘１匹遍謹≦ｍｍム８　０．０１　０． ００１　０．００１２コ、Ｐ”＊ｔｅ＋ａｓ　１ｉｒａｂｉｌｉｓ　２　０．０ １　０．０１　Ｃ，０Ｌ２４、ＰｒＯセｅｕｓコΩ！克己１１２７　０．１０　 ０．０１　（ｉ、ｏ１２５、Ｐｒ０？ａｕｓ　＝ｔａｅ：二１０６　０．１０　 ０．０１　０．１０２６、Ｐｒ０を白ｕｓ　ｒｉａ＝ｑａｎｉｉ　９９　０．０ １　０．０１　０．０１２７、Ｐｒりｙｉｄｅｈｃｉａ　５二ふＢロゴ；Ｌ裏　 ９７　０．０１　０．０１　Ｃ，０１２８、皇虫ぢ工壜匹２江ｃｌｏａｃａｅ　 ２０　Ｇ、ＯＩ　Ｑ、ＯＩ　Ｏ，０Ｌ２９、（：ｉ’＝＝ｏｂａｃ？１ｌ＝ＳＰ 　８　０．０１　０．０１　０．１０３２、＋Ｉｅｉｓｓｅｒｉａ　ａｏｎｏｒ ″：ｈｅａ　５　０．００１　０．ＯＯＬ　０．００１コ５．　Ｈ旦ｍ９ｐｈ工 ｌ■互 劫息旦阻雄（Ａｍｐ　Ｓ）””　０＝ＯＯＩ　０．００１　０．００１３６、出 しΣ咀劇１ａ’ａ’ｔ’ｄ’　０．００１　０．００１　０．００１Ｎａｂｒａ ｓｋａ　ｆａｎｎｅｒ　Ｏ，００２５０，０００コ　ｏ、ｏｏｏコ１．９と二話 罰ｅ工匹劇距０．０１　０．００１　０．０Ｏ１２、Ｓａｃ”ｙｏｈｖｅ＝ｓ　 ＳＰ　Ｏ，０１０，０１０，００１Ｃ１真菌　殺真菌濃度 １０ｇ＋ｉｎ　６０ｓｉｎ　２４ｈｒ　７−４５日のインキュベート後 １・咽旦虹匹二匹釦 ■４つよ　°°°°１ ４°　ｉｃ　ｏｏｈｖ：ｏｎ　ｏ、ｏｏｌｅｎｔ　ｏｏ’ｖｔｓｓ 本ペニシリン耐性 ＊＊アンビンリン耐性 ＊零＊アンピシリン感受性 ←未確認種 表Ｍ ＲＢＥ　ｌ−リモネンの殺菌および殺真菌活性生物　殺菌濃度 ｌｏｇｉｎ　６０ｓｉｎ　２４ｈｒ ３・銭跋」匹ヰ匹 ａｕ一旦ｕｓ　３９　（Ｍａｔｈ　Ｒ）　Ｏ，コ　０．０６　０．００２５ｂ匹 ムｎ１５　０．１　０＋０１　０．００２５１１、ｓｃ　ｅ　’ｃ　ｅ　ａ　９ 艷ｕ、７　０．００５０．００２５０．００１２１２、　加工ｍｌコ１４　（ｐ ａｒａ　Ｂ）　０．００２５０．００２５０．０００６１３．８担１ｎ区皿ム８ ｏ、０１ｏ、００２５０．ｏｏ１２Ｎａｂｒａｓｋａ　ｆａｒｉａｒ　Ｏ，００ ０６０，０００６０，０００コ１、　Ｃａ二何担船上江ｙ遥０．００１２０．０ ０１２　０．０００６Ｃ１真菌　殺真菌濃度 ｌｏｇｉｎ　６０ｍ１ｎ　２４ｈｒ のインキュベート後 章＊メチシリン耐性 ト未確認種 ）Ａ準殺菌終点に達するまで酸化されたリモネンのｄおよび１−異性体の段閑話 性を試験するために用いられた標準アッセイはＦ記のとおりてあった：所望リモ ネンの様々な希釈液を試験株に適したブロス培地で別々に調製した。１０６コロ ニー形成＋１１１位（ＣＰＵ／ｍｌ）の接種物を用いた。各試験液を各生物にと り適正な温度でインキュベートし、無リモネン寒天培地上で１０分間、６０分間 および２４時間ト１に継代培養した（０．０１ｇ＋ｌ）。 結果は殺菌濃度、即ち接種物の少くとも９９．９９％を投ずＲＢＥリモネンの最 低濃度（リモネン−１／試験液の全一１）として表示した。 