JPH07324096A

JPH07324096A - 転写調節物質ａｐｒｆ

Info

Publication number: JPH07324096A
Application number: JP7077584A
Authority: JP
Inventors: Shizuo Shinriyou; 静男審良; Chuzo Kishimoto; 忠三岸本
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1994-04-04
Filing date: 1995-04-03
Publication date: 1995-12-12

Abstract

(57)【要約】【構成】哺乳動物の転写調節物質ＡＰＲＦ、その製造
法、該物質をコードするＤＮＡ、そのＤＮＡを含む複製
又は発現べクター、該ベクターで形質転換された宿主細
胞、ＡＰＲＦ機能阻害剤の評価方法及びＡＰＲＦ機能阻
害剤。【効果】本発明ポリペプチド（ＡＰＲＦ）は、ＡＰＲＦ
機能の補完、抑制に有用であり、またＡＰＲＦの機能を
阻害する物質の検索に利用できる。該機能阻害物質を有
効成分として含有する本発明ＡＰＲＦ機能阻害剤は、Ｉ
Ｌ−６等のサイトカインが関与する各種の疾患、例えば
炎症性疾患の治療等に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は新規な転写調節物質、急
性期反応因子（acute phase response factor 、以下
「ＡＰＲＦ」と略記する）、それをコードするＤＮＡ、
該ＡＰＲＦの機能阻害剤の評価乃至検索方法、及び該Ａ
ＰＲＦの機能阻害剤に関する。

【０００２】更に詳しくは、インターロイキン６（以下
「ＩＬ−６」と略す）の細胞内シグナル伝達に関わる転
写調節物質であるＡＰＲＦ、その製法、該ＡＰＲＦをコ
ードするＤＮＡ、該ＤＮＡを含む複製又は発現べクタ
ー、該ベクターで形質転換された宿主細胞、該ＡＰＲＦ
の機能阻害剤の評価検索方法及び該ＡＰＲＦの機能阻害
剤に関する。

【０００３】

【従来技術とその課題】生理活性シグナル伝達物質は、
生理活性物質の信号を細胞内に伝え、細胞の応答を仲立
ちするものである。狭義には、生理活性シグナル伝達物
質は、生理活性物質の受容体から信号を受取り、核内Ｄ
ＮＡの発現制御を行なう物質を言う。該生理活性シグナ
ル伝達物質の中で、直接に核内ＤＮＡに結合し、遺伝子
の発現を制御する蛋白質は転写因子、転写調節因子等と
も言われる。本発明では之等を転写調節物質（transcri
ption factor）と称することにする。

【０００４】転写調節物質は多くの場合それ自体蛋白質
である。該転写調節物質は、第１の生理活性物質から細
胞に与えられた情報（シグナル）を、核のＤＮＡに伝
え、核内で第２の蛋白質の発現をその転写段階で調節す
る機能を有している。即ち、第１の生理活性物質が細胞
に作用して第２の蛋白質が発現される場合に、細胞内で
その仲立ちをするものが転写調節物質である。この転写
調節物質による転写調節には、第２の蛋白質の発現を増
加（促進）する場合と、減少（抑制）する場合が含まれ
る。上記第１の生理活性物質の作用により発現調節され
る第２の蛋白質を、本発明では誘導性蛋白質と称し、そ
の遺伝子を誘導性遺伝子と称する。例えばＩＬ−６で発
現が誘導される蛋白質、代表的にはハプトグロビンを、
ＩＬ−６誘導性蛋白質、該ハプトグロビンの遺伝子をＩ
Ｌ−６誘導性遺伝子と称する。

【０００５】ＩＬ−６誘導性蛋白質には、ＩＬ−６によ
り発現を促進される蛋白質として、上記ハプトグロビン
以外に、ヘモペキシン、Ｃ−反応性蛋白、α₂−マクロ
グロブリン、α₁−酸性グリコプロティン等が含まれ、
之等の蛋白質は炎症時における急性期反応に顕著に現わ
れる急性期蛋白として知られている。逆に、ＩＬ−６に
より発現が抑制される蛋白質としては、血清アルブミン
が知られている。

【０００６】転写調節物質は、誘導性遺伝子のＤＮＡ配
列の特定部位に結合し、その誘導性遺伝子の転写を調節
する。転写調節物質が結合するＤＮＡ配列部位は、通
常、構造遺伝子の上流でプロモータの近傍に存在する。
転写調節物質が結合するＤＮＡ配列は、該転写調節物質
の種類によりそれぞれ固有である。転写調節物質の最近
の進歩については、文献（１）〔Montminy,M., Scienc
e, 261, 1694(1993) 〕に解説されている。

【０００７】従来、ＩＬ−６の細胞内シグナル伝達に関
わる転写調節物質としては、ＮＦ−ＩＬ６が知られてい
る〔文献（２）：Akira,S. et al., EMBO. J, 9, 1897
(1990) 、文献（３）：Poli,V. et al., Cell, 63, 643
(1990) 、文献（４）：Kinoshita,S. et al., Proc. Na
tl. Acad. Sci. USA, 89, 1473(1992) 等参照〕。

【０００８】しかし、ＩＬ−６の受容体から、より直接
的に核内のＩＬ−６誘導性遺伝子に転写調節シグナルを
伝達する転写調節物質は、上記各文献にも一切記載はな
い。一方、前述のいくつかのＩＬ−６誘導性遺伝子の上
流には、ＣＴＧＧＧＡなる配列が存在することが知られており、ＩＬ−６で活
性化されて、この配列に結合する転写調節物質の存在
が、文献（５）〔Wegenka,U.M. et al., Mol. Cell. Bi
ol., 13, 276, 1993〕に示唆されている。しかし、該文
献には蛋白質性の因子の存在が示されるだけで、該因子
の配列、構造、更には分子量等の物理化学的性質は明ら
かにされておらず、物質としての転写調節物質ＡＰＲＦ
についての開示はない。

【０００９】また、転写調節物質は前述したように、細
胞内にあり、通常の場合、生理活性物質（第１の蛋白
質）が細胞の受容体に結合した後、リン酸化を受ける、
核内へ移行する、特定のＤＮＡ配列に結合する等の段階
を経て、誘導性遺伝子の転写を調節する物質であるた
め、該転写調節物質の作用に影響を与える物質、例えば
その機能を阻害し得る物質等は、上記生理活性物質の関
与する病態の治療薬となり得る。

【００１０】上記観点より、本発明者らは、例えば炎症
性疾患等の病態に関連するＩＬ−６に着目し、これを第
１の生理活性物質として第２の蛋白質の発現を調節する
作用を有する転写調節物質としてのＡＰＲＦを単離、精
製し、新たにその部分アミノ酸配列を決定し、またその
遺伝子をクローニングすることによって、該ＡＰＲＦの
全塩基配列を決定すると共に、全アミノ酸配列をも決定
し、これに基づいて、物質としてのＡＰＲＦを初めて得
るに成功した。

【００１１】また、本発明者らは、引続く研究の結果、
上記ＡＰＲＦを利用して、ＩＬ−６に起因する病態、例
えば炎症性疾患、白血病、癌、破骨細胞の活性化による
骨破壊、肺性高血圧症等の病態の治療に役立つと考えら
れる物質としての、ＡＰＲＦ機能阻害物質を評価、検索
する方法を確立し、更に該阻害物質を得るに成功した。
本発明は上記知見に基づいて完成されたものである。

【００１２】

【課題を解決するための手段】本発明によれば、実質的
に純粋な形である哺乳動物の転写調節物質ＡＰＲＦが提
供される。

【００１３】ここで、実質的に純粋な形とは、例えば配
列番号：１又は：５で示されるアミノ酸配列を含むポリ
ペプチドを例にとれば、一般に、生産時のポリペプチド
の９０％以上、例えば９５％以上、９８〜９９％が、配
列番号：１又は：５で示されるアミノ酸配列を含むポリ
ペプチドであることを意味する。

【００１４】本発明の上記ＡＰＲＦは、新規なアミノ酸
一次配列を有している。この配列は、本発明者らの調査
によれば、スイスプロット（Swiss Prot Release 2.0）
に登録されている既知のポリペプチドのアミノ酸配列の
いずれにも合致しなかった。また、本発明ＡＰＲＦをコ
ードするｃＤＮＡの配列も、ジーンバンク（GenBankRel
ease 70.0）に登録されているヌクレオチド配列を調査
した結果、新規であることが確認された。

【００１５】以下、本発明ＡＰＲＦにつき詳述すれば、
該ＡＰＲＦは、例えばより具体的には後記実施例に記述
する方法により、単離精製でき、またその部分アミノ酸
配列の決定、ｃＤＮＡのクローニング、ｃＤＮＡの配列
決定、全アミノ酸配列の決定等を行なうことができる。
その要約は次のようになる。

【００１６】即ちまず、ＩＬ−６をマウスに投与し、１
５分後にマウスを屠殺し、肝臓から核蛋白質分画を抽出
する。この抽出物を、以下の配列、 CCTTCCGGGAATTC を有するＤＮＡオリゴマーを固定化した担体を用いて精
製し、次にポリアクリルアミドゲル電気泳動法により精
製する。その精製品をリジルエンドペプチダーゼによっ
て加水分解し、得られる加水分解物を高速液体クロマト
グラフィーにより分離し、各ピークを単離する。こうし
て得られたペプチド断片を自動アミノ酸配列解析機によ
りＮ末端から配列決定する。決定されたＡＰＲＦの部分
アミノ酸配列をもとに、対応するＤＮＡオリゴマーを合
成する。このＤＮＡオリゴマーをもとにして、哺乳動物
の肝臓又は胎盤ｃＤＮＡライブラリーからＡＰＲＦのｃ
ＤＮＡを単離する。このＡＰＲＦｃＤＮＡの配列を決定
することにより、ＡＰＲＦ蛋白質のアミノ酸配列を決定
することができる。

【００１７】かくして配列を決定される本発明ＡＰＲＦ
において、哺乳動物としては、ヒト、マウス、ラット等
が挙げられる。また、同じ種においても、産生組織或は
細胞により、亜型（subtype)と呼ばれる、アミノ酸配列
の置換、欠失、挿入を持つものの存在する可能性があ
り、本発明ＡＰＲＦには、之等の亜型のＡＰＲＦも包含
される。

【００１８】本発明ＡＰＲＦの一態様には、ヒトのＡＰ
ＲＦが含まれる。具体的には、配列番号：１で示される
アミノ酸配列を含むポリペプチド、そのホモローグ及び
それらのフラグメントであるＡＰＲＦが含まれる。

【００１９】本発明によれば、また上記ヒトＡＰＲＦの
ポリペプチドをコードするＤＮＡが提供される。具体的
には、配列番号：２及び：３で示される各塩基配列を有
するそれぞれのＤＮＡ、之等ＤＮＡとハイブリダイズし
得るＤＮＡ及びそれらのフラグメントが提供される。

【００２０】特に、本発明のこの態様によれば、（１）配列番号：１で示されるアミノ酸配列を含むポリ
ペプチド、（２）前記（１）に記載のポリペプチドをコードするＤ
ＮＡ、（３）配列番号：２で示される塩基配列を有するＤＮ
Ａ、及び（４）配列番号：３で示される塩基配列を有するＤＮＡ
が提供される。

【００２１】更に本発明の別の一態様には、マウスのＡ
ＰＲＦが含まれる。具体的には、配列番号：５で示され
るアミノ酸配列を含むポリペプチド、そのホモローグ及
びそれらのフラグメントであるＡＰＲＦが含まれる。

【００２２】本発明によれば、更に上記マウスＡＰＲＦ
のポリペプチドをコードするＤＮＡが提供される。具体
的には、配列番号：６又は：７で示される各塩基配列を
有するそれぞれのＤＮＡ、之等ＤＮＡとハイブリダイズ
し得るＤＮＡ及びそれらのフラグメントが提供される。

【００２３】特に、本発明のこの態様によれば、（５）配列番号：５で示されるアミノ酸配列を含むペプ
チド、（６）前記（５）に記載したポリペプチドをコードする
ＤＮＡ、（７）配列番号：６で示される塩基配列を有するＤＮ
Ａ、及び（８）配列番号：７で示される塩基配列を有するＤＮＡ
が提供される。

【００２４】本明細書において、上記（１）及び（５）
に記載する配列番号：１又は：５で示されるアミノ酸配
列を含むポリペプチドには、配列番号：１又は：５で示
されるアミノ酸配列からなるポリペプチド（天然型成熟
蛋白）だけでなく、これと等価の生物学的乃至薬理学的
性質を有することを前提として、例えば該ポリペプチド
のＮ末端及び／又はＣ末端に、配列番号：１又は：５で
示される総アミノ酸数の２０％以内、より好ましくは５
％以内の、別個の任意のアミノ酸乃至アミノ酸配列を付
加させたポリペプチドや、後記するホモローグ及びフラ
グメントを含めて、生物活性に関与しないアミノ酸乃至
アミノ酸配列を改変（欠損、他のアミノ酸配列への置
換、他のアミノ酸配列の付加、挿入等）させた誘導体も
包含される。

【００２５】配列番号：１又は：５で示されるアミノ酸
配列を含むポリペプチドのホモローグとは、該ポリペプ
チドと対比して、一般に少なくとも１００個、好ましく
は少なくとも１５０個、例えば２００、２５０又は３０
０個の連続したアミノ酸領域で、少なくとも７０％、好
ましくは少なくとも８０又は９０％、より好ましくは９
５％以上の相同性を有するポリペプチドをいう。以後、
本発明ポリペプチドなる記載はそのようなホモローグを
も含むものとする。

【００２６】更に、本発明ポリペプチドのフラグメント
とは、本発明ポリペプチドの少なくとも１０アミノ酸、
好ましくは少なくとも１５アミノ酸、例えば２０、２
５、３０、４０、５０又は６０アミノ酸部分を意味す
る。

