JPH07270301A - Flow type particle image analysis method and apparatus - Google Patents
Flow type particle image analysis method and apparatusInfo
- Publication number
- JPH07270301A JPH07270301A JP6061819A JP6181994A JPH07270301A JP H07270301 A JPH07270301 A JP H07270301A JP 6061819 A JP6061819 A JP 6061819A JP 6181994 A JP6181994 A JP 6181994A JP H07270301 A JPH07270301 A JP H07270301A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- particle
- particles
- flow
- image analysis
- measurement mode
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000002245 particle Substances 0.000 title claims abstract description 502
- 238000003703 image analysis method Methods 0.000 title claims abstract description 42
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims abstract description 181
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 127
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 181
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 166
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 59
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 37
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 claims description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 claims description 17
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 8
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 6
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000000306 component Substances 0.000 claims description 4
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 3
- 239000012503 blood component Substances 0.000 claims description 2
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 39
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 23
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 7
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 5
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 5
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 238000003909 pattern recognition Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 239000011247 coating layer Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000004973 liquid crystal related substance Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は、フロー式粒子画像解析
方法およびフロー式粒子画像解析装置に係り、粒子が懸
濁されたサンプル液を偏平状に連続的に流して画像を撮
影し、サンプル液中の粒子を分析するフロー式粒子画像
解析方法およびその装置に関するものである。特に、血
液または尿中の細胞や粒子を解析するのに利用される。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a flow-type particle image analysis method and a flow-type particle image analysis apparatus, in which a sample liquid in which particles are suspended is continuously flowed in a flat shape to capture an image, and a sample is sampled. The present invention relates to a flow type particle image analysis method and apparatus for analyzing particles in a liquid. In particular, it is used to analyze cells and particles in blood or urine.
【０００２】[0002]
【従来の技術】従来の粒子画像解析においては、血液中
の細胞や尿中の細胞や粒子を分類解析するには、スライ
ドガラス上に標本を作成し顕微鏡にて観察することによ
りなされてきた。尿の場合には、尿中の粒子濃度が薄い
ため、サンプルをあらかじめ遠心分離器で濃縮してから
観察している。2. Description of the Related Art In conventional particle image analysis, classification and analysis of cells in blood and cells and particles in urine have been carried out by preparing a sample on a slide glass and observing with a microscope. In the case of urine, since the particle concentration in urine is low, the sample is concentrated in advance by a centrifuge and then observed.
【０００３】これらの観察、検査の作業を自動化する方
法または装置としては、血液などのサンプル試料をスラ
イドガラス上に塗沫したあと顕微鏡にセットし、顕微鏡
ステージを自動的に走査し、粒子の存在する位置で顕微
鏡ステージを止めて静止粒子画像を撮影し、画像処理技
術による特徴抽出およびパターン認識手法を用い、サン
プル試料中にある粒子の分類・解析等がなされている。As a method or apparatus for automating these observation and inspection operations, a sample such as blood is smeared on a slide glass and then set on a microscope, and the microscope stage is automatically scanned to detect the presence of particles. The microscope stage is stopped at the position where a still particle image is taken, and the feature extraction and pattern recognition techniques by image processing technology are used to classify and analyze the particles in the sample.
【０００４】しかし、上記手法では標本作成に時間が掛
ること、さらに顕微鏡ステージを機械的に移動しながら
粒子を見つけ、粒子を適切に画像取り込み領域へ移動さ
せる作業が必要である。そのため、解析に時間を要した
り、機械機構が複雑になるという欠点がある。そこで、
上記のような塗沫標本を作成せず、検査の高精度化と省
力化を図るため、清浄液であるシース液を外層とし、前
記外層シース液の内層にサンプル液を流し、このサンプ
ル液を極めて偏平な流れにするフローセルを用いるフロ
ー式粒子画像解析技術があり、例えば特表昭５７−５０
０９９５号公報、特開昭６３−９４１５６号公報、特開
平４−７２５４４号公報に開示されている。However, in the above method, it takes time to prepare a specimen, and it is necessary to find particles while mechanically moving the microscope stage and move the particles appropriately to the image capturing area. Therefore, there are disadvantages that analysis takes time and the mechanical mechanism becomes complicated. Therefore,
In order to improve the accuracy and labor of the inspection without creating the above-mentioned smear, the sheath liquid that is a cleaning liquid is used as the outer layer, and the sample liquid is flown to the inner layer of the outer layer sheath liquid, and this sample liquid is used. There is a flow-type particle image analysis technology that uses a flow cell that produces an extremely flat flow.
No. 0995, Japanese Patent Application Laid-Open No. 63-94156, and Japanese Patent Application Laid-Open No. 4-72544.
【０００５】これらのフロー式粒子画像解析装置におい
ては、フローセル中を移動するサンプル液を、例えばビ
デオカメラで撮像する。そして、撮像した静止画像を画
像処理することにより、サンプル中の粒子を分類・計数
を行うものである。さらに、精度を向上させるため、サ
ンプル中の粒子の態様に応じて倍率を変更して、サンプ
ル中の粒子を撮像するフロー式粒子画像解析装置とし
て、特開平３−１０５２３５号公報および特開平４−３
０９８４１号公報に記載された粒子画像解析装置があ
る。In these flow type particle image analyzers, the sample liquid moving in the flow cell is imaged by, for example, a video camera. Then, the captured still image is image-processed to classify and count the particles in the sample. Furthermore, in order to improve accuracy, as a flow-type particle image analysis device for changing the magnification according to the mode of particles in a sample and imaging the particles in the sample, there are disclosed in Japanese Patent Laid-Open Nos. 3-105235 and 4-105235. Three
There is a particle image analysis device described in Japanese Patent Publication No. 09841.
【０００６】さらに、サンプル液の画像取り込みのた
め、静止粒子画像撮像系とは別個に、フロー上流に設置
された粒子検出系により粒子検出を行い、適当なタイミ
ングで撮像用パルス光を点灯させ、その粒子静止画像を
撮像するフロー式粒子画像解析装置がある。これに関し
ては、例えば特開昭６３−９４１５６号公報、特開平４
−７２５４５号公報にその技術が開示されている。この
方法は、前記パルス光の点灯を周期的にせず、サンプル
液中の粒子を検出して、その時だけ撮像するものであ
り、効率よく画像処理することができ、サンプル中の粒
子の計数、分類の測定精度が改善される。Further, in order to capture an image of the sample liquid, a particle detection system installed upstream of the flow detects particles separately from the stationary particle image pickup system, and the imaging pulsed light is turned on at an appropriate timing. There is a flow-type particle image analysis device that captures the particle still image. In this regard, for example, JP-A-63-94156 and JP-A-4-94156.
The technique is disclosed in Japanese Patent Publication No. 72545. This method does not periodically turn on the pulsed light, detects particles in the sample liquid, and takes an image only at that time, which enables efficient image processing, counting and classification of particles in the sample. The measurement accuracy of is improved.
【０００７】上記従来技術は、測定精度の向上のため種
々の工夫がなされているが、測定対象粒子の態様に応じ
る工夫が不十分であった。例えば、粒子が少なければ、
より多く測定したいという要請がある。粒子が多けれ
ば、特定粒子をより多く測定したいという要請がある。
この要請に応える技術として、上記のように粒子検出系
を静止粒子画像撮像系とは別個に構成していないが、二
つの測定モードを備え、第一の測定モードによるサンプ
ルの測定結果を判断し、第二の測定モードを実施するか
どうか判断する技術がある。これに関するものとして
は、特開昭６０−５０１６２４号公報記載の技術があ
る。[0007] The above-mentioned conventional techniques have been devised in various ways to improve the measurement accuracy, but they have not been sufficiently devised according to the mode of the particles to be measured. For example, if there are few particles,
There is a demand to measure more. If there are many particles, there is a demand to measure more specific particles.
As a technique to meet this demand, although the particle detection system is not separately configured from the static particle image pickup system as described above, it has two measurement modes and judges the measurement result of the sample in the first measurement mode. , There is a technique for determining whether or not to execute the second measurement mode. Regarding this, there is a technique described in JP-A-60-501624.
【０００８】[0008]
【発明が解決しようとする課題】上記のように測定対象
粒子の態様に応じる工夫がなされているが、粒子検出系
を静止粒子画像撮像系とは別個に構成していない、例え
ば特開昭６０−５０１６２４号公報記載の技術では、次
のような問題が存在する。サンプル中の粒子数を正しく
知るためには、全サンプルをくまなく画像処理し粒子数
を計数しなければならない。一般に、一つの画像に相当
するサンプル体積は、視野の大きさと顕微鏡対物レンズ
の焦点深度とから自ずと決まるので、サンプルを忠実に
画像撮影すると、画像撮影された測定サンプル体積の和
は、おのずから定まってくる。As described above, although the device according to the mode of the particles to be measured has been devised, the particle detection system is not constructed separately from the stationary particle image pickup system. The technique described in Japanese Patent No. 501216 has the following problems. In order to correctly know the number of particles in a sample, it is necessary to image-process all the samples and count the number of particles. Generally, the sample volume corresponding to one image is naturally determined by the size of the field of view and the depth of focus of the microscope objective lens. come.
【０００９】サンプル中の粒子濃度が小さな標本では、
必要な測定精度を得るために顕微鏡対物レンズの焦点深
度を大きくしなければならず、そのため、一つの画像に
相当するサンプル体積が小さくなり、したがって全サン
プルをくまなく画像撮影する時間が長くなるという問題
があった。また、前記粒子濃度が小さいサンプルでは、
粒子が処理画面に存在しない場合が大部分といった状態
も出現する。For a sample having a small particle concentration in the sample,
In order to obtain the required measurement accuracy, the depth of focus of the microscope objective lens must be increased, which reduces the sample volume corresponding to one image, thus increasing the time taken to take an image of all samples. There was a problem. Also, in the sample with a small particle concentration,
In some cases, particles do not exist on the processing screen.
【００１０】しかも、上述特開昭６０−５０１６２４号
公報記載技術では、第一の測定モードにおいては、でき
るだけサンプル測定体積を大きくする必要から、顕微鏡
撮像光学系の撮影倍率を小さくして撮像する。第二の測
定モードでは、撮影倍率を大きくして詳細な画像処理を
する。そのため、第一の測定モードでの画像は、分解能
が悪いため粒子分類精度が悪く、小さいサイズの粒子の
処理が事実上できない。このように、第一の測定モード
を低倍率モードで動作させ、画像分解能が悪いため、サ
ンプル中の微小粒子の処理が正しく行われず、正しくな
い結果を基づき判断し、第二の測定モードが実施され
る。したがって。第一の測定モードではより正確な判断
データが必要であるという問題があった。Moreover, in the technique described in Japanese Patent Laid-Open No. 60-501624, in the first measurement mode, it is necessary to make the sample measurement volume as large as possible. In the second measurement mode, the photographing magnification is increased and detailed image processing is performed. Therefore, the image in the first measurement mode has poor resolution because of poor resolution, and it is practically impossible to process small-sized particles. In this way, the first measurement mode is operated in the low magnification mode, and because the image resolution is poor, the processing of fine particles in the sample is not performed correctly, and it is judged based on the incorrect result, and the second measurement mode is executed. To be done. Therefore. The first measurement mode has a problem that more accurate judgment data is required.
【００１１】また、特開平３−１０５２３５号公報記載
の技術では、二つの測定モードを有し、二つの測定モー
ドにおけるそれぞれ測定対象粒子を限定しているが、第
一の測定モードの結果により、第二の測定を行うかどう
かの判断機能を具備していない。さらに、第一の測定モ
ードおよび第二の測定モードの撮像倍率を変えているた
め、低倍率動作では小サイズの粒子の分解能が不足する
という問題がある。さらに、測定サンプル体積を多くす
る目的で撮像領域のサンプル厚さを厚くしているため、
小サイズ粒子の焦点が合わず、良質な画像を撮影できな
い問題が存在する。Further, the technique described in Japanese Patent Laid-Open No. 3-105235 has two measurement modes and limits the particles to be measured in each of the two measurement modes. It does not have a function to judge whether to perform the second measurement. Furthermore, since the imaging magnifications of the first measurement mode and the second measurement mode are changed, there is a problem that the resolution of small-sized particles is insufficient in low magnification operation. Furthermore, since the sample thickness in the imaging area is increased to increase the measurement sample volume,
There is a problem that small size particles are out of focus and a good quality image cannot be captured.
【００１２】また、上述したように測定サンプル体積を
増大させるため、撮像倍率を小さくすること、サンプル
厚さを厚くすることと共に、サンプル流速を速くするこ
ともなされている。前記のサンプル流速を速くすると、
いわゆるデットタイムのため、画像処理される粒子数が
減少する問題が発生する。一般に、静止画像を撮像する
ＣＣＤＴＶカメラに撮影された画像信号は、２フィール
ドの時間をかけて信号を読み出すため、読み出しの時間
内に次の粒子が撮像領域に流れてきても画像を撮影でき
ない、いわゆるデットタイムが存在する。前記デットタ
イム中に、粒子が粒子検出系を通過した場合に、撮像用
のパルス光を点灯させると多重露光となり、正常な画像
が撮像出来ない。サンプル液の粒子濃度が大きくなると
この影響が強く出てくる問題がある。Further, as described above, in order to increase the measurement sample volume, the imaging magnification is reduced, the sample thickness is increased, and the sample flow velocity is increased. By increasing the sample flow rate,
The so-called dead time causes a problem that the number of particles subjected to image processing decreases. In general, an image signal captured by a CCD TV camera that captures a still image is read out over a time period of two fields, so that an image cannot be captured even if the next particles flow into the image capturing area within the readout time. There is so-called dead time. When particles pass through the particle detection system during the dead time, if the pulsed light for imaging is turned on, multiple exposure occurs and a normal image cannot be captured. There is a problem that this effect becomes more pronounced as the particle concentration of the sample liquid increases.
