JPH05509162A

JPH05509162A - Ｎｍｒを利用する脂質過酸化の測定による癌の検出方法

Info

Publication number: JPH05509162A
Application number: JP3513741A
Authority: JP
Inventors: フォッセル，エリック　ティー．
Original assignee: ザ　ベス　イスラエル　ホスピタル　アソシエイション
Priority date: 1990-07-24
Filing date: 1991-07-23
Publication date: 1993-12-16
Also published as: PT98433B; AU8413991A; CA2087171A1; FI930177A; WO1992001419A1; NZ239080A; FI930177A0; ZA915771B; PT98433A; IE912581A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】ＮＭＲを利用する脂質過酸化の測定による癌の検出方法発明の背景発明の分野本発明は生体患者内の局検出のための診断方法及び診断装置に関するものである。

先行技術癌の臨床診断を目的とした核磁気共振（ＮＭＲ：ｎｕｃｌｅａｒｍａｇｎｅｔｉｃ　ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）技術の利用は従来より広く知られた試みである。

ダマディアン（Ｄａｍａｄ　ｉ　ａｎ）はＮＭＲの医療分野における活用を最初に提案した。それは身体組織内の悪性物（ｍａ　Ｉ　ｉ　ｇｎａｎＣｙ）を検出するためであった。アール（Ｒ）ダマディアン著「核磁気共振による腫瘍検出Ｊ　１９７１年版「サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）」誌１７１　：１１５１−１１５３を参照。ダマディアンに付与されたアメリカ合衆国特許第３，７８９，８３２号は外科的に切除された組織標本に対して核磁気共振を適用し、プロトン減衰（ｐｒｏｔｏｎ　ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ）時間ＴＩ及びＴ２を測定する装置並びに方法を開示しており、それらの値は健康組織に対する値との比較において癌の有無を示す指針とされるものである。ダマディアンに付与されたアメリカ合衆国特許第４，４１１，２７０号及び第４，３５４，４９９号は全身組織標本のＮＭＲ画像法（ｉｍａｇｉｎｇ）並びにスキャニング法（ｓｃａｎｎｉｎｇ）による癌の検出装置及び検出方法を開示している。

多数の研究者もまた、腫瘍を有する動物の器官内の水プロトン（ｗａｔｅｒ　ｐｒｏｔｏｎ）核磁気共振減衰時間（Ｔ１）は健康動物の器官内の水構造に対する対応Ｔｌ値よりも高い値を有していると報告している。参照文献としては、フレイ（Ｆ　ｒ　ｅ　ｙ）他者１９７２年版「国立癌研究所（Ｊ、Ｎａｔｌ、Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔ、）Ｊ誌４９．９０３、インチ（Ｉｎｃｈ）他者１９７４年版「国立癌研究所Ｊ誌５２．３５３、いいじま他者１９７３年版［生理学・化学・物理学（Ｐｈｙｓ　ｉ　ｏ　ｌ。

Ｃｈｅｍ、ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｃｓ）Ｊ誌５．４３１、及びハズルウッド（Ｈａｚｌｅｗｏｏｄ）他者１９７４年版「国立癌研究所」誌５２．１８４９がある。

作用メカニズムの詳細に関する不確定要素にもかかわらず、今日においては悪性細胞内にてしばしば発生する生物物理学的変化がそのプロトンＮＭＲ信号の変化をもたらす事実が周知となっている。参照文献には、デー、ジー、テーラ−ＣＤ、Ｇ、Ｔａｙｌｏｒ）他者［生理学的組織の磁気反応研究及びＮＭＲ放射線によるその癌検診への応用（Ａ　Ｒｅｖｉｅｗ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｍａｇｎｅｔｉｃ　Ｒｅ５ｏｎａｎｃｅ　Ｒｅ５ｐｏｎｓｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｔｉ５ｓｕｅ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　Ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　Ｃａｎｃｅｒ　ｂｙ　ＮＭＲＲａｄ　ｉ　ｏ　ｌ　ｏｇｙ）Ｊ　１９８１年版［コンピュータ断層Ｘ線撮影（Ｃ。

ｍｐｕｔｅｄ　Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）Ｊ誌５　：１２２−１３３がある。このような変化はプロトンＮＭＲ画像法による腫瘍検出の物理学的基礎を形成する。

参照文献には、アール、ジメルマン（Ｒ，Ｚｉｍｍｅｒｍａｎ）他者「脳のＮＭＲ（Ｃｅｒｅｂｒａｌ　ＮＭＲ）：抵抗性（ｒｅｓ　ｉｓｔ　ｉｖｅ）ＮＭＲを使用した一部（ｐａｒｔｉａｌ）飽和（ｓａｔｕｒａｔ　１ｏｎ）技術による脳腫瘍の診断Ｊ　１９８５年版「放射線神経医学（Ｎｅｕｒｏｒａｄｉｏｌｏｇｙ）Ｊ　２７：９−１５、及びケー　（Ｋ、）おおとも著「肝臓腫瘍：磁気共振画像法の交軸的（ｔｒａｎｓｖｅｒｓｅ）減衰時間（Ｔ２）による識別（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）Ｊ　１９８５年版「放射線医学」誌１５５　：　４２１−４２３がある。しかしながら、利用施設不足及び経済的要因によってＮＭＲ画像法は悪性腫瘍の画像による検診用としては広く一般的には利用されるに至らないと思われる。

実験動物及び患者からのプラズマ及びしよう液（ｓｅｒｕｍ）と同様に、切除された腫瘍に対するプロトンＮＭＲの研究はしばしば減衰パラメータＴ１、Ｔ２及びＴ２＊に対して差異を示した。ここでのＴ２＊とは悪性腫瘍の１機能としての本来的な減衰からと、磁界の非均質性により引き起こされる減衰からのＴ２値の合成時間である。このような発見は以下記載の文献にて報告されている。

