JPH07255304A - アカシア属植物の大量増殖法 - Google Patents
アカシア属植物の大量増殖法Info
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- JPH07255304A JPH07255304A JP7129494A JP7129494A JPH07255304A JP H07255304 A JPH07255304 A JP H07255304A JP 7129494 A JP7129494 A JP 7129494A JP 7129494 A JP7129494 A JP 7129494A JP H07255304 A JPH07255304 A JP H07255304A
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- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 アカシア属植物の組織培養による大量増殖法
を提供する。 【構成】 アカシア属植物の組織片をサイトカイニン系
植物ホルモン０．０１〜１０．０ｍｇ／ｌ、オーキシン
系植物ホルモン０〜１０．０ｍｇ／ｌを組み合わせた培
地を用いて無菌的にカルスを誘導し、次いで誘導された
カルスをオーキシン系植物ホルモン０．０１〜１０．０
ｍｇ／ｌ、サイトカイニン系植物ホルモン０〜１０．０
ｍｇ／ｌを組み合わせた培地を用いてシュートを再分化
し、次いで再分化されたシュートをオーキシン系植物ホ
ルモン０．０１〜１０．０ｍｇ／ｌを含む培地にて発根
させることを特徴とするアカシア属植物の大量増殖法
を提供する。 【構成】 アカシア属植物の組織片をサイトカイニン系
植物ホルモン０．０１〜１０．０ｍｇ／ｌ、オーキシン
系植物ホルモン０〜１０．０ｍｇ／ｌを組み合わせた培
地を用いて無菌的にカルスを誘導し、次いで誘導された
カルスをオーキシン系植物ホルモン０．０１〜１０．０
ｍｇ／ｌ、サイトカイニン系植物ホルモン０〜１０．０
ｍｇ／ｌを組み合わせた培地を用いてシュートを再分化
し、次いで再分化されたシュートをオーキシン系植物ホ
ルモン０．０１〜１０．０ｍｇ／ｌを含む培地にて発根
させることを特徴とするアカシア属植物の大量増殖法
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はアカシア属植物の大量増
殖法に関し、更に詳しくはアカシア属植物の組織培養に
よる大量増殖法に関する。
殖法に関し、更に詳しくはアカシア属植物の組織培養に
よる大量増殖法に関する。
【０００２】
【従来の技術】アカシア属植物は世界的に約600 種知ら
れており、おもに南半球の熱帯、亜熱帯地方に広く分布
する。このアカシア属植物は、根に根粒菌を持ち、痩せ
地でも成長が早い事が知られていてパルプ用材をはじ
め、切り花、庭園木、緑化樹として用いられ、パルプ、
家具材、香水、タンニン、アラビアゴムなどの広い用途
がある。これらのアカシア属植物の増殖は、通常種子又
は挿木によって行われている。しかし種子による増殖に
よる場合は、苗木の遺伝的性質が安定しない欠陥があ
る。また挿木による増殖の場合は、遺伝的には均一の苗
木の増殖ができるが、この方法を用いた大量増殖は、組
織培養を用いた場合と比較すると極端に効率が落ちる。
組織培養の手法を用いた、アカシア属植物の増殖の例と
しては、以下の例がある。
れており、おもに南半球の熱帯、亜熱帯地方に広く分布
する。このアカシア属植物は、根に根粒菌を持ち、痩せ
地でも成長が早い事が知られていてパルプ用材をはじ
め、切り花、庭園木、緑化樹として用いられ、パルプ、
家具材、香水、タンニン、アラビアゴムなどの広い用途
がある。これらのアカシア属植物の増殖は、通常種子又
は挿木によって行われている。しかし種子による増殖に
よる場合は、苗木の遺伝的性質が安定しない欠陥があ
る。また挿木による増殖の場合は、遺伝的には均一の苗
木の増殖ができるが、この方法を用いた大量増殖は、組
織培養を用いた場合と比較すると極端に効率が落ちる。
組織培養の手法を用いた、アカシア属植物の増殖の例と
しては、以下の例がある。
【０００３】Crawford及びHartney は、Acacia mangium
とA. stenophyllaの発芽後2.5 週間の子葉をMurashige-
Skoog （ＭＳ）培地にベンジルアデニン（ＢＡ）とナフ
タレン酢酸（ＮＡＡ）を添加し培養を行った。この結
果、A. mangiumでは完全な植物体を再生できたが、A. s
tenophyllaではシュートの伸長は認められたものの発根
せず完全な植物体は再生できなかった（ACIAR proceedi
ng No.35、64〜65頁）。またSemsuntud 及びNitiwattan
achai は、A. auriculiformis の精英樹の芽を用いてマ
ルチプルシュートの誘導を行った。この結果、シュート
の増殖率は１〜10倍、発根率は40％という値を得ている
（ACIAR proceeding No.35、39〜42頁）。
とA. stenophyllaの発芽後2.5 週間の子葉をMurashige-
Skoog （ＭＳ）培地にベンジルアデニン（ＢＡ）とナフ
タレン酢酸（ＮＡＡ）を添加し培養を行った。この結
果、A. mangiumでは完全な植物体を再生できたが、A. s
tenophyllaではシュートの伸長は認められたものの発根
せず完全な植物体は再生できなかった（ACIAR proceedi
ng No.35、64〜65頁）。またSemsuntud 及びNitiwattan
achai は、A. auriculiformis の精英樹の芽を用いてマ
ルチプルシュートの誘導を行った。この結果、シュート
の増殖率は１〜10倍、発根率は40％という値を得ている
（ACIAR proceeding No.35、39〜42頁）。
【０００４】さらにDewan et al.は、A. nilotica の発
芽15日後の子葉をＢ５培地にサイトカイニン系植物ホル
モンとしてＢＡ、2-イソペンテニルアデニン（２ｉ
Ｐ）、ゼアチン、カイネチンを添加し、マルチプルシュ
ートの誘導を行った。この結果、植物体の再生はできた
が、増殖率は３倍程度と低い値を示している（Plant Ce
llReport、vol.12 18〜21頁）。また齋藤らは、A. man
giumの発芽６カ月後の茎を用い、ＭＳ培地にＢＡとＩＡ
Ａを添加し、マルチプルシュートの誘導を行い、完全な
植物体を得た。しかし、増殖率は１〜６倍程度、発根率
は14〜20％程度と低い値しか得られていない（植物組織
培養、vol.10、163 〜168 頁）。これらの報告は、基礎
的な試験結果であるため、事業的な大量増殖には不向き
なものであるだけでなく、本発明に比べ増殖率、発根率
ともに低い値を示している。
芽15日後の子葉をＢ５培地にサイトカイニン系植物ホル
モンとしてＢＡ、2-イソペンテニルアデニン（２ｉ
Ｐ）、ゼアチン、カイネチンを添加し、マルチプルシュ
ートの誘導を行った。この結果、植物体の再生はできた
が、増殖率は３倍程度と低い値を示している（Plant Ce
llReport、vol.12 18〜21頁）。また齋藤らは、A. man
giumの発芽６カ月後の茎を用い、ＭＳ培地にＢＡとＩＡ
Ａを添加し、マルチプルシュートの誘導を行い、完全な
植物体を得た。しかし、増殖率は１〜６倍程度、発根率
は14〜20％程度と低い値しか得られていない（植物組織
培養、vol.10、163 〜168 頁）。これらの報告は、基礎
的な試験結果であるため、事業的な大量増殖には不向き
なものであるだけでなく、本発明に比べ増殖率、発根率
ともに低い値を示している。
【０００５】本発明と同様にアカシア属植物を用いてカ
ルスを経由した増殖方法は、Rao 及びPrasadによってA.