ＲＢＥリモネンの１１１１性は、未希釈曲状物とＰｒｏｓｋａｕｃｒＢｃｃｋ液 体培地て１：８０００以内に希釈された油状物を用いて、ＭｙｃｏｂａｃＬｃｒ ｉａに対して評価した。各試験液を１０６ＣＦＵ／ｓｌのＨｙｃｏｂａｃＬｅｒ ｉａて接種し、空気中７％ＣＯ２内において３７℃でインキュベートした。様々 な時間間隔て、６試験液を激しく振盪し、一部０．０１ｍ１を取り出した。これ をＤｕｂｏｓオレイン酸−アルブミン寒天プレートて継代培養して、残留する生 存Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｌａの数を調べた。各試験液を１０分間、６０分間、２ ４時間１．２．３および４週間のインキュベート後にこの方式でサンプリングし た。殺菌濃度は原接種物の９９．９９％を殺す油状物の最低濃度として定義した 。 ある工°↓菌（ｄａｒ■ａｔｏｐｌ＋ｙｌｅｓ＞について試験するために用いら れた標準アッセイはト紀のとおりであった：ＲＢＥｄ−リモネンおよびＲＢＥ　 Ｉ−リモネンを０．０５％酵母抽出物で袖先された５ａｂｏｕｒａｕｄデキスト ロ一ス寒天斜面上において空気中で試験した。２化合物の各々を１＋１０，１： １．５．１　：　１−００，１　：　１０００の希釈で溶融寒天の異なるサンプ ルに個々に加え、その後激しく混合し、それから寒天を固化させた。接種物は下 記のように調製した：１Ｆ１ｓｌの塩水（ｒｌ、８５％）および４滴のツイーン ８０を室温で１４１］間増殖させた真菌を含台した５ａｂｏｕｒａｕｄデキスト ロ一ス寒大斜面に加えた。激しい振盪後に、培谷物を無菌ガーゼで濾過し、０． ８５％塩水てＭａｃｌ’ａｒｌａｎｄ　５Ｌａｎｔｌａｒｔｌ　Ｎｏ、ｌの術度 に調整した。 リモネン含有斜面（ｓｌａｎｔ　）をこの調整懸濁液０．１１で接種し、室温で インキュベートし、４３１１間にわたり毎日増殖についてチェックした。７日後 に、各真菌の密集増殖を無リモネンコントロール斜面で観察した。増殖は４３日 間にわたりいかなるリモネン含有斜面でも観察されなかった。ＲＢＥリモネンの 殺真菌濃度は、４３日間にわたり斜面で増殖を妨げた最低濃度として規定した。 ＲＢＥリモネンの抗微生物活性を調べるために用いられた試験条件は下記表Ｎて 示されている。 表Ｎ 継代培養　インキュ １１物　ブロス培地　寒人槁地　べ−１・条件１．５ｔａｐｌ＋ｙｌｏｃｏｃｃ ｕｓ　Ｍｕｃｌ　ｆａｒ　５％Ｙ’　３７℃て５ａｒｃｌｎｉａ　−１１ｉｎＬ ｏｎ　血液　空気中口ａｃｉｌｌｕｓ ＩｎＬｃｒｏｌ＋ａｃＬａｒｉａｃｃａｃおよびＩ”　ｓ　ｃ　Ｕ　（１０＠　 ＯＩＩ　ａ　ｓ２、ＳＬ’ｒｃｐＬｏｃｏｃｃｕｓ　Ｔｏｄｄ−５％￥゛３７℃ で空気中１、ａｃＬｏｌ＋ａｃｉｌ　ｌｕｓ　ｌＩｃｗｌＬＬ　血ｌｒ＆　１０ ％　ＣＯ，。 １．