エル、マクラチラン（Ｌ、ＭｃＬａｃｈ　Ｉ　ａｎ）著「ヒトのプラズマプロトンＮＭＲ減衰率における癌誘導減少（Ｃａｎｃｅｒ−ｉｎｄｕｅｅｄ　Ｄｅｃｒｅａｓｅｓ　ｉｎ　Ｈｕｍａｎ　ＰｌａｓｍａＰｒｏｔｏｎ　ＮＭＲＲｅ１ａｘａｔｉｏｎ　Ｒａｔｅｓ）Ｊ１９８０年版［物理学・医学・生物学（Ｐｈｙｓ、Ｍｅｄ、Ｂｉｏｌ、）Ｊ誌２５：　３０９−３１５゜エフ、スミス（Ｆ、Ｓｍｉ　ｔｈ）他者「すい臓の核磁気共振画像法」１９８２年版「放射線医学」誌１４２　：　６７７−６８０゜ピー、ビオール（Ｐ、Ｂｅａ　ｌ　ｌ）他者「癌を有した動物及びヒトにおける、水に対して上昇させた組織体及びしよう液の減衰時間の体系的効果（Ｔｈｅ　Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｅｌｅｖａｔｅｄ　Ｔｉ５ｓｕｅ　ａｎｄ　Ｓｅｒｕｍ　Ｒｅ１ａｘａｔｉｏｎ　Ｔｉｍｅｓ　ｆｏｒ　Ｗａｔｅｒ　ｉｎ　Ａｎｉｍａｌｓａｎｄ　Ｈｕｍａｎｓ　ｗｉｔｈ　ＣａｎｃｅｒｓＪ１９８１年版ｒＮＭＲ基礎理論と進歩」誌（ピー、ディエール（Ｐ、Ｄｉｅｈｌ）他編集）１９・３９−５７゜アール、フロイド（Ｒ，Ｆｌｏｙｄ）著「腹水症腫瘍を患うネズミにおける、絹織水プロトンスピンラチス減衰の時間的変化過程（Ｔｉｍｅ　Ｃｏｕｒｓｅ　ｏｆ　Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｗａｔｅｒ　Ｐｒｏｔ。

ｎ　５ｐｉｎ−ｌａｔｔｉｃｅ　Ｒｅ１ａｘａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｍｉｃｅ　Ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ　Ａｓｃｉｔｅｓ　Ｔｕｍｏｒ）Ｊ　１９７４年版「癌研究（Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、）Ｊ誌３４　：　８９−９１゜ンー　ハズルウッド（Ｃ，Ｈａｚ　ｌｅｗｏｏｄ）他者「腫瘍を有するネズミと腫瘍を有しないネズミの組織における、水和作用とプロトン核磁気共振減衰時間との関係：癌検出のためのヒントＪ　１９７４年版「国立癌研究所」誌５２　：１８４９−１８５３゜アール、クリング（Ｒ，Ｋｌ　ｉｍｅｋ）他者「自己組織化消滅構造としての理解に基づく組織体の核磁気共振（ＮＭＲ）減衰時間の解説及びＮＭＲズーグマトグラフイ−画像法（Ａ　Ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎｏｆ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍａｇｎｅｔｉｃ　Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ（ＮＭＲ）Ｒｅ　１ａｘａｔ　ｉｏｎ　Ｔｉｍｅ　ｏｆ　Ｔｕｍｏｒｓ　ｉｎ　Ｔｅｒｍｓ　ｏｆ　Ｔｈｅｉｒ　Ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎａｓ　Ｓｅｌｆ−ｏｒｇａｎｉｚｉｎｇ　ＤｉｓｓｉｐａｔｉｖｅＳｔｒｕｃｔｕｒｅｓ、　ａｎｄ　ｏｆ　Ｔｈｅｉｒ　５ｔｕｄｙｏｆ　ＮＭＲＺｅｕｇｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　Ｉｍａｇｉｎｇ）Ｊ１９８１年版「シネコール　ポル（ＧｉｎｅｋＯＩ　Ｐｏ１．）Ｊ誌５２・４９３−５０２゜しかしながら、研究者グループ間による研究の広汎なオーバーラツプ、及びそれぞれの研究手段間の些細な相違に起因して、これらの方法論は臨床的には有効な手段とはいえないものであった。

前記の先行技術の大半が組織分析に対するＮＭＲの適用を解説しているが、そのような分析において代用として体液を利用することも周知な技術である。このことは、たとえば、前記ビオール他者による「スーブラ（ｓｕｐｒａ）Ｊ球内の記事に掲載されている。

前記の先行技術研究及び方法は、組織もしくは血液から得られたサンプル内の全プロトンから発生する合成ＮＭＲ信号の観察に頼っている。この合成信号は水のプロトンにより支配されており、サンプルの他のプロトン含有構成要素からのＮＭＲ信号を妨害して不明瞭にしている。事実上、先行技術では悪性体とＮＭＲパラメータで観測された変化との外見的相関関係は「水構造の変化」によるものと信しられていた。このことはフレイ（Ｆ　ｒ　ｅ　ｙ）他によりスーブラ誌上にて述へられている。

プロトンＮＭＲスペクトロスコピー（ｓｐｅｃｔ　ｒｏｓｃｏｐｙ）の他への応用において、それはサンプル内の溶剤（たとえば水）からの信号を抑制（ｓｕｐｐｒｅｓｓ）することか知られていた。

重要な予想値を提供するＮＭＲスペクトルの構成成分は、サンプル内の他の物質によってマスク（ｍａｓｋ）されている可能性が存在することが発見された。本信号排除等の手段によるこのマスキング排除により、以前であればマスクされていたようなこれらの成分のスペクト°ルか取得可能になった。エリツク　テ仁フオソセル（ＥｒｉｃＴ、Ｆｏｓｓｅｌ）に対して１９９０年３月２７日付けで付与されたアメリカ合衆国特許第４，９１２，０５０号「核磁気共振を利用する癌検診プロセス」において、それらの発見は生体患者における癌の存在を検診するための信頼度の高い方法を提供するものとして採用された。該発明に従えば、磨者の体液サンプルは核磁気共振スペクトルを発生させるために核磁気共振スペクトログラフィーにかけられる。サンプルの非水成分（ｎｏｎ−ｗａｔｅｒ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ）により発生する共振線（ｒｅｓｏｎａｎｃｅ　Ｉ　１ｎｅ）及びこの共振線の全幅（たとえばその半高部（ｈａｌｆ　ｈｅｉｇｈｔ）における）が計測される。

そのように計測された全幅（ｆｕｌｌ　ｗｉｄｔｈ）は患者における癌の存在有無を知るための統計的に信頼するに足る計測値であることが証明されている。

プラズマの水抑制（ｗａｔｅｒ−ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ）プロトンＣＮ　Ｍ　Ｒの前記テストは未冶療癌を有する者と有さない者とを９０％以上の精度で区別する。それまでは癌のノンインヘーシブ（ｎｏｎ−ｉｎｖａｓｉｖｅ）テストでそれほどの精度に近づいたものさえ存在したことはなかった。しかしながら、間違った陽性判定結果も得られてきていた。１９９０年４月１７日付けでエリツク　ティ、フォラセルに付与された、後のアメリカ合衆国特許第４，９１８，０２１号（以後′０２１号特許）「癌の検出プロセス」に従えば、偽陽性判定結果（ｆａｌｓｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒｅｓｕｌｔ）の主要発生源は高レベルのプラズマトリグリセリド（ｐｌａｓｍａ　ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）を有した対象者であることか判明した。それゆえ前記′０２１号特許によれば、Ｃ −Ｃ−１３Ｎを利用した生体患者内における癌の存在を判定するためのノンインベーシブな方法の精度を改良するための方法並びに装置が開発された。

