JPH07145148A - ポリメチン系化合物およびそれを用いる測定方法 - Google Patents
ポリメチン系化合物およびそれを用いる測定方法Info
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- JPH07145148A JPH07145148A JP14146992A JP14146992A JPH07145148A JP H07145148 A JPH07145148 A JP H07145148A JP 14146992 A JP14146992 A JP 14146992A JP 14146992 A JP14146992 A JP 14146992A JP H07145148 A JPH07145148 A JP H07145148A
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【目的】 アミノ基含有物質の高感度測定に有用な化合
物および測定方法を提供する。 【構成】 下記式（１）に示されるポリメチン系化合物
をアミノ基を含有する物質と反応させ、反応生成物の近
赤外部における吸収または蛍光を測定することにより、
アミノ基含有物質の定量分析を行なう。 （式中ｎ，ｎ′はそれぞれ１〜１８の自然数、Ｒ１は水
素、スルホン酸基、Ｎ−スクシイミジルカルボネート
基、スルホニルクロリド基のいずれかを表す。Ｒ２はＮ
−スクシイミジルカルボネート基、ハロゲン基、イソチ
オシアネート基、スルフォニルクロリド基、アルデヒド
基のいずれかを表す。Ａｒは、置換していてもよいフェ
ニル基、α−ナフチル基、β−ナフチル基のいずれかを
表す。Ｘは、酸素、イオウ、ジメチルメチレン基のいず
れかを表す。）
物および測定方法を提供する。 【構成】 下記式（１）に示されるポリメチン系化合物
をアミノ基を含有する物質と反応させ、反応生成物の近
赤外部における吸収または蛍光を測定することにより、
アミノ基含有物質の定量分析を行なう。 （式中ｎ，ｎ′はそれぞれ１〜１８の自然数、Ｒ１は水
素、スルホン酸基、Ｎ−スクシイミジルカルボネート
基、スルホニルクロリド基のいずれかを表す。Ｒ２はＮ
−スクシイミジルカルボネート基、ハロゲン基、イソチ
オシアネート基、スルフォニルクロリド基、アルデヒド
基のいずれかを表す。Ａｒは、置換していてもよいフェ
ニル基、α−ナフチル基、β−ナフチル基のいずれかを
表す。Ｘは、酸素、イオウ、ジメチルメチレン基のいず
れかを表す。）
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はアミノ基を有する物質の
高感度測定に有用な、ポリメチン系化合物およびそれを
用いた測定方法である。
高感度測定に有用な、ポリメチン系化合物およびそれを
用いた測定方法である。
【０００２】
【従来の技術】従来、ＨＰＬＣによるアミノ基を有する
物質の定量法は種々開発されている。例えば、未修飾化
合物の吸光度測定による直接定量法があるが、物質各々
の性質に依存し、一般的にその感度は低い。また間接吸
光度検出法も種々の方法が知られている。その方法とし
ては、以下に示す方法が知られている。
物質の定量法は種々開発されている。例えば、未修飾化
合物の吸光度測定による直接定量法があるが、物質各々
の性質に依存し、一般的にその感度は低い。また間接吸
光度検出法も種々の方法が知られている。その方法とし
ては、以下に示す方法が知られている。
【０００３】ａ）２３０−２６０ｎｍの吸光を測定する
アミノ酸の銅錯体法（Ｓ．Ｌｅｖｉｎｅ，ｅｔ ａ
ｌ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，５７，１８３０（１９８
５））。 ｂ）２５４ｎｍ付近に紫外吸収を持つイオン対、例えば
ナフタレン−２−オクタンスルホン酸ナトリウム、１−
フェニル−２−ピコリニウムなどを用い、ＨＰＬＣによ
り分離測定する方法（Ｍ．Ｄｅｎｋｅｒ，ｅｔ ａ
ｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，２１８，３１（１
９８１））。
アミノ酸の銅錯体法（Ｓ．Ｌｅｖｉｎｅ，ｅｔ ａ
ｌ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，５７，１８３０（１９８
５））。 ｂ）２５４ｎｍ付近に紫外吸収を持つイオン対、例えば
ナフタレン−２−オクタンスルホン酸ナトリウム、１−
フェニル−２−ピコリニウムなどを用い、ＨＰＬＣによ
り分離測定する方法（Ｍ．Ｄｅｎｋｅｒ，ｅｔ ａ
ｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，２１８，３１（１
９８１））。
【０００４】しかし、これらの方法もその感度は低い。
【０００５】ポストカラム法による吸光検出法として
は、ｎｍｏｌ程度の感度を有するニンヒドリン法（波多
野博行、“アミノ酸自動分析法”、化学同人、ｐ７９
（１９６４））及び、ＰＩＴＣ法（Ｈ．−Ｓｕ，Ｐ．−
Ｈ．Ｌａｉ，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．３６８，２１
５（１９８６））がある。一方蛍光検出法としては、オ
ルトフタルアルデヒドを使用するＯＰＡ法（Ｍ，Ｒｏｔ
ｈ，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，４３，８８０（１９７
１））、フルオレッサミン法（Ａ．Ｇ．Ｇｅｏｒｇｉａ
ｄｉｓ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎａ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５
６，１２１（１９７３）、及びＮＢＤ法（Ｙ．Ｗａｔａ
ｎａｂｅ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，５
５，１７８６（１９８３））などが知られている。これ
らの方法により、高感度分析への試みがなされている。
は、ｎｍｏｌ程度の感度を有するニンヒドリン法（波多
野博行、“アミノ酸自動分析法”、化学同人、ｐ７９
（１９６４））及び、ＰＩＴＣ法（Ｈ．−Ｓｕ，Ｐ．−