auriculiformis の発芽後10日の胚軸を用いてカルスを
誘導し、このカルスからシュートを再分化させ、完全な
植物体を再生した報告がある（Journal of plant physi
ology 、vol.137 、625 〜627 頁）。この報告では、胚
軸をＭＳ培地を１／２に希釈した基本培地にＢＡとＮＡ
Ａとを添加し、カルスを誘導し、シュートの再分化を図
っている。しかし、この培地ではシュートの増殖率が４
〜５倍と低いため、グルタミンを添加することによって
増殖率を20倍程度に増加させている。本発明では、外植
体として胚軸以外でも完全な植物体が再生できたこと、
シュートの再分化の際に基本培地にグルタミン等の添加
物がなくても増殖率が30倍程度と高いこと、発根に用い
た基本培地の濃度が低いこと等がこの報告と異なる点で
ある。
ルスを経由した増殖方法は、Rao 及びPrasadによってA.
auriculiformis の発芽後10日の胚軸を用いてカルスを
誘導し、このカルスからシュートを再分化させ、完全な
植物体を再生した報告がある（Journal of plant physi
ology 、vol.137 、625 〜627 頁）。この報告では、胚
軸をＭＳ培地を１／２に希釈した基本培地にＢＡとＮＡ
Ａとを添加し、カルスを誘導し、シュートの再分化を図
っている。しかし、この培地ではシュートの増殖率が４
〜５倍と低いため、グルタミンを添加することによって
増殖率を20倍程度に増加させている。本発明では、外植
体として胚軸以外でも完全な植物体が再生できたこと、
シュートの再分化の際に基本培地にグルタミン等の添加
物がなくても増殖率が30倍程度と高いこと、発根に用い
た基本培地の濃度が低いこと等がこの報告と異なる点で
ある。
【０００６】現在までに公開された特許出願の中には、
アカシア属植物の上位に位置するマメ科植物に関する組
織培養関連のものとして、苗条原基による一年生豆科植
物の多年生化大量増殖法（特開昭62−236415号公報）、
植物の組織培養法（特開昭63−245668号公報）、マメ科
植物のプロトプラスト由来カルスの製法（特開昭63−31
3579号公報）、甘草由来細胞賦活物質（特開平２−1176
87号公報）、まめ科甘草の組織培養物の製造方法（特開
平２−119773号公報）、体細胞不定胚によるブラシノス
テロイドの生産方法（特開平２−299595号公報）がある
が、これらはマメ科一年生作物を対象としたものであ
り、本発明に用いた木本性のマメ科植物ではない。
アカシア属植物の上位に位置するマメ科植物に関する組
織培養関連のものとして、苗条原基による一年生豆科植
物の多年生化大量増殖法（特開昭62−236415号公報）、
植物の組織培養法（特開昭63−245668号公報）、マメ科
植物のプロトプラスト由来カルスの製法（特開昭63−31
3579号公報）、甘草由来細胞賦活物質（特開平２−1176
87号公報）、まめ科甘草の組織培養物の製造方法（特開
平２−119773号公報）、体細胞不定胚によるブラシノス
テロイドの生産方法（特開平２−299595号公報）がある
が、これらはマメ科一年生作物を対象としたものであ
り、本発明に用いた木本性のマメ科植物ではない。
【０００７】また、木本性マメ科植物としては、抗アレ
ルギー剤の製造方法（特開平１−102027号公報）の中
に、クズ、エンジュが含まれているが、前者はPueraria
属であり、後者はSophora 属であるため、本発明のアカ
シア属とは別の属の植物である。また、植物細胞培養物
における二次代謝産物のエリシター誘導方法（特開平５
−184355号公報）については、植物体の再生は行ってい
ない。アカシアの名前がついている木本生殖物として、
ニセアカシア、トゲナシニセアカシアがあるが、これら
はRobinia 属であり、本発明のアカシア属植物とは異な
るものである。
ルギー剤の製造方法（特開平１−102027号公報）の中
に、クズ、エンジュが含まれているが、前者はPueraria
属であり、後者はSophora 属であるため、本発明のアカ
シア属とは別の属の植物である。また、植物細胞培養物
における二次代謝産物のエリシター誘導方法（特開平５
−184355号公報）については、植物体の再生は行ってい
ない。アカシアの名前がついている木本生殖物として、
ニセアカシア、トゲナシニセアカシアがあるが、これら
はRobinia 属であり、本発明のアカシア属植物とは異な
るものである。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、これまで実
生繁殖に頼っていたアカシア属植物の増殖を、組織培養
の手法によって大量増殖することを目的とするものであ
る。さらにこの方法は遺伝子組み替えの手法にも用いる
ことが可能な組織培養方法を提供することを目的とする
ものである。
生繁殖に頼っていたアカシア属植物の増殖を、組織培養
の手法によって大量増殖することを目的とするものであ
る。さらにこの方法は遺伝子組み替えの手法にも用いる
ことが可能な組織培養方法を提供することを目的とする
ものである。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明は、アカシア属植
物の組織片をサイトカイニン系植物ホルモン0.01〜10.0
mg/l、オーキシン系植物ホルモン０〜10.0mg/lを含む培
地を用いて無菌的にカルスを誘導し、次いで誘導された
カルスをオーキシン系植物ホルモン0.01〜10.0mg/l、サ
イトカイニン系植物ホルモン０〜10.0mg/lを含む培地を
用いてシュートを再分化し、次いで再分化されたシュー
トを少なくとも１種類以上のオーキシン系植物ホルモン
0.01〜2.0mg/l を含む培地にて発根させることを特徴と
するアカシア属植物の大量増殖法に存する。
物の組織片をサイトカイニン系植物ホルモン0.01〜10.0
mg/l、オーキシン系植物ホルモン０〜10.0mg/lを含む培
地を用いて無菌的にカルスを誘導し、次いで誘導された
カルスをオーキシン系植物ホルモン0.01〜10.0mg/l、サ
