JPH06502539A

JPH06502539A - Ｈｉｖ−１　ｇｐ１２０のｖ３ループおよびｃｄ−４結合部位に特異的な中和ヒトモノクローナル抗体

Info

Publication number: JPH06502539A
Application number: JP4501832A
Authority: JP
Inventors: ティリー，シャーメイン・エイ; ピンター，エイブラハム
Original assignee: ザ・パブリック・ヘルス・リサーチ・インスティチュート・オブ・ザ・シティ・オブ・ニューヨーク・インコーポレーテッド
Priority date: 1990-10-26
Filing date: 1991-10-25
Publication date: 1994-03-24
Also published as: EP0554401A4; WO1992007878A1; CA2094713A1; EP0554401A1; AU9072991A; US5922325A; HU9301189D0; HUT66445A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

３１、不滅化されたヒト細胞系であって、その細胞系はＨＩＶ−エンベロ・ツブ糖タンパク質ｇｐ１２０に特異的であるヒトモノクローナル抗体を生産し、その抗体は（ａ）　ＨＩＶ−１株である、Ｉ　Ｉ　Ｉ　Ｂ、　３１Ｎ、　５Ｆ−２およびＲＦを中和し：（ｂ）　ｇｐ１２０に対して高い親和性を有し：（ｃ）　ｇｐ１２０の超可変ｖ３ループとは反応せず：（ｄ）　ＣＤ−４の存在でｇｐ１２０への結合から阻害される、不滅化されたヒト細胞系。３２、不滅化されたヒト細胞系であって、その細胞系はＨＩＶ−エンベロ・ノブ糖タンパク質ｇｐ１２０に特異的であるヒトモノクローナル抗体を生産し、その抗体は、（ａ）　ＨＩＶ−１のＩ　Ｉ　ＩＢ、　ＭＮ、　５Ｆ−２およびＲＦ株を中和し；（＋））　ＬＡＹ−２とは反応せず；（Ｃ）アセトンおよびメタノールの両方で固定したＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｄ）ホルムアルデヒド−固定ＨＩＶ−１感染細胞と反応し：（ｅ）生きているＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｆ）　ｇｐ１２０に対して高い親和性を有し：（ｇ）　ａｐ１２０の超可変額域ｖ３ループとは反応せず：（ｈ）　ＣＤ−４の存在においてｇｐ１２０への結合から阻害され：（ｉ）約ｌμｇ／ｍｌの濃度でＭＮ　ＨＩＶ−１株のｌＸｌ０’感染単位の５０％中和を達成し；そして（Ｄウィルスタンパク質のジスルフィド結合を減少する処理がなされたＩＩＩＩＶとは反応しない、形質転換ヒト細胞系。３３、ＥＢＶ形質転換により不滅化された請求項３１または３２に記載の細胞系。３４、抗体はカッパー型の軽鎖イソタイプおよびＩｇＧ１型の重鎮イソタイプを有する請求項３１または３２に記載の細胞系。３５、　ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１０５８２テ寄託された細胞系１１２５Ｈと同一の特性を有する請求項３２中のＥＢＶ−形質転換細胞系。３６．＾ＴＣＣＣＲＬ１０５８２で寄託された細胞系１１２５Ｈからクローンされた請求項３２に記載のＥＢＶ−形質転換細胞系。３７、　［１１Ｖ−１株であル＋７）ＩＩＩＢ、ＭＮ、５Ｆ−２およびＲＦ中に保持されティるｇｐ１２０！ピトーブに特異的なヒトモノクローナル抗体。３８、約１μｇ／ｍｌの濃度で、ＭＮ　［ＩＩＶ−１株のｌＸｌ０’感染単位の約９０％の中和を達成する請求項３７に記載のヒトモノクローナル抗体。３９、ＨＩＶ−エンペロツブ糖タンパク質ｐｇＬ２０に特異的なヒトモノクローナル抗体であって、その抗体は、（ａ）　ＩＩＩＶ−１のｌ　Ｉ　ＩＢ、　ＭＮ、　５Ｆ−２およびＲＦ株を中和し：（ｂ）　ｇｐ１２０に対して高い親和性を有し；（Ｃ）　ｇ＋）１２０の超可変領域ｖ３ループとは反応せず。（ｄ）　ＣＤ−４の存在においてｇｐ１２０への結合から阻害される、ヒトモノクローナル抗体。４０、＾ＴＣ０ＣＲＬ１０５８１で寄託された細胞系２１５４Ｂ、　１により生産された、エピトープ特異性を有する請求項３９に記載のヒトモノクローナル抗体。４１、＾ＴＣＣ＃　ＣＲＬ１０５８１で寄託された細胞系２１５４Ｂ、　１からクローンされた細胞から得た請求項４０に記載のヒトモノクローナル抗体。４２、　ＡＴＣＣ＃　ＣＲＬ１０５８０で寄託された細胞系２１７３Ｃにより生産された、エピトープ特異性を有する請求項３９に記載のヒトモノクローナル抗体。４３、　ＡＴＣｃ＃ＣＲＬ１０５８０で寄託された細胞系２１７３Ｃからクローンされた細胞から得た請求項４２に記載のヒトモノクローナル抗体。４４、　ＡＴＣＣ＃　ＣＲＬ１０５１１１２で寄託された細胞系１１２５Ｈにより生産された、エピトープ特異性を有する請求項３９に記載のヒトモノクローナル抗体。４５、＾ＴＣＣ＃　ＣＲＬ１０５８２で寄託された細胞系１１２５Ｈからクローンされた細胞により生産された請求項４４に記載のヒトモノクローナル抗体。４６、ＨＩＶ−エンペロツブ糖タンパク質ｇｐ１２０に特異的であるヒトモノクローナル抗体であって、その抗体は、（ａ）　ＨＩＶ−１のＩ　Ｉ　ＩＢ、　ＭＮ、　５Ｆ−２およびＲＦ株を中和し：（ｂ）　ＬＡＹ−２とは反応せず：（Ｃ）アセトンおよびメタノールの両方で固定したＦＩＩＶ−１感染細胞と反応し：（ｄ）ホルムアルデヒド−固定＋１１Ｖ−１感染細胞と反応し。（ｅ）生きているＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｆ）　ｇｐ１２０に対して高い親和性を冑し。（ｇ）　ＥＩＩＶ−１の超可変領域ｖ３ループとは反応せず。（ｈ）　ＣＤ−４の存在においてｇｐ１２０への結合から阻害され。（ｉ）約１μｇ／ｍｌの濃度で訃■ＩＶ−１株のｌＸｌ０’感染単位の５０％中和を達成し：そして（Ｄウィルスタンパク質のジスルフィド結合を減少する処理がされたＨＩＭとは反応しない、ヒトモノクローナル抗体。４７、カッパー型の軽鎖イソタイプおよびＩｇＧ１型の重鎮イソタイプを有する請求項４６記載のヒトモノクローナル抗体。４８、さらに毒素が付でいるヒトモノクローナル抗体を含む請求項３７ないし４７のいずれかに記載の治療薬。４９、　ｆｌＩＶ−１に対するワクチンとして使用するためのポリペプチド配列を決定するために、請求項３７ないし４７のいずれかに記載のモノクローナル抗体を使用することを特徴とする、モノクローナル抗体を使用するスクリーニング法。５０、請求項４０ないし４５のいずれかに記載の抗体が特異的であるエピトープから成る抗原（この抗原は、本質的にエピトープ特異性を有するこれら抗体の生産から成る免疫反応を誘導することができる）を医薬的に受容できるキャリアーと混合して含むワクチン。５１、モノクローナル抗体、モノクローナル抗体が特異的である抗原が上に被覆されている固相およびモノクローナル抗体と抗原との複合体を検出する手段を含む請求項３７ないし４７のいずれかに記載のモノクローナル抗体により認識されるエピトープに対する抗体の存在を測定するキット。５２、請求項３７ないし４７のいずれかに記載のヒトモノクローナル抗体の有効量を投与することから成る、■ＩＶ−１感染の予防および治療法。浄書（内容に変更なし）明細書［発明の名称］ＨＩＶ−Ｉ　ＧＰ１２０のＶ３ループおよびＣＤ−４結合部位に特異的な中和ヒトモノクローナル抗体［技術分野］本発明はＨＩＶ−１に対して中和能力を持つ抗体（“Ａｂｓ”）に関する。［背景技術］ＨＩＶを制御するための免疫学的方法における主たる問題点はウィルスゲノムの極端な可変性（対応する抗原の可変性に反映される）である。この問題により効果的なワクチン設計の試みならびに免疫療法の開発の試みが妨げられてきた。従って、中和されしかも変更しないエピトープの同定によりこの領域での大きな進歩が見こまれることが認められている。ＨＩＶエンベロープは２つの糖蛋白質、ｇｐ１２０およびｇｐ４１から構成されている。これらの糖蛋白質はウィルスに感染した細胞中でｇｐ１６０と称される前駆体としてまず合成される：この分子はピリオンの組立てに先立ってｇｐ１２０およびｇｐ４１に切断される。あとの２つの糖蛋白質は非共有結合的に互いに会合トランスメンブラン蛋白質ｇｐ４１を経てウィルスゲノム膜に付着している（Ｏｌｓｈｅｖｓｋｙ　ｅｔ　ａｌ、１９９０１＝総説としてまとめられティる）中和抗体を引き出すことが示されている一つの領域はｇｐ１２０のｖ３領域超可変ループ（ｈｖｌ−Ｖ３）（アミノ酸３０７−３３０）である；それはヒトおよび実験動物において強力な中和Ａｂｓを引き出す免疫優性エピトープクラスターである（Ｊａｖａｈｅｒｉａｎ　ｅｔ　ａｌ、１９９０に要約されティる）。最初Ｖ３ループの超可変性はこのエピトープに基づ（理論的ワクチンの設計を妨げるのではないかという懸念があった。しかしながら最近ＬａＲｏｓａ　ｅｔａｌ、（ＬａＲｏｓａ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）はＶ３ループは本来考えられていたより可変性が少ないことを示しており、加えて、より広範囲のＨＩＶ株特異性を持つ抗−Ｖ３　Ａｂｓが得られている（Ｊａｖａｈｅｒｉａｎ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）：これらのＡｂｓはループの先端に存在する保存性ヘキサマー配列（ＧＰＧＲＡＦ）を認識する。別々の研究者により３つの抗−Ｖ３ヒトモノクローナル抗体（ＨｕＭＡｂｓ）が単離されており、各々は比較的に株特異的でありウィルスのＭＮ株および非常に近い株のみを認識する（Ｓｃｏｔｔ　ｅｔ　ａｌ、１９９０．Ｚｏｌｌａ−Ｐａｚｎｅｒ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）。中和抗体を引き出すことが示されているＨＩＶエンベロープの別のエピトープクラスターはｇｐ１２０のＣＤ−４結合部位である。最近、ＣＤ−４結合部位はｇｐ１２０の複数の領域からの非隣接蛋白質ループにより形成されていることが示されている（Ｏｌｓｈｅｖｓｋｙ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）ｏ　しかしながら、ＣＤ−４結合部位の正確な構造およびその接触残基はまだ同定されていない。この部位に対する中和抗体は組換えｇｐ１２０または明らかにＣＤ−４結合部位を形成しているループの１つに隣接する直線状ペプチドを用いていくつかのげつ歯類で高められている（Ｓｕｎ　ｅｔ　ａｌ、１９８９．Ｌａ５ｋｙ　ｅｔ　ａｌ。１９８７、Ｂｅｒｍａｎ　ｅｔ　ａｌ、１９８９）。ヒト血清Ａｂｓが上に議論した線状ペプチドと結合することを示すことができないなどの理由もあってヒトはＣＤ−４結合部位に対するＡｂｓを産生しないと信じられていた（Ｓｕｎ　ｅｔ　ａｌ、１９８９．Ｌａ５ｋｙ　ｅｔ　ａｌ、１９８７）ｏ我々およびｍ＋１のグループ（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ、１９９０．Ｐｏ５ｎｅｒ　ｅｔ　ａｌ。１９９０）はＣＤ−４結合領域にマツピングされた配座（線状というよりも）エピトープに対するＨｕＭＡｂｓを単離した。これらのＨｕＭＡｂｓはいろいろな分岐したＨＩＶ−１株に対して中和活性を持っており、それ故、比較的保存性を示すエピトープを認識している。その結合がＣＤ−４により阻害されるＲｏｂｉｎｓＯｎ　ｅｔ　ａｌ、のヒトモノクローナル抗体はＨＩＶ−１のＭＮおよびＩＩＩＢ株を中和するがＲＦ株は中和しないことが示されている。ＲＦはノ１イチ人起源の株である。可能なかぎり広範囲に中和するヒトｍＡｂｓに対する要求が存在する。また可能なかぎり強＜ＭＮのような共通株を中和するヒトｍＡｂｓに対する要求も存在する。ＡＩＤＳ流行の初期において、ＨＩＶに対する中和Ａｂｓの防護機能につＧ）ては懐疑的であり、なぜならそのような抗体はＡＩＤＳを発症した血清陽性の個体で観察できたからである。現在、ヒトにおいてＨＩＶ感染の過程の間に現われる中和抗体の力価は一般的には非常に高（はなく　（Ｒｏｂｅ　ｒ　ｔ−Ｇｕ　ｒｏ　ｆ　ｆｅｔ　ａｌ、１９８５．Ｗｅｉｓｓ　ｅｔ　ａｌ、１９８５）、ある種の抗ＨＩＶのより高い力価はよりよい予後と本当に関連していること、およびＨＩＶに対して有害なＡｂｓ（ウィルス感染を実際に促進する）は血清陽性の個体に存在するであろうこと（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ、１９９０．Ｈｏｍ５ｙ　ｅｔａｌ、１９８８．Ｔａｋｅｄａ　ｅｔ　ａｌ、１９８８．Ｊｏｕａｕｌｔ　ｅｔａｌ、１９８９）がわかっている。さらに、最近の研究は４＞ｅｇにおけるある種の抗ＨＩＶＡｂｓの防御的効果を示している。そのような研究の１つにおいては、健康なＨＩＶ感染者からＡＲＣおよびＡＩＤＳ患者への高度免疫血漿の受動投与により、ｐ２４抗原の持続性清掃および受血者における抗ウイルス抗体力価の維持または増加を生じ、９人の受血者中５人に臨床的改善がみられた（Ｋａｒｐａｓ　ｅｔ　ａｌ、１９８８）ｏ別の研究においてはチンパンジーにＨＩＶ−血清陽性チンパンジーからの中和血清Ａｂと前もってインキュベートされたＨＩＶのＩＩＩＢ株の保存物を投与した。投与された動物は、ウィルスに応答する血清Ａｎの欠除による評価、およびウィルス単離の試みではウィルス感染から保護されていた（Ｅｍｉｎｉ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）ｏご（最近、組換えｇｐ１６０続いてのＶ３ループペプチドで免疫することによりＩ（ＩＶ感染に対して２匹のチンパンジーの長期間の防護に成功したことが示された（Ｇｉｒａｒｄ　ｅｔ　ａｌ、１９９１）。別の研究では、組換えｇｐ１２０で免疫されたチンパンジーはＨＩＶを投与しても感染から防護された（Ｂｅｒｍａｎ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）。両方のこれらのワクチンの試みにおいて、ウィルス投与に先立って株特異的中和Ａｂの著しい力価が誘導された。サブユニットワクチンは細胞毒性Ｔ細胞をほとんど誘導しないと考えられているので、得られた保護能力は主としてこの中和抗体によるものしと信じられる（Ｂｅｒｍａｎ　ｅｔ　ａｌ、１９９０参照）。げっ歯動物ｍＡｂｓの組合せによるウィルス中和は風疹（Ｇｅｒｎａ　ｅｔａｌ、１９８７）、小水庖性口内炎（Ｖｏｌｋ　ｅｔ　ａｌ、１９８２）、西ナイル（Ｐｅｉｒｊｓ　ｅｔ　ａｌ、１９８２）、シンドビスＣＣ］ｅｇｇ　ｅｔａｌ、１９８３）、日本脳炎（Ｋｉｍｕｒａ−ＫｕｒｏｄａおよびＹａｓｕｉ１９８３Ｌラクロス（Ｋｉｎｇｓｆｏｒｄ　１９８４）、−ニューカッスル病（Ｒｕｓｓｅｌｌ　１９８６）、呼吸全包体（Ａｎｄｅｒｓｏｕ　ｅｔ　ａｌ、１９８８）、ウシ　ヘルペスウィルス　タイプ４　（Ｄｕｂｕｉｓｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ。１９９０）ウィルスを含むある種の非ＡＩＤＳウィルスについて記載されている。これらの研究において、比較的高いレベルのウィルス中和が１つのｍＡｂｓ単独で達成されるよりも比較的低い濃度の２つまたはそれ以上のｍＡｂＳの組合せで達成された。しかしながら、我々の知識によるとＡｂｓの組合せによるＨＩＶの中和の改善は報告されていないのみならず、ヒトｍＡｂｓによるウィルスの相乗的中和は以前には示されていない。［発明の開示コ乗的組合せに関する。組合せ中のＡｂｓの１つはＨｒｖ−ｉエンベロープ糖蛋白質ｇｐ１２０のＶ３ループに特異的である。他のものはＨＩＶ−１工ンベロープ糖蛋白質ｇｐ１２０のＣＤ−４結合部位に特異的である。本発明はこれらのエピトープクラスター内のエピトープに特異的であり、組合せた場合相乗的にＨＩＶ−１感染を中和できるすべてのＡｂｓを含んでいる。好適には抗体はヒト　モノクローナル抗体であるが、本発明は同様な他の型の抗体にも関する。ヒトｍＡｂｓの相乗的組合せは好適には約０．　５マイクログラム／ｍｌの濃度でＨＩＶ−１のＭＮ株の約ｌＸｌ０’感染単位の９５％の中和を達成できる。本発明の好適な実施態様はインビトロで細胞株１１２５Ｈにより産生される抗体のｇｏ１２０への結合を競合的に阻害するヒトｍＡｂｓ、インビトロで細胞株４１１７Ｃにより産生される抗体のｇｐ１２０への結合を競合的に阻害するヒトｍＡｂｓ（これらはＨＩＶを相乗的にＨＩＶ感染を中和できる）から成る相乗的組合せを含んでいる。好適には本組合せは約０．５マイクログラム／ｍｌの濃度でＨＩＶ−１のＭＮ株の約１×１０４感染単位の約９５％を中和できる。本抗体組合せはＨＩＶ感染の処置または防止に使用できる。好適には抗体は一緒に使用されるが、それらを連続して投与してもよい。本発明はまたＨＩＶ−１工ンベロープ糖蛋白質ｇｐ１２０の■３ループに特異的なヒト　モノクローナル抗体を産生ずる細胞株も含んでおり、その抗体は細胞株４１１．７　Ｃにより産生される抗体のエピトープ特異性をｇｐ１２０に対して示す。本発明１；ｋｌ　Ｉ　Ｉ　Ｂ、　ＭＮ、５Ｆ−２およびＲＦ　ＨＩＶ−１株間で保存されているＨＩＶ−１工ンベロープ糖蛋白質ｇｐ１２０のＣＤ−４結合部位エピトープに対して特異的なヒト　モノクローナル抗体にも関する。本抗体はこれらの株のすべてを中和でき、抗原に対し高い親和性を持っている。これらのモノクローナル抗体を産生ずる細胞株、ならびに関連する治療的および防護的使用、薬剤、抗体を用いるスクリーニング法、ワクチンおよびアッセイキットも同様に本発明に含まれている。０と反応するｍＡｂｓ　１１２５Ｈ，２１７３Ｃおよび２１５４Ｂ、１の電気泳動パターンを表わしている。図２Ａ−２Ｃはｇｐ１６０被覆プレートおよびＣＤ−４阻害剤を用いた競合ＥＬＩＳＡを表わすグラフである。図３はＭＮ　ＨＩＶ−１株に対するｍＡｂ　１１２５Ｈの中和活性を表わすグラフである。図４はヒトｍＡｂｓ　１１２５Ｈ，２１７３Ｃ，２１５４Ｂ、１および４１１７Ｃの見掛は上の親和性を示している。図５は１１２５Ｈおよび４１１７Ｃ抗体の仮定される結合シナリオを示している。図６はヒトｍＡｂｓ　１１２５Ｈおよび４１１７ＣによるＭＮ株の相乗的中和を示している。図７はヒトｍＡｂｓ　１１２５Ｈおよび４１１７Ｃによる５Ｆ−２株の相乗的中和を示している。図８ａおよび８ｂは図６および図７に示した実験曲線から計算される組合せ指標値を表わしている。図９は４１１７Ｃのｇｐ１６０　ＭＮに対する結合における１１２５Ｈの影響（およびその逆も）を測定する実験の結果を示している。図１０はヒトｍＡｂｓ　５１４５Ａおよび４１１７Ｃ１：よるＭＮ株の相乗的中和を表わしている。図１１はヒトｍＡｂｓ　５１４５Ａおよび４１１７Ｃによる５Ｆ−２株の相乗的中和を表わしている。図１２はチノパンツー抗Ｖ３　Ａｂｓおよび１１２５ＨによるｌｌＩｂ株の相乗的中和を表わしている。［発明を実施するための最良の形態〕抗ＣＤ−４結合部位領域に対するある種の抗体および抗Ｖ３領域に対するある種の抗体を組合わせるとそれらが相乗的に作用すること、即ちそれらは個々の抗体に対して必要とされる濃度よりもより低い濃度でＨＩＶを中和することが発見れる単一のＡｂｓの量は多量で容易に得られないであろうことを示している。本組合せで高められた活性がこの問題点を克服することが見い出された。我々の知識によると、Ａｂｓの組合せによりＨＩＶの相乗的中和が観察されたのは初めてであり、ヒトｍＡｂｓによりウィルスの相乗的中和が示されたのも初めてである。さらに、我々はこれらの結果を米国で最も流行しているＨＩＶ株の２つ、ＭＮおよび５Ｆ−２に対して得た。我々の中和ヒトｍＡｂｓ　：　４１１７Ｃ（抗Ｖ３ヒトｍＡｂ）および１１２５Ｈ（抗ＣＤ−４結合部位ヒトｍＡｂ）の２つによるこれらの実験で得られた相乗作用の程度が数学的に分析された。これらの分析の結果はＨＩＶＭｓに対し１１２５Ｈおよび４１１７Ｃ間で観察された相乗作用は２つの薬剤または試薬間でこれまで見られたものよりも大きかった、即ち０．０１−０．２の組合せ指標（ＣＩ）値（Ｃｈａｕ、　１９９１）。これらの２つのヒトｍＡｂｓが１：１の比で組合わされた場合、３０−１５０の範囲の用量減少指標でＨＩＶＭＮピリオンの９５−９９％を中和する。このことは各々が単独で使用された場合に比べて組合せて使用された場合は３０−１５０分の１の総ヒトｍＡｂで同じレベルの中和が達成されることを示している。本発明のこれらの特別のｍＡｂｓがヒト起源であるという事実は、ヒトにおいて抗ウィルス剤として使用するためには明白な利点となる。