JPH06504286A - 人ｉｇｆ−ｉの利用方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称 人ＩＧＦ−Ｉの利用方法。

技術分野 本発明は、成長因子、その関連の化合物、及び心臓疾患の予防又は治療への利用 に関する。

従来の技術 インシュリン状成長因子Ｉ　（ＩＧＦ−Ｉ）は、血漿及びその他の体液中に存在 するペプチドである。該因子は３つの二硫化物結合を含む７０のアミノ酸から成 り、広い範囲の種類の細胞の成長を促進し、又、骨格の成長に与える成長ホルモ ンの効果を媒介する。人ＩＧＦ−Ｉは、血漿から精製され、その完全なアミノ酸 の配列順序が形成される。人ＩＧＦ−Ｉと良く似た同族体の配列は、その他の種 類の血漿から精製したＩＧＦ−Ｉ内に存在する。

ＩＧＦ−Ｉは、系統的且つ局部的効果の双方があり、その殆どが異なる特別な結 合蛋白と関係すると考えられ、かかる蛋白の４つは、配列化されており、ＩＧＦ ＢＰＩ、ＩＧＦＢＰ２、ＩＧＦＢＰ３、ＩＧＦＢＰ４と呼ばれている。これら蛋 白は、積極的及び消極的方法の双方で工ＧＦ−Ｉの生物学的機能及び利用可能性 を調整すると考えられている。結合蛋白に対する親和力が変化した同族体が形成 され、配列順序に関係する生物学的活性の変化が確認されている。ＩＧＦ−Ｉは 、主として多くの異なる種類の細胞中の血漿薄膜の外面に露呈されたＩＧＦ−型 １の受容体と相互利用することにより反応すると考えられている。しかし、ＩＧ Ｆ−型２及びインシュリン受容体との結合もまた重要であると考えられている。

精製される血漿ＩＧＦ−Ｉの量が不足しているため、ＩＧＦ−■を商業的規模で 製造する方法を開発することが非常な課題とされていた。今日、その大規模な製 造は、ＤＮＡ遺伝子組換え技術を利用して容易に行うことが出来る。

遺伝子組換えＩＧＦ−ＩＧ　（ｒ　ＩＧＦ−Ｉ）の作製法に関する研究の結果、 ｒＩＧＦ−Ｉは、骨格の成長及び骨格の筋肉の蛋白の合成を促進することが実証 された。更に、ＩＧＦＩは、患者の代謝機能の治療又は予防（スウェーデン国特 許出願願第９００２７３１−９号）にも効果的であり、そして切断した末梢神経 の再生（欧州特許第０３０８３８６号）も促進する。従来、ＩＧＦ−１は又、生 体外で、筋細胞のアクチンの合成を促進しくフロリニ　ジェイ　アール著、筋及 び細胞、第１０巻、（１９８７年）第５７７頁乃至第５９８頁）及び生体外で新 生ネズミの心臓細胞の収縮性を促進する（ベータ、ＵｅＬ等、心臓基礎研究、第 ８３巻（１９８８年）第６４７頁乃至第６５４頁）に報告されている。しかし、 これらの観察結果を動物の全体又は治療目的に応用する従来の技術は無かった。

発明の詳細な説明 本発明の第一の特徴において、ＩＧＦ−Ｉ、又はそのａ効な同族体の特別な生物 学的作用は、人間を含む哺乳動物に系統的に投与したとき、心筋の基本的な蛋白 合成機能を選択的に促進させる、即ち、その他の組織で見られる程度を著しく土 建る程度に増進させることがあることを知った。第二の特徴において、ＩＧＦ− Ｉ、又はその有効な同族体を系統的に投与することは、心臓の拍動量を顕著に増 大させ、これにより、心臓の拍出量を増大させることが分かった。このように、 本発明によれば、その結合蛋白を同時に投与するかどうかに拘わらず、■ＧＦ− Ｉ、又はその有効な同族体は、人間の低心臓拍出量の適当な治療法である。

本発明は、人ＩＧＦ−Ｉ又はその有効な同族体を投与する段階を含む心臓疾患の 予防又は治療方法、及びＩＧＦ−Ｉ、又はその有効な同族体を使用して、薬剤を 製造する方法を開示するものである。特に、対象となるのは、心筋の蛋白質の合 成の促進及び心筋障害、心筋炎又は心筋梗塞を含む急性の心臓病、又は急性発作 の治療である。