【００２７】配列番号：１又は：５で示されるアミノ酸
配列を有するポリペプチド以外の本発明ポリペプチド及
びそのフラグメントは、いずれも上記配列番号：１及
び：５で示されるアミノ酸配列を含むポリペプチドと等
価の生理学的又は薬理学的性質を有している。従って、
本発明は、配列番号：１又は：５で示されるアミノ酸配
列を有するポリペプチド及びそれらと等価の生理学的又
は薬理学的性質を有し、それらと構造類似なポリペプチ
ドを提供するものでもある。

【００２８】配列番号：２、：３、：６又は：７で示さ
れる塩基配列を有するＤＮＡとハイブリダイズし得るＤ
ＮＡとは、配列番号：２、：３、：６又は：７で示され
る塩基配列を有するＤＮＡと対比して、一般に少なくと
も１００個、好ましくは少なくとも１５０個、例えば２
００、２５０又は３００個の連続した塩基配列領域で、
少なくとも７０％、好ましくは少なくとも８０又は９０
％、より好ましくは９５％以上の相同性を有するＤＮＡ
をいう。以後、本発明ＤＮＡなる記載は、そのような相
同性を有するＤＮＡをも含むものとする。

【００２９】本発明ＤＮＡのフラグメントとは、本発明
ＤＮＡの少なくとも１０塩基、好ましくは少なくとも１
５塩基、例えば２０、２５、３０又は４０塩基部分を意
味し、そのようなフラグメントも本発明ＤＮＡと等価で
あり、本発明に含まれる。

【００３０】上記（２）又は（６）で特定される本発明
ＤＮＡには、それぞれ配列番号：１又は：５で示される
ポリペプチドをコードするすべての塩基配列群が含まれ
る。即ち、よく知られているように、ひとつのアミノ酸
をコードするコドンは１〜６種類（例えば、メチオニン
（Ｍｅｔ）は１種類、ロイシン（Ｌｅｕ）は６種類）あ
る。上記配列番号：１又は：５で示されるアミノ酸配列
をコードする塩基配列の代表的例としては、配列番号：
２、：３、：６又は：７で示される塩基配列を挙げるこ
とができるが、本発明ＤＮＡには、当然に上記アミノ酸
配列を変えることなく、任意のコドンを選択した他のＤ
ＮＡも含まれ、かかる塩基配列の変更によって目的ポリ
ペプチドの生産性が向上することもある。

【００３１】上記（３）又は（７）で特定されるＤＮＡ
は、それぞれ上記（２）又は（６）で示されるＤＮＡの
一態様であり、天然型配列を表わす。

【００３２】また、上記（４）又は（８）に示されるＤ
ＮＡは、上記（３）又は（７）で特定されるＤＮＡに天
然の非翻訳部分を加えた配列を示す。

【００３３】以下、本発明ＤＮＡ（そのフラグメントを
含む、以下同じ）の製造につき説明すれば、これは、遺
伝子組換え法、合成法等の公知の各種方法により取得で
きる。その詳細は後記実施例に示す通りであるが、代表
的に配列番号：３及び：７で示される塩基配列を有する
ＤＮＡを例にとり詳述すれば、之等は以下の如くして作
成できる。

【００３４】即ち、(i) 本発明ポリペプチドが産生され
る細胞からｍＲＮＡを分離し、(ii)該ｍＲＮＡからファ
ーストストランド（１本鎖ＤＮＡ）、次いでセカンドス
トランド（２本鎖ＤＮＡ）を合成し（ｃＤＮＡの作
製）、(iii) 該ｃＤＮＡを適当なプラスミドベクターに
組込み、(iv)得られた組換えベクターで宿主細胞を形質
転換し（ｃＤＮＡライブラリーの作製）、(v) 得られた
ｃＤＮＡライブラリーより、ハイブリダイゼーション法
により目的とするＤＮＡ含有プラスミドを単離し、(vi)
目的ＤＮＡの塩基配列を決定することにより作製でき
る。

【００３５】より詳しくは、上記工程(i) は、哺乳動
物、例えばヒト又はラットの組織中ＡＰＲＦを発現して
いると考えられる組織、好ましくは、肝臓、マクロファ
ージ、胎盤等の組織細胞又は細胞株を利用して、オカヤ
マ（Okayama,H.）らの方法［Method in Enzymology,15
4,3 (1987) ］、チルグィン（Chirgwin,J.M. ）らの方
法［Biochem.,18,5294(1979)］等の方法に従い行なわれ
る。

【００３６】上記(ii)、(iii) 及び(iv)の工程は、ｃＤ
ＮＡライブラリー作製工程であり、改変したグブラー−
ホフマン（Gubler and Hoffman）法［Gene,25,263(198
3) ］に準じて行なわれる。尚、(iii) の工程で用いら
れるプラスミドベクターとしては、大腸菌内で機能する
もの（例えばｐＢＲ３２２等）や枯草菌内で機能するも
の（例えばｐＵＢ１１０等）が多数知られており、特に
大腸菌内で機能するλ-ZAPII等が好適である。(iv)の工
程で用いられる宿主細胞は、公知の各種のもののいずれ
でもよく、特にＤＨ５のコンピテントセル［Gene,96,23
(1990)記載の方法により調製される］が好ましい。最近
では、各種動物の種々の組織のｃＤＮＡライブラリーが
既に市販されている。例えば、マウス肝臓λｇｔ１１や
ヒト胎盤のｃＤＮＡライブラリーは、クローンテック
（Clontech）社より販売されている。之等市販のｃＤＮ
Ａライブラリーも好適に用いられる。

【００３７】工程(v) はそれ自体公知の例えばプラーク
ハイブリダイゼーション法、コロニーハイブリダイゼー
ション法［Gene,10,63(1980)］等により行ない得る。適
当なプローブとしては、異種動物のＡＰＲＦのＤＮＡ、
そのホモロジー、之等のフラグメントを例示できる。

【００３８】工程(vi)もそれ自体公知であり、例えばジ
デオキシ・ターミネーター(dideoxyterminator)法やマ
キサム・ギルバート(Maxam-Gilbert) 法に従い得る。

【００３９】配列番号：２、：３、：６又は：７で示さ
れる塩基配列が一旦確定されると、その後は、化学合成
法やＰＣＲ法により、また該塩基配列の断片をプローブ
としたハイブリダイズ法により、本発明ＤＮＡを得るこ
とができる。更に、本発明ＤＮＡを含有するベクターＤ
ＮＡを適当な宿主に導入し、これを増殖させることによ
り、目的とする本発明ＤＮＡの必要量を得ることができ
る。

【００４０】従って本発明によれば、本発明ＤＮＡを含
む複製又は発現ベクターが提供される。該ベクターの起
源ベクターとしては、通常知られている例えばｏｒｉ領
域と、必要により本発明ＤＮＡの発現のためのプロモー
ター、プロモーターの制御因子等を有する各種のプラス
ミド、ウィルス、ファージベクター等を利用できる。該
起源ベクターは、また１又は２以上の選択的マーカー遺
伝子、例えばアンピシリン耐性遺伝子を含んでいてもよ
い。

【００４１】また、本発明によれば、配列番号：２、：
３、：６又は：７で示される塩基配列（それらのオープ
ンリーディングフレームを含む）のＤＮＡを含む本発明
ＤＮＡを複製又は発現させるための上記複製又は発現ベ
クターで形質転換された宿主細胞も提供される。この形
質転換細胞の創製に利用される宿主細胞は、細菌、酵
母、昆虫細胞、哺乳動物細胞等のいずれでもよく、形質
転換法は慣用される各種方法に従い実施できる。

【００４２】上記形質転換細胞は、これを本発明ポリペ
プチド（そのフラグメントを含む、以下同じ）を発現さ
せ得る条件下で培養することにより、本発明ポリペプチ
ドを発現（生産）、蓄積し得る。上記培養条件は利用す
る宿主細胞に応じて熟知されている。形質転換細胞の細
胞内又は細胞外に生産、蓄積される目的ポリペプチド
は、該ポリペプチドの物理化学的及び生物学的性質を利
用した慣用の分離手段により、分離、精製できる。かく
して、工業的規模で大量に本発明ポリペプチド、即ちＡ
ＰＲＦを製造できる。従って、本発明はかかる本発明ポ
リペプチドの遺伝子組換え技術による製造方法をも提供
するものである。

【００４３】本発明ポリペプチド（例えば配列番号：１
又は：５で示されるもの）は、（１）生体又は培養細胞
から精製単離する方法、（２）ペプチド合成する方法、
（３）遺伝子組換え技術を用いて生産する方法、等の各
種方法により製造でき、工業的には特に上記（３）の方
法が好ましい。

【００４４】該遺伝子組換え技術による本発明ポリペプ
チドの製造は、より好ましくは以下のような発現系（宿
主−ベクター系）で実施できる。

【００４５】即ち、例えば、大腸菌発現系においては、
まず蛋白部分をコードするＤＮＡ（例えば、配列番号：
２又は：６で示される塩基配列をコードするＤＮＡ）
を、適当なプロモーター、例えばｔｒｐプロモーター、
ｌａｃプロモーター、λＰＬプロモーター、Ｔ７プロモ
ーター等の下流に接続し、大腸菌内で機能するベクタ
ー、例えばｐＢＲ３２２、ｐＵＣ１８、ｐＵＣ１９等に
挿入して発現ベクターを作製する。次に、この発現ベク
ターで形質転換した大腸菌、例えばE.coliＤＨ１、E.co
liＪＭ１０９、E.coliＨＢ１０１株等を適当な培地で培
養し、菌体より目的ポリペプチドを得ることができる。
また、バクテリアのシグナルペプチド、例えばｐｅｌＢ
のシグナルペプチド等を利用すれば、ペリプラズム中に
目的ポリペプチドを分泌させ得る。更に、他のポリペプ
チドとの融合蛋白(fusion protein)として本発明ポリペ
プチドを生産させることもできる。

【００４６】哺乳動物細胞発現系においては、まず例え
ば配列番号：３又は：７で示される塩基配列をコードす
るＤＮＡを、例えばレトロウイルスベクター、パピロー
マウイルスベクター、ワクシニアウイルスベクター、Ｓ
Ｖ４０系ベクター等の適当なベクター中の適当なプロモ
ーター、例えばＳＶ４０プロモーター、ＬＴＲプロモー
ター、メタロチオネインプロモーター等の下流に挿入し
て発現ベクターを作製する。次に、得られた発現ベクタ
ーで適当な哺乳動物細胞、例えば、サルＣＯＳ−７細
胞、チャイニーズハムスターＣＨＯ細胞、マウスＬ細胞
等を形質転換し、形質転換体を適当な培地で培養するこ
とによって、その培養液中に目的ポリペプチドが分泌さ
れる。

【００４７】以上のようにして得られる本発明ポリペプ
チド、即ち転写調節物質ＡＰＲＦは、前述したように、
核内のＩＬ−６誘導性遺伝子の特定ＤＮＡ部位に結合し
て、該遺伝子の細胞内シグナル伝達に関与する転写を調
節する機能を有しており、例えばＩＬ−６の作用に起因
する病態の解明、ひいてはその治療のための上記機能阻
害剤の研究、開発に有効である。

【００４８】また、本発明ＡＰＲＦの利用によれば、該
ＡＰＲＦの機能を阻害する物質の検索、評価を行なうこ
とができ、本発明はかかるＡＰＲＦ機能阻害物質の検索
法をも提供する。これは例えば本発明ＡＰＲＦのｃＤＮ
Ａをプローブとして、ＡＰＲＦの組織や細胞での発現量
を、ノザン分析法等の通常の測定技術に従い測定するこ
とにより実施できる。

【００４９】上記ＡＰＲＦの機能には、そのリン酸化、
核への移行、ＤＮＡへの結合の全てが含まれ、該機能の
阻害とは、それらのいずれか少なくともひとつの阻害を
意味する。即ち、本発明者らは、ＡＰＲＦが通常状態
で、ある種の細胞内に存在し、ＩＬ−６が細胞に作用し
た時にリン酸化を受けて活性化されることを見出した。
転写調節物質がリン酸化を受けると、核内に移行し、固
有のＤＮＡ配列に結合するようになることが知られてい
る。従って、ＡＰＲＦの機能の阻害はリン酸化段階の阻
害、核への移行段階の阻害、ＡＰＲＦ蛋白質そのものの
発現段階の阻害などによって達成される。

【００５０】更に、本発明によれば、ＡＰＲＦの機能を
阻害する物質を有効成分として含有するＡＰＲＦ機能阻
害剤も提供される。

【００５１】上記有効成分には、例えば配列番号：１又
は：５で示されるアミノ酸配列を含むポリペプチド、そ
のホモローグ又はそれらのフラグメントで感作された哺
乳動物から得られる抗体、ＡＰＲＦに結合能をもつ核酸
もしくは核酸誘導体、ＡＰＲＦ遺伝子のアンチセンス核
酸もしくはアンチセンス核酸を含む発現ベクター、ＡＰ
ＲＦのｍＲＮＡを分解するリボザイム等が含まれる。

【００５２】上記ＡＰＲＦ機能阻害物質としての抗ＡＰ
ＲＦ抗体は、通常の方法に従って、例えば本発明のＡＰ
ＲＦのアミノ酸配列をもとに、適当な免疫原としてのペ
プチドを合成し、それを動物に投与して免疫（感作）す
ることによって、容易に製造できる。

【００５３】こうして得られたＡＰＲＦを認識する抗体
は、上記の通りＡＰＲＦの機能阻害物質として有用であ
ると共に、ＡＰＲＦの細胞内や生体内での挙動を知る上
でも、重要な物質である。また、該抗体の認識部位をも
とに、低分子量のＡＰＲＦ阻害剤を設計することもで
き、かかる低分子量物質も本発明抗体に含まれる。