イトカイニン系植物ホルモン０〜10.0mg/lを含む培地を
用いてシュートを再分化し、次いで再分化されたシュー
トを少なくとも１種類以上のオーキシン系植物ホルモン
0.01〜2.0mg/l を含む培地にて発根させることを特徴と
するアカシア属植物の大量増殖法に存する。
【００１０】また、カルス誘導時の植物ホルモンがオー
キシン系植物ホルモン0.01〜5.0mg/l 、サイトカイニン
系植物ホルモンが0.05〜5.0mg/l である上記アカシア属
植物の大量増殖法に存する。また、シュート再分化時の
植物ホルモンがオーキシン系植物ホルモン0.05〜5.0mg/
l 、サイトカイニン系植物ホルモンが0.01〜5.0mg/l で
ある上記アカシア属植物の大量増殖法に存する。また、
発根時の植物ホルモンがオーキシン系植物ホルモン0.01
〜5.0mg/l である上記アカシア属植物の大量増殖法に存
する。
キシン系植物ホルモン0.01〜5.0mg/l 、サイトカイニン
系植物ホルモンが0.05〜5.0mg/l である上記アカシア属
植物の大量増殖法に存する。また、シュート再分化時の
植物ホルモンがオーキシン系植物ホルモン0.05〜5.0mg/
l 、サイトカイニン系植物ホルモンが0.01〜5.0mg/l で
ある上記アカシア属植物の大量増殖法に存する。また、
発根時の植物ホルモンがオーキシン系植物ホルモン0.01
〜5.0mg/l である上記アカシア属植物の大量増殖法に存
する。
【００１１】以下に本発明をさらに詳細に説明する。 （アカシア属植物の組織）本発明に適用できるアカシア
属植物としては、代表的なものとしてAcacia aulacocar
pa、A.auriculiformis、A.cincinnata、A.crassicarpa
、A.fasciculifera 、A.flavescens、A.hylonoma、A.m
angium 、A.melanoxylon 、A.oraria、A.polystachya
、A.shirleyi、A.spirorbis 、A.alata 、A.baileyana
、A.boormanii 、A.confusa 、A.cultriformis、A.cya
nophylla 、A.dealbata、A.deanei、A.decurrens 、A.d
iffusa 、A.drummondii、A.elata 、A.falcata 、A.fim
briata、A.floribunda、A.implexa 、A.lineata 、A.lo
ngifolia、A.mearnsii、A.oxycedrus 、A.penninervis
、A.podalyriifolia、A.pravissima、A.prominens 、
A.pycnantha 、A.retinodes 、A.rubida、A.spectabili
s 、A.uncinata、A.verticillata、A.stenophylla 、A.
nilotica等がある。さらに、これらの種間雑種があげら
れる。
属植物としては、代表的なものとしてAcacia aulacocar
pa、A.auriculiformis、A.cincinnata、A.crassicarpa
、A.fasciculifera 、A.flavescens、A.hylonoma、A.m
angium 、A.melanoxylon 、A.oraria、A.polystachya
、A.shirleyi、A.spirorbis 、A.alata 、A.baileyana
、A.boormanii 、A.confusa 、A.cultriformis、A.cya
nophylla 、A.dealbata、A.deanei、A.decurrens 、A.d
iffusa 、A.drummondii、A.elata 、A.falcata 、A.fim
briata、A.floribunda、A.implexa 、A.lineata 、A.lo
ngifolia、A.mearnsii、A.oxycedrus 、A.penninervis
、A.podalyriifolia、A.pravissima、A.prominens 、
A.pycnantha 、A.retinodes 、A.rubida、A.spectabili
s 、A.uncinata、A.verticillata、A.stenophylla 、A.
nilotica等がある。さらに、これらの種間雑種があげら
れる。
【００１２】また、組織培養に用いる組織片（外植体）
としては頂芽及び腋芽における茎頂、枝及び幹における
形成層、子葉及び幼葉における葉肉組織、根等のよう
に、分裂細胞を持っている組織であれば良いが、特に茎
頂と子葉を用いるのが有効である。
としては頂芽及び腋芽における茎頂、枝及び幹における
形成層、子葉及び幼葉における葉肉組織、根等のよう
に、分裂細胞を持っている組織であれば良いが、特に茎
頂と子葉を用いるのが有効である。
【００１３】（培地）本発明に使用する培地は植物の組
織培養に一般に用いられる培地を広く用いることができ
る。例えば、ガンボーグＢ５培地（Ｂ−５培地）、ムラ
シゲ・スクーグ培地（ＭＳ培地）、Litvayの培地（ＬＭ
培地）、Woody plant medium培地（ＷＰＭ培地）、Whit
e の培地（White 培地）、井出・齋藤の培地（ＩＳ培
地）あるいはこれらの培地の組成を改変した培地などで
ある。
織培養に一般に用いられる培地を広く用いることができ
る。例えば、ガンボーグＢ５培地（Ｂ−５培地）、ムラ
シゲ・スクーグ培地（ＭＳ培地）、Litvayの培地（ＬＭ
培地）、Woody plant medium培地（ＷＰＭ培地）、Whit
e の培地（White 培地）、井出・齋藤の培地（ＩＳ培
地）あるいはこれらの培地の組成を改変した培地などで
ある。
【００１４】（植物ホルモン）培地の植物ホルモンとし
てナフタレン酢酸（ＮＡＡ）、インドール−３−酢酸
（ＩＡＡ）、インドール−３−酪酸（ＩＢＡ）、２，４
−ジクロロフェノキシ酢酸（2,4-Ｄ）、インドール−３
−プロピオン酸（ＩＰＡ）、ベンゾフラン−３−酢酸