これらの試薬はこの目的のためにげっ歯動物のＭＡｂｓより多くの利点を持っており、ヒトにおいての安定性の増加および非常に低い免疫原性などが挙げられる。即ち、ヒトＭＡｂＳはげっ歯動物のような他の種からのｍＡｂｓにより起こされる有害な抗イムノグロブリン応答を起こしに＜（、ヒトにおいてヒトｍＡｂｓの治療用量の安定なレベルを得ることが可能であろう。これらの観察は重要なことであるため、我々の発見の基となる理論的機構の決定を試みた。そのような知識は当業者が我々の発明の最適化を行う場合にその労力を減少させてくれるであろう。相乗作用を起こすことができる１つの機構は、他のＡｂ存在下でｇｐ１２０に対する１つまたは両方のＡｂｓの結合が促進されることである。組換えｇｐ１６０（適切なｇｐ１２０エピトープを含んでいる）がＥｌ、ＩＳＡプレート上に固定されている結合アッセイを用いて４１１７Ｃ存在下で１１２５ＨヒトｍＡｂのそのエピトープへの結合が２−３倍促進されることが示された。対照的に、４１１７Ｃのそのエピトープへの結合は同じ濃度範囲の１１２５Ｈの存在下では影響を受けなかった。そのような結合の一方向的な促進はラフロス（Ｋｉｎｇｓｆｏｒｄ　１９８４）および風疹（Ｇｅｒｎａ　ｅｔ　ａｌ、１９８７）ウィルスの相乗的中和に関与するｍＡｂｓの組で観察されている。４１１７Ｃにより誘導される１１２５Ｈの結合促進が単一ビリオン上の複数のｇｐ１２０分子で起こっていると仮定すると、ＨＩＶ中和において４１１７Ｃおよび１１２５Ｈ間で観察された強い相乗作用を容易に説明することができる（Ｌｕｓｓｅｎｈｏｐ１９８８）。現時点で、本発明の基となる理論についての我々の仮説は、４１１７ＣＡｂがＶ３ループに結合した場合にはＣＤ−４結合部位は１１２５ＨＡｂに対しより近づくことができるようになるが、一方、１１２５ＨがＣＤ−４結合部位に結合してもしていなくても、Ｖ３ループは４１１７Ｃに対して等しく近づくことができるということである（図５）。このモデルは、■３が接近可能な免疫優性エピトープクラスターであり、ＣＤ−４結合部位はより低い免疫原性エピトープクラスター（多分環もれた）であるとされている現在の概念に一致する。さらに、このモデルはこれらの中和エピトープに対するヒト体液免疫応答で観察されていることを説明できるであろう。特に、ＨＩＶに感染された個体は感染後数週間以内に■ ３ループに対するＡｂｓを産生ずるのに対し、ＣＤ−４結合部位に対する抗体は典型的には感染後１月では現れないことが観察されている。我々のモデルはインビボでの抗Ｖ３Ａｂｓの産生に続いてＣＤ−４結合部位がより免疫原性になるであろうことを示唆している（なぜなら抗Ｖ３Ａｂｓのｖ３への結合がＣＤ−４結合部位をより免疫系に開放するからである）。本発明はＣＤ−４結合部位および■３領域に対するポリクローナル抗体の使用ならびにこれらの領域に対するヒトｍＡｂｓの使用も包含している。ｖ３領域に対するチンパンジーポリクローナル抗体もまたこの様式で相乗的であることが示されている。しかしながら、免疫療法に全血清抗体のかわりにヒトｍＡｂｓを使用する重要な利点はモノクローナル抗体技術により均質な試薬を無制限に産生できることである。試薬はさらに特性付けされ、詳細に研究され、受動免疫療法またはＨＩＶの処置のための薬剤として使用されるであろう（下記参照）。不均一なヒト血清Ａｂｓはこの目的には使用できない；これらは入手可能な量が制限され、各々の個体により異なっており、阻止およびウィルス促進抗体を含む複雑な抗体の混合物から成っている。本発明の不死細胞株はまたヒトｍＡｂをコードしている発現された遺伝子のすべてまたは一部の単離を可能にしている。これら遺伝子は抗原に対する親和性がさらに高いヒトｍＡｂを産生ずるようにおよび／またはヒトｍＡｂのイソタイプ、イディオタイプまたはエフェクター機能を変更するために変形してもよい。発現系は遺伝子工学によるヒトｍＡｂｓをマウス細胞中で発現および分泌可能なように開発されている。一般的には、ＨＩＶ感染個体でヒトｍＡｂｓの治療的使用が最も効果的であるためにはヒトｍＡｂ　（ｓ）のミリグラム量の投与に続いての４７　Ｍ＝ｔ５での中和濃度が達成できるように中和ヒトｍＡｂ　（ｓ）はきわめて効力があるべきである。を持つ０，０３から３ｍｇ／ｍｌの中和Ａｂが必要とされるであろうことが推定されている（Ｌａｙｎｅ　ｅｔ　ａｌ、１９８９）、このことは患者当り約０゜１５から１５ｇのＡｂの投与を必要とするであろうし、そのような高い蛋白用量の投与に付随する副作用およびそのような多量の純粋な抗体を製造する困難さおよび費用のためそのようなより高い用量範囲は実行できそうもない。しかしながら、我々のｇｐ１２０のためのヒトｍＡｂｌ１２５Ｈの親和性はＣＤ−４よりも高い。我々が観察した相乗作用もヒトｍＡｂの濃度を非常に減少させることを可能にしている。理論にしばられることを望むわけではないが、本発明を使用する少くとも１−２桁の大きさく１０−１００倍）の用量減少指標が達成されると信じられる。即ち、本発明の相乗的中和ヒトｍＡｂｓの組合せは受動免疫療法またはＨＩＶ感染個体の処置のより実際的応用を可能にしている。ＨＩＶに対してのヒトｍＡｂ療法の使用において起こりそうな問題は中和からのがれるウィルス変異体の選択が起こりうることである。ＣＤ−４結合部位およびｖ−３ループ領域を変えて変異体が両方の中和ヒトｍＡｂにより認識されないようにするには２つまたはそれ以上の独立した突然変異が必要とされるので、単一のヒトｍＡｂの使用ではな（本発明に従ったヒトｍＡｂの組合せ使用によりこの問題点は著しく減じられると信じられる。本発明は相乗的にＨＩＶ−１を中和するＣＤ−４結合領域およびｖ−３ループ領域に対するヒトｍＡｂｓの組合せを含んでいる。これらの領域からのどの抗体が相乗的に働くかを決定するため、例えば以下に記載される方法により製造された各々のエピトープクラスターに対するヒト　モノクローナル抗体がスクリーニングされた。ＣＤ−４結合部位に対するヒト　モノクローナル抗体およびＶ−３領域に対するヒト　モノクローナル抗体の与えられた組合せは、各々の抗体の個々の中和活性と抗体組合せでのアッセイにおける中和活性を比較することによる相乗中和活性のための標準中和アッセイでスクリーニングできる。そのような中和アッセイの例は以下に記載されている。相乗作用を起こす抗体組合せの能力は個々の抗体が等しい濃度で存在する場合に得られた活性よりも著しく増加した中和活性により明らかであろう。相乗作用の程度は既知の統計法を用いた組合せ指標を計算することにより定量できる。例えば、与えられた抗ＣＤ−４結合部位ヒト　モノクローナル抗体は４１１７Ｃ抗体と組合せて著しく増加した中和活性がスクリーニングできる。同様に、与えられた抗Ｖ−３ヒト　モノクローナル抗体はそれを１１２５Ｈ抗体と組合せ同じ方法で中和活性を試験することにより相乗活性がスクリーニングできる。本発明の相乗的抗体を得るための別の方法は、工乞互上三でｇｐ１２０に対する１１２５Ｈの結合を競合的に阻害するＣＤ−４結合部位領域に対するヒトモノクローナル抗体を４１１７Ｃまたは工乞互上三でｇｐ！２０に対する４１１７Ｃの結合を競合的に阻害する抗体と組合せてスクリーニングすることである。本発明の組合せに用いられた抗体は１１２５Ｈおよび４１１７Ｃのように同一のエピトープクラスターに対して向かうものである。しかしながら、これらの特異的エピトープクラスター内の他のエピトープに対する（即ちＣＤ−４結合部位エピトープクラスターおよびＶ−３ループクラスター）ヒト　モノクローナル抗体もまた相乗的に作用することが決定された。例えば４１１７Ｃと相乗的に作用するが１１２５Ｈのものとは異なったＣＤ−４結合部位クラスター内のエピトープに向かう少くとも１つの別の抗体が観察された。５１４５Ａと名付けられたこの抗体について以下に記載する。本発明の範囲内の著しい相乗値は例えば図６および７に示された結果に対して実証されているものである。同様にこれらの結果に対して得られた組合せ指標値は本発明の範囲内の著しい相乗作用を実証している。相乗作用の尺度としての組合せ指標値はさらに以下に議論されている。好適にはヒトｍＡｂｓの相乗的組合せにより約０．　５マイクログラム／ｍｌの濃度でＨＩＶ−１のＭＮ株の約ｌＸｌ０’感染単位の９５％の中和が達成される。組合せの好適な実施態様においては細胞株１１２５Ｈにより産生される抗体のｇｐ１２０に対する歪と旦上三での結合を競合的に阻害するヒトｍＡｂｓの１つが、細胞株４１１７Ｃにより産生される抗体のｇｐ１２０に対する（７　ｅｔでいる。本発明の別の実施態様ではヒトｍＡｂｓの組合せが含まれており、ここでヒトｍＡｂｓの１つは本質的に細胞株１１２５Ｈにより産生される抗体のエピトープ特異性を持っており、他のヒトｍＡｂｓは細胞４１１７Ｃにより産生される抗体のエピトープ特異性を本質的に持っている。エピトープ特異性を決定する手段もまた本分野ではよく知られている。別の好適な実施態様においては、ヒトｍＡｂｓの１つは細胞株１１２５Ｈから得られるものと同一の特性を持っており、他のｍＡｂｓは細胞株４１１７Ｃから得られるものと同一の特性を持っている。本発明にはまた細胞株４１１７Ｃにより産生される抗体のエピトープ特異性を持つヒト　モノクローナル抗体を産生ずる形質転換細胞株も含まれている。これらの特異性を持つヒト　モノクローナル抗体もまた本発明に含まれている。前に示したごと（、記載してきたヒト抗体に加えて異なった起源からのポリクローナル抗体を用いてもよい。げっ歯動物およびチンパンジーにおいてＨＩＶｇｐ１２０の異なったエピトープに対する中和抗体を誘導するための方法は文献に記載されている。Ｖ３ループに対する抗体は合成Ｖ３ペプチドを遊離形でまたはＫＬＨと共役させて動物に免疫することによりげっ歯動物（Ｊａｖａｈｅｒｉａｎ　ｅｔ　ａｔ　１９９０）およびチンパンジー（Ｇｉｒａｒｄ　ｅｔ　ａｔ。１９９１）の両方で誘導されている。抗Ｖ−３抗体はまた精製ｇｐ１２０およびｇｐ１６０でチンパンジーを免疫することにより誘導されている（Ｂｅｒｍａｎｅｔ　ａｌ、、１９９０）。Ｖ３領域が免疫優性であり、抗Ｖ３抗体は抗ＣＤ− ４結合部位抗体に対して優勢であろうが、両方の領域に対する抗体がＨｉＶで感染させられたチンパンジーで産生可能である。これらのｇｐ１２０エピトープに対するモノクローナル抗体は常法によりマウスを免疫化することにより製造でき、ヒト細胞のためにここで説明されているＥＢＶ−形質転換法に従ってチンパンジーからもモノクローナル抗体が製造できる。Ｖ３領域およびＣＤ−４結合部位の両方に対する特異的抗体はイムノアフィニティ　クロマトグラフィーにより精製できる。１つの実施例においては、ＡＨ−セファロースビーズがグルタルアルデヒド処理により活性化され、精製ｖ３ペプチドまたは精製ｇｐ１２０を複合させる。Ｖ３に対する抗体は１０倍希釈の高度免疫血清をカラムに通して抗体を結合させ、非結合抗体を生理食塩水および０゜５Ｍ　ＮａＣ１溶液で洗い立すことにより得られる。■３〜特異的抗体は■３カラムからはトリス−グリシン緩衝液、ｐＨ２，７で洗うことにより溶出でき、一方ｇｐ１２０カラムからは過剰のｖ３ペプチドを通すことにより■３特異的抗体が溶出できる。ＣＤ−４結合部位に対する抗体はｇｐ１２０カラムからトリス−グリシン緩衝液で溶出でき、次に過剰の可溶性ＣＤ−４でＣＤ−４結合部位が遮断さていれる第２のｇｐ１２０−アフィニティヵラムを通すことにより精製される。これらの条件下、抗ＣＤ−４結合部位抗体はカラムに吸着されず、流出液中に観察されるであろうし一方すべての他の抗体は保持されるであろう。以下はＣＤ−４結合部位およびｖ−３ループに対するヒト　モノクローナル抗体がいかにして得られるかを記載したものである。ＨＩＶ−１−血清陽性個体からの末梢血がＨＩＶ−１エンベロープ蛋白質に対して高親和性のヒトｍＡｂｓを合成する形質転換クローナルヒトＢ細胞株の確立に使用された。ｆ（ｉＶ−１−血清陽性供与者は正常白血球細胞含量を持ち、日和見感染の経歴はない。ＣＤ−４結合部位に対して得られたヒトｍＡｂｓはＩＩＩＢ、ＭＮ、５Ｆ−２およびＲＦ株を含むＨＩＶ−ｉの分岐株に対し特異的であることが観察された。この能力を持つｍＡｂｓを産生ずる得られた３つの細胞株は本明細書では２１７３Ｃ，２１５４Ｂ、１および１１２５Ｈと称された。これら１；！ＡＴＣＣに各’４人番号ＣＲＬ１０５８０．ＣＲＬ１０５８１およびｃＲＬ１０５８２として寄託されている。Ｖ−３領域に対するヒトｍＡｂｓ、４１１７Ｃ，もまた得られており、それは前のｖ−３に対するヒト抗体よりも低い株特異性で反応する。このｍＡｂはＭＮ。５Ｆ−２および以下に記載する他の株を含む種々の株に特異的である。これはＡＴＣＣに受入番号ＣＲＬ　１０７７０番として寄託されている。これらの培養物は本発明を例示するものとして寄託されているがそのような物質を得るのを当業者に可能にする方法が以下に詳細に記載されている。寄託細胞株からのｍＡｂは同一または近くのエピトープに特異的なｍＡｂｓを産生ずる細胞株の同定のスクリーニングの助けとして使用できる。以下の詳細に説明された方法を用いるとこれらのｍＡｂｓを発現する細胞株が得られる。術語″中和“とは特に指示しないかぎり、本明細書では約１００μｇ／ｍｌを越えない濃度で、以下に記載する一夜中和アッセイにより評価されるように１０’ −１０５総感染単位の範囲内のＨＩＶ−１によるＨ９細胞のイン　ビトロ感染が少くとも９０％（抗体が加えられていない対照培養物と比較して）減少する抗体の能力を意味するために使用される。ＨＩ　Ｖ感染個体からの末梢血単核細胞が以下に記載するＧｏｒｎｙ　ｅｔ　ａｌ、（Ｇｏｒｎｙ　ｅｔ　ａｌ、１９８９）の方法の変形を用いてエプスタイン −パール　ウィルスで形質転換することにより不死化された。抗ＣＤ−４結合部位ｈｕｍＡｂｓ培養物は不死化培養物を組換えｇｐ１６０被覆ＥＬＩＳＡプレートを用いて抗−ｅｎｖの産生をスクリーニングすることにより得られた。スクリーニングにおいて組換え的に製造されたｇｐ１６０の使用は、培養物のスクリーニングに例えばＨＩＶ−１溶菌物（Ｇｏｒｎｙ　ｅｔ　ａｌ、１９８９）、固定されたＨＩＶ−１感染細胞（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ、１９９０　ＡＩＤＳ４：１ｌ−１９）；　（Ｐｏｓｎｅｒ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）またはＨＩＶ −１感染細胞の界面活性剤破壊上清液からのＣｏｎＡ−固定化糖蛋白質（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ、１９９０　ＡＩＤＳ　４：１ｌ−１９）を使用した他の研究者と異なっている。より高等な真核生物形質転換宿主がら得られた組換えｇｐ１６０が好適である。例えば、Ｋｉｅｎｙ　ｅｔ　ａｌ、（Ｋｉｅｎｙ　ｅｔａｌ、１９８８）による形質転換子ハムスター腎臓細胞により発現されたｇｐ１６０を使用した。Ｐａ５ｔｅｕｒ　Ｍｅｒｉｅｕｘにより供給されるｇｐ１６０のこのバージョンは通常切断されてｇｐ１２０およびｇｐ４１を生成する部位が欠除している。しかしながらこの切断部位の欠除はスクリーニング過程には何の影響も与えないと考えられており、本発明の抗体が特異的であるエピトープからは離れている。別の好適な供給源は他の形質転換された高等真核生物宿主から得られたｇｐ１６０またはｇｐ１２０が挙げられる。例えば、ＡＩＤｓ研究および基準試薬プログラム（Ｎ　Ｉ　）（）を通して入手可能なＬｅｏｎａｒｄ　ｅｔ　ａｌ、（Ｌｅｏｎａｒｄ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）による組換えｇｐ１２０もまた本発明のｍＡｂｓのための培養物のスクリーニングに有効であると信じられる。ＣＤ−４による競合阻害を試験する競合ＥＬＩＳＡは抗ＣＤ−４結合部位ｈｕＭ　ａ　ｂ　ｓを産生じている培養物の更なるスクリーニングのために実施できる。特にＩ　Ｉ　ＩＢ、ＭＮ、５Ｆ−２およびＲＦの４つの株にわたって広い中和活性を与えるエピトープに特異的である抗ＣＤ−４結合部位培養物を陽性として同定するために免疫蛍光および中和アッセイが実施されるであろう。さらに、ｈｖｌ−Ｖ３ループに存在するペプチドおよびｇｐ４１エピトープに存在するペプチドは本発明の抗ＣＤ−４結合部位ｍＡｂｓにより定義されたエピトープに対してのｍＡｂｓの特異性を確立するための陰性対照物として使用できる。これらのペプチドはより詳細に以下に記載されている。培養物が本発明の抗体の１つとしての同一のエピトープクラスターに対するｍＡｂｓを産生じているかどうかを決定するための別のスクリーニングは寄託した３つの抗ＣＤ−４結合部位抗体または抗Ｖ３ｍＡｂｓを用いる競合ＥＬＩＳＡアッセイにより行うことができる。そのようなアッセイは例えば組換えｇｐ１６０被覆ＥＬＩＳＡプレート上に存在するエピトープに対する結合で記載されたものとスクリーニングされている培養物からのｍＡｂｓが競合するかどうかを決定するものであろう。競合するｍＡｂｓは同一のまたは隣接するエピトープに対して特異的であろう。適切な競合アッセイが以下に記載されている。本発明の寄託された抗ＣＤ−４結合部位ｍＡｂｓはＬＡＶ−２とは反応しない。寄託された細胞株からのｍＡｂｓの各々はこれらの型はアセトンおよびメタノール固定ＨＩＶ−１感染細胞の両方と反応した。さらに、各々はまたホルムアルデヒド固定ＨＩＶ−１感染細胞とも反応し、認識されるエピトープが感染細胞の表面上に発現された場合にのみ結果が得られた。また寄託された細胞株からの３つのすべての抗体が生きているＨＩＶ−１感染細胞し反応することも示された。Ｖ−３領域に対する抗体を得るためスクリーニングにおいてＭＮ株のアミノ酸３０５−３２８から成るペプチドを組換えｇｐ１６０と置換した。その配列はＮＹＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮＩ　ＩＧＣでありＧｕｒｇｏ　ｅｔａｌ　１９８８に記載されている。４１１７Ｃはその下記の株の■３ペプチドとの反応性：ＭＮ、５Ｆ−２，ＮＹ−５，ＣＤ−４５１，ＷＭＪ−１，ＷＭＪ−３゜Ｚ−３，２−３２１およびＳＣ１および下記の株との反応性の欠除、ＷＭＪ−２゜ＬＡＶ−ＭＡ、ＢＲ，ＬＡＶ−Ｉ　Ｉ　ＩＢ、ＰＶ−２２，ＥＬＩ、Ｚ−６，ＮＸ３＝３．ＪＹ−１，、ＨＸＢ−２およびＭＡＬにより特徴付けられるであろう。前記の方法と同じように、寄託された抗体４１１７　Ｃの競合アッセイが関連する抗体を更に選抜するために実施されるであろう。特定のペプチドに対する抗体の反応性の試験が選抜される抗体の株特異性の決定に使用できる。寄託された抗体の中和能力が下記のように決定された。対照培養物（即ち抗体が加えられていない）のウィルス感染を検出するために典型的には一週間の期間を必要とする他の研究者の中和アッセイ（Ｈｏ　ｅｔ　ａｌ、１９８７）にかえて多量のウィルスが一夜中和アッセイで使用されたことを評価すべきであろう。それ故、数分の１のウィルスが加えられるアッセイよりも我々のア・ソセイにおける与えられた中和のレベルに影響を及ぼすには多量のｍＡｂが必要とされる。我々のｍＡｂｓによる中和の効率と数日のアッセイによりその中和活性が決定される他のｍＡｂｓの効率を比較するには、異なった研究で利用されたウィルスの組織培養感染単位の導入数を比較する必要がある。組織培養感染単位はＨ９細胞でのＨＩＶ−４増殖に対して２つの５０％組織組織培養感染単位ＣＩ　Ｄ）ではほとんど等しかった（Ｈａｒａｄａ　ｅｔ　ａｌ、１９８５）、この型の比較、および１１２５ＨｍＡｂがＭＮ（図３参照）およびＩＩＩＢ株をほとんど等しい効率で中和するという我々の観察に基づ（と、我々のＭａｂｓはＨＩＶ−１のいくつかの株を（はとんどではないにしても）Ｒｏｂｉｎｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ、のＮ７０−１．５ｅ　ｍＡｂ（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ、１９９０ヒト　レトロウィルス６：５６７−５７９：Ｈｏ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）またはＰｏ５ｎｅｒ　ｅｔ　ａｌ、のＦ１０５ｍＡｂ　（Ｐｏｓｎｅｒ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）が行うよりよい効率で中和すると推定された。４１１７ＣｍＡｂは１１２５Ｈとほとんど等しいＭＮ株の中和能力を持っており５Ｆ−２をより容易に中和するようである。これらの発見はＭＮおよび５Ｆ−２が米国で最も普通に代表される株の２つであるので特に重要である。