JPH06505049A - 高活性セルラーゼ含有コンパクト洗剤組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 高活性セルラーゼ含有コンパクト洗剤組成物技　術　分　野 本発明は“コンパクト”であるセルラーゼ含有顆粒洗剤組成物に関し、即ちそれ らは従来の洗剤組成物と比べて比較的高い密度であって、比較的少量の無機充填 塩を含有するものである。この洗剤組成物において、セルラーゼは本明細書に記 載されたＣ　１４　ＣＭ　Ｃ法により定義される高活性のセルラーゼである。好 ましくはセルラーゼは特定の単一成分のエンドグルカナーゼである。

発明の背景 良好なりリーニング性質だけでなく、良好な布帛柔軟化効能及び他の布帛ケア効 果も示す洗剤組成物が必要とされていることは当業界で十分に認められている。

布帛の織物クリーニング及び手ざわりの悪さを改める薬品としてのセルロース分 解酵素、即ちセルラーゼの効力は既に認識されている。英国特許Ａ第２，０７５ ，０２８号、英国特許Ａ第２．０９５，２７５号及び英国特許／ｌ！ｆ２，０９ ４．８２６号明細書は改良されたクリーニング能を有するセルラーゼ含有洗剤組 成物について開示している；英国特許Ａ第１．３６８，５９９号明細書は綿含有 布帛の手ざわりの悪さを改めるためのセルラーゼの使用について開示している； 米国特許第４．４３５゜３０７号明細書は手ざわりの悪さを改め洗剤添加剤とし てヒューミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ　１ｎｓｏｌｅｎｓ）に由来 するセルロース分解酵素とＡＣＸ　Ｉと表示されるその部分の使用について開示 している。

欧州特許Ａ篇０２６９１６８号明細書は緩アルカリｐＨ範囲で処方されて、布帛 クリーニング、布帛柔軟化及び布帛ケア効能を組合されて示すセルラーゼを含有 した最適な洗剤組成物について開示している。

国際出願第８９１０９２５９号明細書では、高エンドアーゼ活性とセルロースに 対する親和性を有するエンドグルカナーゼ成分とを含んでなる綿含有布帛の手ざ わりを改めるのに有用なセルラーゼ製剤が開示されている。

しかしながら、セルラーゼの実用のための開発は上記従来の技術文書で開示され たセルラーゼ製剤が複雑な混合物であって、そのうちある部分のみが布帛ケア関 係で有効であるという事実により遅れており、このため洗剤工業でセルラーゼの コスト上効率的な工業的生産を行うことは困難であったが、布帛で望ましい効果 を得るためには、多量のセルラーゼの製造が必要となるであろう。

セルラーゼの生産に関する改良も、洗剤において用いられる場合には十分ではな いとわかったことが多い。セルラーゼを洗剤に用いる際のセルラーゼの選択の基 準の確立は、欧州特許Ａ第３５００９８号明細書で開示された０　１４　ＣＭＣ 法で可能となった。固定された放射線標識カルボキシメチルセルロースを最少で １０％除去するものは、高活性のセルラーゼであることがわかった。本発明によ る高活性の定義に属する好ましい群のセルラーゼは１９９０年５月５日付で出願 されたデンマーク特許出願第１１５９／９０号明細書で開示されている。ヒュー ミコラ・インソレンスＤ　Ｍ　１８００に由来した部分精製４３ｋＤセルラーゼ に対するモノクローナル抗体と免疫反応する均一エンドグルカナーゼ成分から本 質的になる、セルラーゼ製剤が開示されている。

セルラーゼのこの特定エンドグルカナーゼ成分がセルロースを含む物質の処理に 有利であるという発見から、例えば組換えＤＮＡ技術を用いることでセルラーゼ をコスト上効率的に生産させて、少量のセルラーゼ製剤を用いるだけで布帛で望 ましい効果を得ることができるようになる。

他方、新世代の洗剤組成物が現在市販され、これは“コンパクト洗剤”として最 も良く表現できるが、それらには“ウルトラ”、“スブラ”、“マイクロ”・・ ・のような様々な商品名が付されている。このような洗剤組成物の特徴点は、従 来の洗剤組成物と比べてそれらの比較的高い密度と、著しく少量の“コンパクト ”洗剤組成物を用いることで従来の洗剤組成物と同効力を発揮する能力である。

この特徴点は組成に関して比較的少量の無機充填塩によりまずもたらされる。こ のような“コンパクト”洗剤組成物の効率のよさは、前洗浄サイクルを省略して 、主洗浄サイクルの開始時に洗濯機のドラムに直接取付けられた分散及び拡散装 置を用いることにより最も良く発揮される。

本発明の目的は、比較的高い密度を有しかつ少量の無機充填塩を含有してなる最 良のセルラーゼ効力を示す洗剤組成物をコンパクトな形で提供することである。

欧州特許Ａ第３８１３９７号明細書では、特にリパーゼの酵素効能に対する低イ オン強度の効果が開示されている。

しかしながら、本発明の選択酵素におけるコンパクトマトリックスの効果は、欧 州特許Ａ第３８１３９７号明細書で開示されたような最先端セルラーゼから予想 できる場合よりもかなり高いことが意外にも見出された。

本発明のもう１つの目的は主洗浄サイクルにおいて少ない量の本洗剤組成物を利 用した洗濯機による布帛処理方法を提供することである。

発明の要旨 本発明は界面活性剤、ビルグー、酵素及び所望であれば慣用されている添加剤を 含有してなるものであって、この酵素が洗濯試験溶液中においてセルラーゼタン ７ずり質２５Ｘ１０　重量％で、Ｃ１４ＣＭ　Ｃ法に従い少くとも１０％の固定 放射線標識カルボキシメチルセルロースを除去するセルラーゼ製剤からなること で特徴付けられる顆粒洗剤組成物に関する。

好ましくは、セルラーゼ化合物は、ヒューミコラ・インソレンスＤＳＭ１８００ に由来する部分精製された約−４３ｋＤセルラーゼに対するモノクローナル抗体 と免疫反応するか又は上記−４３ｋＤエンドグルカナーゼに相同的である均一エ ンドグルカナーゼ成分から本質的になるものである。

発明の詳細な説明 本洗剤組成物は顆粒形であり、その密度が従来の洗剤組成物の密度よりも高いこ とを特徴としている。本組成物の密度は、２０℃で測定した場合に、５５０〜９ ５０ｇ／ｌ、好ましくは６５０〜８５０ｇ／ｌの範囲である。

ここで組成物の“コンパクト”形は組成に関して無機充填塩の量によりまずもた らされるものである。無機充填塩は粉末形における洗剤組成物の慣用的成分であ るが、従来の洗剤組成物において充填塩は実質上、典型的には全組成物の１７〜 ３５重量％で存在する。

本組成物において、充填塩は全組成物の１５％、好ましくは１０％、を超えず、 最も好ましくは組成物の５重量％を超えない量で存在する。

本組成物における無機充填塩は、硫酸及び塩化物のアルカリ及びアルカリ土類金 属塩から選択される。

好ましい充填塩は硫酸ナトリウムである。

界面活性剤 広範囲の界面活性剤が洗剤組成物で使用できる。アニオン系、ノニオン系、両性 及び双極性のもののリストと、これら界面活性剤の具体例は１９７２年５月２３ 日付でＮｏｒｒ口に発行された米国特許第３．６６４，９６１号明細書に示され ている。

複数のアニオン系界面活性剤の混合物が好ましく、特に重量比でスルホネート及 びスルフェート界面活性剤を５＝１〜１：２、好ましくは３：１〜２：３、更に 好ましくは３：１〜１：１で含む混合物が適している。好ましいスルホネート類 としてはアルキル基中に９〜１５、特に１１〜１３の炭素原子を有するアルキル ベンゼンスルホネート類と、脂肪酸がＣ−Ｃ脂肪源、好ましくはＣ−Ｃｔａ脂肪 源に由来するα−スルホン化メチル脂肪酸エステルとがある。各場合においてカ チオンはアルカリ金属、好ましくはナトリウムである。好ましいスルフェート界 面活性剤は（アルキル基中に１０〜２０．好ましくは１０〜１６、の炭素原子と １〜６の平均エトキシル化度を有するエトキシサルフェート類と場合により混合 された）アルキル基中に１２〜１８の炭素原子を有するアルキルスルフェート類 である。ここで好ましいアルキルスルフェート類の例は獣脂アルキルスルフェー ト、ココナツアルキルスルフェート及びＣアルキルスルフェート類である。各場 合におけるカチオンもアルカリ金属カチオン、好ましくはナトリウムである。

本発明で有用なノニオン系界面活性剤の１の群は８〜１７、好ましくは９．５〜 １３．５、更に好ましくは１０〜１２．５の範囲で平均親水性−親油性バランス （ＨＬＢ）を有する界面活性剤を与えるエチレンオキシドと疎水性部分との縮合 物である。疎水性（親油性）部分は性質上脂肪族でも又は芳香族であってもよく 、いずれか特定の疎水性基と縮合されたポリオキシエチレン基の長さは親水性及 び疎水性要素間で望ましいバランス度を有する水溶性化合物を得る上で容易に調 節できる。

このタイプの特に好ましいノニオン系界面活性剤はエチレンオキシド３ル８ ル／アルコールモルを有するＣ　−Ｃ　−級アルコール頭である。

ノニオン系界面活性剤のもう１つの群は下記一般式のアルキルポリグルコシド化 合物からなる：ＲＯ　（ＣｎＨ２，Ｏ）　ｔＺｘ 上記式中２はグルコースに由来する部分である：Ｒは１２〜１８の炭素原子を有 する飽和疎水性アルキル基である；ｔは０〜１０、ｎは２又は３、Ｘは１．３〜 ４である；その化合物は１０％以下の未反応脂肪アルコール及び５０％以下の短 鎖アルキルポリグルコシドを含む。

このタイプの化合物及び洗剤中それらの使用は欧州特許Ｂ第００７００７７号、 第００７５９９６号及び第０Ｏ９４１１８号明細書で開示されている。

ノニオン系界面活性剤として下記式のポリヒドロキシ脂肪酸アミド界面活性剤も 適切である：（上記式中Ｒ　はＨ，　Ｃ　ヒドロカルビル、２−ヒト０キシエチ ル、２−ヒドロキシプロピル又はそれらの混合物である；Ｒ２はＣ　ヒドロカル ビルである；Ｚは直鎖ヒドロカルピル鎖をその鎖に直接結合された少くとも３つ のヒドロキシルと共に有するポリヒドロキシヒドロカルビル又はそのアルコキシ ル化誘導体である）好ましくは、Ｒ１はメチルであり、Ｒ２はココナツアルキル のような直ｌＩＣ　−　アルキルもしくはアルケニｌ　ｔ５ ル鎖又はそれらの混合物であり、Ｚは還元アミノ化反応においてグルコース、フ ルクトース、マルトース、ラクトースのような還元種に由来する。