（ＢＦＡ）、フェニル酪酸（ＰＢＡ）、及びこれらの誘
導体等のオーキシン類、及びベンヂルアデニン（Ｂ
Ａ）、カイネチン、ゼアチン、２−イソペンテニルアデ
ニン（２ｉＰ）、（２−クロル−４−ピリジン）−３−
フェニル尿素（４ＰＵ）等のサイトカイニン類を例示で
きる。
てナフタレン酢酸（ＮＡＡ）、インドール−３−酢酸
（ＩＡＡ）、インドール−３−酪酸（ＩＢＡ）、２，４
−ジクロロフェノキシ酢酸（2,4-Ｄ）、インドール−３
−プロピオン酸（ＩＰＡ）、ベンゾフラン−３−酢酸
（ＢＦＡ）、フェニル酪酸（ＰＢＡ）、及びこれらの誘
導体等のオーキシン類、及びベンヂルアデニン（Ｂ
Ａ）、カイネチン、ゼアチン、２−イソペンテニルアデ
ニン（２ｉＰ）、（２−クロル−４−ピリジン）−３−
フェニル尿素（４ＰＵ）等のサイトカイニン類を例示で
きる。
【００１５】（カルスの誘導）上記の培地にサイトカイ
ニン類とオーキシン類との組み合せによる植物ホルモン
及びショ糖を添加した固体もしくは液体培地に、表面殺
菌を行ったアカシア属植物の組織片を植え付ける。この
ときのサイトカイニン類の濃度は0.01〜10.0mg/l、好ま
しくは0.05〜5.0mg/l である。また、オーキシン類は０
〜10.0mg/l、好ましくは0.01〜5.0mg/l である。培地
は、寒天0.1 〜1.5 ％、ショ糖１〜５％を添加したもの
が好ましい。培養条件は、温度15〜35℃、照度1000〜20
000luxで明期10〜16時間、暗期14〜８時間を与え培養す
る。このとき、培養温度は20〜30℃、照度1500〜3000lu
x 、明期12〜16時間、暗期12〜８時間が好ましい。組織
片植え付け後、約２週間程度で組織片のカルス化が始ま
り、約４週間後には直径５〜15mm程度のカルスに生長す
る。
ニン類とオーキシン類との組み合せによる植物ホルモン
及びショ糖を添加した固体もしくは液体培地に、表面殺
菌を行ったアカシア属植物の組織片を植え付ける。この
ときのサイトカイニン類の濃度は0.01〜10.0mg/l、好ま
しくは0.05〜5.0mg/l である。また、オーキシン類は０
〜10.0mg/l、好ましくは0.01〜5.0mg/l である。培地
は、寒天0.1 〜1.5 ％、ショ糖１〜５％を添加したもの
が好ましい。培養条件は、温度15〜35℃、照度1000〜20
000luxで明期10〜16時間、暗期14〜８時間を与え培養す
る。このとき、培養温度は20〜30℃、照度1500〜3000lu
x 、明期12〜16時間、暗期12〜８時間が好ましい。組織
片植え付け後、約２週間程度で組織片のカルス化が始ま
り、約４週間後には直径５〜15mm程度のカルスに生長す
る。
【００１６】（植物体の再生）上記によって誘導された
カルスを、前述の培地にオーキシン類単独又は、オーキ
シン類とサイトカイニン類とを組み合せた植物ホルモン
及びショ糖を添加した液体もしくは固体培地に移植す
る。このとき、サイトカイニン類の濃度は0.01〜10.0mg
/l、好ましくは0.01〜5.0mg/l である。また、オーキシ
ン類は０〜10.0mg/l、好ましくは0.05〜5.0mg/l 含まれ
ているのが好ましい。培地は、寒天0.1 〜1.5 ％、ショ
糖１〜５％を添加したものが好ましい。培養条件は、カ
ルス誘導の条件と同様である。このとき、培養温度は20
〜30℃、照度1500〜3000lux 、明期12〜16時間、暗期12
〜８時間が好ましい。カルス移植後、１〜３週間程度で
シュートの再分化が確認できる。約５週間後には５〜15
mmの長さのシュートが５〜30本程度カルスから再分化す
る。
カルスを、前述の培地にオーキシン類単独又は、オーキ
シン類とサイトカイニン類とを組み合せた植物ホルモン
及びショ糖を添加した液体もしくは固体培地に移植す
る。このとき、サイトカイニン類の濃度は0.01〜10.0mg
/l、好ましくは0.01〜5.0mg/l である。また、オーキシ
ン類は０〜10.0mg/l、好ましくは0.05〜5.0mg/l 含まれ
ているのが好ましい。培地は、寒天0.1 〜1.5 ％、ショ
糖１〜５％を添加したものが好ましい。培養条件は、カ
ルス誘導の条件と同様である。このとき、培養温度は20
〜30℃、照度1500〜3000lux 、明期12〜16時間、暗期12
〜８時間が好ましい。カルス移植後、１〜３週間程度で
シュートの再分化が確認できる。約５週間後には５〜15
mmの長さのシュートが５〜30本程度カルスから再分化す
る。
【００１７】（シュートからの発根）シュート再分化に
用いた培地を1/2 〜1/8 程度に希釈し、これにオーキシ
ン類を添加した培地に再分化したシュートをカルスから
切り放し移植を行う。このとき、培地のショ糖濃度はで
きるだけ低い方がよい。場合によってはショ糖は添加し
なくてもよい。このとき、オーキシン類は０〜10.0mg/
l、好ましくは0.01〜5.0mg/l 。培地は、ゲランガム0.1
〜1.5 ％、ショ糖１〜５％を添加したものが好まし
い。
用いた培地を1/2 〜1/8 程度に希釈し、これにオーキシ
ン類を添加した培地に再分化したシュートをカルスから
切り放し移植を行う。このとき、培地のショ糖濃度はで
きるだけ低い方がよい。場合によってはショ糖は添加し
なくてもよい。このとき、オーキシン類は０〜10.0mg/
l、好ましくは0.01〜5.0mg/l 。培地は、ゲランガム0.1
〜1.5 ％、ショ糖１〜５％を添加したものが好まし
い。
【００１８】発根時の培養条件は、カルス誘導、ショー
ト再分化時の条件と同様である。このとき、培養温度は
20〜30℃、照度1500〜3000lux 、明期12〜16時間、暗期
12〜８時間が好ましい。発根培地へ移植後、早いもので
約１週間程度で発根が認められる。この後２〜４週間で
順化を行えるような状態まで根が発達する。この発根個
体を従来知られている方法により順化することによっ
て、健全な苗木を多数得ることができる。以下に本発明
を実施例によって具体的に説明する。
ト再分化時の条件と同様である。このとき、培養温度は
20〜30℃、照度1500〜3000lux 、明期12〜16時間、暗期