【００５４】また、ＡＰＲＦの機能抑制のためには、Ａ
ＰＲＦの遺伝子のアンチセンス核酸をそのままもしくは
適切な発現ベクターに導入したものを、細胞もしくは生
体に投与ればよく、このようなアンチセンス核酸もしく
はこれを含む発現ベクターも、本発明のＡＰＲＦ機能阻
害剤の有効成分として利用できる。

【００５５】更に、本発明ＡＰＲＦのｍＲＮＡを分解す
るリボサイムも上記と同様のＡＰＲＦ機能阻害作用を奏
し得、従ってこれも本発明のＡＰＲＦ機能阻害剤の有効
成分として利用できる。

【００５６】尚、ＡＰＲＦ蛋白質もしくは、ＡＰＲＦを
遺伝子操作によって部分的に改変した誘導体は、細胞内
もしくは生体内において、ＡＰＲＦの機能の補完もしく
は抑制に用いることができる。同じ目的は、ＡＰＲＦの
遺伝子もしくはＡＰＲＦを遺伝子操作によって部分的に
改変した誘導体の遺伝子を細胞内もしくは生体に投与す
ることによって達成できる。

【００５７】このように、本発明は、本発明ＡＰＲＦの
機能を阻害する物質を有効成分として含有する阻害剤を
提供するものであり、該阻害剤は、これが細胞内乃至生
体内においてその作用を発揮し得る適宜の製剤形態（投
与形態）、例えば表面に適当な修飾を施して細胞核内に
直接有効成分が取り込まれるように設計されたリポソー
ム製剤等の形態に調製され、該形態に応じた投与経路に
より投与される。

【００５８】かくして本発明阻害剤の利用によれば、Ｉ
Ｌ−６に由来する病態の治療の新しい方法が見出され
る。

【００５９】本発明のＡＰＲＦはＩＬ−６の細胞内シグ
ナル伝達に関与する蛋白質として本発明者らが新規に単
離、同定したものである。しかし、一般的に転写調節物
質は他の幾つかの生理活性物質の細胞内シグナル伝達に
も関与する場合がある。従って、本発明ＡＰＲＦの阻害
は、ＩＬ−６のみならず、ＡＰＲＦの伝達する他の生理
活性物質の誘導する病態の治療にも役立つ。実際に本発
明者らは別途、ＩＬ−６のみでなく、他のサイトカイ
ン、例えばオンコスタチンＭ(oncostatin M)、白血病抑
制因子(leukemia inhibitory factor)、インターロイキ
ン１１(interleukin 11)、毛様体神経発育因子(ciliary
neurotrophic factor) 等によって、ＡＰＲＦのリン酸
化が誘導されることを別個に発見している。従って、本
発明ＡＰＲＦ機能阻害剤は、之等サイトカイン類の関係
する病態の治療にも役立つ。

【００６０】

【実施例】以下、実施例により本発明をより詳細に、具
体的に説明するが、勿論これによって本発明が制限され
るものではない。

【００６１】

【実施例１】ＡＰＲＦの単離ＡＰＲＦは、ヒトＩＬ−６を投与して１５分後に屠殺し
たマウスから摘出された肝臓の核抽出物より単離した。

【００６２】（１）核抽出物の単離核抽出物は、ベゲンカ(Wegenka,U.M.)らの方法［Mol. C
ell. Biol.,13,276(1993) ］の変法を用いて調製した。

【００６３】即ち、マウスに精製ヒトＩＬ−６（５μg/
マウス）を静注し、１５分後に屠殺した。摘出した肝臓
を１mMオルトバナデート(orthovanadate) を含有する、
氷冷したハンクス（HANKS)溶液にすばやく浸した。次
に、０．３Ｍショ糖を添加したホモジネーション用緩衝
液（１０mM HEPES緩衝液（pH７．６）、０．５mMスペル
ミジン(spermidine)、０．１５mMスペルミン(spermin
e)、２５mMＫＣｌ、１mM EDTA 、１mM EGTA 、１mMジチ
オスレイトール(dithiothreitol,DTT)、１mMフェニルメ
チルスルホニルフロリド(PMSF)及び１０％グリセロール
からなる）（摘出肝臓１個当り３ml）中、氷冷した電動
テフロン−ガラスホモジナイザーで２０回往復させてホ
モジネートした。

【００６４】ホモジネートする前に、アプロチニン（１
０μg/ml）、ロイペプチン（２μg/ml）、ペプスタチン
（２μg/ml）及び１mMオルソバナデートを加えた。ホモ
ジネートに２Ｍショ糖を含む前記のホモジネート緩衝液
を重層させ、４℃で３０分間遠心分離器（型式SW28、日
立製作所製造）を用いて２７０００rpm で遠心分離し
て、核画分を単離した。

【００６５】上清を除去した後、１０個の肝臓から集め
られた核画分を、核抽出用緩衝液（５０mM Tris 緩衝液
（pH７．８) 、４２０mMＫＣｌ、５mMＭｇＣｌ₂、０．
１mMEDTA 、２mM DTT及び０．５mM PMSF からなる）１m
l中、種々のプロテアーゼ阻害剤及びホスファターゼ阻
害剤と一緒に再懸濁させた。混合物を４℃で３０分間ゆ
っくりと攪拌した後、３０分間、遠心分離器、SW28（２
７０００rpm)で遠心分離した。得られた上清を、種々の
プロテアーゼ阻害剤及びホスファターゼ阻害剤を添加し
た透析用緩衝液（２０mM HEPES緩衝液（pH７．８）、５
０mMＫＣｌ、１２．５mMＭｇＣｌ₂、１mM EDTA 、１mM
DTT、１mM PMSF 、０．１％ノニデット(Nonidet)P-40
（商品名、ＢＤＨラボラトリー社製）及び２０％グリセ
ロールからなる）に対して透析した。抽出物は不溶物を
除去するため再度遠心分離にかけた。

【００６６】（２）ＡＰＲＦの単離（１）で得られた核抽出物（マウス肝臓３０００個分）
を、サケ精子ＤＮＡ（２００μg/ml）の存在下、ＡＰＲ
Ｆバインディングサイトと高い親和性を有するオリゴヌ
クレオチド（５′−ビオチン化タンデムパリンドローム
ＡＰＲＦコンセンサスシークエンス（即ち、２×CCTTCC
GGGAATTC）を含むストレプトアビジンを結合させたパラ
マグネティックビーズ［ダイナビーズ(Dynabeads)M-280
ストレプトアビジン（商品名）、ダイナール（Dynal)社
製］と共に、４℃で３０分間反応させた。

【００６７】結合した蛋白を、洗浄用溶液（２０mM HEP
ES緩衝液（pH７．９）、１mM EDTA、５mMＭｇＣｌ₂、
０．０５％ NP-40及び１０％グリセロールからなる）で
十分に洗浄した後、１M ＫＣｌを含有する前記洗浄用溶
液で溶出した。溶出液をすぐに前記洗浄用溶液で希釈し
た後、再度、ＡＰＲＦバインディングサイトを結合した
マグネティックビーズと共に反応させた。

【００６８】ＤＮＡアフィニティークロマトグラフィー
の操作を３回くり返した後、溶出物をSDS-PAGEで分離し
た。精製された物質には、９５Ｋｄのポリペプチド（メ
インピーク）及び８５Ｋｄと７０Ｋｄのポリペプチド
（サブピーク）が含まれていた。之等のバンドはいずれ
もチロシン残基がリン酸化されており、また、ＩＬ−６
未処理細胞から得られた抽出物では検出されなかった。

【００６９】溶出された９５Ｋｄのリン酸化蛋白のバン
ドを１０％(v/v) トリクロロ酢酸で析出させ、アセトン
で洗浄後、８M ウレア及び１０mM Tris 緩衝液（pH９．
０）からなる緩衝液に溶解させた。該蛋白を３７℃で６
時間、リジルエンドペプチターゼで消化した。得られた
ペプチドを逆層ＨＰＬＣ（カラム：ＲＰ−３００（アプ
ライドバイオシステムズ(Applied Biosystems)社製、１
mm×２５cm）で０．１％トリフルオロ酢酸を含有したア
セトニトリルのグラジエントを用いて分離した。

【００７０】分離した断片ペプチドを集め、自動アミノ
酸シークエンサー（型式 477A 、アプライドバイオシス
テムズ社製）でシークエンスした結果、以下のアミノ酸
配列を有していることが判明した。以下、この断片をペ
プチド３と呼ぶ。ＴｈｒＧｌｎＩｌｅＧｌｎＳｅｒＶａｌＧ
ｌｕＰｏｒＴｙｒ

【００７１】

【実施例２】ＡＰＲＦのｃＤＮＡクローニングマウス肝臓λｇｔ１１ｃＤＮＡライブラリー（CLML 103
5b、クローンテック社製）から得られたファージテンプ
レートＤＮＡの一部を、実施例１で得られたペプチド３
からデジェネレートした下記オリゴヌクレオチド、 5'-AC(AGCT)CA(AG)AT(ACT)CA(AG)TC(AGCT)GT-3' とλgt11ベクターリバースプライマーを用いてＰＣＲ法
で増幅した。増幅は９４℃で１分間、５５℃で１分間及
び７２℃で２分間を１サイクルとして３０サイクル繰り
返して行なった。

【００７２】上記で増幅されたｃＤＮＡを、pT7 Blue T
ベクター（Novagen 社製) ベクターにサブクローニング
した結果、ペプチド３の正確なアミノ酸配列をコードす
るＤＮＡ配列を有するＰＣＲ生成物が得られていること
が判った。

【００７３】次に、マウス肝臓λgt11のｃＤＮＡライブ
ラリーとマクロファージλgt11（大阪バイオサイエンス
研究所の長田重一博士より譲渡された）のｃＤＮＡライ
ブラリーのそれぞれ約１．５×１０⁶プラークをプロー
ブとして、先のＰＣＲ生成物を用いたプラークハイブリ
ダイゼーションによりスクリーニングした。

【００７４】ハイブリダイゼーションは５×Denhardt's
溶液（０．１％Ficoll、０．１％ポリビニルピロリドン
及び０．１％ウシ血清アルブミン）と０．５％ SDS (so
diumdodecyl sulfate）を含有する６×SSC （90 mM NaC
l、90 mM クエン酸ナトリウム）中、65℃で１５時間行
ない、ハイブリダイゼーション後、フィルターは、６５
℃で３０分間１％SDS 含有２×SSD で２回洗浄した。

【００７５】いくつかのポジティブクローンを単離後、
シークエンス解析に供した。ｃＤＮＡの塩基配列は、ジ
デオキシ塩基配列決定法（dideoxy chain termination
method）により、二本鎖について解析した。

【００７６】その結果、２３１０ｂｐの転写解読枠（配
列番号：６に示す）を持つマウスＡＰＲＦの完全長ｃＤ
ＮＡクローンと解析された。

【００７７】この全長の塩基配列を配列番号：７に示
す。また、転写解読枠より推定されるアミノ酸配列を配
列番号：５に示す。

【００７８】同じＰＣＲ生成物をプローブとして用い
て、上記ハイブリダイゼーションと同一条件で、ヒト胎
盤ｃＤＮＡライブラリー（CLHL 1008b、Clontech社製）
について同様のスクリーニングを行なって、ヒトＡＰＲ
ＦのｃＤＮＡを単離した。

【００７９】このものの全長の塩基配列と転写解読枠の
塩基配列とをそれぞれ、配列番号：３及び：２に示す。
また、転写解読枠より推定されるアミノ酸配列を配列番
号：１に示す。

【００８０】

【実施例３】ノザンブロッティング分析全ＲＮＡをマウス組織からセシウムクロライドグラディ
エーション法により調製した。ポリ（Ａ）⁺ＲＮＡをオ
リゴ−ｄＴラテックス（Oligotex-dT30 商品名、ロッシ
ュ社製）を用いて精製した。ポリ（Ａ）⁺ＲＮＡ（３μ
g)をアガロースゲル電気泳動にかけた後、ＲＮＡをナイ
ロンメンブラン（Hybond Plus （商品名）、Amersham社
製）に移した。ヒト組織については、ＲＮＡをブロット
したメンブランが、Human Multiple Tissue Northern B
lot という商品名で Clontech 社から販売されており、
これを用いた。

【００８１】上記メンブランを、それぞれマウスのサン
プルに対しては、マウスＡＰＲＦの８０６番目から１２
００番目の、そしてヒトのサンプルに対しては、ヒトＡ
ＰＲＦの２３８番目から７２６番目のヌクレオチドを含
む放射ラベルしたＤＮＡプローブでハイブリダイズし
た。メンブランを洗浄し、乾燥後、オートラジオグラフ
ィーにかけた。内部コントロールとしては、メンブラン
をアクチンプローブで再ハイブリダイゼーションしたも
のを用いた。

