JPH0491033A - 免疫調節剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス
等の自己免疫疾患の治療に有用な免疫調節剤に関する。

［従来の技術］ 慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス等のいわゆ
る自己免疫疾患の治療剤としては、従来、ステロイドホ
ルモン剤、金製剤、Ｄ−ペニシラミン、レバミゾール等
の化学合成薬剤が主として使われていた。最近では、イ
ンターフェロンやインターロイキン（ＩＬ−１、Ｉ　Ｌ
−２、ＩＬ−３等）等のタンパク質性生物学的薬剤が注
目され、基礎及び応用研究が種々検討されている。

〔発明が解決しようとする課題〕

しかし、上記の化学合成薬剤は副腎皮質機能不全、感染
症、腎障害、造血障害又は胃腸障害等、時として重篤な
副作用を起こすので、使用に当たっては細心の注意を払
わなければならず、またインターフェロンやインターロ
イキン等のタンパク質性生物学的薬剤は効能の点で必す
しも満足できるものではない。

本発明は効能が高く、しかも副作用が少なくて使いやす
い免疫調節剤を提供するものである。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者らはＩｇＥのＦｃ領域由来のペプチド又はそれ
と類似するペプチドを種々合成し、それらの抗アレルギ
ー活性をはじめとする種々の薬理活性を鋭意検討してい
たところ、抗アレルギー活性を示すペプチドの中に免疫
調節作用を示すものがあることを見出し、本発明を完成
した。ここで、免疫調節作用とは、免疫機能低下状態に
対し増強的に働き、免疫機能亢進状態に対し抑制的に働
く作用のことをいい、この作用をもつ薬剤を免疫調節剤
という。

すなわち、本発明は次の式〔Ｉ〕 Ｈ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
−ＯＨ（Ｉ　）（ただし、ＡｌａはＬ−アラニン残基、
ＳｅｒはＬ−セリン残基、ＡｓｎはＬ−アスパラギン残
基、ＰｒｏはＬ−プロリン残基、Ｇｌｙはグリシン残基
、ＬｙｓはＬ−リジン残基を示す）で表されるヘキサペ
プチド又はその薬学的に許容される塩を有効成分として
含有する免疫調節剤に関するものである。

上記のＨ−Ａｌａ−３ｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−
Ｌｙｓ−ＯＨは本発明者らによって抗アレルギー剤とし
ての有用性とともに、見出されたペプチドである（特願
平１−２６２５１３号）。

上記のへキサペプチドは、特願平１−２６２５１３号明
細書に記載したとおり、ペプチド合成に通常用いられる
固相法又は液相法によって合成できる。

Ｈ−Ａｌａ−５ｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
−ＯＨで表されルヘキサベプチドの薬学的に許容される
塩としては、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、
酢酸塩、クエン酸塩、フマール酸塩、酒石酸塩、乳酸塩
等の有機酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ
金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土
類金属塩、アンモニウム塩等が挙げられる。

上記の薬学的に許容される塩は、合成の最終工程で保護
基を外したのちに、塩酸、酢酸等の酸を加え、又は水酸
化ナトリウム、水酸化カリウム等の塩基を加え相当する
塩とすることもできるし、式〔Ｉ〕で表されるヘキサペ
プチドを単離したのち、上記と同様に酸又は塩基を加え
て塩とすることもできる。

本発明の免疫調節剤は経口的又は非経口的に投与するた
めの形態を適宜にとりうる。代表的な投与方法としては
経口、直腸、皮膚透過、皮下、静脈内、筋肉内、吸入ま
たは鼻腔内経路を含む種々の経路により投与することが
できる。

これらの投与方法では、本発明の免疫調節剤は種々の薬
学的製剤の形態で投与されうる。これらの薬学的製剤の
形態としては、錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、顆
粒剤、散剤、トローチ剤、平削、シロップ剤、クリーム
剤、軟膏剤、ハツプ剤、注射剤、懸濁剤、吸入剤、エア
ロプール剤などがある。また他の免疫調節剤、その他の
医薬と共に二重層錠、多重層錠などとすることもできる
。

さらに錠剤の場合には必要に応じて通常の剤皮を施し、
例えば糖衣錠、腸溶被錠とすることもできる。

錠剤、顆粒剤、散剤などの固体製剤とする場合は、製剤
化に当って公知の添加剤、例えば乳糖、ショ糖、ブドウ
糖、結晶セルロース、コーンスターチ、リン酸カルシウ
ム、ソルビトール、グリシン、カルボキシメチルセルロ
ース、ヒドロキシフロビルセルロース、アラビアゴム、
ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ステ
アリン酸マグネシウム、タルク等を添加することができ
る。

半固体製剤とする場合は、植物性ワックス、ミクロクリ
スタリンワックス、脂肪例えばタローラノリンなどの材
料を添加することができる。

液体製剤とする場合は、添加剤、例えば塩化ナトリウム
、ソルビトール、グリセリン、オリーブ油、アーモンド
油、プロピレングリコール、エチレングリコール、エチ
ルアルコールなどの材料を添加することができる。

