JPH0570448A - Ｈｉｖプロテアーゼ阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 ストレプトミセス培養株による生物変換で得
られる下記構造式を有する化合物。 【化４】 【効果】 ＨＩＶプロテアーゼを阻害し、ＨＩＶの感染
予防又は治療およびエイズの治療に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明はヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）
によりコードされるプロテアーゼを阻害する化合物に関
する。本化合物又はその薬学上許容される塩はＨＩＶ感
染の予防、ＨＩＶ感染の治療及び感染による後天性免疫
不全症候群（エイズ）の治療に有益である。本発明は本
化合物を含有した医薬組成物並びにエイズ及びＨＩＶウ
イルス感染治療用の他の薬剤と一緒にまたは単独で本化
合物を使用する方法にも関する。

【０００２】ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）と称され
るレトロウイルスは免疫系の進行性破壊（後天性免疫不
全症候群；エイズ）と中枢及び末梢神経系の変性とを含
めた複合疾患の病原体である。このウイルスはＬＡＶ、
ＨＴＬＶ・III 又はＡＲＶとして以前知られていた。レ
トロウイルス複製に共通した特徴はウイルスアセンブリ
ー及び機能上必要な成熟ウイルスタンパク質を生成する
ための、ウイルスによりコードされるプロテアーゼによ
る前駆体ポリタンパク質の広範囲な翻訳後プロセッシン
グである。このプロセッシングの遮断は通常感染ウイル
スの産生を妨げるらしい。例えば、クロウフォード、
Ｓ．ら、ジャーナル・オブ・バイロロジー、第５３巻、
第８９９頁、１９８５年[Crawford,S.et al.,J.Virol.,
５３、８９９（１９８５）］は、前駆体構造タンパク質
のプロセッシングを妨げる、ネズミ白血病ウイルスにお
けるプロテアーゼの遺伝的欠失変異は非感染性ウイルス
粒子を生じることを証明した。非プロセッシング構造タ
ンパク質もヒト患者から単離された非感染性ＨＩＶ株の
クローンで観察された。これらの結果はＨＩＶプロテア
ーゼの阻害がエイズの治療及びＨＩＶ感染の予防又は治
療に関して実現可能な方法であることを示唆する。

【０００３】ＨＩＶのヌクレオチド配列決定ではｐｏｌ
遺伝子が１つのオープン読取り枠で存在することを示す
［ラトナー、Ｌ．ら、ネーチャー、第３１３巻、第２７
７頁、１９８５年（Ratner,L.et al.,Nature,３１３、
２７７（１９８５）） ］。アミノ酸配列相同性は、ｐ
ｏｌ配列が逆転写酵素、エンドヌクレアーゼ及びＨＩＶ
プロテアーゼについてコードすることを示す［トー、
Ｈ．(Toh,H.)ら、ＥＭＢＯジャーナル、第４巻、第１２
６７頁、１９８５年；パワー、Ｍ．Ｄ．ら、サイエン
ス、第２３１巻、第１５６７頁、１９８６年(Power,M.
D.et al.,Science,２３１，１５６７（１９８６））；
パール、Ｌ．Ｈ．(Pearl,L.H.)ら、ネイチャー、第３２
９巻、第３５１頁、１９８７年］。本出願人らは本発明
の化合物がＨＩＶプロテアーゼの阻害剤であることを証
明している。

【０００４】要約すると本発明では、ここで定義される
ような生物変換化合物が開示される。本化合物は単一化
合物として、または薬学上許容される塩（適切な場
合）、医薬組成物成分もしくはプロドラッグとして又は
他の抗ウイルス剤、抗感染剤、免疫調節剤、抗生物質も
しくはワクチンと組合せてＨＩＶプロテアーゼの阻害、
ＨＩＶ感染の予防、ＨＩＶ感染の治療、エイズ及び／又
はＡＲＣの治療に有用である。エイズ治療方法、ＨＩＶ
感染予防方法及びＨＩＶ感染治療方法も開示されてい
る。

【０００５】以下本発明を詳細に説明する。本発明はＨ
ＩＶプロテアーゼの阻害、ＨＩＶ感染の予防又は治療及
びその結果の後天性免疫不全症候群（エイズ）の治療に
おける下記構造の化合物又はその薬学上許容される塩の
用途に関する。生物変換化合物はＨＩＶプロテアーゼ阻
害剤の１つであるＬ−６８９、５０２の存在下でストレ
プトミセス(Streptomyces)ＡＴＣＣ５５０８６を培養し
て産生される。生物変換化合物は下記構造の化合物：

【化２】 又はその薬学上許容される塩である。本発明の化合物の
薬学上許容される塩（水もしくは油溶性又は分散性生成
物の形）としては本化合物の慣用的無毒性塩がある。水
和物又はエステルも本発明に包含される。このような水
和物又はエステルとは当業者にとって容易に想起しうる
化合物であり、例えばＣ_1-4 アルキルエステルがある。

【０００６】本発明の化合物はＨＩＶプロテアーゼの阻
害、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染の予防又は治
療及び感染に続くエイズのような結果的病状の治療に有
用である。エイズの治療又はＨＩＶ感染の予防もしくは
治療とは格別限定されないが、広範囲のＨＩＶ感染状
態：顕性および非顕性のエイズとＡＲＣ（エイズ関連合
併症）並びにＨＩＶとの現実的又は潜在的接触の治療を
含めて定義される。例えば、本発明の化合物は例えば輸
血、偶発的針刺又は手術中患者血液との接触などのＨＩ
Ｖとの過去の接触が疑われるＨＩＶ感染を治療する上で
有用である。

【０００７】これらの目的から、本発明の化合物は慣用
的な無毒性の薬学上許容されるキャリア、アジュバント
及び賦形剤を含有した投薬単位処方剤として経口、非経
口（皮下、静脈内、筋肉内、胸骨内注射又は注入技術を
含む）、吸入スプレー又は経直腸投与される。このため
本発明によれば、ＨＩＶ感染及びエイズ治療のための方
法及び医薬組成物も更に提供される。その治療では製剤
キャリア及び治療上有効量の本発明の化合物を含有した
医薬組成物をかかる治療の必要な患者に投与する。これ
らの医薬組成物は経口投与用懸濁液又は錠剤；経鼻スプ
レー；例えば無菌注射用水性又は油性懸濁液のような無
菌注射製剤；坐剤の形である．懸濁液として経口投与さ
れる場合、これらの組成物は医薬処方業界で周知の技術
に従い製造され、増量剤として微結晶セルロース、懸濁
剤としてアルギン酸又はアルギン酸ナトリウム、増粘剤
としてメチルセルロース及び当業界で公知の甘味剤／芳
香剤を含有していてもよい。速放出錠剤として、これら
の組成物は微結晶セルロース、リン酸二カルシウム、デ
ンプン、ステアリン酸マグネシウム、ラクトース及び／
又は当業界で公知の他の賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊
剤、希釈剤、滑沢剤も含有してよい。