【００８２】

【配列表】

【００８３】配列番号：１配列の長さ：７７０配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：蛋白質配列： Met Ala Gln Trp Asn Gln Leu Gln Gln Leu Asp Thr Arg Tyr Leu Glu 1 5 10 15 Gln Leu His Gln Leu Tyr Ser Asp Ser Phe Pro Met Glu Leu Arg Gln 20 25 30 Phe Leu Ala Pro Trp Ile Glu Ser Gln Asp Trp Ala Tyr Ala Ala Ser 35 40 45 Lys Glu Ser His Ala Thr Leu Val Phe His Asn Leu Leu Gly Glu Ile 50 55 60 Asp Gln Gln Tyr Ser Arg Phe Leu Gln Glu Ser Asn Val Leu Tyr Gln 65 70 75 80 His Asn Leu Arg Arg Ile Lys Gln Phe Leu Gln Ser Arg Tyr Leu Glu 85 90 95 Lys Pro Met Glu Ile Ala Arg Ile Val Ala Arg Cys Leu Trp Glu Glu 100 105 110 Ser Arg Leu Leu Gln Thr Ala Ala Thr Ala Ala Gln Gln Gly Gly Gln 115 120 125 Ala Asn His Pro Thr Ala Ala Val Val Thr Glu Lys Gln Gln Met Leu 130 135 140 Glu Gln His Leu Gln Asp Val Arg Lys Arg Val Gln Asp Leu Glu Gln 145 150 155 160 Lys Met Lys Val Val Glu Asn Leu Gln Asp Asp Phe Asp Phe Asn Tyr 165 170 175 Lys Thr Leu Lys Ser Gln Gly Asp Met Gln Asp Leu Asn Gly Asn Asn 180 185 190 Gln Ser Val Thr Arg Gln Lys Met Gln Gln Leu Glu Gln Met Leu Thr 195 200 205 Ala Leu Asp Gln Met Arg Arg Ser Ile Val Ser Glu Leu Ala Gly Leu 210 215 220 Leu Ser Ala Met Glu Tyr Val Gln Lys Thr Leu Thr Asp Glu Glu Leu 225 230 235 240 Ala Asp Trp Lys Arg Arg Gln Gln Ile Ala Cys Ile Gly Gly Pro Pro 245 250 255 Asn Ile Cys Leu Asp Arg Leu Glu Asn Trp Ile Thr Ser Leu Ala Glu 260 265 270 Ser Gln Leu Gln Thr Arg Gln Gln Ile Lys Lys Leu Glu Glu Leu His 275 280 285 Gln Lys Val Ser Tyr Lys Gly Asp Pro Ile Val Gln His Arg Pro Met 290 295 300 Leu Glu Glu Arg Ile Val Glu Leu Phe Arg Asn Leu Met Lys Ser Ala 305 310 315 320 Phe Val Val Glu Arg Gln Pro Cys Met Pro Met His Pro Asp Arg Pro 325 330 335 Leu Val Ile Lys Thr Gly Val Gln Phe Thr Thr Lys Val Arg Leu Leu 340 345 350 Val Lys Phe Pro Glu Leu Asn Tyr Gln Leu Lys Ile Lys Val Cys Ile 355 360 365 Asp Lys Asp Ser Gly Asp Val Ala Ala Leu Arg Gly Ser Arg Lys Phe 370 375 380 Asn Ile Leu Gly Thr Asn Thr Lys Val Met Asn Met Glu Glu Ser Asn 385 390 395 400 Asn Gly Ser Leu Ser Ala Glu Phe Lys His Leu Thr Leu Arg Glu Gln 405 410 415 Arg Cys Gly Asn Gly Gly Arg Ala Asn Cys Asp Ala Ser Leu Ile Val 420 425 430 Thr Glu Glu Leu His Leu Ile Thr Phe Glu Thr Glu Val Tyr His Gln 435 440 445 Gly Leu Lys Ile Asp Leu Glu Thr His Ser Leu Ser Val Val Val Ile 450 455 460 Ser Asn Ile Cys Gln Met Pro Asn Ala Trp Ala Ser Ile Leu Trp Tyr 465 470 475 480 Asn Met Leu Thr Asn Asn Pro Lys Asn Val Asn Phe Phe Thr Lys Pro 485 490 495 Pro Ile Gly Thr Trp Asp Gln Val Ala Glu Val Leu Ser Trp Gln Phe 500 505 510 Ser Ser Thr Thr Lys Arg Gly Leu Ser Ile Glu Gln Leu Thr Thr Leu 515 520 525 Ala Glu Lys Leu Leu Gly Pro Gly Val Asn Tyr Ser Gly Cys Gln Ile 530 535 540 Thr Trp Ala Asn Phe Cys Lys Glu Asn Met Ala Gly Lys Gly Phe Ser 545 550 555 560 Tyr Trp Val Trp Leu Asp Asn Ile Ile Asp Leu Val Lys Lys Tyr Ile 565 570 575 Leu Ala Leu Trp Asn Glu Gly Tyr Ile Met Gly Phe Ile Ser Lys Glu 580 585 590 Arg Glu Arg Ala Ile Leu Ser Thr Lys Pro Pro Gly Thr Phe Leu Leu 595 600 605 Arg Phe Ser Glu Ser Ser Lys Glu Gly Gly Val Thr Phe Thr Trp Val 610 615 620 Glu Lys Asp Ile Ser Gly Lys Thr Gln Ile Gln Ser Val Glu Pro Tyr 625 630 635 640 Thr Lys Gln Gln Leu Asn Asn Met Ser Phe Ala Glu Ile Ile Met Gly 645 650 655 Tyr Lys Ile Met Asp Ala Thr Asn Ile Leu Leu Ser Pro Leu Val Tyr 660 665 670 Leu Tyr Pro Asp Ile Pro Lys Glu Glu Ala Phe Gly Lys Tyr Cys Arg 675 680 685 Pro Glu Ser Gln Glu His Pro Glu Ala Asp Pro Gly Ser Ala Ala Pro 690 695 700 Tyr Leu Lys Thr Lys Phe Ile Cys Val Thr Pro Thr Thr Cys Ser Asn 705 710 715 720 Thr Ile Asp Leu Pro Met Ser Pro Arg Ala Leu Asp Ser Leu Met Gln 725 730 735 Phe Gly Asn Asn Gly Glu Gly Ala Glu Pro Ser Ala Gly Gly Gln Phe 740 745 750 Glu Ser Leu Thr Phe Asp Met Glu Leu Thr Ser Glu Cys Ala Thr Ser 755 760 765 Pro Met 770

【００８４】配列番号：２配列の長さ：２３１０配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA to mRNA 配列： ATGGCCCAAT GGAATCAGCT ACAGCAGCTT GACACACGGT ACCTGGAGCA GCTCCATCAG 60 CTCTACAGTG ACAGCTTCCC AATGGAGCTG CGGCAGTTTC TGGCCCCTTG GATTGAGAGT 120 CAAGATTGGG CATATGCGGC CAGCAAAGAA TCACATGCCA CTTTGGTGTT TCATAATCTC 180 CTGGGAGAGA TTGACCAGCA GTATAGCCGC TTCCTGCAAG AGTCGAATGT TCTCTATCAG 240 CACAATCTAC GAAGAATCAA GCAGTTTCTT CAGAGCAGGT ATCTTGAGAA GCCAATGGAG 300 ATTGCCCGGA TTGTGGCCCG GTGCCTGTGG GAAGAATCAC GCCTTCTACA GACTGCAGCC 360 ACTGCGGCCC AGCAAGGGGG CCAGGCCAAC CACCCCACAG CAGCCGTGGT GACGGAGAAG 420 CAGCAGATGC TGGAGCAGCA CCTTCAGGAT GTCCGGAAGA GAGTGCAGGA TCTAGAACAG 480 AAAATGAAAG TGGTAGAGAA TCTCCAGGAT GACTTTGATT TCAACTATAA AACCCTCAAG 540 AGTCAAGGAG ACATGCAAGA TCTGAATGGA AACAACCAGT CAGTGACCAG GCAGAAGATG 600 CAGCAGCTGG AACAGATGCT CACTGCGCTG GACCAGATGC GGAGAAGCAT CGTGAGTGAG 660 CTGGCGGGGC TTTTGTCAGC GATGGAGTAC GTGCAGAAAA CTCTCACGGA CGAGGAGCTG 720 GCTGACTGGA AGAGGCGGCA ACAGATTGCC TGCATTGGAG GCCCGCCCAA CATCTGCCTA 780 GATCGGCTAG AAAACTGGAT AACGTCATTA GCAGAATCTC AACTTCAGAC CCGTCAACAA 840 ATTAAGAAAC TGGAGGAGTT GCACCAAAAA GTTTCCTACA AAGGGGACCC CATTGTACAG 900 CACCGGCCGA TGCTGGAGGA GAGGATCGTG GAGCTGTTCA GAAACTTAAT GAAAAGTGCC 960 TTTGTGGTGG AGCGGCAGCC CTGCATGCCC ATGCATCCTG ACCGGCCCCT CGTCATCAAG 1020 ACCGGCGTCC AGTTCACTAC TAAAGTCAGG TTGCTGGTCA AGTTCCCTGA GTTGAATTAT 1080 CAGCTTAAAA TTAAAGTGTG CATTGACAAA GACTCTGGGG ACGTTGCAGC TCTCAGAGGA 1140 TCCCGGAAAT TTAACATTCT GGGCACAAAC ACAAAAGTGA TGAACATGGA AGAATCCAAC 1200 AACGGCAGCC TCTCTGCAGA ATTCAAACAC TTGACCCTGA GGGAGCAGAG ATGTGGGAAT 1260 GGGGGCCGAG CCAATTGTGA TGCTTCCCTG ATTGTGACTG AGGAGCTGCA CCTGATCACC 1320 TTTGAGACCG AGGTGTATCA CCAAGGTCTC AAGATTGACC TAGAGACCCA CTCCTTGTCA 1380 GTTGTGGTGA TCTCCAACAT CTGTCAGATG CCAAATGCCT GGGCGTCCAT CCTGTGGTAC 1440 AACATGCTGA CCAACAATCC CAAGAATGTG AACTTCTTCA CTAAGCCGCC AATTGGAACC 1500 TGGGACCAAG TGGCCGAGGT GCTCAGCTGG CAGTTCTCGT CCACCACCAA GCGGGGGCTG 1560 AGCATCGAGC AGCTGACAAC GCTGGCTGAG AAGCTCCTAG GGCCTGGTGT GAACTACTCA 1620 GGGTGTCAGA TCACATGGGC TAACTTCTGC AAAGAAAACA TGGCTGGCAA GGGCTTCTCC 1680 TACTGGGTCT GGCTAGACAA TATCATCGAC CTTGTGAAAA AGTATATCTT GGCCCTTTGG 1740 AATGAAGGGT ACATCATGGG TTTCATCAGC AAGGAGCGGG AGCGGGCCAT CTTGAGCACT 1800 AAGCCCCCAG GCACCTTCCT GCTGCGCTTC AGTGAAAGCA GCAAAGAAGG AGGCGTCACT 1860 TTCACTTGGG TGGAGAAGGA CATCAGCGGT AAGACCCAGA TCCAGTCCGT GGAACCATAC 1920 ACAAAGCAGC AGCTGAACAA CATGTCATTT GCTGAAATCA TCATGGGCTA TAAGATCATG 1980 GATGCTACCA ATATCCTGTT GTCTCCACTT GTCTATCTCT ATCCTGACAT TCCCAAGGAG 2040 GAGGCATTCG GGAAGTATTG TCGGCCAGAG AGCCAGGAGC ATCCTGAAGC TGACCCAGGT 2100 AGCGCTGCCC CATACCTGAA GACCAAGTTT ATCTGTGTGA CACCAACGAC CTGCAGCAAT 2160 ACCATTGACC TGCCGATGTC CCCCCGCGCT TTAGATTCAT TGATGCAGTT TGGAAATAAT 2220 GGTGAAGGTG CTGAACCCTC AGCAGGAGGG CAGTTTGAGT CCCTCACCTT TGACATGGAG 2280 TTGACCTCGG AGTGCGCTAC CTCCCCCATG 2310

