JPH0481659A - 粒状試薬の懸濁液を使用する流体の分折 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、流れる液体流、例えば、クロマトグラフィー
の流出液、流れ注入分析の流れまたは毛管ゾーンの電気
泳動の流れの１または２以上の溶解した成分の分析的検
出および測定の装置および方法に関する。とくに、本発
明は、粒状試薬を流れに添加して懸濁液またはスラリー
、またはコロイド分散液を形成することからなり、不溶
性粒状試薬は液体の流れ中に変化を発生させて、流れ中
の１または２以上の選択した検出可能な溶解した物質の
検出を促進する、検出器への通過前に液状分析物の流れ
を処理する、新規な装置および方法に関する。

本発明は、要約すれば、次の通りである：溶液中の検出
可能な溶解した物質を、検出手段で、例えは、前記溶解
した物質の存在または濃度を決定する検出手段に、検出
可能な物質を含有する溶液を通過させることにより、検
出することからなる、溶液中のもとの分析物の存在また
は濃度を決定する分析法の改良。この改良は、前記溶液
を１まｊ：は２以上の粒状試薬と混合して懸濁液を形成
し、前記粒状試薬は前記溶液を変更して、もとの分析物
の濃度と相関関係する、合計の検出可能な物質の濃度を
生成し、そして前記溶液を検出手段に通過させることか
らなる。粒子を使用して分析物を検出可能な物質または
中間体と置換することができ、前記中間体は溶液中で反
応して検出可能な物質を形成することができる。あるい
は、粒子を使用して妨害物質を抑制または除去すること
かできる。装置は試料検出の系における改良であり、こ
の改良は連続流の試料源、例えは、プロセス液体源、担
体の液体を注入した試料源、試料セパレーターカラム、
例えは、イオン交換カラムまたはクロマトグラフィー〇
カラム、または毛管ゾーンの電気泳動の試料セパレータ
ーからなる。それは、また、溶解した試料の種を検出す
る検出手段、および試料源および検出手段と連絡する流
れ通路を含む接続手段を含む。改良は２ミクロンより小
さい粒子サイズを有する試薬粒子のための粒状試薬の溜
手段、および流れ制御手段からなり、前記流れ制御手段
は、前記粒状試薬の溜および接続手段の流れ通路と連絡
し、前記流れ通路中に入る粒状試薬を計量する。前記検
出手段は粒状試薬の存在下に溶解した試料の種を検出す
ることができる。

流れる流れの分析法および系における主な進歩は、最近
なされて来ている。流れる流れにおける有効に検出され
る分析物の範囲および種類、分析物の濃度の測定の制度
、および系の信頼性は、研究、プロセス制御、汚染の抑
制、及び多くの他の分野における必須の分析の道具とし
て流れの分析の手順を確立した。

これらの方法において、検出可能な部分を含有する液体
を検出器に通過させ、そしてその部分の存在および濃度
を流れが連続しているとき決定する。これらの手順の最
も高度に開発されたもののうちの３つは、液体クロマト
グラフィー、例えは、ＨＰＬＣ（高性能液体クロマトグ
ラフィー）、イオン交換クロマトグラフィー、および流
れ注入分析である。新しい技術、ＣＺＥ　（毛管ゾーン
電気泳動）は、また、流れを検出器に通過させる。

各方法において、検出可能な物質を検出器を通過する流
れのセグメントにおいて濃縮し、そしてセグメント内の
レベルまたは濃度を、それが検出器を通過するとき、決
定する。検出可能な物質の分散は、濃度のピークを平ら
にしかつ広げ、この方法の感度を減少させる。分散は接
続する管を通る流れの速度、接続管の長さ、流れの断面
の変化、および多くの他の因子により影響される。

多くの物質を検出するために、検出の前に、濃縮した分
析物を有するセグメントを含有する液体の流れを化学的
に処理することか必要である。液体クロマトグラフィー
において、所望の感度を得るために、あるいは分析物か
ら検出可能な物質を得るために、種々のカラム後の処理
を必要とする。

利用可能手順は化学物質を添加または混合して、化学反
応を達成し、溶液の成分除去または置換すること、およ
び他の方法を包含する。これらの処理を用いることは、
固有に、液体の流れ中の濃縮し！二分析物の分散を増加
する。これは次の文献に記載されている：フレイ（Ｆｒ
ｅｉ）ら、ｒＨＰＬＣにおける反応の検出器（Ｒｅａｃ
ｔｉｎ　　ｄｅｃｔｏｒ　　ｉｎ　　ＨＰＬＣＪ、Ｊ、
Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　　５ｃｉｅｎｃｅ、
＋７＋１５１１５９　（１９７９）、ここで著者らは「
適切な反応の検出器の構成はバンドの広がりに対する一
定の闘争からなる」と述べている。なお他の最近の刊行
物、シュビレ（Ｊｕｐｉｌｌｅ）、［液体クロマトグラ
フィーＩこおけるＵＶ−可視吸着誘導化（ＵＶ　−Ｖｉ
ｓｉｂｌｅ　　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　　ｄｅｒｉｖａ
ｔｉｚａｔｉｏｎ　　ｉｎ１ｑｕｉｄ　　　ｃｈｒｏｍ
ａｔｏｇｒａｐｈｙ）Ｊ　　、Ｊ、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇ
ｒａｐｈｉｃ　　　５ｃｉｅｎｃｅ、１７：１６０　１
６７（１９７９）において、著者ら、なかでも、反応器
の設計および状態の利点を記載している＝　［ハードウ
ェアーの必要性（付随する融通性の損失を伴う）：およ
び、。

１．カラム後の混合体積によるバンドの広がり、それか
ら生ずる分解能の損失」。

さらに説明するため、バンドの広がりを回避する頻繁に
述へられている問題は種々の因子、なかでも試薬を計量
する方法と相互に関係する。流れに添加される試薬は、
通常少なくとも小さいバックグラウンドの信号を有する
。計量の終始一貫性の欠如は、流出液中の試薬の濃度の
変動を生じ、これは検出器において「ノイズ」として示
される。

この問題は、ことに、高度に濃縮された試薬を使用する
場合きびしい。なぜなら、小さい変動は検出の感度をひ
どく妨害する、高いバンクグラウンドの「ノイズ」のレ
ベルを生成し得るからである。先行技術の選択の１つは
濃縮された試薬を使用して試料の希釈によるバンドの広
がりを回避することであるが、それのもかかわらず、増
加は増大したバックグラウンドのノイズのレベルにより
少なくとも部分的に相殺されることがある。