【０００８】経鼻エアゾール又は吸入により投与される
場合、これらの組成物は医薬処方業界で周知の技術に従
い製造され、ベンジルアルコール又は他の適切な保存
剤、生体利用効率を高める吸収促進剤、フッ化炭素類及
び／又は当業界で公知の他の溶解又は分散剤を用いて生
理食塩水中の溶液として製造できる。注射溶液又は懸濁
液はマンニトール、１，３−ブタンジオール、水、リン
ゲル溶液もしくは等張塩化ナトリウム溶液のような適切
な無毒性の非経口上許容される希釈剤もしくは溶媒又は
合成モノもしくはジグリセリドを含めた無菌低刺激性固
定油及びオレイン酸を含めた脂肪酸のような適切な分散
もしくは湿潤及び懸濁剤を用いて公知技術に従い処方さ
れる。

【０００９】坐剤の形で経直腸投与される場合、これら
の組成物は常温で固体であるが直腸腔内で液化及び／又
は溶解して薬物を放出するカカオ脂、合成グリセリドエ
ステル又はポリエチレングリコールのような適切な無刺
激性賦形剤と薬物を混ぜることにより製造される。

【００１０】０．０２〜５．０又は１０．０ｇ／日程度
の投薬レベル、経口用量では２〜５倍高い用量が前記症
状の治療又は防止上有用である。例えば、ＨＩＶ感染は
１〜３回／日で体重Kg当たり化合物１０〜５０mgの投与
により有効に治療される。しかしながら、いかなる特定
患者の具体的用量レベル及び投薬頻度も一定でなく、用
いられる具体的化合物の活性、その化合物の代謝安定性
及び作用時間、患者の年令、体重、一般的健康度、性
別、食事、投与方式及び時間、排出速度、薬物併用、具
体的症状の程度並びに治療をうけるホストを含めた様々
な因子に依存していると理解される。

【００１１】本発明はＨＩＶプロテアーゼ阻害化合物と
エイズの治療に有用な１種以上の薬剤との組合せにも関
する。例えば、本発明の化合物は接触前及び／又は接触
後の時間にかかわらず有効量の他のエイズ抗ウイルス
剤、免疫調節剤、抗感染剤又はワクチンと組合せて有効
に投与される。

【００１２】親化合物Ｌ−６８９，５０２の生物変換 本発明の新規抗菌化合物はストレプトミセス培養株＃Ｓ
−２９−１４５（ＡＴＣＣ５５０８６）の接種により制
御的条件下で適切な水性栄養培地の好気性発酵中に産生
される。抗生物質の産生用に用いられるような水性培地
が本発明の新規化合物を産生する上で適する。このよう
な培地は微生物が資化しうる炭素、窒素及び無機塩の供
給源を含有している。多くの発酵培地はストレプトミセ
ス培養株＃Ｓ−２９−１４５によるＬ−６８９、５０２
からＬ−６９７、８１１への生物変換を支持し、発酵微
生物学者の日常的技術範囲内で適切に調整される。

【００１３】一般に、炭水化物、例えばグルコース、フ
ルクトース又はデンプン及びグリセロール、ペクチン又
はペプトン化ミルクは単独で又は組合せて栄養培地中資
化炭素源として使用できる。培地で利用される炭素源の
正確な量は培地の他の成分に一部依存しているが、一般
に炭素源の量は通常培地の約１〜約６重量％である。こ
れらの炭素源は個別的に用いられるか又は数種のこのよ
うな炭素源が培地中で混合される。

【００１４】多数のタンパク質性物質が発酵プロセスで
窒素源として用いられる。適切な窒素源としては例えば
酵母エキス、酵母加水分解産物、大豆粉、ディスティラ
ーズソリュブル、コーンスチープリカー、ペプトン化ミ
ルク、ラード水、ピーナツミール及びトマトペースト等
がある。窒素源は単独で又は組合せて水性培地の約０．
２〜６重量％範囲の量で用いられる。

【００１５】培地に配合してよい栄養無機塩としてはナ
トリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグ
ネシウム、リン酸、硫酸、塩化物、炭酸等のイオンを生
じうる慣用的な塩がある。更にコバルト、マンガン及び
鉄のような微量金属も含有してよい。

【００１６】発酵は典型的にはバッフルのついたフラス
コにおいて約２０〜約４２℃の範囲、好ましくは約２７
℃の温度で行われる。ストレプトミセス培養株＃Ｓ−２
９−１４５を増殖させかつ本発明の新規化合物を産生す
るために適した栄養培地のpHは約５．５〜８．０の範
囲、好ましくは約７．０であるべきである。本化合物の
小規模発酵は適切な栄養培地に培養菌を接種し、産生培
地に移した後好気性条件下で発酵を数日間シェーカー上
一定温度で進めることにより行われる。基質Ｌ−６８
９、５０２の添加後、インキュベートが１〜４日間続け
られる。第二インキュベート期間終了時に、生物変換産
物が下記技術で発酵ブロスから単離される。

【００１７】小規模発酵は無菌フラスコ内において１，
２，３又は４段階で種菌を展開させて行ってもよい。種
菌段階用栄養培地は炭素及び窒素源のいかなる適切な組
合せであってもよい。種菌フラスコは最大増殖が完了す
るまで（通常１〜３日間）定温室で振盪され、得られた
増植物の一部は更なる種菌段階又は産生培地のいずれか
に接種するため用いられる。中間段階種菌フラスコが用
いられる場合は、実質上同様に展開される、即ちフラス
コ内容物の一部が次段階の種菌培地又は産生培地のいず
れかに接種するため用いられる。接種された産生フラス
コは数日間（通常２〜５日間）にわたり定温で振盪され
る。基質Ｌ−６８９、５０２の添加後、インキュベート
が１〜４日間行われる。第二インキュベート期間終了時
に、本発明の新規化合物が単離される。