もう１つの群の界面活性剤はアミンオキシド類のような半極性界面活性剤である 。適切なアミンオキシド類は残留Ｎ位がメチル、ヒドロキシエチル又はヒトミキ シプロピル基で置換されたモノＣーＣ，好ましくはＣ１Ｇ−ＣＩ４°Ｎ−アルキ ル又はアルケニルアミンオキシド類とプロピレン−１，３−ジアミンジオキシド 類から選択される。

もう１つの群の界面活性剤はポリアミンベース種のような両性界面活性剤である 。

カチオン系界面活性剤も洗剤組成物に使用でき、適切な四級アンモニウム界面活 性剤は残留Ｎ位がメチル、ヒドロキシエチル又はヒドロキシプロピル基で置換さ れたモノＣ−Ｃ好ましくはＣ−ＣＮ−アルキル又はアルケニルアンモニウム界面 活性剤から選択される。

混合タイプの界面活性剤、更に具体的にはアニオン−ノニオン系及びアニオン− ノニオン−カチオン系混合物が好ましい。特に好ましい混合物は英国特許第２０ ４０９８７号及び欧州公開出願第００８７９１４号明細書に記載されている。洗 剤組成物は１〜７０重量％の界面活性剤を含むことができるが、但し通常は、界 面活性剤をこの組成物中重量で１〜３０％、更に好ましくは１０〜２５％の量で 含む。

ビルダー 典型的には洗剤組成物は、その１０〜６０％の量のビルグー物質を含む。ここで 組成物はリン酸含有ビルダーを含まないか又は実質上含まず（本明細書において 実質上含まないとは全洗剤ビルグー系の１％以下であることを意味する）、ここ でビルグー系は水溶性ビルダー、非水溶性ビルグー又はそれらの混合物からなる 。

非水溶性ビルグーとは無機イオン交換物質、通常無機水和アルミノケイ酸塩物質 、更に具体的には水和ゼオライトＡ、Ｘ、Ｂ又はＨ３のような水和合成ゼオライ トである。

好ましいアルミノケイ酸塩イオン交換物質は下記の単位式を有する： Ｍ！　（（ＡＩＯ’　）ｒ（ＳｉＯ）　）　ｌｌＩ２０２　２ｒ 上記式中Ｍはカルシウム交換カチオンである；２及びｙは少くとも６であり、２ 対ｙのモル比は１．０〜０．５である；Ｘは少くとも５、好ましくは７．５〜２ ７６、更に好ましくは１０〜２６４である。アルミノケイ酸塩物質は水和形であ り、好ましくは１０〜２８％、更に好ましくは１８〜２２％の水を含有する結晶 である。

上記アルミノケイ酸塩イオン交換物質は０．１〜１０μｍ、好ましくは０．２〜 ４μｍの粒径で更に特徴付けられる。ここで“粒径”という用語は、例えば走査 型電子顕微鏡を利用する顕微鏡観察のような慣用的分析技術で調べられるような 所定イオン交換物質の平均粒径を表す。アルミノケイ酸塩イオン交換物質は無水 ベースで計算した場合にＣａ　ＣＯ３水硬度が少くとも２００ｍｇ当量／ｇアル ミノケイ酸塩であり、通常３００〜３５２ｍｇ当量／ｇの範囲であるそれらのカ ルシウムイオン交換容量で更に特徴付けられる。ここでアルミノケイ酸塩イオン 交換物質は英国特許第１，４２９，１４３号明細書で詳細に記載されたそれらの カルシウムイオン交換率で更に特徴付けられる。

本発明の実施上有用なアルミノケイ酸塩イオン交換物質は市販され、天然物質で もよいが、合成であることが好ましい。アルミノケイ酸塩イオン交換物質の生産 方法は米国特許篇３，９８５．６６９号明細書に記載されている。ここで有用な 好ましい合成結晶アルミノケイ酸塩イオン交換物質は名称ゼオライトＡ１ゼオラ イトＢ１ゼオライトＸ１ゼオライトＨ３及びそれらの混合物として市販されてい る。特に好ましい態様において、結晶アルミノケイ酸塩イオン交換物質はゼオラ イトＡであり、下記式を有する： Ｎ！　（（ＡＩＯ２）　１２（ＮＯ２）　１２）　ｌｌＩ２０上記式中Ｘは２０ 〜３０、特に２７である。式Ｎａ８６（（ＡＩＯ）　（Ｓｈｏ　）　〕−１０， ２７６Ｈ２０のゼオライトＸと式Ｎ！　（（ＡＩＯ）　（ＳｉＯ）　）　７．５ Ｈ２０のイオンイトＨ３も好ましく用いられる。

もう１つの好ましい非水溶性無機ビルグー物質は積層ケイ酸塩、例えばＳ　Ｋ　 Ｓ　−６（Ｈｏｓｃｈｓｊ）である。５ＫＳ−６はケイ酸ナトリウム（Ｎ　ａ　 ２　Ｓ　Ｌ　２０５　’）からなる結晶積層ケイ酸塩である。高いＣ！＋＋／Ｍ ｇ＋＋結合能は主にカチオン交換メカニズムである。温水中でその物質はより可 溶になる。

水溶性ビルダーはモノマー又はオリゴマーカルボキシレートキレート化剤である 。

１つのカルボキシ基を有する適切なカルボキシレート類としてはベルギー特許第 ８３１．３６８号、第８２１゜３６９号及び第８２１．３７０号明細書で開示さ れたような乳酸、グリコール酸及びそれらのエーテル誘導体がある。２つのカル ボキシ基を有するポリカルボキシレート類としてはコハク酸、マロン酸、（エチ レンジオキシ）二酢酸、マレイン酸、ジグリコール酸、酒石酸、タルトロン酸及 びフマル酸の水溶性塩とドイツ特許公開第２゜４４６．６８６号、第２，４４６ ，６８７号及び米国特許東３，９３５，２５７号明細書で記載されたエーテルカ ルボキシレート類、ベルグー特許第８４０．６２３号明細書で記載されたスルフ ィニルカルボキシレート頚がある。３つのカルボキシ基を有するポリカルボキシ レート類としては特に水溶性クエン酸塩、アコニット酸塩及びシトラコン酸塩と 英国特許第１，３７９．２４１号明細書で記載されたカルボキシメチルオキシサ クシネート類、オランダ出願第７２０５８７３号明細書で記載されたラクトキシ サクシネート類のようなサクシネート誘導体及び英国特許第１，３８７．４４７ 号明細書で記載された２−オキサ−１，１，３−プロパントリカルボキシレート 類のようなオキシポリカルボキシレート物質がある。

４つのカルボキシ基を有するポリカルボキシレート類としては英国特許第１，２ ６１，８２９号明細書で開示されたオキシジサクシネート類、１．１．２．２− エタンテトラカルボキシレート類、１，１．３．３−プロパンテトラカルボキシ レート類及び１，１．２．３−プロパンテトラカルボキシレート類がある。スル ホ置換基を有するポリカルボキシレート類としては英国特許第１．３９８．４２ １号、第１，３９８．４２２号及び米国特許第３，９３６，４４８号明細書で開 示されたスルホサクシネート誘導体と英国特許第１．０８２．１７９号明細書で 記載されたスルホン化熱分解シトレート類があり、一方ホスホン置換基を有する ポリカルボキシレート類は英国特許第１．４３９，０００号明細書で開示されて いる。

脂環式及びヘテロ環式ポリカルボキシレート類としてはシクロペンタン−シス、 シス、シス−テトラカルボキシレート類、シクロペンタジエニドペンタカルボキ シレート類、２，３，４．５−テトラヒドロフラン−シス。

シス、シス−テトラカルボキシレート類、２．５−テトラヒドロフラン−シス− ジカルボキシレート類、２，２゜５．５−テトラヒドロフラン−テトラカルボキ シレート類、１，２．３．４．５．６−ヘキサン−ヘキサカルボキシレート類と ソルビトール、マンニトール及びキシリトールのような多価アルコールのカルボ キシメチル誘導体がある。芳香族ポリカルボキシレート類としては英国特許第１ ，４２５，３４３号明細書で開示されたメリット酸、ピロメリット酸及びフタル 酸誘導体がある。

上記の中で好ましいポリカルボキシレート類は分子量たり３以内のカルボキシ基 を有するヒドロキシカルボキシレート類、更に具体的にはシトレート類である。

本組成物において好ましいビルダー系としてはゼオライトＡのような非水溶性ア ルミノケイ酸塩ビルグーとクエン酸のような水溶性カルボキシレートキレート化 剤の混合物がある。

本発明に用いられる更に他のビルダー物質としては炭酸、炭酸水素、ケイ酸アル カリ金属のような無機物質と有機ホスホネート類、アミノポリアルキレンホスホ ネート類及びアミノポリカルボキシレート類のような有機物質がある。

他の適切な水溶性有機塩はホモもしくはコポリマー酸又はそれらの塩であり、そ の場合にポリカルボン酸は２以下の炭素原子で互いに分離された少くとも２つの カルボキシル基を有する。

このタイプのポリマーは英国特許Ａ第１，５９６．７５６号明細書で開示されて いる。このような塩の例はＭＷ２０００〜５０００のポリアクリレート類及びそ れらと無水マレイン酸とのコポリマーであり、このようなコポリマーは２０，０ ００〜７０，０００．特に約４０．０００の分子量を有する。

セルラーゼ 酵素の活性、特にセルラーゼ酵素の活性は異なる分析法で様々な用途に関して規 定されている。これらの方法ではすべて、予想される使用時の効能の現実的評価 又は少くとも使用時の効能と相関する測定の実施を試みている。欧州特許出願Ａ 第３５００９８号明細書で詳述されたように、多くの方法、特にセルラーゼの製 造においてしばしば用いられているこれら方法は、洗濯洗剤組成物におけるセル ラーゼの使用時の効能と十分に相関していない。これは、これらの活性測定法が 開発された用法条件が様々なせいである。

