JPH06501388A - 添加剤として選択されたモントモリロナイト粘土を含む動物飼料及び粘土を選択する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 添加剤として選択されたモントモリロナイト粘土を含む動物飼料及び枯木発明は 、選択されたタイプのモントモリロナイト粘土を添加することによって乾燥動物 飼料中に汚染物として存在する可能性があるマイコトキシンを不活性化するため の方法に関する。さらに詳細には、選択される粘土は、表面酸性度（５，０〜６ ．８ｐＫａの範囲でハメット指示薬によって測定された）対細孔容積（５０〜６ ００オングストロームの範囲の）の比が５より大きくそして好ましくは１０より 大きいカルシウムモントモリロナイト粘土である。

遍在する菌・カビによって製造される化学物質であるマイコトキシンは、家禽類 及び家畜類の産業に利益と損失との間の差を生み出す可能性がある。動物飼料へ のマイコトキシンで汚染された農業産品の振り向けの一般的な実施のために、動 物はマイコトキシンに対して極端に害をこうむり易い。かくして、マイコトキシ ン中毒症、即ちマイコトキシンで誘発される病気は、しばしば動物において起き る。

これらの薬剤の中で最も検討されそしていきわたっているものは、アフラトキシ ン、即ちコウジカビ菌のフラビス（ｆｌａｖｉｓ）及びパランチカス（ｐａｒａ ｓｉｔｉｃｕｓ）種によって生合成される一群の密接に関連した多置換クマリン 誘導体であることが科学文献の一覧から容易に明らかである。アフラトキシンは 、それらが　１）潜在的な発癌物として見いだすことができ、モして４）動物及 びヒトの病気と関係があることが発見された後では毒性の食物及び飼料に運ばれ る薬剤として多くの関心を集めた。

家禽類及び家畜類のアフラトキシンへの暴露の過重（ｐｒｅｐｏ口ｄｅｒａｎｃ ｅ）は、性質が慢性的でありそして、これらの化学品の低いレベルの摂取例えば 死亡率を増さずまた結果として病気の明瞭な兆候ももたらさない“ぎりぎりに汚 染された”　１日の食糧によって起きる。その代わりに、アフラトキシンへの慢 性的な暴露は、動物における経済的に重要な影響例えば成長率の低下、一層感染 しやすいこと及びストレスに耐える能力の減少をもたらす可能性がある免疫能力 の食物転換（ＣＯｎｖｅｒｓｉｏｎ）及び改変をもたらす。

農業産品中のアフラトキシンレベルの減少のための多数の手法が実験的に評価さ れてきた。これらは、規制のガイドライン内のレベルを得るためのアフラトキシ ンを含まない穀物との混合及び希釈：物理的な分離の方法例えば洗浄、密度分離 及び選択的破砕（ｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ）；溶媒抽出：生物学的不活性化 ：熱的不活性化：並びに種々の酸、アルデヒド、酸化剤及びアルカリによる化学 的不活性化を含む。これらの手法は、効能の欠如、プロトコールの経済的制約、 食物品質の受け入れられない変更、または潜在的に有害な物質の導入によって商 業的規模では比較的不成功であった。結果として、動物飼料の汚染を除くまたは 無毒化することができる簡単でコスト効果的で実用的でかつ安全な方法には大き な需要があるっ 米国特許第３．６８７．６８０号中におけるように、粘土例えばモン飼料中に以 前に組み込まれてきた。モントモリロナイトの添加に伴う効果は、鶏の成長率及 び体重の増加並びに死亡率の減少を含んでいた。ゼオライト［スミス（Ｓｍｉ　 ｔｈ）　、Ｊ、アニマル　サイエンス（Δユ±ｍａＩ　５ｃｉｅｎｃｅ）、１９ ８０　第５０（２）巻、２７８〜２８５頁］、ベントナイト［カールソン（Ｃａ ｒｓｏｎ）、Ｍ、Ｓ、玉シス　ユニバーシイティ　オブ　ゲルフ（Ｔｈｅｓｉｓ 　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｇｕｅｌｐｈ）、カナダ　１９８２コ及びカノ ーラ（Ｃａｎｏｌａ）石油精製からの廃漂白粘土［スミス、カン、（Ｃａｎ、） Ｊ、アニマル　サイエンス、１９８４、第６４巻、７２５〜７３２頁コの食物添 加は、ラット及び幼い豚におけるＴ−２毒素及びゼアラレノン（ｚｅａ　ｒａ　 Ｉ　ｅｎｏｎ、ｅ）の悪い影響を減少させることが示された。