【００１３】また、顕微鏡画像の倍率を小さくし、ＴＶ
カメラ撮像視野を広くする方法においては、光学系の倍
率切り替え、光量調節、画像周辺の光量不足、撮像粒子
画像の分解能が低下し、粒子識別能力が悪い等の問題が
発生する。In addition, the magnification of the microscope image is reduced and the
In the method of widening the field of view of the camera, there are problems that the magnification of the optical system is switched, the amount of light is adjusted, the amount of light around the image is insufficient, the resolution of the captured particle image is reduced, and the particle identification capability is poor.
【００１４】本発明は、上記従来技術の問題点を解決す
るためになされたもので、フロー式粒子画像解析方法お
よびその装置において、画像撮影時間が短く、画像分解
率のよい、良質な画像が得られるとともに、第一の測定
モードを高倍率で動作させ、その測定結果を正確に判断
させ、第二の測定モードの測定結果をより正しく制御す
る手段を設け、粒子解析、分類精度を向上させるフロー
式粒子画像解析方法およびその装置を提供することをそ
の目的とする。The present invention has been made in order to solve the above-mentioned problems of the prior art. In the flow-type particle image analysis method and its apparatus, a high-quality image with a short image capturing time and a good image decomposition rate can be obtained. In addition to being obtained, the first measurement mode is operated at a high magnification, the measurement result is accurately judged, and means for more accurately controlling the measurement result in the second measurement mode is provided to improve particle analysis and classification accuracy. It is an object of the present invention to provide a flow type particle image analysis method and its apparatus.
【００１５】[0015]
【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に、本発明に係るフロー式粒子画像解析方法の構成は、
粒子を懸濁したサンプル液を清浄液でシールし、フロー
セル中を流し、前記フローセル中のサンプル液の粒子を
検出し、前記検出信号により前記サンプル液に光線を照
射して前記粒子の画像を撮像し、前記撮像画像の粒子を
分類するフロー式粒子画像解析方法において、前記サン
プル液量が増減されるフローセルを用い、一の粒子検出
法と他の一の粒子検出法とを有し、同一倍率で画像を撮
像し、一の粒子抽出法と他の一の粒子抽出法とを有し、
対象粒子に応ずる第一、第二の測定モードを設け、前記
第一の測定モードは、前記サンプル液量を増加させ、一
の検出法により粒子を検出し、前記一の粒子検出法によ
る画像から粒子の計数、分類するとともに、他の一の粒
子検出法の検出信号より粒子個数を計数し、前記第二の
測定モードは、前記サンプル液量を減少させ、上記他の
一の粒子検出法により粒子を検出し、前記他の一の粒子
検出法による画像から粒子の計数、分類することを特徴
とする。In order to achieve the above object, the structure of the flow type particle image analysis method according to the present invention comprises:
The sample liquid in which the particles are suspended is sealed with a cleaning liquid, flown in a flow cell, the particles of the sample liquid in the flow cell are detected, and the sample liquid is irradiated with a light beam by the detection signal to capture an image of the particles. Then, in a flow type particle image analysis method for classifying particles of the captured image, a flow cell in which the sample liquid amount is increased or decreased is used, and has one particle detection method and another particle detection method, and has the same magnification. The image is captured with, and has one particle extraction method and another one particle extraction method,
The first and second measurement modes according to the target particles are provided, and the first measurement mode increases the sample liquid amount, detects particles by one detection method, and from the image by the one particle detection method. Counting and classifying particles, counting the number of particles from the detection signal of another particle detection method, the second measurement mode, the sample liquid volume is reduced, by the other one particle detection method. It is characterized in that particles are detected, and the particles are counted and classified from an image obtained by the other particle detection method.
【００１６】前項記載のフロー式粒子画像解析方法にお
いて、前記光線照射方向と前記サンプル液の通過方向と
の両方向に直交する方向の当該サンプル液の寸法が一定
なフローセルを用い、前記サンプル液を増加させる場合
は、このサンプル液の前記光線照射方向の寸法とその流
速を増し、前記サンプル液を減少させる場合は、このサ
ンプル液の前記光線照射方向の寸法とその流速を減じ、
前記一の粒子検出法は、前記サンプル液中の大径、か
つ、少数の粒子を検出し、前記他の一の粒子検出法は、
前記サンプル液中の小径、かつ、多数の粒子を検出する
ことを特徴とする。In the flow type particle image analysis method described in the preceding paragraph, the sample liquid is increased by using a flow cell in which the size of the sample liquid is constant in a direction orthogonal to both the light irradiation direction and the passing direction of the sample liquid. In the case of increasing the dimension of the sample solution in the light irradiation direction and its flow rate, when reducing the sample solution, decrease the dimension of the sample solution in the light irradiation direction and its flow rate,
The one particle detection method is a large diameter in the sample liquid, and, detects a small number of particles, the other one particle detection method,
It is characterized by detecting a large number of particles having a small diameter in the sample liquid.
【００１７】前項記載のフロー式粒子画像解析方法にお
いて、前記第一の測定モードにおける前記他の一の粒子
検出法による粒子計数値から、前記第二の測定モードの
実施を判断することを特徴とする。前項記載のフロー式
粒子画像解析方法において、前記第二の測定モードは、
前記一の粒子検出法による検出粒子と、前記他の一の粒
子検出法による検出粒子との両方の全検出粒子を測定対
象とすることを特徴とする。前項記載のフロー式粒子画
像解析方法において、前記第一の測定モードにおける前
記他の一の粒子検出法による粒子計数値から、前記第一
の測定モードの継続、前記第二の測定モードの実施、ま
たは測定中止のいずれかを判断することを特徴とする。
前項記載のフロー式粒子画像解析方法において、前記第
一の測定モードにおける前記他の一の粒子検出法より得
られたデータから複数種の粒子数を計数し、それら複数
の粒子計数値により、前記第二の測定モードの実施を判
断することを特徴とする。In the flow-type particle image analysis method described in the preceding paragraph, the execution of the second measurement mode is judged from the particle count value of the other particle detection method in the first measurement mode. To do. In the flow type particle image analysis method according to the preceding paragraph, the second measurement mode,
All the detection particles of both the detection particles by the one particle detection method and the detection particles by the other one particle detection method are set as measurement targets. In the flow type particle image analysis method according to the preceding paragraph, from the particle count value by the other one particle detection method in the first measurement mode, the continuation of the first measurement mode, the implementation of the second measurement mode, It is also characterized in that either the measurement is stopped or the measurement is stopped.
In the flow type particle image analysis method according to the preceding paragraph, counting the number of particles of a plurality of types from the data obtained from the other one particle detection method in the first measurement mode, by the plurality of particle count values, the It is characterized in that the execution of the second measurement mode is determined.
【００１８】前項記載のフロー式粒子画像解析方法にお
いて、前記粒子検出法は、その粒子のサイズ情報に基ず
くものであることを特徴とする。前項記載のフロー式粒
子画像解析方法において、前記粒子検出法は、その粒子
から発せられる蛍光散乱信号情報に基ずき、蛍光散乱信
号の大小関係を利用することを特徴とする。前項記載の
フロー式粒子画像解析方法において、前記検出粒子が、
生物細胞、血液成分、尿中沈渣成分であることを特徴と
する。In the flow type particle image analysis method described in the preceding paragraph, the particle detection method is based on size information of the particles. In the flow-type particle image analysis method described in the preceding paragraph, the particle detection method is characterized in that the magnitude relationship of the fluorescence scattering signals is used based on the fluorescence scattering signal information emitted from the particles. In the flow type particle image analysis method according to the preceding paragraph, the detection particles,
It is characterized by being biological cells, blood components, and urinary sediment components.
【００１９】また、上記目的を達成するために、本発明
に係るフロー式粒子画像解析装置の構成は、粒子を懸濁
したサンプル液を清浄液でシールして流すフローセル
と、前記フローセル中のサンプル液の粒子を検出する粒
子検出手段と、前記検出信号により前記サンプル液に光
線を照射して前記粒子の画像を撮像する撮像手段と、前
記撮像画像の粒子を分類する粒子分類手段とを具備する
フロー式粒子画像解析装置において、フローセルは、前
記サンプル液量を増減できるフロー系制御部を有し、粒
子検出手段は、一の粒子検出回路と他の一の粒子検出回
路とを有し、前記撮像手段は同一倍率で画像を撮像し、
前記粒子分類手段は、対象粒子に応ずる第一、第二の測
定モードを選択する選択部を設け、前記第一の測定モー
ドが選択された場合は、前記サンプル液量を増加させ、
一の検出回路により粒子を検出し、前記一の粒子検出回
路による画像から粒子の計数、分類をするとともに、他
の一の粒子検出法の検出信号により粒子個数を計数し、
前記第二の測定モードが選択された場合は、前記サンプ
ル液量を減少させ、前記他の一の粒子検出回路により粒
子を検出し、前記他の一の粒子検出回路による画像から
粒子の計数、分類をするように構成したことを特徴とす
る。In order to achieve the above object, the structure of the flow type particle image analyzer according to the present invention comprises a flow cell in which a sample solution in which particles are suspended is sealed with a cleaning liquid and is flowed, and a sample in the flow cell. The liquid crystal display device further comprises a particle detection unit for detecting liquid particles, an image pickup unit for irradiating the sample liquid with a light beam according to the detection signal to pick up an image of the particles, and a particle classification unit for classifying particles in the picked-up image. In the flow type particle image analysis device, the flow cell has a flow system control unit capable of increasing or decreasing the sample liquid amount, the particle detecting means has one particle detection circuit and another one particle detection circuit, The image capturing means captures an image at the same magnification,
The particle classification means is provided with a selection unit that selects a first measurement mode or a second measurement mode depending on the target particle, and when the first measurement mode is selected, increases the sample liquid amount,
Detect particles by one detection circuit, counting the particles from the image by the one particle detection circuit, while classifying, while counting the number of particles by the detection signal of the other one particle detection method,
When the second measurement mode is selected, the sample liquid amount is reduced, particles are detected by the another particle detection circuit, and particles are counted from an image by the other particle detection circuit, It is characterized by being configured to perform classification.
【００２０】前項記載のフロー式粒子画像解析装置にお
いて、前記フローセルは、前記光線照射方向と前記サン
プル液の通過方向との両方向に直交する方向の当該サン
プル液の寸法が一定になるように構成され、前記フロー
系制御部は、前記サンプル液を増加させる場合は、この
サンプル液の前記光線照射方向の寸法とその流速を増
し、前記サンプル液を減少させる場合は、このサンプル
液の前記光線照射方向の寸法とその流速を減じ、前記一
の粒子検出法は、前記サンプル液中の大径、かつ、少数
の粒子を検出し、前記他の一の粒子検出法は、前記サン
プル液中の小径、かつ、多数の粒子を検出するように構
成したことを特徴とする。In the flow-type particle image analyzer described in the preceding paragraph, the flow cell is constructed so that the dimension of the sample liquid is constant in the direction orthogonal to both the light beam irradiation direction and the sample liquid passage direction. The flow system controller increases the size and flow velocity of the sample liquid in the light irradiation direction when increasing the sample liquid, and increases the size of the sample liquid in the light irradiation direction, and when decreasing the sample liquid, the light irradiation direction of the sample liquid. The particle size and its flow rate are reduced, the one particle detection method has a large diameter in the sample liquid, and detects a small number of particles, and the other one particle detection method has a small diameter in the sample liquid, In addition, it is characterized in that it is configured to detect a large number of particles.
【００２１】前項記載のフロー式粒子画像解析装置にお
いて、前記第一の測定モードにおける前記他の一の粒子
検出回路による粒子計数値から、前記第二の測定モード
の実施を判断するように構成したことを特徴とする。前
項記載のフロー式粒子画像解析装置において、前記第二
の測定モードは、前記一の粒子検出回路による検出粒子
と、前記他の一の粒子検出回路による検出粒子との両方
の全検出粒子を測定対象とするようにしたことを特徴と
する。前項記載のフロー式粒子画像解析装置において、
前記第一の測定モードにおける前記他の一の粒子検出回
路による粒子計数値から、第一の測定モードの継続、前
記第二の測定モードの実施、または測定中止のいずれか
を判断するように構成したことを特徴とする。In the flow type particle image analyzer described in the preceding paragraph, it is configured to judge the execution of the second measurement mode from the particle count value of the other particle detection circuit in the first measurement mode. It is characterized by In the flow-type particle image analyzer according to the preceding paragraph, the second measurement mode measures all detected particles of both the particles detected by the one particle detection circuit and the particles detected by the other one particle detection circuit. The feature is that it is targeted. In the flow type particle image analysis device described in the preceding paragraph,
From the particle count value by the other particle detection circuit in the first measurement mode, it is configured to determine whether the first measurement mode is continued, the second measurement mode is performed, or the measurement is stopped. It is characterized by having done.