欧州特許Ａ第３５００９８号明細書に記載された方法は、洗濯洗剤組成物におけ るセルラーゼ活性のランキングに関して予想相関関係にありかつそれを有するよ うに開発された。

したがって、本発明では本発明で有用なセルラーゼと本発明の目的に合わないも のとを区別するためにセルラーゼをスクリーニングする上で欧州特許Ａ第３５０ ０９８号明細書で開示された方法を用いる。欧州特許Ａ第３５００９８号明細書 で開示された方法から採用された以下Ｃ１４ＣＭＣ法と称されるスクリーニング 方法は以下のようなものである。

スクリーニングに関するＣ　１４　ＣＭ　Ｃ法の原理は、洗浄溶液中の所定のセ ルラーゼ濃度における布基材からの固定カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ） の除去を測定することである。ＣＭ　Ｃの除去はＣ１４放射性炭素を用いたＣＭ Ｃの一部の放射線標識化により測定される。

セルラーゼ処理の前後において布基材の放射性Ｃ１４量を単純にカウントすれば セルラーゼ活性を評価できる。

サンプル調製： ＣＭＣ調製：放射性ＣＭ　Ｃストック溶液は表Ｉに従い調製される。放射性ＣＭ 　Ｃは欧州特許Ａ第３５００９８号明細書で言及された方法により得ることがで きる。

布帛基材：布帛基材は５　ｘ　５　ｃｍのサイズを有するモスリン綿布である。

それらの中央に放射線標識ＣＭ　Ｃストック溶液０．３５ｍ１を付着させる。次 いでモスリン綿布を風乾する。

ＣＭ　Ｃの固定：放射線標識ＣＭＣをモスリン綿布に固定するため、ドイツのＯ ｒｉｇｉｎａｌ　Ｈａｕｎａａ製の洗濯装置Ｌｉｎ１ｔｅｓｔ　Ｏｒｉｇｉｎａ ｌ　Ｈａｕｎａａが用いられる。洗濯機の金属ジャーには硬水（Ｃａ＋＋イオン ４ｍｍｏｌ／　ｌ）　４００ｍｌが入れられる。最大数１３枚の布がジャー当た りで使用できる。次いでジャーは洗濯機中で２０〜６０℃で４０分間にわたりる 昇温サイクルでインキュベートされる。インキュベート後に布は水道水で１分間 洗浄される。それらは絞られて少くとも３０分間風乾される。欧州特許Ａ篤３’ ５００９８号によれば、固定放射性ＣＭＣ含有布のサンプルも洗浄せずに“ブラ ンクサンプル”として測定洗濯試験溶液：洗濯試験溶液は表１１の組成に従い調 製される。それはｐＨ７，５に平衡化される。洗濯試験溶液はセルラーゼ試験サ ンプルが加えられるベースである。

添加されるセルラーゼの量を決める前に１００％残部まで水を加えて洗濯試験溶 液を希釈することがないよう注意が払われるべきである。このスクリーニング試 験で用いられるセルラーゼの量は、洗濯試験溶液中で２５×１０−６重量％のセ ルラーゼタンパク質（１４，５℃で０、　２　５ｍｇ／ｌに相当）となるよう加 えられる。

洗浄操作：次いでこうして放射線標識ＣＭ　Ｃが付着した布は洗濯シミュレーシ ョンプロセスで処理される。洗濯プロセスはドイツのＯｒｉｇｉｎａｌ　Ｎｚａ ｎａｕによる洗濯機タイプ装置Ｌｉｎ１＋ｅｓ＋、Ｏ＋１ｇ１ｎａｌ　Ｎｘａｎ ｔａでシミュレートされる。個々の布は２０ｃｌｎ３ガラスバイアルにいれられ る。

そのバイアルは洗濯試験溶液１０ｍ１で満たされ、液がもれないよう密封される 。５本以内のバイアルが各洗濯ジャーにいれられる。ジャーは洗濯シミュレーシ ョン用熱移動媒体として水で満たされている。洗濯シミュレーションは２０〜６ ０°Ｃの４０分間にわたる昇温サイクルとして行なわれる。

サンプルの処理後、バイアルは冷水に浸され、各市がそのバイアルから取り出さ れ、軟水下ビーカー中で洗浄され、絞られ、少くとも３０分間風乾される。

測定： 放射線標識ＣＭ　Ｃ除去を測定するため、シンチレーションカウンター、例えば ＬＫＢ　１２１０ウルトラベータ（ＵＩＨａｂｅＮ）　シンチレーションカウン ターが用いられる。

最も正確な結果を得るためには、特定シンチレーションカウンターの最適操作に 関する取扱マニュアルに従うべきである。例えばＬＫＢ　１２１０ウルトラベー タシンチレーシヨンカウンターの場合、下記操作に従うべきである。測定される 布をシンチレータ−液体（例えば、Ｐａｃｋａｒｄのシンチレータ−２９９）１ ２ａ＋ｌで満たされたプラスチックバイアルに入れる。次いで布を少くとも３０ 分間安定化させる。次いでバイアルをＬＫＢ　１２１０ウルトラベータシンチレ ーシヨンカウンターに入れられ、布に関する各々の放射能カウントを得る。

セルラーゼのみに起因するＣＭＣ除去量を測定するためには、同時に処理された が、セルラーゼなしの洗濯試験溶液中で処理された布の測定も必要である。次い でセルラーゼの活性は放射線標識ＣＭＣ除去％として表示される。このパーセン テージは下記式により計算される：上記式中、ＸＯはセルラーゼなしの洗濯試験 溶液で処理された布きれの放射能シンチレーションカウントであり、ＸＣは評価 対象であるセルラーゼを含有した洗濯試験溶液で処理された布の放射能シンチレ ーシジンカウントである。

統計学的考察、操作確認： 統計学的に正しい結果を与えるためには、標準統計分析が用いられる。示された 例の場合、ＬＫＢ　１２１０ウルトラベータシンチレーシヨンカウンターを用い て、各放射能シンチレーションカウントに関して布３枚というサンプルサイズが 使用できることがわかった。

内部クロスチェックにより操作を確認するため、欧州特許Ａ第３５００９８号に 従う“ブランクサンプル”の測定及び計算が勧められる。これによればエラーを 検出して除くことができる。

結果の解釈・ 記載されたスクリーニング試験は本発明の活性基準を満足するセルラーゼと、本 発明に用いられないセルラーゼとを区別するための、迅速で特異な信頼しつる方 法を提供する。

前記Ｃ１４ＣＭＣ法において固定放射線標識ＣＭＣを１０％以上除かれるという ことは、各セルラーゼが本発明の要求を満足するものであることを示すこと見出 された。

１０％以上の除去％が各セルラーゼで高活性を示すことは当業者に明らかであろ う。したがって、Ｃ１４ＣＭＣ法による洗濯試験溶液中のタンパク質濃度におい て放射線標識ＣＭ　Ｃを２５％以上、好ましくは５０％以上除去するセルラーゼ は、洗濯用洗剤において良好なセルラーゼ効能を示すと考えられる。

Ｃ１４ＣＭＣ法でより高濃度のセルラーゼの使用はどより高い除去率を示すこと も考えられた。しかしながら、セルラーゼ濃度とそれで得られる除去率との間に 直線的な判明らかな相関はない。Ｃ１４ＣＭＣ法でより高濃度のセルラーゼの使 用はどより高い除去率を示すことも考えられた。

表Ｉ：放射性ＣＩ４標識ＣＭＣストック溶液（ＣＭＣは置換度約０．４７〜約０ ．７の洗剤　９９．２　Ｘｌ０−３％グレードＣＭＣであるべきである） エタノール　１４９ｇ５．１２Ｘ１０−３％脱イオン水　８４９１５．６１１ｘ ｌｔｌ’％全　量　１００％ ９全ＣＭＣは、用いられたシンチレーションカウンターで十分明確に読み取れる 放射能を示すような放射性及び非放射性ＣＭＣを含有する。例えば、放射性ＣＭ Ｃは０．　７ｍＣ１／ｇの活性を有し、混合できる。

表１１：洗濯試験溶液 （すべて全溶液の重量％） 直鎖Ｃ１２アルキルベンゼンスルホン酸　０．１１０％ココナツアルキルサルフ ェート（ＴＥＡ［０，０４０％Ｃｌ２−ｔ５　フル’：ｌ−ルエトキシＬ、−ト （ＥＯ７１ＴＪ、　１［ＩＢココナツ脂肪酸　Ｑ、１ｔｌｌ１％ オレイン酸　Ｑｙ０５０％ クエン酸　０．０１０％ トリエタノールアミン　０．０４０％ エタノール　ｏ、　ｏａｏ％ プロパンジオール　０．０１５％ 水酸化ナトリウム　０．０３ｔｌｊｌ ギ酸ナトリウム　０．１１１０％ プロテアーゼ　０．００６％ 水（Ｃａ”２．５ｍｍｏｌ／　ｌ）　、１）　Ｈ調整剤　残部１００％（ＩＩＣ Ｉ又はＮｌＯＨ溶田及グセルラーゼ本発明によれば、好ましいセルラーゼはデン マーク特許出願第１１５９／９０号明細書で記載されたようなものである。例え ば、本発明の組成物で有用なセルラーゼ製剤は、ヒューミコラ・インソレンスＤ ＳＭＬ８００に由来する高度精製４３ｋＤセルラーゼに対する抗体と免疫反応す るか又は上記４３ｋＤエンドグルカナーゼに相同的である均一なエンドグルカナ ーゼ成分から本質的になる。

本発明によるすべてのセルラーゼ酵素は前記スクリーニング試験の基準に合わね ばならない。しかしながら、テンマーク特許出願第１１５９／９０号明細書にお いて追加基準が確立され、それによれば本スクリーニング試験と組合せて好まし いセルラーゼ酵素を確認できる。

本発明の組成物で特に有用なセルラーゼ製剤は、スクリーニング試験に加えて、 エンドグルカナーゼ成分がＣＭＣニンエンドゼ単位で少くとも約５０．好ましく は少くとも約６０、特に少くとも約９０／ｍｇ全タンパク質のＣＭＣエンドアー ゼ活性を示すものである。特に、好ましいエンドグルカナーゼ成分はＣＭ　Ｃエ ンドアーゼ単位少くとも１００／ｍｙ全タンパク質のＣＭ　Ｃエンドアーゼ活性 を示す。