モントモリロナイトを含む種々のフィロケイ酸塩による種々の液状媒体からのア フラトキシンＢ１の吸着が報告された［マシマンコ（Ｍａｓｉｍａｎｃｏ）ら、 ’７’／、ｆ、ニュートリシコン　玉上　アリメンテ−ナイトを含む広範囲の鉱 物を使用した詳細な検討［フィリップス（Ｐｈｉｌｌｉｐｓ）　ら、ボウルトリ ー　”ｊ＜、（Ｐｏｕｌｔｒｙ　Ｓｃｉ、）１９８８、第６７巻、２４３〜２４ ７頁］は、一連の種々のメンバーがアフラトキシンの吸着に関して異なるレベル の生体内及び生体外活性を示すことを示した。添付の表中で粘土Ａと名付けられ たカルシウムモントモリロナイトは、飼料添加剤として商業的に供給されてきた 。

／−価カチオンの低い比を有する）よりも優れていることが観察された。

カルシウムモントモリロナイトでさえアフラトキシンを吸着するそれらの能力が 顕著に変わることそして化学的に類似のモントモリロナイト粘土の間に実際に認 め得る差が存在することが認識された。しかしながら、どの物理的または化学的 特性が責任があるのかに関しての決定に導くために利用できる準備された説明は なかった。種々のカルシウムモントモリロナイトの間で、その場で結合する能力 はいずれの単一の物理化学的特性とも関係付けることはできなかった。

従って、本発明の目的は、広い種類の粘土の中から、マイコトキシン、殊にアフ ラトキシンを吸着するのに最も効果的であるモントモリロナイト粘土を選択する 手段を提供することである。

発明の要約 本発明は、アフラトキシンＢ１の生体外吸着に関して高い親和性を示すであろう 未加工モントモリロナイト粘土を同定するための方法に関する。本発明はまた、 マイコトキシンを含みそして、飼料中の元々のマイコトキシンの吸着を増進する であろう未加工モントモリロナイト粘土を含有する乾燥動物飼料組成物に関する 。

本発明者は、マイコトキシン、殊にアフラトキシンを吸着するのに最大の効果を 有するモントモリロナイト粘土は、表面酸性度（ＳＡｃ）割る細孔容積（ＰＶ） の比が、５．０〜６．８（即ち、弱い酸性）の範囲の表面酸サイトに関して６よ り大きい、好ましくは１０より大きいそして多孔度がそれらの径が５０〜６００ オングストロ一ム単位の範囲に入る細孔に関するものであるモントモリロナイト 粘土であり、そしてこの価のカチオンの比を有することによって更に特徴づけら れることを発見した。

本発明によれば、このような選択されたモントモリロナイト粘土は、動物飼料と 一緒に摂取されるマイコトキシン、例えばアフラトキシンと結合する動物飼料添 加剤として使用される。粘土と結合したマイコトキシンは消化の間にそれほど吸 着されないので、それは動物の排泄物中に結合している粘土と共に排泄される。

本発明の粘土添加剤は、マイコトキシン、特にアフラトキシンによって汚染され ている動物飼料の摂取及び消化の間にマイコトキシンに対する保護を与えるため に生物分解可能な動物飼料と共に最小量で使用される。本発明の添加剤は、小量 、例えば１日の食糧の００５〜１．５重量％、好ましくは０．　１〜０．５重量 ％、もっとも好ましくは１日の飼料の０，２〜０．６重量％の範囲の量で実質的 にすべての動物の１日の食糧と結び付く。なお、すべての重量は乾燥重量基準で 表され、そして粘土重量は１１０°Ｃで４時間の乾燥による重量％損失である。