【００２２】前項記載のフロー式粒子画像解析装置にお
いて、前記第一の測定モードにおける前記他の一の粒子
検出回路より得られたデータから複数種の粒子数を計数
し、それら複数の粒子計数値により、第二の測定モード
の実施を判断するように構成したことを特徴とする。前
項記載のフロー式粒子画像解析装置において、前記粒子
検出回路は、その粒子のサイズ情報に基ずくものである
ことを特徴とする。前項記載のフロー式粒子画像解析装
置において、前記粒子検出回路は、その粒子から発せら
れる蛍光散乱信号情報に基ずき、蛍光散乱信号の大小関
係を利用することを特徴とする。In the flow type particle image analysis apparatus described in the preceding paragraph, the number of plural kinds of particles is counted from the data obtained from the other particle detection circuit in the first measurement mode, and the plural particle count values are obtained. It is characterized in that it is configured to judge whether to implement the second measurement mode. In the flow type particle image analysis device described in the preceding paragraph, the particle detection circuit is based on size information of the particles. In the flow-type particle image analysis device described in the preceding paragraph, the particle detection circuit is characterized by utilizing the magnitude relationship of the fluorescence scattering signals based on the fluorescence scattering signal information emitted from the particles.
【００２３】[0023]
【作用】上記各技術的手段は、次ぎの如き働きを有す
る。本発明の構成によれば、サンプル液中の対象を定め
た二つの粒子検出回路と、二つの測定モードとを有し、
第一の測定モードでは、一の検出回路により粒子検出が
なされ、その画像より粒子の計数および分類がなされ、
同時に、他の一の検出回路により粒子個数を計数され、
第二の測定モードにおいて、前記他の一の粒子検出回路
により粒子検出がなされ、その画像より計数、分類がな
されるので、粒子の種類に応じて第一の測定モードと、
第二の測定モードとを選択し、粒子の分類、解析精度を
上げ、測定精度を向上させることができる。The above technical means have the following functions. According to the configuration of the present invention, it has two particle detection circuits that target the sample liquid, and two measurement modes,
In the first measurement mode, particle detection is performed by the one detection circuit, particles are counted and classified from the image,
At the same time, the number of particles is counted by another detection circuit,
In the second measurement mode, particle detection is performed by the other one particle detection circuit, and counting and classification are performed from the image, so the first measurement mode according to the type of particles,
By selecting the second measurement mode, it is possible to improve the classification accuracy of particles and the analysis accuracy, and improve the measurement accuracy.
【００２４】また、第一の測定モードにおける他の一の
粒子検出回路を第二の測定モードの粒子検出回路に用い
るため、第一の測定モードの他の一の粒子検出回路によ
る粒子の検出計数値から第二の測定モードの粒子濃度の
予測ができ、第二の測定モードを実施するかどうか判断
することができる。第一の測定モードの測定結果から第
二の測定モードを実行する、実行しない、第一の測定モ
ードを継続させるなどの判定が出来るため、粒子画像解
析の効率、粒子画像解析の測定精度を向上させる。Since the other particle detection circuit in the first measurement mode is used in the particle detection circuit in the second measurement mode, the particle detection circuit by the other particle detection circuit in the first measurement mode is used. The particle concentration of the second measurement mode can be predicted from the numerical value, and it can be determined whether or not to execute the second measurement mode. From the measurement result of the first measurement mode, it is possible to judge whether to execute the second measurement mode, not to execute it, or to continue the first measurement mode. Therefore, the efficiency of particle image analysis and the measurement accuracy of particle image analysis are improved. Let
【００２５】すなわち、第一の測定モードにおける他の
一の粒子検出回路により得られた粒子計数値により、第
二の測定モードにおいて対象となる粒子計数値を把握す
ることができ、把握した数値を所定値と比較することが
できる。所定値として、生体サンプルにおいて正常値と
される値の一定範囲に設定されている場合、把握した数
値が前記範囲にあれば、サンプルは正常と判断され、第
二の測定モードを実行する必要がないことがある。逆
に、正常値の一定範囲から外れている場合に、第二の測
定モードを実行することができる。That is, the particle count value of interest in the second measurement mode can be grasped from the particle count value obtained by the other particle detection circuit in the first measurement mode, and the grasped numerical value can be obtained. It can be compared with a predetermined value. When the predetermined value is set in a certain range of the normal value in the biological sample, if the grasped numerical value is in the range, the sample is determined to be normal, and it is necessary to execute the second measurement mode. Sometimes there is not. On the contrary, the second measurement mode can be executed when it is out of the certain range of the normal value.
【００２６】また、第二の測定モードにおいて、一の粒
子検出回路と、他の一の粒子検出回路とを併用し、粒子
検出手段を通過した全粒子を測定対象とすることができ
る。この場合、第二の測定モードにおいて、一の粒子検
出回路の対象粒子を引き続いて処理するため、前記粒子
の数え落としを無くすことができる。Further, in the second measurement mode, one particle detection circuit and another one particle detection circuit can be used together, and all the particles that have passed through the particle detection means can be the objects of measurement. In this case, in the second measurement mode, the target particles of the one particle detection circuit are successively processed, so that counting down of the particles can be eliminated.
【００２７】また、第一の測定モードにおける他の一の
粒子検出回路により得られた粒子計数値により、第一の
測定モードを継続して実施するか、第二の測定モードを
実施するか、または測定を中止することを決定ができる
ので、画像処理対象粒子のサンプル測定体積を増加せる
ことができ、測定精度が改善できる。Whether the first measurement mode is continuously executed or the second measurement mode is executed according to the particle count value obtained by the other particle detection circuit in the first measurement mode, Alternatively, since it can be decided to stop the measurement, the sample measurement volume of the particles to be image-processed can be increased, and the measurement accuracy can be improved.
【００２８】また、前記粒子の検出は、その粒子から発
せられる粒子のサイズ情報に基ずき、粒子からの光散乱
情報を用い、光散乱信号の大小関係、または、粒子検出
系の通過時間による大小関係、または両者の情報を併用
し、粒子の大小を識別することができる。また、前記粒
子の検出は、その粒子から発せられる蛍光散乱信号情報
に基ずき、蛍光散乱信号の大小関係を利用して、粒子種
類の識別をすることもできる。Further, the detection of the particles is based on the size information of the particles emitted from the particles, and the light scattering information from the particles is used to determine the magnitude relationship of the light scattering signals or the passage time of the particle detection system. It is possible to identify the size of the particles by using the size relationship or the information of both. Further, the detection of the particles can be performed based on the fluorescence scattering signal information emitted from the particles, and the particle type can be identified by utilizing the magnitude relationship of the fluorescence scattering signals.
【００２９】さらに、第一の測定モードにおける他の一
の粒子検出回路により得られたデータにより複数種の粒
子を分類・計数し、第二の測定モードを実施するかどう
か判断するため、無駄な測定を省くことができる。Further, it is unnecessary to classify and count a plurality of types of particles based on the data obtained by the other particle detection circuit in the first measurement mode and determine whether or not to execute the second measurement mode. The measurement can be omitted.
【００３０】また、前記サンプル液の幅が変化しないフ
ローセルを用い、サンプル液量の増減は、流速およびサ
ンプル厚さの増減にて対応するるので、前記複数の測定
モードにおいて、粒子画像撮像倍率を同一として撮像す
ることができるので、画像分解能に起因する間違いを少
なくすることができる。画像撮像倍率が同一であるの
で、装置の構成を簡単にすることができ、複数の測定モ
ードにおいて、同一方法により画像処理および粒子分類
処理をすることができる。Further, since the flow cell in which the width of the sample liquid does not change is used and the increase / decrease in the sample liquid amount corresponds to the increase / decrease in the flow velocity and the sample thickness, the particle image imaging magnification is increased in the plurality of measurement modes. Since the images can be taken as the same image, it is possible to reduce errors due to the image resolution. Since the image pickup magnifications are the same, the configuration of the device can be simplified, and image processing and particle classification processing can be performed by the same method in a plurality of measurement modes.
【００３１】また、粒子検出とともに粒子計数するた
め、いわゆる画像処理におけるデットタイムによる粒子
の数え落としがあっても、サンプル中の粒子数を正しく
知ることができる。また、サンプル液および清浄液の流
量を制御し、前記サンプル液の照射光軸方向の厚さを制
御するので、測定体積が増加し、測定精度が改善され
る。Since the particles are counted together with the particle detection, the number of particles in the sample can be correctly known even if the particles are missed due to dead time in so-called image processing. Further, since the flow rates of the sample liquid and the cleaning liquid are controlled and the thickness of the sample liquid in the irradiation optical axis direction is controlled, the measurement volume is increased and the measurement accuracy is improved.
【００３２】一つの測定モードにおいて、複数の測定対
象粒子を定め、別々に粒子検出し、一方は粒子分類処
理、他方は粒子計数させているため、例えば、サンプル
厚さが厚く、粒子画像が焦点外れのため画像がボケてい
ても、粒子検出および粒子計数は正しく行われる。In one measurement mode, a plurality of particles to be measured are determined, the particles are detected separately, one is subjected to particle classification processing, and the other is subjected to particle counting. Therefore, for example, the sample thickness is thick and the particle image is focused. Even if the image is blurred due to the deviation, particle detection and particle counting are correctly performed.
【００３３】また、第一の測定モードの他の一の検出回
路において、第二の測定モードでの画像処理をしなくて
も、複数種の粒子を粒子検出信号の大きさおよび信号の
パルス幅などの検出パラメータにより、複数種の粒子を
計数するようにできる。これにより、第二の測定モード
を実行するあるいは実行しないの判断を正しく実行でき
る。Further, in the other detection circuit of the first measurement mode, even if the image processing in the second measurement mode is not performed, a plurality of types of particles can be detected in terms of the size of the particle detection signal and the pulse width of the signal. It is possible to count plural kinds of particles by detecting parameters such as. This makes it possible to correctly determine whether or not to execute the second measurement mode.
【００３４】[0034]
【実施例】本発明に係るフロー式粒子画像解析方法およ
びその装置の一実施例を図１ないし図６を参照して説明
する。 〔実施例 １〕図１は、本発明の一実施例に係るフロー
式粒子画像解析方法に用いる解析装置の略示構成図、図
２は、図１の実施例におけるフローセルの構成を示す斜
視図、図３は、図２の実施例におけるノズルを内蔵する
セル部の略示斜視図、図４は、図２のフローセルにおけ
るサンプル液流れとノズルとの略示斜視図、図５は、図
２のフローセルにおける測定モード切り替えによるサン
プル液の変形説明図、図６は、図１のフロー式粒子画像
解析装置における解析動作の説明ブロック図である。DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS An embodiment of a flow type particle image analysis method and apparatus according to the present invention will be described with reference to FIGS. [Embodiment 1] FIG. 1 is a schematic configuration diagram of an analyzer used in a flow type particle image analysis method according to an embodiment of the present invention, and FIG. 2 is a perspective view showing a configuration of a flow cell in the embodiment of FIG. 3, FIG. 3 is a schematic perspective view of a cell portion containing a nozzle in the embodiment of FIG. 2, FIG. 4 is a schematic perspective view of a sample liquid flow and a nozzle in the flow cell of FIG. 2, and FIG. FIG. 6 is a deformation explanatory diagram of the sample liquid by switching the measurement mode in the flow cell of FIG. 6, and FIG. 6 is an explanatory block diagram of the analysis operation in the flow type particle image analysis device of FIG.
【００３５】図１において、本発明の一実施例に係るフ
ロー式粒子画像解析方法に用いられる解析装置は、フロ
ー系制御部１２４により流れ量が調整され、幅が一定な
サンプル流れ１１０が流れるフローセル１００と、異な
る二つの基準により前記サンプル流れ１１０内の粒子の
有無を検出する粒子検出部１０１と、前記粒子検出部１
０１からの信号出力によりサンプル流れ１１０を撮像す
る画像撮像部１０２と、粒子の種類に応じて二つの測定
モードに切り替え、前記撮像画像中の粒子を分類識別す
る粒子解析部１０３とから構成されている。なお、本実
施例においては、画像撮像部１０２の撮像倍率は、つね
に同一の場合について説明する。Referring to FIG. 1, an analyzer used in a flow type particle image analysis method according to an embodiment of the present invention has a flow cell in which a flow amount is adjusted by a flow system controller 124 and a sample flow 110 having a constant width flows. 100, a particle detector 101 for detecting the presence or absence of particles in the sample flow 110 based on two different criteria, and the particle detector 1.
An image capturing unit 102 that captures a sample flow 110 by a signal output from 01 and a particle analysis unit 103 that switches between two measurement modes according to the type of particles and classifies and identifies the particles in the captured image. There is. In the present embodiment, the case where the image pickup magnifications of the image pickup units 102 are always the same will be described.
【００３６】前記フローセル１００は、その内部をサン
プル液Ｓ0と、前記サンプル液Ｓ0をシースするシース液
Ｓ1とからなるサンプル流れ１１０が流れている。前記
フロー系制御部１２４は、前記サンプル液Ｓ0とシース
液Ｓ1との流量比を調整するようになっている。[0036] The flow cell 100, its internal and sample liquid S 0, the sample flow 110 consisting of sheath liquid S 1 Metropolitan to sheath the sample liquid S 0 is flowing. The flow system control unit 124 is adapted to adjust the flow rate ratio between the sample solution S 0 and the sheath solution S 1 .