本明細書において、“ＣＭＣエンドアーゼ活性”という用語は、以下で詳細に記 載されるように、本発明のセルラーゼ製剤とインキュベート後にカルボキシメチ ルセルロース（ＣＭＣ）の溶液の粘度減少で測定されるように、セルロースをグ ルコース、セロビオース及びトリオースに分解するその能力によるエンドグルカ ナーゼ成分のエンドグルカナーゼ活性をいうものとする。

ＣＭＣエンドアーゼ（エンドグルカナーゼ）活性は下記のようにＣＭＣの粘度減 少から測定できる。ｐＨ９，０で０．１Ｍ）リス緩衝液中ＣＭ　ＣＨｅｒｃｕｌ ｅｓ、　７　ＬＦＤ）３５ｇ／ｌを含有する基質溶液を調製する。分析される酵 素サンプルを同緩衝液に溶解する。基質溶液１゜ｍ（及び酵素溶液０．　５ｆｆ ｌｌを混合し、４０　’Ｃに恒温化された粘度計（例えば、Ｈｚ！ｋｓ　ＶＴ　 １８１、ＮＶセンサー、１８１　＋ｐｍ　）に移す。粘度の読みは混合後できる だけ早く行いかつ３０分間後に再び行う。これらの条件下で粘度を半分に減少さ せる酵素量が１単位のＣＭＣエンドアーゼ活性として規定される。

ＳＯＳポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＯ８−ＰＡＧＥ）及びマーカータン パク質との等電点電気泳動として当業者に公知の方法を用いて好ましいセルラー ゼ製剤中におけるエンドグルカナーゼ成分の分子量及び等電点（ｐＩ）を各々測 定した。その結果、特定エンドグルカナーゼ成分の分子量は４３ｋＤであった。

このエンドグルカナーゼの等電点は約５．１であった。

セロビオヒドロラーゼ活性はセロビオースｐ−ニトロフェニルに対する活性とし て規定される。その活性は３７°Ｃ及びｐＨ７，Ｏで放出されたニトロフェニル μｍｏｌ／ｍｉｎとして測定される。本エンドグルカナーゼ成分はセロビオヒド ロラーゼ活性を本質的に有しないことが見出された。

ここでセルラーゼ製剤中におけるエンドグルカナーゼ成分は、米国特許第４，４ ３５，３０７号明細書に従いクルードなＨ，インソレンスセルラーゼ混合物の逆 相ＨＰＬＣ精製を含めた大規模精製操作で最初に単離された。

この操作では意外に高いエンドグルカナーゼ活性のために予想外に好ましい性質 を有する単一成分として４３ｋＤエンドグルカナーゼを意外にも単離した。

更にスクリーニング試験に加えて、本組成物で有用なセルラーゼ酵素は、エンド グルカナーゼ活性を示す酵素として更に定義でき（以下、“エンドグルカナーゼ 酵素”と称する）、酵素は添付配列表配列番号２で示されたアミノ酸配列を有す るか又はエンドグルカナーゼ活性を示すその相同体である。

本関係において、“相同体”という用語は（例えば、５ｘＳＳＣに前浸漬し、２ ０％ホルムアミド、５×デンハート溶液、ｐＨ６，８の５０ｍＭリン酸ナトリウ ム及び変性音波処理子牛胸＃ｌＤＮＡ５０μｇの溶液中４０℃で１時間かけてプ レハイブリッド形成させ、１００μＭＡＴＰで補充された同溶液中４０℃で１８ 時間かけてハイブリッド形成させるような）ある特定条件下で、このアミノ酸配 列を有するエンドグルカナーゼ酵素をコードするＤＮＡと同じであるプローブと ハイブリッド形成するＤＮＡによりコードされるポリペプチドを示す。その用語 は天然配列のＣ及びＮ末端の一方又は双方への１以上のアミノ酸残基の付加、天 然配列中の１以上の部位での１以上のアミノ酸残基の置換、天然アミノ酸配列の 一方又は双方の末端で又は天然配列中の１以上の部位での１以上のアミノ酸残基 の欠失あるいは天然配列中の１以上の部位での１以上のアミノ酸残基の挿入によ り得られた前記配列の誘導体を含む意味に用いる。

ここでエンドグルカナーゼ酵素は、ブダペスト条約の規定に従いマシェローダー ・ベークＩＢ、Ｄ−３３００ブラウンシュバイヒ、Ｆ　ＲＧ　（Ｍ＊５ｃｈｅ＋ ｏｄｅ「ｌｅｇ　１Ｂ、Ｄ−３３０１１Ｂｒａａｎｓｃｈｖｅｉｇ、ＦＲＧｌの ドイツ微生物寄託機関（Ｄｅｌｓｃｈｅ　Ｓａｍｍｌｕｎｇ　ｗｏｎ　Ｍｉｋｔ ｏｏｔｇａｎｉｓｍｅｎ）に１９８１年１０月１日付で寄託されたヒューミコラ ・インソレンス、例えば株ＤＳＭ１８００のようなヒューミコラの種で産生じつ る酵素であってもよい。

更にもう１つの面において、有用なセルラーゼ酵素はスクリーニング試験に加え て添付配列表配列番号４で示されたアミノ酸配列を有するエンドグルカナーゼ酵 素又はエンドグルカナーゼ活性を示す（上記したような）その相同体として定義 できる。上記エンドグルカナーゼ酵素はブダペスト条約の規定に従いマシエロー ダー・べ一りＩＢ、Ｄ−３３００ブラウンシュバイヒ、ＦＲＧのドイツ微生物寄 託機関に１９８３年６月６日付で寄託されたフザリウム・オキシスポルム（Ｆｕ ｓｘｔｉｕｍ　ｏｗｙ＋ｐｏ＋ｕｍ　）、例えば株ＤＳＭ２６７２のようなフサ リウムの種で産生じつる酵素でもよい。

更に、相同的エンドグルカナーゼはセルロース分解酵素を産生ずる他の微生物、 例えばトリコダーマ（Ｔｒｉｃｈａｄｅｒｍａ）　、ミセリオフトラ（Ｍ７ｃｇ ｌｉｏｐｈ＋ｈｏｒｘ）、ファネロカエテ（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈｘｅｔｅ）　、 シゾフイルム（Ｓｃｈｉｘｏｐｈ７１１ｕｍ）　、ペニシリウム（Ｐｅａｉｃｉ ｌｌｉｕｍ）　、アスペルギルス（Ａｓｐｓ＋ｇｉｌｌｕ＋）及びゲオトリクム （Ｇｅｏ＋ｒｉｃｕｍ）の種に由来してもよい。

しかしながら、ここでセルラーゼ製剤の工業生産のためには、望ましい酵素活性 の多量の生産を確保するため、用いられる微生物の醗酵又は変異の調整を伴う組 換えＤＮＡ技術又は他の技術を用いることが好ましい。このような方法及び技術 は当業界で公知であり、当業者により容易に実施される。

このためエンドグルカナーゼ成分は、上記エンドグルカナーゼ成分又は上記エン ドグルカナーゼ成分の前駆体をコードするＤＮＡ配列と、エンドグルカナーゼ成 分又はその前駆体をコードするＤＮＡ配列を発現させる機能をコードするＤＮＡ 配列とを保有する組換えＤＮＡベクターで形質転換された宿主細胞をエンドグル カナーゼ成分又はその前駆体を発現させる条件下で培養し、培養物からエンドグ ルカナーゼ成分を回収することからなる方法で産生じうるものでもよい。

前記のようなエンドグルカナーゼ酵素又はその酵素の前駆体をコードするＤＮＡ 配列を含むＤＮＡ構成物には添付配列表配列番号１または３に示されたＤＮＡ配 列を有するＤＮＡ構成物又はその修正物がある。ＤＮＡ配列の適切な修正例はエ ンドグルカナーゼの別のアミノ酸配列を生じないが、但しＤＮＡ構成物が導入さ れる宿主生物のコドン用法に対応するヌクレオチド置換又は異なるアミノ酸配列 とひいてはおそらく異なるタンパク質構造を生じて、天然酵素にはない異なる性 質を有するエンドグルカナーゼ変異体を生じることがあるヌクレオチド置換であ る。可能な他の修正例は配列の一端における１以上のヌクレオチドの挿入又は配 列の一端もしくは内部における１以上のヌクレオチドの欠失である。

ここで有用なエンドグルカナーゼ酵素をコードするＤＮＡ構成物は確立された標 準法、例えばＳ、　Ｌ、　Ｂｅａａｃａｇｅ及びＭ、！１．ｃａｒｕｊｈｅｒｓ 、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｔｓ、２２．　ｆ９Ｈ，ｐｐ。

１８５９−１８６９で記載されたホスホアミダイト法又はＭａｕｈｅｓ　ら、　 ＥＭＢＯＪｏｕｔｎａｌ、　３．１９８４．１１＋１．　ａｌｌ−８０５で記載 されな方法により合成で製造してよい。ホスホアミダイト法によれば、オリゴヌ クレオチドは例えば自動ＤＮＡシンセサイザーで合成され、精製、アニーリング 、結合され、適切なベクターでクローニングされる。

エンドグルカナーゼ酵素又はその前駆体をコードするＤＮＡ構成物は、例えばヒ ニーミコラ・インソレンスＤＳＭＩ　８００のようなセルラーゼ産生微生物のｃ 　Ｄ　Ｎ　Ａ又はゲノムライブラリーを確立し、標準技術（Ｓａｍｂｔｏｏｋら 、Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ：　Ａ　Ｌａｂｏｔｘ［ｏｒ７Ｓｌａｎ ｕｉｌ　（分子クローニング：実験マニュアル）、２＋＋ｄ。

εｄ、、Ｃｏ１ｄ　Ｓｐ＋ｉＢ　Ｈｘ＋ｂｏｒ、１９８９参照〕に従いエンドグ ルカナーゼの完全又は部分アミノ酸配列に基づき合成されたオリゴヌクレオチド プローブを用いるハイブリッド形成、適切な酵素活性（即ち、前記のようなＣＭ Ｃエンドアーゼ活性）を発現するクローンについての選択あるいは天然セルラー ゼ（エンドグルカナーゼ）に対する抗体と反応するタンパク質を産生ずるクロー ンについての選択によるような慣用的操作で、陽性クローンに関してスクリーニ ングすることにより単離してよい。