１ｓＬａｒｉａ ３、Ｎａ１ｓｓｃｒｉａ　Ｄｕａｌｌｅｒ　５％η　３７℃て空気中＊ａｎｉｎ ｇｉＬｉｄｉｓ　−１１ｉｎＬｏｎ　血液　１０％ｃｏ２４、Ｎｃｉｓｓｅｒｉ ａ　Ｉ：ｕｇｏｎ　チョロ　３７℃で空気中ｇｃ＋ｎｏｒｒｈａａ　レート　１ ０％Ｃ０２５、ｌｌｃｍｏｐｈｉｌｉｓ　Ｌｃｖｉｎｔｈａｌ　チョロ　３７℃ で空気中１ｎＮｕｃｎｚａ　し　−　ト　１０％　Ｃ０２６醇Ｎ　３ａｂｏｕｒ ａｕｄ　５％羊　３７℃でデキストロース　血液　空気中 ７、ＸａｎＬｈｏＩＩｏｎａｓ　ＮｕＬｒｉｃｎＬ　血液寒天　２５℃てｃａｍ ｐｅｓＬｒｉｓ　空気中 ｖｅｓｉｃａＬｏｒｉａ ＆　ｃｔｔｒｉ ８、ＮａＪｒａｓｋａ／Ｉｌｌ家　Ｄｕａｌｌｅｒ　血液寒天　３７℃てから１ １１．１ＩＩｔされた　−１１ｉｎＬｏｎ　空気中ＸａｎＬｈｏ＠ｏｎａｓ種 （種は未確認） ９、ＭｙｃｏｂａｃＬｅｒｉａ　Ｉ’ｒｏｓｋａｕｃｒ　１ｌｕｈｏｓオレ　３ ７℃て口ｃｃｋ　イン酸−アルア％Ｃ（）２ 液体培地　ブミン寒人 １０、真菌　０．０５％酵母　３７℃で抽出物音ａ　空気中 ５ａｂｏｕｒａｕｄ 例′うては、ＲＢＥリモネンを３台した処方が掲載されている。ＲＢＥ　ｄ−リ モネンおよびＲＢＥ　１−リモネンは、液剤、ゲル、石鹸、ペイント、ペースト 、クリーム、軟今、串刺、タンポン、エアゾールおよびエマルジョンを含めた下 記処方で調製する。細菌、真菌または酵母がＲＢＥ　ｄ−リモネンまたはＲＢＥ 　ｌ−リモネンをＤ１４Ｌ、た処方で処理されると、その処方は細菌、酵母およ び真菌を殺すかまたはその増殖を妨げる。 Ａ　液剤 １、溶液またはスプレー 化合物　全体の％　範囲　作用 ａ、ＲｒｌＰ　ｄ−リモネン　６０％　０．１−５０％　殺菌剤１００．０％ 化合物　全体の９６　範囲　作用 す、１ｌｌｌｌ　Ｉ−’Ｊ−ｔ−ネン１０％　０．１−６０％　殺ｎ　ｍ　ｉ／ ＰＩエチルアルコール９９．０％　５０−９９．９％　希釈液１００．０％ ２、洗口液 化合物　全体の％　範囲　作用 ａ、関ロ１シｄ−リモネン　５０．０％　０．１−５０％　抗酵母剤フレーバー 　２．０％　１−５％　フレーバーエチルアルコール４８．０％　４５−９８． ９％　希釈液１００．０％ Ｂ、向心ｌ！１ １　液剤 化合物　全体の９６　範囲　作用 濃縮液体石鹸　５．０％　２−１０％　界面活性剤サッカリン　０．２％　０． １−１．０％フレーバーチョウジ油　１．０％　０．５−３．０％フレーバーシ ナモン１Ｔ１１　Ｇ、５％　０　、５−３　、０％フレーバーペパーミント油　 ０．５％　０．５−３．０％フレーバーエチルアルコール　４２．６％　２９． ５−９５．３％　希釈液着色剤　０．２％　０．１−０．５％　着色剤ＲＢＥ　 ｌ−リモネン　５０．０％　０．１−５０％　殺真菌剤１００．０％ ２、ゲル 化合物　全体の％　範囲　作用 ナトリウムモノ　０．８％０．５−１．５％　抗プラフルオロホスフエート　− ク剤 Ｒ１１１シ【１−リモネン　５０．０％　１−５０％　殺菌剤水相シリカキセロ ゲル１０．０％　８−１５％　研磨剤水和増粘シリカ　８．５％　５−１０％　 結合剤ソルビトール７０％溶液１８．８％　５−７３．３％　保湿剤ポリエチレ ン　５．０％　３−７％　増粘剤グリコール３２ ラウリル硫酸ナトリウム１．