【００１８】大規模作業の場合、攪拌機及び好気性条件
下で発酵培地を維持する手段を装備した適切なタンク内
で発酵を行うことが好ましい。栄養培地はタンク内で調
製され、約１２０℃に加熱することで滅菌される。冷却
後、滅菌された培地に産生菌の既増殖種培養物を接種
し、発酵が定温に維持しながら数日間（例えば２〜５日
間）にわたり続ける。基質Ｌ−６８９、５０２の添加
後、インキュベートが１〜４日間続けられる。本出願ガ
イドライン及び実験プロトコールをもとにする、ストレ
プトミセス＃Ｓ−２９−１４５に関する適切な発酵又は
培養条件の決定も本発明の範囲内に属すると理解され
る。小及び大規模発酵を含めたこのような条件は当業者
で容易に確認される慣用的な適合化又は普通のバリエー
ションである。

【００１９】生体変換微生物ＭＡ６８１６の特徴（＃Ｓ
−２９−１４５） 供給源 −ＭＡ６８１６（ＣＩＢＥ Ｓ−２９−１４５）
はアナンダ・テンプル、パガン、ミャンマー(Ananda Te
mple,Pagan,Burma) の黄砂土壌サンプルである。細胞壁組成の分析 −ＭＡ６８１６ペプチドグリカンはＬ
−ジアミノピメリン酸を含有している。全細胞糖分析で
はグルコース、微量のリボース及びキシロースを示す。一般的増殖特性 −ＭＡ６８１６株は酵母麦芽エキス、グ
リセロールアスパラギン、無機塩−デンプン、オートミ
ール及びトリプチケースソイ寒天でよく増殖する。その
株は２７〜３７℃で増殖し、酵母デキストロースブロス
のような液体培地でもよく増殖する。コロニー形態 −（２１日目の酵母麦芽エキス寒天上）Ｍ
Ａ６８１６−基質菌糸体はブリリアントオレンジ（６７
brill.ＯＹ）であり、コロニーは不透明、隆起状、全円
かつゴム状である。コロニー表面は荒い。気菌糸は５日
間のインキュベート後に現れ、白色（２６３ホワイト）
である。胞子体は存在する場合に褐色がかったピンク色
（３３br. ピンク）である。微細形態 −ＭＡ６８１６気菌糸（０．５７μm 径）は基
質菌糸体から四方に広がり、直線状である。成熟培養物
において、気菌糸の端は、単独かつ擬輪生子状に生じ、
らせん状にのびてゆく胞子の鎖である。培養が進むに従
い、胞子体は不定形に合体する傾向がある。

【００２０】その他の生理反応−ＭＡ６８１６：培養物
はメラノイド色素を産生しない。デンプンは加水分解さ
れる。二硫化水素は産生されない。拡散性黄色色素が１
％α−Ｄ−グルコース、セロビオース、Ｄ−マルトー
ス、Ｄ−マンニトール、Ｄ−マンノースを加えたプリダ
ム−ゴットリーブ(Pridham-Gottlieb)基体培地で産生さ
れる。炭素源利用パターンは下記のとおりである：Ｄ−
フルクトース、Ｄ−マンノース、Ｄ−キシロースはよく
利用される；セロビオース、β−Ｄ−ラクトース、Ｄ−
マルトース、Ｄ−マンニトールは中程度に利用される；
α−Ｄ−ラクトースはほとんど利用されない；Ｄ−アラ
ビノース、Ｌ−アラビノース、イノシトール、Ｄ−ラフ
ィノース、Ｌ−ラムノース、スクロース、Ｌ−キシロー
スは全く利用されない。

【００２１】識別−この株の化学分類的及び形態学的特
徴はストレプトミセス属の種に関して公表された記載と
比較して差がない。ＭＡ６８１６：この株の炭素源利用
パターンはＳ．ゴシケンシス(S.goshikensis) 及びＳ．
パクタム(S.pactum)と強い類似性を有する。気菌糸にお
ける坦胞子体の配列も同様にＳ．パクタムの場合とよく
似ている。しかしながら、この培養株はラベンジュラエ
(lavendulae)種複合体の一員に典型的でないＳ．ヒグロ
スコピクス(S.hygroscopicus) 株の場合と似て胞子体が
吸湿性合体性を示す。このように、ＭＡ６８１６はこの
種複合体の一員と考えられない。いずれのＳ．ヒグロス
コピクス株も赤色胞子体を示さない。したがって、この
株は以前に記載されていない種であるらしい。

【００２２】ＡＴＣＣ寄託 本出願の米国出願日又はその前に、＃Ｓ−２９−１４５
とも表示されるＭＡ−６８１６のサンプルは１２３０／
パークローン・ドライブ、ロックビルＭＤ２０８５２の
アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(Ameri
can Type Culture Collection)（ＡＴＣＣ）に寄託され
た。培養株受理表示は５５０８６である。この寄託物は
少なくとも３０年間ＡＴＣＣで維持され、それを開示す
る特許の許可で公に利用可能となる。寄託物が利用でき
るということは行政力で認可される特許権を侵害して本
発明を実施するライセンスを構成するわけではないと理
解されるべきである。

【００２３】実施例１親化合物Ｌ−６８９、５０２の合成 製造及び合成は一般に米国特許第４，６６１，４７３
号；エバンス、Ｂ．Ｅ．ら、ジャーナル・オブ・オーガ
ニック・ケミストリー、第５０巻、第４６１５頁、１９
８５年［Evans,B.E.et al.,J.Org.Chem.,５０、４６１
５（１９８５）］；エバンス、Ｂ．Ｅ．ら、“ヒドロキ
シエチレンジペプチド同配体の立体制御合成”、プロシ
ーディグス・オブ・アメリカンペプチド・シンポジウ
ム、第９巻、第７４３−６頁、１９８５年[Evans,B.E.e
t al.,“A Stereocontrolled Synthesis of Hydroxyeth
ylene Dipeptide Isosteres ”，Proc.Am.Pept.Symp.,
９，７４３−６（１９８５）］；ラリー、Ｊ．Ｒ．(Lul
y,J.R.) ら、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミス
トリー、第５２巻、第１４８７頁、１９８７年に従う
が、それらはすべて参考のためここに組込まれる。すべ
ての温度は他に指摘のないかぎり摂氏度である。