最後に、ＤＮＡ構成物は（適宜に）合成、ゲノム又はｃＤＮＡ源の断片を結合さ せることで製造された混合合成及びゲノム、混合合成及びｃＤＮＡ又は混合ゲノ ム及びｃＤＮＡ源であってもよく、その断片は標準技術に従い全ＤＮＡ構成物の 様々な部分に対応する。ＤＮＡ構成物は例えば米国特許東４，６８３，２０２号 明細書又はＲ，Ｋ、　５ａｉｋｉ　ら、　５ｃｉｅｎｃｅ、　２３９．１９８８ ．　ｐｐ、　４ｇ？−４９１で記載されたような特異的プライマーを用いてポリ メラーゼ鎖反応により製造してもよい。

上記ＤＮＡ構成物が挿入された組換え発現ベクターには、組換えＤＮＡ操作に付 されることが都合よいあらゆるベクターを含み、ベクターの選択はそれが導入さ れる宿主細胞に多くの場合依存する。このため、ベクターは自立複製ベクター、 即ち復製が染色体複製から独立している染色体外物として存在するベクター、例 えばプラスミドでもよい。一方、ベクターは宿主細胞中に導入された場合に宿主 細胞ゲノム中に組み込まれてそれが組み込まれた染色体と一緒に複製されるもの であってもよい。

ベクターにおいて、エンドグルカナーゼをコードするＤＮＡ配列は適切なプロモ ーター及びターミネータ−配列に作動的に結合される必要がある。プロモーター は選択された宿主細胞で転写活性を示すいかなるＤＮＡ配列であってもよく、宿 主細胞と同種又は異種いずれかのタンパク質をコードする遺伝子に由来してもよ い。エンドグルカナーゼをコードするＤＮＡ配列、プロモーター及びターミネー タ−を各々結合してそれらを適切なベクター中に挿入するために用いられる操作 は当業者に周知である（例えばＳａｍｂｒｏｏｋら、前掲参照）。

上記ＤＮＡ構成物又は上記発現ベクターで形質転換された宿主細胞は、例えばア スペルギルスの種、最も好ましくハアスペルギルス・オリザ（Ａｓｐｅｒｇｉｌ ｌｕ＋’　ｏｒ７ｘａｅ　）又はアスペルギルス・ニガー（ＡｓｐｅＢｉｌｌｕ ｓ　ｎｊ１２）に属するものである。真菌細胞もそれ自体公知の方法でプロトプ ラスト形成及びプロトプラストの形質転換し、細胞壁の再生を伴うプロセスによ り形質転換してよい。宿主微生物としてアスペルギルスの使用はＮｏｙａ　Ｉａ ｄｏｓｔ＋ｉＡ／Ｓの欧州特許第２３８０２３号明細書に記載され、その内容は 本明細書の開示の一部とされる。宿主細胞は酵母細胞、例えばサツカロミセス・ セレビシア（Ｓａｃｃｈｘｔｏｍ７ｃｅｓ　ｃｓｒｅｖｉｓｉｘｅ）の株であっ てよい。

一方、宿主生物は細菌、特にストレプトミセス（Ｓ＋ｒｅｐｔｏｍ７ｃｅｓ）及 びバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）の株と大腸菌であってよい。細菌細胞の形質転 換は慣用的方法に従い、例えばＳａｍｂｔｏｏｋら、Ｍｏ１ｅｃａｌ＠ｒＣｌｏ ｎｉｎｇ：　Ａ　ＬａｂｏｔａｔｏＢＭｘｎｕａｌ　（分子クローニング：実験 マニュアル）　、　ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｔ、　１９８９で記載さ れたように実施してよい。

適切なりＮＡ配列のスクリーニング及びベクターの組立ては標準操作（Ｓａｍｂ ｔｏｏｋら、前掲参照）により実施してもよい。

形質転換宿主細胞を培養するために用いられる培地は当該宿主細胞を増殖させる 上で適したいかなる慣用的培地であってもよい。発現されたエンドグルカナーゼ は好都合には培地中に分泌され、遠心又は濾過で細胞を培地から分離して硫酸ア ンモニウムのような塩で培地のタンパク質成分を沈降させる周知の操作の後、イ オン交換クロマトグラフィー、アフイニテイクロマトグラフイー等のようなりロ マトグラフイー操作によりそれから回収される。

当業界で周知である前記のような組換えＤＮＡ技術、タンパク質精製技術、醗酵 及び変異の技術又は他の技術を用いることにより、高純度のエンドグルカナーゼ を提供することができる。

前記セルラーゼの本組成物中における量は、洗浄溶液に持ち込まれる酵素タンパ ク質の量が０．００５〜４０ｍｇ／ｌ洗浄溶液、好ましくは０．０１〜１０Ｂ／ １洗浄溶液であるような量である。

任意成分 本組成物は、洗剤組成物の通常一部をなす任意成分を典型的には含有する。抗再 沈着及び汚れ懸濁剤、ケイ光増白剤、漂白剤、漂白活性剤、起泡抑制剤、抗凝固 剤、色素及び顔料はこのような任意成分の例であり、所望の様々な量で添加でき る。

ここで適切な抗再沈着及び汚れ懸濁剤としてはメチルセルロース、カルボキシメ チルセルロース及びヒドロキシエチルセルロースのようなセルロース誘導体とホ モもしくはコポリマーポリカルボン酸又はそれらの塩がある。

このタイプのポリマーとしては既にビルダーとして述べられたポリアクリレート 類及び無水マレイン酸−アクリル酸コポリマー並びに無水マレイン酸がコポリマ ーの少くとも２０モル％を占める無水マレイン酸とエチレン、メチルビニルエー テル又はメタクリル酸とのコポリマーがある。これらの物質は通常組成物の０． ５〜１０重量％、更に好ましくは０．７５〜８重量％、最も好ましくは１〜６重 量％の量で用いられる。

好ましいケイ光増白剤は性質上アニオン系であって、１゜ その例は４．４　ビス（２−ジェタノールアミノ−４−アニリノ−ｓ−トリアジ ン−６・イルアミノ）スチルベン−２：２１−ジスルホン酸二ナトリウム、４． ４１−ビス（２−モルホリノ−４−アニリノ−５−）リアジン−６−イルアミノ ）スチルベン−２＝２１−ジスルホン酸二ナトリウム、４．４１−ビス（２，４ −ジアニリノ−５−）リアジン−６−イルアミノ）スチルベン−２：２１−ジス ルホン酸二ナトリウム、４．４　ビス（２，４−ジアニリノ−５−トリアジン− ６−イルアミ　′））スチルベン−２−スルホン酸−ナトリウム、４゜４１−ビ ス〔２−アニリノ−４−（Ｎ−メチル−Ｎ−２−ヒドロキシエチルアミノ）−ｓ −トリアジン−６−イルアミノコスチルベン−２＝２１−ジスルホン酸二ナトリ ウム、４．４１−ビス（４−フェニル−２，１，３−トリアゾール−２−イル） スチルベン−２＝２１−ジスルホン酸二ナトリウム、４，４１−ビス〔２−アニ リノ−４−（１−メチル−２−ヒドロキシエチルアミノ）−ｓ−トリアジン−６ −イルアミノコスチルベン−２：２１−ジスルホン酸二ナトリウム及び２−スチ ルビル−４１１−（ナフト−１１，２１：４．５）−１，２，３−トリアゾール −２１１−スルホン酸ナトリウムである。

いかなる粒状無機過水和漂白剤も組成物の３〜４０重量％、更に好ましくは８〜 ２５重量％、最も好ましくは１２〜２０重量％の量で使用できる。このような漂 白剤の好ましい例は過ホウ酸ナトリウムー水和物及び四水和物、過炭酸塩とそれ らの混合物である。

もう１つの好ましい別に混合される成分には、漂白活洗剤と通常称されるペルオ キシカルボン酸漂白前駆物質があり、これは小球又は凝集形で加えられることが 好ましい。このタイプの好適な化合物の例は英国特許第１５８６７６９号及び第 ２１４３２３１号明細書で開示され、それらの小球形への形成方法は欧州公開特 許出願第００６２５２３号明細書で記載されている。このような化合物の好まし い例はテトラセチルエチレンジアミン及び３．５．５−トリメチルヘキサノイル オキシベンゼンスルホン酸ナトリウムである。

漂白活性剤は通常組成物の０．５〜１０重量％、更に多くは１〜８重量％、好ま しくは２〜６重量％の量で用いられる。

もう１つの任意成分はシリコーン類及びシリカ−シリコーン混合物で例示される 起泡抑制剤である。シリコーン類は通常アルキル化ポリシロキサン物質で代表さ れ、一方シリカは様々なタイプのシリカエーロゲル、キセロゲル及び疎水性シリ カで例示される微細形で通常用いられる。これらの物質は起泡抑制剤が水溶性又 は水分散性で実質上非界面活性剤不浸透性キャリアで有利に放出できるように配 合された粒子として配合できる。一方起泡抑制剤は液体キャリアに溶解又は分散 して、１種以上の他の成分にスプレーすることで適用してもよい。

前記のように、有用なシリコーン起泡制御剤は前記タイプのアルキル化シロキサ ン及び固体シリカの混合物からなることができる。このような混合物としては、 固体シリカの表面にシリコーンを添加することで製造される。

好ましいシリコーン起泡制御剤は約１：１〜約１＝２のシリコーン対シラン化シ リカ重量比で約５００〜約２００，０００範囲の分子量を有するジメチルシリコ ーン液と完全に混合された１０〜２０ｍμ範囲の粒度及び５０ｍ／ｇ以上の比表 面積を有する疎水性シラン化（最も好ましくはトリメチルシラン化）シリカが代 表として挙げられる。

好ましいシリコーン起泡制御剤はＢｌ　ｔ　ｔｏ　ｌ　ｌｏ　ｔａらの米国特許 第３．９３３．６７２号明細書に開示されている。

他の特に有用な起泡抑制剤は１９７７年４月２８日付で公開されたドイツ特許出 願ＤＴＯ３第２．６４６，１２６号明細書に１己載された自己乳化性シリコーン 起泡抑制剤である。このような化合物の例はダウ・コーニング（Ｄｏｔ　Ｃｏｒ ｎｉｎｇ）から市販されるＤＣ−５４４であって、それはシロキサン／グリコー ルコポリマーである。

上記起泡抑制剤は通常組成物の０．００１〜２重量％、好ましくは０．０１〜１ 重量％の量で用いられる。起泡調節剤の配合は別個の粒子として得ることが好ま しく、これによりＣ−Ｃ脂肪酸、微結晶ロウとエチレン第キシド及びプロピレン オキシドの高ＭＷコポリマーのような他の起泡制御物質をその中に含有させるこ とができ。