【００３７】前記粒子検出部１０１は、レーザ光を発射
する半導体レーザ源１５と、前記レーザ光を平行なレー
ザ光束１４に形成するコリメータレンズ１６と、前記レ
ーザ光束１４の一方向のみを集束するシリンドリカルレ
ンズ１７と、この集束されたレーザ光束を反射する反射
鏡１８と、前記反射レーザ光束を前記フローセル１００
中の粒子に照射する微小反射鏡１９と、前記粒子検出領
域を照射した照射光を通過させる顕微鏡対物レンズ５
と、ビームスプリッタ２０と、絞り２１と、それぞれ別
の検出基準により動作する二つの検出回路を有する光検
出回路２２と、フラッシュランプ点灯制御回路２３とを
備えている。The particle detector 101 includes a semiconductor laser source 15 for emitting a laser beam, a collimator lens 16 for forming the laser beam into a parallel laser beam 14, and a cylindrical beam for focusing the laser beam 14 in only one direction. A lens 17, a reflecting mirror 18 for reflecting the focused laser beam, and the reflected laser beam for the flow cell 100.
A micro-reflecting mirror 19 for irradiating the particles inside, and a microscope objective lens 5 for passing the irradiation light irradiating the particle detection region.
A beam splitter 20, a diaphragm 21, a photodetector circuit 22 having two detection circuits that operate according to different detection criteria, and a flash lamp lighting control circuit 23.
【００３８】また、前記粒子検出部１０１は、粒子の有
無をその検出原理にしたがい粒子を検出する。この検出
原理は複数用意されている。検出原理としては、粒子サ
イズ情報に基づくものがある。粒子サイズ情報として
は、粒子検出系を粒子が通過する時間または光照射によ
る粒子からの散乱光情報を利用できる。すなわち、粒子
通過時間の大小は、粒子の大小関係に相当する。また、
光散乱情報の大小は、同じく通過粒子の大小関係を表
す。The particle detector 101 detects particles according to the detection principle of the presence or absence of particles. Multiple detection principles are prepared. Some detection principles are based on particle size information. As the particle size information, the time when the particles pass through the particle detection system or the scattered light information from the particles due to light irradiation can be used. That is, the size of the particle transit time corresponds to the size relationship of the particles. Also,
The size of the light scattering information also represents the size relationship of passing particles.
【００３９】また、別な検出原理としては、粒子からの
蛍光情報の信号大小関係を利用できる。また、粒子から
の蛍光信号の大小関係を利用して粒子を検出してもよ
い。粒子検出系に１次元イメージセンサを利用する場合
には、粒子内の複雑な形態情報も利用できる。また、サ
ンプル液に染色液を加える場合には色彩レベルにより粒
子を検出し、測定する粒子の径の大小に応じて判断する
色彩レベルを変えても差し支えない。As another detection principle, the signal magnitude relationship of fluorescence information from particles can be used. Further, the particles may be detected by utilizing the magnitude relationship of the fluorescence signal from the particles. When a one-dimensional image sensor is used for the particle detection system, complicated morphological information inside the particle can also be used. In addition, when a staining solution is added to the sample solution, the particles may be detected based on the color level and the color level to be judged may be changed according to the size of the particle to be measured.
【００４０】前記画像撮像部１０２は、前記粒子検出部
１０１から粒子検出信号をうけ、フラッシュランプ１へ
駆動信号を出力するフラッシュランプ駆動回路１ａと、
前記駆動信号により点灯するフラッシュランプ１と、前
記フラッシュランプ１からの照射光を通過させ、前記フ
ローセル１００中の粒子を照射するフィールドレンズ
２、視野絞り１１、開口絞り１２、顕微鏡コンデンサレ
ンズ３と、前記粒子の照射光を収束する顕微鏡対物レン
ズ５（本実施例においては、粒子検出部１０１の顕微鏡
対物レンズと共用されている）と、前記収束光をうけ前
記粒子を撮像するＴＶカメラ８とから構成されている。The image pickup section 102 receives a particle detection signal from the particle detection section 101 and outputs a drive signal to the flash lamp 1, and a flash lamp drive circuit 1a,
A flash lamp 1 that is turned on by the drive signal, a field lens 2 that passes the irradiation light from the flash lamp 1 and irradiates the particles in the flow cell 100, a field stop 11, an aperture stop 12, and a microscope condenser lens 3, From a microscope objective lens 5 that converges the irradiation light of the particles (in this embodiment, it is also used as the microscope objective lens of the particle detection unit 101), and a TV camera 8 that receives the converged light and images the particles. It is configured.
【００４１】前記粒子解析部１０３は、前記ＴＶカメラ
８から出力される画像信号をデジタル信号に変換するＡ
Ｄ変換器２４と、前記ＡＤ変換された画像信号を所定の
アドレスに記憶する画像メモリ２５と、前記画像メモリ
２５を制御する画像処理制御回路２６と、前記画像メモ
リ２５の記憶された画像信号を読みだして所定の基準に
より粒子の識別分類処理する特徴抽出回路２７、識別回
路２８、粒子数分析部４０と、各部を制御する中央制御
部２９と、画像表示部５０とを備えている。また、前記
粒子数分析部４０は、測定モード切り替え回路を備えて
いる。The particle analysis unit 103 converts the image signal output from the TV camera 8 into a digital signal A
A D converter 24, an image memory 25 for storing the AD-converted image signal at a predetermined address, an image processing control circuit 26 for controlling the image memory 25, and an image signal stored in the image memory 25. It is provided with a feature extraction circuit 27 for performing particle identification and classification processing based on a predetermined standard, an identification circuit 28, a particle number analysis section 40, a central control section 29 for controlling each section, and an image display section 50. Further, the particle number analysis unit 40 includes a measurement mode switching circuit.
【００４２】上記粒子の識別分類処理は、通常行われて
いるパターン認識処理により自動的に行われる。この画
像処理結果と測定条件および画像処理された画像情報
が、中央制御部２９から粒子数分析部４０に送られる。
前記画像情報は、粒子分類結果と粒子分類に使われた粒
子識別特徴パラメータデータである。The identification and classification processing of the particles is automatically performed by the pattern recognition processing which is usually performed. The image processing result, the measurement condition, and the image information subjected to the image processing are sent from the central controller 29 to the particle number analyzer 40.
The image information is a particle classification result and particle identification feature parameter data used for particle classification.
【００４３】前記粒子数分析部４０においては、中央制
御部２９、光検出回路２２からの粒子検出信号、および
画像処理制御回路２６からの制御信号をもとに、検出粒
子と粒子画像情報との対応関係を調べ、最終的な粒子画
像の分類識別結果の整理がなされる。これらの結果を基
にして、サンプル中の粒子濃度計算、視野換算粒子数計
算を行い、分析結果を中央制御部２９に返送される。そ
の結果は、中央制御部２９に送られ、必要に応じて表示
部５０に出力表示される。In the particle number analyzing unit 40, the detected particles and the particle image information are detected based on the particle detection signal from the central control unit 29, the photodetection circuit 22 and the control signal from the image processing control circuit 26. The correspondence is examined and the final classification and classification result of the particle image is arranged. Based on these results, the concentration of particles in the sample and the number of particles converted into the visual field are calculated, and the analysis result is returned to the central control unit 29. The result is sent to the central control unit 29 and is output and displayed on the display unit 50 as necessary.
【００４４】フローセル１００を図２、３、４を参照し
詳細に説明する。図２に示されるように、フローセル１
００は、外側のケース部Ｋと、前記ケース部Ｋ内に配設
されるセル部Ｃと、前記セル部Ｃの入口近傍に配置され
るサンプル液用ノズル１１４とから構成され、通常ガラ
ス材により製作され透明となっている。前記ケース部Ｋ
は断面が長方形の角筒であり、その内側に前記セル部Ｃ
と前記サンプル液用ノズル１１４とが内設されるように
なっている。The flow cell 100 will be described in detail with reference to FIGS. As shown in FIG. 2, the flow cell 1
00 is composed of an outer case part K, a cell part C arranged in the case part K, and a sample liquid nozzle 114 arranged in the vicinity of the inlet of the cell part C, and is usually made of a glass material. It is made and transparent. The case part K
Is a rectangular tube having a rectangular cross section, and the cell portion C is provided inside thereof.
And the sample liquid nozzle 114 are internally provided.
【００４５】図３に示す如く、前記セル部Ｃは、断面が
長方形状であり、その長手方向が流体の流れ方向となっ
ており、前記流れ方向の両端が、上記流体入口１１７、
流体出口１１８になり、その間を流路断面積が変化し、
平行流路部１５０と、縮流流路部１５１と、測定流路部
１５２と、減速流路部１５３とから構成される。As shown in FIG. 3, the cell portion C has a rectangular cross section, and the longitudinal direction thereof is the flow direction of the fluid, and both ends of the flow direction are the fluid inlet 117,
Becomes the fluid outlet 118, the flow passage cross-sectional area changes between them,
The parallel flow path section 150, the contracted flow path section 151, the measurement flow path section 152, and the deceleration flow path section 153 are included.
【００４６】図４に示す如く、ノズル１１４は、その長
手方向をサンプル流れ方向とし、その両端面がサンプル
液Ｓ0の入口１１５、サンプル液Ｓ0の出口１１６となっ
ている。その形状は、前記サンプル液Ｓ0の流れ方向に
向かって前記出口１１６まで断面形状がほぼ同一の長方
形状のままであるが、サンプル出口１１６の先端からは
サンプル流れ方向に対して縮小する形となっている。[0046] As shown in FIG. 4, the nozzle 114, with its longitudinal direction with the sample flow direction, has both end faces thereof entrance 115 of the sample liquid S 0, and the outlet 116 of the sample liquid S 0. The shape is such that the cross-section remains substantially the same rectangular shape toward the outlet 116 in the flow direction of the sample solution S 0 , but the sample outlet 116 contracts from the tip end in the sample flow direction. Has become.
【００４７】前記ノズル１４は、前記サンプル流れ方向
に平行な図示左右の両側面にはサンプルガイド１１３が
取り付けられている。このサンプルガイド１１３は、サ
ンプル液Ｓ0の液流を間にして互いに対向する一対の板
状部材であり、その長さは出口１１６から前記セル部Ｃ
平行流路部１５０の真中部付近まで延びている。前記サ
ンプルガイド１１３と直交する図示上下の両面にも、サ
ンプルガイドが設けられ、その上面は、層流形成のため
の切り欠き部となっている。The nozzle 14 is provided with sample guides 113 on both left and right sides in the drawing which are parallel to the sample flow direction. The sample guide 113 is a pair of plate-like members facing each other with a liquid flow of the sample liquid S 0 in between, and the length thereof is from the outlet 116 to the cell portion C.
It extends to the vicinity of the center of the parallel flow path portion 150. Sample guides are also provided on both upper and lower surfaces in the drawing orthogonal to the sample guide 113, and the upper surface thereof is a notch portion for forming a laminar flow.
【００４８】また、前記ノズル１４の断面は長方形状を
形成し、前記サンプル流れ方向と直交する方向、かつ、
前記サンプルガイド１１３の間を幅方向として長辺と
し、前記サンプルガイド１１３と直交する図示上下のサ
ンプルガイド両面間を厚さ方向として短辺となってい
る。前記サンプルガイド１１３は、サンプル液Ｓ0の前
記幅方向の寸法を一定にする働きがある。Further, the nozzle 14 has a rectangular cross section and has a direction orthogonal to the sample flow direction, and
The space between the sample guides 113 is a long side in the width direction, and the space between the upper and lower sample guides in the drawing orthogonal to the sample guide 113 is a short side in the thickness direction. The sample guide 113 has a function of making the dimension of the sample solution S 0 in the width direction constant.
【００４９】前記平行流路部１５０は、前記入口１１７
から前記縮流流路部１５１の接合部分までは、前記サン
プル液Ｓ0の流れ方向に垂直な断面が、四角形状、か
つ、一定である。前記入口１１７には、前記流れ方向に
垂直な断面の四角形の交点が上記ノズル１１４が形成す
る長方形の対角線交点と一致するように、前記ノズル１
１４が設けられる。したがって、前記入口１１７の形成
する四角形の内側に、前記ノズル１１４の形成する長方
形が含まれる形状となっている。The parallel flow path portion 150 has the inlet 117
The cross section perpendicular to the flow direction of the sample solution S 0 from the joint portion to the joint portion of the contraction flow channel portion 151 is square and constant. At the inlet 117, the nozzle 1 is arranged so that the intersection of a quadrangle of a cross section perpendicular to the flow direction coincides with the diagonal intersection of the rectangle formed by the nozzle 114.
14 is provided. Therefore, the inside of the quadrangle formed by the inlet 117 includes the rectangle formed by the nozzle 114.
【００５０】前記縮流流路部１５１は、平行流路部１５
０と接合部分から測定流路部１５２の接合部分まで断面
形状が四角形状となっており、幅方向の寸法は変化せ
ず、厚さ方向の寸法が、測定流路部１５２に向かって徐
々に減少する形状である。The contraction flow passage 151 is a parallel flow passage 15
0 and the joint portion from the joint portion to the joint portion of the measurement flow passage portion 152 have a quadrangular cross section, the dimension in the width direction does not change, and the dimension in the thickness direction gradually increases toward the measurement passage portion 152. The shape is decreasing.
【００５１】前記測定流路部１５２は、縮流流路部１５
１の接合部分から減速流路部１５３の接合部分まで断面
形状が同一の四角形状のもので、中央部分には粒子検出
領域８０と撮像領域９０とが設けられている。前記粒子
検出領域８０は、上記幅方向に延び、ほぼサンプル液Ｓ
0の幅と同じ長さの細長い形状である。前記撮像領域９
０は、前記粒子検出領域８０の下流側に配置され、一辺
が、サンプル液Ｓ0の幅とほぼ同じ長さの寸法を有する
四角形状となっている。The measurement flow path section 152 is the contracted flow path section 15
The rectangular cross section has the same sectional shape from the joint portion 1 to the joint portion of the deceleration flow path portion 153, and the particle detection region 80 and the imaging region 90 are provided in the central portion. The particle detection region 80 extends in the width direction, and is almost the sample solution S.