過去においては′　０２１号特許の開示技術に従い、本発明の要領で陽性の測定結果が得られた場合には、トリグリセリドのレベルを決定する。もしトリグリセリドのレベルが高い場合には患者の体液はさらにＣ−１３核磁気共振スペクトロスコピーにかけられる。Ｃ−１３スペクトルの共振スペクトルは対象患者に癌が存在するかしないの決定のために、以前よりも高い精度にて陽性結果の真偽を判別する。Ｃ−Ｃ−１３Ｎは１つの二重結合を有する脂肪酸類と２つの二重結合を有する脂肪酸類との比を考察する。しかしながら、Ｃ−１３は高価であり、検査には比較的長時間を要する。

本発明は癌検診のための改良検診法であって、′０２１号特許で開示されたごとくの偽陽性反応排斥用Ｃ−１３の必要性を排除するものである。本発明の利点はテストが比較的短時間で済むことと、費用が比較的安く済むことである。

本発明の以上及び他の目的さらにその特徴は、添付された図面を参考にして以下記載の本発明のさらに詳細な説明を読むことにより、本分野に携わる専門家には明確なものとなることであろう。

本発明の概要従って、本発明の主要目的は生体患者における癌の存在判定のためのＮＭＲ水抑制プロトン法による診断の確認方法を提供することである。

本発明の別目的は生体患者内の癌の存在を診断する水抑制プロトンＮＭＲテストで得られた陽性結果の真偽判定方法を提供することである。

本発明のさらに別目的は患者の体液サンプルに対して実施可能な、患者内の癌の存在検出方法を提供することである。

本発明のさらに別目的は従来手段よりもさらに精度の高い生体患者内の癌の存在検診方法を提供することである。

本発明に従い、患者の体液サンプルか核磁気共振スペクトルを発生させるためにプロトン核磁気共振スペクトロスコピーにかけられる。

サンプルの非水成分により発生する共振線が選択され、その共振線のピーク部分の下方面積（ａｒｅａ）もしくはピーク部の密度（ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ）が測定される。その面積もしくはそのように測定される密度は標準コントロール（ｃｏｎｔｒｏｌ）と比較して患者内の癌の存在有無評価を十分に信頼性高く提供する。

普通では２．Ｏｐｐｍ（アリル基（ａｌｌｙＬｉｃ））でのＨ−１共振部と２．８ｐｐｍ（ビスアリル基（ｂｉｓ−ａｌｌｙｌｉｃ））でのＨ−１共振部との比は２０から２５の範囲である。これは正常者においては多不飽和脂肪酸と重下飽和脂肪酸との比は９：１以上であることに起因する。

（以下余白）２．０　２．８　２．０　２．０　２．Ｏｐｐｍ　ｐｐｍ　ｐｐｍ　ｐｐｍ　ｐｐｍリノール酸の二重結合　オレイン酸の二重結合プラズマリポプロティン（ｐｌａｓｍａ　１ｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＳ）内にもっとも多量に存在する多不飽和脂肪酸はリノール酸であり、もっとも多量に存在する重下飽和脂肪酸はオレイン酸である。脂質の過酸化（ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　１ｉｐｉｄｓ）が起きる癌患者においては、準飽和脂肪酸との比較においてリノール酸及び他の多不飽和脂肪酸の減少が生じる。この理由はそれらが準飽和脂肪酸よりも遊離基（ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌｓ）に対してさらに高い反応性を有して（するからである。このことにより２．８ｐｐｍにおける共振の減少、並びに２．□ｐｐｍ／２．８ｐｐｍ共振比の増加がもたらされる。２゜５以上に上昇した比は癌の存在を示す。２．０及び２．８ｐｐｍでの共振は図２のスペクトルにおいて図示されている。

本発明のいくつかの好適実施例においては、体液は血液、を髄液、もしくは骨髄プラズマを使用している。血液プラズマあるいはしよう液の使用は特に望ましい。）１イパートリグリセリデミア（ｈｙｐｅｒｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｍｉａ）による当初のプロトンＮＭＲスペクトルにおける偽陽性判定結果は、過酸化リポプロティンの比を測定し、標準値と比較することで、得られる過酸化リポプロティンのスペクトルにおいて判別することが可能である。

図面の簡単な説明図１は本発明に従って得られた健康コントロール（ｃｏｎ　ｔ　ｒｏ　ｌ）からのプラズマサンプルの非水成分（水抑制）における典型的な３６０ＭＨｚＮＭＲスペクトルである。

図２は図１のサンプル測定値の拡大図であり、２．０及び２．８ｐｐｍでの共振を含むスペクトル領域を示している。

図３は本発明の方法を利用して実施された研究の結果を示している。

好適実施例の説明最初に本発明の概要を解説し、続いてその詳細を説明することにする。本発明は生体患者における癌の存在を検出する方法に関するものである。本発明に従って患者の体液サンプルは核磁気共振スペクトルを発生させるために核磁気共振スペクトロスコピーにかけられる。重要な予想値を提供するＮＭＲスペクトルの成分はサンプル内の他の物質によってマスクされている可能性かあるため、純粋ＮＭＲスペクトルを取り出すためにそのマスキングは排除される。サンプルの非水成分により発生する共振線が選択され、患者内の癌の存在有無を示す信頼すべき測定値を提供するために、この共振線の全幅か、たとえばその半高部分（半分の高さの位置）で測定される。前述の手順はフォソセルの’　０５０号特許に記述されているが、その技術内容は本願においても参考に供されている。

陽性の判定測定値が得られたときには、この測定値は患者か癌を有しているか、もしくはそれか偽の陽性判定であるかのどちらであると解される。偽陽性判定がもたらされる主要因は患者における高レベルのプラズマトリグリセリドである。

従って、陽性判定の真偽を確認するために、高レベルのトリグリセリドを有する患者に対しては、彼らのテスト済みサンプルは２回目のプロトンＮＭＲスペクトロスコピーテストにかけられる。ハイバートリグリセリデミアによる偽陽性結果、すなわち、患者（こおける癌の存在有無は、得られたスペクトルにて検出された過酸化リポプロティンの比を標準値と比較することによって信頼高く判定することが可能となる。