【００２４】Ｎ−（シス−２（Ｒ）−ヒドロキシ−１
（Ｓ）−インダニル）−５（Ｓ）−（１，１−ジメチル
エトキシカルボニルアミノ）−４（Ｓ）−ヒドロキシ−
６−フェニル−２（Ｒ）−［（４−（２−（４−モルホ
リニル）エトキシ）フェニル）メチル］ヘキサンアミド
Ｌ−６８９、５０２の製造 ステップＡ ：Ｎ−３（Ｓ）−［（１，１−ジメチルエト
キシカルボニル）アミノ］−２（ＲＳ）−ヒドロキシ−
４−フェニル−１−トリメチルシリルブタンの製造 乾燥ジエチルエーテル（２００ml）中のマグネシウム屑
（９．７９ｇ、４０３mmol）の攪拌懸濁液に窒素下でク
ロロメチルトリメチルシラン（５０ml、３５８mmol）を
加えた。反応を穏やかな加温で開始させ、しかる後氷浴
で冷却して穏やかな還流を維持した。発熱が終了した
後、反応液を室温で１時間攪拌し、しかる後ドライアイ
ス／アセトン浴で−７８℃に冷却した。グリニャール溶
液に乾燥ジエチルエーテル（２５０ml）中Ｎ−２（Ｓ）
−［（１，１−ジメチルエトキシカルボニル）アミノ］
−３−フェニルプロピオンアルデヒド（１９．３ｇ、７
７．４mmol）の溶液を攪拌下で反応温度−５５℃に保ち
ながら滴下した。得られた灰色懸濁液を室温に戻し、そ
れを３０分間攪拌した後、氷（５００ｇ）及び１０％ク
エン酸（５００ml）の混合液に注ぐことで反応を停止さ
せた。有機相を集め、水相をジエチルエーテル（３×３
００ml）で抽出した。合わせた有機相を１０％クエン酸
（１×３００ml）及び塩水（１×２００ml）で洗浄し、
無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、黄色
油状物として粗製Ｎ−３（Ｓ）−［（１，１−ジメチル
エトキシカルボニル）アミノ］−２（ＲＳ）−ヒドロキ
シ−４−フェニル−１−トリメチルシリルブタン（２
６．６ｇ、粗収率は定量的）を得た。分析サンプルは低
圧クロマトグラフィー（シリカゲル、２３０〜４００メ
ッシュ；ジエチルエーテル：ヘキサン３０％：７０％）
を行いしかる後ヘプタンからの再結晶化で得た。mp＝９
１〜９５°；元素分析、計算値Ｃ₁₈Ｈ₃₁ＮＯ₃ Ｓｉ（３
３７．５３）：Ｃ＝６４．０５、Ｈ＝９．２６、Ｎ＝
４．１５；実測値：Ｃ＝６４．０５、Ｈ＝９．１３、Ｎ
＝４．２２；［α］_D ２０＝−４０．０°

【００２５】ステップＢ：３（Ｓ）−アミノ−４−フェ
ニル−１−ブテンの製造 窒素下氷浴で冷却された乾燥塩化メチレン（４００ml）
中ステップＡの生成物（２２．８ｇ、６７．５mmol）の
攪拌溶液に細流として三フッ化ホウ素エーテル和物（４
３ml、３４５mmol）を加えた。溶液を室温に戻し、それ
を４日間攪拌した。反応液を氷浴で冷却し、１０％水酸
化ナトリウム（４００ml）の滴下で反応を停止させた。
有機相を集め、水相を塩化メチレン（２×２５０ml）で
抽出した。合わせた有機相を塩水（１×２００ml）で洗
浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮
し、黄色油状物として粗製３（Ｓ）−アミノ−４−フェ
ニル−１−ブテン（１４．２ｇ）を得た。

【００２６】ステップＣ：Ｎ−３（Ｓ）−［（１，１−
ジメチルエトキシカルボニル）アミノ］−４−フェニル
−１−ブテンの製造 乾燥塩化メチレン（２００ml）中のステップＢの生成物
（１４．２ｇ）及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネー
ト（３１．０ｇ、１４２mmol）の溶液を室温で１８時間
攪拌し、１０％クエン酸（３×１００ml）、水（１×１
００ml）、飽和炭酸水素ナトリウム（３×１２５ml）及
び塩水（１×２５０ml）で洗浄し、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥し、濾過し、濃縮し、黄色油状物として粗製Ｎ
−３（Ｓ）−１−［（１，１−ジメチルエトキシカルボ
ニル）アミノ］−４−フェニルブテン（３４．６ｇ）を
得た。粗生成物を低圧クロマトグラフィー（シリカゲ
ル、２３０〜４００メッシュ、１０×２０cmカラム；ジ
エチルエーテル：ヘキサン２０％：８０％）で精製し、
白色固体物としてＮ−３（Ｓ）−［（１，１−ジメチル
エトキシカルボニル）アミノ］−４−フェニル−１−ブ
テン（１６．３ｇ、収率９７．６％）を得た。分析サン
プルはヘプタンからの再結晶化で得た。mp＝６７．５−
６８．５°；元素分析、計算値Ｃ₁₅Ｈ₂₁ＮＯ₂ （２４
７．３４）：Ｃ＝７２．８４、Ｈ＝８．５６、Ｎ＝５．
６６ 実測値：Ｃ＝７２．７８、Ｈ＝８．７６、Ｎ＝５．６４