It has an elongated shape with the same length as the width of 0 . The imaging area 9
0 is arranged on the downstream side of the particle detection region 80, and one side thereof has a quadrilateral shape having a dimension substantially the same as the width of the sample solution S 0 .
【００５２】前記減速流路部１５３は、測定流路部１５
２の接合部分から出口１１８まで断面が四角形状のもの
で、幅方向の寸法は一定で、厚さ方向の寸法が、サンプ
ル液Ｓ0の流れ方向に沿って徐々に拡大する形状であ
る。The deceleration flow path section 153 is the measurement flow path section 15
The cross section from the joining portion of 2 to the outlet 118 has a quadrangular shape, the dimension in the width direction is constant, and the dimension in the thickness direction gradually expands along the flow direction of the sample solution S 0 .
【００５３】次に、フローセル１００内における粒子１
６０が懸濁したサンプル液Ｓ0と、シース液Ｓ1との流動
の状態について説明する。懸濁した粒子１６０が含まれ
るサンプル液Ｓ0は、サンプル液Ｓ0の入口１１５から、
シース液Ｓ1は、前記セル部Ｃの入口１１７から平行流
路部１５０に流入する。平行流路部１５０では、サンプ
ル液Ｓ0がノズル１１４の形状にしたがう層流となり、
この層流のサンプル液Ｓ0を内層としてシース液Ｓ1が外
層、すなわち被覆層となり、二重の層流が形成される。Next, the particles 1 in the flow cell 100 are
The flow state of the sample liquid S 0 in which 60 is suspended and the sheath liquid S 1 will be described. The sample solution S 0 containing the suspended particles 160 is supplied from the inlet 115 of the sample solution S 0 ,
The sheath liquid S 1 flows into the parallel flow path part 150 from the inlet 117 of the cell part C. In the parallel flow path part 150, the sample solution S 0 becomes a laminar flow according to the shape of the nozzle 114,
The laminar flow of the sample liquid S 0 is used as an inner layer, and the sheath liquid S 1 is used as an outer layer, that is, a coating layer, and a double laminar flow is formed.
【００５４】このとき、サンプルガイドは、ノズル出口
１１６でのサンプル液Ｓ0の乱れを抑制するので、前記
ノズル出口１１６から前記セル部Ｃの出口１１８まで、
サンプル液Ｓ0の幅は、ほぼサンプルガイド１１３の幅
に保つことができる。また、サンプル液Ｓ0とシース液
Ｓ1の流量比を調整すると、サンプルガイド１１３によ
りこのサンプル液Ｓ0の幅の寸法は一定に保たれ、厚さ
の寸法だけが変化する。At this time, since the sample guide suppresses the turbulence of the sample solution S 0 at the nozzle outlet 116, from the nozzle outlet 116 to the outlet 118 of the cell portion C,
The width of the sample solution S 0 can be kept almost equal to the width of the sample guide 113. Further, when the flow rate ratio between the sample liquid S 0 and the sheath liquid S 1 is adjusted, the width dimension of the sample liquid S 0 is kept constant by the sample guide 113, and only the thickness dimension changes.
【００５５】前記サンプル液Ｓ0が、上記縮流流路部１
５１に流入すると、厚さ方向にのみが縮流する。例え
ば、幅寸法が２００〜３００μｍ、厚さ寸法が数μｍ〜
数１０μｍ程度の超偏平サンプルとなる。この超偏平サ
ンプルが測定流路部１５２を通過すると、サンプル液Ｓ
0中の粒子１６０は、粒子検出領域８０により検出さ
れ、撮像領域９０で撮像される。そして、超偏平サンプ
ルが、減速流路部１５３を通過して、上記出口１１８か
ら流出する。前記減速流路部１５３も前記出口１１８に
向かって、除々に拡大するようになっているので、前記
サンプル液Ｓ0とシース液Ｓ1との二重層流が乱されな
い。The sample solution S 0 is supplied to the contracted flow channel section 1 described above.
When it flows into 51, it contracts only in the thickness direction. For example, the width dimension is 200 to 300 μm, and the thickness dimension is several μm
It becomes a super flat sample of about several tens of μm. When this ultra-flat sample passes through the measurement flow path section 152, the sample liquid S
The particles 160 in 0 are detected by the particle detection area 80 and imaged in the imaging area 90. Then, the ultra-flat sample passes through the deceleration flow path portion 153 and flows out from the outlet 118. Since the deceleration flow path portion 153 also gradually expands toward the outlet 118, the double laminar flow of the sample solution S 0 and the sheath solution S 1 is not disturbed.
【００５６】また、フローセル１００は、サンプル液Ｓ
0とシース液Ｓ1との流量比に応じて測定流路部１５２の
超偏平サンプルの厚さが調整される。例えば、サンプル
液Ｓ0の流量が一定の場合に、シース液Ｓ1の流量が少な
くなると、幅は一定のままで超偏平サンプルの厚さが増
加し、シース液Ｓ1の流量が多くなると、幅は一定のま
まで超偏平サンプルの厚さが減少する。Further, the flow cell 100 has the sample solution S
The thickness of the ultra-flat sample in the measurement flow path portion 152 is adjusted according to the flow rate ratio between 0 and the sheath liquid S 1 . For example, when the flow rate of the sample liquid S 0 is constant, the flow rate of the sheath liquid S 1 is less, the width increases the thickness of the ultra-flat sample remains constant, the flow rate of the sheath liquid S 1 is increased, The width of the superflat sample decreases while the width remains constant.
【００５７】次いで、図５を参照して上記サンプル液流
れ１１０の変形を詳しく説明する。図５は、上記フロー
セルにおける測定モード切り替えによるサンプル液の変
形説明図である。サンプル液Ｓ0中の粒子濃度が小さい
粒子を測定すモードの場合には、測定精度をあげるため
に、サンプル液Ｓ0の流速を速くすることにより測定サ
ンプル液体積を多くしても差し支えないが、それでも測
定体積が不足する場合には、図５（Ｂ）に示したよう
に、サンプル液Ｓ0の厚さを厚くして対応させる。一
方、粒子濃度が大きい粒子を対象とした測定モードで
は、サンプル液流速を遅くし、必要ならばサンプル液Ｓ
0の厚さを図５（Ｄ）のように薄くして対応させる。い
ずれの測定モードにおいても、画像の取り込み領域の大
きさは、図５（Ａ）、（Ｃ）で示したように一定で、測
定モードを切り換えても、幅寸法Ｗ0は、変わらず、厚
みが、図５（Ｂ）のＴ0（厚さが厚い状態）から、図５
（Ｄ）のＴ1（厚さが薄い状態）に、または逆に、Ｔ1か
らＴ0に変化する。Next, the deformation of the sample liquid flow 110 will be described in detail with reference to FIG. FIG. 5 is a diagram for explaining a modification of the sample liquid by switching the measurement mode in the flow cell. If the sample liquid modes to measure the particle particle concentration smaller in S 0, in order to increase the measurement accuracy, but no problem even if many measurement sample liquid volume by increasing the flow rate of the sample liquid S 0 If the measurement volume is still insufficient, the thickness of the sample solution S 0 is increased to cope with it, as shown in FIG. 5 (B). On the other hand, in the measurement mode for particles with a high particle concentration, the sample liquid flow rate is slowed down, and if necessary, the sample liquid S
The thickness of 0 is made thin as shown in FIG. In any measurement mode, the size of the image capturing area is constant as shown in FIGS. 5A and 5C, and the width dimension W 0 does not change even when the measurement mode is switched, and the thickness However, from T 0 of FIG.
(D) changes to T 1 (thin state is thin), or conversely, changes from T 1 to T 0 .
【００５８】次に、本実施例に係るフロー式粒子画像解
析装置の動作について説明する。図１において、フロー
セル１００には、サンプル液Ｓ0およびシース液Ｓ1が、
図示上方から下方に流れている。前記中央制御部２９
は、粒子数分析部４０と、画像処理制御回路２６と、フ
ロー系制御部１２４とに制御信号を送る。前記粒子数分
析部４０は、前記制御信号により測定対象の粒子に対応
する測定モードを切り替える。また、前記画像処理制御
回路２６は、前記粒子数分析部４０に指令信号を出力
し、粒子数を計数させる。前記制御信号によりフロー系
制御部１２４は、測定対象の粒子に対応して、シース液
Ｓ1の流量とサンプル液Ｓ0の流量との流量比を変化し、
フローセル１００中のサンプル液Ｓ0の厚さ方向のみの
寸法を変化させる。Next, the operation of the flow type particle image analysis apparatus according to this embodiment will be described. In FIG. 1, the flow cell 100 is provided with a sample solution S 0 and a sheath solution S 1 .
It flows from the upper side to the lower side in the figure. Central control unit 29
Sends a control signal to the particle number analysis unit 40, the image processing control circuit 26, and the flow system control unit 124. The particle number analysis unit 40 switches the measurement mode corresponding to the particle to be measured by the control signal. Further, the image processing control circuit 26 outputs a command signal to the particle number analysis unit 40 to count the number of particles. With the control signal, the flow system control unit 124 changes the flow rate ratio between the flow rate of the sheath liquid S 1 and the flow rate of the sample liquid S 0 in accordance with the particles to be measured,
The dimension of the sample solution S 0 in the flow cell 100 only in the thickness direction is changed.
【００５９】半導体レーザ源１５からのレーザ光がコリ
メータレンズ１６を通過して、レーザ光束１４となる。
このレーザ光束１４は、シリンドリカルレンズ１７、反
射板１８および反射板１９を介してフローセル１００に
照射される。前記サンプル液Ｓ0中の粒子が前記レーザ
光束１４の照射位置に到達すると、前記レーザ光束１４
により検出され、顕微鏡対物レンズ５を介しビームスプ
リッタ２０により反射され、絞り２１を介し光検出回路
２２に入射される。前記光検出回路２２から粒子数分析
部４０とフラッシュランプ点灯制御回路２３とに対し、
検出信号が送られる。The laser light from the semiconductor laser source 15 passes through the collimator lens 16 and becomes the laser light beam 14.
The laser light flux 14 is applied to the flow cell 100 via the cylindrical lens 17, the reflection plate 18, and the reflection plate 19. When the particles in the sample solution S 0 reach the irradiation position of the laser beam 14, the laser beam 14
Is reflected by the beam splitter 20 through the microscope objective lens 5 and is incident on the photodetector circuit 22 through the diaphragm 21. From the light detection circuit 22 to the particle number analysis unit 40 and the flash lamp lighting control circuit 23,
A detection signal is sent.
【００６０】この検出信号によりフラッシュランプ点灯
制御回路２３は、フラッシュランプ駆動回路１ａを介し
フラッシュランプ１を点灯させる。前記フラッシュラン
プ１からのフラッシュ光は、レンズ２を通過し、視野絞
り１１と、開口絞り１２、顕微鏡コンデンサレンズ３を
介して、フローセル１００中の粒子を照射する。この照
射された粒子の像が、顕微鏡対物レンズ５を介してＴＶ
カメラ８に送られ撮像される。With this detection signal, the flash lamp lighting control circuit 23 lights the flash lamp 1 via the flash lamp driving circuit 1a. The flash light from the flash lamp 1 passes through the lens 2 and irradiates the particles in the flow cell 100 through the field stop 11, the aperture stop 12 and the microscope condenser lens 3. The image of the irradiated particles is displayed on the TV via the microscope objective lens 5.
It is sent to the camera 8 and is imaged.
【００６１】前記中央制御部２９から信号をうけた画像
処理制御回路２６は、前記撮像画像の情報をＡＤ変換器
２４を介し画像メモリ２５に供給し、さらに、画像メモ
リ２５から特徴抽出回路２７と識別回路２８とを介し、
中央制御部２９に返送する。前記中央制御部２９は、画
像処理した像を表示部５０に表示させる。The image processing control circuit 26, which receives the signal from the central control unit 29, supplies the information of the picked-up image to the image memory 25 via the AD converter 24, and further from the image memory 25 to the feature extraction circuit 27. Via the identification circuit 28,
It returns to the central control unit 29. The central control unit 29 causes the display unit 50 to display the image processed image.
【００６２】次に、図６を参照して、本実施例における
光検出回路２２および粒子数分析部４０による測定モー
ドの切り替えと対象粒子の計数と画像処理との関係を説
明する。図６は、前記構成に基ずく解析動作を説明する
ブロック図である。図６において、光検出回路２２は、
一の検出回路である検出回路ａ３１と、前記検出回路ａ
３１に接続される粒子の大小を判別する粒子判定回路ａ
３３と、他の一の検出回路である検出回路ｂ３２と、前
記検出回路ｂ３２に接続される粒子の大小を判別する粒
子判定回路ｂ３４とにより構成されている。前記検出回
路ａ３１と前記検出回路ｂ３２と粒子検出は、粒子の検
出レーザ光に対し並列になっており、粒子判定回路ａ３
３、粒子判定回路ｂ３４とにより、対象粒子の種類に応
じ、それぞれ別々の判別基準にしたがって行われる。Next, with reference to FIG. 6, the relationship between the switching of the measurement mode by the photodetector circuit 22 and the particle number analyzing section 40, the counting of the target particles, and the image processing will be described with reference to FIG. FIG. 6 is a block diagram illustrating an analysis operation based on the above configuration. In FIG. 6, the photodetector circuit 22 is
A detection circuit a31 which is one detection circuit, and the detection circuit a
Particle determination circuit a for determining the size of particles connected to 31
33, a detection circuit b32 that is another detection circuit, and a particle determination circuit b34 that determines the size of particles connected to the detection circuit b32. The detection circuit a31, the detection circuit b32, and particle detection are arranged in parallel with the particle detection laser beam, and the particle determination circuit a3 is used.