本発明の１つの重要な実施例では、テストサンプルに対してプロトンＮＭＲスペクトロスコピーが当初において実施される。ヒトの血液プラズマで取得された水抑制プロトンＮＭＲスペクトルはプラズマリポプロティン脂質によって支配されている。フオ・ノセルの′０５０号特許において開示されているごとくに、水抑制は存在せず、実質的にはこれらの非水共振は水により支配されている。高磁界にお（Ｘでｉｔ水共振の存在下であろうとも、信号の平均化をすれば非水体液成分と関連するいくらかのモイエテイ　（ｍｏｉｅｔｉｅｓ）の共振観測力呵能にはなる。しかしながら、近代的ＮＭＲスベク）・ロメータに備わった水プロトン共振をほぼ完璧に抑制する能力は、この観測を可能なものにしている。プラズマの水抑制プロトンＮＭＲスペクトルは本質的にはプラズマリポプロティンといくらかの低分子量分子のスペクトルである。

本発明のプロセスはいかなる脂質をも含有する体液、血液あるいは骨髄プラズマに対しても有効である。プラズマ、全血（ｗｈｏｌｅｂｌｏｏｄ）もしくはしよう液（ｓｅｒｕｍ）が使用可能である。０かなるこのような脂質含有体液に対してもテストは可能であるが、今日までの研究は血液プラズマに集中していた。血液中においてはコレステロール、トリグリセリド及びリン脂質を含んだ脂質類はリポプロティンの形態にて存在する。本発明の癌検出テストは典型的には生体外で実施され、しよう液あるいはプラズマに対して行われるのが望ましい。

癌の疑いがもたれる患者もしくは癌検診すべき人からの選択された体液は、核磁気共振信号を発生させるために磁界と高周波にさらされ、たとえば、脂質メチル及び／あるいはメチレンプロトンの選択されたパラメータ値Ｗ１／２を取得するための処理が施される。比較的広い範囲のプロトン周波数であるところの、たとえば、６０ＭＨｚ以上が利用可能である。３６０ＭＨｚ以上であればなお望ましい。もしコストが重要な要素でなければ５００ＭＨｚが特に望ましい周波数である。

図１には健康コントロールの水抑制プロトンスペクトルが示されており、図２には同サンプルの拡大スペクトルが示されており、２０から２．８ｐｐｍ（共振周波数１００万あたりの数値）までの領域を示している。２．０から２．８ｐｐｍまでの領域における共振はリポプロティン脂質の脂肪酸群から発生する。よってその好適実施例においては本発明はいくつかの通常水抑制技術の１つ、たとえば水プロトンＮＭＲ信号の抑制技術を利用している。この他にも水プロトンＮＭＲ信号を抑制するための多数の技術が考案されている。これらの技術はフォラセルの’　０５０号特許においてもその解説がなされている。

フォラセルの′　０５０号特許での開示技術によれば、プラズマリポプロティンの脂質と関連した、たとえば、メチル及びメチレン群（ｍｅｔｈｙｌ　ａｎｄ　ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｒｏｕｐｓ）モイエティ共振部の半高部での線幅は利用対象の変数として扱われる。ＮＭＲ共振線の半高部Ｗｌ／２（線幅）での全幅は、外見上のスピン−スピン減衰時間（ｓｐｉｎ−ｓｐｉｎｒｅｌａｘａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ）（Ｔ２＊）に対して反比例している。

すなわち、Ｗ＋、／２＝　’　となる。

Ｔ２＊選択パラメータの検出値は健康コントロールにおける対応パラメータと比較される。１好適実施例においてはメチルとメチレンに対する値は平均化され、プロトン周波数３６０ＭＨｚ　（８，４５Ｔ）もしくは４００ＭＨｚ　（９，４０Ｔ）での３３Ｈｚ以下の平均値は悪性を示すものとして解釈される。

もし患者からのプラズマサンプルの水抑制プロトンＮＭＲスペクトルから陽性の測定値が得られたならば、その診断を確認するための第２レベルのテストか実施される。まず、一般的にトリグリセリド分析と呼ばれている通常のテストが患者のトリグリセリドレベルを決定するために実施される。もしトリグリセリドレベルが正常であるならば、水抑制プロトンＮＭＲスペクトロスコピーの陽性判定は真陽性であり、患者に癌が存在することを示している。もしトリグリセリドレベルが正常値を越えるならば、陽性判定の真偽を確かめるために患者からすでに入手されているプラズマサンプルに対して２回目のプロトンＮＭＲスペクトル試験が行われる。

ハイバートリグリセリデミアによる偽陽性判定結果は結果的に得られるスペクトルでの酸化リポプロティンの比における相当なる相違によって真陽性結果とは信頼性高く区別することが可能である。従って、癌検診スクリーンされるべき癌の疑いのある患者からすでに入手されているプラズマサンプルは、核磁気信号を発生させるために磁界と高周波数エネルギーにさらされ、第２プロトンＮＭＲ値を取得するための処理が施される。

フォラセルの′０２１号特許の開示技術（あるいは炭素１３）に従い、当初はスペクトルのオレフィン領域である１ｌ２０−１４０ｐｐの領域が調査される。この範囲には２つのピークが現れる。その１つは１ｌ２８−１２９ｐｐの辺りであり、もう１つは１ｌ３０−１３１ｐｐの辺りである。前記のピークは互いに約２ｐｐｍ分だけ離れている。一般的に１２８ｐｐｍ領域での共振と１３０ｐｐｍ領域での共振との比が重要である。正常コントロールからのプラズマと非癌性疾病患者からのプラズマの測定値において、これら２つの共振部の高さの比（１２８／１３０ｐｐｍ）は０．　９以上となる。すなわち、１２８ｐｐｍでの共振ピークは１３０ｐｐｍでの共振ピークとだいたい等しくなるか、それより高くなる。

ピークの高さは、基底線のノイズ部中央からピークの頂上までの距離を物差し、あるいはコンピュータによって計測したものである。未治療癌を有する患者群からのプラズマの測定値において、ピークの高さの比は０．　９以下であるか、あるいは１３０ｐｐｍでの共振ピークは１２８ｐｐｍでのものよりも少なくとも１０％分だけ高くなる。ハイパートリグリセリデミア患者の場合には共振（１２８／１３０ｐｐｍ）での高さの比は正常コントロール値と同じであることに注目しなければならない。