【００２７】ステップＤ：１（Ｒ）−［１’（Ｓ）−
（１，１−ジメチルエトキシカルボニル）アミノ−２−
フェニルエチル］オキシランの製造 窒素下氷浴で冷却された乾燥塩化メチレン（１００ml）
中のステップＣの生成物（９．４ｇ、３８mmol）の溶液
に３−クロロ過安息香酸（テクニカルグレード、８０〜
８５％；４１ｇ、２００mmol）を加えた。混合液を０°
で１８時間及び２５°で２３時間攪拌し、しかる後ジエ
チルエーテル（３００ml）で希釈し、氷冷１０％亜硫酸
ナトリウム水（１リットル）に注いだ。有機層を集め、
水層をジエチルエーテル（３×１００ml）で抽出した。
合わせた有機層を１０％亜硫酸ナトリウム（３×１００
ml）、飽和炭酸水素ナトリウム（３×１００ml）及び塩
水（１×１００ml）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾
燥し、濾過し、濃縮して、白色固体物を得た。粗生成物
を低圧クロマトグラフィー（シリカゲル、２３０〜４０
０メッシュ、８×１５cmカラム；酢酸エチル：ヘキサン
２５％：７５％）で精製し、透明油状物として１（Ｒ）
−［１’（Ｓ）−（１，１−ジメチルエトキシカルボニ
ル）アミノ−２−フェニルエチル］オキシラン（７．０
ｇ、収率７０％）を得たが、これは放置すると結晶化し
た。分析サンプルはヘプタンからの再結晶化で得た。mp
＝５１．５−５２°；元素分析、計算値Ｃ₁₅Ｈ₂₁ＮＯ₂
（２６３．３４）：Ｃ＝６８．４２、Ｈ＝８．０４、Ｎ
＝５．３２．実測値：Ｃ＝６８．２２、Ｈ＝８．２６、
Ｎ＝５．２９；［α］_D ２０＝１．３４°

【００２８】ステップＥ：（５Ｓ，１’Ｓ）−３−カル
ボエトキシ−５−［１−（（１’，１’−ジメチルエト
キシカルボニル）アミノ）−２−フェニルエチル］ジヒ
ドロフラン−２−（３Ｈ）−オンの製造 ステップＤの生成物９．９３ｇを無水エタノール１００
mlに溶解し、無水エタノール１７０ml中のナトリウム
２．６ｇ及びマロン酸ジエチル２０．１mlの溶液に加え
た。一夜攪拌後、反応液を１０％クエン酸でpH４に酸性
化し、エーテル２×５００mlで抽出した。合わせた有機
抽出液を水１×５００ml、飽和ＮａＨＣＯ₃ １×５００
ml、飽和塩水１×５００mlで洗浄し、ＭｇＳＯ₄ で乾燥
した。溶媒を除去し、粗生成物をシリカゲル低圧クロマ
トグラフィーにより５０％エーテル／ヘキサン（又はＥ
ｔＯＡｃ／ヘキサン）で溶出させて精製した。半固体生
成物の収量は１０．６ｇであった。後の方の分画は白色
固体物として望ましくない５Ｒ異性体２．５ｇを含有し
ていた。

【００２９】ステップＦ：（５Ｓ，１’Ｓ）−３−カル
ボエトキシ−３−（４−ベンジルオキシフェニルメチ
ル）−５−［１−（１，１−ジメチルエトキシカルボニ
ル）アミノ）−２−フェニルエチル］ジヒドロフラン−
２（３Ｈ）−オンの製造 無水エタノール２５ml中の（５Ｓ，１’Ｓ）−３−カル
ボエトキシ−５−［１−（（１’，１’−ジメチルエト
キシカルボニル）アミノ）−７−フェニルエチル］ジヒ
ドロフラン−２（３Ｈ）−オン（ステップＥの生成物）
２ｇ（５．３mmol）の攪拌溶液に、無水エタノール２．
２ml中ナトリウム０．１３ｇの溶液しかる後４−ベンジ
ルオキシベンジルクロリド１．３０ｇ（５．５mmol）を
加えた。溶液を窒素下で１時間５０℃に加熱し、しかる
後氷浴で冷却し、１０％クエン酸２０mlで酸性化し、水
２００mlで希釈した。混合液をエーテル３×１００mlで
抽出し、合わせたエーテル抽出液を水５０ml、飽和Ｎａ
ＨＣＯ₃ ２００mlで洗浄し、ＭｇＳＯ₄ で乾燥した。溶
媒の減圧除去及びシリカゲル低圧クロマトグラフィーに
よりヘキサン中４０％エーテルで溶出させる精製で、Ｔ
ＬＣ（５０％エーテル／ヘキサン）によると本質的に単
一な透明無色ガラス状物質１．５６ｇ（収率５１％）を
得た。

【００３０】ステップＧ：（３Ｒ，５Ｓ，１’Ｓ）−３
−（４−ベンジルオキシフェニルメチル）−５−［１−
（（１，１−ジメチルエトキシカルボニル）アミノ）−
２−フェニルエチル］ジヒドロフラン−２−（３Ｈ）−
オンの製造 ステップＦの生成物１３．６ｇを１，２−ジメトキシエ
タン２５０mlに溶解し、それに室温で１Ｍ水酸化リチウ
ム１１７mlを加えた。１２時間攪拌後、溶媒を減圧下で
除去し、残渣を１０％クエン酸２００mlに懸濁し、ジエ
チルエーテル３×５００mlで抽出した。合わせたエーテ
ル抽出液を塩水５００mlで洗浄し、（ＭｇＳＯ₄ ）乾燥
し、濃縮乾固させた。残渣をトルエン２５０mlに溶解
し、１２時間加熱還流し、しかる後減圧下で濃縮乾固さ
せた。シリカゲル中圧クロマトグラフィーにより１５％
酢酸エチル／ヘキサンで溶出させる精製で、透明泡状物
として３Ｒ−ラクトン３．２ｇを得た。更に同溶媒によ
る溶出で、白色固体物として３Ｓ−ラクトン６．１５ｇ
を得た。

【００３１】ステップＨ：Ｎ’−（１，１−ジメチルエ
トキシカルボニル）−５（Ｓ）−アミノ−４（Ｓ）−
（１’，１’−ジメチルエチル−１，１−ジメチルシリ
ルオキシ）−６−フェニル−２（Ｒ）−（４−ベンジル
オキシフェニルメチル）ヘキサン酸の製造 ステップＧの生成物０．６ｇをエチレングリコールジメ
チルエーテル／水の２：１混合液３０mlに溶解し、それ
に室温で１Ｍ水酸化リチウム５mlを加えた。１時間攪拌
後、混合液をクロロホルム２００ml及び１０％クエン酸
２０mlで分配した。各層を分離し、水相をクロロホルム
３×２０mlで抽出した。合わせた有機層を（Ｎａ₂ ＳＯ
₄ ）乾燥し、溶媒を除去して、粗製ヒドロキシ酸０．５
６ｇを得た。この残渣を乾燥ＤＭＦ５mlに溶解し、ｔｅ
ｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド０．８４５ｇ及び
イミダゾール０．７２５ｇを加えた。１８時間攪拌後、
反応液を水５０mlに注ぎ、酢酸エチル３×２０mlで抽出
した。合わせた有機抽出液を１０％クエン酸３×２０m
l、水１×２０ml、飽和Ｎａ₂ ＣＯ₃ 水溶液３×１０ml
及び塩水２０mlで洗浄した。（Ｎａ₂ ＳＯ₄ ）乾燥後、
溶媒を除去し、得られた残渣をＴＨＦ５ml、氷酢酸５ml
及び水２mlの混合液に溶解した。混合液を４時間攪拌
し、しかる後水５０mlに注ぎ、エーテル３×２０mlで抽
出した。合わせたエーテル抽出液を水、塩水２×２０ml
で洗浄し、（Ｎａ₂ ＳＯ₄ ）乾燥し、溶媒を除去した。
シリカゲル中圧クロマトグラフィーによりＭｅＯＨ／Ｃ
ＨＣｌ₃ で溶出させて精製し、白色ガラス状固体物とし
て生成物０．６０ｇを得た。