12〜８時間が好ましい。発根培地へ移植後、早いもので
約１週間程度で発根が認められる。この後２〜４週間で
順化を行えるような状態まで根が発達する。この発根個
体を従来知られている方法により順化することによっ
て、健全な苗木を多数得ることができる。以下に本発明
を実施例によって具体的に説明する。
【００１９】
【実施例】以下、本発明を実施例によって具体的に説明
する。 実施例−１ Acacia auriculiformis の増殖（外植体に茎頂を用いた
場合） カルス誘導の培地及び植物ホルモン：ＭＳ、ＬＭ、ＷＰ
Ｍ、Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、第１表に示
す各種の濃度のＮＡＡとＢＡを加えpH5.6 に調製した。
この培地を100ml 容量のガラス製の三角コルベンに40ml
ずつ分注し、さらに寒天0.７％を加えオートクレーブに
よって滅菌した（121 ℃、1.2Kg/cm2 、15分間）。
する。 実施例−１ Acacia auriculiformis の増殖（外植体に茎頂を用いた
場合） カルス誘導の培地及び植物ホルモン：ＭＳ、ＬＭ、ＷＰ
Ｍ、Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、第１表に示
す各種の濃度のＮＡＡとＢＡを加えpH5.6 に調製した。
この培地を100ml 容量のガラス製の三角コルベンに40ml
ずつ分注し、さらに寒天0.７％を加えオートクレーブに
よって滅菌した（121 ℃、1.2Kg/cm2 、15分間）。
【００２０】
【表１】
【００２１】茎頂の植え付け及び培養条件：これらの培
地に、A.auriculiformisの種子を殺菌処理後、ＬＭ培地
で無菌播種し、２〜３週間で得られた芽生えの茎頂部分
を切りとって１コルベン当たり２茎頂ずつ植え付け、28
℃で14時間明期（2,000lux）、10時間暗期の培養条件で
１カ月培養し、カルスを誘導した。この結果、第１表に
示したようにカルス誘導率はＬＭ培地が最も良かったの
で、カルス誘導に使用した基本培地はＬＭ培地とした。
地に、A.auriculiformisの種子を殺菌処理後、ＬＭ培地
で無菌播種し、２〜３週間で得られた芽生えの茎頂部分
を切りとって１コルベン当たり２茎頂ずつ植え付け、28
℃で14時間明期（2,000lux）、10時間暗期の培養条件で
１カ月培養し、カルスを誘導した。この結果、第１表に
示したようにカルス誘導率はＬＭ培地が最も良かったの
で、カルス誘導に使用した基本培地はＬＭ培地とした。
【００２２】シュートの再分化：ＭＳ、ＬＭ、ＷＰＭ、
Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、シュートを再分
化させるために使用するホルモンの種類と濃度を明らか
にするためにＮＡＡ及びＢＡを表２に示す種々の濃度で
それぞれ添加し、ｐＨ５．６に調製して100ml 容量のガ
ラス製の三角コルベンに40mlずつ分注した。これに寒天
０．７％を加えオートクレーブによって滅菌した。
Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、シュートを再分
化させるために使用するホルモンの種類と濃度を明らか
にするためにＮＡＡ及びＢＡを表２に示す種々の濃度で
それぞれ添加し、ｐＨ５．６に調製して100ml 容量のガ
ラス製の三角コルベンに40mlずつ分注した。これに寒天
０．７％を加えオートクレーブによって滅菌した。
【００２３】
【表２】
【００２４】これらの培地に先にＬＭ培地で誘導したカ
ルスを直径５〜10mm程度に分割して各ホルモン濃度毎
に、１コルベン当たり２個ずつ移植した。なお、培養条
件はカルス誘導の際と同じとし、２カ月培養しシュート
の再分化率を調べた。この結果、シュート再分化率の最
も高かったのは、基本培地ではＭＳ、ホルモンではＮＡ
Ａ0.1mg/l とＢＡ１mg/lの組合せを添加したものであっ
た。培養後１カ月の段階で、カルスは1.5 〜２cm程度の
大きさに生長し、さらにここからシュートが１カルス当
たり10〜30本再分化した。この時点でシュートをカルス
から切り取り、次に述べる発根培地に移植した。
ルスを直径５〜10mm程度に分割して各ホルモン濃度毎
に、１コルベン当たり２個ずつ移植した。なお、培養条
件はカルス誘導の際と同じとし、２カ月培養しシュート
の再分化率を調べた。この結果、シュート再分化率の最
も高かったのは、基本培地ではＭＳ、ホルモンではＮＡ
Ａ0.1mg/l とＢＡ１mg/lの組合せを添加したものであっ
た。培養後１カ月の段階で、カルスは1.5 〜２cm程度の
大きさに生長し、さらにここからシュートが１カルス当
たり10〜30本再分化した。この時点でシュートをカルス
から切り取り、次に述べる発根培地に移植した。
【００２５】シュートからの発根：培地はＭＳ、ＬＭ、
ＷＰＭ、Ｂ−５のそれぞれの培地の1/6 希釈培地とし、
これにショ糖1.5 ％、ゲランガム0.4 ％とし、ホルモン
としてＩＢＡをその適正濃度を明らかにするために0.05
mg/l及び0.1 mg/lの濃度で添加した。培養条件は、カル
ス誘導及びシュート再分化時と同様とした。この条件
で、２ヶ月培養後発根が確認できた。なお、表３に示し
た発根率は、シュート再分化率の高かったＭＳ培地のＮ
ＡＡ0.1 mg/l及びＢＡ１mg/lを添加した試験区から取っ
たショートの発根率であるが、この結果から、ＩＢＡ0.
1 mg/lの濃度を添加したＷＰＭ培地で最も発根率が高か
った。
ＷＰＭ、Ｂ−５のそれぞれの培地の1/6 希釈培地とし、
これにショ糖1.5 ％、ゲランガム0.4 ％とし、ホルモン
としてＩＢＡをその適正濃度を明らかにするために0.05
mg/l及び0.1 mg/lの濃度で添加した。培養条件は、カル
ス誘導及びシュート再分化時と同様とした。この条件
で、２ヶ月培養後発根が確認できた。なお、表３に示し
た発根率は、シュート再分化率の高かったＭＳ培地のＮ
ＡＡ0.1 mg/l及びＢＡ１mg/lを添加した試験区から取っ
たショートの発根率であるが、この結果から、ＩＢＡ0.