試薬の混合を達成し、適切な反応時間を可能とし、そし
て最小の分散による溶液の種々の処理を達成するために
、独創的な系が開発された。本発明まで、これらの問題
に対する最も有効な解決は、充填した床および膜の反応
器に基づいた。

しかしながら、充填した床および膜の反応器は感度およ
び融通性に制限する因子を与え続けている。充填した床
は、流れの分析法において、分析物のイオンをより検出
可能なイオンと、イオン交換または重力により、単なる
イオン交換、酵素反応、または分析物と床により提供さ
れる化学物質との反応を経て、置換するために使用され
る。それらは、また、液体の流れ中の妨害物質を、吸着
、イオン交換、化学反応などにより、除去または抑制す
るために使用される。充填した床中の粒子またはゲルの
固定床を通る濃縮された分析物の流れのセグメントの流
れにおいて、分析物の床の通過は固定床系の流れの動力
学のために減衰する。これらの相互作用および流れはク
ロマトグラフィーの分離において分析物の分離を達成す
るために高度に有効であるが、それらは簡単な反応系に
おける分散を絶えず増加する。

充填した床反応器の流れのある反応は、沈澱を形成する
ことがある。これらの沈澱は、流れの流れに対して高い
抵抗を発生させることがあるか、あるいは反応器を詰ま
らせ、そして反応器を使用不可能にさせることさえある
。

充填した床反応器は連続的に使用することができない。

床の消耗後、流れの処理法は中断し、次いで反応器を再
生または置換しなくてはならない。

膜の反応器は、膜表面を横切って分析物の流れを通すこ
とをを含み、そしてこれは管状膜を通してまたはシート
状膜を横切って流れを通過させることによって、流れの
検出系において最も有効に達成される。所望の膜反応を
達成するために要求される管の長さまたは形状は、分散
をさらに増加するが、この手順の有用性を制限する。膜
反応器は脆く、っそいて容易に破壊する。また、膜Ｉ！
’物質で容易に詰まったり、あるいは汚れたりし、これ
は除去不可能であり、そして膜使用不可能にする。

米国特許第４．０９７．３３８号は減少した補酵素を検
出する方法を記載しており、ここで減少しだ補酵素の蛍
光を、水と混和性の有機液体およびｌまたは２以上のわ
ずかに可溶性または不溶性の物質の分散液の同時の存在
下に、水性媒質中で測定する。有機液体および粒子の存
在および組み合わせは、減少した補酵素の蛍光を増強す
る。

米国特許！４，６５０．７７０号は蛍光性粒子および吸
収性粒子を使用するイムノア・ンセイを記載しており、
ここで吸収性粒子は、蛍光性粒子に特別の非共有結合に
より結合するとき、蛍光を実質的に阻害する。不溶性粒
子の蛍光を測定する。

西ドイツ国特許第ＤＥ２７４９９５６号は、ラテックス
ポリャーの試薬を使用する検出の光測定方法を用いるイ
ムノアッセイを記載している。これは流れる流れに容易
に適用できない動力学的方法である。日本国特許第５９
１７１８６３号、６２００２１３６号、６２０９３６６
３号および６２０９３６６４号は、また、動力学的方法
、バ／チ溶液を使用する時間および点に対する読み、に
関し、そして流れる流れの測定に容易に適用することが
できない。実質的なまたは完全な反応後の試料の計器の
読みは、一般に、要求される。一般に、動力学的イムノ
アッセイ、は本発明の流れる流れの検出法に有用ではな
い。なぜなら、動力学的イムノアッセイおよび検出可能
な種を生成する反応は非常に遅すぎかつ特異的でありす
ぎるからである。

米国特許第４，６６５．０２０号は結合競合イムノアッ
セイの流れサイトメーターの測定を記載しており、ここ
で試薬の抗原で蛍光性微小球および抗原と特異的に結合
する抗体を分析物を含有する液体試料と混合する。粒子
の懸濁液をレーザー流れサイトメーターで蛍光性事象お
よび光散乱について測定して、試料中の分析物の濃度Ｉ
こデータを関係付ける。これは特別のイムノアッセイで
あり、そしてクロマトグラフィーの分離は存在しない。

西ドイツ国特許第ＤＤＩＩ９．８７３号はＨＦおよびＦ
ｅＦ２／ＦｅＦ、を検出する連続流れの方法を記載して
おり、ここでＭｇＯの水性懸濁液を試料に添加する。ク
ロマトグラフィーの分離は含まれず、そしてこの方法は
クロマトグラフィーの分離または他の流れの方法に拡張
することができない。試薬は混合物中の１つのみの化合
物に対して特異的である。さらに、Ｍ　ｇ　Ｏは不溶性
でなく、そしてこの方法の間溶液中に存在する。

カナダ国特許第１．１０３，１３７号は、イオン交換コ
ロイド状ポリマーを反対に帯電したコロイド状ポリマー
で滴定することを記載している。

ロシア特許第ＳＵＩ、２７１，５６１号は、工業的分離
方法においてイオン交換スラリーの向流添加を記載して
いる。スラリー混合物の検出は含まれない。

上の検出方法のいずれも、検出すべき可溶性物質の溶液
を生成するために不溶性粒子を使用しない。分析方法は
、一般に、溶液の分析物に濃度か関係する特定の粒子を
生成し、通常分析物を不溶性化すること、およびプロセ
スの粒子の生成物の測定または決定を包含する。他の先
行技術の方法は、免疫学的または化学的反応を開始する
ために粒子を使用し、そして溶液の分析を実施出来る前
に、長い反応を完結することを必要とする；それらは流
れる流れの処理および検出に容易に適用することができ
ない。上の方法のすべては特異的であり、そしてクロマ
トグラフィーの方法に適用することができない。

ＨＰＬＣおよびＦＩＡのための表面増強ラーマン分光学
の技術は、次の文献に記載されている：フリーマン（Ｆ
　ｒ　ｅ　ｅｍａ　ｎ）ら、Ａ　ｐ　ｐ　Ｉ　ｉ　ｅｄ
　　５ｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ　　４２：４５６　（１
９８８）。この方法は、溶液の分析物に濃度で関係付け
る粒子を生成し、分析物を不溶性化し、そしてプロセス
の粒子生成物を測定することを含む。

本発明の目的は、流れの処理および検出のための改良さ
れた反応器の開発によって特徴づけられる、流れる液体
の流れの溶解した成分の分析的検出および測定の改良さ
れた装置および方法を提供することである。とくに、本
発明の目的は、検出器が応答しない化学試薬を使用して
、液体の流れを処理して、検出器のノイズを減少しかつ
感度を増加する検出器および方法を提供することである
。