【００８５】配列番号：３配列の長さ：２７８７配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA to mRNA 配列： CAGCTGGAAT TCGGGGCGGC GGCGCAGACT GGGAGGGGGA GCCGGGGGTT CCGACGTCGC 60 AGCCGAGGGA ACAAGCCCCA ACCGGATCCT GGACAGGCAC CCCGGCTTGG CGCTGTCTCT 120 CCCCCTCGGC TCGGAGAGGC CCTTCGGCCT GAGGGAGCCT CGCCGCCCGT CCCCGGCACA 180 CGCGCAGCCC CGGCCTCTCG GCCTCTGCCG GAGAAACAGG ATGGCCCAAT GGAATCAGCT 240 ACAGCAGCTT GACACACGGT ACCTGGAGCA GCTCCATCAG CTCTACAGTG ACAGCTTCCC 300 AATGGAGCTG CGGCAGTTTC TGGCCCCTTG GATTGAGAGT CAAGATTGGG CATATGCGGC 360 CAGCAAAGAA TCACATGCCA CTTTGGTGTT TCATAATCTC CTGGGAGAGA TTGACCAGCA 420 GTATAGCCGC TTCCTGCAAG AGTCGAATGT TCTCTATCAG CACAATCTAC GAAGAATCAA 480 GCAGTTTCTT CAGAGCAGGT ATCTTGAGAA GCCAATGGAG ATTGCCCGGA TTGTGGCCCG 540 GTGCCTGTGG GAAGAATCAC GCCTTCTACA GACTGCAGCC ACTGCGGCCC AGCAAGGGGG 600 CCAGGCCAAC CACCCCACAG CAGCCGTGGT GACGGAGAAG CAGCAGATGC TGGAGCAGCA 660 CCTTCAGGAT GTCCGGAAGA GAGTGCAGGA TCTAGAACAG AAAATGAAAG TGGTAGAGAA 720 TCTCCAGGAT GACTTTGATT TCAACTATAA AACCCTCAAG AGTCAAGGAG ACATGCAAGA 780 TCTGAATGGA AACAACCAGT CAGTGACCAG GCAGAAGATG CAGCAGCTGG AACAGATGCT 840 CACTGCGCTG GACCAGATGC GGAGAAGCAT CGTGAGTGAG CTGGCGGGGC TTTTGTCAGC 900 GATGGAGTAC GTGCAGAAAA CTCTCACGGA CGAGGAGCTG GCTGACTGGA AGAGGCGGCA 960 ACAGATTGCC TGCATTGGAG GCCCGCCCAA CATCTGCCTA GATCGGCTAG AAAACTGGAT 1020 AACGTCATTA GCAGAATCTC AACTTCAGAC CCGTCAACAA ATTAAGAAAC TGGAGGAGTT 1080 GCACCAAAAA GTTTCCTACA AAGGGGACCC CATTGTACAG CACCGGCCGA TGCTGGAGGA 1140 GAGGATCGTG GAGCTGTTCA GAAACTTAAT GAAAAGTGCC TTTGTGGTGG AGCGGCAGCC 1200 CTGCATGCCC ATGCATCCTG ACCGGCCCCT CGTCATCAAG ACCGGCGTCC AGTTCACTAC 1260 TAAAGTCAGG TTGCTGGTCA AGTTCCCTGA GTTGAATTAT CAGCTTAAAA TTAAAGTGTG 1320 CATTGACAAA GACTCTGGGG ACGTTGCAGC TCTCAGAGGA TCCCGGAAAT TTAACATTCT 1380 GGGCACAAAC ACAAAAGTGA TGAACATGGA AGAATCCAAC AACGGCAGCC TCTCTGCAGA 1440 ATTCAAACAC TTGACCCTGA GGGAGCAGAG ATGTGGGAAT GGGGGCCGAG CCAATTGTGA 1500 TGCTTCCCTG ATTGTGACTG AGGAGCTGCA CCTGATCACC TTTGAGACCG AGGTGTATCA 1560 CCAAGGTCTC AAGATTGACC TAGAGACCCA CTCCTTGTCA GTTGTGGTGA TCTCCAACAT 1620 CTGTCAGATG CCAAATGCCT GGGCGTCCAT CCTGTGGTAC AACATGCTGA CCAACAATCC 1680 CAAGAATGTG AACTTCTTCA CTAAGCCGCC AATTGGAACC TGGGACCAAG TGGCCGAGGT 1740 GCTCAGCTGG CAGTTCTCGT CCACCACCAA GCGGGGGCTG AGCATCGAGC AGCTGACAAC 1800 GCTGGCTGAG AAGCTCCTAG GGCCTGGTGT GAACTACTCA GGGTGTCAGA TCACATGGGC 1860 TAACTTCTGC AAAGAAAACA TGGCTGGCAA GGGCTTCTCC TACTGGGTCT GGCTAGACAA 1920 TATCATCGAC CTTGTGAAAA AGTATATCTT GGCCCTTTGG AATGAAGGGT ACATCATGGG 1980 TTTCATCAGC AAGGAGCGGG AGCGGGCCAT CTTGAGCACT AAGCCCCCAG GCACCTTCCT 2040 GCTGCGCTTC AGTGAAAGCA GCAAAGAAGG AGGCGTCACT TTCACTTGGG TGGAGAAGGA 2100 CATCAGCGGT AAGACCCAGA TCCAGTCCGT GGAACCATAC ACAAAGCAGC AGCTGAACAA 2160 CATGTCATTT GCTGAAATCA TCATGGGCTA TAAGATCATG GATGCTACCA ATATCCTGTT 2220 GTCTCCACTT GTCTATCTCT ATCCTGACAT TCCCAAGGAG GAGGCATTCG GGAAGTATTG 2280 TCGGCCAGAG AGCCAGGAGC ATCCTGAAGC TGACCCAGGT AGCGCTGCCC CATACCTGAA 2340 GACCAAGTTT ATCTGTGTGA CACCAACGAC CTGCAGCAAT ACCATTGACC TGCCGATGTC 2400 CCCCCGCGCT TTAGATTCAT TGATGCAGTT TGGAAATAAT GGTGAAGGTG CTGAACCCTC 2460 AGCAGGAGGG CAGTTTGAGT CCCTCACCTT TGACATGGAG TTGACCTCGG AGTGCGCTAC 2520 CTCCCCCATG TGAGGAGCTG AGAACGGAAG CTGCAGAAAG ATACGACTGA GGCGCCTACC 2580 TGCATTCTGC CACCCCTCAC ACAGCCAAAC CCCAGATCAT CTGAAACTAC TAACTTTGTG 2640 GTTCCAGATT TTTTTTAATC TCCTACTTCT GCTATCTTTG AGCAATCTGG GCACTTTTAA 2700 AAATAGAGAA ATGAGTGAAT GTGGGTGATC TGCTTTTATC TAAATGCAAA TAAGGATGTG 2760 TTCTCTGAGA CCCATGATCA GGGGATG 2787

【００８６】配列番号：４配列の長さ：２７８７配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA to mRNA 起源生物名：human 組織の種類：胎盤配列の特徴特徴を表わす記号：ＣＤＳ存在位置：221..2533 特徴を決定した方法：Ｐ配列： CAGCTGGAAT TCGGGGCGGC GGCGCAGACT GGGAGGGGGA GCCGGGGGTT CCGACGTCGC 60 AGCCGAGGGA ACAAGCCCCA ACCGGATCCT GGACAGGCAC CCCGGCTTGG CGCTGTCTCT 120 CCCCCTCGGC TCGGAGAGGC CCTTCGGCCT GAGGGAGCCT CGCCGCCCGT CCCCGGCACA 180 CGCGCAGCCC CGGCCTCTCG GCCTCTGCCG GAGAAACAGG ATG GCC CAA TGG AAT 235 Met Ala Gln Trp Asn 1 5 CAG CTA CAG CAG CTT GAC ACA CGG TAC CTG GAG CAG CTC CAT CAG CTC 283 Gln Leu Gln Gln Leu Asp Thr Arg Tyr Leu Glu Gln Leu His Gln Leu 10 15 20 TAC AGT GAC AGC TTC CCA ATG GAG CTG CGG CAG TTT CTG GCC CCT TGG 331 Tyr Ser Asp Ser Phe Pro Met Glu Leu Arg Gln Phe Leu Ala Pro Trp 25 30 35 ATT GAG AGT CAA GAT TGG GCA TAT GCG GCC AGC AAA GAA TCA CAT GCC 379 Ile Glu Ser Gln Asp Trp Ala Tyr Ala Ala Ser Lys Glu Ser His Ala 40 45 50 ACT TTG GTG TTT CAT AAT CTC CTG GGA GAG ATT GAC CAG CAG TAT AGC 427 Thr Leu Val Phe His Asn Leu Leu Gly Glu Ile Asp Gln Gln Tyr Ser 55 60 65 CGC TTC CTG CAA GAG TCG AAT GTT CTC TAT CAG CAC AAT CTA CGA AGA 475 Arg Phe Leu Gln Glu Ser Asn Val Leu Tyr Gln His Asn Leu Arg Arg 70 75 80 85 ATC AAG CAG TTT CTT CAG AGC AGG TAT CTT GAG AAG CCA ATG GAG ATT 523 Ile Lys Gln Phe Leu Gln Ser Arg Tyr Leu Glu Lys Pro Met Glu Ile 90 95 100 GCC CGG ATT GTG GCC CGG TGC CTG TGG GAA GAA TCA CGC CTT CTA CAG 571 Ala Arg Ile Val Ala Arg Cys Leu Trp Glu Glu Ser Arg Leu Leu Gln 105 110 115 ACT GCA GCC ACT GCG GCC CAG CAA GGG GGC CAG GCC AAC CAC CCC ACA 619 Thr Ala Ala Thr Ala Ala Gln Gln Gly Gly Gln Ala Asn His Pro Thr 120 125 130 GCA GCC GTG GTG ACG GAG AAG CAG CAG ATG CTG GAG CAG CAC CTT CAG 667 Ala Ala Val Val Thr Glu Lys Gln Gln Met Leu Glu Gln His Leu Gln 135 140 145 GAT GTC CGG AAG AGA GTG CAG GAT CTA GAA CAG AAA ATG AAA GTG GTA 715 Asp Val Arg Lys Arg Val Gln Asp Leu Glu Gln Lys Met Lys Val Val 150 155 160 165 GAG AAT CTC CAG GAT GAC TTT GAT TTC AAC TAT AAA ACC CTC AAG AGT 763 Glu Asn Leu Gln Asp Asp Phe Asp Phe Asn Tyr Lys Thr Leu Lys Ser 170 175 180 CAA GGA GAC ATG CAA GAT CTG AAT GGA AAC AAC CAG TCA GTG ACC AGG 811 Gln Gly Asp Met Gln Asp Leu Asn Gly Asn Asn Gln Ser Val Thr Arg 185 190 195 CAG AAG ATG CAG CAG CTG GAA CAG ATG CTC ACT GCG CTG GAC CAG ATG 859 Gln Lys Met Gln Gln Leu Glu Gln Met Leu Thr Ala Leu Asp Gln Met 200 205 210 CGG AGA AGC ATC GTG AGT GAG CTG GCG GGG CTT TTG TCA GCG ATG GAG 907 Arg Arg Ser Ile Val Ser Glu Leu Ala Gly Leu Leu Ser Ala Met Glu 215 220 225 TAC GTG CAG AAA ACT CTC ACG GAC GAG GAG CTG GCT GAC TGG AAG AGG 955 Tyr Val Gln Lys Thr Leu Thr Asp Glu Glu Leu Ala Asp Trp Lys Arg 230 235 240 245 CGG CAA CAG ATT GCC TGC ATT GGA GGC CCG CCC AAC ATC TGC CTA GAT 1003 Arg Gln Gln Ile Ala Cys Ile Gly Gly Pro Pro Asn Ile Cys Leu Asp 250 255 260 CGG CTA GAA AAC TGG ATA ACG TCA TTA GCA GAA TCT CAA CTT CAG ACC 1051 Arg Leu Glu Asn Trp Ile Thr Ser Leu Ala Glu Ser Gln Leu Gln Thr 265 270 275 CGT CAA CAA ATT AAG AAA CTG GAG GAG TTG CAC CAA AAA GTT TCC TAC 1099 Arg Gln Gln Ile Lys Lys Leu Glu Glu Leu His Gln Lys Val Ser Tyr 280 285 290 AAA GGG GAC CCC ATT GTA CAG CAC CGG CCG ATG CTG GAG GAG AGG ATC 1147 Lys Gly Asp Pro Ile Val Gln His Arg Pro Met Leu Glu Glu Arg Ile 295 300 305 GTG GAG CTG TTC AGA AAC TTA ATG AAA AGT GCC TTT GTG GTG GAG CGG 1195 Val Glu Leu Phe Arg Asn Leu Met Lys Ser Ala Phe Val Val Glu Arg 310 315 320 325 CAG CCC TGC ATG CCC ATG CAT CCT GAC CGG CCC CTC GTC ATC AAG ACC 1243 Gln Pro Cys Met Pro Met His Pro Asp Arg Pro Leu Val Ile Lys Thr 330 335 340 GGC GTC CAG TTC ACT ACT AAA GTC AGG TTG CTG GTC AAG TTC CCT GAG 1291 Gly Val Gln Phe Thr Thr Lys Val Arg Leu Leu Val Lys Phe Pro Glu 345 350 355 TTG AAT TAT CAG CTT AAA ATT AAA GTG TGC ATT GAC AAA GAC TCT GGG 1339 Leu Asn Tyr Gln Leu Lys Ile Lys Val Cys Ile Asp Lys Asp Ser Gly 360 365 370 GAC GTT GCA GCT CTC AGA GGA TCC CGG AAA TTT AAC ATT CTG GGC ACA 1387 Asp Val Ala Ala Leu Arg Gly Ser Arg Lys Phe Asn Ile Leu Gly Thr 375 380 385 AAC ACA AAA GTG ATG AAC ATG GAA GAA TCC AAC AAC GGC AGC CTC TCT 1435 Asn Thr Lys Val Met Asn Met Glu Glu Ser Asn Asn Gly Ser Leu Ser 390 395 400 405 GCA GAA TTC AAA CAC TTG ACC CTG AGG GAG CAG AGA TGT GGG AAT GGG 1483 Ala Glu Phe Lys His Leu Thr Leu Arg Glu Gln Arg Cys Gly Asn Gly 410 415 420 GGC CGA GCC AAT TGT GAT GCT TCC CTG ATT GTG ACT GAG GAG CTG CAC 1531 Gly Arg Ala Asn Cys Asp Ala Ser Leu Ile Val Thr Glu Glu Leu His 425 430 435 CTG ATC ACC TTT GAG ACC GAG GTG TAT CAC CAA GGT CTC AAG ATT GAC 1579 Leu Ile Thr Phe Glu Thr Glu Val Tyr His Gln Gly Leu Lys Ile Asp 440 445 450 CTA GAG ACC CAC TCC TTG TCA GTT GTG GTG ATC TCC AAC ATC TGT CAG 1627 Leu Glu Thr His Ser Leu Ser Val Val Val Ile Ser Asn Ile Cys Gln 455 460 465 ATG CCA AAT GCC TGG GCG TCC ATC CTG TGG TAC AAC ATG CTG ACC AAC 1675 Met Pro Asn Ala Trp Ala Ser Ile Leu Trp Tyr Asn Met Leu Thr Asn 470 475 480 485 AAT CCC AAG AAT GTG AAC TTC TTC ACT AAG CCG CCA ATT GGA ACC TGG 1723 Asn Pro Lys Asn Val Asn Phe Phe Thr Lys Pro Pro Ile Gly Thr Trp 490 495 500 GAC CAA GTG GCC GAG GTG CTC AGC TGG CAG TTC TCG TCC ACC ACC AAG 1771 Asp Gln Val Ala Glu Val Leu Ser Trp Gln Phe Ser Ser Thr Thr Lys 505 510 515 CGG GGG CTG AGC ATC GAG CAG CTG ACA ACG CTG GCT GAG AAG CTC CTA 1819 Arg Gly Leu Ser Ile Glu Gln Leu Thr Thr Leu Ala Glu Lys Leu Leu 520 525 530 GGG CCT GGT GTG AAC TAC TCA GGG TGT CAG ATC ACA TGG GCT AAC TTC 1867 Gly Pro Gly Val Asn Tyr Ser Gly Cys Gln Ile Thr Trp Ala Asn Phe 535 540 545 TGC AAA GAA AAC ATG GCT GGC AAG GGC TTC TCC TAC TGG GTC TGG CTA 1915 Cys Lys Glu Asn Met Ala Gly Lys Gly Phe Ser Tyr Trp Val Trp Leu 550 555 560 565 GAC AAT ATC ATC GAC CTT GTG AAA AAG TAT ATC TTG GCC CTT TGG AAT 1963 Asp Asn Ile Ile Asp Leu Val Lys Lys Tyr Ile Leu Ala Leu Trp Asn 570 575 580 GAA GGG TAC ATC ATG GGT TTC ATC AGC AAG GAG CGG GAG CGG GCC ATC 2011 Glu Gly Tyr Ile Met Gly Phe Ile Ser Lys Glu Arg Glu Arg Ala Ile 585 590 595 TTG AGC ACT AAG CCC CCA GGC ACC TTC CTG CTG CGC TTC AGT GAA AGC 2059 Leu Ser Thr Lys Pro Pro Gly Thr Phe Leu Leu Arg Phe Ser Glu Ser 600 605 610 AGC AAA GAA GGA GGC GTC ACT TTC ACT TGG GTG GAG AAG GAC ATC AGC 2107 Ser Lys Glu Gly Gly Val Thr Phe Thr Trp Val Glu Lys Asp Ile Ser 615 620 625 GGT AAG ACC CAG ATC CAG TCC GTG GAA CCA TAC ACA AAG CAG CAG CTG 2155 Gly Lys Thr Gln Ile Gln Ser Val Glu Pro Tyr Thr Lys Gln Gln Leu 630 635 640 645 AAC AAC ATG TCA TTT GCT GAA ATC ATC ATG GGC TAT AAG ATC ATG GAT 2203 Asn Asn Met Ser Phe Ala Glu Ile Ile Met Gly Tyr Lys Ile Met Asp 650 655 660 GCT ACC AAT ATC CTG TTG TCT CCA CTT GTC TAT CTC TAT CCT GAC ATT 2251 Ala Thr Asn Ile Leu Leu Ser Pro Leu Val Tyr Leu Tyr Pro Asp Ile 665 670 675 CCC AAG GAG GAG GCA TTC GGG AAG TAT TGT CGG CCA GAG AGC CAG GAG 2299 Pro Lys Glu Glu Ala Phe Gly Lys Tyr Cys Arg Pro Glu Ser Gln Glu 680 685 690 CAT CCT GAA GCT GAC CCA GGT AGC GCT GCC CCA TAC CTG AAG ACC AAG 2347 His Pro Glu Ala Asp Pro Gly Ser Ala Ala Pro Tyr Leu Lys Thr Lys 695 700 705 TTT ATC TGT GTG ACA CCA ACG ACC TGC AGC AAT ACC ATT GAC CTG CCG 2395 Phe Ile Cys Val Thr Pro Thr Thr Cys Ser Asn Thr Ile Asp Leu Pro 710 715 720 725 ATG TCC CCC CGC GCT TTA GAT TCA TTG ATG CAG TTT GGA AAT AAT GGT 2443 Met Ser Pro Arg Ala Leu Asp Ser Leu Met Gln Phe Gly Asn Asn Gly 730 735 740 GAA GGT GCT GAA CCC TCA GCA GGA GGG CAG TTT GAG TCC CTC ACC TTT 2491 Glu Gly Ala Glu Pro Ser Ala Gly Gly Gln Phe Glu Ser Leu Thr Phe 745 750 755 GAC ATG GAG TTG ACC TCG GAG TGC GCT ACC TCC CCC ATG TGAGGAGCTG 2540 Asp Met Glu Leu Thr Ser Glu Cys Ala Thr Ser Pro Met 760 765 770 AGAACGGAAG CTGCAGAAAG ATACGACTGA GGCGCCTACC TGCATTCTGC CACCCCTCAC 2600 ACAGCCAAAC CCCAGATCAT CTGAAACTAC TAACTTTGTG GTTCCAGATT TTTTTTAATC 2660 TCCTACTTCT GCTATCTTTG AGCAATCTGG GCACTTTTAA AAATAGAGAA ATGAGTGAAT 2720 GTGGGTGATC TGCTTTTATC TAAATGCAAA TAAGGATGTG TTCTCTGAGA CCCATGATCA 2780 GGGGATG 2787