3. By the particle determination circuit b34, the determination is performed according to different determination criteria depending on the type of target particles.
【００６３】前記粒子数分析部４０は、計数回路ａ４
１、計数回路ｂ４２、粒子検出系制御部４４およびモー
ド切替回路４３より構成されている。前記計数回路ａ４
１、計数回路ｂ４２は、その入力側がそれぞれ前記光検
出回路２２の検出回路ａ３１、検出回路ｂ３２と接続さ
れ、その出力側が粒子検出系制御部４４と接続されてい
る。The particle number analysis unit 40 includes a counting circuit a4.
1, a counting circuit b42, a particle detection system control unit 44, and a mode switching circuit 43. The counting circuit a4
1. The counter circuit b42 has its input side connected to the detection circuit a31 and the detection circuit b32 of the photodetection circuit 22, and its output side connected to the particle detection system control unit 44.
【００６４】前記粒子検出系制御部４４は、前述の如
く、前記光検出回路２２の検出回路ａ３１、検出回路ｂ
３２と接続されるとともに、中央制御部２９とも接続さ
れている。また、その出力側が、モード切替回路４３と
接続され、画像処理制御回路２６とも接続されている。As described above, the particle detection system control section 44 includes the detection circuit a31 and the detection circuit b of the photodetection circuit 22.
The central control unit 29 is connected with the central control unit 29. Further, its output side is connected to the mode switching circuit 43 and also to the image processing control circuit 26.
【００６５】前記モード切替回路４３は、前述の如く、
前記粒子検出系制御部４４の信号を入力すると共に、中
央制御部２９からの信号も入力する。また、前記モード
切替回路４３は、フラッシュランプ点灯制御回路２３に
出力する。なお、前記画像処理制御回路２６と前記フラ
ッシュランプ点灯制御回路２３とについての再度の説明
は、煩瑣となるので省略する。The mode switching circuit 43, as described above,
The signal from the particle detection system control unit 44 is input, and the signal from the central control unit 29 is also input. Further, the mode switching circuit 43 outputs to the flash lamp lighting control circuit 23. The description of the image processing control circuit 26 and the flash lamp lighting control circuit 23 will be omitted because it is troublesome.
【００６６】いま、中央制御装置２９の制御信号が粒子
検出系制御部４４を介して前記モード切替回路４３に送
られ、第一の測定モードに切り替えられた場合、フロー
系制御部１２４は、シース液Ｓ1の流量とサンプル液Ｓ0
の流量との流量比を変化し、フローセル１００中のサン
プル液Ｓ0の厚さを厚くし、流速を速くし、前記サンプ
ル液Ｓ0を多量流れさせる。Now, when the control signal of the central controller 29 is sent to the mode switching circuit 43 via the particle detection system control unit 44 to switch to the first measurement mode, the flow system control unit 124 causes the sheath to operate. Flow rate of liquid S 1 and sample liquid S 0
The flow rate ratio to the flow rate is changed to increase the thickness of the sample solution S 0 in the flow cell 100, increase the flow rate, and cause the sample solution S 0 to flow in a large amount.
【００６７】前記粒子検出系制御部４４の信号により検
出回路ａ３１、粒子判定回路ａ３３、計数回路ａ４１が
動作状態となり、レーザ光によりサンプル液Ｓ0中の大
径、かつ、少量の処理対象粒子を検出し、出力パルス信
号を出力する。前記出力パルス信号は、計数回路ａ４１
により大径、かつ、少量の粒子数として計数される。The detection circuit a31, the particle determination circuit a33, and the counting circuit a41 are activated by the signal from the particle detection system control unit 44, and a large diameter and a small amount of particles to be processed in the sample solution S 0 are generated by the laser light. It detects and outputs an output pulse signal. The output pulse signal is the counting circuit a41.
Is counted as a large number of particles with a small diameter.
【００６８】また、前記出力パルス信号と前記測定モー
ド切り替え信号と画像処理制御回路２６との信号が、フ
ラッシュランプ点灯制御回路２３に導かれ、前記点灯制
御回路２３より駆動信号が、ＴＶカメラ８および画像処
理制御回路２６の時間タイミングを合わせてフラッシュ
ランプ駆動回路１ａへ送信される。Further, the output pulse signal, the measurement mode switching signal, and the signal of the image processing control circuit 26 are guided to the flash lamp lighting control circuit 23, and the driving signal is sent from the lighting control circuit 23 to the TV camera 8 and the TV camera 8. It is transmitted to the flash lamp drive circuit 1a at the same timing as the image processing control circuit 26.
【００６９】前記信号によりフラッシュランプ駆動回路
１ａがフラッシュランプ１を点灯し、ＴＶカメラ８によ
り前記前記サンプル液Ｓ0の大径、かつ、少量の粒子を
撮像する。撮像された画像は、画像処理制御回路２６に
より処理され、粒子の分類識別がなされる。The flash lamp drive circuit 1a turns on the flash lamp 1 in response to the signal, and the TV camera 8 captures an image of a large diameter and a small amount of particles of the sample solution S 0 . The captured image is processed by the image processing control circuit 26, and the particles are classified and identified.
【００７０】同時に、前記粒子検出系制御部４４の信号
により検出回路ｂ３２、粒子判定回路ｂ３４、計数回路
ｂ４２も動作状態となり、サンプル液Ｓ0中の小径、か
つ、多量の処理対象粒子を検出し、出力パルス信号を出
力する。前記出力パルス信号が前記計数回路ｂ４２によ
り小径、かつ、多量の粒子数として計数される。At the same time, the detection circuit b32, the particle determination circuit b34, and the counting circuit b42 are activated by the signal from the particle detection system control unit 44, and a small diameter and a large amount of particles to be processed in the sample solution S 0 are detected. , Output the output pulse signal. The output pulse signal is counted as a large number of particles with a small diameter by the counting circuit b42.
【００７１】中央制御装置２９が粒子検出系制御部４４
を介して第二の測定モードに切り替えられた場合、フロ
ー系制御部１２４は、シース液Ｓ1の流量とサンプル液
Ｓ0の流量との流量比を変化し、フローセル１００中の
サンプル液Ｓ0の厚さを薄くし、流速を遅くし、前記サ
ンプル液Ｓ0を小量流れさせる。The central control unit 29 is the particle detection system control unit 44.
If that is switched to the second measurement mode through the flow system control unit 124 changes the flow rate ratio between the flow rate of the flow and the sample liquid S 0 of the sheath liquid S 1, the sample liquid S 0 in the flow cell 100 Is thinned, the flow velocity is reduced, and a small amount of the sample solution S 0 is caused to flow.
【００７２】前記粒子検出系制御部４４の信号により検
出回路ｂ３２、粒子判定回路ｂ３４、計数回路ｂ４２が
動作状態となり、レーザ光によりサンプル液Ｓ0中の小
径、かつ、多量の処理対象粒子を検出し、出力パルス信
号を出力する。前記出力パルス信号は、計数回路ｂ４２
により小径、かつ、多量の粒子数として計数される。The detection circuit b32, the particle determination circuit b34, and the counting circuit b42 are activated by the signal from the particle detection system control unit 44, and a small diameter and a large amount of particles to be processed in the sample solution S 0 are detected by the laser light. Then, the output pulse signal is output. The output pulse signal is a counting circuit b42.
Is counted as a large number of particles with a small diameter.
【００７３】また、前記出力パルス信号と前記測定モー
ド切り替え信号と画像処理制御回路２６との信号が、フ
ラッシュランプ点灯制御回路２３に導かれ、ＴＶカメラ
８および画像処理制御回路２６の時間タイミングを合わ
せてフラッシュランプ駆動回路１ａへ送信される。Further, the output pulse signal, the measurement mode switching signal, and the signal of the image processing control circuit 26 are guided to the flash lamp lighting control circuit 23, and the time timings of the TV camera 8 and the image processing control circuit 26 are adjusted. Is transmitted to the flash lamp drive circuit 1a.
【００７４】前記信号によりフラッシュランプ駆動回路
１ａがフラッシュランプ１を点灯し、前記前記サンプル
液Ｓ0の小径、かつ、多量の粒子を撮像し、上述と同様
にしたがい、撮像画像を処理し、粒子の分類識別がなさ
れる。なお、第二の測定モードで、粒子判定回路ａ３３
および粒子判定回路ｂ３４の両方の判別基準で検出され
た粒子、すなわち、検出系で検出された全粒子を画像処
理対象とし、フラッシュランプ１の点灯制御を実施する
ように構成しても差し支えない。The flash lamp driving circuit 1a turns on the flash lamp 1 in response to the signal, picks up a small diameter and a large amount of particles of the sample solution S 0 , and the picked-up image is processed according to the same procedure as described above. Classification classification is made. In the second measurement mode, the particle determination circuit a33
The particles detected by both of the discrimination criteria of the particle determination circuit b34 and the particle determination circuit b34, that is, all the particles detected by the detection system may be targeted for image processing, and the lighting control of the flash lamp 1 may be performed.
【００７５】次に、第一の測定モードから第二の測定モ
ードへ移行する判断について説明する。前記判断回路
は、図示しないが中央制御部２９内に設けられている。
第一の測定モードでは、検出回路ａ３１および粒子判定
回路ａ３３で検出した粒子だけが計数回路ａ４１にて計
数され、続いて、画像処理される。Next, the judgment of shifting from the first measurement mode to the second measurement mode will be described. Although not shown, the judgment circuit is provided in the central control unit 29.
In the first measurement mode, only the particles detected by the detection circuit a31 and the particle determination circuit a33 are counted by the counting circuit a41, and then the image processing is performed.
【００７６】一方、検出回路ｂ３２および粒子判定回路
ｂ３４で検出された粒子は、その計数値だけが計数回路
ｂ４２で数えられる。前記計数回路ｂ４２で計数された
粒子数の大小関係を中央制御部２９で調べる。粒子数の
大小判定の基準値としては、例えば、血液中の血球や尿
中の沈渣成分では、予め正常値範囲、検査結果の表現が
決められているので、これらの値から計算される判定値
を使うのがよい。On the other hand, only the count value of the particles detected by the detection circuit b32 and the particle determination circuit b34 is counted by the counting circuit b42. The central control unit 29 checks the size relationship of the number of particles counted by the counting circuit b42. As the reference value for determining the size of the number of particles, for example, for blood cells in blood or sediment components in urine, the normal value range and the expression of the test result are determined in advance, so the determination values calculated from these values It is better to use.
【００７７】上記計数結果が、所定の範囲に入っておれ
ば、第二の測定モードを実行する必要がない場合であ
り、第二の測定モードでの粒子の細分類が必要でない場
合である。この場合、第二の測定モードを実行するより
は、第一の測定モードを引き続き継続して実行する。第
二の測定モードを実行するか、しないか、第一の測定モ
ードの継続するか、しないかの判定等は、予め決められ
た判定論理にしたがって中央制御部２９内で行われる。
このようにして、第一の測定モードの測定結果を、第二
の測定モードの測定結果に反映できるため、粒子解析結
果のデータ信頼性が改善できる。If the count result is within the predetermined range, it is not necessary to execute the second measurement mode, and it is not necessary to subdivide the particles in the second measurement mode. In this case, rather than executing the second measurement mode, the first measurement mode is continuously executed. Whether or not to execute the second measurement mode, whether or not to continue the first measurement mode, or the like is determined in the central control unit 29 according to a predetermined determination logic.
In this way, the measurement result of the first measurement mode can be reflected in the measurement result of the second measurement mode, so that the data reliability of the particle analysis result can be improved.
【００７８】第二の測定モードでは、サンプル液中の検
出回路ｂ３２および粒子判定回路ｂ３４で検出した粒子
が、画像処理・分類識別処理実行され、より正確な粒子
の細分類が可能である。いうまでもなく、第二の測定モ
ードではサンプル中の全粒子を測定対象にすることもで
きる。この場合には、第二の測定モードの測定中に、測
定上重要な第一測定モードでの画像処理対象粒子が存在
した場合には、その結果を第一の測定結果に補正し、反
映できる利点がある。In the second measurement mode, the particles detected by the detection circuit b32 and the particle determination circuit b34 in the sample liquid are subjected to the image processing / classification discrimination processing, and more accurate fine classification of the particles is possible. Needless to say, in the second measurement mode, all particles in the sample can be measured. In this case, during the measurement in the second measurement mode, if there is an image processing target particle in the first measurement mode that is important in measurement, the result can be corrected to the first measurement result and reflected. There are advantages.
【００７９】また、検出回路ａ３１、粒子判定回路ａ３
３と検出回路ｂ３２、粒子判定回路ｂ３４との粒子検出
結果を併用してフラッシュランプ点灯、粒子画像撮影が
実施される。さらに、検出回路ａ３２の粒子検出基準を
変更して、全粒子検出にしても差し支えない。Further, the detection circuit a31 and the particle determination circuit a3
3 and the particle detection results of the detection circuit b32 and the particle determination circuit b34 are used together, and the flash lamp is turned on and the particle image is photographed. Furthermore, the particle detection reference of the detection circuit a32 may be changed to detect all particles.