Ｈ．Ｌａｉ，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．３６８，２１
５（１９８６））がある。一方蛍光検出法としては、オ
ルトフタルアルデヒドを使用するＯＰＡ法（Ｍ，Ｒｏｔ
ｈ，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，４３，８８０（１９７
１））、フルオレッサミン法（Ａ．Ｇ．Ｇｅｏｒｇｉａ
ｄｉｓ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎａ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５
６，１２１（１９７３）、及びＮＢＤ法（Ｙ．Ｗａｔａ
ｎａｂｅ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，５
５，１７８６（１９８３））などが知られている。これ
らの方法により、高感度分析への試みがなされている。
【０００６】プレカラム法においては紫外蛍光を有する
多くの紫外蛍光プローブが知られている。例えば、ＦＩ
ＴＣ，ＮＢＤ−Ｃｌ（Ｆ）（Ｙ．Ｗａｔａｎａｂｅ，ｅ
ｔａｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，２３９，７２
３（１９８２），ＦＭＯＣ（Ｌ．Ａ．Ｃａｒｐｉｎｏ，
ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３７，３４０
４（１９７２）、及びＤＮＳ−Ｃｌ（Ｙ．Ｔａｐｕｈ
ｉ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１１
５，１２３（１９８１））などが知られており、ｆｍｏ
ｌ程度の感度を有する高感度測定も可能になりつつあ
る。
多くの紫外蛍光プローブが知られている。例えば、ＦＩ
ＴＣ，ＮＢＤ−Ｃｌ（Ｆ）（Ｙ．Ｗａｔａｎａｂｅ，ｅ
ｔａｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，２３９，７２
３（１９８２），ＦＭＯＣ（Ｌ．Ａ．Ｃａｒｐｉｎｏ，
ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３７，３４０
４（１９７２）、及びＤＮＳ−Ｃｌ（Ｙ．Ｔａｐｕｈ
ｉ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１１
５，１２３（１９８１））などが知られており、ｆｍｏ
ｌ程度の感度を有する高感度測定も可能になりつつあ
る。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】上述したように、アミ
ノ基を有する物質の高感度分析がＨＰＬＣ法により達成
されつつあるが、まだ多くの問題点を有している。その
一つは、バックグラウンドに関する問題である。つまり
実際の試料の分析に於いて、紫外部に吸収を持つ種々の
妨害成分に由来する夾雑ピークの為に感度が低下し、同
定が困難になることが多い。この為に、標準物質の定量
で得られた感度が達成されないことが多い。特に生体試
料などの場合には、この問題点を回避するために複雑な
前処理が必要となる。
ノ基を有する物質の高感度分析がＨＰＬＣ法により達成
されつつあるが、まだ多くの問題点を有している。その
一つは、バックグラウンドに関する問題である。つまり
実際の試料の分析に於いて、紫外部に吸収を持つ種々の
妨害成分に由来する夾雑ピークの為に感度が低下し、同
定が困難になることが多い。この為に、標準物質の定量
で得られた感度が達成されないことが多い。特に生体試
料などの場合には、この問題点を回避するために複雑な
前処理が必要となる。
【０００８】また通常の吸光度及び蛍光測定法において
も、バックグラウンドの上昇のため、同様の感度の低下
が起こる。また蛍光分析法において高感度を追及する場
合には、その検出器として、水冷アルゴンイオンレーザ
ー、ヘリウム−カドニウムレーザーなどの大型かつ高価
な励起光源が蛍光検出器に必要となるため、実用的な分
析法でなくなる傾向があった。
も、バックグラウンドの上昇のため、同様の感度の低下
が起こる。また蛍光分析法において高感度を追及する場
合には、その検出器として、水冷アルゴンイオンレーザ
ー、ヘリウム−カドニウムレーザーなどの大型かつ高価
な励起光源が蛍光検出器に必要となるため、実用的な分
析法でなくなる傾向があった。
【０００９】このような問題点を解決するために、種々
の方法が検討されてきた。例えば化学発光法、時間分解
法、近赤外部蛍光色素法などがあげられる。今坂らによ
って検討された近赤外励起蛍光色素法は、夾雑成分の吸
収のバックグラウンドを回避でき、また高感度化するた
めに使用する半導体レーザーは非常に小型かつ安価であ
る（Ｉｍａｓａｋａ，Ｔ．，Ａａｎｌ．Ｃｈｅｍ．，６
２，３６３（１９９０））。しかしながら、化合物と反
応する活性部分を有する近赤外励起蛍光色素がこれまで
得られていなかったので、本法の測定適用範囲は限られ
ていた。
の方法が検討されてきた。例えば化学発光法、時間分解
法、近赤外部蛍光色素法などがあげられる。今坂らによ
って検討された近赤外励起蛍光色素法は、夾雑成分の吸
収のバックグラウンドを回避でき、また高感度化するた
めに使用する半導体レーザーは非常に小型かつ安価であ
る（Ｉｍａｓａｋａ，Ｔ．，Ａａｎｌ．Ｃｈｅｍ．，６
２，３６３（１９９０））。しかしながら、化合物と反
応する活性部分を有する近赤外励起蛍光色素がこれまで
得られていなかったので、本法の測定適用範囲は限られ
ていた。
【００１０】
【課題を解決するための手段】本発明者らは上記課題を
解決するために鋭意検討を重ねた結果、本発明に到達し
た。
解決するために鋭意検討を重ねた結果、本発明に到達し
た。
【００１１】すなわち本発明の特徴は、下記一般式
（１）で示されるポリメチン系化合物
（１）で示されるポリメチン系化合物
【００１２】
【化２】
【００１３】（式中ｎ，ｎ’はそれぞれ１〜１８の自然
数、Ｒ1 は水素、スルホン酸基、Ｎ−スクシイミジルカ
ルボネート基、スルホニルクロリド基のいずれかを表