必要に応じて、モントモリロナイト粒子を、粘土鉱物のマイコトキシン不活性化 容量を増すのに十分な量で、小量の水可溶性金属イオン封鎖剤によってコートす る。３／７／９０に出願された共に継続中のＵＳＳＮ　０７／４９００１３の教 示は引用によって本明細書中に組み込まれる。

ただ一つの添付の図面は、毒素結合とＳＡｃ／ＰＶ比を関係付けるグ本発明は、 アフラトキシンと結合する優れた吸着能力を示すモントモリロナイト粘土を同定 することができる方法の使用に関する。この方法は、２種類の物理化学的測定値 、即ち表面酸性度及び多孔度測定値を利用する。これらの２つの特性を利用する 数学的なモデルを演鐸的に誘導し、そして広い範囲の物理化学的特性を有する一 連の未加エモントモリロナイト粘土によって示されたアフラトキシンに関する吸 着能力と非常に良く関係することを見い出した。詳細には、未加工モントモリロ ナイト粘土によるアフラトキシンの生体外吸着は、以下のモデル・％ＡＤＳ、、 、、、。オ、−＝１．２７　（ＳＡｃ／ＰＶ）＋７４．６Ｕ式中、 ％Ａ　Ｄ　Ｓ　ｍ　ｌ　ｌ　ｍ　ｔ　ａ　ｘ　＋　ｎは、３７℃／６０分でＳｍ ｉの原料溶液（４０μｇのアフラトキシン）中で１ｍｇの粘土に結合するアフラ トキシンＢ１の％であり、 ＳＡｃは、ｍｅｑのｎ−ブチルアミン／ｇｍ粘土として測定した、５゜０〜６． ８の範囲の表面酸性度であり、そしてＰＶは、ｃｃ／ｇｍ粘土として測定した、 ５０〜６００Ａの細孔径の範囲の細孔容積（ＢＥＴ法）である〕 に従うことが見い出された。

本発明の添加剤は、小さな粒子または粉末として利用され、そして餌付けに先立 って任意の適切な方法によって動物飼料と完全に混合されねばならない。本発明 において使用される時には“動物飼料”または“１日の飼料”という語は、生物 劣化を受け易くそして動物または鳥によって食物として消費され得る任意の天然 のそして加工されたまたはその他の方法で改質された有機物質を指す。このよう な有機物質の例は、新しく収穫された穀物からベレット化された食物にまで及ぶ 。本発明における使用のための現在のところ好ましい動物飼料は、家禽類及び家 畜類の飼料である。

本発明においてマイコトキシン（例えばアフラトキシン）不活性化剤として利用 することができる粘土添加剤は、緑粘土タイプの粘土として知られているフィロ ケイ酸塩鉱物のメンバーである。構造的には、フィロケイ酸塩は、結合されたＭ ２〜ｓ　（ＯＨ）ｓ八面体（式中、Ｍは二価若しくは三価のどちらかカチオンま たはこれらの組み合わせである）と結合されたＳ　ｉ　（０，ＯＨ）　４四面体 との重合によって形成された層から本質的に作られている。上で述べた特性を有 することに加えて、緑粘土はまた、これらの粘土を水に添加する時に容易に可溶 化され得るもっと少ない量の可動性の（交換可能な）カチオンを有する。

金属イオン封鎖剤／粘土調製物の必要に応じた金属イオン封鎖剤部分は、食物加 工において使用されるーまたはそれより多い食品級の金属イオン封鎖剤塩を含む 。このような物質の一部のリストは、酢酸ナトリウム、カルシウム及びカリウム ：クエン酸ナトリウム、カルシウム及びカリウム並びに遊離酸並びにそのモノイ ソプロピル、モノグリセリド　ステアリル及びトリエチル誘導体、エチレンジア ミン四酢酸（ＥＤＴＡ）の二ナトリウムニ水素及び二ナトリウムカルシウム塩ニ ゲルコン酸カルシウム及びナトリウム、オキソステアリン：オルトリン酸塩（− カルシウム酸、−塩基性ナトリウム、三塩基性ナトリウム）：メタリン酸塩（カ ルシウムへキサメタ、ナトリウムへキサメタ）：ピロリン酸塩（テトラナトリウ ム、ナトリウム酸）ニトリポリリン酸ナトリウム、フィヂン酸チオ硫酸ナトリウ ム並びにこれらの混合物を含む。