我々の抗体のどちらがｇｐ１２０のＣＤ−４結合部位にまたは近辺に結合するのかを決定する実験が実施された。Ｌａ５ｋｙ　ｅｔ　ａｌ、（Ｌａｓｋｙ　ｅｔ　ａｌ、１９８７）および他の研究者により示され、ｇｐ１２０アミノ酸の３９７−４３９を含む（ＨＩＶのＨＴＬＶ−Ｉ　Ｉ　ＩＢ株（Ｇａｌｌｏ　ｅｔ　ａｌ、１．９８４）に対してのアミノ酸番号を用いて）この推定部位はＨＩＶ−１株間にわたって比較的保存されている。競合ＥＬＩＳＡアッセイにおいて組換えｇｐ１６０に対し可溶性ＣＤ−４が寄託された細胞株のｍＡｂｓの結合を阻害できるかどうかを決定する実験が実施された。その結果はＣＤ−４は濃度依存性様式でｇｐ１６０に対する抗ＣＤ−４結合部位ヒトｍＡｂｓの結合を本当に阻害したことを示していた。図４は記載した４つの寄託細胞株からのヒト抗−ｇｐ１２０の明らかな親和定数を示している。１０”Ｌ１モルの付近にに値を持つ抗体（Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙｅｔ　ａｌ、１９８９）が高い親和性を持つと考えられる。この規準によると、４つすべてのヒトｍＡｂｓはｇｐ１２０に対し高い親和性を持っている。ＨＩＶ−１溶菌物で調製された細長い板を用いるウェスタンプロ・ノド分析による抗ＣＤ−４結合部位ヒトｍＡｂｓのさらなる特性付けの結果ｍＡｂｓのこれらの型の３つすべてのエピトープがジスルフィド結合の還元により破壊されたことが示された。このことはそれらのエピトープはｇｐ１２０の３次元コンホメーションに依存しており、他の人により作られた線状が合成抗原（Ｌａｓｋｙ　ｅｔａｌ、１９８７；Ｓｕｎ　ｅｔ　ａｌ、１９８９）が我々のｍＡｂｓにより認識されるエピトープを含んでいることはなさそうである。むしろ、これらのｍＡｂＳのエピトープは多分ジスルフィド結合により適当なループ（類）を形成した場合にのみ認識される。抗体４１１７Ｃは非還元ｇｐ１２０に比較して還元ｇｐ１２０では反応性の減少を示すが、活性が完全に消失するわけではない。我々の寄託細胞株の４つのｍＡｂｓのイソタイプ特性付けが重鎮分析に対しては免疫蛍光アッセイの変法および軽鎖分析にはＥＬＩＳＡの変法を用いて決定された。免疫蛍光アッセイにより決定された重鎮イソタイプはＩｇＧ１であることが観察された。ＣＤ−４結合部位抗体の軽鎖のイソタイプはカツノくであると決定され、４１１７Ｃのそれはラムダであると決定された。方法はいかに記載されている。本発明のｍＡｂｓはＨＩＶ−１感染個体を処置するための療法に使用できる。ＨＩＶ−１誘発疾患の進行を遅くするため、これらはそれ自身でまたはＡＺＴまたはＤＤＩのような他の抗ウイルス治療と連結させて投与されるであろう。我々が発見した相乗的組合せはＨＩ　Ｖを中和するために必要とされる抗体量が少くてすむのでこの点で最も興味をそそるものである。記載されている単一ヒト抗体よりも明白な利点をこれらは提供する。本発明の相乗的抗体を投与するためには適当な比で混合された精製ＨｕＭＡｂＳの組合せが５０ｍｇ／ｍｌの濃度となる無菌生理食塩水の５％溶液に調製される。相乗的抗体の最良の比は以下に記載される２４時間蛍光フォーカスアッセイを用いて実験的に決定される。例えば、２つの抗体１１２５Ｈおよび４１１７Ｃの等しい効力を示す濃度が使用できる：即ち各々の濃度は互いに匹敵する中和レベルを与えるように決定されている。防護のために必要とされるこの溶液の量は動物実験で決定でき、最初にＨｕ−８ＣＩＤ７ウスで（Ｍｏｓｉｅｒ　ｅｔ　ａｌ、１９８８．ＭｃＣｕｎｅｅｔ　ｅｔ　ａｌ、１９８８）続いてチンパンジーで実施された。治療用試薬は最小では２つの相乗する抗体から成るけれども、最も有効な組成物は２つの主たる抗原部位に対する多数の異なった抗体を含んでいるであろうと考えられている。これは患者に存在するであろう異なったＨＩＶ変異体に対する抗体の交差反応性を増加させるためでありのがれる変異体の発生を防ぐためであり、および有害な抗イデイオタイプ応答の見込みを減少させるためである。抗体の親和性およびエフェクター活性を増加させるためにＩｇＧｓ、ＩｇＭｓおよびＩｇＡｓを含む異なったイソタイプの遺伝子工学による抗体を混合するのも有益であろうと考えられている。また、感染細胞を殺すことを増加させるため以下に説明するような毒素に複合させた抗体、および免疫細胞媒介細胞毒性機構への感染細胞の標的化を増加させるための遺伝子工学による二特異性抗体を含ませることも有益であろうと考えられる。入手可能なデータおよび理論的考察に基づくと、工乞叩でのウィルス拡散を防止するためには１から３０μｇ／ｍＩの相乗的中和抗体組合せの血漿濃度を達成することが必要であろうというのが合理的仮定である。１−５ｍ１の５％溶液（５０−２５０ｍｇ総Ｉｇ）が患者に静脈内注射で投与される。総血液容量を５Ｌと仮定し、すべての投与されたＩｇが血漿内に２週間の半減期で残ると仮定すると、ＨｕＭＡｂＳの初期血漿濃度は１０−５０μｇ／ｍｌの範囲になる。このレベルを維持するには２週間から２ケ月毎に注射が必要とされるであろう。処置はウィルス拡散を阻害するように管理されるが、適当な期間処置した後は免疫細胞毒性機構によりウィルス感染の減少または根絶につながるかもしれない。本発明のヒトｍＡｂｓの受動投与もまた、ＨＩＶへの急性暴露の場合におけるＨＩＶ−１感染の防止に使用してもよい。前に述べたごと（、ＨＩＶ−１血清陽性の母から生まれたヒト新生児中のＭＮ株のｈｖｌ　−Ｖ３領域に対する高親和性血清Ａｂｓの存在と新生児におけるＨＩＶ−１感染がないことの間に著しい相関があることが示されている（Ｄｅｖａｓｈ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）ｏ従って、ＨＩＶ−１血清陽性の母が彼女の胎児へ高親和性抗−ｈｖｌ−Ｖ３抗体を移送し、そのため誕生時に母から受けるであろうＨＩＶ−１から胎児が保護されていると結論付けることができる。Ｄｅｒａｓｈの結果はＨＩＶ−１に対する高親和性中和がＡｂがウィルス感染時に存在した場合ＨＩＶ−１感染から胎児を保護できるという証拠である。従って、本発明のＨＩＶ−１中和ｍＡｂｓは妊娠している血清陽性の女性に受動的に投与でき、彼女らの胎児がＨＩＶ−１感染になることを防止する。さらに、ｍＡｂｓの組合せはＨＩＶ−１へ暴露される時近くに個体に投与することによりＨＩＶ−１感染の防止に使用されるであろう。これらの応用に対してそれ自身のみでも優れたものである本発明の好適なｍＡｂｓの性質は：　１）−（＞ビトロで低いｍＡｂ濃度で示されたＨＩＶ−１中和活性、２）その広いＨＩＶ −１株特異性、３）その抗原（ＨＩＶ−１ｇｐ１２０）に対する高い親和性、４）それらはヒト起源であり、それ故ヒトに投与された場合、あったとしても有害な免疫反応が少ないであろうこと、および５）ｍＡｂｓの重鎖イソタイプがＩｇＧ１である、これは重要なことでありなぜならヒトＩｇＧＡｂｓは胎盤を通過できるＡｂの唯一の群であり、ＩｇＧ１亜群のＡｂｓは位叩におＬＸてＡｂ−および補体−依存性細胞毒性（ＡＣＣ）および／またはＡｂ−依存性細胞細胞毒性（ＡＤＣＣ）（下記参照）を通してＨＩＶ−１感染細胞を潜在的に殺すことができる。本発明のｍＡｂｓはそれ自体でＨＩＶ−１感染の防止に使用できるが、ｍＡｂＳへりシンＡまたはアメリカやまごぼう抗ウイルス蛋白質のような毒素を共有結合で結合することによりｄ＞ｌ１＝ｆ：でのその抗ウィルス活性を増強するために変形してもよい。そのような抗−ＨＩＶ−１ｍＡｂｓ−毒素（免疫毒素）は＜＞ビトロでＨＩＶ−１感染細胞を特異的に殺すことができることが実証されている。ＨＩＶ−１感染防止のためのこれらのｍＡｂｓの使用を考えると、ＡＣＣ，ＡＤＣＣを経るまたはｍＡｂと毒素との複合によりＨＩＶ−１感染細胞を殺すことはｍＡｂｓによりもしＨＩＶ−１の中和が１００％得られないことで生じる非常に少しのパーセントのＨＩＶ−１感染細胞を除去することにより我々のｍＡｂｓの中和活性を補完できるものである。本発明の抗ＣＤ−４結合部位ｍＡｂｓはＨＩＶ−１に対する免疫性を与えるワクチンの製造にも使用できる。それらが特異的であるエピトープを同定するように使用されるであろう（下記参照）。そのエピトープを含むペプチドは標準メリーフィールド合成技術を用いて化学的に合成しても、または本分野では既知の組換えＤＮＡ技術により合成してもよい。もし組換えＤＮＡ技術により調製するなら、より近い天然の蛋白質の二重のグリコジル化パターンのために高等な真核生物宿主を使用するのが好適であろう。例えば、ＣＨ○細胞における組換えＤＮＡに基づいたｇｐ１２０ペプチド合成の技術がＬａ５ｋｙ　ｅｔ　ａｌ、により記載されている（Ｌａｓｋｙ　ｅｔ　ａｌ、１９８６）。もしくは、非グリコジル化分子はグリコジル化分子と同等かより効果的であろうし；それらは細菌において、組換えＤＮＡ構築物からのｇｐ１２０ペプチドの発現により産生されるであろう（例えばＰｕｔｎｅｙ　ｅｔ　ａｌ、１９８６参照）。これらのペプチドが化学的に合成されたらおよび／または細胞により発現されたら、我々の抗ＣＤ−４結合部位ｍＡｂｓにより認識されるであろうエピトープ（または類似の構造）を再構成するためにペプチド間にジスルフィド結合を形成させなければならないようである。もし、ペプチドが化学的に合成されたら、ペプチド合成に続いて制御された酸化によりペプチド間にジスルフィド結合が形成できるが、一方細胞で発現されたペプチドはｄ＞ｅｉでンステイン残基間でそのような結合が形成されているようである。両方の場合において、全分子種のほんの一部が我々のｍＡｂｓにより認識される構造を形成していると予期される。ｍＡｂｓにより認識される分子種を同定するために共有結合で結合されたｍＡｂＳから成るアフィニテイ力ラムにペプチド誘導構造物の合成または発現混合物を通すことができる。さらに、ｍＡｂｓにより全混合物の何／（−セントが認識されるかを決定するために、ペプチド誘導構造物が前もって放射標識されている。結合ペプチド誘導構造物は配列決定およびアミノ酸組成分析に連結されたＨＰＬＣを用いたトリプシン　マツピングにより（Ｌｅｏｎａｒｄ　ｅｔ　ａｌ、１９９０）さらに特性付けできる。この方法により我々のｍＡｂｓによる断片の認識に必要とされる合成および／または組換えｇｐ１２０断片の最小構造要求性の限定が可能である。これは我々ののｍＡｂｓに対しよく認識それるエピトープ（またはエピトープ模倣物）としてより大きな合成構造が１度限定されたら種々のより小さなおよびわずかに異なった合成および／または組換えｇｐ１２０ペプチド誘導物が作り出せるからである。ワクチンを製造する別の方法は結合された本発明のｍＡｂｓを持つカラム上で化学的に（Ｌａｓｋｙ　ｅｔ　ａｌ、１９８７）または蛋白分解的に断片化したｇｐｉｅｏを精製することであろう。本発明のｍＡｂｓが特異的に結合するエピトープが濃縮された断片の混合物が得られる。前記のように有効性を試験した後これらの混合物は免疫化に使用できる。混合物から個々の断片を単離し使用してもよい。エピトープが合成または断片化により得られたら、げつ歯動物およびチンパンジーで効力が試験されるであろう。そのような試験においてはエピトープは単独で存在してもよいし、その免疫原性を増強するためキーホール　リンペット　ヘモシアニン（ＫＬＨ）のような担体に共有結合で結合されててもよい。免疫応答を促進させるためエピトープと共に水酸化アルミニウムのようなアジュノ（ントが含まれる。動物の血清が広範囲中和抗体（即ちＨＩＶ−１の分岐種を中和できる抗体）の出現のために試験できる。チンパンジーの場合、そのような抗体を発現している動物には次にＨＩＶ−１の異なった株を投与し抗ウイルス防護のレベルを評価した。チンパンジーにおいて組換えｇｐ１２０およびｇｐｉｅｏを用（吹そのようなワクチンの試みは最近報告されている（Ｂｅｒｍａｎ　ｅｔ　ａｌ。１９９０；Ｇｉｒａｒｄ　ｅｔ　ａｌ、１９８９）、Ｂｅｒｒｎａｎ　ｅｔ　ａｌ。は２匹のｇｐ１２０−免疫化チンパンジーは少くとも６ケ月続いて低用量のウィルスを投与しても防護されたが、型特異性防護のみの評価であった（ｇｐ１２０が誘導されたウィルスの同族体が投与された）。チンパンジーの免疫化に組換えｇｐ：ｔ６ｏを用いると、Ｇｉｒａｒｄ　ｅｔ　ａｌ、はｇｐ１６０開始動物に型特異性防護抗体を引き出すｈｖｌ−Ｖ３で動物が追加免疫されるまでは中和抗体の発現は観察されなかった。上に議論された両方の研究においてのｇｐ１２０ −ＣＤ−４結合を遮断できる中和抗体が引き出せなかったことはワクチンとして使用された全ｇｐ１２０またはｇｐｉｅｏは広範囲の中和抗体の引き出しには有効でないであろうことを示している。このことは１つの主な理由はｂｖｌ−Ｖ３領域が免疫優性であり、として有効に働くのでＣＤ−４結合部位のようなより保存的な分子の領域へ対する免疫系の応答を妨げている。ワクチン注射の目的には、それ数本発明の抗ＣＤ−４ｍＡｂｓにより認識されるエピトープに対する広範囲の中和Ａｂ応答を得るためにｇｐ１２０またはｇｐｉｅｏからｈｖｌ−Ｖ３領域および可能なら他の領域を除去するのが好適であろう。従って、上記のごとくして合成されたペプチドから既知の技術を用いる工学によりｈｖｌ−Ｖ３領域が除去された。同様に断片を含む混合物は既知の技術を用いてｈ　ｖ　］　−Ｖ３領域を含む断片が除去された。本発明の抗体が特異的であるエピトープを効果的に提示し、Ｉ　Ｉ　Ｉ　Ｂ、ＳＦ２゜ＭＮおよびＲＦを含むＨＩＶ−１株に対する広範囲の中和能力を引き出すワクチンは本分野では知られていない。そのようなワクチンは例えば全組換えｇｐ１２０またはｇｐｉｓｏが免疫化に使用された場合通常起こると考えられているようなｈｖｌ−Ｖ３に対する抗体を主として産生じないであろう。“効果的に提示する”とは、未感染個体の免疫化に使用された場合、個体への株の投与によりまたはイン　ビトロ試験で決定されるようにＩ　Ｉ　ＩＢ、５Ｆ−２、ＭＮおよびＲＦ株を中和する抗体の産生を抗原が引き出すことを意味している。本発明は本発明の抗ＣＤ−４結合部位抗体が特異的に結合するエピトープから成る抗原をとり入れたワクチンを含んでいる。本抗原は本発明の抗体のエピトープ特異性を持つ抗体の産生を本質的に含む免疫応答を引き出すことができる。我々のｍＡｂｓにより認識されるエピトープを模倣するｇｐ１２０の断片または構築物が１度得られたらＨＩＶ−２に対するワクチンを作るためにＨＩＶ−２からの相同エピトープが合成できる。ＨＩＶ−２ｇｐ１２０配列は既知であり、システィン残基（ジスルフィド結合を形成する）はＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２配列間、特にＣＤ−４結合部位の周辺領域で比較釣車（保存されている（Ｍｙｅｒｓ　ｅｔ　ａｌ、１９８９）ｏ従って、ＨＩＶ−２に対するワクチンは我々のｍＡｂｓで同定できるＨＩＶ−１のエピトープと類似のＨＩＶ−２構造に基づＬＸて得ることであろう。本発明の抗ＣＤ−４ｍＡｂｓの別の応用は、ｍＡｂｓにより認識されるＨＩＶ− １エピトープに応答する天然ヒト抗体を研究するための競合イムノア・ツセイにおけるその使用である（下記参照）。この型のアッセイは；１）どのくらいの比率でＨＩＶ−１感染個体がこのエピトープに対するＡｂを発現するか？　２）ＨＩＶ−１感染後どのくらいでおよび／またはＨＩＶ−１由来疾患のどの段階で特定のエピトープに対するＡｂが現れるか？　３）本エピトープに対し高いＡｂの力価を持つ個体はそのようなＡｂを持たない個体より予後が良いか？　４）本エピトープに対するＡｂを持つ母親の彼女らの胎児へのＨＩＶ−１の伝達は本エピトープに対するＡｂを持たない母親よりも少ないか？などの研究を可能にする。これらの研究が行われたら、そのようなＡｂｓの存在または不在と、ＨＩＶ−１感染の段階、ＨＩＶ−１感染個体の予後または介入のための適用との間の相関が明らかになるであろう。これらの場合、上記の競合的イムノア・ソセイはＨＩＶ −１感染の特定のパラメーターを決定するための診断ア・ソセイとして使用できる。従って、本発明はまた本出願で請求されている抗ＣＤ−４ｍＡｂｓのエピトープに対するヒトＡｂｓの存在を測定する試験キ・ソトも含んでいる。本キ・ソトは上記の特異性を持つヒト　モノクローナル抗体、本モノクローナル抗体が特異的である抗原で被覆された固体相、およびモノクローナル抗体および抗原間の複合体の形成を検出するための手段を含んでいる。ビオチン標識ヒトｍＡｂｓを用Ｌ）る競合ＥＬＩＳＡが以下に記載する競合阻害アツセイと同様に実施できる。そのようなアッセイは試料が本発明の抗体と競合する抗体を持っているかどうかを決定する。本発明のｍＡｂｓが結合する抗原の存在を決定するためのア・メセイは例えばサンドイッチフォーマットを用いて実施でき、固体相がＨＩＶエンベロープ番二対する抗体で被覆され、試料が添加され、本発明のビオチン標識ｍＡｂが添加される。洗浄後、酵素標識アビジンならびに酵素基質が添加される。このような一般的な型のアッセイは本分野ではよ（知られている。本発明はまた本発明の抗ＣＤ−４ｍＡｂｓが特異的である抗原を決定するためのキットも含んでいる。例えば、そのようなキットは本発明の抗ＣＤ−４ｍＡｂｓ、ＨＩＶ−１ｅｎｖに特異的な抗体で被覆された固体相および本発明のｍＡｂｓ、ＨＩＶ−１ｅｎｖに特異的な抗体およびｍＡｂｓが特異的であるＨＩＶ抗原の間の複合体の形成を検出するための手段を含んでいるであろう。そのようなサンドインチ型のイムノアッセイの実施は当業者にはよく知られている。イン　ビボでヒトにこれらの試薬の効力のある量を投与するためにはダラム量の本発明のｍＡｂｓが得られるのが好適であろう。これらの量はミニバイオリアクター中で我々のヒト細胞株を増殖させることにより得ることができる。加えて、ヒトｍＡｂ産生を増加させる費用節約法は：１）我々のＥＢＶ−形質転換株とヒト／マウス異種骨髄腫（Ｔｅｎｇ　ｅｔ　ａｌ、１９８３；Ｋａｚｂｏｒ　ｅｔａ！、１９８２）との融合および　２）報告されているヒトプライマー配列を用いるヒト細胞株から発現されたイムノグロブリンＶＨおよびＶＬ遺伝子のＰＣＲ増幅（Ｌａｒｒｉｃｋ　ｅｔ　ａｌ、１９８９）％続いてのヒト定常部遺伝子を含む入手可能な真核生物発現ベクター内へのこれらの遺伝子のクローニング（Ｏｒｌａｎｄｉ　ｅｔ　ａｌ、１９８９）である。もしくは本遺伝子は抗体産生ヒトまたは非ヒト細胞のｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡから直接的にクローン化できる。後者の構成物は次にマウス骨髄腫細胞株中で高いレベルでｍＡｂｓとして発現される。組換えモノクローナル抗体を産生じている形質転換細胞株は本発明の範囲内に含まれ、それにより産生される抗体も同様である。Ｆａｂ断片、Ｆ　（ａｂ）’　ｚ、Ｆｄまたは他の断片、キメラのごとく変形されたＦｃ領域または変異誘発によるイディオタイプ領域を持つ改変蛋白質なとも本発明のヒト　モノクローナル抗体として同一のエピトープへ結合する限り、モノクローナル抗体として同一の機能を持つ一部分も本発明に含まれる。そのような断片または変形抗体の製造技術は当業者にはよ（知られている（Ｐａｒｈａｍ１９８６）。ｈ　ｕＭａ　ｂ　ｓのその抗原への親和性および感染物を中和するこれらの抗体の能力はそのイソタイプを変えることにより著しく促進できることが従来の研究で示されている。例えば、群Ｂ連鎖球菌に対するヒトＩｇＧｍＡｂは標準組換えＤＮＡ法によりＩｇＭに変換された（Ｓｈｕｆｏｅｄ　ｅｔ　ａｌ、１９９１）。抗体の１ｇＭ形はＩｇＧよりＥＬＩＳＡアッセイにおいて約１００倍高い結合レベルを示し、１６分の１以下の薄い濃度で細菌の致死効果からマウスを防護することができた。 ■３または抗ＣＤ−４エピトープクラスターに対する本明細書に記載の抗体の中和活性の著しい促進がそのイソタイプを変えることより達成されることが期待できる。本発明の好適な治療用試薬は抗体の親和性およびエフェクター活性を増すためのＩｇＧｓ、ＩｇＭｓおよびＩｇＡｓを含む異なったイソタイプの遺伝子工学により得られた抗体の混合物から成ると考えられる。本発明は以下にさらに説明される。これらの実施例は例示のためにだけであり、本発明を制限すると考えてはならない。実施例ＨＩＶ−１の血清陽性型をもつ血友病患者から抹消血液を採取した。これらの患者はＷａｉｔｅｒ　Ｒｅｅｄの段階２Ａに分類される。すなわちこれらの患者の白血球数は正常値であり、日和見感染の経験がない。本発明によるヒトモノクローナル抗体を産生ずる細胞系の調製とスクリーニング新鮮なヘパリン処理した血液をＲＰＭ１１６４０培地（Ｆｌｏｗ）で１：３に希釈し、Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ　（Ｓｉｇｍａ）とともに４００Ｘｇで３０分間遠心することにより、抹消血液単核細胞を分離した。