す。Ｒ2はＮ−スクシイミジルカルボネート基、ハロゲ
ン基、イソチオシアネート基、スルフォニルクロリド
基、アルデヒド基のいずれかを表す。Ａｒは、置換して
いてもよいフェニル基、α−ナフチル基、β−ナフチル
基のいずれかを表す。Ｘは、酸素、イオウ、ジメチルメ
チレン基のいずれかを表す。）にある。
数、Ｒ1 は水素、スルホン酸基、Ｎ−スクシイミジルカ
ルボネート基、スルホニルクロリド基のいずれかを表
す。Ｒ2はＮ−スクシイミジルカルボネート基、ハロゲ
ン基、イソチオシアネート基、スルフォニルクロリド
基、アルデヒド基のいずれかを表す。Ａｒは、置換して
いてもよいフェニル基、α−ナフチル基、β−ナフチル
基のいずれかを表す。Ｘは、酸素、イオウ、ジメチルメ
チレン基のいずれかを表す。）にある。
【００１４】また本発明は、上記ポリメチン系化合物か
らなる近赤外光励起蛍光プローブ試薬を提供することを
もう一つの特徴とする。
らなる近赤外光励起蛍光プローブ試薬を提供することを
もう一つの特徴とする。
【００１５】またこの試薬をアミノ基を有する物質と反
応させ、反応生成物の近赤外部に於ける吸収または蛍光
を測定することでアミノ基含有物質を測定する方法を更
に他の特徴とする。
応させ、反応生成物の近赤外部に於ける吸収または蛍光
を測定することでアミノ基含有物質を測定する方法を更
に他の特徴とする。
【００１６】以下本発明をさらに詳細に説明する。
【００１７】本発明のポリメチン化合物は上記一般式
（１）で示される。中でもｎ，ｎ’は、大きすぎるとア
ミノ基を有する物質との反応性が劣るため、２〜５が好
ましい。Ｒ1 はＨ、スルホン酸基などアミノ基との反応
性がない基が好ましい。アミノ基との反応性を有する基
では、Ｒ1 およびＲ2 とアミノ基との反応物、Ｒ1 また
はＲ2 とアミノ基との反応物、さらに未反応物が混在す
る恐れがあり、定量分析などにおいて取扱いが煩わしく
なるからである。一方Ｒ2 は、アミノ基との反応性を有
するもので、特にＮ−スクシイミジルカルボネート基、
イソチオシアネート基が好ましい。これらは、水の存在
する反応系においても分解しにくいからである。またＡ
ｒは置換していてもよいα−ナフチル基、Ｘはイオウ、
ジメチルメチレン基であると、励起波長が長波長側にシ
フトするので好ましい。
（１）で示される。中でもｎ，ｎ’は、大きすぎるとア
ミノ基を有する物質との反応性が劣るため、２〜５が好
ましい。Ｒ1 はＨ、スルホン酸基などアミノ基との反応
性がない基が好ましい。アミノ基との反応性を有する基
では、Ｒ1 およびＲ2 とアミノ基との反応物、Ｒ1 また
はＲ2 とアミノ基との反応物、さらに未反応物が混在す
る恐れがあり、定量分析などにおいて取扱いが煩わしく
なるからである。一方Ｒ2 は、アミノ基との反応性を有
するもので、特にＮ−スクシイミジルカルボネート基、
イソチオシアネート基が好ましい。これらは、水の存在
する反応系においても分解しにくいからである。またＡ
ｒは置換していてもよいα−ナフチル基、Ｘはイオウ、
ジメチルメチレン基であると、励起波長が長波長側にシ
フトするので好ましい。
【００１８】以上のような化合物の一例として、例えば
以下に示す式（２）〜（６）で示される化合物などがあ
げられる。
以下に示す式（２）〜（６）で示される化合物などがあ
げられる。
【００１９】
【化３】
【００２０】
【化４】
【００２１】
【化５】
【００２２】
【化６】
【００２３】
【化７】
【００２４】これら一般式（１）で示されるポリメチン
系化合物は、公知のポリメチン系色素から製造すること
ができる。具体的には上記式（２）〜（６）の化合物
は、それぞれ以下に示す式（７）〜（１１）のポリメチ
ン系色素を原料とし、そのカルボキシル基、スルホン酸
基または水酸基をスクシイミジルエステル化又はハロゲ
ン化することにより誘導することができる。
系化合物は、公知のポリメチン系色素から製造すること
ができる。具体的には上記式（２）〜（６）の化合物
は、それぞれ以下に示す式（７）〜（１１）のポリメチ
ン系色素を原料とし、そのカルボキシル基、スルホン酸
基または水酸基をスクシイミジルエステル化又はハロゲ
ン化することにより誘導することができる。
【００２５】
【化８】
【００２６】
【化９】
【００２７】
【化１０】
【００２８】
【化１１】
【００２９】
【化１２】
【００３０】一例を上げると、ポリメチン系色素のカル
ボキシル基のスクシイミジルエステル化は、ポリメチン
系色素を無水アセトニトリルに溶解後、カルボキシル基
に対し１．２等量のＮ，Ｎ’−ジスクシイミジルカルボ
ネートを室温で加え、そのまま１時間撹拌する。反応混
合物を減圧濃縮後クロロホルムに溶解し、有機層を希塩
酸水溶液で洗浄する。有機層を濃縮しヘキサンを加え、
析出した紺色結晶を濾別することで、一般式（１）で示
されるポリメチン系化合物が得られる。原料となるポリ
メチン系色素の中で、式（１０）の化合物ようなモノス
ルホン酸−モノカルボン酸ポリメチン色素が、種々の有
機溶媒への溶解性が高くさらに水溶性も高いため、これ
をもとに一般式（１）で示されるポリメチン系化合物を
製造することが好ましい。
ボキシル基のスクシイミジルエステル化は、ポリメチン
系色素を無水アセトニトリルに溶解後、カルボキシル基
に対し１．２等量のＮ，Ｎ’−ジスクシイミジルカルボ
ネートを室温で加え、そのまま１時間撹拌する。反応混
合物を減圧濃縮後クロロホルムに溶解し、有機層を希塩
酸水溶液で洗浄する。有機層を濃縮しヘキサンを加え、
析出した紺色結晶を濾別することで、一般式（１）で示
されるポリメチン系化合物が得られる。原料となるポリ
メチン系色素の中で、式（１０）の化合物ようなモノス
ルホン酸−モノカルボン酸ポリメチン色素が、種々の有
機溶媒への溶解性が高くさらに水溶性も高いため、これ
をもとに一般式（１）で示されるポリメチン系化合物を
製造することが好ましい。
【００３１】一般式（１）のポリメチン系化合物は、近
赤外光励起蛍光プローブ試薬として用いることができ、
これをアミノ基を有する物質と反応させ、反応生成物の
近赤外部における吸収又は蛍光を測定することで、アミ
ノ基含有物質を測定することができる。即ち、一般式
（１）で示されるポリメチン系化合物のＮ−スクシイミ
ジルカルボネート基、ハロゲン基、イソチオシアネート