本発明に導く実験的な仕事においては、変数例えば細孔容積、表面酸性度、表面 積及びｐＨに関してかなりの範囲に広がる一連の未加エモントモリロナイト粘土 が得られた。これらのサンプルをＡ、Ｂ、Ｃ，Ｄ及びＥとコード化した。サンプ ルを、それらのアフラトキシン結合能力に関してテストする前に、１１０℃で４ 時間乾燥しそして１７０メツシユのタイラー篩を通過するように粉砕した。間近 に検量したｐＨメーターを使用して新たに煮沸したＤＩ氷水中粘土のスラリーの 酸性度を測ることによってｐＨを測定した。粘土スラリーは、乾燥重量基準で９ 〜３８重量％の粘土の範囲であった。

これらの粘土物質を使用して生体外での結合研究を以下のように実施した二乾燥 した粘土の秤量したサンプルを、きれいな１６ｘ１２５ｍｍの捨てて良いガラス 試験管中に入れた。これに、５．００ｍ１のタイプ■の水（２回蒸留した脱イオ ン水に等しい）を添加した。この管を１５秒秒間中かに撹拌しそして次に３７℃ の水浴中に入れそして１時間平衡にならしめた。１時間後に、４０μｇのアフラ トキシンＢ１を導入した（１ｐｇ／μｍ溶液中で）。この管を１５分間隔（１５ ，３０及び４５分）で１５秒間渦巻きにした。１時間後に、この管を１２０Ｏｒ ｐｍで５分間遠心分離すると管の底にペレットがそして上に透明な上澄み液が生 成した。この上澄み液をきれいな試験管中に注意深く傾斜した。次に上澄み液を 抽出して残りのマイコトキシンを回収した。毎回２ｍｌのジクロロメタンで上澄 み液を３回抽出した。ジクロロメタン溶液を合わせそして分析に先立って窒素の 流れの下で蒸発して乾燥させた。このアフラトキシン結合研ｊからの乾燥した残 渣を既知の容積のクロロホルム中−； に再溶解し、２μｆカこの溶液をＨＰＴＬＣプレート（アナルテック（Ａｎａｌ ｔｅｃｈ）の上に点けけしそして９／１のクロロホルム／アセトン（Ｖ　／　Ｖ 　）溶媒システムを使用して展開した。同じプレートの上に点付けされた既知の 量のアフラトキシンＢ１と目視比較することによって量の測定を実施した。アフ ラトキシンの対照の分析は、ＨＰＴＬＣ以外にＧＣ／ＭＳによった。すべてのサ ンプルは三日操作した。金属ナトリウムから新たに蒸留したテトラヒドロフラン （ＴＨＦ）をアフラトキシンＢ１のための配達溶媒として使用した。上澄み液か らのアフラトキシンＢ１の回収％は、各々の実験に関して対照サンプルから測定 した。アフラトキシンＢ１の回収％は、ＧＣ／〜Ｉｓ、ＴＬＣ及びＨＰＬＣの量 の測定によって確認されたように、各々の実験に関して一貫して１００％である ことが見い出された。

表面酸性度がアフラトキシン結合特性に影響を与えるがどうかを決定するために 、Ｗ　クラトニツヒ（Ｋｌａｄｎｉｇ）の論文［Ｊ　フィケム　（Ｐｈｙ、Ｃｈ ｅｍ、）　、８０．２６２　（１９７６）］中に概論された手順を使用して５つ の粘土の表面酸性度を測定した。実験及び結果の記述を以下に提示する。

テストにおいて使用したバイアル、キャップ及び隔膜はフィートン（Ｗｈｅａｔ ｏｎ）社から購入した。ガラスバイアルは８ｍｌでありそして隔膜はテフロン面 のシリコーンであった。使用されたｓ　ｍｌのカイマックス（Ｋｉｍａｘ）ミク ロビユレットは０．０１ｍ１の目盛りを有していた。隔膜を貫くために、ルアー 　ロック（Ｌｕｅｒ　Ｌｏｋ）のサイズ１８の取り外し可能なンリンノ針をミク ロビュー１トの先端に取り付使用したすべての化学品は試薬級であった。