【００８０】また、検出回路ｂ３２さらに複雑な構成に
して、複数種類の粒子を別々に計数できるようにもでき
る。この場合、粒子検出基準として、複数のパラメータ
を組み合わせて実施することができる。また、複数の測
定モードにて、サンプル液およびシール液の流量を制御
し、サンプル液の流速および撮像位置でのサンプル液の
光軸方向の厚さを制御することができる。したがって、
測定条件として、サンプル流れの厚さを厚くして、測定
体積を増やすことができ、測定の再現性を改善できる。
この場合にも、第一の測定モードの他の一粒子検出回路
により粒子計数するため、サンプル厚さ増加による微小
粒子の焦点ボケの影響を受けない。Further, the detection circuit b32 may have a more complicated structure so that a plurality of types of particles can be separately counted. In this case, a plurality of parameters can be combined and implemented as the particle detection reference. Further, in a plurality of measurement modes, the flow rates of the sample liquid and the seal liquid can be controlled, and the flow velocity of the sample liquid and the thickness of the sample liquid at the imaging position in the optical axis direction can be controlled. Therefore,
As a measurement condition, the sample flow can be thickened to increase the measurement volume, and the reproducibility of measurement can be improved.
In this case as well, particles are counted by another particle detection circuit in the first measurement mode, and therefore the influence of defocus of fine particles due to increase in sample thickness is not affected.
【００８１】また、粒子検出部の光散乱受光系の光スリ
ットのサイズを大きくすると、サンプル厚さ方向の粒子
通過位置による焦点ボケの影響を小さくできる。上記撮
像手段の撮像倍率を、例えば１０〜１００倍として撮像
することが好ましい。Further, if the size of the light slit of the light-scattering / light-receiving system of the particle detector is increased, the influence of defocus on the particle passing position in the sample thickness direction can be reduced. It is preferable to pick up an image with an imaging magnification of 10 to 100 times, for example.
【００８２】上記測定粒子としては、生物細胞、血液中
に存在する血球成分、尿中に存在する尿沈査成分、いず
れにも適用できる。流量比の変化に伴い、サンプル液の
流速が変化するので、それに応じて、光照射の開始を調
整するので、粒子画像の撮像を正確にできる。The measurement particles can be applied to any of biological cells, blood cell components existing in blood, and urine sedimentation components existing in urine. Since the flow velocity of the sample liquid changes with the change of the flow rate ratio, the start of the light irradiation is adjusted accordingly, so that the particle image can be accurately captured.
【００８３】なお、本発明は、上記実施例に限定される
ことなく、粒子検出手段として、レーザ光束を検出光と
して用い、粒子で散乱されたレーザ光束を利用する場合
について説明したが、粒子からの蛍光や透過光を利用す
ることもできるし、一次元イメージセンサにより粒子を
検出する方法、粒子通過による電気抵抗変化により粒子
を検出する方法も利用することができる。The present invention is not limited to the above-described embodiment, but a case has been described in which a laser light beam is used as detection light and a laser light beam scattered by particles is used as the particle detection means. It is also possible to use the fluorescent light and transmitted light, a method of detecting particles by a one-dimensional image sensor, and a method of detecting particles by a change in electric resistance due to passage of particles.
【００８４】また、本発明は、上記実施例に限定される
ものでなく、サンプル液の幅が一定となるフローセルを
用いたが、撮像領域においてサンプル液の幅が徐々に拡
大または縮小するようなフローセルを用いる場合にも適
用することができる。Further, the present invention is not limited to the above-mentioned embodiment, and a flow cell in which the width of the sample liquid is constant is used, but the width of the sample liquid gradually increases or decreases in the imaging region. It can also be applied when using a flow cell.
【００８５】[0085]
【発明の効果】以上詳細に説明したごとく、本発明によ
れば、フロー式粒子画像解析方法およびその装置におい
て、撮像倍率同一、かつ、撮影時間が短く、画像分解率
のよい、良質な画像が得られるとともに、第一の測定モ
ードを高倍率で動作させ、その測定結果を正確に判断さ
せ、第二の測定モードの測定結果をより正しく制御し、
粒子解析、分類精度を向上させる構成の簡単なフロー式
粒子画像解析方法およびその装置を提供することができ
る。As described in detail above, according to the present invention, in a flow type particle image analysis method and apparatus, a high-quality image having the same imaging magnification, a short imaging time, and a good image decomposition rate can be obtained. While being obtained, the first measurement mode is operated at a high magnification, the measurement result is accurately judged, and the measurement result of the second measurement mode is controlled more accurately.
It is possible to provide a flow-type particle image analysis method and device having a simple configuration that improves particle analysis and classification accuracy.
【００８６】より詳しく説明すると、粒子を懸濁したサ
ンプル液を清浄液で包囲してフローセル中を流し、上記
サンプル液に光を照射して、サンプル液中の粒子を撮像
手段で撮像し、撮像した画像を画像解析して粒子の分類
を実施するフロー式粒子画像解析方法において、サンプ
ル中の粒子に対し測定対象をそれぞれ定めた二つの測定
モードを有し、二つの測定モードにて同一倍率で撮像し
構成を簡単にし、第一の測定モードでは、多量のサンプ
ル中の粒子に対し、一の検出回路と、一の判別回路とに
より大径、少量の粒子の計数、画像処理、分類し、他の
一の検出回路と他の一の判別回路とにより小径、多量の
粒子の個数を計数し、第二の測定モードでは、小量のサ
ンプル中の粒子に対し、他の一の検出回路と、他の一の
判別回路とにより小径、多量の粒子の計数、画像処理、
分類するフロー式粒子画像解析方法およびその装置を提
供することができる。More specifically, the sample liquid in which the particles are suspended is surrounded by a cleansing liquid and is caused to flow in a flow cell, the sample liquid is irradiated with light, and the particles in the sample liquid are imaged by an image pickup means to obtain an image. In a flow-type particle image analysis method that classifies particles by performing image analysis on the images obtained, it has two measurement modes in which the measurement target is defined for each particle in the sample, and the measurement magnification is the same in the two measurement modes. Imaging and simplifying the configuration, in the first measurement mode, for particles in a large amount of sample, one detection circuit and one determination circuit, large diameter, counting a small number of particles, image processing, classify, The number of small particles and a large number of particles is counted by the other one detection circuit and the other determination circuit, and in the second measurement mode, the number of particles in a small amount of the sample is different from that of the other detection circuit. , By the other discriminating circuit Diameter, counting the quantity of particles, the image processing,
A flow type particle image analysis method for classifying and a device therefor can be provided.
【図１】本発明の一実施例に係るフロー式粒子画像解析
方法に用いる解析装置の略示構成図である。FIG. 1 is a schematic configuration diagram of an analyzer used in a flow type particle image analysis method according to an embodiment of the present invention.
【図２】図１の実施例におけるフローセルの構成を示す
斜視図である。FIG. 2 is a perspective view showing the structure of a flow cell in the embodiment of FIG.
【図３】図２の実施例におけるノズルを内蔵するセル部
の略示斜視図である。FIG. 3 is a schematic perspective view of a cell portion containing a nozzle in the embodiment of FIG.
【図４】図２のフローセルにおけるサンプル液流れとノ
ズルとの略示斜視図である。FIG. 4 is a schematic perspective view of a sample liquid flow and a nozzle in the flow cell of FIG.
【図５】図２のフローセルにおける測定モード切り替え
によるサンプル液の変形説明図である。5 is a modification explanatory view of the sample liquid by switching the measurement mode in the flow cell of FIG.
【図６】図１のフロー式粒子画像解析装置における解析
動作の説明ブロック図である。6 is an explanatory block diagram of an analysis operation in the flow-type particle image analysis device of FIG.
１…フラッシュランプ １ａ…フラッシュランプ駆動回路 ２…フィールドレンズ ３…顕微鏡コンデンサレンズ ５…顕微鏡対物レンズ ８…ＴＶカメラ １１…視野絞り １２…開口絞り １５…半導体レーザ源 １６…コリメータレンズ １７…シリンドリカルレンズ １８、１９…反射鏡 ２０…ビームスプリッタ ２１…絞り ２２…光検出回路 ２３…フラッシュランプ点灯制御回路 ２４…ＡＤ変換器 ２５…画像メモリ ２６…画像処理制御回路 ２７…特徴抽出回路 ２８…識別回路 ２９…中央制御部 ３１…検出回路ａ ３２…検出回路ｂ ３３…粒子判定回路ａ ３４…粒子判定回路ｂ ４０…粒子数分析部 ４１…計数回路ａ ４２…計数回路ｂ ４３…モード切替 ４４…粒子検出系制御部 ５０…表示部 ８０…粒子検出領域 ９０…画像撮像領域 １００…フローセル Ｋ…フローセル１００のケース Ｃ…フローセル１００のセル部 １０１…粒子検出部 １０２…画像撮像部 １０３…粒子分析部 １１０…サンプル流れ Ｓ0…サンプル液 Ｓ1…シース液 １１２…シース液入り口 １１３…サンプルガイド １１４…ノズル １１５…サンプル液入口 １１６…サンプル液出口 １１７…流体入口 １１８…流体出口 １５０…平行流路部 １５１…縮流流路部 １５２…測定流路部 １５３…減速流路部 １６０…粒子DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... Flash lamp 1a ... Flash lamp drive circuit 2 ... Field lens 3 ... Microscope condenser lens 5 ... Microscope objective lens 8 ... TV camera 11 ... Field stop 12 ... Aperture stop 15 ... Semiconductor laser source 16 ... Collimator lens 17 ... Cylindrical lens 18 , 19 ... Reflector 20 ... Beam splitter 21 ... Aperture 22 ... Photodetection circuit 23 ... Flash lamp lighting control circuit 24 ... AD converter 25 ... Image memory 26 ... Image processing control circuit 27 ... Feature extraction circuit 28 ... Identification circuit 29 ... Central control unit 31 ... Detection circuit a 32 ... Detection circuit b 33 ... Particle determination circuit a 34 ... Particle determination circuit b 40 ... Particle number analysis unit 41 ... Counting circuit a 42 ... Counting circuit b 43 ... Mode switching 44 ... Particle detection system Control unit 50 ... Display unit 80 ... Particle detection area 90 ... Image capturing area 100 ... Flow cell K ... Case of flow cell 100 C ... Cell part of flow cell 100 101 ... Particle detecting unit 102 ... Image capturing unit 103 ... Particle analyzing unit 110 ... Sample flow S 0 ... Sample liquid S 1 ... Sheath liquid 112 ... Sheath liquid inlet 113 ... Sample guide 114 ... Nozzle 115 ... Sample liquid inlet 116 ... Sample liquid outlet 117 ... Fluid inlet 118 ... Fluid outlet 150 ... Parallel flow passage portion 151 ... Constriction flow passage portion 152 ... Measurement flow passage portion 153 ... Deceleration flow passage portion 160 ... particle
Claims (17)
ールし、フローセル中を流し、前記フローセル中のサン
プル液の粒子を検出し、前記検出信号により前記サンプ
ル液に光線を照射して前記粒子の画像を撮像し、前記撮
像画像の粒子を分類するフロー式粒子画像解析方法にお
いて、 前記サンプル液量が増減されるフローセルを用い、一の
粒子検出法と他の一の粒子検出法とを有し、同一倍率で
画像を撮像し、対象粒子に応ずる第一、第二の測定モー
ドを設け、 前記第一の測定モードは、前記サンプル液量を増加さ
せ、一の検出法により粒子を検出し、前記一の粒子検出
法による画像から粒子の計数、分類するとともに、他の
一の粒子検出法の検出信号より粒子個数を計数し、 前記第二の測定モードは、前記サンプル液量を減少さ
せ、上記他の一の粒子検出法により粒子を検出し、前記
他の一の粒子検出法による画像から粒子の計数、分類す
ることを特徴とするフロー式粒子画像解析方法。1. A sample liquid in which particles are suspended is sealed with a cleaning liquid, flowed in a flow cell, particles of the sample liquid in the flow cell are detected, and the sample liquid is irradiated with a light beam according to the detection signal, In a flow type particle image analysis method for capturing an image of particles and classifying the particles of the captured image, a flow cell in which the sample liquid amount is increased or decreased is used, and one particle detection method and another particle detection method are used. Having the first and second measurement modes corresponding to the target particles by capturing an image at the same magnification, the first measurement mode increases the sample liquid amount and detects the particles by one detection method. Then, counting and classifying the particles from the image by the one particle detection method, counting the number of particles from the detection signal of the other one particle detection method, the second measurement mode, the sample liquid amount is reduced. Let the above A flow-type particle image analysis method, wherein particles are detected by another particle detection method, and particles are counted and classified from an image obtained by the other particle detection method.
法において、 前記光線照射方向と前記サンプル液の通過方向との両方
向に直交する方向の当該サンプル液の寸法が一定なフロ
ーセルを用い、 前記サンプル液を増加させる場合は、このサンプル液の
前記光線照射方向の寸法とその流速を増し、前記サンプ
ル液を減少させる場合は、このサンプル液の前記光線照
射方向の寸法とその流速を減じ、 前記一の粒子検出法は、前記サンプル液中の大径、か
つ、少数の粒子を検出し、前記他の一の粒子検出法は、
前記サンプル液中の小径、かつ、多数の粒子を検出する
ことを特徴とするフロー式粒子画像解析方法。2. The flow type particle image analysis method according to claim 1, wherein a flow cell having a constant dimension of the sample liquid in a direction orthogonal to both the light beam irradiation direction and the passing direction of the sample liquid is used, When increasing the sample liquid, increase the dimension and the flow velocity of the sample liquid in the light beam irradiation direction, and when reducing the sample liquid, decrease the dimension of the sample liquid in the light beam irradiation direction and the flow velocity, One particle detection method is a large diameter in the sample solution, and detects a small number of particles, the other one particle detection method,
A flow-type particle image analysis method characterized by detecting a large number of particles having a small diameter in the sample liquid.