本発明の他の目的は、より融通性のある装置および方法
を提供することである。例えば、通常沈澱を形成する化
学的処理を、反応器の詰まりまたは汚れの危険なしに、
本発明の装置および方法と組み合わせて使用することが
できる。

本発明の他の目的は、連続でありかつピークの広がりを
最小にする、改良された検出方法を提供することである
。

本発明のなお他の目的は、先行技術の方法よりも頑丈で
ありかつ容易に実施される、検出の装置および方法を提
供することである。

本発明の１つの面は、溶液中のもとの分析物の存在また
は濃度を決定する分析方法である。その最も広い形態に
おいて、本発明の方法は、溶液中の溶解度検出可能な溶
解した物質を溶解した物質の存在または濃度を決定する
検出手段で検出することにより、溶液中の１または２以
上の分析物の存在または濃度を決定する方法の改良であ
る。この改良は、前記溶液を粒状試薬と混合して懸濁液
を形成し、前記粒状試薬は前記溶液を変更して、もとの
分析物の濃度と相関関係する、合計の検出可能な物質の
濃度を生成し、そして前記溶液中の検出可能な溶解した
物質を検出して、前記検出可能な溶解した物質の存在ま
たは濃度を検出手段で検出することからなる。この方法
は好ましくはイムノアッセイではない。

粒状試薬は、種々の方法で、分析物と相互作用して、溶
液中の合計の検出可能な物質の対応する濃度を生成する
ことかできる。粒子は第２物質と分析物により置換され
る交換可能なイオンを有する、分散可能なイオン交換粒
子からなることかでき、第２物質の濃度は本来溶液中の
分析物の濃度と相関関係する。第２物質は検出可能な物
質であるか、あるいは笑２物質は溶液中の試薬と反応し
て、分析物の濃度と相関関係する濃度で検出可能な物質
を生成することかできる。粒状試薬は、分析物と化学的
または酵素的に反応して、検出可能な物質であるか、あ
るいは溶液中の試薬との反応により転化して、検出可能
な物質を生成することができる、反応生成物を生成する
粒子からなることかできる。

好ましい実施態様において、この方法は分析物の溶液の
流れる流れを含む分析方法に適用される。

検出可能な物質の溶液は、流れる流れとして検出手段を
通過して、溶液中の検出可能な溶解した物質の存在およ
び濃度を検出し、そして粒状試薬は検出工程の前に流れ
る流れに添加する。

１つの実施態様において、溶液は干渉物質を含有し、そ
して粒状試薬は干渉物質と相互作用して、イオン交換、
化学反応、酵素反応、吸着または吸収により、溶液中の
そのレベルを減少させる。他の実施態様において、溶液
の分析物は、検出工程前に、ｌまたは２以上の試薬との
相互作用により転化して、例えば、イオン交換、酵素の
作用、化学反応などにより、分析物を検出可能な溶解し
た物質と置換する。これらの方法の組み合わせを、また
、適用することができる。

好ましくは、粒状試薬は溶液中に止まり、検出手段を通
過する。適当な粒状試薬は、例えは、イオン交換物質、
キレート化物質、化学試薬、吸着剤、吸収剤、それに結
合した酵素を有する粒子、またはそれに結合した干渉物
質のための結合相手を有する粒子であることができる。

抗体、抗体結合性断片、または特定の抗体結合反応のた
めに選択した抗原をそれに結合して有する粒子は好まし
い。

本発明の他の面は、試料の種を分離または導入するする
試料手段、溶解した試料の種を検出する検出手段、およ
び前記連続流の試料入口および検出手段と連絡する流れ
通路を含む接続手段からなる試料を検出するＨＰＬＣ，
ＦＩＡおよびＣＺＥ装置である。改良は、２ミクロンよ
り小さい粒子サイズを有する試薬粒子のための粒状試薬
の溜手段、および流れ制御手段からなり、前記流れ制御
手段は、前記粒状試薬の溜および接続手段の流れ通路と
連絡し、前記流れ通路中に入る粒状試薬を計量する。検
出手段は粒状試薬の存在下に溶解した試料の種を検出す
る手段である。１つの好ましい実施態様において、検出
器は粒状試薬によって架橋または妨害されない電極を有
する伝導度メーターである。このような実施態様におい
て、電極は最大の粒状試薬の粒子の直径の１０倍より小
さい直径を有する孔をもたず、そして前記電極は前記粒
子の直径の少なくとも２倍である空間を有する。他の好
ましい実施態様において、接続手段の流れ通路は、最大
の粒状試薬の粒子の直径の少なくとも１０倍の内径を有
する。なお他の好ましい実施態様において、粒状試薬の
溜手段は、粒状試薬を懸濁して維持する手段を含む。さ
らに他の好ましい実施態様において、粒状試薬の溜手段
は圧力容器、加圧気体入口手段を有する圧力容器であり
、流れ制御手段は流れ制御弁を含み、そして溜は加圧さ
れていない容器であり、そして流れ制御手段は計量ポン
プを含む。

本発明は、溶液中のもとの分析物の存在または濃度を決
定する分析の装置および方法である。この方法は、溶液
中の検出可能な物質の存在または濃度を検出する検出手
段に、検出可能な物質を含有する溶液を通過させるとい
う必須の工程からなる。本発明の改良は、溶液を粒状試
薬と混合して懸濁液を形成し、前記粒状試薬は前記溶液
を変更して、もとの分析物の濃度と相関関係する、合計
の検出可能な物質の濃度を生成し、そして検出手段に前
記溶液を通過させることからなり、前記検出手段は溶液
中の検出可能な溶解した物質の存在および／または濃度
を決定する。この方法は、結合対のアンセイ、例えは、
試薬の粒子を溶液中の分析物との相互作用により試薬粒
子において変化を発生させ、次いで粒子の特性を測定す
るイムノアッセイではない。装置はこの方法を実施でき
る装置である。

本発明の装置および方法は、検出測定前の液体クロマト
グラフィーの溶離剤の流れのカラム後の処理に特に有利
である。液体クロマトグラフィのカラムから溶離される
とき、試料のピークの自動化検出は、速い、高い性能の
分離に必要である。

それゆえ、高性能液体クロマトグラフ（−（ＨＰＬＣ）
は、使用する検出器の型によってしはしは特徴づけられ
る。液体クロマトグラフィーのために最も普通の検出器
は、分光光度計である。多くの有機化合物は紫外線の波
長で強く吸収する。こうして、ＨＰＬＣのために開発さ
れた検出器の多数の異なる型、例えは、アンペア測定、
伝導度測定、蛍光測定および反射測定の検出器などが存
在する。