ｎ−ブチルアミンを乾燥するためにＫＯＨベレットを使用した。０゜０９８４Ｎ の溶液を作った後で、あり得る付加的な湿気を吸着するためにモレキュラーシー ブ（アルファ　プロダクツ（Ａｌｆａ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）によるリンダ（Ｌｉ ｎｄｅ）４Ａ）を添加した。

乾燥ベンゼンによって０．　１％指示薬溶液を作った。それらの各々の色変化及 びｐ　Ｋ、　ａを以下にリストする。

１．９−ジフェニル−１，３，６，８−ノナテトラエナー５−オン　Ｒ−Ｙ　− ３，Ｑ４−フェニルアゾジフェニルアミン　Ｐ−Ｙ　＋１．５ｐ−ジメチルアミ ノアゾベンゼン　Ｒ−Ｙ　＋３．３４−ｐ−エトキシフェニルアゾ−ｍ− フェニレンジアミン　Ｒ−Ｙ　＋５．０ニユートラルレツド　Ｒ−Ｙ　＋６．８ （Ｙ＝黄色：Ｒ＝赤：Ｐ＝紫） ニュートラルレッド及び４−ｐ−エトキンフェニルアゾ−ｍ−フェニレンジアミ ンはＨＣｌ塩として得られた。これらの塩を、ＤＩ氷水中溶解し、数滴のＮａＯ Ｈによって沈殿させ、濾過し、そしてテンケータ中で２４時間真空下で乾燥した 。ベンゼンに添加した時に、固体の一部はなボトル中に入れた。

これらのサンプルバイアルを、５００℃で４時間処理し、モしてダンケータ中に 入れ、そして必要とされるまで２５インチＨｇの真空下で貯蔵した。これらのサ ンプルは、一層の処理無しでそのまま使用した。

各々のバイアルに、Ｏ，Ｌｏｇの量の乾燥した粘土を、引き続いて５滴の０．１ ％指示薬溶液と一緒に３ｍｉ’のベンゼンを添加した。次に、サンプル中への湿 気の取り込みを防止するために、隔膜及びキャップをバイアルに取り付けた。１ 分間の超音波タンク中での浸漬は、粘土の上への指示薬の吸着を助けた。い（ら かの粘土をガラスの壁に接着せしめそして間違った結果を与える可能性がある突 然の動きからバイアルを防止するために注意を払った。吸着が完全になった後で （通常は３〜４時間）、サンプルを鉤　ＩＮのｎ−ブチルアミンによって０．　 ０５ｒｒ＋１づつ増して滴定した。（０，２ｍｌより多く滴定する時には、排出 による圧力がビユレットからの滴定液の流れを防止した。これらの場合には、隔 膜を貫きそして圧力を解放するために小さなシリンジを使用した）。

滴定の後で、サンプルをもう一度１分間超音波タンク中に入れた。平衡には４時 間以内に到達した（しかしニュートラルレッド指示薬は１６時間かかった）。一 度終点が決定されると、新しいシリーズの滴定は、この終点の範囲で０．Ｏ１ｍ Ａ’の増加で行い、そして同様に処理した。指示薬あたり約２グラムのサンプル が、この実験のためには適切であるはずである。

ｍｅｑ／ｇの粘土として報告されるデータを表２中に提示する。

嚢メー ｐＫａ　−３，０＋１．５　＋３．３　＋５．０　＋６．８肚 Ｃ，０１，０５，２８ Ａ　、０１　．０３　．４８ Ｂ　、０２　．０３　．８２ Ｄ　、０５　．０９　．１１　．８６ Ｅ　、０１　．０２　．０６　．１２　１．１４このデータはまた、表３中に示 すように、ｐＫａレンジでｍｅｑ／ｇとして提示することもできる。