これらは配合されてないとマトリックスの分散性に悪影響を与える。このような 起泡調節粒子の形成技術は前記Ｂａ＋ｔｏｌｌ＋＋ｔａらの米国特許第３，９３ ３．６７２号明細書で開示されている。

他の有用なポリマー物質は分子量が具体的には１０００〜１００００、更に具体 的には２０００〜８０００、最も好ましくは約４０００のポリエチレングリコー ル類である。これらは０．２０〜５重量％、更に好ましくは０．２５〜２．５重 量％の量で用いられる。

これらのポリマーと前記ホモ又はコポリマーポリカルボキシレート塩は遷移金属 不純物の存在下で白色維持、布帛灰分沈着と粘土、タンパク質及び酸化性汚れの クリーニング効能を改善するために有益である。

本発明の組成物で有用な汚れ放出剤は慣用的には様々な汲み合せとしてのテレフ タル酸とエチレングリコール及び／又はプロヨ°シングリコール単位とのコポリ マー又はターポリマーである。このようなポリマーの例は米国特許第４１’１６ ８８５号及び第４７１１７３０号と欧州公開特許出願第０２７２０３３号明細書 に開示されている。欧州特許Ａ第０２７２０３３号明細書における特に好ましい ポリマーは下記式を有する： （Ｃ１ｌ　（ＰＥＧ）　）　１ＰｏＨ）　［（Ｔ−ＰＯ）　（Ｔ−ＰＥＧ）３　 ４３　０．７ご　０．２５　２．８ｏ、４１Ｔ（ＰＯ［Ｉ）　０．２５（（ＰＥ Ｇ）４３Ｃ）１３）ｏ、７ｓ上記式中ＰＥＧは−（ＱＣＨ）Ｏ−１ＰＯは（ＯＣ ＨＯ）及びＴは（ｐｃＯｃ６Ｈ４Ｃｏ）である。

典型的にはＭ　Ｗ　５０００〜２００００．好ましくは１００００〜１５０００ のポリビニルピロリドン類のようなあるポリマー物質も洗浄プロセス中に布帛間 における不安定色素の移動を妨げる上で有用な剤を形成する。

布帛柔軟剤も本発明で洗剤組成物中に配合できる。これらの剤はタイプ上無機で も又は有機であってもよい。

無機柔軟剤は英国特許Ａ第１，４００，８９８号明細書で開示されたスメクタイ ト粘土で例示される。有機布帛柔軟剤としては英国特許Ａ第１５１４２７６号及 び欧州特許Ｂ第００１１３４０号明細書で開示されたような非水溶性三級アミン 類、欧州特許Ｂｊ［００２６５２７号及び欧州特許Ｂ第００２６５２８号明細書 で開示されたそれらとモノＣ−Ｃ四級アンモニウム塩との組合せと欧州特許Ｂｏ ｏ　２４２９１９号明細書で開示されたようなジ長鎖アミド類がある。布帛柔軟 系の他の有用な有機成分としては欧州特許Ａ第０２９９５７５号及び第０３１３ １４６号明細書で開示されたような高分子量ポリエチレンオキシド物質がある。

スメクタイト粘土の量は通常５〜２０重量％、更に好ましくは８〜１５重量％の 範囲内であり、その物質は処方の残部に乾燥混合成分として加えられる。非水溶 性三級アミン類又はジ長鎖アミド物質のような有機布帛柔軟剤は０．５〜５重量 ％、通常１〜３重量％の量で配合され、一方高分子量ポリニチシンオキシド物質 及び水溶性カチオン系勧賞は０．１〜２重量％、通常０．１５〜１．５重量％の 量で加えられる。これらの物質は組成物のスプレー乾燥部分に通常加えられるが 、一部の場合においてそれらを乾燥混合粒子として加えるか又はそれらを組成物 の他の固体成分に溶融液体としてスプレーすることがより便利であろう。

ここでプロテアーゼ、リパーゼ及びアミラーゼのような特定のセルラーゼ製剤以 外の酵素も本組成物で存在できる。

製造プロセス 本発明による組成物は乾燥ミキシング、スプレー乾燥、凝集、造粒及びこれらあ らゆる技術の組合せを含めた様々な方法から製造できる。

好ましい製造プロセス 本組成物の好ましい製造方法はスプレー乾燥、高速ミキサーでの凝集及び乾燥ミ キシングの組合せである。

比較的不溶性のアニオン系界面活性剤を含有する第一顆粒成分はスプレー乾燥さ れ、スプレー乾燥製品の一部は転用され、残部と再ブレンドされる前に低レベル のノニオン系界面活性剤スプレーに付される。第二顆粒成分はＬｏｄｉｇｅＫＭ ミキサーのような連続高速ブレンダーで中和剤として炭酸ナトリウムを用いるア ニオン系界面活性剤酸の乾燥中和により製造される。次いで第−及び第二成分は カルボキシレートキレート化剤、無機ベルオキシゲン漂白剤、漂白活性剤、汚れ 懸濁剤、ケイ酸塩及び酵素のような他の乾燥混合成分と一緒にコンベヤベルトに 供給され、そこからそれらは水平回転ドラムに移され、そこで香料及びシリコー ン起泡抑制剤が製品上にスプレーされる。高度に好ましい組成物において、低（ 約２％）レベルの微細結晶アルミノケイ酸塩が密度を増加させて粒子流動特性を 改善するために導入されるドラムミキシングステップが更に用いられる。

洗浄プロセス 本コンパクト洗剤組成物は、著しく少量の本組成物を洗濯機の主洗浄サイクルで 用いた場合にも、従来の洗剤組成物と同効力を発揮する能力を有している。

したがって、本発明の他の態様において、１５〜１７０ｇの量の本発明の洗剤組 成物が主洗浄サイクルで用いられる洗濯機での布帛洗浄方法が提供される。

典型的には、欧州において、推奨される用法は前洗浄の必要性なしに、主洗浄サ イクルにおいて８０〜１４０ｇの洗剤組成物を用いることである。

本洗剤組成物は機械の外ケースから間接的ではなくドラムに直接いれられること が好ましい。これはバッグ又は容器へ組成物を入れることで最も容易に実現でき 、そこからそれが攪拌、温度上昇又はドラム内洗浄水浸漬に応答して洗浄サイク ルの開始時に放出される。このような容器は洗浄される布帛と一緒にドラム中に おかれる。

一方、洗濯機自体も例えば取り出し口における分配装置でドラムに組成物を直接 加えられるようにしてもよい。

バッグ又は容器内に封入された洗剤組成物からなる製品は、容器が乾燥時に内容 物を漏出させないように維持されるよう通常デザインされるが、但し通常水溶液 に浸漬された時に洗浄環境との接触で内容物を放出するようとされている。

容器は通常バッグ又はポーチのように軟質である。バッグは内容物を留められる ように非水浸透性保護物質でコートされた繊維質構造であり、欧州公開特許出願 第００１８６７８号明細書に開示されている。一方、それは欧州公開特許出願東 ００１１５００号、第００１１５０１号、第００１１５０２号及び第００１１９ ６８号明細書に開示されたような水性媒体中で破裂するようにデザインされた端 部シール又はクロージヤーで得られる非水溶性合成ポリマー物質から形成しても よい。好ましい形の水脆弱性クロージヤーは、ポリエチレン又はポリプロピレン のような非水浸透性ポリマーフィルムから形成されるポーチの一端に沿って配置 されて、それをシールする水溶性接着剤からなる。

バッグ又は容器製品形の変形例においては、中心軟質層が組成物により含浸及び ／又はコートされ、１以上の外層が布帛様美的効果を発揮するように適用された ラミネートシート製品が使用できる。層は使用時に付着したままであるように一 緒にシールしても又はコートもしくは含浸された物質の放出を促進するように水 との接触で分離してもよい。

他のラミネート形態としては、一連のポーチ様容器を与えるように型押又は変形 されてその各々に洗剤成分が一定量でいれられた′Ｍ１層と第１層を覆う第２層 であってそれが接触するとポーチ様容器間の領域で第１層にシールされた第二層 からなる。その成分は粒子、ペースト又は溶融の形態で入れられ、ラミネート層 はそれらを水に加える前にポーチ様容器の内容物の漏出を防ぐ。各層は水との接 触で分離しても又は−緒に付着したままでもよく、唯一の要求はその構造がポー チ様容器の内容物を溶液中に急速に放出させることである。基材の単位面積当た りにおけるポーチ様容器の数は適宜選択されてよいが、但し通常５００〜２５， ０００／ｉである。

本発明のこの態様において軟質ラミネート層に使用できる適切な物質としては特 にスポンジ、ペーパーと織布及び不織布がある。

しかしながら、本発明に従い洗浄プロセスを実施する上で好ましい手段は液体に 浸透性だが但し固体組成物に不浸透性である壁を有する再使用しうる分配装置の 使用である。

この積項の装置は欧州特許出願公開第０３４３０６９号及び第０３４４０７０号 明細書で開示されている。後者の出願はオリフィスを規定する支持リングから伸 びるバッグの形で軟質シートからなる装置について開示し、そのオリフィスは洗 浄サイクルで１回の洗浄サイクルに十分な製品をバッグに入れるように適合化さ れている。

洗浄媒体の一部はオリフィスからバッグに流入し、製品を溶解し、しかる後その 溶液がオリフィスから洗浄媒体中に出る。支持リングは湿潤未溶解製品の漏出を 防ぐためマスキング配列で設置され、この配列は典型的にはスポークドホイール 配置又は同様の構造で中心ボスから伸びた放射状に広がる壁からなり、その壁は 螺旋形を有する。