1 mg/lの濃度を添加したＷＰＭ培地で最も発根率が高か
った。
【００２６】
【表３】
【００２７】この後１カ月で順化可能となるように根が
発育した。この発根した個体をすでに明らかにされてい
る方法で培養土に移植し、徐々に湿度を下げ、高照度に
移していくことによって約１ヶ月で順化を終了し、正常
な苗木となった。この方法によって、１個の茎頂から約
８カ月で約３０本の苗木が生産できた。
発育した。この発根した個体をすでに明らかにされてい
る方法で培養土に移植し、徐々に湿度を下げ、高照度に
移していくことによって約１ヶ月で順化を終了し、正常
な苗木となった。この方法によって、１個の茎頂から約
８カ月で約３０本の苗木が生産できた。
【００２８】実施例−２ Acacia auriculiformis の増殖（外植体に子葉を用いた
場合） カルス誘導の培地および植物ホルモン：ＭＳ、ＬＭ、Ｗ
ＰＭ、Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、第４表に
示す各種の濃度のＮＡＡとＢＡを加えpH5.6 に調製し
た。この培地を100ml 容量のガラス製の三角コルベンに
40mlずつ分注し、さらに寒天0.7 ％を加えオートクレー
ブによって滅菌した（121 ℃、1.2Kg/cm2 、15分間）。
場合） カルス誘導の培地および植物ホルモン：ＭＳ、ＬＭ、Ｗ
ＰＭ、Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、第４表に
示す各種の濃度のＮＡＡとＢＡを加えpH5.6 に調製し
た。この培地を100ml 容量のガラス製の三角コルベンに
40mlずつ分注し、さらに寒天0.7 ％を加えオートクレー
ブによって滅菌した（121 ℃、1.2Kg/cm2 、15分間）。
【００２９】
【表４】
【００３０】子葉の植え付け及び培養条件：これらの培
地にA.auriculiformisの種子を殺菌処理後、ＬＭ培地で
無菌播種後、２〜３週間で得られた芽生えの子葉部分を
切りとって１コルベン当たり２枚の子葉を植え付け、28
℃で14時間明期（2,000lux）、10時間暗期の培養条件で
１カ月培養し、カルスを誘導した。この結果、第４表に
示したようにカルス誘導率はＷＰＭ培地が最も良かった
ので、カルス誘導に使用した基本培地はＷＰＭ培地とし
た。
地にA.auriculiformisの種子を殺菌処理後、ＬＭ培地で
無菌播種後、２〜３週間で得られた芽生えの子葉部分を
切りとって１コルベン当たり２枚の子葉を植え付け、28
℃で14時間明期（2,000lux）、10時間暗期の培養条件で
１カ月培養し、カルスを誘導した。この結果、第４表に
示したようにカルス誘導率はＷＰＭ培地が最も良かった
ので、カルス誘導に使用した基本培地はＷＰＭ培地とし
た。
【００３１】シュートの再分化：ＭＳ、ＬＭ、ＷＰＭ、
Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、シュートを再分
化させるために使用するホルモンの種類と濃度を明らか
にするためにＮＡＡ及びＢＡを表５に示す種々の濃度で
それぞれ添加し、pH5.6 に調製して100ml 容量のガラス
製の三角コルベンに40mlずつ分注した。これに寒天0.7
％を加えオートクレーブによって滅菌した。
Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、シュートを再分
化させるために使用するホルモンの種類と濃度を明らか
にするためにＮＡＡ及びＢＡを表５に示す種々の濃度で
それぞれ添加し、pH5.6 に調製して100ml 容量のガラス
製の三角コルベンに40mlずつ分注した。これに寒天0.7
％を加えオートクレーブによって滅菌した。
【００３２】
【表５】
【００３３】これらの培地に先にＷＰＭ培地で誘導した
カルスを直径５〜10mm程度に分割して各ホルモン濃度毎
に、１コルベン当たり２個ずつ移植した。なお、培養条
件はカルス誘導の際と同じとし、１カ月培養しシュート
の再分化率を調べた。この結果、シュート再分化率の最
も高かったのは、基本培地ではＢ−５、ホルモンではＮ
ＡＡ0.5mg/l とＢＡ１mg/lの組合せを添加したものであ
った。培養後１カ月の段階で、カルスは1.5 〜2cm 程度
の大きさに生長しさらにここからシュートが１カルス当
たり10〜30本再分化した。この時点でシュートをカルス
から切り取り、次に述べる発根培地に移植した。
カルスを直径５〜10mm程度に分割して各ホルモン濃度毎
に、１コルベン当たり２個ずつ移植した。なお、培養条
件はカルス誘導の際と同じとし、１カ月培養しシュート
の再分化率を調べた。この結果、シュート再分化率の最
も高かったのは、基本培地ではＢ−５、ホルモンではＮ
ＡＡ0.5mg/l とＢＡ１mg/lの組合せを添加したものであ
った。培養後１カ月の段階で、カルスは1.5 〜2cm 程度
の大きさに生長しさらにここからシュートが１カルス当
たり10〜30本再分化した。この時点でシュートをカルス
から切り取り、次に述べる発根培地に移植した。
【００３４】シュートからの発根：培地はＭＳ、ＬＭ、
ＷＰＭ、Ｂ−５のそれぞれの培地の1/6 希釈培地とし、
これにショ糖1.5 ％、ゲランガム0.4 ％とし、ホルモン
としてＩＢＡをその濃度を明らかにするために0.05mg/l
及び0.1mg/l の濃度で添加した。培養条件は、カルス誘
導及びシュート再分化時と同様とした。この条件で、１
ヶ月培養後発根が確認できた。なお、表６に示した発根
率は、シュート再分化率の高かったＢ−５培地のＮＡＡ
0.5mg/g 及びＢＡ１mg/lを添加した試験区から取ったシ
ョートの発根率であるが、この結果から、ＩＢＡ0.1mg/
l の濃度を添加したＷＰＭ培地で最も発根率が高かっ
た。
ＷＰＭ、Ｂ−５のそれぞれの培地の1/6 希釈培地とし、
これにショ糖1.5 ％、ゲランガム0.4 ％とし、ホルモン
としてＩＢＡをその濃度を明らかにするために0.05mg/l
及び0.1mg/l の濃度で添加した。培養条件は、カルス誘
導及びシュート再分化時と同様とした。この条件で、１
ヶ月培養後発根が確認できた。なお、表６に示した発根