基、スルフォニルクロリド基またはアルデヒド基と、測
定対象のアミノ基とを反応させ、生成物質の近赤外部に
おける吸収又は蛍光を測定すればよい。
赤外光励起蛍光プローブ試薬として用いることができ、
これをアミノ基を有する物質と反応させ、反応生成物の
近赤外部における吸収又は蛍光を測定することで、アミ
ノ基含有物質を測定することができる。即ち、一般式
（１）で示されるポリメチン系化合物のＮ−スクシイミ
ジルカルボネート基、ハロゲン基、イソチオシアネート
基、スルフォニルクロリド基またはアルデヒド基と、測
定対象のアミノ基とを反応させ、生成物質の近赤外部に
おける吸収又は蛍光を測定すればよい。
【００３２】このときの反応条件には限定はなく、室温
でポリメチン系化合物とアミノ基含有物質とを混合すれ
ばよい。ポリメチン系化合物は、水の存在下で僅かずつ
ではあるが分解していくため、ジメチルホルムアミドな
ど有機溶媒を用いるとよい。ただし有機溶媒だけではア
ミノ基含有物質が溶解しない場合があるため、水−有機
溶媒の混合溶媒中で反応を行うとよい。好ましくは、混
合溶媒における有機溶媒が６０〜９５％、さらに好まし
くは７０〜９０％である。
でポリメチン系化合物とアミノ基含有物質とを混合すれ
ばよい。ポリメチン系化合物は、水の存在下で僅かずつ
ではあるが分解していくため、ジメチルホルムアミドな
ど有機溶媒を用いるとよい。ただし有機溶媒だけではア
ミノ基含有物質が溶解しない場合があるため、水−有機
溶媒の混合溶媒中で反応を行うとよい。好ましくは、混
合溶媒における有機溶媒が６０〜９５％、さらに好まし
くは７０〜９０％である。
【００３３】ポリメチン系化合物の使用量については、
少ないと反応が遅く、多すぎても無駄になるだけなの
で、反応する１級アミノ基に対しては２等量、２級アミ
ノ基では４等量あれば充分である。ポリメチン系化合物
とアミノ基との反応は非常に速く、約５分でほぼ反応が
終了する。アミノ基含有物質の濃度に依存して反応が直
線的に進行するので、定量分析に利用することができ
る。
少ないと反応が遅く、多すぎても無駄になるだけなの
で、反応する１級アミノ基に対しては２等量、２級アミ
ノ基では４等量あれば充分である。ポリメチン系化合物
とアミノ基との反応は非常に速く、約５分でほぼ反応が
終了する。アミノ基含有物質の濃度に依存して反応が直
線的に進行するので、定量分析に利用することができ
る。
【００３４】測定対象のアミノ基含有物質としては特に
限定はなく、例えば、アミノ酸やその混合物、尿や血漿
など夾雑物質の多量に含まれている体液中のアミノ酸、
ペプチド、タンパクなどの生体高分子が、特別な前処理
なしに分離定量することができる。
限定はなく、例えば、アミノ酸やその混合物、尿や血漿
など夾雑物質の多量に含まれている体液中のアミノ酸、
ペプチド、タンパクなどの生体高分子が、特別な前処理
なしに分離定量することができる。
【００３５】アミノ基含有物質とポリメチン系化合物の
反応生成物の検出には、近赤外部における吸収または蛍
光を測定すればよい。これらの測定には、通常使用され
ている装置を用いればよい。本発明のポリメチン系化合
物を用いた場合の検出感度は、吸光度の測定に於いて
は、数１０ｐｍｏｌまで検出可能であり、さらに近赤外
励起半導体レーザー蛍光検出器を用いた場合には、出力
１２ｍｗに於いて、数１００ａｍｏｌという超高感度な
測定が可能である。
反応生成物の検出には、近赤外部における吸収または蛍
光を測定すればよい。これらの測定には、通常使用され
ている装置を用いればよい。本発明のポリメチン系化合
物を用いた場合の検出感度は、吸光度の測定に於いて
は、数１０ｐｍｏｌまで検出可能であり、さらに近赤外
励起半導体レーザー蛍光検出器を用いた場合には、出力
１２ｍｗに於いて、数１００ａｍｏｌという超高感度な
測定が可能である。
【００３６】
【実施例】以下、本発明を実施例によりさらに詳しく説
明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるもの
ではない。
明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるもの
ではない。
【００３７】（実施例１）Ｎ−スクシイミジル化ポリメチン系化合物の合成 １−１ 式（１０）で示されるモノスルホン酸−モノカルボン酸
置換ポリメチン（ＭＷ＝６８５）１００ｍｇ（０．１５
ｍｍｏｌ）をアセトニトリル２０ｍｌに溶解後、Ｎ，
Ｎ’−ジスクシイミジルカルボネート９６０ｍｇ（０．
４４ｍｍｏｌ）を室温で加え、そのまま室温下１時間撹
拌した。反応混合物を減圧濃縮し、クロロホルム３００
ｍｌに溶解後、０．１Ｎ−ＨＣｌ水溶液で洗浄し、有機
層を無水Ｎａ2 ＳＯ4 乾燥し、続いて約５０ｍｌに減圧
濃縮した。濃縮液にｎ−ヘキサン２００ｍｌを加え析出
した結晶を濾別・減圧乾燥し、式（５）の化合物を１０
２ｍｇ得た（収率９０％）。
置換ポリメチン（ＭＷ＝６８５）１００ｍｇ（０．１５
ｍｍｏｌ）をアセトニトリル２０ｍｌに溶解後、Ｎ，
Ｎ’−ジスクシイミジルカルボネート９６０ｍｇ（０．
４４ｍｍｏｌ）を室温で加え、そのまま室温下１時間撹
拌した。反応混合物を減圧濃縮し、クロロホルム３００
ｍｌに溶解後、０．１Ｎ−ＨＣｌ水溶液で洗浄し、有機
層を無水Ｎａ2 ＳＯ4 乾燥し、続いて約５０ｍｌに減圧
濃縮した。濃縮液にｎ−ヘキサン２００ｍｌを加え析出
した結晶を濾別・減圧乾燥し、式（５）の化合物を１０
２ｍｇ得た（収率９０％）。
【００３８】 ＩＲνｃｍ-1：１７３５（スクシイミジル基） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．５８（ｓ，ＣＯＣＨ
2 ＣＨ2 ＣＯ） ＭＳ：７８５（Ｍ+ ） １−２ 式（８）で示されるジカルボン酸置換ポリメチン（ＭＷ
＝７３０）１００ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）をアセトニ
トリル５０ｍｌに溶解後、Ｎ，Ｎ’−ジスクシイミジル
カルボネート９２３ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を室温で
加え、そのまま室温下、１時間撹拌した。反応混合物を
減圧濃縮し、クロロホルム３００ｍｌに溶解後、０．１