粒子画像解析方法において、 前記第一の測定モードにおける前記他の一の粒子検出法
による粒子計数値から、前記第二の測定モードの実施を
判断することを特徴とするフロー式粒子画像解析方法。3. The flow type particle image analysis method according to claim 1, wherein the second measurement mode is determined based on a particle count value obtained by the other particle detection method in the first measurement mode. A flow type particle image analysis method, characterized in that the execution of the method is judged.
粒子画像解析方法において、 前記第二の測定モードは、前記一の粒子検出法による検
出粒子と、前記他の一の粒子検出法による検出粒子との
両方の全検出粒子を測定対象とすることを特徴とするフ
ロー式粒子画像解析方法。4. The flow-type particle image analysis method according to claim 1, wherein the second measurement mode is detection particles by the one particle detection method and another particle detection method by the other particle detection method. A flow-type particle image analysis method characterized in that all the detection particles including both the detection particles and the detection particles are measured.
粒子画像解析方法において、 前記第一の測定モードにおける前記他の一の粒子検出法
による粒子計数値から、この第一の測定モードの継続、
前記第二の測定モードの実施、または測定中止のいずれ
かを判断することを特徴とするフロー式粒子画像解析方
法。5. The flow type particle image analysis method according to claim 1, wherein the first measurement mode is based on a particle count value of the other particle detection method in the first measurement mode. Continuation of
A flow type particle image analysis method, characterized in that it is judged whether the second measurement mode is performed or the measurement is stopped.
粒子画像解析方法において、 前記第一の測定モードにおける前記他の一の粒子検出法
より得られたデータから複数種の粒子数を分類計数し、
それら複数の粒子計数値により、前記第二の測定モード
の実施を判断することを特徴とするフロー式粒子画像解
析方法。6. The flow type particle image analysis method according to claim 1, wherein the number of particles of a plurality of types is calculated from data obtained by the other particle detection method in the first measurement mode. Counting and counting,
A flow-type particle image analysis method, wherein execution of the second measurement mode is determined based on the plurality of particle count values.
粒子画像解析方法において、 前記一と前記他の一との粒子検出法が、その粒子のサイ
ズ情報に基ずくものであることを特徴とするフロー式粒
子画像解析方法。7. The flow type particle image analysis method according to claim 1, wherein the particle detection methods of said one and said other ones are based on size information of the particles. Characteristic flow-type particle image analysis method.
粒子画像解析方法において、 前記一と前記他の一との粒子検出法が、その粒子から発
せられる蛍光散乱信号情報に基ずき、蛍光散乱信号の大
小関係を利用することを特徴とするフロー式粒子画像解
析方法。8. The flow-type particle image analysis method according to claim 1, wherein the particle detection method of the one and the other is based on fluorescence scattering signal information emitted from the particle. A flow-type particle image analysis method characterized by using the magnitude relationship of fluorescence scattering signals.
ー式粒子画像解析方法において、 前記検出粒子が、生物細胞、血液成分、尿中沈渣成分で
あることを特徴とするフロー式粒子画像解析方法。9. The flow type particle image analysis method according to claim 1, wherein the detected particles are biological cells, blood components, and urinary sediment components. Method.
シールして流すフローセルと、前記フローセル中のサン
プル液の粒子を検出する粒子検出手段と、前記検出信号
により前記サンプル液に光線を照射して前記粒子の画像
を撮像する撮像手段と、前記撮像画像の粒子を分類する
粒子分類手段とを具備するフロー式粒子画像解析装置に
おいて、 フローセルは、前記サンプル液量を増減できるフロー系
制御部を有し、粒子検出手段は、一の粒子検出回路と他
の一の粒子検出回路とを有し、前記撮像手段は同一倍率
で画像を撮像し、前記粒子分類手段は、対象粒子に応ず
る第一、第二の測定モードを選択する選択部を設け、 前記第一の測定モードが選択された場合は、前記サンプ
ル液量を増加させ、一の検出回路により粒子を検出し、
前記粒子分類手段は前記一の粒子検出回路による画像か
ら粒子の計数、分類するとともに、他の一の粒子検出法
の検出信号より粒子個数を計数し、 前記第二の測定モードが選択された場合は、前記サンプ
ル液量を減少させ、前記他の一の粒子検出回路により粒
子を検出し、前記粒子分類手段は前記他の一の粒子検出
回路による画像から粒子の計数、分類するように構成し
たことを特徴とするフロー式粒子画像解析装置。10. A flow cell in which a sample liquid in which particles are suspended is sealed and flowed with a cleaning liquid, a particle detecting means for detecting particles of the sample liquid in the flow cell, and a light beam is irradiated to the sample liquid by the detection signal. In the flow-type particle image analyzer, the flow cell is capable of increasing / decreasing the amount of the sample liquid. The particle detection means has one particle detection circuit and another particle detection circuit, the imaging means captures an image at the same magnification, and the particle classification means responds to the target particles. One, provided with a selection unit for selecting the second measurement mode, when the first measurement mode is selected, increase the sample liquid amount, to detect particles by one detection circuit,
When the particle classification means counts and classifies particles from the image by the one particle detection circuit and counts the number of particles from the detection signal of the other one particle detection method, and when the second measurement mode is selected Is configured to reduce the amount of the sample liquid, detect particles by the another particle detection circuit, and count the particles from the image by the other particle detection circuit to classify and classify particles. A flow type particle image analysis device characterized by the above.
析装置において、 前記フローセルは、前記光線照射方向と前記サンプル液
の通過方向との両方向に直交する方向の当該サンプル液
の寸法が一定になるように構成され、 前記フロー系制御部は、前記サンプル液を増加させる場
合は、このサンプル液の前記光線照射方向の寸法とその
流速を増し、前記サンプル液を減少させる場合は、この
サンプル液の前記光線照射方向の寸法とその流速を減じ
るように構成され、 前記一の粒子検出法は、前記サンプル液中の大径、か
つ、少数の粒子を検出し、前記他の一の粒子検出法は、
前記サンプル液中の小径、かつ、多数の粒子を検出する
ように構成したことを特徴とするフロー式粒子画像解析
装置。11. The flow type particle image analyzer according to claim 10, wherein the flow cell has a constant size of the sample liquid in a direction orthogonal to both the light beam irradiation direction and the sample liquid passage direction. The flow system control unit increases the size of the sample solution in the light irradiation direction and its flow rate when increasing the sample solution, and decreases the sample solution when decreasing the sample solution. It is configured to reduce the dimension of the light beam irradiation direction and its flow velocity, the one particle detection method is a large diameter in the sample liquid, and detects a small number of particles, the other one particle detection method is ,
A flow-type particle image analyzer characterized by being configured to detect a large number of particles having a small diameter in the sample liquid.
ロー式粒子画像解析装置において、 前記第一の測定モードにおける前記他の一の粒子検出回
路による粒子計数値から、前記第二の測定モードの実施
を判断するように構成したことを特徴とするフロー式粒
子画像解析装置。12. The flow type particle image analysis device according to claim 10, wherein the second measurement mode is determined from a particle count value of the other particle detection circuit in the first measurement mode. A flow-type particle image analysis device characterized in that it is configured to judge whether or not to carry out.
ロー式粒子画像解析装置において、 前記第二の測定モードは、前記一の粒子検出回路による
検出粒子と、前記他の一の粒子検出回路による検出粒子
との両方の全検出粒子を測定対象とするように構成した
ことを特徴とするフロー式粒子画像解析装置。13. The flow type particle image analysis device according to claim 10, wherein the second measurement mode is a particle detected by the one particle detection circuit and another particle detection circuit by the other particle detection circuit. A flow-type particle image analysis device, characterized in that it is configured so that all detection particles including both the detection particles according to (1) and (2) are measured.
ロー式粒子画像解析装置において、 前記第一の測定モードにおける前記他の一の粒子検出回
路による粒子計数値から、前記第一の測定モードの継
続、前記第二の測定モードの実施、または測定中止のい
ずれかを判断するように構成したことを特徴とするフロ
ー式粒子画像解析装置。14. The flow type particle image analysis device according to claim 10, wherein the first measurement mode is based on a particle count value of the other particle detection circuit in the first measurement mode. The flow-type particle image analysis apparatus is configured to determine whether to continue, the second measurement mode is performed, or the measurement is stopped.
ロー式粒子画像解析装置において、 第一の測定モードにおける前記他の一の粒子検出回路よ
り得られたデータから複数種の粒子数を分類計数し、そ
れら複数の粒子計数値により、第二の測定モードの実施
を判断するように構成したことを特徴とするフロー式粒
子画像解析装置。15. The flow type particle image analyzer according to claim 10, wherein a plurality of types of particles are classified from data obtained from the other particle detection circuit in the first measurement mode. A flow-type particle image analysis device, wherein the flow-type particle image analysis device is configured to count and determine execution of the second measurement mode based on the plurality of particle count values.
ロー式粒子画像解析装置において、 前記一と前記他の一との粒子検出回路が、その粒子のサ
イズ情報に基ずいて検出するように構成したことを特徴
とするフロー式粒子画像解析装置。16. The flow type particle image analysis device according to claim 10, wherein the particle detection circuits of the one and the other one detect based on size information of the particles. A flow-type particle image analysis device characterized by being configured.
ロー式粒子画像解析装置において、 前記一と前記他の一との粒子検出回路が、その粒子から
発せられる蛍光散乱信号情報に基ずき、蛍光散乱信号の
大小関係を利用するように構成したことを特徴とするフ
ロー式粒子画像解析装置。17. The flow type particle image analysis device according to claim 10, wherein the particle detection circuits of the one and the other one are based on fluorescence scattering signal information emitted from the particles. A flow-type particle image analysis device, characterized in that it is configured to utilize the magnitude relationship of fluorescence scattering signals.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6061819A JPH07270301A (en) | 1994-03-31 | 1994-03-31 | Flow type particle image analysis method and apparatus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6061819A JPH07270301A (en) | 1994-03-31 | 1994-03-31 | Flow type particle image analysis method and apparatus |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07270301A true JPH07270301A (en) | 1995-10-20 |
Family
ID=13182081
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6061819A Pending JPH07270301A (en) | 1994-03-31 | 1994-03-31 | Flow type particle image analysis method and apparatus |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07270301A (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013513109A (en) * | 2009-12-04 | 2013-04-18 | ライフ テクノロジーズ コーポレーション | Apparatus, system, method and computer readable medium for acoustic flow cytometry |
| JP2020513103A (en) * | 2017-03-31 | 2020-04-30 | ライフ テクノロジーズ コーポレーション | Apparatus, system and method for imaging flow cytometry |
-
1994
- 1994-03-31 JP JP6061819A patent/JPH07270301A/en active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013513109A (en) * | 2009-12-04 | 2013-04-18 | ライフ テクノロジーズ コーポレーション | Apparatus, system, method and computer readable medium for acoustic flow cytometry |
| JP2016128832A (en) * | 2009-12-04 | 2016-07-14 | ライフ テクノロジーズ コーポレーション | Apparatus, system, method, and computer readable medium for acoustic flow cytometry |
| JP2020513103A (en) * | 2017-03-31 | 2020-04-30 | ライフ テクノロジーズ コーポレーション | Apparatus, system and method for imaging flow cytometry |
| US11566995B2 (en) | 2017-03-31 | 2023-01-31 | Life Technologies Corporation | Apparatuses, systems and methods for imaging flow cytometry |
| US11940371B2 (en) | 2017-03-31 | 2024-03-26 | Life Technologies Corporation | Apparatuses, systems and methods for imaging flow cytometry |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH07120375A (en) | Method and apparatus for flow-type particle image analysis | |
| US4786165A (en) | Flow cytometry and apparatus therefor | |
| JP3187129B2 (en) | Particle analyzer | |
| JP4085297B2 (en) | Urine component classification device | |
| WO2009147931A1 (en) | Particle image analysis method and device | |
| EP2317302A2 (en) | Analyzer and particle imaging method | |
| JP2007101623A (en) | Automatic microscope and analyzing apparatus equipped with the same | |
| JPH0743307A (en) | Imaging flow sight meter | |
| JPH06186156A (en) | Particle analyzer | |
| JP3102925B2 (en) | Particle analyzer | |
| JP3189608B2 (en) | Flow type particle image analysis method | |
| JPH07294414A (en) | Grain image analyzing method and device therefor | |
| JPH0972842A (en) | Method and apparatus for flow-type particle image analysis | |
| JP2826448B2 (en) | Flow type particle image analysis method and flow type particle image analysis device | |
| JPH0783818A (en) | Flow type method and device for analysis of particle image | |
| JPH07218417A (en) | Particle analyzing method | |
| JPH07270301A (en) | Flow type particle image analysis method and apparatus | |
| JP2002062251A (en) | Flow type particle image analyzing method and device | |
| JPH06288895A (en) | Particle analytical apparatus | |
| JPH06229904A (en) | Method and apparatus for analyzing particle | |
| JPH08145872A (en) | Method and device for analyzing flow type particle picture | |
| JP2008111833A (en) | Apparatus for classifying formed component in urine | |
| JP3165272B2 (en) | Flow type particle image analysis method and flow type particle image analysis device | |
| JPH06221986A (en) | Flow-type method and apparatus for analyzing particle image | |
| JPH07181126A (en) | Particle analyzer |