【００３２】ステップＩ：１−アミノ−２−ヒドロキシ
インダンの分割 既知ラセミ体１−アミノ−２−ヒドロキシインダンか
ら、分割が下記実施例（ステップＤ及びＥ）で３−アミ
ノ−１，２−ジヒドロキシインダンに関して記載される
ように実施された。高Ｒｆ側ジアステレオマーのケン化
から得られる（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ヒドロ
キシインダンはα_D −５８°（ｃ＝１．０、ＣＨＣｌ
₃ ）であることが示された。低Ｒｆ側ジアステレオマー
のケン化から得られる（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２
−ヒドロキシインダンはα_D ＋６２°（ｃ＝１．０、Ｃ
ＨＣｌ₃ ）であることが示された。

【００３３】ステップＪ：Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ
−１（Ｓ）−インダニル）−５（Ｓ）−（１，１−ジメ
チルエトキシカルボニルアミノ）−４（Ｓ）−ヒドロキ
シ−６−フェニル−２（Ｒ）−（４−ベンジルオキシフ
ェニルメチル）ヘキサンアミドの製造 ステップＨの生成物０．１２ｇを乾燥ＤＭＦ２mlに溶解
し、それに１（Ｓ）−アミノ−２（Ｒ）−ヒドロキシイ
ンダン（ステップＩ）４０mg、１−ヒドロキシベンゾト
リアゾール水和物２５mg及びジメチル−３−（３−ジメ
チルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩７０mgを加
えた。トリエチルアミンをpH８．５になるまで（３２m
l）攪拌溶液に加えた。攪拌して減圧下で濃縮乾固後、
残渣をクロロホルム１００mlに溶解し、１０％クエン酸
１×５０ml、水１×５０ml、飽和ＮａＨＣＯ₃ １×５０
mlで処理し、ＭｇＳＯ₄ で乾燥し、濃縮乾固した。残渣
をテトラヒドロフラン１mlに溶解し、ＴＨＦ中の１Ｍテ
トラブチルアンモニウムフルオリド２mlに加えた。室温
で一夜攪拌後、反応混合液を１０％クエン酸１０mlで希
釈し、白色沈殿物を濾取した。生成物をシリカゲル低圧
クロマトグラフィーにより２％メタノール／ＣＨ₂ Ｃｌ
₂で溶出させて精製し、生成物８５mgを得たが、これは
ＴＬＣ（３％メタノール／ＣＨ₂ Ｃｌ₂ ）によると本質
的に単一であった。

【００３４】ステップＫ：Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ
−１（Ｓ）−インダニル）−５（Ｓ）−（１，１−ジメ
チルエトキシカルボニルアミノ）−４（Ｓ）−ヒドロキ
シ−６−フェニル−２（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニ
ルメチル）ヘキサンアミドの製造 ステップＪの生成物８５mgをメタノール１０ml及びＴＨ
Ｆ１０mlに溶解し、それに１０％パラジウム炭素１．１
０ｇを加えた。混合液を水素雰囲気下室温で４８時間攪
拌し、しかる後濾過し、濃縮乾固した。残渣を熱エタノ
ール１０mlに溶解し、水２０mlを加えた。冷却後に白色
固体沈殿物を集め、減圧下Ｐ₂ Ｏ₅ で乾燥した。収量は
純粋生成物７２mg（収率９８％）であった：mp２１８−
２１９°（２１５°で起泡、焼結）；元素分析、計算値
Ｃ₃₃Ｈ₄₀Ｎ₂ Ｏ₆ （５６０．６９６）：Ｃ，７０．６
９；Ｈ，７．１９；Ｎ，５．００ 実測値：Ｃ，７０．６２；Ｈ，７．３９；Ｎ，４．７９

【００３５】ステップＬ：Ｎ−（シス−２（Ｒ）−ヒド
ロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−５（Ｓ）−（１，１
−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）−４（Ｓ）−ヒ
ドロキシ−６−フェニル−２（Ｒ）−［（４−（２−
（４−モルホリニル）エトキシ）フェニル）メチル］ヘ
キサンアミドの製造 無水ジオキサン１００ml中のステップＫの生成物Ｎ−
（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−５
（Ｓ）−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミ
ノ）−４（Ｓ）−ヒドロキシ−６−フェニル−２（Ｒ）
−（４−ヒドロキシフェニルメチル）ヘキサンアミド
（０．５０ｇ、０．９mmol）、無水炭酸セシウム（１．
０ｇ、３mmol）及びＮ−（２−クロロエチル）モルホリ
ン遊離塩基（２．３５ｇ、１７mmol）の攪拌混合液を３
時間にわたり８０°（内部温度）に加熱した。室温まで
冷却後、混合液をクロロホルム（５０ml）で希釈し、濾
過し、減圧下で濃縮乾固し、残渣を無水エーテル５０ml
及び酢酸エチル１０mlで摩砕した。白色固体生成物を集
め、減圧下Ｐ₂ Ｏ₅ で乾燥した。収率は純粋生成物０．
５４ｇ（８９％）であった：mp１９５−７°；元素分
析、計算値Ｃ₃₉Ｈ₅₁Ｎ₃ Ｏ₇（６７３．８５６）：Ｃ，
６９．５２；Ｈ，７．６３；Ｎ，６．２３ 実測値：Ｃ，６９．１９；Ｈ，７．４５；Ｎ，６．１５ マレイン酸塩水和物：mp１１２−１１３°分解；元素分
析、計算値Ｃ₃₉Ｈ₅₁Ｎ₃Ｏ₇ ．Ｃ₄ Ｈ₄ Ｏ₄ ．Ｈ₂ Ｏ：
（８０７．９４６）：Ｃ，６３．９２；Ｈ，７．１１；
Ｎ，５．２０；実測値：Ｃ，６４．２３；Ｈ，６．９
４；Ｎ，５．１０．