例 下記例は本発明について説明し、その理解を容易にする。

個別的成分に関する略号は下記意味を有する：ＬＡＳ：直鎖ドデシルベンゼンス ルホン酸ナトリウム塩ＴＡＳ：獣脂アルコール硫酸のナトリウム塩ＡＳ：アルキ ル（Ｃ−Ｃ−）硫酸のナトリウム塩ＡＯ：Ｃ−ｃ　アルキルジメチルアミンオキ シド２１ｊ ＦＡ４５Ｅ７　：約７モルのエチレンオキシドでエトキシル化された脂肪アルコ ール（Ｃ−Ｃ） ＣＡＴ：０１２アルキルトリメチルアンモニウムクロリド粘土：スメクタイト粘 土 ゼオライト４Ａ：平均粒度１〜１０μｍのゼオライト４Ａのナトリウム塩 ５ＫＳ−６：結晶積層ケイ酸塩（ヘキスト）コポリマーＡＡ／ＭＡアクリル酸及 びメタクリル酸のコポリマー ＦＡＡ　ポリアクリル酸ＭＷＩＱＯＯ→１０１００００Ｃ：カルボキシメチルセ ルロース ホスホン酸塩：エチレンジアミンテトラメチレンホスホン酸のナトリウム塩 ＥＤＴＡ　：エチレンジアミン四酢酸のナトリウム塩ＰＢ１：ＮａＢＯ・ＨＯ Ｐ　Ｂ４　：　Ｎａ　ＢＯ・ＨＯ−３Ｈ２０ＴＡＥＤ　：テトラアセチルエチレ ンジアミンＮ０ＢＳ：ノナノイルオキシベンゼンスルホン酸ナトリウム Ｐ、Ａ、・スルホン化亜鉛フタロシアニンケイ酸塩（Ｒ：ｎ）　：　Ｓ　ｉ○２ ／Ｎａ２０＝ｎアミラーゼ：ターマミル６０Ｔ（ノボーノルジクス）リパーゼ： リポラーゼＩＱＧＴ　（ノポーノルジクス）プロテアーゼ：サビナーゼ４Ｔ（ノ ボーノルジクス）ＳＳＳ　：起泡抑制系（シリカ／シリコーン混合物）例■ 請求項１のセルラーゼ効能パラメーターの臨界的意味下記試験を行った。

試験条件・ 洗浄温度＝６０°Ｃ（昇温サイクル） 洗浄時間：４０分 ｐＨ＝７．５ 水硬度：　４ｍｍｏｌ／Ｌ 洗剤濃度・１％ 洗剤組成：　ＥＰＡ　３５００９８　ｅｘ、Ｌ参照セルラーゼ： １］　Ｎｏｖａ　Ｌｒｄｉ＋に供給のＣｅｌｌａｘ７ｍｓ　（商品名）＝対照物 ２）　４３ｋＤ工ンドグルカナーゼ ＝本発明によるセルラーゼ 試験結果： セルラーゼによるＣ１４−ＣＭＣ除去％無セルラーゼ洗剤（＝対照物）　Ｏ 洗剤子Ｃｅｌｌａｚ７ｍｓ　（商品名）　０．２５ｍｇタンパク質／Ｌ３以下 ０．９ｚｇタンパク質／Ｌ１０ １．５■タンパク質／Ｌ　１２．７ ３、ＯＩＩ１ｇタンパク質／Ｌ　１７．７４．５ｍｇタンパク質／ｌ　２１．５ 洗剤＋４３ｋＤエンドグルカナーゼ ０．３のｇタンパク質／１　２０．３ ０、２５ｍｇタンパク質／Ｌ　１８．５結果の考察： 上記データは市販ＣｇＨｕＢｍｅより優れた本発明のセルラーゼに関する請求の 範囲に記載されたパラメーターの臨界意味を明らかに実証している。

例ＩＩ 下記ベース組成物を製造した。

洗剤　洗剤 ＬＡＳ　９．４０　６．２７ ＴＡＳ　３．ＧＧ　２．００ ＦＡ４５Ｅ７　２．６５　１．７７ クエン酸Ｎ！／クエン酸　１８．５０　１２．３３ゼオライト４Ａ　３２．６５ 　２１．７７コポリマ−ＡＡ／ＭＡ　４．９０　３．２７ホスホン酸塩　０．１ ９　０．　Ｎ 炭酸ｌａ　３．００　２．ＧＯ コンパクト　非コンパクト 洗剤　洗剤 ケイ酸塩（Ｒ＝２１　２．９０　１．９３プロテアーゼ　１．６２　１．０８ 硫酸塩　４．５０　３０．００ ＳＳＳ　Ｑ、４０　０．２７ 微量成分十水　残部ＩＨＮ 密度ＣＭ／Ｌ、　２０℃）　６８０　４１５推奨製品用量（ｇ／洗浄）　１２０ 　１８０色回復試験 試験条件： 洗濯装置 洗浄温度：４０℃ 洗浄時間：３時間 洗浄サイクル数：２ ｐＨ−８，２非コンパクト洗剤 ８．５コンパクト洗剤 水硬度：　１５ｇｒ、／ＵＳ　ｇａｌ。

洗剤濃度二 非コンパクト洗剤の場合０．７５％ コンパクト洗剤の場合０．６６％ 試験布帛：使用済みブルーパジャマ綿 （９０／１０ＪｉＭ／ポリエステル） セルラーゼ：　Ｌ）　Ｎｏｙｏ　Ｎｏｒｄｉｓｋ供給のＣｅｌｌｕＢｍ６　（商 品名）（＝参照） ２）４３ｋＤエンドグルカナーゼ ＝本発明によるセルラーゼ 洗浄試験：使用済みブルーパジャマ布帛８ｇの布を異なる洗浄溶液で処理した。

タンブル乾燥後、布帛を等しいセルラーゼレベルで２つの異なる洗剤マトリック スの直接比較により、色清澄化効果に関して評価した。０〜４段階を用いた熟練 者の判断による視覚による評価分けが好ましかった（０は差異なしを示し、４は 非常に大きな差異を示す）。

試験結果： 無セルラーゼ　Ｏ ＣｅｌｌｕＢｍｅ １３８１１ｇタンパク質／Ｌ　＋２．３　６０４３ｋＤエンドグルカナーゼ １８、　ｆｉｍｇタンパク質／Ｌ　＋２．２　８．５無セルラーゼ　Ｏ Ｃｃｌｌａｘ７ｍｅ １５５１ｇタンパク質／Ｌ　÷３．３　４３４３ｋＤエンドグルカナーゼ ３、４ｍｇタンパク質／Ｌ　＋３．４　１．０ＬＳＤ　（最少有意差）　＝　ｏ 、ｓｐｓＵａ１ｇタンパク質／ＰＳＵ結果から、下記効率係数を計算した。

６０／８．５＝１　４３／１．０＝４３コンパクト洗剤対非コンパクト洗剤の効 率係数セルザイム　４３ｋＤエンドグルカナーゼ６Ｑ／４３＝１．４　８．５／ １＝８．５結論： 上記結果は本発明により選択されたセルラーゼが、請求の範囲に記載されたコン パクトマトリックスにおいて、従来のセルラーゼよりも４３倍も有効であること を示す。

更に、上記結果は選択されたセルラーゼでみられる請求の範囲に記載されたコン パクトマトリックスによる効能増強が、従来のセルラーゼで得られる場合よりも 意外にかなり高いことを示す。

セルラーゼ酵素も布帛から粘土汚れを除去する上で非常に有効である。この特殊 な効能特性は例１１で示された２つの洗剤組成物で４３ｋＤエンドグルカナーゼ に関して調Ｌｉｎ１Ｈ＋を装置 ６０℃洗浄（昇温サイクル） 洗浄時間：４０分 水硬度：ブリュッセル水道水 洗剤濃度： コンパクト洗剤の場合０．６６％ 非コンパクト洗剤の場合１．０％ セルラーゼ濃度： １．５５．３．１Ｏ１４，６５及び６．２ｍｇ酵素タンパク質／Ｌ洗浄液洗浄試 験： モスリン綿布帛を２つの異なる箇所（ＵＳ、ＵＫ）の天然粘土で汚した。セルラ ーゼ効能は２つの異なる洗剤組成物において等しいセルラーゼレベルで洗浄され た粘土汚れを比較することにより評価した。例ＩＩで用いられた視覚による評価 スケールがここでも好ましかった。

（ｍｇ酵素タンパク質／Ｌ洗浄液） コンパクト洗剤 ＵＳ粘土＋１．５０　＋２．５０　＋２．１］Ｇ　＋１．５ＱＵＫ粘土　＋０． ５０　÷１，００　÷１．５０　＋２．５０非コンパクト洗剤 （＝対照）　００００ ＬＳＤ　（最少有意差）＝信頼度９５％で０．４２本発明のコンパクト洗剤組成 物における本発明に従い選択されたセルラーゼの粘土汚れ除去効能は従来の非コ ンパクト洗剤組成物における同セルラーゼの効能よりも育意に優れている。

下記コンパクト洗剤組成物も製造する。

ＬＡＳ　９．４０１Ｌ５０１１．ＯＯ−７，５８７，５８８，２０６，５０−Ｔ Ａ９　３．００　−　−　−　２．４３２．４３２．６５３．２５３．９０ＡＳ 　−−４，８０１２，ＧＯ−− ＦＡ４Ｓε７　２．６５２．０Ｇ　４．０Ｇ　１．０Ｇ　５．１１５．１１３． １５２．２０６．ＱＯＣＡＴ　−−−−−−−−２，４５ ココナツグルコースアミド　−１１，００−−−−−−−獣脂グルコースアミド 　−　−−１０，００−−−−−クエン酸Ｎｓ／クエン酸　２０．５０２９．５ ０１ｇ、ＯＱ　１１００　−　５．０［１２３，５０１２，０ｆｌ　１５．００ ゼオライト４Ａ　３３．６５　−　３２．００３２．５０２３．８０１５．６５ 　−　１６．１１０２Ｇ、　Ｇ。