未治療癌患者スペクトルのオレフィン領域での変化は過酸化リポプロティンの増加によるものであるとの説明が可能である。

オレイン酸は重工飽和脂肪酸であり、人体内で作られる。リノール酸は多不飽和脂肪酸であり、２つの二重結合を有しており、人体では製造されないが、食物消費により得られるものである。ダイニタリ（ｄｉｅｔａｒｙ）脂肪酸類にはリノール酸のごとき多不飽和酸が含まれる。一般的に領域１ｌ２８−１２９ｐｐでの共振ピークは患者におけるリノール酸に関するもののみを表す。一般的に領域１３０−１３１ｐｐｍでの共振ピークは患者にお＋フるオレイン酸とリノール酸の両方に関するものである。

これらの共振ピークの高さは相対的なものであり、患者の症状に影響を受けることか発見されている。たとえば、トリグリセリｌ−１ノベルの高い患者は一般的にオレイン酸に対するリノール酸の高い比率を有している。未治療癌患者は体内に低レベルのリノール酸を保有していることが知られているか、おそら（は癌がリノール酸を含めた多不飽和脂肪酸の酸化を引き起こすからであろう。このことは［多不飽和脂肪酸が酸化に対して非常に敏感であるかゆえに、脂質か癌患者内で遊離水酸基により酸化される」とする仮説と矛盾することはない。

従って、もし対象患者か高いトリグリセリドレベル及び未治療癌の両方を有しているならば、１３０ｐｐｍにおける共振ピークはさらに高くなり、両方のピークでのリノール酸の減少を反映する。しかしながら、もし１２８ｐＴ）ｍでのピークが１３０ｐｐｍでのピークより７％以上低くないならば、リノール酸レベルの減少はまったく生じておらず、あるいはほとんど生じていないことを示しており、プロトンＮＭＲスペクトルから得られた陽性の判定は偽陽性判定と確認され、癌が存在していないことになる。

加えて、４８ｐｐｍと８０ｐｐｍとの間のスペクトル領域は正常コントロールもしくはハイパートリグリセリデミアプラズマにおけるよりも未治療癌プラズマにおいてずっとさらに複雑なものである。「さらに複雑」とは、この領域にはさらに多くの共振ピークか存在することを意味（７ている。ここでの共振ピークとは、通常テスト期間において、その高さが基底ノイズ部よりも５０％以上高いものを指している。

本分野の専門家であれば承知しているごとくに、長いデータが得られれば得られるほどノイズは減少し、ピークはより明確なものとなる。

これらのパラメータにはサンプルチューブのサイズ、パルス幅、パルス反復比、及び異なる要素による自由誘導崩壊（ｆｒｅｅ　１ｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｄｅｃａｙ）の指数増加（ｅｘｐｏｎｅｎ　ｔ　ｉ　ａ　１ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉＯｎ）が含まれている。たとえば、本分野の専門家であれば、テストサンプルか大きければ大きいほど素早く適正品質のスペクトルが入手できることを承知している。ここに挙げた条件に対する他の変更は専門家にとっては常識範囲のことであろう。

フォラセルの′０２１号特許にて実施されたごとくのＣ−Ｃ−１３Ｎにより、本発明の方法に従ったスペクトロスコピー分析は前記に記述したごとくのプロトンＮＭＲスペクトロスコピー分析を最初に実施せずとも、癌検診のための方法として当初から実施することが可能である。しかし、この診断法はまだテストされてはいない。

本発明の実施においてはいかなる従来式の近代型ＮＭＲスペクトロメータでもその使用が可能である。本発明の好適実施例においては、一定の磁力を有した磁石付きＮＭＲスペクトロメータが使用されており、メチル及びメチレン群のプロトン共振、そしてその後の対象ＮＭＲパラメータである２　０及び２．８ｐｐｍでのリボプロティンのプロトンＮＭＲ共振における半高部での全幅にてそのＮＭＲ信号はフーリエ変換される。

フォラセルの２０５０号特許において述べられているように、正確なサンプルの準備とその分析がプラズマに対する測定を適正に行うための不可欠要素である。

血液は１５％Ｎａ２ＥＤＴＡ溶液を７０リツトル含有するチューブ内に収集される。血液は遠心分離機にかけられるまで４度Ｃにて保存された。プラズマか分離され、ＮＭＲ分析までの間４度Ｃにて保存された。冷凍はリボプロティンの脂質構造結合を破壊するのでプラズマサンプルは決して冷凍されなかった。溶血（ｈｅｍｏｌｙｓｉｓ）の見られるサンプルは全て除外された。

好適実施例において、スペクトルは磁力（ｍａｇｎｅｔｉｃ　ｆｉｅｌｄ　ｓｔｒｅｎｇｔｈｓ）３６０ＭＨｚ以上、２０度Ｃ−２２度Ｃの温度範囲にて取得された。

他のテストは３０度Ｃと３７度Ｃにて問題な〈実施された。サンプルは水共振の半高部での全幅が４Ｈｚ以下となるまでプロトン自由誘導崩壊（ｆｒｅｅ　１ｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｄｅｃａｙ）のエリアに対して個々にシム（ｓｈｉｍ）処理された。もちろん、注意深いシム処理（ｓｈｉｍｍｉｎｇ）は良質のＮＭＲ実験技術の重要な要素である。使用磁力がサンプル準備時間の長さを決定することは言うまでもない。実験条件に加えて、正確な実験結果は患者の分類をするための患者カルテの注意深い検討をも必要としている。

フォラセルの２０５０号特許によれば、使用スペクトロメータはサンプルのＮＭＲスペクトルに少なくとも１つ、望ましくは複数、たとえば２本のＮＭＲ共振線のごとき選択手段を含んでおり、本発明の第１段階においてはそのように選択された線の線幅を測定する。望ましくは線幅は線の半高部にて測定されるが、これは必須条件ではなく、対象線のいかなる所定高の部分で計測しても構わない。半高部における測定はこれがＮＭＲスペクトロスコピー分析での標準計測手段である理由によって望ましいのである。使用スペクトロメータはまた第２のプロトンＮＭＲスペクトル分析試験に有用な選択されたピークの測定手段をも含んでいる。使用スペクトロメータはさらに通常構造のものであり、他の全構造に加えて、】測定値もしくはある領域の測定値の保存用手段をも含んでいる。好適実施例においては、直接的に測定されるか、あるいは複数のそのような直接的測定値から導き出された面積もしくは密度は、正常な患者、すなわち癌ではない患者から予想される１値あるいは値の領域を代表する１値あるいは値の領域と比較される。

本発明に従えば、使用スペクトロメータはさらに、２．０もしくは２．８ｐｐｍ共振の測定された、もしくは導き出された面積、あるいは２．０もしくは２．８ｐｐｍの測定された、もしくは導き出された密度、及び保存された情報に基づいた正常（すなわち癌が存在しない）もしくは異常（すなわち癌が存在する）を示すピークの数を分類するための手段をも含んでいる。これは比較法、減法、あるいは他の適当なる数学的手法により行われる。