又、薬剤の投与、炎症、感染、敗血症、又は狭心症後の心筋障害、心筋障害、心 筋炎、炎症、又は狭心症の回復速度の促進、拍動量の増加による拍出量の増大、 及び心筋梗塞の治療の用途が開示されている。拍出量は、外傷、敗血症、心筋梗 塞、外科手術、心臓炎又はその組み合わせの結果として減少する場合がある。人 ＩＧＦ−Ｉを使用することが望ましい。所定の投与量は、ｏ、ｏｉ乃至ｌＯ１望 ましくはＯ，ｌ乃至１■／ｋｇ体重／日とする。約２■／ｋｇ体重／日以上のよ り多量の投与量の場合、低血糖症が生じ、治療しなければならない（グルコース の投与）。

人ＩＧＦ−Ｉ、又はその有効な同族体の投与は、経皮的、経筋内的、静脈内、鼻 、口、皮膚を通じて投与し、又はこれら投与方法を組み合わせて行うことが出来 る。

その投与は、経皮的に行うことが望ましい。又、本発明は、ＩＧＦ−Ｉ、又はそ の有効な同族体の所望の効果を増進し、又は改良する成長因子、ホルモン、結合 蛋白、又は受容体のような付加的な蛋白、又はペプチドと共に、人ＩＧＦ−Ｉ、 又はその有効な同族体から成る組成物を提供するものである。心臓疾患の予防又 は治療用の薬学的に許容可能な担体、又は希釈剤を添加することも出来る。心筋 は、骨格筋肉には見られない幾つかの性質がある。繊維は、合胞体でなく、両端 で互いに接続され、円筒状の単位体ではなく、分岐し、その他の繊維と接続して 回路網を形成する、別個の細胞単位から形成されている。細胞核は、骨格筋肉細 胞中よりもより深く位置し、筋形質は、骨格筋肉におけるよりもより多くのミド コン心筋における蛋白質の合成を選択的に促進する■ＧＦ−■、又はその有効な 同族体の性質は、次のものを含むか、これにのみ限定されない人間の心臓疾患の 一次的又は二次的な各種予防、又は治療に有効である。

維持するための心筋が不十分なことを特徴とする。これらはある薬剤、特に、肺 炎及びその他の腫瘍の治療に使用する薬剤に起因する、原発的に又は医元性に発 生する原発性、感染後又は浸潤的に生じる。本発明において、網状心筋蛋白の合 成を選択的に促進させるためにＩＧＦ−■を使用することは、罹患率及び心筋障 害に伴う死亡率を低下させるものである。

■：２ン弔＼＃幕査カ予□ｐノン　デュアノルビシン又はアドリアマイシン（腫 瘍の治療に使用されるもの）のような心臓有害薬剤の投与後。特に、アドリアマ イシン又はデュアノルビシンのような薬剤を使用した特定の状態で心筋障害が予 測される。ＩＧＦ−１は、心筋の綱状蛋白の合成を維持し且つ促進するその効果 を通じて、こうした状況にて、心筋障害の発生を緩和し、又は低下させ、或はこ れにより患者の拍出量を増大させる。

Ｉ：３）心筋の停留ス叩査Φ幀濃　感染、外傷、中毒、大きな傷又は外科手術後 。心筋炎のような心臓疾患に伴って、心筋の質量が急激に且つ顕著に失われるこ とか多い。

同様に、急激な損傷、又はその他の重大な病気後の敗血症の手術から回復する患 者は、心筋の蛋白を急激に失い、罹患率及び死亡率が増すことがある。こうした 状況にて、心筋蛋白の網状合成を促進し且つ心筋の蛋白の損失を防止するために Ｉ　Ｇ　Ｆ　−１を使用することは、罹患率又は死亡率を低下させ、又入院期間 を短くする効果がある。

更に、回復速度を速める結果、間接的に、長期の病気に起因する望ましくない副 作用の発生を最小限に抑制出来域の心筋の質量が低ドする。回復には、繊維状組 織の付着を促進させる又梗塞領域に接する心筋の機能が回復することを必要とす る。外傷、又は損傷後に各種のその他の組織で局部的に高濃度で形成されること が知られるＩＧＦ−Ｉは、系統的に投与したとき、心筋の回復を促進し、これに より、心臓機能の回復、及び患者の健康状態の回復するのを速める。心筋梗塞後 の罹患率及び死亡率は、回復速度が遅いことに関係するため、ＩＧＦ−Ｉを使用 して心筋の回復速度をより速めることは、罹患率及び死亡率の低下につながる。

Ｉ：５）今源嘩旗卑促進　心筋炎、心筋虚血（梗塞の有無を問わず）又はその他 の心筋の病気（例えばリュウマチ熱及びウィルス感染の二次的疾患として）を含 む心筋の損傷状態における網状蛋白質の合成及び／又は機能を増進させによる。