５％　１−２％　界面活性剤カルボキシメチル　１ ．０％０．５−２％　結合剤セルロースガム ＳＤアルコール　１．０％０．５−２％　安定剤フレーバー　３．０％　２−４ ％　フレーバーサッカリン　０．２％０．１−０．５％フレーバーＦ　Ｄ　＆　 ＣＧｒｅｅｎ　１３　０．１％０．１−０．５％　着色剤Ｆ　Ｄ　＆　ＣＹｅｌ ｌｏｗ　＄１０　０．１％　０．１−０．５％　着色剤１００．０％ ナトリウムモノ　０．８％０．５−１．５％　抗ブラフルオロホスフエート　− ク剤 ＲＢＥ　ｌ−リモネン　５０．０％　１−５０％　殺真菌剤リン酸二カルシウム 　２２．０％２０．４−３０％　研磨剤二水和物 水　１６．０％１１．１−１３９．５％希釈液グリセリン　５．１％４．５−１ ２．５％　増粘剤フレーバー　２０％　２−３％　フレーバーラウリル硫酸ナト リウム１．５％　１−２％　界面活性剤カルボキシメチル　１．４％０．５−２ ．０％　結合剤セルロースガム ビロリン酸四ナトリウム１．０％０．５−２．０％　結合剤サッカリンナトリウ ム　０２％０．１−０．５％フレーバー１００．０％ １、ヒドロコルチゾン含有軟膏 化合物　全体の％　範囲　作用 Ｒｒ１１シｄ−リモネン　１．０％　０．１−１５．０％　殺菌剤ポリエチレン 　５９．５％　４８．５−５９．７％　増粘剤グリコール３３５０　および乳化 剤 ポリエチレン　３９．５％　３１．５−３９．７％　増粘剤グリコール４００＆ 乳化剤 ヒドロコルチゾン　１．０％　０．５−５．０％　抗炎症剤ｔｏｏ、ｏ％ ２、ヒドロコルチゾン非含有軟膏 化合物　全体の９６　範囲　作用 Ｒ肛１−リモネン　１．０％　０．１−１５．０％殺真菌剤ポリエチレン　５９ ．５％　５１．０−！ｉ９．９５％　増粘剤グリコールＬ１５０　＆乳化剤 ポリエチレン　３９．５％　３４．０−３９．９５％　増粘剤グリコール４００ ＆乳化剤 １００．０％ ３、ヒドロコルチゾン非含ａ串刺 化合物　全体の％　範囲　作用 に旧シ１−リモネン　１．０％　０．１−１５．０％　殺菌剤ポリエチレン　９ ．５％　５１．０−５９．９５％　増粘剤グリコール１０００　＆乳化剤 ポリエチレン　３９．５％　３４．０−３９．９５％　増粘剤＆乳化剤 グリコール３３５０ ＋００．０蔦 ４、ヒドロコルチゾン含有串刺 化合物　全体の９６　範囲　作用 ＲＢＩシｄ−リモネン　ｔ、ｏ％　０．１−１５．０％抗酵母剤ポリエチレン　 ７４．０％　６０．０−７５．２％　増粘剤グリコール１０００　＆乳化剤 ポリエチレン　２４．０％　２０．０−２４．２％　増粘剤グリコール３３５０ 　＆乳化剤 ヒドロコルチゾン　１．０％　０．５−５゜０％　抗炎症剤１００．０％ Ｄ、ヒドロコルチゾン非含有クリーム 化合物　全体の％　範囲　作用 Ｒ旧−１−リモネン１．０％　０．１−１５．０％　殺菌剤セチルアルコール　 １５．０％１２．０−１８．０％　増粘剤＾ｒｌａｃｃｌ　１６５　”　５．０ ％　３．５−７．５％　乳化剤ツルピトールア０％溶液　５．０％　３．５−８ ．