Ｎ−ＨＣｌ水溶液で洗浄し、有機層を無水Ｎａ2 ＳＯ4
乾燥し、続いて約１００ｍｌに減圧濃縮した。濃縮液に
ｎ−ヘキサン２００ｍｌを加え析出した結晶を濾別・減
圧乾燥し、式（３）の化合物を５２ｍｇ得た（収率４０
％）。
2 ＣＨ2 ＣＯ） ＭＳ：７８５（Ｍ+ ） １−２ 式（８）で示されるジカルボン酸置換ポリメチン（ＭＷ
＝７３０）１００ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）をアセトニ
トリル５０ｍｌに溶解後、Ｎ，Ｎ’−ジスクシイミジル
カルボネート９２３ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を室温で
加え、そのまま室温下、１時間撹拌した。反応混合物を
減圧濃縮し、クロロホルム３００ｍｌに溶解後、０．１
Ｎ−ＨＣｌ水溶液で洗浄し、有機層を無水Ｎａ2 ＳＯ4
乾燥し、続いて約１００ｍｌに減圧濃縮した。濃縮液に
ｎ−ヘキサン２００ｍｌを加え析出した結晶を濾別・減
圧乾燥し、式（３）の化合物を５２ｍｇ得た（収率４０
％）。
【００３９】 ＩＲνｃｍ-1：１７３５（スクシイミジル基） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．５８（ｓ，ＣＯＣＨ
2 ＣＨ2 ＣＯ） １−３ 式（９）で示されるモノカルボン酸置換ポリメチン（Ｍ
Ｗ＝５８９）１００ｍｇ（０．１７ｍｍｏｌ）をアセト
ニトリル１００ｍｌに溶解後、Ｎ，Ｎ’−ジスクシイミ
ジルカルボネート１．１２ｇ（０．５１ｍｍｏｌ）を室
温で加え、そのまま室温下１時間撹拌した。反応混合物
を減圧濃縮し、クロロホルム３００ｍｌに溶解後、０．
１Ｎ−ＨＣｌ水溶液で洗浄し、有機層を無水Ｎａ2 ＳＯ
4 乾燥し、続いて、約１００ｍｌに減圧濃縮した。濃縮
液にｎ−ヘキサン２００ｍｌを加え析出した結晶を濾別
・減圧乾燥し、式（４）の化合物を７８ｍｇ得た（収率
７０％）。
2 ＣＨ2 ＣＯ） １−３ 式（９）で示されるモノカルボン酸置換ポリメチン（Ｍ
Ｗ＝５８９）１００ｍｇ（０．１７ｍｍｏｌ）をアセト
ニトリル１００ｍｌに溶解後、Ｎ，Ｎ’−ジスクシイミ
ジルカルボネート１．１２ｇ（０．５１ｍｍｏｌ）を室
温で加え、そのまま室温下１時間撹拌した。反応混合物
を減圧濃縮し、クロロホルム３００ｍｌに溶解後、０．
１Ｎ−ＨＣｌ水溶液で洗浄し、有機層を無水Ｎａ2 ＳＯ
4 乾燥し、続いて、約１００ｍｌに減圧濃縮した。濃縮
液にｎ−ヘキサン２００ｍｌを加え析出した結晶を濾別
・減圧乾燥し、式（４）の化合物を７８ｍｇ得た（収率
７０％）。
【００４０】 ＩＲνｃｍ-1：１７３５（スクシイミジル基） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．５８（ｓ，ＣＯＣＨ
2 ＣＨ2 ＣＯ） （実施例２）アミノ酸との反応 ２−１ グリシン０．０１ｇ（０．１３ｍｍｏｌ）水溶液２００
μｌに５ｍＭホウ酸緩衝液（ｐＨ９．５）２００μｌを
加え、さらにジメチルホルムアミド７５０μｌを加えた
後、式（５）で示されるスルホン酸置換ポリメチン−Ｎ
−スクシイミジルカルボネート３６６ｍｇ（０．３９ｍ
ｏｌ）のＤＭＦ溶液８００μｌを室温で加え、そのまま
３０分撹拌した。反応混合物をＨＰＬＣ（ＴＳＫｇｅｌ
ＯＤＳ８０Ｔｍ分取用）により精製し、グリシン−ポリ
メチン誘導体８０ｍｇを得た（収率８４％）。
2 ＣＨ2 ＣＯ） （実施例２）アミノ酸との反応 ２−１ グリシン０．０１ｇ（０．１３ｍｍｏｌ）水溶液２００
μｌに５ｍＭホウ酸緩衝液（ｐＨ９．５）２００μｌを
加え、さらにジメチルホルムアミド７５０μｌを加えた
後、式（５）で示されるスルホン酸置換ポリメチン−Ｎ
−スクシイミジルカルボネート３６６ｍｇ（０．３９ｍ
ｏｌ）のＤＭＦ溶液８００μｌを室温で加え、そのまま
３０分撹拌した。反応混合物をＨＰＬＣ（ＴＳＫｇｅｌ
ＯＤＳ８０Ｔｍ分取用）により精製し、グリシン−ポリ
メチン誘導体８０ｍｇを得た（収率８４％）。
【００４１】ＩＲνｃｍ-1：１７６５（ＣＯＯＨ），１
６８０（ＣＯＮＨ） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：３．８５（ＮＨ−ＣＨ2
ＣＯＯＨ） ＭＳ：７４５（Ｍ+ ） ２−２ ２−１と同様にして、ただしセリンと式（５）の化合物
とを等量用いて反応を行い、このとき反応溶媒中のＤＭ
Ｆ濃度を変化させて、反応収率に及ぼす影響を調べた。
結果を図１に示す。図中、○はセリンと前記式（５）の
化合物との反応収率を、●は前記式（５）の化合物の加
水分解物の収率を表す。図からも明らかなように、ＤＭ
Ｆ濃度が高いほど、反応収率が高く加水分解物が少ない
ことがわかる。
６８０（ＣＯＮＨ） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：３．８５（ＮＨ−ＣＨ2
ＣＯＯＨ） ＭＳ：７４５（Ｍ+ ） ２−２ ２−１と同様にして、ただしセリンと式（５）の化合物
とを等量用いて反応を行い、このとき反応溶媒中のＤＭ
Ｆ濃度を変化させて、反応収率に及ぼす影響を調べた。
結果を図１に示す。図中、○はセリンと前記式（５）の
化合物との反応収率を、●は前記式（５）の化合物の加
水分解物の収率を表す。図からも明らかなように、ＤＭ
Ｆ濃度が高いほど、反応収率が高く加水分解物が少ない
ことがわかる。
【００４２】２−３ ２−１と同様にして、ただしアミノ酸としてセリン又は
プロリンを用いて、反応に用いるポリメチン系化合物の
量を変化させて反応収率に及ぼす影響を調べた。結果を
図２に示す。図中○はプロリンを、●はセリンを用いた
ときの反応収率を表す。図からも明らかなように、プロ
リンに対しては４等量以上、セリンに対しては２等量以
上のポリメチン系化合物を用いれば、反応は平衡に達す
る。これは、それぞれのアミノ基の１級と２級の違いに
よるものと考えられる。
プロリンを用いて、反応に用いるポリメチン系化合物の
量を変化させて反応収率に及ぼす影響を調べた。結果を
図２に示す。図中○はプロリンを、●はセリンを用いた
ときの反応収率を表す。図からも明らかなように、プロ
リンに対しては４等量以上、セリンに対しては２等量以
上のポリメチン系化合物を用いれば、反応は平衡に達す