上記の性質は、心筋炎、又は心筋梗塞のような急性の発作後の心筋のより急激な 治療を可能にするものである。

■、心臓の拍出量の増加／変力 敗血症、又は中毒後、心筋炎、又は心筋梗塞後のような心臓の感染的又は中毒性 疾患、心筋梗塞等のような心臓の虚血性発作の患者の場合、心臓の拍出量か不１ ′分な状況となる。こうした状況及びその他の心臓の拍出量か不十分な状況のと き、長期間に亘るＩＧＦ−Ｉの投与は、心筋の回復速度を促進するのみならず、 心筋の拍出量を維持する点で治療的効果がある。更に、拍出量に苅する効果は、 心拍数に何等顕著な影響を及ぼすことなく、又、その効果は急激であるため、急 激な心臓疾患の状態に採用されている。臨床的状況は、心臓障害、心筋炎及び心 筋梗塞後の状況が含まれるが、これらにのみ限定されるものではない。

より具体的には、本発明は、有効な量のペプチド又はＩＧＦ−４の有効な同族体 及び薬学的に許容可能な担体又は希釈体を含む薬剤成分を提供するものである。

投与方法は、静脈内、経筋肉、経皮的、経鼻、経口又は経皮的に行い、又はこれ ら投与方法を組み合わせて行うことが出来る。ペプチドは、約０．０１−１０、 望ましくは０．１−１■／ｋｇ投与量を提供するのに十分な量とすることが出来 る。

図面の説明 第１図は、６０分の時間で得られるｒＩＧＦ−Ｉの丸塊に従う心臓拍出量（ＣＯ ）のパーセンテージを示す図、第２図は、ＩＧＦ−Ｉ投与後の心拍数を示す図、 第３図は、ＩＧＦ−Ｉ投与後の平均動脈血圧を示す図である。

実施例 次に以下の非限定的な実施例に関して本発明の好適な実施例を説明する。

１、心臓の網状蛋白の合成の促進に対するＩＧＦ−Ｉの効果 衷練輿去 ４８時間、絶食し、これによりその基礎的血漿ＩＧＦ−■の濃度を低下させた羊 について実験をおこなった。

これら羊は、１５又は５０μｓ／ｋｇ／時間の何れかの投与量にて遺伝子組換え 人ＩＧＦ−Ｉを５時間、注入した。

投与量が少ない結果、血漿ＩＧＦ−Ｉ濃度が約２倍になり、又、結合蛋白の分解 量の変化が最小である一方、より多量の投与量である場合、血漿ＩＧＦ−Ｉ濃度 は約４倍となり、自由（即ち、結合蛋白に結合されていないもの）血漿ＩＧＦ− Ｉが幾分、増加した。更に、少ない投与量は、体全体の炭水化物の代謝の影響を 与えない一方、より多量の投与では影響が見られた。等量のインシュリン（１μ ｓ／臓／時間）を使用した研究結果から、観察された機能に対するＩＧＦ−Ｉの 独自性を実証する心臓代謝機能に関する作用は観察されなかった。

心筋の代謝機能は、蛋白中にレブチンを含ませることで測定した。横隔膜、骨格 筋肉及び肝臓に含めた場合の測定も行った。ＩＧＦ−Ｉは、検査した全ての組織 内の合成分解速度（ＦＳＲ）を速めたが、誘起の程度は、その他の組織よりも心 筋でより著しく増大した（表１に示すように）。蛋白ＦＳＲは、心臓内で２．９ ％／日で５゜６％／日に増加（９３％の増加）する一方、骨格筋肉中では、０． ９％／日乃至１．３％／日に増加（４４％増加）した。

少量投与のＩＧＦ−Ｉ群の場合、蛋白ＦＳＲは、心臓内で３８％増加する一方、 骨格筋肉中では何らの影響も観察されなかった。このように、ＩＧＦ−Ｉの非低 血糖投与量が少ないことは、心筋に選択的に影響を及ぼす。