感度および試料の選択性の必要性は、カラム後の誘導化
の技術の開発に導いた。いくつかの計画がまた開発され
た。最も簡単なカラム後の反応は、熱、照射または電子
の形態のエネルギーの添加のみを含む。はとんどの他の
カラム後の反応は、物質、例えば、色形成試薬または酵
素を添加して、溶離剤の流れ中の試料の種と反応させる
ことを含む。

これらの試薬は、本質的に３つの方法でカラム後溶離剤
に添加されてきている。１つのアブロチは固体の充填さ
れた床のカラム反応器を使用する。この反応器は、試料
の種と反応し、そしてピークを検出可能とする試薬を含
有する。試薬を使用するとき、カラム反応器は置換する
か、あるいは再生しなくてはならない。カラム後の誘導
化の他の方法は、溶媒中に溶解した試薬を混合Ｔ字管に
より添加することをを含んだ。このアプローチは有用性
が制限される。なぜなら、多くの誘導化は不溶性試薬を
必要とするからである。また、検出工程を妨害しうる他
の化学物質（例えば、反対イオン）は、誘導化試薬中に
存在することがある。

試薬のカラム後の添加最後の方法は、膜、例えば、イオ
ン交換クロマトグラフィーにおいて使用するものを使用
する。膜は選択した試薬を溶離剤の流れ中に通過させる
ことができるようにする。しかしながら、膜は脆く、制
限した表面積を有し、そしである種の反応にのみ使用す
ることができる。

本発明は、液体クロマトグラフィーにおけるとくに有用
である、装置および新規なカラム後の処理を導入する。

不溶性固体をカラム後に溶離剤の流れに添加する。固体
を溶離剤中に分散させ、そいて溶離剤を処理して試料の
ピークを検出可能とする。本発明以前において、固体の
液体クロマトグラフィーの流れへの添加は回避されてき
た。通常、ＨＰＬＣの溶媒は濾過して、０．２ミクロン
以上の粒子のすべてを除去し、そいてＨＰＬＣの管状反
応器セルの詰まりを防止する。

本発明の装置のＨＰＬＣおよびＩＣの概略的表示は、第
１図に示されている。溶離剤の溜２は、管および計量ポ
ンプ４により、試料注入弁６を通して分離カラム８の入
口に接続されている。試料注入弁６は、試料注入手段、
例えば、導管ｌＯを有する。分離カラム８の出口は、検
出器、例えば、伝導度セル１２へ導管１４により接続さ
れている。

検出器は普通のモニター１６および記録装置］８と接続
している。

粒状試薬の溜を使用して、■または２以上の粒状試薬を
導管１４を通して流れる液体の流れ中に導入することか
できる。試薬の溜２０および２２は加圧されていない容
器である。溜２０は撹拌装＃２４を装備し、この撹拌装
置は非コロイド状粒子を懸濁して維持する。これらの溜
からの流れの制御は、計量ポンプ２６および２８、例え
は、嬬動ポンプにより維持される。試薬の溜３０は加圧
された容器であり、加圧気体のための気体入口３２およ
び導管１４への液体の流れを制御する計量弁３４を装備
する。本発明の他の詳細および変更は、以下の説明から
明らかとなるであろう。

固体の試薬はカラム後にスラリーまたは懸濁液として液
体クロマトグラフィーの流れ１４に添加し、そして流れ
中に分散させて試料／固体の流れる懸濁液を形成する。

導管１４の障害を回避するために、導管の直径は最大の
粒状試薬の粒子の直径の少なくとも１０倍であるべきで
ある。固体は、成を流れへ添加し、成分を流れから抽出
するか、あるいは順次にまたは同時に両者の機能を実施
することによって、溶離剤を処理して試料を検出可能と
することかできる。処理は溶離剤全体に、あるいは濃縮
した分析物を含有する液体セグメントに適用することか
できる。しかしなから、処理の試薬は不溶性固体である
ので、多くの検出工程を有意に妨害しない。

多くの型の検出器１２を装置および方法におし・て使用
することができる。多くの検出器のトラスデューサーは
懸濁液の液体の部分にのみ応答し、分散した固体は検出
器に対して「透明」であり、そして測定に有意に影響を
及ぼさない。このような検出器の例は、伝導度メーター
、アンペアメタ−１および電位差計を包含する。他の検
出器、例えは、蛍光検出器および分光光度検出器を変更
して、分散した固体の存在下に検出可能な溶解した物質
の適切な性質を測定することかてきる。懸濁した固体の
存在か望ましくない方法で妨害する場合、固体は、例え
は、低い分散のフィルター例えは、接線貫流フィルター
により、試料の検出前に除去することかできる。

検出器は、粒状試薬の最大粒子によって架橋または妨害
されうる電気要素の配置または流れの制限もつへきでは
ない。ある貫流伝導度メーターは、例えは、大きい粒子
に適当ではな（゛。なぜなら、それらの粒子サイズは最
大の粒子直径の１０倍より小さいからである。一般に、
貫流多孔質電極の伝導度メーターは好ましくない。他の
多孔質の高い表面積の使用電極は、また、妨害するであ
ろう。

粒状試薬は導電性であることかできるので、例えは、最
大の粒子の直径の少なくとも２倍でない伝導度電極の空
間はより大きい粒子により架橋されかつンヨートされる
ことがある。選択した検出器は、この方法において使用
すべき特定の粒状試薬とともに使用できるかどうかに、
注意を払うべきである。

イオン交換クロマトグラフィ イオン交換クロマトグラフィーは、イオン交換カラムま
たはイオン交換体を含浸したシート上の移動の差により
物質を分離することである。試料のイオンは溶離剤溶液
とともにカラムを下に動かすか、あるいは溶離する。こ
れはイオン交換体上へ官能基と反応する溶離剤イオンお
よび試料イオンの競争により達成される。反応は可逆で
あるので、試料イオンか下に移動するとき、それは通常
数回「粘着し」および「引き離される」。試料イオンか
溶離剤イオンと競争する能力は、イオン交換体および試
料イオンの特定の種の各々に依存する。こうして、交換
体への試料イオンの親和性は独特であり、イオン混合物
の溶液を順次の溶離剤セグメントへの分離を実施する基
準を提供し、セグメントの各々単一のイオン種を含有す
る。