【００８７】配列番号：５配列の長さ：７７０配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：蛋白質配列： Met Ala Gln Trp Asn Gln Leu Gln Gln Leu Asp Thr Arg Tyr Leu Glu 1 5 10 15 Gln Leu His Gln Leu Tyr Ser Asp Ser Phe Pro Met Glu Leu Arg Gln 20 25 30 Phe Leu Ala Pro Trp Ile Glu Ser Gln Asp Trp Ala Tyr Ala Ala Ser 35 40 45 Lys Glu Ser His Ala Thr Leu Val Phe His Asn Leu Leu Gly Glu Ile 50 55 60 Asp Gln Gln Tyr Ser Arg Phe Leu Gln Glu Ser Asn Val Leu Tyr Gln 65 70 75 80 His Asn Leu Arg Arg Ile Lys Gln Phe Leu Gln Ser Arg Tyr Leu Glu 85 90 95 Lys Pro Met Glu Ile Ala Arg Ile Val Ala Arg Cys Leu Trp Glu Glu 100 105 110 Ser Arg Leu Leu Gln Thr Ala Ala Thr Ala Ala Gln Gln Gly Gly Gln 115 120 125 Ala Asn His Pro Thr Ala Ala Val Val Thr Glu Lys Gln Gln Met Leu 130 135 140 Glu Gln His Leu Gln Asp Val Arg Lys Arg Val Gln Asp Leu Glu Gln 145 150 155 160 Lys Met Lys Val Val Glu Asn Leu Gln Asp Asp Phe Asp Phe Asn Tyr 165 170 175 Lys Thr Leu Lys Ser Gln Gly Asp Met Gln Asp Leu Asn Gly Asn Asn 180 185 190 Gln Ser Val Thr Arg Gln Lys Met Gln Gln Leu Glu Gln Met Leu Thr 195 200 205 Ala Leu Asp Gln Met Arg Arg Ser Ile Val Ser Glu Leu Ala Gly Leu 210 215 220 Leu Ser Ala Met Glu Tyr Val Gln Lys Thr Leu Thr Asp Glu Glu Leu 225 230 235 240 Ala Asp Trp Lys Arg Arg Gln Gln Ile Ala Cys Ile Gly Gly Pro Pro 245 250 255 Asn Ile Cys Leu Asp Arg Leu Glu Asn Trp Ile Thr Ser Leu Ala Glu 260 265 270 Ser Gln Leu Gln Thr Arg Gln Gln Ile Lys Lys Leu Glu Glu Leu Gln 275 280 285 Gln Lys Val Ser Tyr Lys Gly Asp Pro Ile Val Gln His Arg Pro Met 290 295 300 Leu Glu Glu Arg Ile Val Glu Leu Phe Arg Asn Leu Met Lys Ser Ala 305 310 315 320 Phe Val Val Glu Arg Gln Pro Cys Met Pro Met His Pro Asp Arg Pro 325 330 335 Leu Val Ile Lys Thr Gly Val Gln Phe Thr Thr Lys Val Arg Leu Leu 340 345 350 Val Lys Phe Pro Glu Leu Asn Tyr Gln Leu Lys Ile Lys Val Cys Ile 355 360 365 Asp Lys Asp Ser Gly Asp Val Ala Ala Leu Arg Gly Ser Arg Lys Phe 370 375 380 Asn Ile Leu Gly Thr Asn Thr Lys Val Ile Asn Met Glu Glu Ser Asn 385 390 395 400 Asn Gly Ser Leu Ser Ala Glu Phe Lys His Leu Thr Leu Arg Glu Gln 405 410 415 Arg Cys Gly Asn Gly Gly Arg Ala Asn Cys Asp Ala Ser Leu Ile Val 420 425 430 Thr Glu Glu Leu His Leu Ile Thr Phe Glu Thr Glu Val Tyr His Gln 435 440 445 Gly Leu Lys Ile Asp Leu Glu Thr His Ser Leu Pro Val Val Val Ile 450 455 460 Ser Asn Ile Cys Gln Met Pro Asn Ala Trp Ala Ser Ile Leu Trp Tyr 465 470 475 480 Asn Met Leu Thr Asn Asn Pro Lys Asn Val Asn Phe Phe Thr Lys Pro 485 490 495 Pro Ile Gly Thr Trp Asp Gln Val Ala Glu Val Leu Ser Trp Gln Phe 500 505 510 Ser Ser Thr Thr Lys Arg Gly Leu Ser Ile Glu Gln Leu Thr Thr Leu 515 520 525 Ala Glu Lys Leu Leu Gly Pro Gly Val Asn Tyr Ser Gly Cys Gln Ile 530 535 540 Thr Trp Ala Lys Phe Cys Lys Glu Asn Met Ala Gly Lys Gly Phe Ser 545 550 555 560 Phe Trp Val Trp Leu Asp Asn Ile Ile Asp Leu Val Lys Lys Tyr Ile 565 570 575 Leu Ala Leu Trp Asn Glu Gly Tyr Ile Met Gly Phe Ile Ser Lys Glu 580 585 590 Arg Glu Arg Ala Ile Leu Ser Thr Lys Pro Pro Gly Thr Phe Leu Leu 595 600 605 Arg Phe Ser Glu Ser Ser Lys Glu Gly Gly Val Thr Phe Thr Trp Val 610 615 620 Glu Lys Asp Ile Ser Gly Lys Thr Gln Ile Gln Ser Val Glu Pro Tyr 625 630 635 640 Thr Lys Gln Gln Leu Asn Asn Met Ser Phe Ala Glu Ile Ile Met Gly 645 650 655 Tyr Lys Ile Met Asp Ala Thr Asn Ile Leu Val Ser Pro Leu Val Tyr 660 665 670 Leu Tyr Pro Asp Ile Pro Lys Glu Glu Ala Phe Gly Lys Tyr Cys Arg 675 680 685 Pro Glu Ser Gln Glu His Pro Glu Ala Asp Pro Gly Ser Ala Ala Pro 690 695 700 Tyr Leu Lys Thr Lys Phe Ile Cys Val Thr Pro Thr Thr Cys Ser Asn 705 710 715 720 Thr Ile Asp Leu Pro Met Ser Pro Arg Thr Leu Asp Ser Leu Met Gln 725 730 735 Phe Gly Asn Asn Gly Glu Gly Ala Glu Pro Ser Ala Gly Gly Gln Phe 740 745 750 Glu Ser Leu Thr Phe Asp Met Asp Leu Thr Ser Glu Cys Ala Thr Ser 755 760 765 Pro Met 770

【００８８】配列番号：６配列の長さ：２３１０配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA to mRNA 配列： ATGGCTCAGT GGAACCAGCT GCAGCAGCTG GACACACGCT ACCTGGAGCA GCTGCACCAG 60 CTGTACAGCG ACAGCTTCCC CATGGAGCTG CGGCAGTTCC TGGCACCTTG GATTGAGAGT 120 CAAGACTGGG CATATGCAGC CAGCAAAGAG TCACATGCCA CGTTGGTGTT TCATAATCTC 180 TTGGGTGAAA TTGACCAGCA ATATAGCCGA TTCCTGCAAG AGTCCAATGT CCTCTATCAG 240 CACAACCTTC GAAGAATCAA GCAGTTTCTG CAGAGCAGGT ATCTTGAGAA GCCAATGGAA 300 ATTGCCCGGA TCGTGGCCCG ATGCCTGTGG GAAGAGTCTC GCCTCCTCCA GACGGCAGCC 360 ACGGCAGCCC AGCAAGGGGG CCAGGCCAAC CACCCAACAG CTGCCGTAGT GACAGAGAAG 420 CAGCAGATGT TGGAGCAGCA TCTTCAGGAT GTCCGGAAGC GAGTGCAGGA TCTAGAACAG 480 AAAATGAAGG TGGTGGAGAA CCTCCAGGAC GACTTTGATT TCAACTACAA AACCCTCAAG 540 AGCCAAGGAG ACATGCAGGA TCTGAATGGA AACAACCAGT CTGTGACCAG ACAGAAGATG 600 CAGCAGCTGG AACAGATGCT CACAGCCCTG GACCAGATGC GGAGAAGCAT TGTGAGTGAG 660 CTGGCGGGGC TCTTGTCAGC AATGGAGTAC GTGCAGAAGA CACTGACTGA TGAAGAGCTG 720 GCTGACTGGA AGAGGCGGCA GCAGATCGCG TGCATCGGAG GCCCTCCCAA CATCTGCCTG 780 GACCGTCTGG AAAACTGGAT AACTTCATTA GCAGAATCTC AACTTCAGAC CCGCCAACAA 840 ATTAAGAAAC TGGAGGAGCT GCAGCAGAAA GTGTCCTACA AGGGCGACCC TATCGTGCAG 900 CACCGGCCCA TGCTGGAGGA GAGGATCGTG GAGCTGTTCA GAAACTTAAT GAAGAGTGCC 960 TTCGTGGTGG AGCGGCAGCC CTGCATGCCC ATGCACCCGG ACCGGCCCTT AGTCATCAAG 1020 ACTGGTGTCC AGTTTACCAC GAAAGTCAGG TTGCTGGTCA AATTTCCTGA GTTGAATTAT 1080 CAGCTTAAAA TTAAAGTGTG CATTGATAAA GACTCTGGCG ATGTTGCTGC CCTCAGAGGG 1140 TCTCGGAAAT TTAACATTCT GGGCACGAAC ACAAAAGTGA TTAACATGGA GGAGTCTAAC 1200 AACGGCAGCC TGTCTGCAGA GTTCAAGCAC CTGACCCTTA GGGAGCAGAG ATGTGGGAAT 1260 GGAGGCCGTG CCAATTGTGA TGCCTCCTTG ATCGTGACTG AGGAGCTGCA CCTGATCACC 1320 TTCGAGACTG AGGTGTACCA CCAAGGCCTC AAGATTGACC TAGAGACCCA CTCCTTGCCA 1380 GTTGTGGTGA TCTCCAACAT CTGTCAGATG CCAAATGCTT GGGCATCAAT CCTGTGGTAT 1440 AACATGCTGA CCAATAACCC CAAGAACGTG AACTTCTTCA CTAAGCCGCC AATTGGAACC 1500 TGGGACCAAG TGGCCGAGGT GCTCAGCTGG CAGTTCTCGT CCACCACCAA GCGGGGGCTG 1560 AGCATCGAGC AGCTGACAAC GCTGGCTGAG AAGCTCCTAG GGCCTGGTGT GAACTACTCA 1620 GGGTGTCAGA TCACATGGGC TAAATTCTGC AAAGAAAACA TGGCTGGCAA GGGCTTCTCC 1680 TTCTGGGTCT GGCTAGACAA TATCATCGAC CTTGTGAAAA AGTATATCTT GGCCCTTTGG 1740 AATGAAGGGT ACATCATGGG TTTCATCAGC AAGGAGCGGG AGCGGGCCAT CCTAAGCACA 1800 AAGCCCCCGG GCACCTTCCT ACTGCGCTTC AGCGAGAGCA GCAAAGAAGG AGGGGTCACT 1860 TTCACTTGGG TGGAAAAGGA CATCAGTGGC AAGACCCAGA TCCAGTCTGT AGAGCCATAC 1920 ACCAAGCAGC AGCTGAACAA CATGTCATTT GCTGAAATCA TCATGGGCTA TAAGATCATG 1980 GATGCGACCA ACATCCTGGT GTCTCCACTT GTCTACCTCT ACCCCGACAT TCCCAAGGAG 2040 GAGGCATTTG GAAAGTACTG TAGGCCCGAG AGCCAGGAGC ACCCCGAAGC CGACCCAGGT 2100 AGTGCTGCCC CGTACCTGAA GACCAAGTTC ATCTGTGTGA CACCAACGAC CTGCAGCAAT 2160 ACCATTGACC TGCCGATGTC CCCCCGCACT TTAGATTCAT TGATGCAGTT TGGAAATAAC 2220 GGTGAAGGTG CTGAGCCCTC AGCAGGAGGG CAGTTTGAGT CGCTCACGTT TGACATGGAT 2280 CTGACCTCGG AGTGTGCTAC CTCCCCCATG 2310