粘土 Ｃ，０１，０４，２３ Ａ　、０１　．０２　．４５ Ｂ　、０２　．０１　．７９ Ｄ　、０５　．０４　．０２　．７５ Ｅ　、０１　．０１　．０４　．０６　１．０２５０〜６００オングストロ一ム 単位の範囲の径を有する細孔の表面積面積及び細孔容積分析計を使用して、慣用 の窒素吸着技術によって測定した。５０〜６００オングストロ一ム単位の範囲の 径を有する細孔の表面積及び容積に関してテストする前に、粘土を、それらを真 空下で約４８０°Ｆで１６時間加熱することによってまず子端処理した。ディン ソーブ２５００装置を使用して得られる細孔容積計算の詳細は、製造業者、ノル クロス（Ｎｏｒｃｒｏｓｓ）ジョーシア３００９３のマイクロメレティクス　イ ンスツルメント（Ｉｎｓ　ｔ　ｒｕｍｅｎ　ｔ）社によって供給された１９７２ 年８月１７日の刊行物、“物質分析実験応用ノート”ナンバー００２中にある。

表４は、このシリーズ中で使用されたモントモリロナイト粘土に関するアフラト キシン結合対物理化学的特性をリストしている。表５は、これらの粘土に関する 化学的分析をリストしている。

Ａ　７９．５　０．０８５　０．４５　５．３　５２　７．９５　２３．４Ｃ８ ４０，０４１０，２３５，６２３９，６８１３，８Ｄ　８６．４　０．０６８　 ０゜７５　１１．０　４２　５．５１　１８．９Ｂ　８９．２　０．０７１　０ ．７９　１１．１　５０　８．７５　１７．６Ｅ　９３．１．　０．０７３　＋ 、０２　＋、３．９　４６　５．１０　１７．１（１，）　３７℃／６０分／１ ｍｇ粘土／４０ｕｇアフラトキンンＢ１で（３）　５．０−６．８ｐＫａｉＭ囲 の表面酸性度；ｍｅｑのｎ−ブチルアミン／ｇｍ粘土。

（４）９〜３８重量％でのスラリー固体。

（５）　２００℃で一晩加熱する際の揮発性物質（損失重量％）。

５ｉ０２　＾１□０３　Ｆｅ２Ｏ３ＭｇＯＣａＯＮａ２ＯＫ２Ｏ粘土のタイプ＾ 　６７．６　２０．７　２，８２　５，４４　３．３２　０．３７　０．１９　 Ｃａ−モントモリロナイトＢ　６７．１　１９．４　５．８７　３，８５　３． １０　０．３０　０．４４　Ｃａ−モントモリロナイトＣ６３，５２１，１５， ０８３，４１４，１０２，１２０，７０Ｃａ−モントモリロナイトＤ　６７．２ 　２２．１　３，８０　４．１６　１．２７　０．３２　１．１６　Ｃａ／＾１ −モントモリロナイトＥ　７０．７　２０．０　１．１９　４，６７　２．２９ 　０．６６　０．５１　Ｃａ／＾ｌ−モントモリロナイトＣａ”２Ｍｇ”　Ｎａ ”″　Ｋ’　Ａ１＋Ｆｅ”　（二価十三価／−価）＾　１３７．９　１５．８　 ４．２５　．３８　３３．２Ｂ　１１５．４　１９．２　５．１８　．９４　２ ２．０Ｃ５８，０１０ロ　４１．７　２．０１　１．５６Ｄ　２５．７　１０． ２　５．７４　．３２　４５．４　１３．４Ｅ　５７．１　２０，２　１１．２ 　．４１　６．６７表４の未加工粘土に関するアフラトキシン結合効能について のデータから、低下する順序での結合の順序は、Ｅ、Ｂ、Ｄ、Ｃ及びＡである。

これらの種々の粘土の生体外でＱアフラトキシン結合能力と任意の一つの物理的 または化学的特性例えば細孔容積、表面積、表面酸性度またはｐＨとの間には簡 単な関係がないことは上の表中のデータの吟味から明らかである。これらの粘土 はこれらの変数に関してかなりの範囲で広がっていたことに注目せよ：細孔容積 は０．０４１〜０．８５ｃｃ／ｇｍの範囲に及び、表面酸性度（５，０〜５．８ ｐＫａ範囲での）は０．２３〜１．０２ｍｅｑのｎ−ブチルアミン／ｇｍ粘土で 変わり、表面積は２３〜５２ｍ２／ｇｍの範囲に及び、そしてスラリーのｐＨは 少し酸性の５．１０から中程度に塩基性の９．６８の範囲に及んでいた。