イオンクロマトグラフィーの手順、装置、カラム後の処
理技術、検出系、およびイオン交換物質の例は、次の文
献に記載されている・ジェルデ（Ｇｊｅｒｄｅ）ら、イ
オンクロマトグラフィー（ＩＯＮ　　ＣＨＲＯＭＡＴＯ
ＧＲΔＰＨＹ）（第２版）、：＝、　−：］−り：Ｄｒ
、ＡＩｆｒｅｄ　　Ｈｕｔｈｉｇ　　Ｖｅｒｌｇ（１９
８７）、その内容全体およびその中に引用されている刊
行物を引用によりここにくわえる。本発明の方法はイオ
ンクロマトグラフィーのすべてのタイプに適用すること
かできる。

アニオン交換の分離において、アルカリ性物質、例えば
、水酸化ナトリウムを含有する塩基性溶離剤中のカチオ
ンは、例えば、水素型の粒状カチオン交換樹脂で処理す
ることにより抑制することができる。本発明の二重の懸
濁液の適用において、溶離剤のカチオンの抑制は第２粒
状試薬による処理と組み合わせ、この粒状試薬は分析物
の種を共通の種に転化して、検出工程における均一なモ
ルの応答を提供する。これは、例えば、流れを粒状アニ
オン交換ポリマーと混合することによって達成すること
ができ、このポリマーはアニオンの分析物イオンを共通
のアニオンとイオン交換により置換する。なお他の別法
において、二重の懸濁液処理の技術を、試料のピークを
マスクし、こうして小さい成分の決定を可能とする、粒
状試薬による処理と組み合わせることができる。粒状の
銀の形態のカチオン交換体を使用して、例えば、亜硝酸
イオン中の塩素イオンをマスクすることができる。また
、バリウムの形態のカチオン交換粒子を使用して、硫酸
の微量のアニオンの決定において強酸イオンをマスクす
ることができる。

カチオン交換の分離において、酸性物質、例えば、塩酸
を含有する酸性溶離剤中のアニオンは、水酸化物の形態
の粒状アニオン交換樹脂ｌコよる処理によって抑制する
ことができる。これはアルカリ金属、アルカリ土類金属
のイオンおよびアミンの分離に有用である。本発明の二
重の懸濁液処理の適用において、溶離剤アニオンの抑制
は第２粒状試薬による処理と組み合わせ、ここで第２粒
状試薬は分析物の種を共通の種に転化して、検出工程に
おける均一なモルの応答を提供する。これは、例えは、
カチオンの分析物イオンを共通のカチオンとイオン交換
により置換する、粒状カチオン交換樹脂と懸濁液を混合
することによって達成することができる。遷移金属を含
有する溶離剤に一ついて、溶離剤中の鉛イオンを硫酸塩
の形態のアニオン交換樹脂のスラリーによる処理によっ
て抑制することができる。硫酸の溶離剤中の硫酸アニオ
ンは、鉛の形態またはバリウムの形態のカチオン交換樹
脂のスラリーによって抑制することかできる。

なお他の別法において、二重の懸濁液の処理の技術は、
試料のピークをマスクし、これにより小さい成分の決定
を可能とする粒状試薬を使用する処理と組み合わせるこ
とができる。例えば、溶離剤をキレート化イオン交換樹
脂のスラリーで処理して、アルカリ土類金属イオンの決
定において遷移金属を除去することができる。

イオン排除手順において、本発明の方法を使用して、銀
の形態のカチオン交換樹脂のスラリーで塩酸の溶離剤中
の塩素イオンを抑制することができる。弱い有機酸の溶
離剤は大きいアンモニウムカチオンの形態のカチオン交
換樹脂のスラリーで抑制することができる。

移動層のイオンクロマトグラフィーにおいて、第四水酸
化アンモニウムの溶離剤は水素の形態のカチオン交換樹
脂のスラリーで抑制することができる。

粒状試薬の除去は、多くのイオンクロマトグラフィーの
検出器、例えは、アンベメーター、比色計、電位差計、
蛍光計、および反射分光光度計の検出器について不必要
であるか、スラリーの組み合わせは溶離剤イオンの抑制
または除去に、あるいは試料の分析物を検出可能な形態
に転化するために要求されることかある。

ある場合において、粒状試薬の除去は、例えは、分光光
度計（ＵＶ−ＶＩＳ）、原子放射および原子吸着の検出
器のために必要であることがある。

高性能液体クロマトグラフィー ＨＰＬＣ法、試薬、装置。検出系、およびノｙラム後処
理は、次の文献に記載されている・フルル（Ｋｒｕｌｌ
）（編）、液体クロマトグラフィにおける反応の検出（
ＲＥＡＣＴＩＯＮ　　ＤＥＴＥＤＴＩＯＮ　　ＩＮ　　
ＬＩＱＵＩＤ　　ＣＨＲＯＭＡＴＯＧＲＡＰＨＹ）　、
ニューヨーク：　Ｍ　ａ　ｒ　ｃｅｌ　　Ｄｅｋｋｅｒ
　（＋９８６）、その内容全体およびその中Ｊこ引用さ
れている刊行物を引用によりここにくわえる。

本発明の方法を適用するとき、有機溶媒の溶離剤は粒状
吸着剤、例えば、ソリケート材料の吸収剤５ＩＬＩＣＡ
ＬＩＴ’（Ｕｎｉｏｎ　　Ｃａｒｂ１ｄｅ）により除去
することができる。化学反応成分および酵素を支持する
粒子を、試料の化学反応、例えば、酵素の酸化または還
元のために使用することができる。イオン対の試薬は、
ピークのマスクについてイオンクロマトグラフィーに関
して上に記載した手順により除去することができる。

イオンクロマトグラフィーの検出器の場合におけるよう
に、粒状試薬の除去は、多くのＨＰＬＣの検出器、例え
は、アンペメーター、比色計、電位差計、蛍光計、およ
び反射分光光度計の検出器について不必要である。ある
場合において、粒状試薬の除去は、例えは、分光光度計
（ＵＶ−ＶＪＳ）、原子放射および原子吸着の検出器の
ために必要であることがある。

連続流れの分析、流れ注入分析、および方法のモニター この方法は、また、検出器を通る試料の流れを含む。セ
グメント化流れを使用する連続流れの分析および流れ注
入分析ならびにそのための装置、試薬および検出器は、
次の文献に記載されているルジ力（Ｒｕｚｉｃｋａ）ら
、流れ注入分析（Ｆｌｏｗ　　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　　
Ａｎａｌｙｓｉｓ）、　ニー　：ｘ、　−Ｅ−り：Ｊｈ
ｏｎ　　Ｗ＋　ｌｅｙ　（１９８１）、その内容全体お
よびその中に引用されている刊行物を引用Ｉこよりここ
ｌこくわえる。連続流Ｊ′１の分析および流れ注入分析
は、適当な液体の流れる担体の流れ中に試料の液体を注
入することを含む。