培地とＨｉ　ｓ　ｔｏｐａｑｕｅとの界面にある細胞を回収し、ＲＰＭ１１６４０培地により７〜８倍に希釈した。細胞を遠心回収（４００ｘｇ、３０分間）し、５ＱｍｌのＲＰＭ１１６４０培地に懸濁し、細胞数をカウントした後、同様にして再度遠心回収した。その後細胞を２Ｘ１０’細胞／ｍｌとなるように、ＲＰＭ１１６４０培地に１５％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）ウシ胎児血清（ＨｙＣｌｏｎｅ）、２ｍＭ　Ｌ−グルタミン、ペニシリン（５０ユニット／ｍｌ）およびストレプトマイシン（５０μｇ）を加えたもの（完全培地）に懸濁した。エプスタイン−バールウィルス（ＥＢＶ）の１００倍ストック液（Ｒａｕｂｉｔｓｃｈｅｋ等１９８５）を細胞の等温９８５最終的に１／１０の体積比となるように加え、細胞を３７℃、５％ＣＯ□の条件下で２５ｃｍ”フラスコで一晩培養した。翌日、細胞を穏やかに再懸濁し、ＲＰＭＩＩ６４０培地でおよそ１０倍に希釈して遠心回収した。沈殿を終濃度１０’細胞／ｍ１となるように完全培地に懸濁した。放射線処理（３５００ｒａｄｓ）を施したラット胚繊維芽細胞を完全培地に生やしたちの１００μｍをＵ字型の底の９６ウエルのプレートに分注し、これに先の細胞をウェルあたり１００μ＋　（１０００細胞）ずつ加えた。この培養細胞を一週間に一度培地を交換し、４週間にわたって培養した。その結果ウェルの４５％で細胞の増殖が見られた。これの上清について抗−ｅｎｖ抗体の産生についてアッセイを行った（以下を参照）。アッセイの結果が陽性のものについては、再び放射線処理を施したラット胚繊維芽細胞をいれた９６ウエルのプレートで翌週にアッセイを行った。再度陽性の結果が得られた細胞を１〜１００細胞／ウエルの範囲で、放射線処理を施したラット胚繊維芽細胞に加えて、細胞系の樹立を行った。プレートの中で増殖が見られたウェルの割合が、ポアソン分布により９５％以上の確率でモノクローナル性を示したもの（Ｃｏｌｌｅｒ等１９８５）については、抗−ｅｎｖｅ　Ｉｏｐｅ抗体の産生について再度検定し、陽性のものを大量培養した。この方法により１１２５Ｈ，２１５４Ｂ、１．２１７３Ｃおよび４１１７Ｃの各細胞系を得た。これらの培養細胞系のモノクローナル性については免疫グロブリンＪＨ遺伝子プローブを用いたサザンプロット解析により確認した。細胞系のクローン性を決定するためのサザンプロット解析同定された４種の細胞系からＤＮＡを調製し、制限酵素処理、アガロースゲル電気泳動の後ニトロセルロースフィルターにブロッティングし、二ソクトランスレーンヨンにより３２ｐで標識したプローブでハイブリダイゼーションを行った（Ｅｃｋｈａｒｃｌｔ等１９８２）。ＤＮＡをＨ４ｎｄｌｌＮ：より切断することで、ハイブリダイゼーションに際し、Ｖ−Ｄ−Ｊの免疫グロブリンゴ１．Ｉ領域をプローブとの連結による再配列を観察することができる（Ｒａｖｅｔｃｈ等１９８１）。Ｊ８プローブとして用いたのは、生殖腺Ｊ、遺伝子座由来の約３．３ｋｂのＥｃｏＲＩ−Ｈｉｎｄｌ　Ｉ　Ｉ断片であった。Ｈｉｎｄｌ　ｌ　１部位は生殖腺ＤＮＡの３′ 末端に存在する部位であり（Ｒａｖｅｔｃｈ、Ｊ、Ｖ、、Ｕ、５ｉｅｂｅｎ　Ｉ　ｉｓ　ｔ、ｓ、Ｋｏｒｓｍｅｙｅ　ｒ、Ｔ、Ｗａ　ｌｄｍａｎｎ、およびＰ、Ｌｅｄｅｒ、（１９８１）Ｃｅｌｌ　２７：５８３−５９１）、５°側のＥｃｏＲ１部位はクローニングに際して生じたものであった。４種の細胞系についてモノクローナル性が確認された。ヒト培養細胞系により生産されたヒト抗−ｇｐ１２０モノクローナル抗体の検出法ＨＩＶｅｎｖ特異的な抗体の検出にはＥＬＩＳＡアッセイを行った。ＥＢＶ形質転換したヒト培養細胞について抗−ｅｎｖ抗体の産生の一次スクリーニングを行う際には、組換えｇｐ１６０　（Ｋｉｅｎｙ等）またはＶ３．、ペプチドでｐｖｃＥＬＩ　ＳＡプレート（Ｆ　ｌ　ｏｗ／ＩＣＮ）をコートした。後に一次スクリーニングで陽性として同定された培養細胞の上清についてさらにアッセイを行う場合には、他の様々なＨＩＶタンパク質およびペプチドを、ヒトモノクローナル抗体の特異性の決定に利用することが可能である。このようなペプチドとしてはＩＩＩＢ株のｇｐ１２０が考えられる。コノタンパク質は、Ｃｅ１ｌｔｅｃｈ、Ｉｎｃで生産され、ＡｒＤｓ研究関連試薬計画（米国立衛生研究所）により入手可能であり、Ｌｅｏｎａｒｄ等１９９０に記載がある。また様々な株に由来する合成Ｖ３ペプチド（株の特異性については上記書に記載）または、ｐ１２１およびｇｐ４１ペプチド（アミノ酸５６５−６４６）の利用も考えられる。ｇｐ４１ペプチドはＤｕｐｏｎｔにより発売され、Ｃｈａｎｇ等の記載がある。またヨーロッパでの特許出願０１９９４３８が１９８６年１０月２９日に公開された。４１１７ＣはＩＩＩＢ株のｇｐ１２０およびｐ１２１に対して陰性であった。１１２５ＨはＶ３ペプチド、同じ＜ｇｐ４１ペプチドに対して陰性であった。他に記載のない限り、まずＮａ、ＣＯ，／ＮａＨＣＯ，緩衝液ｐＨ９，８で希釈した５　０　ｎ　ｇ／ウェルのタンパク質を、プレートで一晩４℃に置いた。翌日プレートをＰＢＳ／１ｗｅｅｎ／ａｚｉｄｅ　（ＳｉｇｍａのＰＢＳと０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０．１ｍＭ　ＮａＮ５）で３回洗った。次に（非特異的な結合を防ぐため）、ＢＳＡをＰＢＳ中で２％としたもの５０μｍで１．５時間、３７℃でインキュベーションして、プレートのウェルをブロックした。前回と同様に洗い、ヒト細胞系の上清５０μｍをウェルに加え、１４５時間、３７℃でインキュベーションした。結合しない抗体をウェルから洗い除き、ヤギの抗ヒトＩｇＧにアルカリホスファターゼ（Ｚｙｍｅｄ）を結合したものを２％ＢＳＡで１１５００に希釈し、５０μｌを各ウェルに加えた。上に述べた条件と同一の洗いとインキュベーションを行った後、アルカリホスファターゼの基質（ｐ−ニトロフェニルリン酸二ナトリウム）を１ｍｇ／ｍｌとなるようジェタノールアミン緩衝液（１Ｍジェタノールアミン、０．５ｍＭ　ＭｇＣｈ、３ｍＭ　ＮａＮ３、ｐＨ９，８）に溶かしたもの５０μｍを加えた。４０５ｎｍの吸光度をＴｉｔｅｔｅｋ　Ｍｕｌｔｊｓｋａｎ　ＰＩｕｓ　ＥＬＩＳＡｒｅａｄｅｒ　（Ｆｌｏｗ）により、基質を加えてから５分から２時間の範囲で測定した。ヒト細胞系の上清ではなく培地の吸光により得られたバックグラウンドの値は、ＥＬＩＳＡｒｅａｄｅｒで得られる結果から自動的に減算されている。ラジオ免疫沈降アッセイとウェスタンプロットアッセイラジオ免疫沈降アッセイに際しては、ＨＩＶ感染した細胞５〜７Ｘ１０’細胞／ｍｌの糖タンパク質を３Ｈ−グルコサミン（１００μｍ）で、既に記載されている（Ｐｉｎｔｅｒ等１９８８等色９８８ラベルした。この細胞を次に、すでに記載されたように（Ｐｉｎｔｅｒら、１９８８）溶解および免疫降下した。簡単に説明すれば、細胞沈殿を５Ｘ１０’細胞／ｍｌの濃度となるように細胞質抽出緩衝液に￥濁した。細胞質抽出液を、固定溶菌したブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）細胞（ＳｔａｐｈＡ）で前処理し、前処理の終わった細胞質抽出液を、７０μｍのヒト抗体産生細胞系の上清または１／４００に希釈したヒト血清７０μ ｍに加えた。インキュベーションと５ｔａｐｈＡによる沈降の後、既に記載のあるとおり（Ｌａｅｍｍｌ　１１９７ＯＬ沈殿を１％ＤＴＴを含むＬａｅｍｍｌｉ試料緩衝液に溶かし、１１％のポリアクリルアミドゲルで電気泳動した。フルオログラフィー（Ｂｏｎｎｅｒ等１９７４）により、ラジオラベルされ免疫沈降した糖タンパク質をゲル内から検出した。ウェスタンプロット解析を、ＨＩ　Ｖ−１に感染した細胞抽出液で調製したストリップを用いて、基本的にはＰｉｎｔｅｒ等１９８９等配９８９づいて行った。細胞抽出液を０．０１Ｍトリスハイドロクロライド（ｐＨ７，４）　、１０％グリセロール、０．０１％ブロモフェノールブルー、０または１％ＤＴＴ、１％ＳＤＳからなる緩衝液に溶解した。ウェスタンプロットのストリップを、１／２に希釈したヒト抗体産生細胞系の上清、または１／１００に希釈したヒト血清とともにインキュベートし、結合した抗体を記載された方法（Ｐｉｎｔｅｒ等１９８９等配９８９出した。ＨＩＶの株ＨＩＶ−１の１７７８株（Ｐｏｐｏｖｉｃ等１９８４＋Ｒａｔｎｅｒ等１９８５）とＳＦ２株（Ｌｅｖｙ等１９８４：５ａｎｃｈｅｚ−Ｐｅｓｃａｄｏｒ等１９８５）は、コーネル医科大学のＪｅｆｆｒｅｙ　Ｌａｕｒｅｎｃｅ博士から得た。ＭＮ株（Ｇａｌｌｏ等１９８４；　Ｓｈａｗ等１９８４）とＲＦ株（Ｐｏｐ。ｖｔｃ等１９８４；５ｔａｒｃｉｃｈ等１９８６）は米国国立衛生研究所ＡＩＤＳ研究試薬管理部から得た。Ｉ　ＩＩＢ、ＭＮ、ＲＦの各株の特性は、各株の超可変■３ループ（ｈｖｌ−ｖ３）に対する特異的な抗血清を用いたイムノフルオロセンスアッセイにより確認した。ＩＩＩＢ特異的なチンパンジー抗血清は、パスツール研究所のＭａｒｃ　Ｇｆｒａｒｄ博士と共同研究により得られた。これに対しＭＮおよびＲＦ特異的なウサギ抗血清は、ニューヨーク血液センターのＲ。ｂｅｒｔ　Ｎｅｕｒａｔｈ博士のご厚意により提供された。ＨＩＶ−２株であるＬＡＶ−２（Ｃ１ａｖｅ　１等１９８６）はパスツール研究所のＬｕｃ　Ｍｏｎｔａｇｉｅｒの許しを得てニューヨーク医科大学のＡｌｖｉｎ　Ｆｒｉｅｄｍａｎ−Ｋｉｅｎ博士から得た。 −Ｅ−）クローナル抗体のＨＩＶ株特異性に関するイムノフルオロセンスアッセイイムノフルオロセンスアッセイに際しては、細胞を多スポット顕微鏡スライドグラス（Ｓ　ｈ　ａ　ｎ　ｄ　ｏ　ｎ）に付着するのに先だってスライドをポリーＬ−リシン（１００μｇ／ｍ１ＰＢｓ、５０ｍ１／ウエル）で室温で３０分間処理した。その後スライドグラスを蒸留水で洗浄し乾燥させた。１００％ＨＩＨ −１感染させた、または非感染の細胞を滅菌したＰＢＳで洗い、１〜２Ｘ１０’ 細胞／ｍｌの濃度となるようにＰＢＳに再懸濁し、ポリーＬ−リジンでコートしたスライドグラス（５０μｌ細胞懸濁液／ウエル）で３７℃、３０分間インキュベートした。その後スライドホルダーとトレイを用いて、１００〜２００ｍ１のＰＢＳで２回スライドグラスを洗った。ホルムアルデヒド固定のため、１０ｍＭ　ＮａＮ３を含有するＰＢＳ中０．５％ホルムアルデヒドをスライドグラスの各ウェルに加え、固定された細胞とともに３０分間室温でインキュベートした。スライドグラスを蒸留水で１回、上に述べたように洗浄し５、乾燥させた。アセトンおよびメタノール固定の場合には、上に述べたＰＢＳでの２回の洗浄の後、スライドを蒸留水で１回洗い、１００〜２００ｍ１のアセトンおよびメタノールで８分間インキュベートシた。この後固定液からスライドを取り出し、風乾した。スライドグラス上に固定した細胞にヒト抗体を加える前に、ウシγグロブリンをＰＢＳで１ｍｇ／ｍ＋としたものとスライドグラスを３０℃で３０分間インキュベーションすることにより、非特異的な結合をブロックした。スライドグラスをＰＢＳで２回、蒸留水で１回洗った後、風乾した。希釈していないヒト抗体産生細胞の上清、またはＰＢＳ中の１ｍｇ／ｍ＋のウシγグロブリンで１／１００〜１／２００に希釈した血清を、スライドグラスのウェル中の固定された細胞に２０〜５０μｍ加え、３７℃で１時間インキュベートした。上に述べたように洗浄と乾燥を行った後ＦＩＴＣ（Ｚｙｍｅｄ）に結合したヤギ抗ヒトＩｇＧを、ウシ γグロブリンでＰＢＳで１ｍｇ／ｍｌとしたものの１１５０に希釈物と、スライドグラスとを、前のステップと同様にインキュベートした。先に述べたとおりスライドグラスを洗浄、風乾し、０．０５％エバンスブルーで１０分間、室温で細胞を対比染色した。その後スライドグラスを蒸留水で徹底的に洗浄し、風乾した。最後にＰＢＳ中０．０３３Ｍ　ＤＴＴ、５０％グリセロールとしたものをウェルあたり２ＢＩ加え保存剤とし、ウェルの上にカバーグラスをかぶせ、ニコンＤ１ａｐｈｏｔ蛍光顕微鏡下でスライドを観察した。モノクローナル抗体のアイソタイプの決定重鎮のサブグラス分けは、イムノフルオロセンスアッセイを改変した方法により決定した。ヒトモノクローナル抗体を産生ずる細胞をスライドグラス上にのせ、アセトンで固定した。スライドグラスをウシγグロブリンを用いて上で述べたのと同様にしてブロックおよび洗浄した。次にヒトＩｇＧのサブクラスに特異的なマウスモノクローナル抗体（Ｚｙｍｅｄ）（本実験では特に抗ＩｇＧ１と抗ＩｇＧ２を用いた）を加え、１時間、３７ ℃でインキュベートした。スライドグラスを洗浄および乾燥した後、ビオチン化ヤギ抗マウスＩｇＧ　（Ｚｙｍｅｄ）　、１／２００希釈物、を加えて３７℃で１時間インキュベートした。スライドグラスを洗浄、乾燥した後、１１５０希釈したＦＩＴＣ／ストレプトアビジン（Ｚｙｍｅｄ）を加え、１時間、３７℃でインキュベートした。スライドグラスを洗浄、乾燥した後細胞を対比染色し、先に述べたのと同様に観察した。軽鎖のアイソタイプは、先に述べたＥＬＩＳＡアッセイの改変により決定した。モノクローナル抗体産生ヒト細胞の上清をｇｐ１６０とともに二連のＥＬＩＳＡウェル中でインキュベーションした後、一方のウェルはヤギ抗ヒトに抗体にアルカリホスファターゼを結合したもので、もう一方のウェルはヤギ抗とトλ抗体にアルカリホスファターゼを結合したもので発色させることにより、モノクローナル抗体のアイソタイプを決定した。発色に用いた抗体（Ｔａｇｏ）はいずれも１／３２５０に希釈して使用した。競合阻害アッセイこのアッセイは先に述べたＥＬＩＳＡ法を改変して行った。ＥＬＩＳＡプレートをｇｐ１６０でコートし、ＢＳＡでブロックした後、洗浄した。ＣＤ−４阻害実験では、ヒト抗体産生細胞の一定量の上清を、エッペンドルフチューブの様々な量の可溶化したＣＤ−４（ＰＢＳに溶かしたもの）に加え、総量が一定となるようにＲＰＭＩを加えた。混合の後、上清／ＣＤ−４混合液を５０μｌ／ウエルとなるようにＥＬＩ　ＳＡプレートに分注した。ＥＬＩＳＡ法の残りの操作は上に述べたのと同様に行った。中和アッセイ中和アッセイの実施前に、ヒトモノクローナル抗体の精製を行った。精製の方法はＨａ　ｒ　ｌ　ｏｗ等１９８８に記載された方法に基本的に則って、組換えプロティンＡセファロースカラムを通すことにより行った。モノクローナル抗体を含むカラム画分は（画分の一部をＥＬＩＳＡアッセイに用いることで決定した）、ＡＭＩＣＯＮ　ｃｅｎｔｒｉｐｒｅｐ３０カラムで濃縮し、ＰＢＳに対して透析をから同様の方法で精製した。精製したＬＡ２モノクローナル抗体は、中和アッセイおよび競合阻害アッセイの陰性コントロールとして用いた。中和アッセイは以下のように行った。精製した抗体または複数の抗体混合物を１０％ＦＣ８を含む完全培地で希釈し、総量の１００μｍで濃度が０．　１〜２０ μｇ／ｍｌの範囲になるようにした。この溶液には約１０４〜１０’の組織培養細胞感染ユニットのＨＩＶ−１が含まれる。ウィルスとモノクローナル抗体を室温で３０分間ブレインキュベーションした後、各混合液にｌＸｌ０’のＨ９細胞を加え、体積を最終的に２００μ■とした。３７℃で一晩インキユベーシコンしてから、各ウェルの細胞をポリーＬ−リシンでコートしたスライドグラスの別々のウェルに移し、ラットの抗−ｎｅｆ抗体（１／２００）　、ＦＩＴＣに結合したウサギの抗うットＩｇＧ抗体（１１５０）（Ｚｙｍｅｄ）で順次染色した。これら後者の二つの抗体はウシγグロブリンをＰＢＳで１ｍｇ／ｍｌとしたもので希釈して用いた。細胞をエバンスブルーで対比染色し、蛍光顕微鏡下で免疫抗体反応で蛍光を発する細胞数を対比染色された全細胞数に対して計数することにより、各培養細胞系で感染した細胞が対照（モノクローナル抗体を加えていない）に対して占めるバーセンナーンを評価した。モノクローナル抗体の特異性１１２５Ｈ，２１７３Ｃおよび２１５４Ｂ、１のｇｐ１２０に対する特異性は、組換えｇｐ１２０に対する上清のＥＬＩＳＡ反応性、およびＨＩＶ−１に感染した細胞の抽出液を用いたラジオ免疫沈降／ＳＤＳゲル解析により決定した。図１は結果を示したものである。左のパネル（レーン１〜５）ではＩＩＩＢ株に感染したＨ９細胞の抽出液を用い、これに対し右のパネル（レーン６〜１０）ではＲＦ株に感染したＨ９細胞の抽出液を用いた。これらの抽出液を以下のものと免疫沈降させた。１／４００に希釈した、ＨＩＶ−１血清陽性の感染者のヒト血清（レーン１．６Ｌ０．７μｇの精製した１１２５Ｈモノクローナル抗体（レーン２．７）、１１２５Ｈ（レーン３．８）　、２１５４Ｂ、１　（レーン４．９）、２１．７３Ｃ（レーン５．１０）細胞の希釈していない上清。最後に挙げた３種の上清は、約１〜３μｇ／ｍｌのモノクロ・−ナル抗体を含んでいた。ヒト血清についての結果（レーン１、陽性コントロール）は予想どおりＩＩＩＢタンパク質、ｇｐ１６０　（ＲＰ、、、、エンベロープ前駆体タンパク質）、ｇｐ１２０　（ＳＵ、、、、表面エンベロープタンパク質）、ｇｐ４１　（ＴＭ、、、、膜貫通エンベロープタンパク質）が免疫沈降したことを示している。ＲＦ株の対応する糖タンパク質（レーン６）は、それぞれ見かけ上の分子量がＩＩＩＢ株のもの（レーン１）より低分子側に移動している。これらの分子についてはＲＦ株とＩＩＩＢ株とでアミノ酸残基数に大きな違いがない（Ｓｔａｒｃｆｃｈ等１９８６）ことから、この泳動度の違いはＲＦ株とＩ［Ｂ株の糖タンパク質との糖鎖付加の違いにちがいない。ｇｐ１６０、ｇｐ１２０．ｇｐ４１の名称は、ＨＩＶ−１のＩＩＩＢ株に関連する単離物に与えられたものであるが、見かけ上の分子量が１６０．１２０．４１キロダルトンの位置に移動する糖タンパク質のみに当てはまるので、我々はより適当な名称として、ＰＲ，、、、ＳＵ、、、、ＴＭ、、ヤという名称を用いた。この名称はこれらの分子の見かけの分子量よりも、特異的なタンパク質構造と機能を示唆している。我々のモノクローナル抗体の結果（レーン２〜５および７〜１０）は、これらがＳＵ、、、配列を含むＰＲ，、ヶおよびＳＵ、、、自身とのみ反応し、ＴＭ、、、　（Ｉ　Ｉ　Ｉ　Ｂ株のｇｐ４１）とは反応しないことから、ＳＵ、、、　（？　Ｉ　Ｉ　Ｂ株のｇｐ１２０）に特異的であることを示している。しかもこのモノクローナル抗体は、ＲＦ株およびＩＩＩＢ株のＳＵ、、、分子の両者を認識する。以上からこれらのヒトモノクローナル抗体はｇ　ｐ　１２０に対してきわめて特異的であり、ＩＩＩＢおよびＲＦ株の糖タンパク質に対する反応性が示された。４１１７Ｃヒト抗体は、ＥＬＩＳＡおよびウェスタンプロット解析からｇｐ１２０に対して特異的であることが示された。ウィルスの株特異性１１２５Ｈ，２１７３Ｃ，２１５４Ｂ、１および４１１７Ｃモノクローナル抗体特異性について、数種のＨＩＶ株のうちの一つで感染させた細胞を固定したものを用いて、イムノフルオロセンスアッセイを行い試験した。抗−ＣＤ−４モノクローナル抗体は、Ｉ　Ｉ　ＩＢ、ＭＮ、５Ｆ−２およびＲＦのＨＩＶ−１各株に対して反応性を示し、試験した二種の初期ＨＩＶ単離単離一種（ＪＲＣ３Ｆ）に対しても反応性を示した。これらの抗体のいずれもＨＩＶ− ２単離株の一種であるＬＡＶ−２に対しては反応しなかった。３種のモノクローナル抗体は全て、アセトンおよびメタノールで固定したＨＩＶ感染細胞に対して反応した。さらに各モノクローナル抗体は、ホルムアルデヒドで固定したＨＩＶ −１感染細胞に対しても反応した。発明者により得られたこの結果は、モノクローナル抗体が認識するエピトープが細胞表面に発現される場合にのみ得られるものである。それぞれのモノクローナル抗体は、ＨＩＶに感染した生きた細胞とも反応した。４１１７モノクローナル抗体は、ＭＮ、５Ｆ−２、ＪＲＣ３Ｆ初期単離株に対して反応し、ＦＶおよび１１６９９の二種の株にも反応したが、１．　Ｉ　Ｉ　ＢとＲＦ株に対しては反応しなかった。ＣＤ−４競合１１２５Ｈ，２１７３Ｃおよび２１５４Ｂ、１モノクローナル抗体が認識するエピトープが、ｇｐ１２０のＣＤ−４結合部位中もしくはその近傍にあるか否かを検討するため、発明者のモノクローナル抗体の組換えｇｐ１６０への結合に関する可溶性ＣＤ−４の阻害能を、競合ＥＬＩＳＡアッセイにより調べた。結果を図２に示した。図２Ａでは白丸は５０−６９の上清すなわち抗ｇｐ４１ヒトモノクローナル抗体（Ｇｏｒｎｙ等１９８９）を表す。図２Ａの黒い四角は１１２５Ｈの上清を示す。図２Ｂは２１７３Ｃの上清の結果を示し、図２０は２１５４Ｂ、１の結果を表す。この結果から、５０−６９　Ｃコントロールモノクローナル抗体）のｇｐ１６０に対する結合は可溶性ＣＤ−４により阻害されないのに対し、他の３種ノモ／　’ｙ　ｏ−ｆ−ル抗体（１１２５Ｈ１２１７３Ｃ１２１５４Ｂ。１）の場合には、濃度に依存した様式でＣＤ−４による阻害を受けていることがわかる。