式［）で表されるペプチドの投与ｍは、患者の年令、体
重、症状なとにより適宜増減することができるが、経口
投与の場合の投与量は１日当たり０．０１〜１０ｍｇ／
ｋｇ、非経口投与の場合の量は１日当たり１０〜１，０
００μｇ／ｋｇである。

［実施例］ 以下の実施例において、式〔Ｉ〕で表されるペプチドが
免疫調節作用を有し、免疫調節剤として治療用に利用さ
れうろことを説明する。

（実施例１） 各種レクチンで刺激したリンパ球の幼若化に及ぼす式〔
Ｉ〕で表されるペプチドの効果ヘパリン存在下採血した
健常人から、フィコール−ハイパキュー　（Ｆｉｃｏｌ
ｌ−Ｈｙｐａｑｕｅ）比重遠心法にて単核細胞を採取し
、ウシ胎児血清（ＦＢＳと略す、大日本製薬製）を１０
容量％添加したＲＰＭＩ−１６４０培養液（ギブコ社製
）にこれを浮遊した。細胞数の濃度をＩ　Ｘ　１０６個
／ｍｌに調整し、これを９６穴マイクロプレート（ファ
ルコン社製）の各ウェルに１００μＩずつ分注した。

次いでＰ　ＨＡ　（Ｐｈｙｔｏｈｅｔｎａｇｇｌｕｔｉ
ｎｉｎ）　１　μｇ　／　ｍ　１　。

Ｃｏｎ−Ａ（Ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ　Ａ）　１０　
μｇ　／　ｍ　ＩもしくはＰ　ＷＭ（Ｐｏｋｅｗｅｅｄ
　ｍｉｔｏｇｅｎ）　１５　μｇ　／　ｍ　Ｉの各レク
チン（いずれも第−化学薬品製）、及び所定濃度のペプ
チドＣＩ、ｌを添加し、１０％ＦＢＳ添加ＲＰＭＩ−１
６４０培地を加えて最終液量を２００μｌとしたのち、
５容量％ＣＯ２インキュベータ内、３７℃で７２時間培
養した。培養終了２４時間前に３Ｈ−チミジン０．５μ
Ｃｉを加え、セル−ハーベスタ−（Ｂｉｏ−Ｌａｂ社製
）にて細胞を回収し、液体シンチレーションカウンター
で３Ｈ−チミジン取込量を測定した。第１表はその測定
結果を示し、表中の数字は平均カウント数（ｃｐｍ）士
標準誤差を示す。

第１表の結果から、式〔Ｉ〕のペプチドは、マイトーゲ
ンを添加しない場合、リンパ球の３Ｈ−チミジン取込量
にあまり影響を及ぼさないが、各レクチン、特にＣｏｎ
−Ａで刺激したリンパ球の３Ｈ−チミジン取込量を強く
抑制することがわがる。

第１表（つづき） （実施例２） 液性因子産生能に及ぼす式〔Ｉ〕で表されるペプチドの
効果 ヘパリン存在下採血した健常人から、フィコール−ハイ
パキュー比重遠心法で分離した単核細胞を、ＦＢＳＩＯ
容量％を容量口たＲＰＭＩ−１６４０培養液に浮遊した
。これを培養チューブ（ファルコン２０５４チューブ）
にＩ　Ｘ　１０６個／ｍｌずつ分注し、式〔Ｉ〕で表さ
れるペプチドを添加して、インキュベータにて一週間培
養を行った。

培養終了後、遠心して（１，５０Ｏｒｐｍ、１０分間）
、上清を採取し、培養上清中の液性因子を測定した。イ
ンターロイキン１（ＴＬ〜１）及び腫瘍壊死因子（ＴＮ
Ｆ）はそれぞれアマジャム社及びメドジニックス社のラ
ジオイムノアッセイキットで測定した。インターロイキ
ン６　（ＩＬ−６）は抗Ｉ　Ｌ−６抗体（ジエンザイム
社製）を用いた酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）で行った
。測定結果を第２表に示した。なお数値は平均値上標準
誤差を表す。

第２表　リンパ球の液性因子産生能 第２表の結果から、式〔Ｉ〕のペプチドはＩＬ−６及び
ＴＮＦの産生を促進することがわかる。

［発明の効果コ 式〔Ｉ〕で表されるペプチドはマイト−ジエンで刺激し
たリンパ球の活性化反応を抑制し、また、Ｉ　Ｌ−６及
びＴＮＦ等の液性因子の産生能を高める。本発明により
、免疫調節剤として効能があり、しかも副作用が少なく
て、使いやすい薬剤を提供することができた。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、次の式〔 I 〕 Ｈ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
   −ＯＨ〔 I 〕（ただし、ＡｌａはＬ−アラニン残基、
   ＳｅｒはＬ−セリン残基、ＡｓｎはＬ−アスパラギン残
   基、ＰｒｏはＬ−プロリン残基、Ｇｌｙはグリシン残基
   、ＬｙｓはＬ−リジン残基を示す）で表されるヘキサペ
   プチド又はその薬学的に許容される塩を有効成分として
   含有する免疫調節剤。