好適実施例においては、選択手段もしくは測定手段はスペクトル内の過酸化リボプロティンの２．０から２．８ｐｐｍの面積あるいは密度を測定するために前もって調整される。これにはサンプルのＮＭＲスペクトルからの水信号抑制が含まれ得る。あるいはスペクトロメータが十分に敏感なものであれば直接的に行うことも可能である。

要約書ＦＩＧ、　３ＢＥＮＩＧＮ　ＭＡＬＩＧＮＡＮＴ国際調査報告

Claims

【特許請求の範囲】１。生体患者における癌の存在を診断するための診断方法であって、ａ）検診対象患者からの血液成分サンプルを、余分な信号の抑制処理済みのＮＭＲスペクトルの発生を目的としてプロトン核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｂ）該スペクトルの脂質ピークに対するリポプロテイン共振線を選択し、ｃ）該共振線の半高部にて全幅を測定し、ｄ）測定された全幅を所定の標準値と比較して、正常全幅の区分、もしくは癌の存在を示す異常全幅の区分に分類し、ｅ）該ステップ（ｄ）にて異常であると分類された測定全幅に対しては前記血液成分サンプルのトリグリセリドレベルを測定し、ｆ）該測定されたトリグリセリドレベルを正常レベル、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｇ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有した血液成分サンプルに対しては、ＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目のプロトン核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｈ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する共振線を選択し、ｉ）該共振線の面積を測定し、ｊ）該ＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して、正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする診断方法。２。前記ステップ（ａ）はその水信号を抑制するステップを含むものであることを特徴とする請求項１記載の方法。３。前記ステップ（ａ）は、対象患者から血液サンプルを入手し、該血液サンプルから赤血球を取り除き、該血液サンプル内のプラズマを核磁気共振スペクトロスコピーにかける各ステップをさらに有することを特徴とする請求項１記載の方法。４。前記プロトン共振は６０ＭＨｚ以上であることを特徴とする請求項１記載の方法。５。前記プロトン共振は３６０ＭＨｚ以上であることを特徴とする請求項４記載の方法。６。前記２回目のプロトンＮＭＲ共振スペクトルにおいて、２．０ｐｐｍ／２．８ｐｐｍ共振の面積比が癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項１記載の方法。７。生体患者における癌の存在を診断するための診断方法であって、ａ）検診対象患者からの血液成分サンプルを、余分な信号の抑制処理済みのＮＭＲスペクトルの発生を目的としてプロトン核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｂ）該スペクトルの脂質ピークに対するリポプロテイン共振線を選択し、ｃ）該共振線の半高部にて全幅を測定し、ｄ）測定された全幅を所定の標準値と比較して、正常全幅の区分、もしくは癌の存在を示す異常全幅の区分に分類し、ｅ）該ステップ（ｄ）にて異常であると分類された測定全幅に対しては前記血液成分サンプルのトリグリセリドレベルを測定し、ｆ）該測定されたトリグリセリドレベルを正常レベル、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｇ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有した血液成分サンプルに対しては、ＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目のプロトン核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｈ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する共振線を選択し、ｉ）該共振線の密度（ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ）を測定し、ｊ）該ＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して、正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする診断方法。８。前記ステップ（ａ）はその水信号を抑制するステップを含むものであることを特徴とする請求項７記載の方法。９。前記ステップ（ａ）は、対象患者から血液サンプルを入手し、該血液サンプルから赤血球を取り除き、該血液サンプル内のプラズマを核磁気共振スペクトロスコピーにかける各ステップをさらに有することを特徴とする請求項７記載の方法。１０。前記プロトン共振は６０ＭＨｚ以上であることを特徴とする請求項７記載の方法。１１。前記プロトン共振は３６０ＭＨｚ以上であることを特徴とする請求項７記載の方法。１２。前記２回目のプロトンＮＭＲ共振スペクトルにおいて、２．０ｐｐｍ／２．８ｐｐｍ共振の密度比が癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項７記載の方法。１３。生体患者における癌の存在を診断するための診断方法であって、ａ）検診対象患者からの血液成分サンプルを、余分な信号の抑制処理済みのＮＭＲスペクトルの発生を目的として核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｂ）該スペクトルの脂質ピークから複数のリポプロテイン共振線を選択し、ｃ）該共振線の各々の半高部での全幅を測定し、ｄ）測定された全幅すべてから合成線幅（ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ　ｌｉｎｅｗｉｄｔｈ）を導き出し、ｅ）該導き出された合成線幅を所定の標準値と比較して、正常合成線幅の区分、もしくは癌の存在を示す異常合成線幅の区分に分類し、ｆ）異常合成線幅であると分類された合成線幅に対しては前記血液成分サンプルのトリグリセリドのレベルを測定し、ｇ）該測定されたトリグリセリドのレベルを正常レベル、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｈ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有した血液成分サンプルに対しては、ＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目のプロトン核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｉ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する複数の共振線を選択し、ｊ）該共振線の各々に対して面積を測定し、ｋ）該２回目のＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して、正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする診断方法。１４。前記の導き出しステップは共振線の２．０ｐｐｍ／２．８ｐｐｍ面積比を計算するステップを有することを特徴とする請求項１３記載の方法。１５。前記複数とは２であることを特徴とする請求項１３記載の方法。１６。前記２回目の２．０及び２．８ｐｐｍにおけるプロトンＮＭＲスペクトルが癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項１３記載の方法。１７。生体患者における癌の存在を診断するための診断方法であって、ａ）検診対象患者からの血液成分サンプルを、余分な信号の抑制処理済みのＮＭＲスペクトルの発生を目的として核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｂ）該スペクトルの脂質ピークから複数のリポプロテイン共振線を選択し、ｃ）該共振線の各々の半高部での全幅を測定し、ｄ）測定された全幅すべてから合成線幅を導き出し、ｅ）該導き出された合成線幅を所定の標準値と比較して、正常合成線幅の区分、もしくは癌の存在を示す異常合成線幅の区分に分類し、ｆ）異常合成線幅であると分類された合成線幅に対しては前記血液成分サンプルのトリグリセリドのレベルを測定し、ｇ）該測定されたトリグリセリドのレベルを正常レベル、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｈ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有した血液成分サンプルに対しては、ＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目のプロトン核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｉ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する複数の共振線を選択し、ｊ）該共振線の各々に対して密度を測定し、ｋ）該２回目のプロトンＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して、正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする診断方法。