これら可溶性ＣＤ−４の非存在下で４つのヒトモノクローナル抗体で吸光度に違いが見られたのは、絶対濃度の違い、かつまたはアッセイに用いた上清中の抗体の親和性の違いによるものである。各実験に用いたモノクローナル抗体の濃度を考慮すれば、ＣＤ−４はそれぞれのモノクローナル抗体のｇｐ１６０に対するほぼ同程度に阻害しているといえる。これらの結果は以下のことを示している。ａ）これらのモノクローナル抗体の認識するエピトープは、ＣＤ−４の結合部位中もしくはその近傍にある。あるいはｂ）ＣＤ−４のｇｐ１６０に対する結合はｇｐ１６０のコンフオメーンヨンの変化を起こし、その結果モノクローナル抗体とエピトープが接近できなくなる。我々はｇｐ１２０の部位特異的な変異体に対するこの抗体の結合に関する研究から、実際にはエピトープがＣＤ−４結合部位中に存在すると考えている。モノクローナル抗体の親和性ｇｐ１６０またはＶ３Ｍ、に対するモノクローナル抗体の親和性は、これらの抗体を既知の濃度に希釈し、プレートを様々な濃度に希釈したｇｐ１６０、Ｖ３．。でコートしてＥＬＩ　ＳＡアッセイを上記のように行うことで決定した。抗体の結合量の半最大値を与える濃度は、およそ１／にで表されることが既に示されている（ｖａｎ　Ｈｅｙｎｉｎｇｅｎ等１９８７）。これらの測定結果は表１に示した。１０９Ｌ１モルの近傍のに値で、抗体は高い親和性を持つと考えられる（Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙ等１９８９）が、この値で我々のモノクローナル抗体４種はいずれもｇｐ１２０に対して高い親和性を持っている。鎖のアイソタイプ１１２５Ｈ，２１７３Ｃ，２１５４Ｂ、１および４１１７Ｃモノクローナル抗体のそれぞれの重鎮のアイソタイプはＩｇＧ１であると決定された。抗−ＣＤ−４結合部位型のモノクローナル抗体３種は軽鎖のアイソタイプがにであるのに対し、４１１７Ｃはλであることがわかった。これらの結果は上に記載した方法により得られた。中和能ｉｎ　ｖｉｔｒｏの中和アッセイの結果から、ヒトモノクローナル抗体１１２５Ｈ，２１７３Ｃおよび２１５４Ｂ、１１ｔＩ　ｒ　ＩＢ、ＭＮＳＳＦ−２、ＲＦのＨＩＶ−１株に対して有力な中和能を持つことがわかった。１１２５ＨがＭＮ株に対してもつ有効な中和活性を図３に示した。ヒトモノクローナル抗体４１１７ＣはＭＮおよび５Ｆ−２株に対して有力な中和能をもち、この結果はそれぞれ図６、図７に示したとおりである。モノクローナル抗体１１２５Ｈ１２１７３Ｃ１２１５４Ｂ、ｌのｇｐ１２０のエピトープの還元条件下での破壊還元条件下または非還元条件下でのＨＩＶ−１抽出液に対して、１１２５Ｈモツクローナル抗体を用いてウェスタンプロ・ソト解析を上に記載した方法で行った。非還元条件下での抽出液のストリップでは、１２０ｋＤの位置にバンドが観察された（データは示していない）が、還元条件下のストリップではモノクローナル抗体とＨＩＶ−１抽出液との反応は見られない。これらの結果は、ジスルフィド結合が還元されることによりモノクローナル抗体のエピトープ（一つまたは複数）が破壊されることを示している。ヒトモノクローナル抗体の定量この決定に際しては、ヤギ抗ヒトＩｇＧ　（Ｚｙｍｅｄ）（１０μｇ／ｍ１．１％Ｂ　Ｓ　Ａ／Ｐ　Ｂ　Ｓ中の）でプレートをコートし、上清中の抗体または精製した抗体標品を捕獲させることにより、ＥＬＩＳＡを行った（Ｇｏｒｎｙ等１９８９）。結合したヒト抗体はアルカリホスファターゼ（Ｚｙｍｅｄ）を結合させたヤギ抗ヒトＩｇＧにより検出した。各アッセイに対して標準曲線を作製し、作製の際には親和性により精製した既知の濃度のヒトＩｇＧ　（Ｃａｐｐｅ　ｌ）を用いた。カルチャー上清またはヒト血清のスクリーニングに関する競合アッセイヒト血清のカルチャー上清またはヒト血清から、エピトープ、またはエピトープ集合体（本発明のモノクローナル抗体が特異的である）に特異的な抗体をスクリーニングするために競合アッセイを行うことも可能である。この競合アッセイは基本的には上に記載したＣＤ−４に対する競合アッセイと同様にして行う。ただしこの際には１１２５Ｈ，２１７３Ｃ１２１４５Ｂ、１または４１１７Ｃ細胞系のビオチン標識したモノクローナル抗体を使用し、ｇｐ１６０または’Ｖ３ｍ−でコートしたＥＬＩＳＡウェルに対する結合を、スクリーニングを行うカルチャー上清と競合させる。その後、アルカリホスファターゼと結合したストレプトアビジンインキュベーションすることにより、ビオチン標識したモノクローナル抗体の結合を検出する。正常なヒトの血清またはエピトープに特異性をもたないヒトＩｇＧを含んだ上清を陰性対照に用いる。抗■３抗体４１１７Ｃの特異性４１１７Ｃは様々な違いをもつ多種のＨＩＶ−１株を認識することがわかった。この中にはＭＮ、５Ｆ−２、ＦＶにューヨークＬ　１１６９９　（中央アフリカ）、ＪＲ−Ｃ３Ｆ初期単離株（ロスアンジエルス）が含まれる（Ｋｏｙａｎａｇｉ等１．９８７）。４１１７　Ｃヒトモノクローナル抗体はこれまでに記載されてきた他の抗−Ｖ３ヒトモノクローナル抗体（Ｓｃｏｔｔ等１９９０．Ｚｏｌｌａ−Ｐａｚｎｅｒ等１９９０）よりも株特異性が低い。４１１７Ｃが認識する単離株のＶ３配列を比較したところ、ループの先端にあるＧＰＧＲ配列がこれら全ての単離株で共通であることがわかった。さらにＧＰＧＲのすぐ左に存在するＩＸＩ配列も高く保存されている。これらの結果は、４１１７Ｃがループの先端付近にある比較的保存された配列を認識している可能性を示している。ループの先端にあるＧＰＧＲＡＦ配列については、実験動物において全般的な反応性を示す抗−Ｖ３抗体を誘導することが、近年来されている（Ｊａｖａｈｅｒｊａｎ等１９９０）。図６と図７はヒトモノクローナル抗体４１１７ＣがＨＩＶのＭＮおよび５Ｆ−２株のそれぞれに対して著しい中和能をもつことを示している。ヒトｍＡｂｌ１２５Ｈおよび４１１７Ｃによる相乗中和人を興奮させる新しい発見は、ＣＤ−４結合部位に対するある抗体およびＶ−３ループに対するある抗体が相乗的にｔｌＩマを中和することである。ＣＤ−４結合部位に対する１１２５ＨヒトｍＡｂは、我々のｖ３ループに対する４１１７ＣヒトｍＡｂと相乗的に働いてＨＩＶを中和する。図６は、２つのヒトｍＡｂの等モル混合物が２つのヒ＋ｍＡｂいづれかの単独の場合よりもざらにＨＩＶのＭＮ株を中和することを表す。このヒトｍＡｂの混合物は、それぞれの２つのヒトｍＡｂ単独の場合と比較して約５分の１の濃度で５０％ウィルス中和をもたらし、これは個々のヒトｍＡｂの各々が単独で使用した場合に比べて他方のヒトｍＡｂと混合した場合には１０倍効果的であることを意味する。これは本ヒトｍＡｂの各々に対して５０％中和レベルで１０の収量減少指数（ｄｏｓｅ　ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ　１ｎｄｅｘ）である。より高い、生理学的により重要な中和レベルを検定した場合、この相乗効果はさらに劇的である。図６に示された結果の数学的分析は、９９％中和では１１２５Ｈおよび４１１７Ｃに対して１５６および５４の収量減少指数が得られるが、一方９５％中和ではこれらヒトｍＡｂに対してそれぞれ５７と２９の服量減少指数カ得うレル。我々ハヒトｍＡｂｌ１２５Ｈと４１１７ｃにょるＨＩｖの５Ｆ−２株の相乗中和も示した（図７）。その結果は、ＭＮ株に関して見られたものほど奥深いものではないものの、印象深いものである。これは多分、本ヒトｍＡｂがいづれもｍ々ではＭＮ株の場合と同程度の中和活性を５Ｆ−２株に対して持たない事実によるものであろう。５Ｆ−２の５０％中和に対する収量減少指数は、１１２５Ｈおよび、４１１７　Ｃに対してそれぞれ９と４であるが、９５％中和ではこれらヒトｍＡｂに対して５７と９であった。我々は１１２５Ｈと４１１７Ｃの間の相乗作用の度合いを分析した。その結果は、ＭＮ株に対して我々が観察した相乗作用が、いかなる２つの薬物または抗体の間で見られたものでは最も大きく（即ち＋１から＋４スケール上で＋４相乗作用（ンユ−（Ｃｈｏｕ）１９９１））、一方５Ｆ−２株に対しては＋３相乗作用であった。これらの値は、図６および７で示されたような実験曲線がら計算された複合指数（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　１ｎｄｅｘ（ＣＩ）　）値に基づいて付けられる。１より低いＣＩ値は相乗作用を示す（シューとタラレー（Ｔａｌａｌａｙ）１９８４）。図８は我々の実験結果（図６と７）から計算したＣＩプロットを示す。ＣＩはＦａに対してプロットされている（ここでＦａＸＩＱＱ＝観察された％中和、即ち、Ｆａ＝％中和／１００）。複合指数値の計算は本分野ではよく知られている。この相乗中和の機構を述べるために、ｇｐ１２０エピトープへの１１２５Ｈの結合に対する４１１７Ｃの影響およびその逆を評価した。これらの実験を実施するために、このヒトｍＡｂの一方をビオチンで印をっけ、異なる量の標識していない２次抗体と混合した。結合したビオチン化した抗体を次にＥＬＩＳＡアッセイにおいてストレプトアビジンの結合により検出した。用いた抗原は、本ヒトｍＡｂの両方が結合した関連のｇｐ１２０エピトープを含むＭＮ株の組み換えｇｐ１６０であった。我々は等モル濃度の４１１７Ｃ存在下でｇｐ１６０ＭＮへの１１２５Ｈ−ビオチンの結合が２−３倍上昇することを一貫して観察することができたが、ｇｐ１６０ＭＮへの４１１７Ｃ−ビオチンの結合は１１２５Ｈによって影響されないようである（図９）。これらの結果に基づく我々の作業仮説を図５に提示した。ＣＤ−４結合部位に対する新しいＨｕＭＡｂ、５１４５Ａの誘導および性格付け１１２５Ｈと同じプロトコールにより５１４５Ａ細胞系列を誘導した。５１４５Ａ　ＨｕＭＡｂは以下の性質を持っている。そのｇｐ１６０への結合は１１２５Ｈの場合と同様に可溶性ＣＤ−４により阻害され、そのエピトープは還元反応により破壊され、これも１１２５Ｈと同様である。その見掛けの親和定数は１×１０９Ｌ１モルである。それはｒｇＧ　ＨｕＭＡｂであるが、そのｆｇＧサブクラスは決定されないでいる。軽鎖はカッパアイソタイプである。’　１２５＋１のように、５１４５ＡはＭＮ−１ＩＩＩＢ−およびＲＦ−感染細胞と免疫蛍光により反応する。しかし、５１４５Ａは、上述の４つのＨＩＶ株の中和作用に基づき１１２５Ｈとは異なるＣＤ−４結合部位のエピトープを認識する。詳細には、１１２５ＨはＲＦと５Ｆ−２株よりもずっと良＜　ｒ　Ｉ　ＩＢ、５Ｆ−２およびＭＮ株を中和するが、５１４５Ａ　ＨｕＭ、Ａｂは問題の４株について実質的に同じ、かつ１１２５ＨＨｕＭＡｂのＭＮ株の中和作用に匹敵する水準で中和作用を示す（図６参照）。株中和のパターンにおけるこうした差異は、ｇｐ１２０に対して匹敵するほどの親和性を有していることから、５１４５Ａと１１２５Ｈのエピトープ特異性における差異によるものに違いないだろう。５１４５Ａ、！＝４１１７Ｃ１：よるＨｒＶ−１（７）ＭＮおよび５Ｆ−２株（Ｍ［［！中和１　：　１（７）モル比で用いた場合、ＨｕＭＡｂ　５１４５Ａ（抗ＣＤ結合部位）と４１１７Ｃ（抗Ｖ３）は、図１０と１１にそれぞれ見られるように、ＭＮ株と５Ｆ−２株を相乗的に中和する。これは、異なるエピトープ特異性の抗ＣＤ−４結合部位ＨｕＭＡｂ　（１１２５Ｈと５１４５Ａ）がｖ３ループに対する抗体との相乗中和に参加し得ることを示している。ｖ３ペプチドで超免疫処理した動物の血清からのチノパンツー抗Ｖ３Ａｂの分離と性格付はチンパンジー＃４９９をギラード（Ｇｉｒａｒｄ）ら、１９９１　（ＰＮＡＳ論文）に記載されたＶ３ペプチドと中和Ａｂ力価のピークで採取した血清（引用文献にも示されている）で免疫処理した。下記のようにして取り付けたＩＩＩＢ株の■３ペプチドを用いたアフィニティーカラムで精製した。このチンパンジーＡｂａ度は、ＩｇＭ、ＩｇＡおよびＩｇＧＪＩ度を各エピトープの精製ヒトＡｂ標準物を用いた独立したアッセイで決定した以外は、ＨｕＭＡｂに対して記載されたようにして決定した。チノパンツー抗Ｖ３Ａｂの全体の濃度はこれら３つの抗体クラスの濃度の合計として考えられた。我々は、このチノパンツー抗Ｖ３Ａｂのｖ３ループへの結合がＶ３の自然発生によるタンパク質分解による切断により崩壊することを示した（チレー（Ｔｉｌｌｅｙ）ら、１９９１．　Ｒ６ｓ、Ｖｉｒｏｌ、印刷中）。これはそのエピトープが先端近くのループの右（Ｃ端）側にあることを示している。反対に、我々の抗Ｖ３ＨｕＭＡｂである４１１７Ｃはループの先端に重なるエピトープに対するものであると我々は考えている。これらのエピトープの位置付けは、チノパンツー抗Ｖ３Ａｂが株特異的であり、他方我々の抗■３ＨｕＭＡｂの４１１７Ｃが様々な誘導ＨＩＶ−１株を認識する、即ちループに先端を含む保存されたエピトープに対するものであるという観察と対応している。抗Ｖ３チンパンジーＡｂと１１２５Ｈ（抗ＣＤ−４結合部位ＨｕＭＡｂ）によるＨＩＶ−１のＩＩＩＢ株の相乗中和図１２は、１：１のモル比で混合したチノパンツー抗Ｖ３Ａｂと１１２５Ｈが相乗的にｌｌＩｂ株を中和することを表す。このことは、異なるエピトープに対する抗Ｖ３Ａｂ　（チノパンツー抗■３および４１１７Ｃ）が相乗中和に参加し得ることを表すからだけでなく、それが我々の相乗中和の観察において別のＨＩＶ −１株、即ちＩＩＩＢを含むことからも重要である。

【参考文献リスト】

アンダーラン（Ａｎｄｅｒｓｏｎ）ル、Ｊ、、ビンガム（Ｂｉｎｇｈａｍ）、　Ｐ、　、およびヒアホルザ−（Ｈｉｅｒｈｏｌｚｅｒ）、　Ｊ、　Ｄ、　（１９８８）、　Ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　５ｙｎｃｙ狽奄≠戟@ｖｉｒｕｓ　ｂｙ　１ｎｄｉｖｉｄｕａｌ　ａｎｄ　ｍ１ｘｔｕｒｅｓ　ｏｆ　Ｆ　ａｎｄ　Ｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄ奄■刀A　Ｊ、　Ｖｉｒｏｌ、　６２．４２３２−４２３８゜ベルマン（Ｂｅｒｍａｎ）、　Ｐ、　１．　、　Ｔ、　Ｊ、グレゴリ−（Ｇｒｅｇｏｒｙ）ル、リトル（Ｒｉｄｄｌｅ）、　Ｇ、　Ｒ。ナカムラ（Ｎａｋａａ＋ｕｒａ）、　Ｍ、＾、チャンペ（Ｃｈａｍｐｅ）、　Ｊ、　Ｐ、ポーター（Ｐｏｒｔｅｒ）、　Ｆ、　Ｍ、ワーム（Ｖｕｒｍ）　、　Ｒ，Ｄ、ハーシュバーグ（Ｈｅｒｓｈｂｅｒｇ）、　Ｅ、　Ｋ、コツプ（Ｃｏｂｂ）　、およびＪ。Ｗ、アイヒバーグ（Ｅｉｃｈｂｅｒｇ）、　（１９９０）、　Ｎａｔｕｒｅ　３４５：６２２−６２５゜ベルマン、ｐ、ｖ、、リトル、Ｌ、、ナカムラ＋　Ｇ− ＋　”ツク７−（Ｈａｆｆｅｒ）、　Ｏ，Ｋ、　、ヌーンズ（Ｎｕｎｅｓ）、　Ｗ、　Ｍ、、スケール（Ｓｋｅｈｅｌ）、　Ｐ、　、バイルン（Ｂｙｒｎ）、　Ｒ，、グループマン（Ｇｒｏｏｐｍａｎ）、　Ｊ、　、　ｖ　ットスルーズ（Ｍａｔｔｈｒｅｗｓ）、　Ｔ、　、およびグレゴリ−、Ｔ、（１９８９）、Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｗｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｄｏＵｉｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕＩhｌａｎ　ｉａ＋ｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　１　ｅｎｖｅｌｏｐｅ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ、　ｇｐ１６０．　Ｊ、　Ｖｉｒｏ戟A　６３．３４８９−３４９８゜ベルマン、　Ｐ、？、　、グレゴリ−、Ｔ、Ｊ、、リトル、Ｌ、、ナカムラ、ＧＪ、、チャンペ。菫、＾、、ポーター、　Ｊ、Ｐ、　、ワーム、Ｆ、１１．、ハーシュバーグ、Ｆｉ、Ｄ、、コツプ、Ｅ、に、。およびアイヒバーグ、　Ｊ、　１．　（１９９０）、　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｉｌｌｌｐａｎｚｅｅｓ　ｆｒｏ譚１ｎｆｅｃｔ奄盾■ ｂｙ　ＨＩＶ−１ａｆｔｅｒ　ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｇｐ１２０　ｂ浮煤@ｎｏｔ　ｇｐ１６０．　Ｎａｔｕｒｅ、　３４５．６２２−６２５゜ベルシフスキー（Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙ）、　Ｊ、　Ａ、　、　Ｓ、　Ｌ、　ｘブシュタイン（Ｅｐｓｔｅｉｎ）、およびＩ。Ｊ、ベルカウア（Ｂｅｒｋｏｖｅｒ）、　（１９８９）ｉｎ　Ｆｕｎｄａａ＋ｅｎｔａｌ　Ｉ＋ｕｕｎｏｌｏｇｙ、第２版、ｆ、Ｅ。ポール（Ｐａｕｌ）（編）、　Ｒａｖｅｎ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｌｔｄ、　、ニューヨーク、　ｐ、３１５−３５６゜ポンカー（Ｂａｎｎｅｔ）、　ｆ」、　、とＲ０＾、ラスキー（Ｌａｓｋｅｙ）、　（１９７４）Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　４６@：８３− ８８゜シュ（Ｃｈｏｕ）、Ｔ、、とタラルー（Ｔａｌａｌａｙ）、　Ｐ、　（１９８４）、　Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ@ｄｏｓｅ−ｅｆｆｅｃｔ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ：Ｔｈｅ　ｃｏａ＋ｂｉｎｅｄ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　１ｌｕｌｔｉｐｌｅ　ｄｒｕ■刀@ｏｒ　ｅｎｚｙｍｅ　１ｎｈｉｂｉｔｏｒｓ、　Ａｄｖ、　ｉｎ　Ｅｎｚ、　Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ、　２２．２７−５５゜シ、　＋、　Ｔ、、　（１９９１）、　Ｔｈｅ　ｍｅｄｉａｎ−ｅｆｆｅｃｔ　ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉ盾氏@１ｎｄｅｘｆｏｒ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ　ａｎｄ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ、ｉｎ：ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ　ａｎｄ　ａ獅狽≠■盾獅奄■ ｖａ　ｉｎ　ｃｈｅａ＋ｏｔｈｅｒａｐｙ　、　Ｔ、シュー、とＤＣ，ライドアウト（Ｒｉｄｅｏｕｔ）、編。（カリフォルニア州、サンディエゴ：＾ｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ）、　ｐｐ、　６１−１０２゜クラベル（Ｃ１ａｖｅｌ）、　Ｆ、　、　Ｄギュータード（Ｇｕｅｔａｒｄ）、　Ｆブリュンーベチネット（Ｂｒｕｎ−Ｖｅｔｉｎｅｔ）、　Ｓカマレート（Ｃｈａｍａｒｅｔ）、　Ｍ、　Ａ、レイ（Ｒｅｙ）、　Ｍ、　Ｏ，サントスーフエレイラ（Ｓａｎｔｏｓ−Ｆｅｒｒｅｉｒａ）、　Ａ、　Ｇ、　ｏ−レット（Ｌａｕｒｅｎｔ）、　Ｃ，ドーゲット（Ｄａｕｇｕｅｔ）、　Ｃ，カトラマ（Ｋａｔｌａａ＋ａ）、　Ｃルージオ −（Ｒｏｕｚｉｏｕｘ）、　Ｄ、クララマン（Ｋｌａｔｚｍａｎｎ）、　Ｊ、　Ｌ、ジャンパリモート（ＣｈａｍｐａｌｉｌＩａｕｄ）、およびＬモンタニアー（Ｍｏｎｔａｇｎｉｅｒ）、　（１９８６）　５ｃｉｅｎｃｅ　２３３：３クレフ（Ｃ１ｅｆｆ）、Ｊ、　Ｃ，Ｓ、　、カナス（Ｃｈａｎａｓ）、　Ａ、　Ｃ，、およびグツド（Ｇｏｕｌｄ）、　Ｅ、　Ａ、　（１９W３）。Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　５ｉｎｄｂｉｓ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｅｌ　１ｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｍｏ獅盾モ撃盾獅≠■ ａｎｔｉｂｏｄｙ　ｂｉｎｄｉｎｇ、　Ｊ、　Ｇｅｎ、　Ｖｉｒｏｌ、　６４．