本発明の方法をこれらの検出手順に適用するとき、粒状
試薬を液体に添加して、試料の分析物を検出可能な形態
に転化し、試料のマトリックスをより均一な形態に転化
するか、あるいは液体の妨害成分を除去またはマスクす
る。手順の多くは、イオンクロマトグラフィーまたはＨ
ＰＬＣに関して上に記載したものに相当する。有機溶媒
は５ＩＬＩＣＡＬＩＴＲで除去することができる：粒子
はバ／クグラウンドのマトリックスを減少する酵素また
は反応成分を支持することができ、試料の分析物をより
検出可能な形態に転化する化学反応成分を支持すること
ができ、試料のｐ　Ｈを、例えば、弱い塩基または弱い
酸のイオン交換材料を使用して調節し、および／または
試料の分析物を共通の種と置換することができる。検出
器およびそれに要求される特別の考慮は上に記載した通
りである。

本発明のＦＩＡ装置の概略的表示は、第２囚に示されて
いる。流体の溜３２は、ｖ８よび計量ポンプ３４により
、試料注入弁３６を通して導管３８の入口に接続されて
いる。試料注入弁３６は、試料注入手段、例えば、導管
４ｏを有する。導管４４は試料注入弁の出口から、検出
器、例えば、伝導度セル４２へ導かれている。検出器は
普通のモニター４６および記録装置４８と接続している
。

粒状試薬の溜を使用して、■または２以上の粒状試薬を
導管４４を通して流れる液体の流れ中に導入することが
できる。試薬の溜５０および５２は加圧されていない容
器である。溜５ｏは撹拌装置５４を装備し、この撹拌装
置は非コロイド状粒子を懸濁して維持する。これらの溜
からの流れの制御は、計量ポンプ５６および５８、例え
ば、嬬動ポンプにより維持される。試薬の溜６ｏは加圧
された容器であり、加圧気体のための気体人口６２およ
び導管４４への液体の流れを制御する計量弁６４を装備
する。本発明の他の詳細および変更は、以下の説明から
明らがとなるであろう。

固体の試薬はスラリーまたは懸濁液として液体の流れ４
４１こ添加し、そして流れ中Ｉこ分散させて試料／固体
の流れる懸濁液を形成する。導ｆ４４の障害を回避する
ために、導管の直径は最大の粒状試薬の粒子の直径の少
なくとも１０倍であるべきである。固体は、成分の流れ
への添加し、成分を流れから抽出するか、あるいは順次
にまたは同時に両者の機能を実施することによって、溶
離剤を処理して試料を検出可能とすることができる。

処理は溶離剤全体に、あるいは濃縮した分析物を含有す
る液体セグメン）・に適用することができる。

しかしなから、処理の試薬は不溶性固体であるので、多
くの検出工程を有意に妨害しない。

多くの型の検出器４２を装置および方法において使用す
ることかできる。多くの検出器のトラスデューサーは懸
濁液の液体の部分にのみ応答し、分散した固体は検出器
に対して「透明」であり、そして測定に存意に影響を及
ぼさない。このような検出器の例は、伝導度メーター、
アンペアメーター、および電位差計を包含する。他の検
出器、例えば、蛍光検出器および分光光度検出器を変更
して、分散した固体の存在下に検出可能な溶解した物質
の適切な性質を測定することができる。懸濁した固体の
存在が望ましくない方法で妨害する場合、固体は、例え
ば、低い分散のフィルター例えは、接線貫流フィルター
により、試料の検出前に除去することができる。

検出器は、粒状試薬の最大粒子によって架橋または妨害
されうる電気要素の配置または流れの制限もつべきでは
ない。ある貫流伝導度メーターは、例えば、大きい粒子
に適当ではない。なぜなら、それらの粒子サイズは最大
の粒子直径の１０倍より小さいからである。一般に、貫
流多孔質電極の伝導度メーターは好ましくない。他の多
孔質の高い表面積の使用電極は、また、妨害するであろ
う。

粒状試薬は導電性であることかできるので、例えば、最
大の粒子の直径の少なくとも２倍でない伝導度電極の空
間はより大きい粒子により架橋されかつショートされる
ことかある。選択した検出器は、この方法において使用
すべき特定の粒状試薬とともに使用できるかどうかに、
注意を払うへきである。

毛管ゾーン電気泳動 毛管ゾーン電気泳動（ＣＺ　Ｅ）は、イオン種の分離の
新しい技術である。この技術はきわめてすぐれた質量の
感度、低い溶液の消費、および高い分解能により特徴づ
けられる。高い電位を分離毛管を横切って印加する。毛
管の１端に導入された試料は、管をそらのイオンの移動
度に基づいて下に移動する。最高の移動度をもつイオン
は最初に毛管から溶離され、そして最低の移動度をもつ
イオンは最後に溶離される。電気浸透の流れと電気泳動
の分離との組み合わせのため、すべての種は通常１つの
方向に移動し、正に帯電した、中性の、および負に帯電
した種は毛管の１端において検出可能である。

調整された直接の高い電圧の電力の供給は３０ｋＶまで
を提供する。これらの電圧は毛管を通してマイクロアン
ペアの電流を発生させる。この技術より発生した熱は、
毛管の壁を通して消散する。

溶融したソリ力は電気泳動の毛管のために最も普通に使
用されるが、ＰＴＦＥＢよびポリプロピレンも使用され
てきている。５０〜１００ミクロンの内径、２００ミク
ロンより小さい壁厚さはたいていの用途において使用さ
れている。５０〜１００ｃｍの毛管の長さは最も普通で
ある。

ＣＺＥについての文献は、次の通りであるユニウイング
（Ｅｗ　ｉ　ｎ　ｇ）ら、Ａｎａ　１．Ｃｈｅｍ。

６１　：　２９Ａ　（１９８９）およびゴートン（Ｇ。

ｒｄｏｎ）ら、５ｃｉｅｎｃｅ、２４２：２２４（１９
８８）。

本発明のＣＺＥ装置の概略的表示は、第３図に示されて
いる。流体の溜７２は、管７４により、試料注入弁７６
を通して分離毛管７８の入口に接続されている。試料注
入装置７６は、試料注入手段、例えば、導管ｌＯを有す
る。分離毛管７８の出口はシース８２へ接続されている
。緩衝液溜７２およびシース８２は高い電圧源８４と電
気的に接触し、これは試料のイオンを分離毛管７８を下
に移動させる。シース８２と分離毛管７８との電気的接
触は、緩衝液の溜８６から送られる緩衝液で維持される
。シース８２の出口８３は検出器、例えは、伝導度セル
４２に導管９０により接続されている。検出器は普通の
モニター９２および記録装置９４と接続している。