０％　保湿剤水　７４．５％５１．５−１１０．９％　希釈液１００．０％ 化合物　全体の％　範囲　イ′１用 １１ＢＩシ１−リモネン　１．０％　０．１−１５．０％殺真菌剤クジラロウ　 １２．５％　１０．０−１５．０％　増粘剤ソルビタンモノ　１０．０％　７． ５−１２．５％　乳化剤ステアレートポリエチレン２０ ゾルビタンモノ　８０％　４．０−１’１．０％　乳化剤１００．０％ Ｅ、ヒドロコルチゾン含金クリーム 化合物　全体の％　範囲　作用 ピ旧シｄ−リモネン　１．０％　Ｏ，ｌ−１５，０％殺真菌剤セチルアルコール 　１５．０％１２．０−１８．０％　増粘剤＾ｒｌａｃａ１１６５　”　５．０ ％　３　、５−７　、５％　乳化剤ソルビトール７０９６溶液　５０％　３．５ −８．０％　保湿剤ヒドロコルチゾン　１．０％　０．５−５．０％　抗炎症剤 水　７３．０％４ｆ＋、５−１１０．４％　希釈液１００．０％ ”Ｃｒｏｄａ、ｌｎｃ、、５１　Ｍａｄｉｓｏｎ　Ａｖｃ、、Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ 、Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ＋００１０ 零＊グリセロールモノステアレートおよびポリオキシエチレンステアレート ＩｃＩ　ｏｒ＾−ｃｒｉｃａ　（以前は＾Ｌｌａｓ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　１ｎｄ ｕｓＬｒｌｏｓ）、Ｗｉｌ＊［ｎｇＬｏｎ、Ｄｃｌａｗａｒｃ　１９８９９に旧 シｄ−リモネン（２ｃｃ）　２０ｇ＋　８．０％　１−１５％　殺菌剤タンポン ２３Ｇｍ　９２．０％　８５−９９％　殺菌剤１００．０％　の保有物 Ｇ、ヒドロコルチゾン非含ａエアゾール・化合物　全体の％　範囲　１′１ＩＩ Ｉｋ旧シ１−リモネン　６．０％　０．５−５０％　殺菌剤エチルアルコール　 ９４．０％　５０−９９．５％　希釈液１００．０％ 加圧窒素噴射剤１００〜１２５ｐｓ１ｇ（約７〜９　ｋｇ／　ｃＪ　）化合物　 全体の％　（狸　作用 に旧シｄ−リモネン　１０．０％　０．５−５０．０％　殺真菌剤大豆ｉＴ！１ ９０．０％　５０．０−９９．５％　希釈液１００．０％ 加圧窒素噴射剤１００〜１２５ｐｓｉｇＨ，ヒドロコルチゾン含ａエアゾール に旧・：１−リモネン６．０％　０．５−５０％　殺菌剤大豆油　９３．０％　 ４５−９９．０Ｘ　希ＩＲｉｆｋヒドロフルチゾン　１．０％　０　、５−５　 、０％　抗炎症剤１００．０％ 加圧窒素噴射剤１（ｌ　Ｃ１〜１２５ｐｓ１ｇ■、水中浦型エマルジョン 化合物　全体の％　範囲　ｆ’ｌｉ　ＩＩＩ（１）Ｒ旧：（トリモネン　１．０ ％　０．１−５０％　抗酵１す剤（２）コーン浦　１０．０％　Ｉｎ−１５％　 浦（２）＾ｒｌａｃｃｌ　４０’零　２．０％　１−３％　乳化剤（２）ツイー ン４０　３．０％　２−４％　乳化剤（３）水　８４．９％　２ｇ−１１６，９ ％　希釈液１００．０％ （２）を７０℃に加熱する。