率は、シュート再分化率の高かったＢ−５培地のＮＡＡ
0.5mg/g 及びＢＡ１mg/lを添加した試験区から取ったシ
ョートの発根率であるが、この結果から、ＩＢＡ0.1mg/
l の濃度を添加したＷＰＭ培地で最も発根率が高かっ
た。
【００３５】
【表６】
【００３６】この後１カ月で順化可能となるように根が
発育した。この発根した個体をすでに明らかにされてい
る方法で培養土に移植し、徐々に湿度を下げ、高照度に
移していくことによって約１ヶ月で順化を終了し、正常
な苗木となった。この方法によって、１個の茎頂から約
８カ月で約20本の苗木が生産できた。
発育した。この発根した個体をすでに明らかにされてい
る方法で培養土に移植し、徐々に湿度を下げ、高照度に
移していくことによって約１ヶ月で順化を終了し、正常
な苗木となった。この方法によって、１個の茎頂から約
８カ月で約20本の苗木が生産できた。
【００３７】実施例−３ Acacia mangiumの増殖： カルス誘導の培地及び植物ホルモン：ＭＳ、ＬＭ、ＷＰ
Ｍ、Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、第７表に示
す各種の濃度のＮＡＡとＢＡを加えpH5.6 に調製した。
この培地を100ml 容量のガラス製の三角コルベンに40ml
ずつ分注し、さらに寒天0.7 ％を加えオートクレーブに
よって滅菌した（121 ℃、1.2Kg/cm2 、15分間）。
Ｍ、Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、第７表に示
す各種の濃度のＮＡＡとＢＡを加えpH5.6 に調製した。
この培地を100ml 容量のガラス製の三角コルベンに40ml
ずつ分注し、さらに寒天0.7 ％を加えオートクレーブに
よって滅菌した（121 ℃、1.2Kg/cm2 、15分間）。
【００３８】
【表７】
【００３９】茎頂の植え付け及び培養条件：これらの培
地にA.mangium の種子を殺菌処理後、ＬＭ培地で無菌播
種後、２〜３週間で得られた芽生えの茎頂部分を切りと
って１コルベン当たり２茎頂ずつ植え付け、28℃で14時
間明期（2,000lux）、10時間暗期の培養条件で１カ月培
養し、カルスを誘導した。この結果、第７表に示したよ
うにカルス誘導率はＬＭ培地が最も良かったので、カル
ス誘導に使用した基本培地はＬＭ培地とした。
地にA.mangium の種子を殺菌処理後、ＬＭ培地で無菌播
種後、２〜３週間で得られた芽生えの茎頂部分を切りと
って１コルベン当たり２茎頂ずつ植え付け、28℃で14時
間明期（2,000lux）、10時間暗期の培養条件で１カ月培
養し、カルスを誘導した。この結果、第７表に示したよ
うにカルス誘導率はＬＭ培地が最も良かったので、カル
ス誘導に使用した基本培地はＬＭ培地とした。
【００４０】シュートの再分化：ＭＳ、ＬＭ、ＷＰＭ、
Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、シュートを再分
化させるために使用するホルモンの種類と濃度を明らか
にするためにＮＡＡ及びＢＡを表８に示す種々の濃度で
それぞれ添加し、pH5.6 に調製して100ml 容量のガラス
製の三角コルベンに40mlずつ分注した。これに寒天0.7
％を加えオートクレーブによって滅菌した。
Ｂ−５の各培地にショ糖３％を添加し、シュートを再分
化させるために使用するホルモンの種類と濃度を明らか
にするためにＮＡＡ及びＢＡを表８に示す種々の濃度で
それぞれ添加し、pH5.6 に調製して100ml 容量のガラス
製の三角コルベンに40mlずつ分注した。これに寒天0.7
％を加えオートクレーブによって滅菌した。
【００４１】
【表８】
【００４２】これらの培地に先にＬＭ培地で誘導したカ
ルスを直径５〜10mm程度に分割して各ホルモン濃度毎
に、１コルベン当たり２個ずつ移植した。なお、培養条
件はカルス誘導の際と同じとし、２カ月培養しシュート
の再分化率を調べた。この結果、シュート再分化率の最
も高かったのは、基本培地ではＭＳ、ホルモンではＮＡ
Ａ0.1mg/l とＢＡ１mg/lの組合せを添加したものであっ
た。培養後１カ月の段階で、カルスは1.5 〜２cm程度の
大きさに生長し、さらにここからシュートが１カルス当
たり10〜30本再分化した。この時点でシュートをカルス
から切り取り、次に述べる発根培地に移植した。
ルスを直径５〜10mm程度に分割して各ホルモン濃度毎
に、１コルベン当たり２個ずつ移植した。なお、培養条
件はカルス誘導の際と同じとし、２カ月培養しシュート
の再分化率を調べた。この結果、シュート再分化率の最
も高かったのは、基本培地ではＭＳ、ホルモンではＮＡ
Ａ0.1mg/l とＢＡ１mg/lの組合せを添加したものであっ
た。培養後１カ月の段階で、カルスは1.5 〜２cm程度の
大きさに生長し、さらにここからシュートが１カルス当
たり10〜30本再分化した。この時点でシュートをカルス
から切り取り、次に述べる発根培地に移植した。
【００４３】シュートからの発根：培地はＭＳ、ＬＭ、
ＷＰＭ、Ｂ−５のそれぞれの培地の1/6 希釈培地とし、
これにショ糖1.5 ％、ゲランガム0.4 ％とし、ホルモン
としてＩＢＡをその濃度を明らかにするために0.05mg/l
及び0.1mg/l の濃度で添加した。培養条件は、カルス誘
導及びシュート再分化時と同様とした。この条件で、１
ヶ月培養後発根が確認できた。なお、表９に示した発根
率は、シュート再分化率の高かったＭＳ培地のＮＡＡ0.
1mg/l 及びＢＡ１mg/lを添加した試験区から取ったシュ
ートの発根率であるが、この結果から、ＩＢＡ0.1mg/l
の濃度を添加したＭＳ培地とＷＰＭ培地で最も発根率が
高かった。
ＷＰＭ、Ｂ−５のそれぞれの培地の1/6 希釈培地とし、
これにショ糖1.5 ％、ゲランガム0.4 ％とし、ホルモン
としてＩＢＡをその濃度を明らかにするために0.05mg/l
及び0.1mg/l の濃度で添加した。培養条件は、カルス誘
導及びシュート再分化時と同様とした。この条件で、１
ヶ月培養後発根が確認できた。なお、表９に示した発根
率は、シュート再分化率の高かったＭＳ培地のＮＡＡ0.