る。これは、それぞれのアミノ基の１級と２級の違いに
よるものと考えられる。
【００４３】２−４ ２−１と同様にして、ただしアミノ酸としてセリンを用
い、式（５）の化合物を３等量反応させたときの、反応
時間と収率の関係を調べた。結果を図３に示す。図から
も明らかなように、反応は約５分で充分に進行してお
り、反応速度が非常に速いことが分かる。
い、式（５）の化合物を３等量反応させたときの、反応
時間と収率の関係を調べた。結果を図３に示す。図から
も明らかなように、反応は約５分で充分に進行してお
り、反応速度が非常に速いことが分かる。
【００４４】２−５ ２−１と同様にして、ただしアミノ酸として各種濃度の
セリンを用いて反応させたときの、セリン濃度とＨＰＬ
Ｃのピーク面積との関係を調べた。結果を図４に示す。
図からも明らかなように、セリン濃度とＨＰＬＣのピー
ク面積とは直線関係にあり、本反応は定量分析に応用で
きることが示された。
セリンを用いて反応させたときの、セリン濃度とＨＰＬ
Ｃのピーク面積との関係を調べた。結果を図４に示す。
図からも明らかなように、セリン濃度とＨＰＬＣのピー
ク面積とは直線関係にあり、本反応は定量分析に応用で
きることが示された。
【００４５】（実施例３）アミノ酸混合物との反応および分析 アミノ酸混合物（Ｇｌｙ，Ａｌａ，Ｖａｌ，Ｌｅｕ，Ｉ
ｌｅｕ，Ａｓｐ，Ｇｌｕ，Ｐｈｅ，Ｔｒｐ，Ｓｅｒ，Ｔ
ｈｒ，Ｌｙｓ，Ａｒｇ，Ｈｉｓ，Ｍｅｔ、各１０μｇ）
１０μｌに、５ｍＭホウ酸緩衝液（ｐＨ９．５）２００
μｌ，ＤＭＦ３００μｌを加え、式（５）の化合物のＤ
ＭＦ溶液（０．８ｍｇ／ｍｌ）５００μｌを加え、室温
で３０分撹拌した。反応混合物２０μｌをＨＰＬＣにイ
ンジェクションし、反応の進行を確認した。
ｌｅｕ，Ａｓｐ，Ｇｌｕ，Ｐｈｅ，Ｔｒｐ，Ｓｅｒ，Ｔ
ｈｒ，Ｌｙｓ，Ａｒｇ，Ｈｉｓ，Ｍｅｔ、各１０μｇ）
１０μｌに、５ｍＭホウ酸緩衝液（ｐＨ９．５）２００
μｌ，ＤＭＦ３００μｌを加え、式（５）の化合物のＤ
ＭＦ溶液（０．８ｍｇ／ｍｌ）５００μｌを加え、室温
で３０分撹拌した。反応混合物２０μｌをＨＰＬＣにイ
ンジェクションし、反応の進行を確認した。
【００４６】分離条件は以下の通りである。
【００４７】カラム（ＴＳＫｇｅｌＯＤＳ８０Ｔｍ
４．６ｍｍ×１５ｃｍ） 移動相（ａ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−４０
％アセトニトリル ｂ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−６０％アセト
ニトリル ａ）からｂ）への２５分リニアグラジエント 流速（１．０ｍｌ／ｍｉｎ．）， 検出器（東ソー製、ＵＶ８０１０ ７００ｎｍ） 図５にそのクロマトグラムを示す。図中、それぞれ１：
Ｈｉｓ，２：Ａｒｇ，３：Ｓｅｒ，４：Ａｓｐ，Ｇｌ
ｕ，５：Ｔｈｒ，６：Ｇｌｙ，７：Ａｌａ，８：Ｍｅ
ｔ，Ｖａｌ，９：Ｉｌｅ，Ｌｅｕ，１０：Ｔｒｐ，１
１：Ｐｈｅ，１２：Ｌｙｓの反応生成物である。図から
明らかなように、アミノ酸の一斉分析が可能で、低バッ
クグランドで高感度な分析が可能であった。
４．６ｍｍ×１５ｃｍ） 移動相（ａ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−４０
％アセトニトリル ｂ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−６０％アセト
ニトリル ａ）からｂ）への２５分リニアグラジエント 流速（１．０ｍｌ／ｍｉｎ．）， 検出器（東ソー製、ＵＶ８０１０ ７００ｎｍ） 図５にそのクロマトグラムを示す。図中、それぞれ１：
Ｈｉｓ，２：Ａｒｇ，３：Ｓｅｒ，４：Ａｓｐ，Ｇｌ
ｕ，５：Ｔｈｒ，６：Ｇｌｙ，７：Ａｌａ，８：Ｍｅ
ｔ，Ｖａｌ，９：Ｉｌｅ，Ｌｅｕ，１０：Ｔｒｐ，１
１：Ｐｈｅ，１２：Ｌｙｓの反応生成物である。図から
明らかなように、アミノ酸の一斉分析が可能で、低バッ
クグランドで高感度な分析が可能であった。
【００４８】（実施例４）血漿の分析 血漿０．５ｍｌにＤＭＦ１．５ｍｌを加え、析出した沈
殿物を超遠心にかけ（２０００ｐｍｒ，１０分）、その
上澄液１０μｌに５ｍＭホウ酸緩衝液（ｐＨ９．５）２
００μｌ、ＤＭＦ３００μｌを加え、さらに式（５）の
化合物のＤＭＦ溶液（０．８ｍｇ／ｍｌ）５００μｌを
加え、室温３０分撹拌した。反応混合物２０μｌをＨＰ
ＬＣにインジェクションし、反応の進行を確認した。
殿物を超遠心にかけ（２０００ｐｍｒ，１０分）、その
上澄液１０μｌに５ｍＭホウ酸緩衝液（ｐＨ９．５）２
００μｌ、ＤＭＦ３００μｌを加え、さらに式（５）の
化合物のＤＭＦ溶液（０．８ｍｇ／ｍｌ）５００μｌを
加え、室温３０分撹拌した。反応混合物２０μｌをＨＰ
ＬＣにインジェクションし、反応の進行を確認した。
【００４９】分離条件は以下の通りである。
【００５０】カラム（ＴＳＫｇｅｌＯＤＳ８０Ｔｍ
４．６ｍｍ×１５ｃｍ） 移動相（ａ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−４０
％アセトニトリル ｂ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−６０％アセト
ニトリル ａ）からｂ）への２５分リニアグラジエント 流速（１．０ｍｌ／ｍｉｎ．）， 図６にそのクロマトグラムを示す。図から明らかなよう
に、多量の夾雑物質が存在する血漿においても、Ｇｌ
ｙ，Ａｌａ，Ｖａｌなどのアミノ酸の同時分析が可能
で、低バックグランドで高感度な分析が可能であった。
４．６ｍｍ×１５ｃｍ） 移動相（ａ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−４０
％アセトニトリル ｂ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−６０％アセト
ニトリル ａ）からｂ）への２５分リニアグラジエント 流速（１．０ｍｌ／ｍｉｎ．）， 図６にそのクロマトグラムを示す。図から明らかなよう
に、多量の夾雑物質が存在する血漿においても、Ｇｌ
ｙ，Ａｌａ，Ｖａｌなどのアミノ酸の同時分析が可能
で、低バックグランドで高感度な分析が可能であった。