【００８９】配列番号：７配列の長さ：２６５２配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA to mRNA 配列： CTGGAGGGGC TGTAATTCAG CGGTTTCCGG AGCTGCAGTG TAGACAGGGA GGGGGAACCT 60 GGGGTTCCGA CGTCGCGGCG GAGGGAACGA GCCCTAACCG GATCGCTGAG GTACAACCCC 120 GCTCGGTGTC GCCTGACCGC GTCGGCTAGG AGAGGCCAGG CGGCCCTCGG GAGCCCAGCA 180 GCTCGCGCCT GGAGTCAGCG CAGGCCGGCC AGTCGGGCCT CAGCCCCGGA GACAGTCGAG 240 ACCCCTGACT GCAGCAGGAT GGCTCAGTGG AACCAGCTGC AGCAGCTGGA CACACGCTAC 300 CTGGAGCAGC TGCACCAGCT GTACAGCGAC AGCTTCCCCA TGGAGCTGCG GCAGTTCCTG 360 GCACCTTGGA TTGAGAGTCA AGACTGGGCA TATGCAGCCA GCAAAGAGTC ACATGCCACG 420 TTGGTGTTTC ATAATCTCTT GGGTGAAATT GACCAGCAAT ATAGCCGATT CCTGCAAGAG 480 TCCAATGTCC TCTATCAGCA CAACCTTCGA AGAATCAAGC AGTTTCTGCA GAGCAGGTAT 540 CTTGAGAAGC CAATGGAAAT TGCCCGGATC GTGGCCCGAT GCCTGTGGGA AGAGTCTCGC 600 CTCCTCCAGA CGGCAGCCAC GGCAGCCCAG CAAGGGGGCC AGGCCAACCA CCCAACAGCT 660 GCCGTAGTGA CAGAGAAGCA GCAGATGTTG GAGCAGCATC TTCAGGATGT CCGGAAGCGA 720 GTGCAGGATC TAGAACAGAA AATGAAGGTG GTGGAGAACC TCCAGGACGA CTTTGATTTC 780 AACTACAAAA CCCTCAAGAG CCAAGGAGAC ATGCAGGATC TGAATGGAAA CAACCAGTCT 840 GTGACCAGAC AGAAGATGCA GCAGCTGGAA CAGATGCTCA CAGCCCTGGA CCAGATGCGG 900 AGAAGCATTG TGAGTGAGCT GGCGGGGCTC TTGTCAGCAA TGGAGTACGT GCAGAAGACA 960 CTGACTGATG AAGAGCTGGC TGACTGGAAG AGGCGGCAGC AGATCGCGTG CATCGGAGGC 1020 CCTCCCAACA TCTGCCTGGA CCGTCTGGAA AACTGGATAA CTTCATTAGC AGAATCTCAA 1080 CTTCAGACCC GCCAACAAAT TAAGAAACTG GAGGAGCTGC AGCAGAAAGT GTCCTACAAG 1140 GGCGACCCTA TCGTGCAGCA CCGGCCCATG CTGGAGGAGA GGATCGTGGA GCTGTTCAGA 1200 AACTTAATGA AGAGTGCCTT CGTGGTGGAG CGGCAGCCCT GCATGCCCAT GCACCCGGAC 1260 CGGCCCTTAG TCATCAAGAC TGGTGTCCAG TTTACCACGA AAGTCAGGTT GCTGGTCAAA 1320 TTTCCTGAGT TGAATTATCA GCTTAAAATT AAAGTGTGCA TTGATAAAGA CTCTGGCGAT 1380 GTTGCTGCCC TCAGAGGGTC TCGGAAATTT AACATTCTGG GCACGAACAC AAAAGTGATT 1440 AACATGGAGG AGTCTAACAA CGGCAGCCTG TCTGCAGAGT TCAAGCACCT GACCCTTAGG 1500 GAGCAGAGAT GTGGGAATGG AGGCCGTGCC AATTGTGATG CCTCCTTGAT CGTGACTGAG 1560 GAGCTGCACC TGATCACCTT CGAGACTGAG GTGTACCACC AAGGCCTCAA GATTGACCTA 1620 GAGACCCACT CCTTGCCAGT TGTGGTGATC TCCAACATCT GTCAGATGCC AAATGCTTGG 1680 GCATCAATCC TGTGGTATAA CATGCTGACC AATAACCCCA AGAACGTGAA CTTCTTCACT 1740 AAGCCGCCAA TTGGAACCTG GGACCAAGTG GCCGAGGTGC TCAGCTGGCA GTTCTCGTCC 1800 ACCACCAAGC GGGGGCTGAG CATCGAGCAG CTGACAACGC TGGCTGAGAA GCTCCTAGGG 1860 CCTGGTGTGA ACTACTCAGG GTGTCAGATC ACATGGGCTA AATTCTGCAA AGAAAACATG 1920 GCTGGCAAGG GCTTCTCCTT CTGGGTCTGG CTAGACAATA TCATCGACCT TGTGAAAAAG 1980 TATATCTTGG CCCTTTGGAA TGAAGGGTAC ATCATGGGTT TCATCAGCAA GGAGCGGGAG 2040 CGGGCCATCC TAAGCACAAA GCCCCCGGGC ACCTTCCTAC TGCGCTTCAG CGAGAGCAGC 2100 AAAGAAGGAG GGGTCACTTT CACTTGGGTG GAAAAGGACA TCAGTGGCAA GACCCAGATC 2160 CAGTCTGTAG AGCCATACAC CAAGCAGCAG CTGAACAACA TGTCATTTGC TGAAATCATC 2220 ATGGGCTATA AGATCATGGA TGCGACCAAC ATCCTGGTGT CTCCACTTGT CTACCTCTAC 2280 CCCGACATTC CCAAGGAGGA GGCATTTGGA AAGTACTGTA GGCCCGAGAG CCAGGAGCAC 2340 CCCGAAGCCG ACCCAGGTAG TGCTGCCCCG TACCTGAAGA CCAAGTTCAT CTGTGTGACA 2400 CCAACGACCT GCAGCAATAC CATTGACCTG CCGATGTCCC CCCGCACTTT AGATTCATTG 2460 ATGCAGTTTG GAAATAACGG TGAAGGTGCT GAGCCCTCAG CAGGAGGGCA GTTTGAGTCG 2520 CTCACGTTTG ACATGGATCT GACCTCGGAG TGTGCTACCT CCCCCATGTG AGGAGCTGAA 2580 ACCAGAAGCT GCAGAGACGT GACTTGAGAC ACCTGCCCCG TGCTCCACCC CTAAGCAGCC 2640 GAACCCCATA TC 2652