これら観察結果から、系統的に投与したＩＧＦ−Ｉの心筋に対する代謝作用がユ ニークに選択可能であることの明確な証拠が得られる。

表１　蛋白質（％／日）の分解合成速度（ＦＳＲ）動物組織食塩 Ｎｏ、外転筋　腰部　横隔膜　心臓　肝臓１１２　０．７　０．７　１．０　３ ．３　１５．０１１６　０．９　１．２　１．５　３．６　１６．９１３３　１ ．２　１．８　３．２　７．０１３５　０．７　０．８　１．２　１．７　７． ９１３８　０．７　０．６　０．９　２．５　８．４１４６　０．８　０．７　 １．６　３．０　１１．２平均値土ＳＥ　Ｏ，８±０．１　０．９±０．１　１ ．３±０．１　２．９±０．３　１１．０±１．フィンシュリン、１μｓ／総、 ｈ： １７１　０．７　１．１　１．６　５，２　１９．１１７２　０．８　０．７　 １．０　２．７　１０．８１７５　０．８　１．０　１．６　４．９　１５．８ １７６　０．６　０．６　１．５　３．９　１１．８平均値土ＳＥ　Ｏ，７±０ ．０　０．９±０．１　１．４±０．１　４．２±０．６　１４．２±２．０１ ５８　０．８　１．０　１．５　５．１　１５．４１５９　０．７　０．８　１ ．３　４．０　１２．８１６０　０．７　０．７　１．１　４，２　１２．３１ ６１　０．６　０．５　１．０　２．８　９．６平均値ヱＳＥ　Ｏ，７±０．０ 　０．７±０．１　１．３±０．２　４．２±０．５　１２．５±１．２１−ρ −」−二」、５０μｓ／ｋｇ、肝１３７　１．１　１．５　２．７　５．９　１ ６．７１３９　０．８　１．３　２．３　５，１　１６．５１４４　１．２　１ ．１　３．２　７，７　２３．９１４５　０．８　１．１　２．０　５．０　１ ３．３１４７　１．０　１．６　２．８　４．２　１３．８１４８　０．９　１ ．３　２．４　５．６　１９．９≠均値土ＳＥ　１．０±０．Ｏ＃１．３±０． ｌ＃２．６±０．２・５．６土０．５ｆｉ１７．４±１．７＃＃Ｐ＜０．０５． 　ＳＰ＜０．０１．・Ｐ＜０．０５　標準食塩水を注入した対照、動物と比較し た（凸凹の動物のみから成るため、低投Ｉ−４，量のＩＧＦ−Ｉ群の結果からは 有意義な値は得られこの効果の生理学的意義、及び可能な治療上の意義を裏付け る証拠は、高血漿又は低血漿ＩＧＦ−１濃度について、生後４２日の選択された ネズミについて行った実験で得られた。８世代の選択後、２つの安定的な種類の ネズミが得られた。即ち、生後月数に関係なく、高濃度血漿Ｉ　Ｇ　Ｆ　−Ｉネ ズミは、低濃度血漿ＩＧ）’−Ｉネズネズりも長く且つ体重が重い。

２種類のネズミ器官の重量比を検査した結果、その他の種類のネズミと比較して 、高濃度ＩＧＦ−Ｉのネズミの心臓の寸法は、不釣合に大きいことが分かった。

このことから、高濃度ＩＧＦ−Ｉに慢性的に露呈させることは、心臓筋肉の質量 を増大させる結果、心臓肥大を伴うことが示唆されている。

このように、急激なＩＧＦ−Ｉの投与は、心筋中の網状蛋白の合成を特定的に且 つ選択的に増大させることを示す上記の実験例と同様に、慢性的な状況に利用す ることが出来る。

このことから、ＩＧＦ−１、又はその同族体による治療は、人間に適用し、治療 上望ましい場合、心筋の蛋白の合成を促進することが出来るという証拠が得られ る。

成長中の小羊を使用して、スワンーギャンッ（Ｓｑａｎ−Ｇａｎｚ）のカーテル を頚動脈から心臓の右側を通って肺動脈に挿入し、心臓拍出量及び心拍数を測定 して研究を行った。子羊は、意識がある状態でスリングに吊り下げた状態で研究 した。５０μｓ／一／時のＩＧＦ−Ｉを経皮的に注入しても、心拍数、又は拍出 量に何ら影響は見られなかった。５０μｓ／一／時以上の注入量は、注入期間中 の拍出量を増大させ、拍出量は、注入後、約１時間で約７５％だけ増大した。心 拍数が変化せずに拍出量が増したため、同様に心臓拍出量も増大した。

心拍数が変化せずに拍出量を増大することは観察された作用が血液グルコースの 濃度、又は血漿カテコルアミンの濃度の変化を通じて間接的に得られるのではな く、ＩＧＦ−Ｉの特定の作用だけに関係することが実証された。この実験例から 、本発明の第２の特徴、即ち、心臓疾患にＩＧＦ−Ｉを使用し、心拍数に影響を 与えずに、拍出量を増大させるという効果の基礎が得られる。

叉杖例４一 体重１５乃至２５ｋｇ及び生後２乃至４力月の潜伏畢丸雄小羊を使用して実験を 行った。この動物は、安全な全身麻酔を促進し得るように試験前、２４時間絶食 させた。

アｌ＼ン剤（サンァン）の静脈内注射を行って全身麻酔を生じさせた。器官を切 開し、フロロサンにュージーランドＩＣ：Ｉ）によりその麻酔を維持した。麻酔 の効果は、臨床的に及び血液ｐＬＩ、Ｐａ　Ｇ　Ｏｔを測定することにより観測 した。