【００５１】（実施例５）尿の分析 尿０．５ｍｌにＤＭＦ０．５ｍｌ、５ｍＭホウ酸緩衝液
（ｐＨ９．５）１９ｍｌを加えた２０倍希尺尿２００μ
ｌに、ＤＭＦ３００μｌ、式（５）の化合物のＤＭＦ溶
液（０．８ｍｇ／ｍｌ）５００μｌを加え、室温で３０
分撹拌した。反応混合物２０μｌをＨＰＬＣにインジェ
クションし、反応の進行を確認した。
（ｐＨ９．５）１９ｍｌを加えた２０倍希尺尿２００μ
ｌに、ＤＭＦ３００μｌ、式（５）の化合物のＤＭＦ溶
液（０．８ｍｇ／ｍｌ）５００μｌを加え、室温で３０
分撹拌した。反応混合物２０μｌをＨＰＬＣにインジェ
クションし、反応の進行を確認した。
【００５２】分離条件以下の通りである。
【００５３】カラム（ＴＳＫｇｅｌＯＤＳ８０Ｔｍ
４．６ｍｍ×１５ｃｍ） 移動相（ａ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−４０
％アセトニトリル ｂ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−６０％アセト
ニトリル ａ）からｂ）への２５分リニアグラジエント 流速（１．０ｍｌ／ｍｉｎ．）， 検出器（東ソー製、ＵＷ８０１０ ７００ｎｍ） 図７にそのクロマトグラムを示す。図から明らかなよう
に、多量の夾雑物質が存在する尿においても、Ｔｈｒ，
Ｇｌｙ，Ａｌａなどのアミノ酸の同時分析が可能で、低
バックグランドで高感度な分析が可能であった。
４．６ｍｍ×１５ｃｍ） 移動相（ａ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−４０
％アセトニトリル ｂ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−６０％アセト
ニトリル ａ）からｂ）への２５分リニアグラジエント 流速（１．０ｍｌ／ｍｉｎ．）， 検出器（東ソー製、ＵＷ８０１０ ７００ｎｍ） 図７にそのクロマトグラムを示す。図から明らかなよう
に、多量の夾雑物質が存在する尿においても、Ｔｈｒ，
Ｇｌｙ，Ａｌａなどのアミノ酸の同時分析が可能で、低
バックグランドで高感度な分析が可能であった。
【００５４】（実施例６）生体高分子との反応 生体高分子としてウシ血清アルブミン１ｍｇ水溶液２０
０μｌに５ｍＭホウ酸緩衝液（ｐＨ９．５）２００μｌ
を加え、さらにジメチルホルムアミド３００μｌを加え
た後、３３μｇの式（５）の化合物のＤＭＦ溶液（３０
０μｌ）を室温で加え、そのまま３０分撹拌した。反応
混合物を直接ＨＰＬＣ分析することにより、反応の進行
を確認した。
０μｌに５ｍＭホウ酸緩衝液（ｐＨ９．５）２００μｌ
を加え、さらにジメチルホルムアミド３００μｌを加え
た後、３３μｇの式（５）の化合物のＤＭＦ溶液（３０
０μｌ）を室温で加え、そのまま３０分撹拌した。反応
混合物を直接ＨＰＬＣ分析することにより、反応の進行
を確認した。
【００５５】分離条件は以下の通りである。
【００５６】カラム（ＴＳＫｇｅｌＧ３０００ＳＷXL） 移動相（５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）：ＣＨ3
ＣＮ＝４：１） 流速（１．０ｍｌ／ｍｉｎ）， 検出器（東ソー製、ＵＷ８０１０ ７００ｎｍ） 図８にそのクロマトグラムを示す。図中、矢印の位置に
ウシ血清アルブミンの反応生成物が検出された。図から
明らかなように、ウシ血清アルブミンなどの生体高分子
においても分析が可能で、低バックグランドで高感度な
分析が可能であった。
ＣＮ＝４：１） 流速（１．０ｍｌ／ｍｉｎ）， 検出器（東ソー製、ＵＷ８０１０ ７００ｎｍ） 図８にそのクロマトグラムを示す。図中、矢印の位置に
ウシ血清アルブミンの反応生成物が検出された。図から
明らかなように、ウシ血清アルブミンなどの生体高分子
においても分析が可能で、低バックグランドで高感度な
分析が可能であった。
【００５７】（実施例７）検出限界 実施例２−１で得たグリシン−ポリメチン誘導体、およ
び実施例２−１と同様にして得たセリン−ポリメチン誘
導体、アラニン−ポリメチン誘導体をＨＰＬＣ分析し、
半導体レーザー励起蛍光検出器（出力１２ｍＷ）を用い
て検出限界を算出した。分離条件は以下の通りである。
び実施例２−１と同様にして得たセリン−ポリメチン誘
導体、アラニン−ポリメチン誘導体をＨＰＬＣ分析し、
半導体レーザー励起蛍光検出器（出力１２ｍＷ）を用い
て検出限界を算出した。分離条件は以下の通りである。
【００５８】カラム（ＴＳＫｇｅｌＯＤＳ８０Ｔｍ
４．６ｍｍ×１５ｃｍ） 移動相（ａ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−５５
％アセトニトリル 流速（１．０ｍｌ／ｍｉｎ．）、注
入量１０μｌ 図９にその結果を示す。図中、○はセリン−ポリメチン
誘導体、△はグリシン−ポリメチン誘導体、□はアラニ
ン−ポリメチン誘導体を示す。図からも明らかなよう
に、低バックグランドで高感度な分析が可能であり、さ
らに半導体レーザー励起蛍光検出器によって超高感度分
析が可能となった。
４．６ｍｍ×１５ｃｍ） 移動相（ａ）５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ２．５）−５５
％アセトニトリル 流速（１．０ｍｌ／ｍｉｎ．）、注
入量１０μｌ 図９にその結果を示す。図中、○はセリン−ポリメチン
誘導体、△はグリシン−ポリメチン誘導体、□はアラニ
ン−ポリメチン誘導体を示す。図からも明らかなよう
に、低バックグランドで高感度な分析が可能であり、さ
らに半導体レーザー励起蛍光検出器によって超高感度分
析が可能となった。
【００５９】
【発明の効果】以上の説明から明らかなように、本発明
のポリメチン系化合物はアミノ基を有する物質の測定に
利用できる。また特別な前処理なしに生体試料の分析に
応用でき、高い検出感度を持ち、定量分析にも極めて有
効である。
のポリメチン系化合物はアミノ基を有する物質の測定に
利用できる。また特別な前処理なしに生体試料の分析に
応用でき、高い検出感度を持ち、定量分析にも極めて有
効である。
【図１】実施例２−２における溶媒組成と収率との関係
を示す図である。
を示す図である。
【図２】実施例２−３におけるポリメチン系化合物量と