1mg/l 及びＢＡ１mg/lを添加した試験区から取ったシュ
ートの発根率であるが、この結果から、ＩＢＡ0.1mg/l
の濃度を添加したＭＳ培地とＷＰＭ培地で最も発根率が
高かった。
【００４４】
【表９】 この後１カ月で順化可能となるように根が発育した。こ
の発根した個体をすでに明らかにされている方法で培養
土に移植し、徐々に湿度を下げ、高照度に移していくこ
とによって約１ヶ月で順化を終了し、正常な苗木となっ
た。この方法によって、１個の茎頂から約８カ月で約２
０本の苗木が生産できた。
の発根した個体をすでに明らかにされている方法で培養
土に移植し、徐々に湿度を下げ、高照度に移していくこ
とによって約１ヶ月で順化を終了し、正常な苗木となっ
た。この方法によって、１個の茎頂から約８カ月で約２
０本の苗木が生産できた。
【００４５】
【発明の効果】本発明によって、これまで実生繁殖に頼
っていたアカシア属植物の増殖を、組織培養の手法によ
って大量増殖するものである。さらにこの方法は遺伝子
組み替えの手法にも用いる事が可能である。
っていたアカシア属植物の増殖を、組織培養の手法によ
って大量増殖するものである。さらにこの方法は遺伝子
組み替えの手法にも用いる事が可能である。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成６年５月２０日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００２】
【従来の技術】アカシア属植物は世界的に約６００種知
られており、おもに南半球の熱帯、亜熱帯地方に広く分
布する。このアカシア属植物は、根に根粒菌を持ち、痩
せ地でも成長が早い事が知られていてパルプ用材をはじ
め、切り花、庭園木、緑化樹として用いられ、パルプ、
家具材、香水、タンニン、アラビアゴムなどの広い用途
がある。これらのアカシア属植物の増殖は、通常種子又
は挿木によって行われている。しかし種子による増殖の
場合は、苗木の遺伝的性質が安定しない欠陥がある。ま
た挿木による増殖の場合は、遺伝的には均一の苗木の増
殖ができるが、この方法を用いた大量増殖は、組織培養
を用いた場合と比較すると極端に効率が落ちる。組織培
養の手法を用いた、アカシア属植物の増殖の例として
は、以下の例がある。
られており、おもに南半球の熱帯、亜熱帯地方に広く分
布する。このアカシア属植物は、根に根粒菌を持ち、痩
せ地でも成長が早い事が知られていてパルプ用材をはじ
め、切り花、庭園木、緑化樹として用いられ、パルプ、
家具材、香水、タンニン、アラビアゴムなどの広い用途
がある。これらのアカシア属植物の増殖は、通常種子又
は挿木によって行われている。しかし種子による増殖の
場合は、苗木の遺伝的性質が安定しない欠陥がある。ま
た挿木による増殖の場合は、遺伝的には均一の苗木の増
殖ができるが、この方法を用いた大量増殖は、組織培養
を用いた場合と比較すると極端に効率が落ちる。組織培
養の手法を用いた、アカシア属植物の増殖の例として
は、以下の例がある。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明は、アカシア属植
物の組織片をサイトカイニン系植物ホルモン０．０１〜
１０．０ｍｇ／ｌ、オーキシン系植物ホルモン０〜１
０．０ｍｇ／ｌを含む培地を用いて無菌的にカルスを誘
導し、次いで誘導されたカルスをオーキシン系植物ホル
モン０．０１〜１０．０ｍｇ／ｌ、サイトカイニン系植
物ホルモン０〜１０．０ｍｇ／ｌを組み合わせた培地を
用いてシュートを再分化し、次いで再分化されたシュー
トを少なくとも１種類以上のオーキシン系植物ホルモン
０．０１〜２．０ｍｇ／ｌを含む培地にて発根させるこ
とを特徴とするアカシア属植物の大量増殖法に存する。
物の組織片をサイトカイニン系植物ホルモン０．０１〜
１０．０ｍｇ／ｌ、オーキシン系植物ホルモン０〜１
０．０ｍｇ／ｌを含む培地を用いて無菌的にカルスを誘
導し、次いで誘導されたカルスをオーキシン系植物ホル
モン０．０１〜１０．０ｍｇ／ｌ、サイトカイニン系植
物ホルモン０〜１０．０ｍｇ／ｌを組み合わせた培地を
用いてシュートを再分化し、次いで再分化されたシュー
トを少なくとも１種類以上のオーキシン系植物ホルモン
０．０１〜２．０ｍｇ／ｌを含む培地にて発根させるこ
とを特徴とするアカシア属植物の大量増殖法に存する。
Claims (4)
- 【請求項１】 アカシア属植物の組織片をサイトカイニ
ン系植物ホルモン0.01〜10.0mg/l、オーキシン系植物ホ
ルモン０〜10.0mg/lを組み合わせた培地を用いて無菌的
にカルスを誘導し、次いで誘導されたカルスをオーキシ
ン系植物ホルモン0.01〜10.0mg/l、サイトカイニン系植
物ホルモン０〜10.0mg/lを組み合わせた培地を含む培地
を用いてシュートを再分化し、次いで再分化されたシュ
ートをオーキシン系植物ホルモン0.01〜10.0mg/lを含む
培地にて発根させることを特徴とするアカシア属植物の
大量増殖法。 - 【請求項２】 カルス誘導時の植物ホルモンがオーキシ
ン系植物ホルモン0.01〜5.0mg/l 、サイトカイニン系植
物ホルモンが0.05〜5.0mg/l である請求項１記載の方
法。 - 【請求項３】 シュート再分化時の植物ホルモンがオー
キシン系植物ホルモン0.05〜5.0mg/l 、サイトカイニン
系植物ホルモンが0.01〜5.0mg/l である請求項１又は２
記載の方法。 - 【請求項４】 発根時の植物ホルモンがオーキシン系植
物ホルモン0.01〜5.0mg/l である請求項１、２又は３記
載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7129494A JPH07255304A (ja) | 1994-03-17 | 1994-03-17 | アカシア属植物の大量増殖法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7129494A JPH07255304A (ja) | 1994-03-17 | 1994-03-17 | アカシア属植物の大量増殖法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07255304A true JPH07255304A (ja) | 1995-10-09 |
Family
ID=13456521
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7129494A Pending JPH07255304A (ja) | 1994-03-17 | 1994-03-17 | アカシア属植物の大量増殖法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07255304A (ja) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998048613A1 (en) * | 1997-04-29 | 1998-11-05 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for plant transformation and regeneration |
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