１１２２１−１１２６゜カラー（Ｃａｌｌｅｒ）、　Ｈ９Ａ、　、　、およびカラー、　Ｂ、　Ｓ、　（１９８７）、　５ｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ａｓｓｅｓｓｍｅ獅煤@ｏｆｈｙｂｒｉｄｏｍａ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌｉｔｙ　ａｆｔｅｒ　ｓｕｂｃｌｏｎｉｎｇ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｌｉｍｉｔｉｎｇ　ｄｉｌｕｔｉ盾氏@ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ、　ｉｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ　Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ａ、Ｈ，バータル（Ｂａｒｔａｌ）、およびＹ、g ｉｒｓｈａｕｔ、編（Ｃ１ｉｆｔｏｎ、ニューシャーシー：Ｈｕｍａｎａ　Ｐｒｅｓｓ）、　ｐｐ、　２３１−２３６゜クローフォード（Ｃｒａｖｆｏｒｄ）、　Ｄ、　Ｈ，（１９８５）、　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　≠獅狽■ ｂｏｄｉｅｓ　ｕｓｉｎｇ　Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒ　ｖｉｒｕｓ、ｉｎ：Ｈｕｍａｎ　Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ　ａｎｄ　Ｍｏｎｏｃｌｏ獅≠戟@Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、　Ｅ、　Ｇ、　Ｌングルマン（Ｅｎｇｌｅｍａｎ）、　Ｓ、　Ｌ　Ｈ，フアツジ（Ｆｏｕｎｇ）、　Ｊ、ラリツク（Ｌａｒｒｉ■ ｋ）、および＾、ラウビチェク（Ｒａｕｂｉｔｓｃｈｅｋ）、編、にューヨーク：Ｐ１ｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ）、　Ｉｌ＋）、　３７−５３゜デヴアッシュ（Ｄｅｖａｓｈ）、　Ｙ、　、カルベリ（Ｃａｌｖｅｌｌｉ）、　Ｔ、　Ａ、　、ウッド（ｆｏｏｄ）、　Ｄ、　Ｇ１．り一ガン（Ｒｅａｇａｎ）、　Ｋ、　Ｌ、　、およびルーピンシュタイン（Ｒｕｂｉｎｓｔｅｉｎ）、　Ａ、　（１９９０）、　Ｖｅｒｔｉｃａ■ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ　ｉｓ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ@ｔｈｅ　ａｂｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｈｉｇｈ−ａｆｆｉｎｉｔｙ／ａｖｉｄｉｔｙ　ｍａｔｅｒｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｇｐ１２０　垂窒奄獅モ奄垂≠■ ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ　ｄｏｍａｉｎ、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ８７．３４４５−３４４９゜ドルビー（Ｄｏｌｂｙ）、　Ｔ、　Ｗ、　、　Ｊデポーノ（Ｄｅｖｕｏｎｏ）、およびＣ，Ｍ、クロース（Ｃｒｏｃｅ）、　（１９８０）　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　７７：６０２７−６０３１゜ドゥビッソン（Ｄｕｂｕｉｓｓｏｎ）、　Ｊ、　、ギルローメ（ＧｕｉｌｌａｕＩＩｌｅ）、　Ｊ　、　、ブーランガー（Ｂｏｕｌａｎｇｅｒ）、　Ｄ、　、サーリー（Ｔｈｉｒｙ）、　Ｅ、　、バブｏ−７ト（Ｂｕｂｌｏｔ）、　１１．、およびバストレット（Ｐａｓｔｏｒｅｔ）、　Ｐ、　（１９９０）、　Ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｖｉｎｅ　ｈｅｒｐｅｒｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　４@ｂｙ　ｐａｉｒｓ　ｏｆｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｒａｉｓｅｄ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｗｏ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ　ａｎｄ　１ｄｅｎ狽奄■奄モ≠狽■ ｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉｇｅｎｉｃ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ　１ｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ、Ｊ、　Ｇｅｎ、@Ｖｉｒｏｌ、　７１，６４７−６５３゜エツカルド（Ｅｃｋｈａｒｄ）ル、　Ａ、　、　Ｓ、　Ａ、ティルー（Ｔｉｌｌｅｙ）、　Ｒ，８ラング（Ｌａｎｇ）、　Ｋ、　Ｂ、　？−り（Ｍａｒｃｕ）、およびＢ、に、ピルシュタイン（Ｂｉｒｓｈｔｅｉｎ）、　（１９８２）Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳ人７９：３００６−３０１０エミニ（Ｅｍｉｎｉ）、　Ｅ、　Ａ、、ナラ（Ｎａｒａ）、　Ｐ、　Ｌ、　、シュライフ（Ｓｈｌｅｉｆ）、　ｆ、　Ａ、　、ルイス（ｌｅ魔奄刀j 、Ｊ、＾、、ダビデ（Ｄａｖｉｄｅ）、　Ｊ、　Ｐｌ、リ−（Ｌｅｅ）、　Ｄ、　Ｒ，ケスター（Ｋｅｓｓｌｅｒ）、　Ｊ、　、　、コンレ[（Ｃ。ｎ１ｅｙ）、　Ｓ、　ｖツシタ（Ｍａｔｓｕｓｈｉｔａ）、　Ｓ、　、バットニー（Ｐｕｔｎｅｙ）、　Ｓ、　Ｄ、、ゲレテ４−（Ｇｅｒｅ■ Ｙ）、　Ｒ，Ｊ、　、およびアイヒバーグ、Ｊ、　Ｗ、　（１９９０）、Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｎｅｕ■ ｒａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｉｍｎ＋ｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　１　ａｂｏｌｉｓｈｅｓ　１ｎ■■モ狽奄魔奄狽■ ｆｏｒ　ｃｈｉｍｐａｎｚｅｅｓ、　Ｊ、　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、　６４．３６７４−３６７８゜ガｏ　（Ｇａｌｌｏ）、　Ｒ，、Ｓ、サラフッヂン（Ｓａｌａｈｕｄｄｉｎ）、　Ｍ、ボポビック（Ｐｏｐｏｖｉｃ）、　Ｑ、シアラー（Ｓｈｅａｒｅｒ）、　Ｍ、カブラン（Ｋａｐｌａｎ）、　Ｂ、　ヘインズ（Ｈａｙｎｅｓ）、　Ｔ、パーカー（Ｐａｌｋｅｒ）、　ＲB レッドフィールド（Ｒｅｄｆｉｅｌｄ）、　Ｊ、オレスケ（Ｏｌｅｓｋｅ）、　Ｂ、サファイ（Ｓａｆａｉ）、　Ｇ、ホワイト（ｆｈｉｔｅ）、　Ｐ、　、フォスター（Ｆｏｓｔｅｒ）、およびＰ、７−クハムαａｒｋｈａｍ）、　（１９８４）Ｓｃｉｅｎｃｅ　２２４：５００−５０３゜ゲルナ（Ｇｅｒｎａ）、　Ｇ、　、レベロ（ＲｅｖｅＬｌｏ）、　Ｍ、　Ｇ、、ドビス（Ｄｏｖｉｓ）、　Ｍ、　、ペトルゼリ（Ｐｅｔｒｕｚｚｅｌｌｉ）、　Ｅ、アキリ（Ａｃｈｉｌｌｉ）、　Ｇ、　、ベルシバレ（Ｐｅｒｃｉｖａｌｌｅ）、　Ｅ、　、およびトーセリニ（Ｔｏｒｓｅｌｌｉｎｉ）、　Ｍ、　（１９８７）、　Ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ　ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｕｂｅｌｌａ@ｖｉｒｕｓ　ｂｙ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ｖｉｒａｌ　ｈａｅｍａｇｇＬｕｔｉｎｉｎ、　Ｊ、　Ｇｅｎ、　Ｖｉｒｏｌ、　６８D２００７−２０１２゜ギラルド（Ｇｉｒａｒｄ）、　Ｍ、　、キーニー（Ｋｉｅｎｙ）、　Ｍ、Ｐ、　、ピンター（Ｐｉｎｔｅｒ）、　Ａ、　、バーレーシヌーシ（Ｂａｒｒｅ−Ｓｉｎｏｕｓｓｉ）、　Ｆ、ナラ（Ｎａｒａ）、　Ｐ、　、コルベ（Ｋｏｌｂｅ）、　［１，、クスミ　（Ｋｕｓｕ＋■ ｉ）、　Ｋ、　、チャプツト（Ｃｈａｐｕｔ）、　Ａ、　、　Ｒｅ１ｎｈａｒｔ、　Ｔ、　、ムックモア（Ｍｕｃｈｍｏｒｅ）、　Ｅ、　、@ｏンコ（Ｒｏｎｃｏ）、　Ｊ、　、カクゾレツク（Ｋａｃｚｏｒｅｋ）、　Ｍ、　、ゴマード（Ｇｏｍａｒｄ）、　Ｅ、　、グループマン（Ｇ１ｕｃｋａ＋ａｎ）、　Ｊ、　、およびフルツ（Ｆｕｌｔｚ）、　Ｐ、　（１９９１）、　ｒｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｉ高垂≠獅嘯■ ｅｓ　ｃｏｎｆｅｒｓ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ａｇａｉｎｓｔ　ｃｈａｌｌｅｎｇｅ　ｗｉｔｈ　ｈｕｍａｎ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉ■獅モ凵@ｖｉｒｕｓ、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ＾ｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　８８．５４２− ５４６ギラルド、　ｉ、Ｐ、　フルツ（Ｆｕｌｔｚ）、　Ｍ、Ｐ　キーニー、晃　ヤゲｏ　（Ｙａｇｅｌｌｏ）、＾、デスランダーズ（Ｄｅｓｌａｎｄｅｒｓ）、　Ｅ、　７　ソチモア（Ｍｕｃｈｍｏｒｅ）、　Ａ、ビンター（Ｐｉｎｔｅｒ）、　Ｐナラ、Ｊ　ロンコ、Ｆ、バールーンヌッン、Ｊ、レコック（Ｌｅｃｏｃｑ）、およびＪ、グリュソクマン、（１９８９）Ｑｕａｎｔｒｉｅｍｅ　Ｃｏ１１ｏｑｕｅ　Ｄｅｓ　’Ｃｅｎｔ　Ｇａｒｄｅｓ’　、０ｃｔｏｂｅｒ　２６− ２８D　′１ｉａｒｎｅｓ−１ａ−Ｃｏｑｕｅｔｔｅ、フランスゴルニ−（Ｇｏｒｎｙ）　、　Ｍ、に、、Ｖ、ギアナカコス（Ｇｉａｎａｋａｋｏｓ）、Ｓ、シャーペ（Ｓｈａｒｐｅ）。およびＳ７　ゾラーパスカー（Ｚｏｌｌａ−Ｐａｓｎｅｒ）、　（１９８９）Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ８６F１６２４〜１６２８゜ガーゴ（Ｇｕｒｇｏ）　Ｃ，、グオ（Ｇｕｏ）　Ｈ，Ｇ、、フランチニ（Ｆｒａｎｃｈｉｎｉ）　Ｇ、、アルドビニ（Ａｌｄｏｖｉｎｉ）＾、、コラッティ（Ｃｏｌｌａｔｔｉ）　Ｅ、、フェμル（ｐｅｒｒｅｌ］、）　Ｋ、、ウォンースタール（Ｗｏｎｇ−３ｔａａｌ）　Ｆ、　、ガｏＲ，Ｇ、、ライッ（Ｒｅｉｔｚ）　Ｍ、　Ｓ、　Ｊｒ、　、　Ｅｎｖｅｌｏｐｅ　５ｅ曹■ ｅｎｃｅｓ　ｏｆ　Ｔｗｏ　Ｎｅｗ　Ｕｎｉｔｅｄ　５ｔａｔｅｓ　ＨＩＶ−Ｉ　ｌ５ｏｌａｔｅｓ、　（１９８ｇ）　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ　S１４６：５３１− ５３６、ハラダ（Ｈａｒａｄａ）、　Ｓ、　、　Ｙコヤナギ（Ｋｏｙａｎａｇｉ）　、およびＮ、ヤマモト（Ｙａｍａｍｏｔｏ）（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ　２２９：５６３−５６６゜ハルロウ（Ｈａｒｌｏｔ）、　Ｅ、　、とＤ　バー：／　（Ｌａｎｅ）、　（１９８ｇ）ｉｎ　Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ　１ａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｍａｎｕａｌ、　Ｃｏ１ｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、　Ｃｏ１ｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　ＨａｒｂｏｒAニューヨーク、　ｐ、　３１０゜ホー（Ｈｏ）、　Ｄ、　Ｄ、　、　ＸＩ、ター（Ｌｉ）、　Ｅ、　Ｓ、　ダール（Ｄａｒｒ）、Ｔ、ムージル（Ｍｏｕｄｇｉｌ）、　Ｎ、　b。サン（Ｓｕｎ）、　Ｄ、ホルトン（Ｈｏｌｔｏｎ）、およびＪ、Ｅ、ｏビンラン（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ）　（６月２０−２４日、１９９０．サンフランシス：＋）　５ｉｘｔｈ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ　。ｎ　ＡＩＤＳ、　１５３゜ホー、　Ｄ、　Ｄ、　、サルンガダーラン（Ｓａｒｎｇａｄｈａｒａｎ）、　ｉｆ、　Ｇ、ヒルシｘ　（Ｉｌｉｒｓｃｈ）、Ｍ、Ｓ、、スクータ−（Ｓｃｈｏｏｌｅｙ）、　Ｒ，Ｔ、、ロタ（Ｒｏｔａ）　、丁、Ｒ１，ケネディ−（Ｋｅｎｎｅｄｙ）、　Ｒ，Ｃ，、シャン（Ｃｈａｎｈ）、　Ｔ、　Ｃ，、およびサト−（Ｓａｔｏ）、　Ｖ、　Ｌ、　（１９８７）、　Ｈｕｍａｎ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅ獅モ凵@ｖｉｒｕｓ　ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｒｅｃｏｇｎｉｚｅ　５ｅｖｅｒａ１．　ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ　ｄｏｍａｉｎ刀@ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｎｖｅｌｏｐｅ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ、　Ｊ、　ＶｉｒｏＬ６１．２０２４−２０３８．　ホムジー（Ｂｏｍｓｙ）、　Ｊ、　、タeノ（Ｔａｔｅｎｏ）　、　Ｍ、およびレビー（Ｌｅｖｙ）、　Ｊ＾（１９８８）、　Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｅｎｈａｎｃｅｍｅ獅■ ｏｆ　ＨＩＶ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎ、　Ｌａｎｃｅｔ、　ｉ、　１２８５−１２８６゜ジャバヘリアン（Ｊａｖａｈｅｒｉａｎ）、　Ｋ、　、ラングロワ（ＬａｎｇＬｏｉｓ）、＾、Ｊ、、ラローザ（Ｌａｆｉｏｓａ）、Ｇ、　Ｊ、　、プロフィ−（Ｐｒｏｆｙ）、　Ａ、　Ｔ、　、ボログネシ（Ｂｏｌｏｇｎｅｓｉ）、　Ｄ、　Ｐ、　、　ハーリヒー（g ｅｒｌｉｈｙ）、　Ｗ、　Ｃ，、バットニー　（Ｐｕｔｎｅｙ）、　Ｓ、　Ｄ、　、およびマッスーズ０１ａｔｔｈｅｗｓ）、　Ｔ、　Ｊ、@（１９９０）、Ｂｒｏａｄ］ｙ　ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｅｌｉｃｉｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂ撃■@ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ　ｄｅｔｅｒａ＋１ｎａｎｔ　ｏｆ　ＨＩＶ−１，５ｃｉｅｎｃｅ、　２５０．１５９０−１５９３゜ジョールト（Ｊｏｕａｕｌｔ）、　Ｔ、　、チャビス（Ｃｈａｐｕｉｓ）、　Ｆ、オリビア（Ｏｌｉｖｉｅｒ）、　Ｒ，、パラビンニ（Ｐａｒｒａｖｉｃｉｎｉ）、　Ｃ，、バーローア（Ｂａｈｒａｏｕｉ）、　Ｅ、　、およびグリュックマン、Ｊ、Ｃ，（１９８９）、　ＨＩＭ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｏｎｏｃｙｔｉｃ　ｃｅｌｌｓ：ｒｏｌｅ　ｏｆ　ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｍｅｄｉａｔｅп@ｖｉｒｕｓ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｔｏ　Ｆｃ−ｇａｍｍａ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ、　ＡＩＤＳ、　３．１２５−１３３゜カルパス（Ｋａｒｐａｓ）、　Ａ、　、ヒル（Ｈｉｌｌ）、　Ｆ、　、ヨール（Ｙｏｕｌｅ）、　Ｍ、　、シラン（Ｃｕｌｌｅｎ）、　Ｖ、 @、グレイ（Ｇｒａｙ）、　Ｊ、　、バイロン（Ｂｙｒｏｎ）、　Ｎ、　ヘイホー（Ｈａｙｈｏｅ）、　Ｆ、　、テナントーフラワーズ（Ｔｅｎａｎｔ−Ｆｌｏｗｅｒｓ）、　Ｍ、　、　ハワード（Ｈｏｖａｒｄ）ル７．ギルゲン（Ｇｉｌｇｅｎ）、Ｄ、　、　Ｊ、　Ｋ、オアeス（Ｏａｔｅｓ）、ホーキンス（Ｈａｗｋｉｎｓ）、　Ｄ、　、およびガザード（Ｇａｚｚａｒｄ）、　Ｂ、　（１９８８）、　Ｅｆｆｃｔｓｏｆ　ｐａｓｓｉｖｅ　ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ａｃｑｉｒｅｄ　ｉｍａ＋ｕｎｏｄｅｆ奄モ奄■獅モ凵@ｓｙｎｄｒｏｗｅ−ｒｅｌａｔｅｄ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ａｎｄ　ａｃｑｕｉｒｅｄ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ、　oｒｏｃ、　Ｎａｔｌ。Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＬＩＳＡ、　８５．９２３４−９２３７゜キーニー、Ｍ、Ｐ、、ルイス（Ｌａｔｈｅ）、　Ｒ，、リビア（ＲＩｖｉｅｒｅ）、　Ｙ、、ドツト（Ｄｏｔｔ）、　Ｋ、、シュミット（Ｓｃｈｍｉｔｔ）、　Ｄ、ギラルド１Ｍ１．モンタニアー、Ｌ、、およびレコック（Ｌｅｃｏｃｑ）、　Ｊ。（１９８８）、　Ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ａｎｔｉｇｅｎｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＩＩＩＶ　ｅｎｖ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｂｙ　ｃｌｅａｖａ■■@５ｉｔｅ　ｒｅｍｏｖａｌ、　Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、　２．２１９−２２５゜キムラークロダ（Ｋｉｍｕｒａ−Ｋｕｒｏｄａ）、　Ｊ、　、とヤスイ（Ｙａｓｕｉ）、　Ｋ、　（１９８３）、　Ｔｏｐｏｇｒａｐｈｉｃ■ ｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ａｎｔｉｇｅｎｉｃ　ｄｅｔｅｒＩｌｉｎａｎｔｓ　ｏｎ　ｅｎｖｅｌｏｐｅ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　u３（Ｅ）　ｏｆ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ　ｖｉｒｕｓ、ｕｓｉｎｇ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ｊ、Ｖｉｒｏｌ、S５．１２４−１３２゜キックスフオード（Ｋｉｎｇｓｆｏｒｄ）ル、　（１９８４）、　Ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｌａ　Ｃｒｏ■ ｓｅ　ｖｉｒｕｓ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｏｆ　５ｐｅｃｉｆｊｃ　ｐａｉｒｓ　ｏｆ　ａ＋ｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏр奄■刀@ｔｏ　ｔｈｅ　Ｇｌ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ、　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、　１３６．２６５ −２７３゜コヤナギ、Ｙ、フィルス（ｌｌｉｌｅｓ）、　Ｓ。ミツヤス（Ｍｉｔｓｕｙａｓｕ）、　Ｒ，Ｔ、　、メリル（Ｍｅｒｒｉｌｌ）、　Ｊ。Ｒ７，ビンタース（Ｖｉｎｔｅｒｓ）、　Ｈ，Ｖ、　、およびチェノ（Ｃｈｅｎ）、Ｉ、　３．　Ｙ、　（１９８７）、　Ｄｕａｌ　１ｎｆ■モ狽■ ｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｅｎｔｒａｌ　ｎｅｒｖｏｕｓ　ｓｙｓｔｅｍ　ｂｙ　ＡＩＤＳ　ｖｉｒｕｓｅｓ　ａｎｄ　ｄｉｓｔｉｎｃｔ　ｃ■撃撃浮撃≠秩@ｔｒｏｐｉｓｍｓ、　５ｃｉｅｎｃｅ　２３６．８１９−８２２゜コズパー（Ｋｏｚｂｏｒ）、　Ｄ、　、　Ａ、　Ｅ、ラガーデ（Ｌａｇａｒｄｅ）、およびＪ、Ｃローダ−（Ｒｏｄｅｒ）、　（１９８２）Ｐｒｏｃ〜ａｔ１．　