５ＫＳ−６−−−−−１２，５０−−−７ｊポ’Ｊｖ　−ＡＡ／ＭＡ　４．９Ｇ 　−４，１０５，０ＯＳ、６０　２．９０　３．５Ｇ　３．４５　３．４５ＰＡ Ａ　−５，７Ｇ　−−−−１，５０−−ホスホン酸塩　０．１９　０．２３　０ ．１９　１．０Ｇ　Ｏ，５７０，４３０，３０−−ＥＤＴＡ　−−−−０，２５ −−０ｊ２０．３２炭酸／炭酸水素Ｎ！　２．００１２．０Ｇ　３．２８　２． ５０１７．３０　ｇ、００　２．５０　９．９０　９．９０ケイ酸塩（Ｒ＝２１ 　３．００　４．２０　３．００　２．００　２．００　２．５０　２．３０　 ２．５０　２．５０ＣＭＣ−ｆｌ、１５　−　−　０．４８　０．３４　０．２ ５　−　−粘土　−−−−−−１２，００Ｌ６０８．６０ＰＢＩ　−−−−１３ ，１２１３，１２１１，４７１１，５０−ＰＢ４　−　−　−　−　−　−　３ ゜５５−−ベルカーボネート−−−−−−−−１２，００ＴＡＥＤ　−−−−５ ，７０５，７０２，４７３，２０−ＮＯＢＳ　−−−−−−２，００−− Ｐ、　Ａ、　−−−−０，００２０，００２−０，００３０，ＯＯ！プロテアー ゼ　１．６２　１．３Ｇ　１．２０　１．Ｈ１，３５１，３５１，０５１，４０ １，４０リポラーゼ　−　−０，４００，３０−０，２０−０，３００，３０ア ミラーゼ　０．１５　−　０．２０　０．３０　−　０．１０　−　−　−硫酸 塩　２．５４　３．７９　１３８　２．４５　１．５０　１．５Ｇ　２．２３　 ３．４５　３．４５増白剤　−０，２７０，２７０，２７０，２４０，２４Ｇ、 ２４　０．２４　Ｇ、２４ＳＳＳ　Ｏ，４００，４０１１，４００，４００，６ ５０，６５０，５００，５００，５０微量成分十水　残、ａｔｏｏ％ セルラーゼ　、　Ｏｆ＜Ｘ＜１０ｍ（酵素タンパク質／洗浄液を放出するような 量配列表：配ｙり番号１ ＣＣＡＡＡＴＧＡＣＡ　ＣＴＣＣＣＡＡＴＣＡ　ＣＴＣＴＡＴＴＡＧＴ　ＴＣＴ ＴＧＴＡＣＡＴ　ＡＡＴＴＴＣＧＴＣＡ　ＴＣＣＣＴＣＣＡfＧ　＋０２４ ＧＡＴＴＧＴＣＡＣＡ　ＴＡＡＡＴＧＣＡＡＴ　ＧＡＧＣＡＡＣＡＡＴ　ＧＡＧ ＴＡＣ１０６０配列表：配列番号２ Ｍｅｔ　Ａｒｇ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｌｅｕ　Ｐｒａ　Ｓｅｒ　 Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ｌｅｕ　Ｐｒ。

−２１−２０−１ｓ　−１０ Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　Ｓ＠ｒ　Ｔｈｒ　Ｇａｙ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｇｌｙ　 Ｓｅｒ　Ａｓｎ　Ｈ４ｓ　Ｐｈｅ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ａｓｎ１１０　１１５　１ ２Ｇ 、１１＠Ｐｒｏ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｖａｔ　Ｇｌｙ　Ｉｌｅ　Ｐｈｅ　 Ａｓｐ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｎ　ＰｈｅＧｌｙ　Ｇｌｙ　Ｌ ｅｕ　Ｐｒｏ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　ｌｌｅ　Ｓ ｅｒ　Ｓｅｒ　Ａｒｇ　Ａｓｎ　ＧｌｕＣｙｓ　Ａｓｐ　Ａｒｇ　Ｐｈｅ　Ｐｒ ｏ　Ａｓｐ＾ｌａ　Ｌ＠ｕ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ　Ｔｙｒ　Ｔｒｐ 　Ａｒｇ　ＰｈｅＡｓｐ　Ｔｒｐ　Ｐｈｅ　Ｌｙｓ　Ａｓｎ　Ａｌａ　Ａｓｐ　 Ａｓｒ＋　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｐｈｅ　Ｓｅｒ　Ｐｈｅ　Ａｒｑ　Ｇｌｎ　Ｖａ■ Ｇｌｎ　Ｃｙｓ　Ｐｒｏ　Ａｌａ　Ｇｌｕ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ａｒｑ　 Ｔｈｒ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ　Ａｒｇ　Ａｒｇ　ＡＳ；ｌ　ＡＳf） １９０　＋９５　２００ Ｌ＠ｕ 配列表：配列番号３ ＧＡＡＴＴＣＧＣ：こ　ＣＣＣＣ丁ＣＡＴＴＣＡＣＴＴＣＡＴＴＣＡ　ＴτＣＴ ＴＴＡＧＡＡ　ＴＴＡＣＡＴＡＣＡＣＴ：ＴＣＴＴＴＣＡｉF　６０ ＭＡＪμＭ＾鯖ＡＡＡＡＭＡＡＡ　１４７３配列表：配列番号４ 国際調査報告 特表千６−５０５０４９　（１Ｂ） フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，Ｓ　識別記号　庁内整理番号（Ｃ１２Ｎ　９／４２ Ｃ１２Ｒ１：６４５） （Ｃ１２Ｎ　９／４２ Ｃ１２Ｒ１ニア７） （８１）指定国　０Ａ（ＢＦ、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ。

ＣＩ、ＣＭ、ＧＡ、ＧＮ、ＭＬ、ＭＲ，ＳＮ、ＴＤ、ＴＧ）、　ＡＴ、　ＡＵ、 　ＢＢ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ、　ＣＨ，Ｃ５，ＤＥ、　ＤＫ、　ＥＳ、　ＦＩ 、　ＧＢ、　ＨＵ、ＪＰ、　ＫＰ、　ＫＲ，ＬＫ、　ＬＵ、　ＭＧ、　ＭＮ、　 ＭＷ、　ＮＬ、　Ｎｏ。

ＰＬ、Ｒ○、　ＲＵ、　ＳＤ、　ＳＥ、　ＵＳＩ （７２）発明者　ブツシュ、アルフレッドベルグー国ロンデルゼール、ハンデル スストラート、２１０

Claims (20)

【特許請求の範囲】
1. １．界面活性剤、ビルダー及びセルラーゼを含んでなる顆粒洗剤組成物であって 、 上記セルラーゼが洗濯試験溶液中におけるセルラーゼタンパク質２５×１０−６ 重量％でＣ１４ＣＭＣ法に従い固定放射線標識力ルボキシメチルセルロースの少 くとも１０％を除去し、 上記顆粒洗剤組成物が１５重量％以下の無機充填塩を含有し、 上記顆粒洗剤組成物が５５０〜９５０ｇ／ｌ組成物の密度を有することを特徴と する、顆粒洗剤組成物。
2. ２．セルラーゼ化合物が、ヒューミコラ・インソレンス（Ｈｏｍｉｃｏｌａ　ｉ ｎｓｏｌｅｎｓ）ＤＳＭ１８００に由来する部分精製された約≒４３ｋＤセルラ ーゼに対するモノクローナル抗体と免疫反応するか又は上記≒４３ｋＤエンドグ ルカナーゼに相同的である均一エンドグルカナーゼ成分から本質的になることを 特徴とする、請求項１に記載の顆粒洗剤組成物。
3. ３．セルラーゼのエンドグルカナーゼ成分が約５．１の等電点を有する、請求項 ２に記載の洗剤組成物。
4. ４．エンドグルカナーゼ成分が、上記エンドグルカナーゼ成分又は上記エンドグ ルカナーゼ成分の前駆体をコードするＤＮＡ配列とエンドグルカナーゼ成分又は その前駆体をコードするＤＮＡ配列を発現させる機能をコードするＤＮＡ配列を 有する組換えＤＮＡベクターで形質転換された宿主ＤＮＡをそのエンドグルカナ ーゼ成分又はその前駆体を発現させる条件下で培地中において培養し、その培地 からエンドグルカナーゼ成分を回収することからなる方法で生産しうる、請求項 ２又は３に記載の洗剤組成物。
5. ５．セルラーゼの量が、洗浄溶液に放出される酵素タンパク質の量が０．００５ 〜４０ｍｇ／ｌ洗浄溶液、好ましくは０．０１〜１０ｍｇ／ｌ洗浄溶液であるよ うな量である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の洗剤組成物。
6. ６．無機充填塩が硫酸及び塩化物のアルカリ及びアルカリ土類金属塩から選択さ れるものである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の洗剤組成物。
7. ７．１０重量％以上の無機充填塩を含有しない、請求項１〜６のいずれか一項に 記載の洗剤組成物。
8. ８．５重量％以上の無機充填塩を含有しない、請求項７に記載の洗剤組成物。
9. ９．６５０〜８５０ｇ／ｌの密度を有する、請求項１〜８のいずれか一項に記載 の洗剤組成物。
10. １０．リン酸塩化合物を実質上含まず、ビルダーがアルミノケイ酸塩イオン交換 剤、クエン酸塩、炭酸塩及びそれらの混合物から選択されるものである、請求項 １〜９のいずれか一項に記載の洗剤組成物。
11. １１．セルラーゼ化合物が、添付配列表配列番号２で示されたアミノ酸配列を有 するエンドグルカナーゼ酵素であるか又はエンドグルカナーゼ活性を示すその相 同体である、請求項１に記載の顆粒洗剤組成物。
12. １２．エンドグルカナーゼ酵素がヒューミコラの一種、例えばヒューミコラ・イ ンソレンス、により産生しうる、請求項１１に記載の洗剤組成物。
13. １３．セルラーゼ化合物が添付配列表配列番号４で示されたアミノ酸配列を有す るエンドグルカナーゼ酵素であるか又はエンドグルカナーゼ活性を示すその相同 体である、請求項１に記載の顆粒洗剤組成物。
14. １４．エンドグルカナーゼ酵素がフサリウムの一種、例えばフサリウム・オキシ スポラムにより産生しうる、請求項１１に記載の洗剤組成物。
15. １５．酵素がその酵素をコードするＤＮＡ配列を含むＤＮＡ構成物により産生さ れる、請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の洗剤組成物。
16. １６．ＤＮＡ配列が添付配列表配列番号１又は３で示されるものである、請求項 １５に記載の洗剤組成物。
17. １７．宿主細胞が、トリクロデルカ又はアスペルギルスのような真菌の株、好ま しくはアスペルギルス・オリザ又はアスペルギルス・ニガー、であるか、または 、ハンセヌラ又はサッカロミセスの株に属する酵母細胞、例えばサッカロミセス ・セレビサ、の株である、請求項１１〜１６のいずれか一項に記載の洗剤組成物 。
18. １８．宿主細胞が細菌、例えばバチルス、ストレプトミセス又は大腸菌の株であ る、請求項１１〜１７のいずれか一項に記載の洗剤組成物。
19. １９．請求項１〜１８のいずれか一項に記載の洗剤組成物の１５〜１７０ｇが主 洗浄サイクルで用いられる、洗濯機での布帛洗浄方法。
20. ２０．前記量の洗剤組成物が洗浄サイクルの開始時に組成物を放出できる容器に いれられ、その容器が洗浄される布帛と一緒に洗濯機のドラムにおかれる、請求 項１９に記載の布帛洗浄方法。