１８。前記の導き出しステップは共振線の２．０ｐｐｍ／２．８ｐｐｍ面積比を計算するステップを有することを特徴とする請求項１７記載の方法。１９。前記複数とは２であることを特徴とする請求項１７記載の方法。２０。前記２回目の２．０及び２．８ｐｐｍにおけるプロトンＮＭＲスペクトルは癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項１７記載の方法。２１。生体患者における癌の存在を診断するための診断方法であって、ａ）検診対象患者からのサンプルを、ＮＭＲスペクトルの発生を目的として核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｂ）該サンプルの非水成分から該スペクトルのＮＭＲ共振線を選択し、ｃ）該共振線の半高部での全幅を測定し、ｄ）測定された全幅を所定の標準値と比較して、正常全幅の区分、もしくは癌の存在を示す異常全幅の区分に分類し、ｅ）異常全幅であると分類された測定全幅に対しては前記サンプルのトリグリセリドレベルを測定し、ｆ）該測定されたトリグリセリドレベルを正常レベルの区分、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｇ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有したサンプルに対しては、ＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目の核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｈ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する共振線を選択し、ｉ）該共振線の面積を測定し、ｊ）該ＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して、正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする診断方法。２２。前記非水成分とは脂質であることを特徴とする請求項２１記載の方法。２３。前記サンプルとは血液プラズマ、脊髄液もしくは骨髄プラズマであり、前記選択された共振線はリポプロテイン脂質類のアリル基及び／あるいはビスアリル基群からのものであることを特徴とする請求項２１記載の方法。２４。前記２回目の２．０及び２．８ｐｐｍにおける共振スペクトルが癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項２１記載の方法。２５。生体患者における癌の存在を診断するための診断方法であって、ａ）検診対象患者からのサンプルを、ＮＭＲスペクトルの発生を目的として核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｂ）該サンプルの非水成分から該スペクトルのＮＭＲ共振線を選択し、ｃ）該共振線の半高部での全幅を測定し、ｄ）測定された全幅を所定の標準値と比較して、正常全幅の区分、もしくは癌の存在を示す異常全幅の区分に分類し、ｅ）異常全幅であると分類された測定全幅に対しては前記サンプルのトリグリセリドレベルを測定し、ｆ）該測定されたトリグリセリドレベルを正常レベルの区分、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｇ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有したサンプルに対しては、ＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目の核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｈ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する共振線を選択し、ｉ）該共振線の密度を測定し、ｊ）該ＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して、正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする診断方法。２６。前記非水成分とは脂質であることを特徴とする請求項２５記載の方法。２７。前記サンプルとは血液プラズマ、脊髄液もしくは骨髄プラズマであり、前記選択された共振線はリポプロテイン脂質類のアリル基及び／あるいはビスアリル基群からのものであることを特徴とする請求項２５記載の方法。２８。前記２回目の２．０及び２．８ｐｐｍにおける共振スペクトルは癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項２５記載の方法。２９。生体患者における癌の存在を診断するための診断方法であって、ａ）検診対象患者からのサンプルを、ＮＭＲスペクトルの発生を目的として核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｂ）該サンプルの非水成分から該スペクトル内の複数のＮＭＲ共振線を選択し、ｃ）該共振線の各々の半高部での全幅を測定し、ｄ）測定された全幅すべてから合成線幅を導き出し、ｅ）導き出された合成線幅を所定の標準値と比較して正常合成線幅の区分、もしくは癌の存在を示す異常合成線幅の区分に分類し、ｆ）異常合成線幅であると分類された測定合成線幅に対しては前記サンプルのトリグリセリドレベルを測定し、ｇ）該測定されたトリグリセリドレベルを正常レベル、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｈ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有したサンプルに対してはＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目の核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｉ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する共振線を選択し、ｊ）該共振線の面積を測定し、ｋ）該ＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする診断方法。３０．前記２回目の２．０及び２．８ｐｐｍにおける共振スペクトルは癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項２９記載の方法。３１。生体患者における癌の存在を診断するための診断方法であって、ａ）検診対象患者からのサンプルを、ＮＭＲスペクトルの発生を目的として核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｂ）該サンプルの非水成分から該スペクトル内の複数のＮＭＲ共振線を選択し、ｃ）該共振線の各々の半高部での全幅を測定し、ｄ）測定された全幅すべてから合成線幅を導き出し、ｅ）導き出された合成線幅を所定の標準値と比較して正常合成線幅の区分、もしくは癌の存在を示す異常合成線幅の区分に分類し、ｆ）異常合成線幅であると分類された測定合成線幅に対しては前記サンプルのトリグリセリドレベルを測定し、ｇ）該測定されたトリグリセリドレベルを正常レベル、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｈ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有したサンプルに対してはＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目の核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｉ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する共振線を選択し、ｊ）該共振線の密度を測定し、ｋ）該ＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする診断方法。３２．前記２回目の２．０及び２．８ｐｐｍにおける共振スペクトルが癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項３１記載の方法。３３。生体患者における癌の存在を診断するための診断方法であって、ａ）血液プラズマ、骨髄プラズマもしくは脊髄液のサンプルを、余分な信号の抑制処理済みのＮＭＲスペクトの発生を目的としてプロトン核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｂ）該スペクトルのリポプロテイン脂質のメチル及びメチレン群の共振線を選択し、ｃ）該共振線の各々の半高部での全幅を測定し、ｄ）測定された全幅から平均幅を算出し、ｅ）算出された平均幅を所定の標準値と比較して正常平均幅の区分、もしくは癌の存在を示す異常平均幅の区分に分類し、ｆ）異常合成幅であると分類された測定合成幅に対しては前記血液成分サンプルのトリグリセリドレベルを測定し、ｇ）該測定されたトリグリセリドレベルを正常レベル、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｈ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有したサンプルに対しては、ＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目の核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｉ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する共振線を選択し、ｊ）該共振線の面積を測定し、ｋ）該ＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して、正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする診断方法。