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ７９：６６５１−６６５５゜ラエムリ（Ｌａｅｍｍｌｉ）、　Ｕ、　Ｋ、　（１９７０）　Ｎａｔｕｒｅ　２２７：６８０−６８３゜ラリツク（Ｌａｒｒｉｃｋ）、Ｊ、　？、ル、ダニエルソランＤａｎｉｅｌｓｓｏｎ）、　Ｃ，Ａブレンナ−（Ｂｒｅｎｎｅｒ）、　Ｅ、　Ｆウォレース（Ｊａｌｌａｃｅ）、　Ｍアブラハムラン（＾ｂｒａｈａｍｓｏｎ）、　Ｋ、　Ｅ、フライ（Ｆｒｙ）、およびＣ，Ａ、　Ｋ、ベレベツク（Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ）、　（１９８９）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　７：９３４−９３８゜ラローザ、Ｇ、Ｊ、ダビデ、Ｊ、Ｐ、ウニインホールド（Ｗｅｉｎｈｏｌｄ）、　Ｋ、　、ウォーターベリー（Ｙａｔｅｒｂｕｒｙ）、　Ｊ、　Ａ、　、プロフィ、　Ａ、　Ｔ、　、ルイス（Ｌｅｖｉｓ）、　Ｊ、＾、、ラングロア（Ｌａｎｇｌｏ奄刀j 、　Ａ、　Ｊ、　、ドリースマン（Ｄｒｅｅｓｍａｎ）、　Ｇ、　Ｒ，、ポスウェル（Ｂｏｓｗｅｌｌ）、　Ｒ，Ｎ、　、　Ｐ、シャダックiＳｈａｄｕｅｋ）、ホリー（Ｈｏｌｌｅｙ）、　Ｌ、　Ｈ，カープラス（Ｋａｒｐｌｕｓ）、　Ｍ、　、ボログネシ（Ｂｏｌｏｇｎｅｓｉ）。Ｄ、Ｐ、、マーソスーズ、Ｔ、Ｊ、、ｚミ＝（Ｅｍｉｎｉ）、　Ｅ、　Ａ、　、およびバ、ソトニー、Ｓ、Ｄ、（１９９０）、　Ｃ。ｎ５ｅｒｖｅｄ　５ｅｑｕｅｎｃｅ　ａｎｄ　５ｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｅｌｅｍｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　［Ｖ−１ｐｒｉｎｃｉｐａｌ　ｎ■浮狽窒≠撃■ ｚｉｎｇ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ、　５ｃｉｅｎｃｅ、　２４９．９３２−９３５゜ラスキー、Ｌ、　Ａ、　、ナカムラ、Ｇ１、スミス（Ｓｍｉｔｈ）、　Ｄ、　Ｈ，、フｚ　ニー　（Ｆｅｎｎｉｅ）、　Ｃ，、シマサキ（Ｓｈｉｍａｓａｋｉ）、　Ｃ，、バッフ７−　（Ｐａｔｚｅｒ）、　Ｅ、　、ベルマン、Ｐｌ、グレゴリ−１Ｔ９．およびカポン（Ｃａｐｏｎ）、　Ｄ、　Ｊ、　（１９８７）、　Ｄｅｌｉｎｅａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｒｅｇｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕ＋ａ≠氏@ｉｍｏ＋ｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　１　ｇｐ１２０　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｒｉｔｉｃａｌ　ｆｏｒ　１ｎｔｅｒａモ狽奄盾氏@ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ＣＤ−４ｒｅｃｅｐｔｏｒ、　Ｃｅ１１．５０．９７５−９８５゜レイン（Ｌａｙｎｅ）、　Ｓ、　Ｐ、　、スプージ（Ｓｐｏｕｇｅ）、　Ｊ、　Ｌ、　、およびデンボ（Ｄｅｍｂｏ）、　Ｍ、　（１９８９j。Ｑｕａｎｔｉｆｙｉｎｇ　ｔｈｅ　１ｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｉａｕ＋＋ｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ、　oｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ８６．４６４４−４６４８゜レビー、Ｊ、＾５．＾、Ｄ、ホフマン、Ｓ、Ｍ、クレー？−（Ｋｒａｍｅｒ）、　Ｊ、＾、シランイス（Ｌａｎｄｉｓ）。Ｊ舅、シマツクｏ　（Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ）、およびＬＳ、オシｏ（Ｏｓｈｉｒｏ）、　（１９８４）　５ｃｉｅｎｃｅ　２２５＋８４０−８４２゜レオナルト（Ｌｅｏｎａｒｄ）、　Ｃ，Ｋ、　、　Ｍ、！、シュベルマン（Ｓｐｅｌｌｍａｎ）ル、リトル、Ｊ、Ｎ、トマス（Ｔｈｏｍａｓ）、およびＴ、　Ｊ、グレゴリ−、（１９９０）　Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅａ＋、２６５：１０３７３ −１０３８２゜ルジャングレン（Ｌｊｕｎｇｇｒｅｎ）、　Ｋ、　、ポノチガ− （Ｂｏｔｔｉｇｅｒ）、　Ｂ、、ビバーフエルド（Ｂｉｂｅｒｆｅｌｄ）、　Ｇ、　、カールソン（Ｍａｒｌｓｏｎ）、　Ａ、　、フェン＝　ｇ　（Ｆｅｎｙｏ）、　Ｅ、　、およびジョンダル（ＪｏｎｄａＬ）、Ｍ、（１９８７）　＾ｎｔｉｂｏｄｙ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ−ｉｎｄｕモ奄獅■@ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｈｕｍａｎ　ｉａｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１３９．２Q６３−２２６７、 − ルッセンホップ（Ｌｕｓｓｅｎｈｏｐ）、　Ｎ、　０．　、ゴアーツ（Ｇｏｅｒｔｚ）、Ｒｏ、ワブケーブノチ（ｆａｂｕｋｅ−Ｂｕｎｏｔｉ）、　Ｍ、　、　ｇｅ−ｒｕｔｕ（Ｇｅｈｒｚ）、　Ｒ，、およびカラ（Ｋａｒａ）、　Ｂ、　（１９８８）、　Ｅｐｉｔ盾垂■@ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ　ｕｓｉｎｇ　ｍｕｒｉｎｅ　高盾獅盾モ撃盾獅■ ｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、　１６４．３６２−３７２゜マイアーズ（Ｍｙｅｒｓ）、　Ｇ、　、　Ａ、ラブラン（Ｒａｂｓｏｎ）、　Ｓ、ジョセフス（Ｊｏｓｅｐｈｓ）、　Ｔ、スミス。Ｊ、ベルシフスキー、およびＦ、ウォンースタール（ｌｏｎｇ−３ｔａａ１．）　（編）（１９８９）　ＨｕｍａｎＲｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ　ａｎｄ　ＡＩＤＳ、　ＬＡ−ＵＲ，８９−７４３，０スアラモス国立研究所、ロスアラモス。オルシェブスキー（Ｏｌｓｈｅｖｓｋｙ）、　Ｕ、　、ベルセス（Ｈｅｌｓｅｔｈ）、　Ｅ、　、ブールマン（Ｇｕｒｍａｎ）。Ｃ９，ター（Ｌｉ）、　Ｊ、　、　ハーゼルタイン（Ｈａｓｅｌｔｉｎｅ）、　Ｗ、、およびンドロスキ（Ｓｏｄｒｏｓｋｉ）。Ｊ、　（１９９０）、　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　１ｎｄｉｖｉｄｕａｌ　ｈｕｍａｎ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　魔奄窒浮刀@ｔｙｐｅｌ　ｇｐ１２０　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄｓ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｆｏｒ　ＣＤ −４ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｂｉｎｄｉｎｇ、　Ｊ、　Ｖｉｒｏ戟A　６４．５７０１− ５７０７゜オシランディ（ＯｒＬａｎｄｉ）、Ｒ，、Ｄ、Ｈ，グツソウ（Ｇｕｓｓｏｖ）、　Ｐ、　Ｔ、ジョーンズ（Ｊｏｎｅｓ）。およびＧ、ウィンター（Ｗｉｎｔｅｒ）、　（１９８９）Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　８６　：３８３３−３８R７゜パルハム（Ｐａｒｈａｍ）、　Ｐ、　（１９８６）　Ｉｎ　Ｃｅ１ｌｕｌａｒ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ第４版（Ｄ］、ウェア（ｊｅｉｒ）編）、　ｖｏｌ、　１．第１４章、　Ｂｌａｃｋｖｅｌｌ　５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、カリフォルニア。ペイリス（Ｐｅｉｒｉｓ）、　Ｊ、　Ｓ、　Ｍ、、ポーターフィールド、Ｊ、　Ｓ、　、およびルーリツヒ（Ｒｏｅｈｒｉｇ）、　Ｊ、　Ｔ、　、　（１９８２）、　Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　ｆｌａｖｖｉｖｔｒ浮刀@Ｗｅｓｔ　Ｎｉ１ｅ、　Ｊ。Ｇｅｎ、　ＶｉｒｏＬ、　５８．２８３−２８９゜ピンク−（Ｐｉｎｔｅｒ）、＾、、Ｗ、Ｊ、ホネン（Ｈｏｎｎｅｎ）、　Ｓ、　Ａ、テイルー、Ｃ，ポナ（Ｂｏｎａ）、　！１゜ザグーア＝　（Ｚａｇｈｏｕａｎｉ）、　Ｍ、　Ｋ、ゴル＝　−（Ｇｏｒｎｙ）、およびＳ、ゾラーバスカー（１９８９）Ｊ、　ＶＩｒｏｌ　８３：２６７４−２６７９゜ビンター、＾０．とＷ、　Ｊ、ホネン、　（１９８８）Ｊ、　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ　６２：１０１６−１０２１゜ボポビソク（Ｐｏｐｏｖｉｃ）、　Ｍ、　、　Ｍ、　Ｇ、サルンガダーラ：／、　Ｅ、リード（Ｒｅａｄ）、およびＲｃ。ガロ、　（１９８４）　５ｃｉｅｎｃｅ　２２４：４９７−５００゜ボスカー１Ｍ、、ムケルジー（Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ）、　Ｍ、　、ヒデシｖ（Ｈｉｄｅｓｈｉｍａ＞、　Ｔ、　、カノン（Ｃａｎｎｏｎ）、　Ｔ、　Ｃ，、およびメイヤー（Ｍａｙｅｒ）、　Ｋ、　（１９９０）、　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ａｎ　ＩｇＧ−１ｈ浮高≠氏@ｔｉｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　ｔｈａｔ　ｎｅｕｔｒａｌｉｚｅｓ■ ｍ　１ｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ａ獅п@ｒｅａｃｔｓ　ｗｉｔｈ　ａ　ｃｅｌｌ　５ｕｒｆａｃｅ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｂｙ　Ｈ１’ｌ　１ｎｆｅｃｔｅｄ　ｃｅｌｌ刀A　５ｉｘｔｈ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｎ　ＡＩＤＳ、サンフランシスコ、要旨集、　Ｔｈ、　Ａ、　７７゜バットニー、Ｓ、Ｄ、、Ｔ、Ｊ、マッスーズＪ、Ｇ、ロビー（Ｒｏｂｅｙ）、　Ｄ、　Ｌ、リン（Ｌｙｎｎ）、　Ｍ、ロバートーギュロフ（Ｒｏｂｅｒｔ−Ｇｕｒｏｆｆ）、　Ｗ、　Ｔ、ミューラ −（Ｍｕｅｌｌｅｒ）、　Ａ、　Ｊ、ラングロア、Ｊ、グレイニブ（Ｇｈｒａｙｅｂ）、　Ｓ、　Ｒ，ペラテラエイ（Ｐｅｔｔｅｗａｙ）、　Ｋ、　Ｊ、ウニインボールド。Ｐ、１．フイツシンガー（Ｆｉｓｃｈｉｎｇｅｒ）、　Ｆ、ウォンースタール、　Ｒ，Ｃ，ガ町およびり、　Ｐ。ボログネン（１９８６）　５ｃｉｅｎｃｅ　２３４：１３９２−１３９５゜ラトカー（Ｒａｔｎｅｒ）ルｊｔｚ−ゼルタイン、Ｒ，パタルヵ（Ｐａｔａｒｃａ）、　Ｋ、　Ｊ、リバック（Ｌｉｖａｋ）、　Ｂ、スターチッチ（Ｓｔａｒｃｉｃｈ）、　Ｓ、　Ｆ、ジョセフス、Ｅ、Ｒ，ドーラン（Ｄｏｒａｎ）。Ｊ、　Ａ、ラフアルスキ（Ｒａｆａｌｓｋｉ）、　Ｅ、　Ａ、ウィツトホーエン（Ｗｈｉｔｖｈｏｅｎ）、　Ｋ、バウマイスタ−（Ｂａｕｍａｉｓｔｅｒ）、　Ｌ、イワノフ（Ｉｖａｎｏｆｆ）、　Ｓ、　Ｒ，ペツテウエイ、Ｍ、Ｌ、ビアンン（Ｐｅａｒｓｏｎ）、Ｊ、Ａ、ｏ−テンベルゴー（Ｌａｕｔｅｎｂｅｒｇｅｒ）、　Ｔ、　Ｓ、ババス（Ｐａｐａｓ）、　Ｊ、グレイニブ、Ｎ、Ｔ、チャン（Ｃｈａｎｇ）、　Ｒ，Ｃ，ガロ、およびウォンースタール、　（１９８５）　Ｎａｔｕｒｅ　３１３：２７７−２８４゜ロービチェック（Ｒａｕｂｉｔｓｃｈｅｋ）、　Ａ、＾、　（１９８５）　ｉｎ　Ｈｕｍａｎ　Ｈｙｂｒｉｄｏｏ＋ａｓ　ａｎｄ　Ｍｏｎｏモ撃盾■ ａ１＾ｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、　Ｅ、　Ｇ、エングルマン、　Ｓ、　Ｋ、　Ｈ，ファング、Ｊ、ラリツク、およびＡ、ロービチェック（編）　Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク、　ｐ、　４５４−４５５゜ラベッチ（Ｒａｖｅｔｅｈ）、　Ｊ、　Ｖ、　、　Ｕ、ジ−ベンリスト（Ｓｉｅｂｅｎｌｉｓｔ）、　Ｓ、コルスマイヤ−（Ｋ。ｒｓｍｅｙｅｒ）、　Ｔ、ワルドマン（Ｗａｌｄｍａｎｎ）、　、　およびＰ、リーダー（Ｌｅｄｅｒ）、　（１９８１）　Ｃｅ１ｌ　２７：５８３−５９１゜ロバートーギュロフ１Ｍ、、ブラウン（Ｂｒｏｗｎ）、麓、、およびガｏ、　Ｒ，Ｃ，（１９８５）、　ＨＴＬｖ−ＩＩＩ−ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ＡＩＤＳ　ａｎｄ　ＡＩＤＳ−ｒｅｌａｔｅｄ　ｃｏａ{ｐｌｅｘ、　Ｎａｔｕｒｅ、　３１６．７２−７４゜ロビンラン、ｆ、Ｅ、、カワムラ（Ｋａｗａｍｕｒａ）、　Ｔ、　、レーク（Ｌａｋｅ）、　Ｄ、　、　７スホ（Ｍａｓｕｈｏ）。Ｙｏ、ミソチーしくＭｉｔｃｈｅｌｌ）、　ｌ、　Ｍ、　、およびバーシー（Ｈｅｒｓｈｙ）、　Ｅ、　ｉｉ、　（１９９０）、　Ａｎｔｉｂ盾р奄■ ｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｉｍｍｕｎｏｄｏｍｉｎａｎｔ　ｄｏｍａｉｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｉＩＩｌｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅ獅モ凵@ｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　１　（ＨＩＶ−１）　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｇｐ４１　ｅｎｈａｎｃｅ　ＨＩＶ−１１ｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏA　Ｊ、　Ｖｉｒｏｌ。６４、５３０１−５３０５．　ロビンラン、　Ｊ、Ｅ、、Ｄ、ホルトン（Ｈｏｌｔｏｎ）、　Ｓ、バチェコーモレル（Ｐａｃｈｅｃｏ−Ｍｏｒｅｌｌ）、　Ｊ、すｓ　（Ｌｉｕ）、Ｊ、およびマクマルト（ＭｃＭｕｒｄｏ）、　ＩＩｌ、　（１９９０）、　Ｉｄｅ獅狽■ ｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ　ａｎｄ　ｖａｒｉａｎｔ　ｅｐｉｔｏｐｅｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃ奄■獅モ凵@ｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　１（ＨＩＶ（）　ｇｐ１２０　ｂｙ　ｈｕｍａｎ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂ凵@ＥＢＶ−ｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ　ｃｅｌｌ　１ｉｎｅｓ、　ＡＩＤＳ　Ｒｅｓ、　Ｈｕｍａｎ　Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ、　６．５６７−５７９゜ルック（Ｒｏｏｋ）、＾、Ｅ１．．レーン（Ｌａｎｅ）、　Ｈ，Ｃ，、フォークス（Ｆｏｌｋｓ）、　Ｔ、、　７　ソコイ（ＭｃＣｏｙ）、Ｓｌ、アルタ−（Ａｌｔｅｒ）、　Ｈ，、およびファウチ（Ｆａｕｃｉ）、＾、Ｓ、　（１９８７）、５ｅｒａ　ｆｒｏｔａ　ＨＴＩＪ−h ＩＩルＡＶ　ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ　１ｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ　ｍｅｄｉａｔｅ　ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　モ■撃撃浮撃≠■ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ａｇａｉｎｓｔ■ＴＬＶ−ＩＩＩ／ＬＡＹ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ　Ｔ　ｃｅｌｌｓ、　Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１R８．１０６４ −１０６７゜ラッセル（Ｒｕｓｓｅｌｌ）、　Ｐ、　Ｈ，（１９８６）、　Ｔｈｅ　ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ　ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｎ■魔モ≠唐狽■ ｅ　Ｄｉｓｅａｓｅ　ｖｉｒｕｓ　ｂｙ　ｔｗｏ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ｉｔｓ　ｈａｅｍａｇｇｌｕｔｉ獅奄氏|ｎｅｕｒａｍｉｎｉｄｓａｓｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ、Ａｒｃｈ、　Ｖｉｒｏｌ、　９０．１３５−１４４゜サンチェスーペスカドール（Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｐｅｓｃａｄｏｒ）、　Ｒ，、Ｍ、　Ｄ、パワー（Ｆ’ｏｖｅｒ）、　Ｐ、　Ｊ、バール、　Ｋ、　Ｓ、スタイ７−　（Ｓｔｅｉｍｅｒ）、　Ｍ、　Ｍ、ステンプテン（Ｓｔｅｍｐｔｅｎ）、　Ｓ、　Ｌ、ブラウンーシャイｖ−（Ｂｒｏｗｎ−Ｓｈｉｍｅｒ）、　ｆ、　ｊギー（Ｇｅｅ）、　Ａ、レカード（Ｒｅｎａｒｄ）、＾、ランドルフ（Ｒａｎｄ。１ｐｈ）、　Ｊ、　Ａ、レビー、Ｄ、ディナ（Ｄｉｎａ）、およびＰ、　Ａ、ルシーウ（Ｌｕｃｉｗ）、　（１９８５）　５ｃｉｅｎｃｅ２２７　：４８４−４９２゜スコツト（Ｓｃｏｔｔ）、　ｃ、　Ｆ、　；シルバー（Ｓｆｌｖｅｒ）、　Ｓ、　、プロフィ−、Ａ、Ｔ、、バットニー。Ｓ、Ｄ、、　ラ：／グｏ７．　Ａ、　、ウニインホールド、Ｘ、、およびロビンラン、　Ｊ、Ｅ、（１９９０）」ｕａ＋ａｎ　ｍｏｎｏｅｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　ｔｈａｔ　ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｓ　ｔｈｅ　Ｖ３　ｒｅｇｉｏｎ　ｏｆ　ｈ浮高≠氏@ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ　ｇｐ１２０　ａｎｄ　ｎｅｕｔｒａｌｉｚｅｓ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　Ｔ−１ｙｍｐｈｏｔｒｏｐ奄メ@ｖｉｒｕｓｔｙｐｅ　ＩＩＩ　ＭＮ　５ｔｒａｉｎ、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　８７．８５９７−８６０１゜シＢ　−（Ｓｈａｍ）、　Ｇ、　Ｍ、　、　Ｂ、　Ｈ，バーン（Ｈａｈｎ）、　Ｓ、　Ｋ、アリャ（Ａｒｙａ）、　Ｊ、　Ｅ、グループマン、Ｒ，Ｃ，ガロ、およびＦ、ウォンースタール、　（１９８４）　５ｃｉｅｎｃｅ　２２６：１１６５−１１７１゜シアダック（Ｓｉａｄａｋ）、　Ａ、　Ｗ、　、とＭ、Ｅ、ｏストロム（Ｌｏｓｔｒｏｍ）、　（１９８５）　ｉｎ　Ｈｕｍａｎ取りｒｉｄｏｍａｓ　ａｎｄ　Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ＾ｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、　Ｅ、　Ｇエングルマン、Ｓ、に、Ｆｌ、ファング、Ｊ。ラリツク、およびＡ、ｏ−ビチェ’７り（ＩＩ）　、　Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ、−ニーヨーク、ｐ、１６７−１８５゜スターチッチ、　Ｂ、Ｒ，、Ｂ、）ｌバーン、Ｇ、Ｍ、シｇ、Ｐ、Ｄ、７クニーリー（ＭｃＮｅｅｌｙ）。