【００３６】実施例２Ｌ−６８９，５０２の生物変換 ストレプトミセス培養株＃Ｓ−２９−１４５（Ｌ−９２
０，９６３−００１Ｄ）の凍結バイアル（２．５ml）を
用いて、２５０mlバッフル付エルレンマイヤーフラスコ
内の発酵培地（５０ml）に接種した。２７°、２２０rp
m で４８時間のインキュベーション後、種（２．５ml）
を新たな発酵培地（各５０ml）含有の２５０mlバッフル
付エルレンマイヤーフラスコに移した。培養条件は種菌
段階の場合と同様であった。４８時間のインキュベーシ
ョン後、基質（フラスコあたりＤＭＳＯ中のＬ−６８
９，５０２ ２．２mg）をフラスコに加え、インキュベ
ーションを同条件下で７２時間続け、主生成物としてＬ
−６９７，８１１を得た。 発酵培地：成 分 濃度（ｇ／リットル） デキストロース ４．０ 麦芽エキス １０．０ 酵母エキス ４．０ 栄養ブロス ４．０ pH７．０に調整

【００３７】実施例３生物変換代謝産物の単離及び精製 ＨＰＬＣ法を単離のためと発酵及び精製ステップのモニ
ターのために用いた。調製用操作は２２５nmでモニター
した。分析用操作は２１５及び２２５nmでモニターし、
各ピークのスペクトルをコンピューターファイルに貯え
た。Ｃ₁₈クロマトグラフィー媒体を分析（４．６mm×２
５cm）及び調製用（１０mm×２５cm）双方の分離に用い
た。流速は各々０．９ml／min 及び３．０ml／min であ
った。２つの異なる勾配法で、２種の電解質溶液（溶媒
Ａ）を水性成分として用いた。中性緩衝液（pH６．２）
は２０mMリン酸アンモニウム溶液であった。酸性溶液は
１０mMリン酸であった。有機相（溶媒Ｂ）はアセトニト
リル−水（８５：１５v/v)であった。１つの調製用単離
用生物変換バッチは９個の振とうフラスコサンプルから
構成された。対応サンプルを合わせ、硫酸ナトリウムを
全ブロスに約５％濃度まで加えた。全ブロスを各々同容
量のメチルエチルケトン（ＭＥＫ）で２回抽出した。プ
ールされたＭＥＫ抽出液を減圧下で油状物にまで蒸発さ
せた。残渣をメタノール（５ml）と共に音波処理し、生
成した沈殿物を分離するため遠心した。上澄を蒸発乾固
し、調製用ＨＰＬＣ分離のためメタノール（１ml）に再
溶解した。最初の分離は中性勾配で行った。複数回行っ
た対応分画を合わせ、蒸発乾固させた。分画の最終精製
は酸性勾配で行った。分画を検出されたピークに従い集
めた。いかなる有意ピークも示さない領域では、２min
分画を集めた。純粋生成物含有分画を合わせ、濃ＮＨ₄
ＯＨで中和し、蒸発乾固させた。生成物はそれをメタノ
ールで選択的に溶解することにより不溶性リン酸アンモ
ニウムから分離した。勾配プログラムは下記のとおりで
あった： 時間（min) 溶媒Ｂ％ 分析、中性： ０−２ ３５ ２−３ ３５−４５ ３−１０ ４５−６５ １０−１２ ６５−１００ １２−１７ １００ １７−１８ １００−３５ 分析、酸性： ０−２ ３０ ２−１８ ３０−８０ １８−２０ ８０−１００ ２０−２４ １００ ２４−２５ １００−３０ 調製用、中性： ０−２．５ ３５ ２．５−７ ３５−４５ ７−３０ ４５−６５ ３０−３４．５ ６５−１００ ３４．５−４３ １００ ４３−４４ １００−３５ 調製用、酸性： ０−２．５ ３０ ２．５−３０ ３０−７５ ３０−３２ ７５−１００ ３２−４３ １００ ４３−４４ １００−３０

【００３８】Ｌ−６９７，８１１：全部で１９．８mgの
Ｌ−６８９，５０２が主生成物（１３．３mg）に変換さ
れたが、但し数種の他の副代謝産物も検出された。抽出
及びクロマトグラフィー精製は前記のように行った。中
性調製用ＨＰＬＣで、１９．５min で溶出するピークを
集めた。次いでこの分画を酸性調製用ＨＰＬＣで再クロ
マトグラフィーに付し、１１．２min に出てくる最終生
成物を得た。約２．５mgの基質は未変化のままであっ
た。単離プロセスで純粋物質７．５mgを得た。化学構造
はＮＭＲ及びＭＳ研究で決定した。 保持時間（min)： 中性勾配 酸性勾配 化合物 分析 調製用 分析 調製用 Ｌ−６９７，８１１ １１．２ １９．５ １１．３ １１．２ Ｌ−６８９，５０２ １４．６ ３１．６ １５．２ ｎ．ａ． Ｌ−６９７，８１１の構造は下記のように決定された：

【化３】 ＮＭＲ及びＭＳによるキイとなるスペクトル分析特徴は
以下であった： １． ３．３５及び３．５３ppm （Ｊ＝１２Ｈｚ）にお
ける新しい１対のジェミナルスプリットダブレット ２． ＢＯＣメチルピーク（６Ｈ）の領域 ジェミナルメチルピークのやや高磁場側シフトの他に、
ＮＭＲスペクトルはポイント１及び２を除き親化合物
（Ｌ−６８９，５０２）の場合とよく似ている。 ３． 通常より１６質量単位高いＢＯＣフラグメント