【００９０】配列番号：８配列の長さ：２６５２配列の型：核酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：cDNA to mRNA 起源生物名：mouse 組織の種類：肝臓配列の特徴特徴を表わす記号：ＣＤＳ存在位置：259..2571 特徴を決定した方法：Ｐ配列： CTGGAGGGGC TGTAATTCAG CGGTTTCCGG AGCTGCAGTG TAGACAGGGA GGGGGAACCT 60 GGGGTTCCGA CGTCGCGGCG GAGGGAACGA GCCCTAACCG GATCGCTGAG GTACAACCCC 120 GCTCGGTGTC GCCTGACCGC GTCGGCTAGG AGAGGCCAGG CGGCCCTCGG GAGCCCAGCA 180 GCTCGCGCCT GGAGTCAGCG CAGGCCGGCC AGTCGGGCCT CAGCCCCGGA GACAGTCGAG 240 ACCCCTGACT GCAGCAGG ATG GCT CAG TGG AAC CAG CTG CAG CAG CTG GAC 291 Met Ala Gln Trp Asn Gln Leu Gln Gln Leu Asp 1 5 10 ACA CGC TAC CTG GAG CAG CTG CAC CAG CTG TAC AGC GAC AGC TTC CCC 339 Thr Arg Tyr Leu Glu Gln Leu His Gln Leu Tyr Ser Asp Ser Phe Pro 15 20 25 ATG GAG CTG CGG CAG TTC CTG GCA CCT TGG ATT GAG AGT CAA GAC TGG 387 Met Glu Leu Arg Gln Phe Leu Ala Pro Trp Ile Glu Ser Gln Asp Trp 30 35 40 GCA TAT GCA GCC AGC AAA GAG TCA CAT GCC ACG TTG GTG TTT CAT AAT 435 Ala Tyr Ala Ala Ser Lys Glu Ser His Ala Thr Leu Val Phe His Asn 45 50 55 CTC TTG GGT GAA ATT GAC CAG CAA TAT AGC CGA TTC CTG CAA GAG TCC 483 Leu Leu Gly Glu Ile Asp Gln Gln Tyr Ser Arg Phe Leu Gln Glu Ser 60 65 70 75 AAT GTC CTC TAT CAG CAC AAC CTT CGA AGA ATC AAG CAG TTT CTG CAG 531 Asn Val Leu Tyr Gln His Asn Leu Arg Arg Ile Lys Gln Phe Leu Gln 80 85 90 AGC AGG TAT CTT GAG AAG CCA ATG GAA ATT GCC CGG ATC GTG GCC CGA 579 Ser Arg Tyr Leu Glu Lys Pro Met Glu Ile Ala Arg Ile Val Ala Arg 95 100 105 TGC CTG TGG GAA GAG TCT CGC CTC CTC CAG ACG GCA GCC ACG GCA GCC 627 Cys Leu Trp Glu Glu Ser Arg Leu Leu Gln Thr Ala Ala Thr Ala Ala 110 115 120 CAG CAA GGG GGC CAG GCC AAC CAC CCA ACA GCT GCC GTA GTG ACA GAG 675 Gln Gln Gly Gly Gln Ala Asn His Pro Thr Ala Ala Val Val Thr Glu 125 130 135 AAG CAG CAG ATG TTG GAG CAG CAT CTT CAG GAT GTC CGG AAG CGA GTG 723 Lys Gln Gln Met Leu Glu Gln His Leu Gln Asp Val Arg Lys Arg Val 140 145 150 155 CAG GAT CTA GAA CAG AAA ATG AAG GTG GTG GAG AAC CTC CAG GAC GAC 771 Gln Asp Leu Glu Gln Lys Met Lys Val Val Glu Asn Leu Gln Asp Asp 160 165 170 TTT GAT TTC AAC TAC AAA ACC CTC AAG AGC CAA GGA GAC ATG CAG GAT 819 Phe Asp Phe Asn Tyr Lys Thr Leu Lys Ser Gln Gly Asp Met Gln Asp 175 180 185 CTG AAT GGA AAC AAC CAG TCT GTG ACC AGA CAG AAG ATG CAG CAG CTG 867 Leu Asn Gly Asn Asn Gln Ser Val Thr Arg Gln Lys Met Gln Gln Leu 190 195 200 GAA CAG ATG CTC ACA GCC CTG GAC CAG ATG CGG AGA AGC ATT GTG AGT 915 Glu Gln Met Leu Thr Ala Leu Asp Gln Met Arg Arg Ser Ile Val Ser 205 210 215 GAG CTG GCG GGG CTC TTG TCA GCA ATG GAG TAC GTG CAG AAG ACA CTG 963 Glu Leu Ala Gly Leu Leu Ser Ala Met Glu Tyr Val Gln Lys Thr Leu 220 225 230 235 ACT GAT GAA GAG CTG GCT GAC TGG AAG AGG CGG CAG CAG ATC GCG TGC 1011 Thr Asp Glu Glu Leu Ala Asp Trp Lys Arg Arg Gln Gln Ile Ala Cys 240 245 250 ATC GGA GGC CCT CCC AAC ATC TGC CTG GAC CGT CTG GAA AAC TGG ATA 1059 Ile Gly Gly Pro Pro Asn Ile Cys Leu Asp Arg Leu Glu Asn Trp Ile 255 260 265 ACT TCA TTA GCA GAA TCT CAA CTT CAG ACC CGC CAA CAA ATT AAG AAA 1107 Thr Ser Leu Ala Glu Ser Gln Leu Gln Thr Arg Gln Gln Ile Lys Lys 270 275 280 CTG GAG GAG CTG CAG CAG AAA GTG TCC TAC AAG GGC GAC CCT ATC GTG 1155 Leu Glu Glu Leu Gln Gln Lys Val Ser Tyr Lys Gly Asp Pro Ile Val 285 290 295 CAG CAC CGG CCC ATG CTG GAG GAG AGG ATC GTG GAG CTG TTC AGA AAC 1203 Gln His Arg Pro Met Leu Glu Glu Arg Ile Val Glu Leu Phe Arg Asn 300 305 310 315 TTA ATG AAG AGT GCC TTC GTG GTG GAG CGG CAG CCC TGC ATG CCC ATG 1251 Leu Met Lys Ser Ala Phe Val Val Glu Arg Gln Pro Cys Met Pro Met 320 325 330 CAC CCG GAC CGG CCC TTA GTC ATC AAG ACT GGT GTC CAG TTT ACC ACG 1299 His Pro Asp Arg Pro Leu Val Ile Lys Thr Gly Val Gln Phe Thr Thr 335 340 345 AAA GTC AGG TTG CTG GTC AAA TTT CCT GAG TTG AAT TAT CAG CTT AAA 1347 Lys Val Arg Leu Leu Val Lys Phe Pro Glu Leu Asn Tyr Gln Leu Lys 350 355 360 ATT AAA GTG TGC ATT GAT AAA GAC TCT GGC GAT GTT GCT GCC CTC AGA 1395 Ile Lys Val Cys Ile Asp Lys Asp Ser Gly Asp Val Ala Ala Leu Arg 365 370 375 GGG TCT CGG AAA TTT AAC ATT CTG GGC ACG AAC ACA AAA GTG ATT AAC 1443 Gly Ser Arg Lys Phe Asn Ile Leu Gly Thr Asn Thr Lys Val Ile Asn 380 385 390 395 ATG GAG GAG TCT AAC AAC GGC AGC CTG TCT GCA GAG TTC AAG CAC CTG 1491 Met Glu Glu Ser Asn Asn Gly Ser Leu Ser Ala Glu Phe Lys His Leu 400 405 410 ACC CTT AGG GAG CAG AGA TGT GGG AAT GGA GGC CGT GCC AAT TGT GAT 1539 Thr Leu Arg Glu Gln Arg Cys Gly Asn Gly Gly Arg Ala Asn Cys Asp 415 420 425 GCC TCC TTG ATC GTG ACT GAG GAG CTG CAC CTG ATC ACC TTC GAG ACT 1587 Ala Ser Leu Ile Val Thr Glu Glu Leu His Leu Ile Thr Phe Glu Thr 430 435 440 GAG GTG TAC CAC CAA GGC CTC AAG ATT GAC CTA GAG ACC CAC TCC TTG 1635 Glu Val Tyr His Gln Gly Leu Lys Ile Asp Leu Glu Thr His Ser Leu 445 450 455 CCA GTT GTG GTG ATC TCC AAC ATC TGT CAG ATG CCA AAT GCT TGG GCA 1683 Pro Val Val Val Ile Ser Asn Ile Cys Gln Met Pro Asn Ala Trp Ala 460 465 470 475 TCA ATC CTG TGG TAT AAC ATG CTG ACC AAT AAC CCC AAG AAC GTG AAC 1731 Ser Ile Leu Trp Tyr Asn Met Leu Thr Asn Asn Pro Lys Asn Val Asn 480 485 490 TTC TTC ACT AAG CCG CCA ATT GGA ACC TGG GAC CAA GTG GCC GAG GTG 1779 Phe Phe Thr Lys Pro Pro Ile Gly Thr Trp Asp Gln Val Ala Glu Val 495 500 505 CTC AGC TGG CAG TTC TCG TCC ACC ACC AAG CGG GGG CTG AGC ATC GAG 1827 Leu Ser Trp Gln Phe Ser Ser Thr Thr Lys Arg Gly Leu Ser Ile Glu 510 515 520 CAG CTG ACA ACG CTG GCT GAG AAG CTC CTA GGG CCT GGT GTG AAC TAC 1875 Gln Leu Thr Thr Leu Ala Glu Lys Leu Leu Gly Pro Gly Val Asn Tyr 525 530 535 TCA GGG TGT CAG ATC ACA TGG GCT AAA TTC TGC AAA GAA AAC ATG GCT 1923 Ser Gly Cys Gln Ile Thr Trp Ala Lys Phe Cys Lys Glu Asn Met Ala 540 545 550 555 GGC AAG GGC TTC TCC TTC TGG GTC TGG CTA GAC AAT ATC ATC GAC CTT 1971 Gly Lys Gly Phe Ser Phe Trp Val Trp Leu Asp Asn Ile Ile Asp Leu 560 565 570 GTG AAA AAG TAT ATC TTG GCC CTT TGG AAT GAA GGG TAC ATC ATG GGT 2019 Val Lys Lys Tyr Ile Leu Ala Leu Trp Asn Glu Gly Tyr Ile Met Gly 575 580 585 TTC ATC AGC AAG GAG CGG GAG CGG GCC ATC CTA AGC ACA AAG CCC CCG 2067 Phe Ile Ser Lys Glu Arg Glu Arg Ala Ile Leu Ser Thr Lys Pro Pro 590 595 600 GGC ACC TTC CTA CTG CGC TTC AGC GAG AGC AGC AAA GAA GGA GGG GTC 2115 Gly Thr Phe Leu Leu Arg Phe Ser Glu Ser Ser Lys Glu Gly Gly Val 605 610 615 ACT TTC ACT TGG GTG GAA AAG GAC ATC AGT GGC AAG ACC CAG ATC CAG 2163 Thr Phe Thr Trp Val Glu Lys Asp Ile Ser Gly Lys Thr Gln Ile Gln 620 625 630 635 TCT GTA GAG CCA TAC ACC AAG CAG CAG CTG AAC AAC ATG TCA TTT GCT 2211 Ser Val Glu Pro Tyr Thr Lys Gln Gln Leu Asn Asn Met Ser Phe Ala 640 645 650 GAA ATC ATC ATG GGC TAT AAG ATC ATG GAT GCG ACC AAC ATC CTG GTG 2259 Glu Ile Ile Met Gly Tyr Lys Ile Met Asp Ala Thr Asn Ile Leu Val 655 660 665 TCT CCA CTT GTC TAC CTC TAC CCC GAC ATT CCC AAG GAG GAG GCA TTT 2307 Ser Pro Leu Val Tyr Leu Tyr Pro Asp Ile Pro Lys Glu Glu Ala Phe 670 675 680 GGA AAG TAC TGT AGG CCC GAG AGC CAG GAG CAC CCC GAA GCC GAC CCA 2355 Gly Lys Tyr Cys Arg Pro Glu Ser Gln Glu His Pro Glu Ala Asp Pro 685 690 695 GGT AGT GCT GCC CCG TAC CTG AAG ACC AAG TTC ATC TGT GTG ACA CCA 2403 Gly Ser Ala Ala Pro Tyr Leu Lys Thr Lys Phe Ile Cys Val Thr Pro 700 705 710 715 ACG ACC TGC AGC AAT ACC ATT GAC CTG CCG ATG TCC CCC CGC ACT TTA 2451 Thr Thr Cys Ser Asn Thr Ile Asp Leu Pro Met Ser Pro Arg Thr Leu 720 725 730 GAT TCA TTG ATG CAG TTT GGA AAT AAC GGT GAA GGT GCT GAG CCC TCA 2499 Asp Ser Leu Met Gln Phe Gly Asn Asn Gly Glu Gly Ala Glu Pro Ser 735 740 745 GCA GGA GGG CAG TTT GAG TCG CTC ACG TTT GAC ATG GAT CTG ACC TCG 2547 Ala Gly Gly Gln Phe Glu Ser Leu Thr Phe Asp Met Asp Leu Thr Ser 750 755 760 GAG TGT GCT ACC TCC CCC ATG TGAGGAGCTG AAACCAGAAG CTGCAGAGAC 2598 Glu Cys Ala Thr Ser Pro Met 765 770 GTGACTTGAG ACACCTGCCC CGTGCTCCAC CCCTAAGCAG CCGAACCCCA TATC 2652

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ａ６１Ｋ 39/395 Ｄ 48/00 Ｃ０７Ｈ 21/04 ＢＣ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡＣ１２Ｐ 21/02 Ｃ 9282−4Ｂ // Ｃ１２Ｎ 1/21 8828−4Ｂ 5/10 (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:91） (Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｒ 1:19） (Ｃ１２Ｎ 5/10 Ｃ１２Ｒ 1:91） 7729−4ＢＣ１２Ｎ 5/00 Ｂ (Ｃ１２Ｎ 5/00 ＢＣ１２Ｒ 1:91）

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】実質的に純粋な形である哺乳動物の転写
調節物質ＡＰＲＦ。
【請求項２】ヒト由来のものである請求項１に記載の
ＡＰＲＦ。
【請求項３】配列番号：１で示されるアミノ酸配列を
含むポリペプチド、そのホモローグ及びそれらのフラグ
メントから選ばれる請求項２に記載のＡＰＲＦ。
【請求項４】配列番号：１で示されるアミノ酸配列か
らなる請求項３に記載のＡＰＲＦ。
【請求項５】請求項１に記載のＡＰＲＦをコードする
ＤＮＡ。
【請求項６】請求項２、３又は４に記載のＡＰＲＦを
コードする請求項５に記載のＤＮＡ。
【請求項７】配列番号：２で示される塩基配列を有す
る請求項６に記載のＤＮＡ、これとハイブリダイズし得
るＤＮＡ及びそれらのフラグメントから選ばれる請求項
５に記載のＤＮＡ。
【請求項８】配列番号：３で示される塩基配列を有す
る請求項６に記載のＤＮＡ、これとハイブリダイズし得
るＤＮＡ及びそれらのフラグメントから選ばれる請求項
５に記載のＤＮＡ。
【請求項９】マウス由来のものである請求項１に記載
のＡＰＲＦ。
【請求項１０】配列番号：５で示されるアミノ酸配列
を含むポリペプチド、そのホモローグ及びそれらのフラ
グメントから選ばれる請求項９に記載のＡＰＲＦ。
【請求項１１】配列番号：５で示されるアミノ酸配列
からなる請求項１０に記載のＡＰＲＦ。
【請求項１２】請求項９、１０又は１１に記載のＡＰ
ＲＦをコードする請求項５に記載のＤＮＡ。
【請求項１３】配列番号：６で示される塩基配列を有
する請求項１２に記載のＤＮＡ、これとハイブリダイズ
し得るＤＮＡ及びそれらのフラグメントから選ばれる請
求項５に記載のＤＮＡ。
【請求項１４】配列番号：７で示される塩基配列を有
する請求項１２に記載のＤＮＡ、これとハイブリダイズ
し得るＤＮＡ及びそれらのフラグメントから選ばれる請
求項５に記載のＤＮＡ。
【請求項１５】請求項５〜８及び１２〜１４のいずれ
かに記載のＤＮＡを含む複製又は発現ベクター。
【請求項１６】請求項１５に記載の複製又は発現ベク
ターで形質転換された宿主細胞。
【請求項１７】請求項１〜４及び９〜１１のいずれか
に記載のＡＰＲＦが発現する条件下で請求項１６に記載
の細胞を培養してＡＰＲＦを採取する請求項１に記載の
ＡＰＲＦの製造方法。
【請求項１８】請求項１に記載のＡＰＲＦを用いてＡ
ＰＲＦの機能を阻害する物質を検索することを特徴とす
るＡＰＲＦの検索方法。
【請求項１９】請求項１に記載のＡＰＲＦの機能を阻
害する物質を有効成分として含有するＡＰＲＦ機能阻害
剤。
【請求項２０】ＡＰＲＦの機能を阻害する物質が、請
求項１に記載のＡＰＲＦに対する抗体である請求項１９
に記載の阻害剤。
【請求項２１】抗体が配列番号：１又は：５で示され
るアミノ酸配列を含むポリペプチド、そのホモローグ及
びそれらのフラグメントで感作された哺乳動物から得ら
れるものである請求項２０に記載の阻害剤。
【請求項２２】ＡＰＲＦの機能を阻害する物質が、請
求項１に記載のＡＰＲＦに結合能をもつ核酸もしくは核
酸誘導体である請求項１９に記載の阻害剤。
【請求項２３】ＡＰＲＦの機能を阻害する物質が、請
求項１に記載のＡＰＲＦをコードする遺伝子のアンチセ
ンス核酸もしくはこれを含む発現ベクターである請求項
１９に記載の阻害剤。
【請求項２４】ＡＰＲＦの機能を阻害する物質が、請
求項１に記載のＡＰＲＦのｍＲＮＡを分解するリボザイ
ムである請求項１９に記載の阻害剤。