しかしながら、これらの粘土のアフラトキシン結合能力と、それらのｐＫａ値が ５．０〜６．８に入るハメｙｈ指示薬によって表面酸性度を測定する時のモして 細孔容積がそれらの径が５０〜６００Ａの範囲に入るすべての細孔を含む時のそ れらの表面酸性度対細孔容積の比との間には良好な関係（ｒ２＝領　８７）が存 在することが見い出された。これらのデータは添付の図面中のグラフとして提示 されている。物理的には、これらの結果が意味することは、比較的大きな細孔径 の領域における多孔度及び比較的弱い酸のサイトがアフラトキシン吸着の観点か ら最も効果的であるように見える。

かくして、本発明は、予備的なマイコトキシン結合検討を実施する必要無しで有 用な粘土と無効またはあまり有用ではない粘土とを区別する、マイコトキシンに 結合する際の使用のために適切な粘土を選択するための簡単な準備できた手段を 提供する。なお、前記の検討は、この初期の選択プロセスを実施した後で実施し て良い。

ＳＡｃ／ＰＶ比 国際調査報告 Ｉｓ＋ｍｓ＋ｉｅ＊ｓ＋Ａｍｌｅｍ＋＊−〜＠ｏｒ↑／ｌＩｃ０１／ＭＱｌ１１ 国際調査報告 ＵＳ　９１０５８０３ Ｓ＾　５１８４７

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）アフラトキシンを結合するための優れた吸着能力を示す未加工モントモリロ ナイト粘土を選択するための方法であって、表面酸性度及び多孔度の測定を実施 すること、これらの二つの特性を利用する数学的モデルを確立すること、並びに 以下のモデル：％ＡＤＳアフラトキシン＝１．２７（ＳＡｃ／ＰＶ）＋７４．６ ［式中、 ％ＡＤＳアフラトキシンは、３７℃／６０ｍｉｎで５ｍｌの原料溶液（４０Ｈｇ アフラトキシン）中で１ｍｇの粘土に結合するアフラトキシンＢ１の％であり、 ＳＡｃは、ｍｅｑのｎ−ブチルアミン／ｇｍ粘土として測定される、５．０〜６ ．８ｐＫａの範囲の表面酸性度であり、そしてＰＶは、ｃｃ／ｇｍ粘土として測 定される、５０〜６００Ａ細孔径範囲の細孔容積（ＢＥＴ法）である］ に従って使用のための未加工モントモリロナイト粘土を選択することを含有して 成る方法。 ２）生物分解性のある飼料が、マイコトキシンによって汚染され、そして６より 大きい表面酸性度割る多孔度（ここで表面酸性度はそれらのｐＫａ値が５．０〜 ６．８の範囲に入るサイトに関するものでありそして多孔度はそれらの径が５０ 〜６００オングストローム単位の範囲に入る細孔に関するものである）の比を有 するように選択された小量のカルシウムモントモリロナイトと混合される、乾燥 固体動物飼料組成物。 ３）該比が１０より大きい、請求項２記載の飼料組成物。 ４）該比が１１〜１４の範囲内である、請求項２記載の組成物。 ５）該カルシウムモントモリロナイトが、それらの（二価＋三価）／一価カチオ ンの比がより大きい交換可能なカチオンを有する、請求項２記載の組成物。 ６）飼料が、それらのｐＫａ値が５．０〜６．８の範囲に入りそして多孔度がそ れらの径が５０〜６００オングストローム単位の範囲である細孔に関するもので ある、表面の酸のサイトに関する表面酸性度割る多孔度の比を有するように選択 される約０．０２５〜１．５重量％の高カルシウム／低ナトリウムベントナイト と混合されたマイコトキシンによって汚染されている、乾燥固体動物飼料組成物 。