（３）を７２℃に加熱する。 （３）を　（２）に連続攪拌下で加える。　（３）および　（２）が４０℃に冷 えたとき、室温に達するまで連続攪拌下で（１）を加える。 Ｊ　石鹸（殺真菌性石鹸）含有の水中油型エマルジョン化合物　全体の？６　範 囲　作用 （ＨＲｎｌＥ　ｄ−リモネン　１．０％　０．１−２５％　殺菌剤（２）コーン 油　３００％　２０．０−４０．０％　曲（２）＾ｒｌａｃｃｌ　４０°　２． ０％　１．０−３．０％　乳化剤（２）ツイーン４０３０％　２．０−４．０％ 　乳化剤（２）濃縮１ｆＪＥ体石鹸　３．５％　２．５−５．０％　界面活性剤 （３）水　６０．５％　２３−７４．４％　希釈液１０００％ （２）を７０℃に加熱する。　（３）を７２℃に加熱する。 （３）を　（２）に連続攪１゛ドて加える。　（３）および　（２）が４０℃に 冷えたとき、室温に達するまで連続攪拌下で（１）を加える。 Ｋ、池中水型エマルジョン 化合物　全体の％　範囲　作用 （１）　ｌ？　１３１シ１−リモネン　１．０％　０．１−２５％　殺真菌割水 ＊ （２）＾ｒｌａｃｃｌ　ｌｌｌ［ｉ　３．０％　２　、０−４　、０％　乳化剤 （２）大豆油１５．０％　１０．０−２５．０％　１ｙｈ（２）セレンンロウ　 ０．５％　０．３−０．８％　増粘剤（２）市ロウ　０．５％　０．３−０．６ ％　増粘剤（２）ツイーン８０　０．５％　０．３−Ｔ１．１４％　乳化剤（３ ）水　７９．５％　４４．２−８７．０％　希釈液１００．０％ （２）を７０℃に加熱する。　（３）を７２℃に加熱する。 （３）を　（２）に連続攪拌下で加える。　（３）および　（２）が４０℃に冷 えたとき、室温に達するまで連続攪拌下で（１）Ｒ１１１ｒｌ−リモネン　１． ００％　１−１０％　殺真菌剤二酸化チタン　１４．旧％　＋２−１８％　顔料 炭酸カルシウム２９．８３％　２５−３５％　１１１？４シリケート　４，８１ ％　３−［１％　顔料大豆アルキド樹脂　２５．７２％　２２〜２８％顔料（結 合剤）ミネラルスピリット　２３．７３％　５−３７％　溶媒１００．０％　（ シンナー） Ｒ１１１：　１−＋７　％ホン１．００％　１−１０％　殺ｒ１菌剤二酸化チタ ン　１０．７６％　８−１２％　顔料シリケート　１２．９１％１０−１６％　 顔料炭酸カルシウム　２０．９１％＋５−２５％　顔料ビニルアクリル系　１２ ．２２％Ｉｎ−１６％　ビヒクル樹脂固体物　（結合剤） グリセロール　８．３０％　Ｂ−１０％溶媒（シンナー）水３４．０Ｏ％　１２ −５０％溶媒（シンナー）１００．０％ 本発明のある好ましい態様のみが示され、実例で記載されてきたが、多くの変更 が当業者によりなされる。したかって本発明が本発明の真の精神および範囲内に 属するすべてのこのような変更を包含していると理解することが望ましい。 補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）平成　６　年　１０月　３１日 １週

Claims (13)

【特許請求の範囲】