反応収率との関係を示す図である。
反応収率との関係を示す図である。
【図３】実施例２−４における反応時間とＨＰＬＣのピ
ーク面積との関係を示す図である。
ーク面積との関係を示す図である。
【図４】実施例２−５における試料濃度とＨＰＬＣのピ
ーク面積との関係を示す図である。
ーク面積との関係を示す図である。
【図５】実施例３におけるアミノ酸混合物の分析のクロ
マトグラムを示す図である。
マトグラムを示す図である。
【図６】実施例４における血漿中のアミノ酸の分析のク
ロマトグラムを示す図である。
ロマトグラムを示す図である。
【図７】実施例５における尿のアミノ酸の分析のクロマ
トグラムを示す図である。
トグラムを示す図である。
【図８】実施例６におけるウシ血清アルブミンの分析の
クロマトグラムを示す図である。
クロマトグラムを示す図である。
【図９】実施例７におけるＨＰＬＣへの負荷量とピーク
高さを示す図である。
高さを示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０９Ｂ 23/00 Ｌ Ｇ０１Ｎ 21/35 Ｚ 9118−2Ｊ 21/64 Ｚ 21/78 (72)発明者 川口 成治 神奈川県綾瀬市早川2743−１ 東ソー株式 会社東京研究センター科学計測事業部開発 部内 (72)発明者 橋本 佳巳 神奈川県綾瀬市早川2743−１ 東ソー株式 会社東京研究センター科学計測事業部開発 部内
Claims (3)
- 【請求項１】 下記一般式（１）で示されることを特徴
とする、ポリメチン系化合物 【化１】 （式中ｎ，ｎ’はそれぞれ１〜１８の自然数、Ｒ1 は水
素、スルホン酸基、Ｎ−スクシイミジルカルボネート
基、スルホニルクロリド基のいずれかを表す。Ｒ2はＮ
−スクシイミジルカルボネート基、ハロゲン基、イソチ
オシアネート基、スルフォニルクロリド基、アルデヒド
基のいずれかを表す。Ａｒは、置換していてもよいフェ
ニル基、α−ナフチル基、β−ナフチル基のいずれかを
表す。Ｘは、酸素、イオウ、ジメチルメチレン基のいず
れかを表す。）。 - 【請求項２】 請求項１に記載のポリメチン系化合物か
らなることを特徴とする、近赤外光励起蛍光プローブ試
薬。 - 【請求項３】 請求項２に記載の試薬をアミノ基を有す
る物質と反応させ、反応生成物の近赤外部に於ける吸収
または蛍光を測定することを特徴とする、アミノ基含有
物質の測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14146992A JPH07145148A (ja) | 1992-06-02 | 1992-06-02 | ポリメチン系化合物およびそれを用いる測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14146992A JPH07145148A (ja) | 1992-06-02 | 1992-06-02 | ポリメチン系化合物およびそれを用いる測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07145148A true JPH07145148A (ja) | 1995-06-06 |
Family
ID=15292613
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14146992A Pending JPH07145148A (ja) | 1992-06-02 | 1992-06-02 | ポリメチン系化合物およびそれを用いる測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07145148A (ja) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998047538A2 (de) * | 1997-04-23 | 1998-10-29 | Institut für Diagnostikforschung GmbH an der Freien Universität Berlin | Säurelabile und enzymatisch spaltbare farbstoffkonstrukte zur diagnostik mit nahinfrarotlicht und zur therapie |
| US6027709A (en) * | 1997-01-10 | 2000-02-22 | Li-Cor Inc. | Fluorescent cyanine dyes |
| WO2001021624A1 (fr) * | 1999-09-20 | 2001-03-29 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Composes destines au marquage par fluorescence |
| JP2001288197A (ja) * | 2000-04-10 | 2001-10-16 | Fuji Photo Film Co Ltd | 蛍光ヌクレオチド |
| JP2007155548A (ja) * | 2005-12-06 | 2007-06-21 | Hitachi Maxell Ltd | 赤外蛍光体を用いた定量方法 |
| JP2010195764A (ja) * | 2009-01-30 | 2010-09-09 | Canon Inc | 新規化合物、該新規化合物を用いたプローブ及び該新規化合物もしくは該プローブを用いた蛍光イメージング用造影剤 |
| JP2015094594A (ja) * | 2013-11-08 | 2015-05-18 | 東洋紡株式会社 | Ｖｏｃ対策材のアルデヒド吸着活性を判定するための判定用組成物、及びｖｏｃ対策材のアルデヒド吸着活性を判定する方法 |
-
1992
- 1992-06-02 JP JP14146992A patent/JPH07145148A/ja active Pending
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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