心臓拍出量の測定： 平均動脈血液を測定し、又流体を注入するため、切開により、右側大腿部動脈及 び左外側頚動脈にカニユーレを挿入した。スワン・ギャンツ（Ｓｗａｎ　Ｇａｎ ｚ）カテーテルを右外側静脈介して肺動脈に挿入した。この方法により、中央静 脈圧力、身体中心温度を測定し、又熱希釈法及びヒユーレット・パラカードのマ イクロプロセッサを使用して心臓拍出量を測定した。この場合、５０ｍ１の水食 塩水を肺動脈内に急速注入した。各群（３匹の小羊）内の動物には、同−員の食 塩を注入した（１時間に６０ｍ１）。

実験方法： 実験方法は２時間、行った。スワン・ギャンツ・カテーテルを血管内に挿入し且 つ位置決めした後、１時間の基準時間後に実験を開始した。平均動脈血液を９０ −１９０−１Ｏ０及び中央静脈圧力を１０−１２ｍｍＨｇに維持すべく、動脈内 流体の置換を開始した。この時間中、心臓拍出量は、１５分毎に測定した。静脈 血液の気体量及びヘモグロビンの濃度を点検し、ヘモグロビンの濃度が８０ｇ／ ｌ以下、又はｐＨが７．３以下である場合、準備作業は中断した。

１時間の基準時間後、動物には、標準食塩水（ｎ＝３）又は１５ｕｓ／ｋｇの投 与量（ｎ＝３）のｒＩＧＦ−１，２０μｓ／ｋｇ（ｎ＝３）又は３０μｓ／ｋｇ の（ｎ＝３）の濃縮塊を投与し、５分毎に心臓拍出量を測定した。この期間中、 心臓拍出量を測定するのに必要な動脈内に流体の薬剤は、投与しなかった。

検体の分析： 血漿グルコースの濃度をヒタチ・オートアナライザ（（Ｈｉｔａ　ｈｉ　Ａｕｔ ｏａｎａｌｙｓｅｒ）　日本の日立製）を使用して測定した。アドレナリン及び 比アドレナリンの血漿濃度を高速度液体クロマトグラフィを使用して測定した。

その結果は、表２に掲げである。

表２　血漿グルコース、平均値±Ｓ　Ｅ　ｍｍｏｌ／Ｌ時酊分食塩水　１５μｓ ／ｋｇ　２０μｓ／ｋｇ３０μｓ／聰−４５３，５±０．２　３．７±０．３　 ３．６±０．２　３．２±０．１−３０　３．５±０．１　３．４±０．２　３ ．３±０．２　３．３±０．２−１５　３．３土０．３　３．５±０．３　３． ５±０．４　３．１±０．３０　３．５±０．１　３．６±０．２　３．５±０ ．２　３．２±０．２１５　３．６±０．２　３．６±０．２　２．６±０．１ 　２．８±０．２３０　３．５±０．１　３．８土０．３　２．８±０．２　２ ．５±０．３４５　３．４±０．１　３．２±０．２　３．２±０．３　２．９ ±０．３６０　３．５±０．１　３．３±０．３　３．２±０．４　３．２±０ ．１食塩水、又はＩＧＦ−１の濃縮塊を１５μｓ／ｋｇを投与した後に測定した 血漿グルコース濃度は、食塩水、又はＩＧＦ−Ｉの投与直前の濃度と比較して変 化は見られなかった。

２０μｓ／馳の投与量でＩＧＦ−Ｉを投与した結果、３０分の時点でそれぞれ２ ．８及び２　、　５　ｍｍｏｌル、低下した（ｐ＜０．　０５）。血漿カテコル アミン濃度、ＩＧＦ−Ｉ　（全ての投与量）又は食塩水の投与の前後の双方で採 用した検体の最小検出可能濃度（５０μｓ／臓）以下だった。

心臓拍出量： 心臓拍出量、平均動脈圧力及び心拍数は、食塩水又はＩＧＦ−Ｉの１５μｓ／ｋ ｇの丸塊の投与後、顕著な変化は見られなかった。

丸塊の投与後、２０μｓ／ｋｇのＩＧＦ−Ｉの投与後４０分で、心臓拍出量は、 ２．７＋／−０，８Ｌ／分から３゜６＋／−０，９Ｌ／分の最大値に増加した（ ｐ＜０．０５）。同様に、３０μｓ／ｋｇのＩＧＦ−Ｉの丸塊後、心臓拍出量は 、ＩＧＦ−Ｉの投与後、３０分で、２．　１＋／−０，５Ｌ／分（平均動脈圧力 Ｉ　Ｑ　４　＋／　−８ｍｍＨｇ、心拍数１４０＋／−２０塊／分）から２．　 ８＋／−０，３Ｌ／分（平均静脈圧力１０４　＋／　−８ｍｍＨｇ、心拍数１４ ０　＋／−２０塊／分）の最大値まで増大した（ｐ＜０゜０５）。その後、心臓 拍出量は、ＩＧＦ−Ｉの投与直前の測定値まで復帰した。