Ｓ、モトｏ　−（Ｍｏｄｒｏｗ）、Ｈ，ウルツ（ｆｏＬｆ）、　Ｅ、Ｓ、　バークス（Ｐａｒｋｓ）、　ｊ　Ｐ、　バークス。ＳＦ、ジョセフス、ｉＣガロ、およびＦ、ウォンースクール、　（１９８６）　Ｃｅ１ｌ　４５：６３７−６４８゜サン（Ｓｕｎ）　、　Ｎ、、ホー（Ｈｏ）　、　Ｄ、Ｄ、　、サン、Ｃ，Ｒ，Ｙ、、リオウ（Ｌｉｏｕ）、　Ｒｏ、　ゴートン（Ｇｏｒｄｏｎ）、　ｆ、　、ファン（Ｆｕｎｇ）　、　Ｍ、Ｓ、Ｃ，、シー（Ｌｉ）　、　Ｘ、　、ティン（Ｔｉｎｇ）、　Ｒ，Ｃ，、シー（Ｌｅｅ）、　Ｔ、　、チャン（Ｃｈａｎｇ）　、　Ｎ、Ｔ、　、およびチャン、　Ｔ、（１９１３９）。Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ｔｈｅ@ｐｕｔａｔｉｖｅＣＤ−４−ｂｉｎｄｉｎｇ　ｄｏＩＩｌａｉｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　１　ｇｐP２０．　Ｊ、　Ｖｉｒｏｌ、　６３．３５７９−３５８５゜タケダ（Ｔａｋｅｄａ）　、＾、、ツァゾン（Ｔｕａｚｏｎ）　、　Ｃ，Ｕ、　、およびエニス（Ｅｎｎｉｓ）。Ｆ、＾、　（１９８８）、＾ｎｔｉｂｏｄｙ−ｅｎｈａｎｃｅｄ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ＨＩＶ−１ｖｉａ　Ｆｃ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ|ｍｅｄｆａｔｅｄ　ｅｎｔｒｙ、　５ｃｉｅｎｃｅ、　２４２．５８０−５８３゜テン（Ｔｅｎｇ）、　Ｎ、　Ｎ、　＋１．　、　Ｋ、　Ｓ、ラム（Ｌａｗ）、　Ｆ、　Ｃ，リエラ（Ｒｉｅｒａ）　、およびＨ，Ｓ。カブラ：／　（Ｋａｐｌａｎ）、　（１９８３）Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ８０　ニア３０６−７３１２゜ポルク（Ｙｏｌｋ）　、　Ｗ、Ａ、　、スナイダ−（Ｓｎｙｄｅｒ）　、　Ｒ，Ｍ、　、ベンジャミン（Ｂｅｎｊａａ＋ｉｎ）、　Ｄ、　Ｃ，、およびワグナ−（ｆａｇｎｅｒ）、　Ｒ，Ｒ，（１９８２）、　Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅ刀@ｔｏ　ｔｈｅ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｏｆ　ｖｅｓｉｃｕｌａｒ　ｓｔｏｍａｔｉｔｉｓ　ｖｉｒｕｓ　：Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｎｅｕｔ窒≠撃奄嘯奄獅■ ａｃｔｉｖｉｔｙ、　Ｊ、Ｖｉｒｏｌ、　４２，２２０−２２７゜ファンへイニンゲン（ｖａｎ　Ｈｅｙｎｉｎｇｅｎ）、　Ｖ、　、とＳ、ファン　へイニンゲン、（１９８７）　ｉｎ　Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ　Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ、Ａ、Ｈ，バータル（Ｂａｒｔａｌ）、とＹ、ヒルシャウド（Ｈｉｒｓｈａｕｔ）　（編）　、　Ｈｕｍａｎａ　Ｐｒｅｓｓ、ニューシャーシー州、クリフトン。ｐ、　３９９−４１１゜ヴアイス（ｆｅｉｓｓ）、　Ｒ，Ａ、　、クラファム（Ｃｌａｐｈａｍ）、Ｐ、Ｒ，、チェインランーポボフ（Ｃｈｅｉｎｇｓｏｎｇ−Ｐｏｐｏｖ）、Ｒ１，ダルグレイシｘ　（Ｄａｌｇｌｅｉｓｈ）、＾、Ｇ、、カルネ（Ｃａｒｎｅ）、Ｃ０＾、、ウエラー（Ｗｅｌｌｅｒ）、　１．　Ｖ、　Ｄ、　、およびテッダー（Ｔｅｄｄｅｒ）、Ｒ，Ｓ、（１９８５）、　Ｎｅｕｔｒ■ ｌｊｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕａ＋ａｎ　Ｔ−１ｙｍｐｈｏｔｒｏｐｉｃ　ｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　ＨＩ　ｂｙ　５ｅｒａ　ｏｆ　ＡＩＤＳ@ａｎｄ　ＡＩＤＳ −ｒｉｓｋ　ｐａｔｉｅｎｔｓ、　Ｎａｔｕｒｅ！１６．６９−７１゜ゾラーパスカー、Ｓ、、ギアナカコス（Ｇｉａｎａｋａｋｏｓ）、　Ｖ、、ウィリアムス（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）。Ｃ１，シャーペ、Ｓ９．およびゴルニー、　Ｍ、に、　（１９９０）、Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　Ｖ３１ｏｏｐ　ｏｆ　ｇｐ１２０．５ｉｘｔｈ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａ戟@Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｎ　ＡＩＤＳ、サンフランシスコ、要旨集、　Ｔｈ、＾、７５゜ｉＦ”ｌＧ、１浄書（内容に変更なりＥｃｏ＋　Ｅ、、ｔＩ３／／Ｍ！浄書（内容に変更なし）浄書（内容に変更なし）ヒト打ひ３ｐ１２０ｍＡトＳの范１！トリ上の凍昧れ咀は迦牧４１１７Ｃ１，ｌｘｌｏ−９Ｍ　９．０ｘｌＯ’Ｌ／ａルＦＩＧ、４ＸスＦＩＧ、８ＡＦＩＧ、８Ｂ ÷ 波〉く α）〉諜１、事件の表示ＰＣＴ／ＵＳ９１１０７９１０平べ牛年拝きマ朧オダ０１Ｂ３２号２、発明の名称ＨＩＶ−Ｉ　ＧＰ１２０のＶ３ループおよびＣＤ−４結合部位に特異的な中和ヒトモノクローナル抗体３、補正をする者事件との関係　特許出願人住所名　称　ザ・パブリック・ヘルス・リサーチ・インスティチュート・オブ・ザ・シティ・オブ・（１）出願人の代表音名を記載した国内書面（２）委任状及び翻訳文（３）タイプ印書により浄書した明細書及び請求の範囲の翻訳文（４）図面翻訳文６、補正の内容別紙の通り（尚、上記（３）　（４）の書面の内容には変更ない国際調査報告１＋ｔｍ＋ｔｍｓ＋ｔａｌＡｗｌｌｅｍｅ＊Ｍｅ、−ｃ丁ｍ？Ｉｌｌア−１０フロントベージの続き（５１）Ｉｎｔ、Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号Ｃｌ２Ｎ　５／１０ＧＯＩＮ　３３１５３　Ｄ　８３１０−２Ｊ３３１５６９　Ｈ９０１５−２Ｊ３３１５７７　Ｂ　９０１５−２Ｊ（８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。ＤＫ、　ＥＳ、　ＦＲ，ＧＢ、　ＧＲ，ＩＴ、　ＬＵ、　ＮＬ、　ＳＥ）、０Ａ（ＢＦ、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ、ＣＩ、ＣＭ、ＧＡ、ＧＮ、ＭＬ、ＭＲ，ＳＮ、ＴＤ、ＴＧ）、ＡＴ、ＡＵ、　ＢＢ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ、　ＣＨ，Ｃ５，ＤＥ、　ＤＫ。ＥＳ、　ＦＩ、　ＧＢ、　ＨＵ、ＪＰ、　ＫＰ、　ＫＲ，ＬＫ、　ＬＵ、ＭＣ，ＭＧ、ＭＮ、ＭＷ、ＮＬ、Ｎｏ、ＰＬ、ＲＯ、ＳＤ、　ＳＥ、ＳＵ、　ＵＳＩ（７２）発明者　ピンター、エイブラハムアメリカ合衆国ニューヨーク州１１２１０．プルツクリン、イースト・トウニンティセカンド・ストリート　１２５０

Claims

【特許請求の範囲】

１．ＨＩＶ−１の感染性を協同的に中和できる抗体の混合物である、（ａ）ＨＩＶ−１エンべロップ糖タンパク質ｇｐ１２０のγ３ループに特異的な抗体：および（ｂ）ＨＩＶ−Ｉエンベロップ糖タンパク質ｇｐ１２０のＣＤ−４結合部位に特異的な抗体、から本質的に成る抗体の混合物。
２．ＨＩＶ−１の感染性を協同的に中和できる抗体の混合物である、（ａ）ＨＩＶ−１エンベロップ糖タンパク質ｇｐ１２０のＶ３ループに特異的なヒトモノクローナル抗体；および（ｂ）ＨＩＶ−１エンベロップ糖タンパク質ｇｐ１２０のＣＤ−４結合部位に特異的なヒトモノクローナル抗体、から本質的に成るヒトモノクローナル抗体の混合物。
３．（ａ）１１２５Ｈ細胞系により生産された抗体のｇｐ１２０への結合を競合的に阻害するヒトモノクローナル抗体；および（ｂ）４１１７Ｃ細胞系により生産された抗体のｇｐ１２０への結合を競合的に阻害するヒトモノクローナル抗体、から本質的に成る抗体の混合物。
４．ＣＤ−４結合部位に特異的である上記ヒトモノクローナル抗体は、（ａ）ＨＩＶ−１のＩＩＩＢ，ＭＮ，ＳＦ−２およびＲＦ株を中和し：（ｂ）ＬＡＶ−２とは反応せず；（ｃ）アセトンおよびメタノールの双方で固定したＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｄ）ホルムアルデヒトー固定ＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｅ）生きているＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｆ）ｇｐ１２０に対して高い親和性を有し；（ｇ）ｇｐ１２０の超可変領域Ｖ３ループとは反応せず：（ｈ）ＣＤ−４の存在においてｇｐ１２０への結合を阻害され；（ｉ）他の抗体の存在下において、約Ｉμｇ／ｍｌの濃度でＭＮ　ＨＩＹ−Ｉ株の５０％中和を達成し；そして（ｊ）ウイルスタンパク質のジスルフィド結合を減少する処理がなされたＨＩＶとは反応しない、請求項３に記載のヒトモノクローナル抗体の混合物。
５．１１２５Ｈ細胞系から得たヒトモノクローナル抗体および４１１７Ｃ細胞系から得たヒトモノクローナル抗体である請求項３に記載のヒトモノクローナル抗体の混合物。
６．（ａ）１１２５Ｈ細胞系から得たものと同一特性を有するヒトモノクローナル抗体：および（ｂ）４１１７Ｃ細胞系から得たものと同一特性を有するヒトモノクローナル抗体、から成る請求項３に記載のヒトモノクローナル抗体の混合物。
７．（ａ）１１２５Ｈ細胞系から生産された抗体のエピトープ特異性を実質的に有するヒトモノクローナル抗体：および（ｂ）４１１７Ｃ細胞系からから生産された抗体のエピトープ特異性を実質的に有するヒトモノクローナル抗体、から成るヒトモノクローナル抗体の混合物。
８．約０．５マイクログラム／ｍｌの濃度で、ＨＩＶ−１のＭＮ株の約１×１０４感染単位の少なくとも約９５％の中和を達成する、請求項１ないし７のいずれかに記載のヒトモノクローナル抗体の混合物。
９．約０．５マイクログラム／ｍｌの濃度で、ＨＩＶ−１のＭＮ株の約１×１０４感染単位の約９５％を中和する、請求項１ないし７のいずれかに記載の混合物。
１０．ｍ１あたり約１００マイクログラム以下の混合物濃度で、ＨＩＶの１０４ −１０憾染単位の５０％中和において、１未満の混合物指数値を有する請求項１ないし７のいずれかに記載の混合物。
１１．ｍ１あたり約１００マイクログラム以下の混合物濃度で、ＨＩＶの１０４ −１０５感染単位の５０％中和において、．５未満の混合物指数値を有する請求項１ないし７のいずれかに記載の混合物。
１２．上記の抗体は１：１のモル比である請求項１ないし７のいずれかに記載の混合物。
１３．約０．１５マイクログラム／ｍｌの濃度で、ＨＩＶ−１のＭＮ株の約１× １０４感染単位の５０％中和を達成する、請求項１ないし７のいずれかに記載のヒトモノクローナル抗体の混合物。
１４．約０．１５マイクログラム／ｍｌの濃度で、ＨＩＶ−１のＭＮ株の１×１０４感染単位の約５０％を中和する、請求項１ないし７のいずれかに記載の混合物。
１５．協同的にＳＦ−２株も中和する請求項１ないし７のいずれかに記載の混合物。
１６．約７マイクログラム／ｍｌの濃度で、ＨＩＶ−１のＳＦ−２株の１×１０４感染単位を少なくとも約９５％中和する、請求項１ないし７のいずれかに記載の混合物。
１７．約１．２マイクログラム／ｍｌの濃度で、ＨＩＶ−１のＭＮ株の約１×１０４感染単位の５０％中和を達成する、請求項１ないし７のいずれかに記載の混合物。
１８．ＨＩＶ−エンベロップ糖タンパク質ｇｐ１２０のγ３ループに特異的なヒトモノクローナル抗体を生産する細胞系であって、その抗体は４１１７Ｃ細胞系によって生産されたｇｐ１２０に対するエピトープ特異性を有する、細胞系。
１９．ＥＢＶに形質転換されたヒト細胞系である請求項１８に記載の細胞系。
２０．不滅化された細胞系である請求項１９に記載の細胞系。
２１．請求項１８に記載の細胞系で生産されたヒトモノクローナル抗体。
２２．細胞系４１１７Ｃにより生産された特異性を実質的に有する請求項２１に記載のヒトモノクローナル抗体。
２３．細胞系４１１７Ｃにより生産されたものと同一の特性を有する請求項２１に記載のヒトモノクローナル抗体。
２４．請求項１ないし７のいずれかに記載の有効量の混合物を個体に投与することからなるＨＩＶ−１感染の治療法。
２５．ＣＤ−４結合部位に対するモノクローナル抗体、そしてＶ−３領域に対するモノクローナル抗体が連続して投与される請求項２４に記載の方法。
２６．請求項１ないし７のいずれかに記載の有効量の混合物を個体に投与することからなるＨＩＶ−１感染の予防法。
２７．生理学的に適合性のある溶液中の請求項１ないし７のいずれかに記載の混合物を含む治療薬。
２８．ＨＩＶ−エンベロップ糖タンパク質のｐｇ１２０に特異的なヒトモノクローナル抗体を生産する細胞系であって、その抗体はＩＩＩＢ．ＭＮ，ＳＦ−２およびＲＦＨＩＶ株の中に保持されているｇｐ１２０エピトープに特異的である、形質転換細胞系。
２９．不滅化されたヒト細胞系であって、その細胞系はＨＩＶ−エンベロップ糖タンパク質ｇｐ１２０に特異的であるヒトモノクローナル抗体を生産し、その抗体は約１μｇ／ｍｌの濃度で、ＭＮ　ＨＩＶ−１株の約１×１０４感染単位の少なくとも約５０％の中和を達成する、不滅化されたヒト細胞系。
３０．不滅化されたヒト細胞系であって、その細胞系はＨＩＶ−エンベロップ糖タンパク質ｇｐ１２０に特異的であるヒトモノクローナル抗体を生産し、その抗体は約１μｇ／ｍｌの濃度で、ＭＮ　ＨＩＶ−１株の約１×１０４感染単位の約９０％の中和を達成する、不滅化されたヒト細胞系。
３１．不滅化されたヒト細胞系であって、その細胞系はＨＩＶ−エンベロップ糖タンパク質ｇｐ１２０に特異的であるヒトモノクローナル抗体を生産し、その抗体は（ａ）ＨＩＶ−１株である、ＩＩＩＢ，ＭＮ，ＳＦ−２およびＲＦを中和し；（ｂ）ｇｐ１２０に対して高い親和性を有し：（ｃ）ｇｐ１２０の超可変Ｖ３ループとは反応せず；（ｄ）ＣＤ−４の存在でｇｐ１２０への結合から阻害される、不滅化されたヒト細胞系。
３２．不滅化されたヒト細胞系であって、その細胞系はＨＩＶ−エンベロップ糖タンパク質ｇｐ１２０に特異的であるヒトモノクローナル抗体を生産し、その抗体は、（ａ）ＨＩＶ−１のＩＩＩＢ，ＭＮ，ＳＦ−２およびＲＦ株を中和し；（ｂ）ＬＡＶ−２とは反応せず；（ｃ）アセトンおよびメタノールの両方で固定したＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｄ）ホルムアルデヒドー固定ＨＩＶ−１感染細胞と反応し：（ｅ）生きているＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｆ）ｇｐ１２０に対して高い親和性を有し；（ｇ）ｇｐ１２０の超可変領域Ｖ３ループとは反応せず：（ｈ）ＣＤ−４の存在においてｇｐ１２０への結合から阻害され；（ｉ）約１μｇ／ｍｌの濃度でＭＮ　ＨＩＶ−１株の１×１０４感染単位の５０％中和を達成し；そして（ｊ）ウイルスタンパク質のジスルフィド結合を減少する処理がなされたＨＩＶとは反応しない、形質転換ヒト細胞系。
３３．ＥＢＶ形質転換により不滅化された請求項３１または３２に記載の細胞系。
３４．抗体はカッバー型の軽鎖インタイプおよびＩｇＧ１型の重鎖インタイプを有する請求項３１または３２に記載の細胞系。
３５．ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１０５８２で寄託された細胞系１１２５Ｈと同一の特性を有する請求項３２中のＥＢＶ−形質転換細胞系。
３６．ＡＴＣＣＣＲＬ１０５８２で寄託された細胞系１１２５Ｈからクローンされた請求項３２に記載のＥＢＶ−形質転換細胞系。
３７．ＨＩＶ−１株であるのＩＩＩＢ，ＭＮ，ＳＦ−２およびＲＦ中に保持されているｇｐ１２０エピトープに特異的なヒトモノクローナル抗体。
３８．約１μｇ／ｍｌの濃度で、ＭＮ　ＨＩＶ−１株の１×１０４感染単位の約９０％の中和を達成する請求項３７に記載のヒトモノクローナル抗体。
３９．ＨＩＶ−エンベロップ糖タンパク質ｐｇ１２０に特異的なヒトモノクローナル抗体であって、その抗体は、（ａ）ＨＩＶ−１のＩＩＩＢ，ＭＮ，ＳＦ−２およびＲＦ株を中和し；（ｂ）ｇｐ１２０に対して高い親和性を有し：（ｃ）ｇｐ１２０の超可変領域Ｖ３ループとは反応せず；（ｄ）ＣＤ−４の存在においてｇｐ１２０ヘの結合から阻害される、ヒトモノクローナル抗体。
４０．ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１０５８１で寄託された細胞系２１５４Ｂ．１により生産された、エピトープ特異性を有する請求項３９に記載のヒトモノクローナル抗体。
４１．ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１０５８１で寄託された細胞系２１５４Ｂ．１からクローンされた細胞から得た請求項４０に記載のヒトモノクローナル抗体。
４２．ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１０５８０で寄託された細胞系２１７３Ｃにより生産された、エピトープ特異性を有する請求項３９に記載のヒトモノクローナル抗体。
４３．ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１０５８０で寄託された細胞系２１７３Ｃからクローンされた細胞から得た請求項４２に記載のヒトモノクローナル抗体。
４４．ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１０５８２で寄託された細胞系１１２５Ｈにより生産された、エピトープ特異性を有する請求項３９に記載のヒトモノクローナル抗体。
４５．ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ１０５８２で寄託された細胞系１１２５Ｈからクローンされた細胞により生産された請求項４４に記載のヒトモノクローナル抗体。
４６．ＨＩＶ−エンベロップ糖タンパク質ｇｐ１２０に特異的であるヒトモノクローナル抗体であって、その抗体は、（ａ）ＨＩＶ−１のＩＩＩＢ，ＭＮ，ＳＦ−２およびＲＦ株を中和し；（ｂ）ＬＡＶ−２とは反応せず；（ｃ）アセトンおよびメタノールの両方で固定したＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｄ）ホルムアルデヒドー固定ＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｅ）生きているＨＩＶ−１感染細胞と反応し；（ｆ）ｇｐ１２０に対して高い親和性を有し；（ｇ）ＨＩＶ−１の超可変領域Ｖ３ループとは反応せず；（ｈ）ＣＤ−４の存在においてｇｐ１２０への結合から阻害され；（ｉ）約１μｇ／ｍｌの濃度でＭＮ　ＨＩＶ−１株の１×１０４感染単位の５０％中和を達成し：そして（ｊ）ウイルスタンパク質のジスルフィド結合を減少する処理がされたＨＩＶとは反応しない、ヒトモノクローナル抗体。
４７．カッパー型の軽鎖インタイブおよびＩｇＧ１型の重鎖インタイプを有する請求項４６記載のヒトモノクローナル抗体。
４８．さらに毒素が付ているヒトモノクローナル抗体を含む請求項３７ないし４７のいずれかに記載の治療薬。
４９．ＨＩＶ−１に対するワクチンとして使用するためのポリペプチド配列を決定するために、請求項３７ないし４７のいずれかに記載のモノクローナル抗体を使用することを特徴とする、モノクローナル抗体を使用するスクリーニング法。
５０．請求項４０ないし４５のいずれかに記載の抗体が特異的であるエピトープから成る抗原（この抗原は、本質的にエピトープ特異性を有するこれら抗体の生産から成る免疫反応を誘導することができる）を医薬的に受容できるキャリアーと混合して含むワクチン。
５１．モノクローナル抗体、モノクローナル抗体が特異的である抗原が上に被覆されている固相およびモノクローナル抗体と抗原との複合体を検出する手段を含む請求項３７ないし４７のいずれかに記載のモノクローナル抗体により認識されるエピトープに対する抗体の存在を測定するキット。
５２．請求項３７ないし４７のいずれかに記載のヒトモノクローナル抗体の有効量を投与することから成る、ＨＩＶ−１感染の予防および治療法。