【００３９】質量スペクトル分析ではマトリックスとし
て“マジック・ビュレット”（magic bullet) （５：１
ジチオスレイトール／ジチオエリスリトール）を用いて
正のＦＡＢ−ＭＳ条件下で構造を確認した。Ｌ−６９
７，８１１の低分解ＦＡＢスペクトルではm/z ６９０で
分子イオン（Ｍ＋Ｈ）を示したが、これはＬ−６８９，
５０２分子への酸素原子の付加を示唆している。m/z ５
７４のフラグメントイオンはＢＯＣ基の喪失を表し、酸
素がＢＯＣメチル基の１つに加えられたことを示す。高
分解ＦＡＢ−ＭＳで測定された正確な質量は６８９．３
５９７であった。Ｃ₃₉Ｈ₅₁Ｎ₃ Ｏ₈ に関する計算値は６
８９．３６７６である。

【００４０】実施例４組換えＨＩＶプロテアーゼ（ＡＰＲＩＮ２．１）の阻害
アッセイ 阻害研究は大腸菌で発現されたＨＩＶプロテアーゼとト
リチウム化ペプチド基質［³ Ｈ］−アセチル−Ｖａｌ−
Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−（β−ナフチル−Ａｌａ）−
Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａ
ｒｇ−ＮＨ₂ （ＭＷ１８００）との反応で行われた。カ
ルボキシル末端における２つのアルギニン残基はこのペ
プチドを酸性pHで全体的に正荷電にしており、そのため
Ｈ⁺ 形のダウエックス（DOWEX)ＡＧ−５０Ｗ−Ｘ８樹脂
及び類似樹脂に結合させることができる。ＨＩＶプロテ
アーゼはβ−ナフチル−Ａｌａ及びプロリン残基間で開
裂し、中性又はやや陰荷電のいずれかであって陽イオン
交換樹脂と結合しない生成物（³ Ｈ）−アセチル−Ｖａ
ｌ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−（β−ナフチル−Ａｌａ）を生じ
る。したがって基質から標識生成物をうまく分離するこ
とができる。アッセイ緩衝液（pH５．５の１００mM酢酸
ナトリウム及び０．１％ＢＳＡ）中６．０〜８．０nMＨ
ＩＶプロテアーゼ含有の２５μl をアッセイチューブに
いれる。pH５．５の１００mM酢酸ナトリウム中４．２μ
Ｍトリチウム化ペプチド基質２５μl ずつ添加して反応
を開始させる。３７°で６０分間のインキュベーション
後、反応を５％Ｈ₃ ＰＯ₄ １００μl で停止させ、しか
る後カラムクロマトグラフィーを用いて分析する。結果
は下記のとおりである： （１）コントロール：Ｌ−６８９，５０２のＡＰＲＩＮ
２．１活性： （２）主代謝産物のＡＰＲＩＮ２．１活性： 培養株＃ 保持時間（min) 濃度 APRIN 2.1 活性（化合物） 調製用HPLC 分析HPLC （ng／ml) （阻害率％） S −29−145 19.75 11.30 11.6 92 (L-697,811)

【００４１】実施例５Ｌ−６９７，８１１の有機合成 Ｎ−（シス−２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダ
ニル）−５（Ｓ）−（１，１−ジメチルエトキシカルボ
ニルアミノ）−４（Ｓ）−ヒドロキシ−６−フェニル−
２（Ｒ）−［（４−（２−（４−モルホリニル）エトキ
シ）フェニル）メチル］ヘキサンアミドと命名されるＬ
−６８９，５０２の１当量をトリフルオロ酢酸で処理
し、ＢＯＣ保護基を除去する。次いで生成物をカップリ
ング反応で５当量の１，１−ジメチル−（２−ベンジル
オキシ）エチルオキシカルボニルクロリドと反応させ
る。ベンジルオキシ保護基を次のパラジウム炭素による
水素添加で除去し、生成物Ｌ−６９７，８１１を得る。
前記明細書は説明目的で記載される実施例と共に本発明
の原理について示しているが、本発明の実施には特許請
求及びその相当範囲内に属するものとしてすべての通常
の変更、応用又は修正を包含すると理解される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ラツセル ビー．リンガム アメリカ合衆国，07060 ニユージヤーシ イ，ウオツチユング，ヨハンナ レーン ５ (72)発明者 バイロン エツチ． アリソン アメリカ合衆国，07060 ニユージヤーシ イ，ウオツチユング，センチユリー レー ン 88 (72)発明者 ローレンス エフ．コルウエル，ジユニア アメリカ合衆国，07724 ニユージヤーシ イ，イートンタウン，プリンセス レーン ５ (72)発明者 ジヨルジエツテ デゼニイ アメリカ合衆国，07078 ニユージヤーシ イ，シヨート ヒルズ，テニソン ドライ ヴ 149 (72)発明者 ナンシー イー．コール アメリカ合衆国，19118 ペンシルヴアニ ア，ウインドムーア，ステントン アヴエ ニユー 8055

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記式の化合物： 【化１】 又はその薬学上許容される塩、水和物もしくはエステ
   ル。
2. 【請求項２】 （１）Ｎ−（シス−２（Ｒ）−ヒドロキ
   シ−１（Ｓ）−インダニル）−５（Ｓ）−（１，１−ジ
   メチルエトキシカルボニルアミノ）−４（Ｓ）−ヒドロ
   キシ−６−フェニル−２（Ｒ）−［（４−（２−（４−
   モルホリニル）エトキシ）フェニル）メチル］ヘキサン
   アミドを用意し； （２）工程（１）の化合物をストレプトミセス培養株＃
   Ｓ−２９−１４５と共にインキュベートし；及び （３）請求項１記載の化合物を単離する；工程からなる
   請求項１記載の化合物の製造方法。
3. 【請求項３】 ＨＩＶプロテアーゼ阻害に有用な医薬組
   成物であって、 有効量の請求項１記載の化合物及び薬学上許容されるキ
   ャリアを含む組成物。
4. 【請求項４】 ＨＩＶ感染の予防もしくは治療又はエイ
   ズもしくはＡＲＣの治療に有用な医薬組成物であって、 有効量の請求項１記載の化合物及び薬学上許容されるキ
   ャリアを含む組成物。
5. 【請求項５】 哺乳動物に有効量の請求項１記載の化合
   物を投与することからなるＨＩＶプロテアーゼの阻害方
   法。
6. 【請求項６】 ＨＩＶ感染の予防又はＨＩＶ感染の治療
   又はエイズもしくはＡＲＣの治療のための方法であっ
   て、 哺乳動物に有効量の請求項１記載の化合物を投与するこ
   とからなる方法。
7. 【請求項７】ＡＴＣＣ５５０８６の培養株。