第１図には、６０分の時点でｒｈＩＧＦ−Ｉの丸塊を投与した後の心臓拍出量（ ＣＯ）の変化パーセンテージが示しである。この変化量は、注入前の基準値に対 する平均値のパーセンテージとして計算しである（６０分対０分）。

より多量の投与Ｉ　Ｇ　Ｆ　−１を投与した後に心臓拍出量は増大することは明 らかである。この増大の結果、心拍数は、変化しなかった。

第２図は、ＩＧＦ−Ｉ投与後の心拍数を示す。心拍数は、顕著に変化しなかった ことが理解される。

第３図には、次の図に基づいてＩＧＦ−Ｉ投与後の減し筋動脈圧力が示しである 。表３を参照。

表３　平均動脈圧力、Ｌ ＩＧＦ−Ｉ　（μｓ／ｋｇ） 分　０　１５　２０　３０ −６０　１１０±１２　９９±１０　８５±１５　１０８±８−４５　９０±１ ５　９６±１０　８８±１２　１１０±１０−３０　１１８±１３　１１０±１ ２　９０土１７　１０９土１６−１５　９８±１４　１０８±８　９８±１２　 １０３士１１０　１０５土１７　１０２±１２　９５±２０　１０４±１８５　 ８８土１８　９８±１４　９４±１３　１０４±１２１０　８８土１７　９６± １２　９５土１２　１１０±１７１５　９０土１２　９８±１４　９６±１０　 １２３±１８２０　９０土１５　９０±１２　９３±１５　１２８±１９２５　 ８５土１４　９４±１６　９２±１６　１２０±９３０　９３土１２　９６土１ ０　９８±１４　１２０±１１３５　９０土ｉｉ　９８土１２　９６±９　１１ ６±１９４０　９１土１０　９６土１０　９９土１７　１０７±５４５　８８土 １２　９４±１５　９８±１３　１０５±１４５０　９０土１５　９０土８　９ ５土７　１０６±１３５５　９２土１０　９０±７　９０土１０　１０１土９６ ０　９１±１６　９０±１２　８９±１９　１０２±５実験例５ 本実験の目的はＩＧＦ−Ｉ治療法が慢性的なアドリアマイシン治療法の副作用と しての心臓疾患（アドリアマイシンに起因する心筋障害）を有するネズミの心臓 機能を向上させ得るか否か判断することである。

生後６０日のウィスターネズミを三つの群に分けた。

１、参照ネズミとして、食塩水を１２週間、毎週経皮的に投与した。

２．２■／ｋｇのアドリアマイシンを１２週間、毎週経皮的に投与した。この群 は食塩水ポンプを挿入し、最後の４週間、食塩水で治療した。

３．２■／ｋｇのアドリアマイシンを１２週間、毎週、経皮的に投与することに 加えて、０．８■／ｋｇ／日のＩＧＦ−Ｉを最後の４週間、浸透性ミニポンプに より経皮的に投与した。

この実験の終了時、生存するネズミに麻酔をかけ、古典的小球法により、心臓吐 出量をめた。第二の群のアドリアマイシンで治療した２５匹の動物の内、１０匹 が生存しており、麻酔薬を注射し、第三群のアドリアマイシンに加えて、ＩＧＦ −Ｉで処理した１６匹のネズミの内、９匹に麻酔薬を注射した。

この実験で全てのデータは、表４にまとめである。

食塩水＋アドリアマイシンで処理した７匹、及びアドリアマイシン＋ＩＧＦ−Ｉ で処理した後の５匹の心臓吐出量の実験結果は、許容可能な状態であった（基準 心拍数〉３００塊／分）。更に、７匹の対照ネズミに関するデータも得られた。

心臓拍出量（ｍｌ／分）は、次の通りであった。

１、対照ネズミ　１３６．１±１４．１２、アドリアマイシン十食塩水　９１． ４±１７．１３、アドリアマイシン＋ＩＧＦ−Ｉ　１３１゜９土１６．３アドリ アマイシンで処理したネズミ心臓拍出量を増進させるＩＧＦ−Ｉの効果は、極め て顕著（ｐ＜０．０１）であり、アドリアマイシンに起因する心臓拍出量は大部 分、ＩＧＦ−Ｉで回復出来た。