1. １．空気中３７℃で６０分間インキュベートされた後に、１０６コロニー形成単 位のＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ＡＴＣＣ　２５９２３が接 種されたブロス培地ｍｌ当たり０．０６ｍｌの濃度で殺菌性である酸化リモネン を含んでなる、物質の化合物としての基準殺菌終点（ｒｃｆｏｒｃａｃｃ　ｂａ ｃｌｏｒｌｃｉｄａｌ　ｃｎｄｐｏｉｎｔ：ＲＢＥ）リモネン。
2. ２．殺歯性および殺真菌性濃度で殺菌性および殺真菌性である安定な殺菌性およ び殺真菌性組成物の生産方法であって、 空気をリモネン中に吹込むかまたは酸素をリモネン中に吹込むことから本質的に なり、 ブロスｍｌ当たり１０６コロニー形成単位のＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａ ｕｒｃｕｓ　ＡＴＣＣ２５９２３が接種され、ブロスｍｌ当たり０．０６ｍｌ以 下の酸化リモネンを含有した適切な培地において、空気中３７℃で６０分間イン キュベートされて実質上すべての細菌を殺す能力により証明されるような、急速 殺菌活性を有する酸化リモネンを生産する方法。
3. ３．急速殺菌活性が暗く覆われた容器中４℃で少くとも６ヶ月間貯蔵した時に実 質的に未変化のままである、請求項１に記載の方法。
4. ４．急速殺菌活性に達するまで空気をリモネン中に吹込むことから本質的になる 、請求項１に記載の方法。
5. ５．急速殺菌活性に達するまで酸素をリモネン中に吹込むことから本質的になる 、請求項１に記載の方法。
6. ６．空気が室温で３〜８週間リモネン中に吹込まれる、請求項３に記載の方法。
7. ７．酸素が室温で３〜８週間リモネン中に吹込まれる、請求項４に記載の方法。
8. ８．空気または酸素をリモネン中に吹込むことから本質的になり、 ブロスｍｌ当たり１０６コロニー形成単位のＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａ ｕｒｏｕｓ　ＡＴＣＣ　２５９２３　が接種され、ブロスｍｌ当たり０．０６ｍ ｌ以下の酸化リモネンを含有し、空気中３７℃で６０分間インキュベートされた 適切な培地において、実質上すべての細菌を殺す能力により証明されるような、 急速殺菌活性を有する酸化リモネンを生産する、安定な殺微生物剤の生産方法。
9. ９．急速殺菌活性が暗く覆われた容器中４℃で少くとも６ヶ月間貯蔵した時に実 質的に木変化のままである、請求項８に記載の方法。
10. １０．急速殺菌活性に達するまで空気をリモネン中に吹込むことから本質的にな る、請求項８に記載の方法。
11. １１．急速殺菌活性に達するまで酸素をリモネン中に吹込むことから本質的にな る、請求項８に記載の方法。
12. １２．空気が室温で約３〜８週間リモネン中に吹込まれる、請求項１０に記載の 方法。
13. １３．酸素が室温で約３〜８週間リモネン中に吹込請求項１０に記載の方法。