粒状試薬の溜を使用して、ｌまたは２以上の粒状試薬を
導管９０を通して流れる液体の流れ中に導入することが
できる。試薬の溜９６および９８は加圧されていない容
器である。溜９６は撹拌装置１００を装備し、この撹拌
装置は非コロイド状粒子を懸濁して維持する。これらの
溜からの流れの制御は、計量ポンプ１０２および１０４
、例えば、螺動ポンプにより維持される。試薬の溜１０
６は加圧された容器であり、加圧気体のための気体入口
１０８および導管９０への液体の流れを制御する計量弁
１１０を装備する。本発明の他の詳細および変更は、以
下の説明から明らかとなるであろう。

固体の試薬はカラム後にスラリーまたは懸濁液として液
体クロマトグラフィーの流れ９０に添加し、そして流れ
中に分散させて試料／固体の流れる懸濁液を形成する。

導管９０の障害を回避するために、導管の直径は最大の
粒状試薬の粒子の直径の少なくとも１０倍であるへきで
ある。固体は、成分の流れへの添加し、成分を流れから
抽出するか、あるいは順次にまたは同時に両者の機能を
実施することによって、溶離剤を処理して試料を検出可
能とすることができる。処理は溶離剤全体に、あるいは
濃縮した分析物を含有する液体セグメントに適用するこ
とかできる。しかしながら、処理の試薬は不溶性固体で
あるので、多くの検出工程を有意に妨害しない。

ＨＰＬＣ，ＩＣおよびＦＩＡの方法のために有効な検出
器のすべてを、また、ＣＺＨのために使用することかで
きる。しかしながら、ＣＺＥの流速は通常他の技術より
有意に低い。ＣＺＥ検出器および管の空隙体積はそれに
応して調節する。

流れる流れでない試料の分離 本発明の方法は、また、流れる流れでない液体試料の処
理、例えは、標準のハ／チ法において有用である、ここ
で検出可能な溶解した種は標準分析検出器で決定する。

一般に、本発明において使用する粒子は、検出工程の間
懸濁液した状態に維持され、そして流れる流れの方法に
ついて前述したように変化を実施するために使用される
。特定の用途は、次のものを包含する：適当なイオン交
換粒子のスラリーを使用する試料のｐＨの調節。

マスキング、例えは、キレート化イオン交換樹脂のスラ
リーを使用するマスキング：および汚染物質の吸着、例
えは、溶液中の有機成分を吸収するが、無機成分を吸収
しない、高い表面積の、非極性の固体を使用する吸着。

検出器およびそれに要求される特別の考慮は流れる流れ
の方法について前述した通りである。

粒状試薬 粒状試薬は無機または有機であることかできる。

無機の試薬は、例えば、アルミナ、ソリ力またはモレキ
ュラーシーブ粒子に基づくことかできる。

有機試薬はポリマー、例えは、架橋した形態のポリスチ
レン、ポリニスルチル、ポリアミドおよびセルロースで
あることができる。用途に依存して、粒状試薬は吸着ま
たは吸収の反応に直接使用することかできるか、あるい
は粒状試薬は固体支持体上に反応基を含有することがで
きる。反応基は粒子に化学的に結合するか、あるいはそ
れに吸着することができ、したがって、また、不動およ
び不溶性である。官能基または反応基は、イオン交換、
分配、親和性、配位子交換、酵素、触媒、キレート化、
錯化なとであることができる。

通常、本発明の用途において粒状試薬は大きすぎないか
、同一の形態の粒状試薬はある数の製造会社から入手可
能である。アルミナ、シリカおよびソリ力誘導体、およ
びモレキュラーシーブ粒子はよく知られており、そして
多くの源から入手可能である。

イオン交換ポリマーは本発明の方法にお（づる粒状試薬
として最も有用である。普通のイオン交換樹脂粒子を使
用することかでき、そしてそれらの組成および製造方法
はこの分野においてよく知られている。それらは、また
、広く商業的に入手可能である。有用なイオン交換樹脂
は、次の文献に記載されている：クニン（Ｋｕｎｉｎ）
、イオン交換樹脂（１’ＯＮ　　ＥＸＣＨＡＮＧＥ　　
ＲＥＳＩＮＳ）、ニューヨーク＋Ｗｉ　ｌｅｙ　（１９
５ｇ）。

反応基は、重合前に七ツマー上に形成することができる
か、あるいは乳化または懸濁重合後にポリマーのヒース
と結合することかできる。

商業的に有用なポリマーヒーズは、通常１０ミクロン以
上であり、そしてこの大きさにおける使用には太きすぎ
る。有機および無機の粒子の大きさは、標準のよく知ら
れた微粉砕機を使用する微粉砕により減少することがで
き、そして微粉砕機は塗料の顔料、化粧品の粉末、およ
び他の材料の微粉砕の特別に設計されたものである。し
がしながら、微粉砕の技術は、検出器のバンクグラウン
ドの信号を生成するような不純物の導入を回避するよう
に選択しなくてはならない。試薬粒子は、また、限外濾
過の技術により精製することができる。

最近、１ミクロンより小さいポリマーの粒状試薬は、次
の会社から入手可Ｉ能となった：インター７エインヤル
・ダイナミクス（Ｉｎｔｅｒｆａｃｉａｌ　　Ｄｙｎａ
ｍｉｃｓ、Ｆａｓｔｅｋ）およびセラゲン・ダイグノス
チクス・インコーホレーテッド（Ｓｅｒａｇｅｎ　　Ｄ
ｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｉｎｃ、）。これらの試薬を製
造する方法は、次の文献に記載されている：バングス（
Ｂ　ａ　ｎ　ｇＳ）、ユニフォーム・ラテックス拳パー
ティクルス（ＵＮＩＦＯＲＭ　　ＬＡＴＥＸ　　ＰＡＲ
ＴＩＣＬＥＳ）、セラゲン・ダイグノスチクス・インコ
ーホレーテッド（Ｓｅｒａｇｅｎ　　Ｄｉａｇｎ。

５ｔｉｃｓ、Ｉｎｃ、、Ｉｎｄｉａｎａｏｌｉｓ。

Ｉｎｃｌｉａｎａ、１９８４）。しかしながら、これら
の粒状組成物によって提供される、高い大きさの均一性
は、本発明の方法における要求されない。

本発明の方法における使用する粒状試薬は、好ましくは
、安定なまたは沈降が遅いコロイド状懸濁液を形成する
。粒子は２ミクロン以下の平均大きさを有し、そして好
ましくは約１００オングストロームから０．２ミクロン
までの大きさを有するへきである。最適には、粒子は大
きさがコロイドであるべきである。均一な大きさは、光
反射が検出方法を妨害する場合を除外して、不必要であ
る。