体重（ｍｌ／分／ｋｇ）に応じて調節するため、心臓指数として表示した場合、 食塩水１−ｍに対するアドリアマイシンの効果は、アドリアマイシンで処理した 動物の異化状態のため、それ程顕著ではなかったが、依然、ＩＧＦ−Ｉの効果は 、顕著であった。しかし、体重は、水の保持時間が可変であることにより影響を 受けるため、この測定結果は、複雑化している。

心臓指数（［＋１１／分／ｋｇ） ■、対照ネネズ ２、アドリアマイシン処理 ３、アドリアマイシン＋ＩＧＦ−Ｉ処理心拍数（回数７分）は、群間で差がなか った。

１、対照ネズミ ２、アドリアマイシン処理 ３、アドリアマイシン＋Ｉ　Ｇ　Ｆ　−Ｉ処理しかし、拍出量（ｍｌ）は、ＩＧ Ｆ−Ｉ治療法で向上した。

１、対照ネズミ ２、アドリアマイシン処理 ３、アドリアマイシン＋ＩＧＦ−Ｉ処理処理期間中、動物は、毎週、計量した。

１２週間、生存する動物の器官の重量を測定し、且つ腹水及び胸膜の浸出液の量 を測定した。

る心臓障害のＩＧＦ−Ｉによる治療 平均値上標準値　ｊ４１ｉＩネズミ　アドリアマイシン　アドリアマイシン＋Ｉ ＧＦ−Ｉ体値変化（ｇ）２２９．５±４３．８　８８．５±４８．６　８７゜９ 土５１．５ｎ＝２４　ｎ＝１Ｉ　ｎ＝９ 肝１ｆｆｉｌ（ｇ）　２０．９±３，８　１７．７±１．９　１７．０土２．２ ｎ＝９　ｎ＝１Ｉ　ｎ＝９ ｊｌｉｉＨ（ｇ）　１．１５土０．２３　０．７８土０．１０　０．９３土０． ３３ｎ＝９　ｎ＝１１　ｎ＝９ １１Ｈｇ）　１．９４土０．３０　１．５６±０．２３　１．９０ｉ０．２９ｎ ＝９　ｎ＝１１　ｎ＝９ 左傭腎１ｉ１（ｇ）　１．８７＋０．２４　１．９１土０．２８　２．３６ｆ０ ．４９’ｎ＝９　ｎ＝１１　ｎ＝９ 右側腎１ｉ１（ｇ）　１．９２±０．２０　１．８３土０．３１　２．３３±０ ．４５’ｎ＝９　ｎ＝１１　ｎ＝９ 腹水量（ｍｌ）　０．９±１．１　５０．０＋３８．１　２１．４土２２．１２ ｎ＝７　ｎ＝１１　ｎ＝９ ＃ｉ浸１ｆｉｉのｉ（ｍｌ）　０　５．５±４．０　３．７±３．７心臓拍出量 （１１１１７分）　１３６．１±１４．１　９１．４±１７．１　１３１．９土 １６．３１ｎ＝７　ｎ＝７　ｎ＝５’ 心臓拍出量（指数）　２４１．７±１９．３　２２９．７±２５．４　３１０． ４土３８．８（ｍｌ）分／ｋｇ）　ｎ＝７　ｎ＝７　ｎ＝５’拍ａｌｌ　（ｍ　 ｌ　）　０．３３５±０．０５２　０．２２６±０．４６　０．３２３±０．０ ７Ｏｎ＝５６ 収縮血圧（ｍｍＨｇ）　１１４．４±１５．０　７５．７±１６．２　８２．２ ±３２．４■＝５６ 注ニ アドリアマイシン及びアドリアマイシン＋ＩＧＦ−Ｉ群の比較のため、ＡＮ○Ｖ Ａの統計値を採用した。

４週間のＩＧＦ−Ｉ治療は、心臓障害における心臓の機能を向上させる効果があ るという結論は明らかである。

心筋中の網状蛋白の合成を促進し且つ拍出容量を増加させることにより、心臓拍 出量を向上させるという本発明の２つの特徴は、ＩＧＦ−Ｉの投与量を異なるも のにすることを利用する。このように、心拍数が増加しない患者にとって拍出量 を増加することが望ましい臨床例の場合、これは適当な投与量を選択することに より可能となる。更に、心筋の蛋白の合成を促進することは、ＩＧＦ−１の投与 量を少なくして別個に実現することが出来る。