３４。前記２回目の２．０及び２．８ｐｐｍにおける共振スペクトルが癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項３３記載の方法。３５。生体患者における癌の存在を診断するための診断方法であって、ａ）血液プラズマ、骨髄プラズマもしくは脊髄液のサンプルを、余分な信号の抑制処理済みのＮＭＲスペクトの発生を目的としてプロトン核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｂ）該スペクトルのリポプロテイン脂質のメチル及びメチレン群の共振線を選択し、ｃ）該共振線の各々の半高部での全幅を測定し、ｄ）測定された全幅から平均幅を算出し、ｅ）算出された平均幅を所定の標準値と比較して正常平均幅の区分、もしくは癌の存在を示す異常平均幅の区分に分類し、ｆ）異常合成幅であると分類された測定合成幅に対しては前記血液成分サンプルのトリグリセリドレベルを測定し、ｇ）該測定されたトリグリセリドレベルを正常レベル、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｈ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有したサンプルに対しては、ＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目の核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、１）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する共振線を選択し、ｊ）該共振線の密度を測定し、ｋ）該ＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して、正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする診断方法。３６。前記２回目の２．０及び２．８ｐｐｍにおける共振スペクトルが癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項３５記載の方法。３７。癌を検出するための検出方法であって、ａ）癌を有していない対象体の脂質含有体液の水以外の構成成分と関連した少なくとも１つのモイエティの核に対する少なくとも１つのＮＭＲパラメータ値を確定し、ｂ）核磁気共振スペクトルを発生させる目的にて癌診断対象体と同ータイプの体液を磁界及び高周波にさらし、ｃ）前記モイエティ核の前記パラメータ値を取得する目的で該核磁気共振スペクトルを処理し、ｄ）前記ステップ（ａ）のパラメータに対する確定値を前記ステップ（ｃ）の取得値と比較し、ｅ）確定された値を所定の標準値と比較して正常区分、あるいはその異常値幅が癌の存在を示す異常区分に分類し、ｆ）異常値幅であると分類された測定値幅に対しては前記体液のトリグリセリドレベルを測定し、ｇ）該測定されたトリグリセリドレベルを正常レベル、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｈ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有した体液サンプルに対してはＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目の核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｉ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する共振線を選択し、ｊ）該共振線の面積を測定し、ｋ）該ＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して、正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする癌の検出方法。３８。前記脂質含有体液とは血液、血液しょう液、あるいは血液プラズマであることを特徴とする請求項３７記載の方法。３９。前記体液のサンプルは診断対象体から採集されたものであり、前記のステップ（ｂ）と前記ステップ（ｃ）は体外（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ）にて実施されることを特徴とする請求項３７記載の方法。４０。前記核（ｎｕｃｌｅｉ）とはプロトンであり、前記ステップ（ａ）の前記モイエティはメチル及びメチレン群から選択されたものであることを特徴とする請求項３７記載の方法。４１。前記メチル及びメチレンはリポプロテインと関連した（ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ）ものであることを特徴とする請求項４０記載の方法。４２。前記プロトンＮＭＲパラメータはメチル及びメチレンプロトンの共振線から導き出された平均値であることを特徴とする請求項４１記載の方法。４３。前記ステップ（ａ）のパラメータはメチル及びメチレンプロトン共振の半高部での全幅の平均値であることを特徴とする請求項３７記載の方法。４４。前記ステップ（ａ）のパラメータは前記モイエティ核のＮＭＲ共振線の半高部での全幅であることを特徴とする請求項３７記載の方法。４５。前記ステップ（ａ）のパラメータは外見上の（ａｐｐａｒｅｎｔ）スピンースピン減衰時間Ｔ２＊であることを特徴とする請求項３７記載の方法。４６。水のＮＭＲ共振信号を抑制するステップをさらに有することを特徴とする請求項３７記載の方法。４７。水のＮＭＲ共振信号を抑制するステップをさらに有することを特徴とする請求項３７記載の方法。４８。水のＮＭＲ共振信号を抑制するステップをさらに有することを特徴とする請求項４０記載の方法。４９。前記２回目の２．０及び２．８ｐｐｍにおけるプロトン共振スペクトルが癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項３７記載の方法。５０。癌を検出するための検出方法であって、ａ）癌を有していない対象体の脂質含有体液の水以外の構成成分と関連した少なくとも１つのモイエティの核に対する少なくとも１つのＮＭＲパラメータ値を確定し、ｂ）核磁気共振スペクトルを発生させる目的にて癌診断対象体と同ータイプの体液を磁界及び高周波にさらし、ｃ）前記モイエティ核の前記パラメータ値を取得する目的で該核磁気共振スペクトルを処理し、ｄ）前記ステップ（ａ）のパラメータに対する確定値を前記ステップ（ｃ）の取得値と比較し、ｅ）確定された値を所定の標準値と比較して正常区分、あるいはその異常値幅が癌の存在を示す異常区分に分類し、ｆ）異常値幅であると分類された測定値幅に対しては前記体液のトリグリセリドレベルを測定し、ｇ）該測定されたトリグリセリドレベルを正常レベル、もしくはそれを越えるレベルの区分に分類し、ｈ）正常レベルを越えるトリグリセリドを有した体液サンプルに対してはＮＭＲスペクトルを発生させるために２回目の核磁気共振スペクトロスコピーにかけ、ｉ）該スペクトルの領域内のりポプロテインに対する共振線を選択し、ｊ）該共振線の密度を測定し、ｋ）該ＮＭＲスペクトルを所定の標準値と比較して、正常スペクトルの区分、もしくは癌の存在を示す異常スペクトルの区分に分類する各ステップを有することを特徴とする癌の検出方法。５１。前記脂質含有体液とは血液、血液しょう液、あるいは血液プラズマであることを特徴とする請求項５０記載の方法。５２。前記体液のサンプルは診断対象体から採集されたものであり、前記ステップ（ｂ）と前記ステップ（ｃ）は体外にて実施されることを特徴とする請求項５０記載の方法。５３。前記核とはプロトンであり、前記ステップ（ａ）の前記モイエティはメチル及びメチレン群から選択されたものであることを特徴とする請求項５０記載の方法。５４。前記メチル及びメチレンはリポプロテインと関連したものであることを特徴とする請求項５０記載の方法。５５。前記プロトンＮＭＲパラメータはメチル及びメチレンプロトンの共振線から導き出された平均値であることを特徴とする請求項５２記載の方法。５６。前記ステップ（ａ）のパラメータはメチル及びメチレンプロトン共振の半高部での全幅の平均値であることを特徴とする請求項５０記載の方法。５７。前記ステップ（ａ）のパラメータは前記モイエティ核のＮＭＲ共振線の半高部での全幅であることを特徴とする請求項５０記載の方法。５８。前記ステップ（ａ）のパラメータは外見上のスピン−スピン減衰時間Ｔ２＊であることを特徴とする請求項５０記載の方法。５９。水のＮＭＲ共振信号を抑制するステップをさらに有することを特徴とする請求項５０記載の方法。６０。水のＮＭＲ共振信号を抑制するステップをさらに有することを特徴とする請求項５０記載の方法。６１。水のＮＭＲ共振信号を抑制するステップをさらに有することを特徴とする請求項５２記載の方法。６２。前記２回目の２．０及び２．８ｐｐｍにおけるプロトン共振スペクトルが癌の存在を示すものであることを特徴とする請求項５２記載の方法。