更に、上記に説明した本発明の精神から逸脱せずに、他の各種の変形例及び応用 例を行うことが可能である。

国際調査報告 １ｎ＋＊＋ｖｎ＋ｉｅ＋ｍ轟ｅ＋畷１＋ＪｌｉｅｅｌｉｅρＣＴ／５Ｅ９２１０ ０００９「。＋ｍ−＋＋−＝＋ｈｅｅｕｍ＋−Ｎ、　ＰＣＴ／ＳＥ　９２１００ ００９国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）心筋の蛋白質の合成を促進し且つ心筋障害、心筋炎又は心筋梗塞を含む急性 心臓病又は急性発作の予防又は治療用の薬剤の製造に使用する人ＩＧＦ−Ｉ又は その有効な同族体の使用方法。 ２）人ＩＧＦ−Ｉ又はその有効な同族体を投与することから成る心筋の蛋白質の 合成の促進及び心筋障害、心筋炎又は心筋梗塞を含む急性心臓病又は急性発作の 予防又は治療方法。 ３）薬剤の投与、炎症、感染、敗血症又は虚血後の心筋障害を予防する請求の範 囲第１項に記載の使用方法。 ４）心筋障害、心筋炎、炎症又は心筋虚血症及び心筋梗塞からの回復速度を促進 する請求の範囲第１項に記載の使用方法。 ５）心臓の拍出容積を増すことにより心臓の拍出量を向上させる請求の範囲第１ 項に記載の使用方法。 ６）前記心臓拍出量が外傷、敗血症、心筋梗塞、外科手術、心臓炎症又はその組 み合わせの結果、低下する請求の範囲第５項に記載の使用方法。 ７）心筋梗塞を治療する請求の範囲第６項に記載の使用方法。 ８）人ＩＧＦ−Ｉが使用される請求の範囲第１項及び第３項乃至第７項のいずれ か１項に記載の使用方法。 ９）投与量が１．０１−１０ｍｇ／ｋｇ体重／日、望ましくは、０．１−２ｍｇ ／ｋｇ体重／日である請求の範囲第１項に記載の使用方法。 １０）前記投与方法が、経皮的、経筋肉、静脈内、経鼻、経口又は皮層を通じて 、又はこれら方法の組み合わせにより行われることを特徴とする請求の範囲第１ 項に記載の使用方法。 １１）前記投与が経皮的に行われることを特徴とする請求の範囲第１０項に記載 の方法。 １２）薬剤の投与、炎症、感染、敗血症、又は虚血症後の心筋障害を予防する請 求の範囲第２項に記載の方法。 １３）心筋梗塞、心筋炎、感染、又は、心筋虚血、及び心筋梗塞を予防する請求 の範囲第２項に記載の方法。 １４）心臓の拍出容積を増すことにより心臓の拍出量を向上させる請求の範囲第 ２項に記載の方法。 １５）前記心臓拍出量が外傷、敗血症、心筋梗塞、外科手術、心臓炎症又はその 組み合わせの結果、低下する請求の範囲第１４項に記載の方法。 １６）心筋梗塞を治療する請求の範囲第１５項に記載の方法。 １７）人ＩＧＦ−Ｉが使用される請求の範囲第２項及び第１２項乃至第１６項の いずれか１項に記載の方法。 １８）請求の範囲第１項に記載の使用方法にして、投与量が０．０１−１０ｍｇ ／ｋｇ体重／日、望ましくは、０．１−２ｍｇ／ｋｇ体重／日であることを特徴 とする方法。 １９）前記投与方法が、経皮的、経筋肉、静脈内、経鼻、経口又は皮膚を通じて 、又はこれら方法の組み合わせにより行われる請求の範囲第２項に記載の方法。 ２０）前記投与が経皮的に行われる請求の範囲第１０項に記載の方法。 ２１）その他の成長因子、ホルモン、結合蛋白又はＩＧＦ−１又はその有効な同 族体の所望の効果を促進させる受容体のような更なる蛋白、又はペプチドと、心 臓疾患の予防又は治療用の薬学的に許容可能な担体又は希釈剤と共に人ＩＧＦ− Ｉ又はその有効な同族体とから成る組成物。 ２２）薬学的に有効な量の人ＩＧＦ−Ｉ又はその同族体と、薬剤の投与可能な形 態を形成する担体又は希釈剤とを組み合わせたことから成る心筋の蛋白の合成を 促進し且つ心臓障害、又は心筋梗塞を含む急性心臓疾患、又は急性発作の予防、 又は治療用薬剤を製造する方法。 ２３）その他の成長因子、ホルモン、結合蛋白、又は人ＩＧＦ−Ｉ又はその有効 な同族体の所望の効果を促進させる受容体のような蛋白、又はペプチドを前記組 成分に添加する請求の範囲第２２項に記載の方法。