新しい実験のスルホン化された低い架橋度のラテックス
のポリスチレンは、ローム・アンド・ハース（Ｒｏｈｍ
　　ａｎｄ　　Ｈａａｓ、Ｐｈ１ｌａｄｅ　１ｈｐｉａ
、ＰＡ）から入手可能である。材料ＸＥ３９１は、約０
．１〜０．３ミクロンの範囲、平均０．２ミクロンの粒
子サイズである。この材料は通常ｌＯ％の懸濁液として
供給される。

選択において使用する粒子の濃度は、要求される相互作
用を満足するように選択される。多くの反応のために、
濃度は試薬粒子の表面積に依存し、粒子か微細になれは
なるほど、要求される濃度は低くなる。一般に、流れの
系において溶液の遊離な流れを妨害せず、そして装置を
汚さない量を使用することができる。Ｏ，１ミクロンよ
り小さい粒子について、約２０重量％までの濃度を使用
することができる。約５重量％より少ない量は好ましい
。

スルホン化ポリスチレンの懸濁粒状試薬の性能 １ミクロンより小さいカチオン交換体の１．０％の懸濁
液の１０ｍ＋２を、脱イオン水の５０ｍθに添加し、そ
して０．０２００モルのＮａＯＨで滴定した。滴定の進
行をｐＨ（オリオン・リサーチ、３０１型、ｐＨメータ
ー）および伝導度（ウェスカン、２１３Ａ型）の測定で
追跡した。カチオン交換体の粒状試薬の容量は１．２２
ミクロシーメンス（ｍｉｃｒｏＳｃｈ　ｉｅｍｅｎｓ）
であつに。

表　　１ 懸濁液は約１３ｍ４のＮａＯＨの滴定剤の伝導度を減少
した。滴定剤を懸濁液に添加するにっれて、懸濁液の伝
導度は最初に約１２ｍ（ｌの滴定剤まで減少する。これ
により示されるように、スルホン化粒状試薬は試薬か低
い伝導度のナトＩＪウム形態に転化されるにつれて、さ
らに減少する低いバンクグラウンドの電動性を有する。

本発明を次の非制限的実施例によりさらに説明する。こ
こにおける実施に構成的に推定した手順は現在の時制で
記載し、そして実験室で実施した手順は過去の時制で記
載する。

実施例１ イオンクロマトグラフィー この実施例は、いくつかの無機アニオン、ことにフッ素
、塩素、亜硝酸、リン酸、および硫酸のアニオンを、濃
度、例えば、１〜５０ｐｐｍの範囲の濃度において分離
および調製するのに適当な方法を実証する。水性の移動
相は０．００２８モルのＮａＨＣＯ，および０．００２
２モルのＮａ２Ｃｏ３の混合物であった。流速は１ｍＱ
／分であり、そしてチャートの記録速度は２分／ｃｍで
あった。　試料の混合物を５ＡＲＡＳＥＰ”ＡＮＩ（Ｓ
ａｒａｓｅｐ、Ｉｎｃ、不バダ州レノ）の原型、低い容
量のアニオン交換樹脂を充填したクロマトグラフィーの
分離カラム（１５ｃｍＸ４ｒｎｍ）に適用した。クロマ
トグラフィーの分離後、溶離剤を混合Ｔ字管に向けた。

この流れを１ミクロンより小さい粒子サイズを有する、
水素型の完全にスルホン化されたカチオン交換樹脂の２
％の懸濁液と混合した。懸濁液の流速は１ｍＱ、７分で
あった。懸濁した固体の樹脂を含有する混合物を、３ｃ
ｍ’のセル定数をもつ導を度検出器（２１３Ａ型、Ｗｅ
ｓｃａｎ　　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）の伝導度セルを
通して向けた。検出器の感度は１００ミフロンーメンス
全目盛りにセラ）・シた。この懸濁液は、ヒドロニウム
カチオンを溶離剤に供与すると同時にナトリウムカチオ
ンを除未することによって溶離剤を低い導電性の炭酸に
転化し、そして同一の機構により、試料アニオンを高度
に導電性の酸に転化した。

粒状試薬の懸濁液を溶離剤に添加する効果は第４図に示
されている。炭酸塩／重炭酸塩の溶離剤は１８９ミクロ
シーメンスのバンクグラウンドのコンダクタンスを有す
る。この懸濁液をカラム後に溶離剤の流れに添加したと
き、コンダクタンスは５，６ミクロシーメンスに低下し
た。試薬の添加を停止すると、直ちにもとのバックグラ
ウンドのコンダクタンスに戻った。

タロマドグラムは第５図および第６図に示されている。

第５図はフッ素（ａ）、塩素（ｂ）、亜硝酸（Ｃ）、臭
素（ｄ）、硝酸（ｅ）、リン酸（ｆ）、および硫酸（ｇ
）を含む標準溶液、すへて上に記載したアニオン、を使
用して得られたタロマドグラムである。第６図は、カリ
フォルニア州の水道水を１９８７年１０月２３日にセラ
トガ（Ｓｅ　ｒａ　ｔ　ｏｇａ）の分離を表し、塩素（
ｈ）および硫酸（ｉ）を示す。

実施例２ イオンクロマトグラフィー この実施例は実施例１の方法の拡張である。この検出方
法は、最初の粒状試薬の処理、溶離剤の抑制および試料
のアニオン処理を、第２粒状試薬による第２回処理と組
み合わせる。この第２試薬は分析物種を共通の種に転化
して、検出工程において均一なモルの応答を提供する。

試料混合物を、５ＡＲＡＳＥｐＨＡＮｌ　（Ｓａｒａｓ
ｅｐ、Ｉｎｃ、　不／＜ダ州レノ）の原型、低い容量の
アニオン交換樹脂を充填したクロマトグラフィーの分離
カラム（１５ｃｍＸ４ｍｍ）に適用した。クロマトグラ
フィーの分離後、溶離剤を１ミクロンより小さい粒子サ
イズを有する、水素型の完全にスルホン化されたカチオ
ン交換樹脂の５％の懸濁液と混合する。懸濁液の流速は
０．５ｍＱ１分である。混合後、流れを真空により取り
囲まれた小さいケイ素の管から成る流れ脱気装置に向け
る。溶離剤を１ミクロンより小さい粒子サイズを有する
、塩素型の完全に官能化された強い塩基のアニオン交換
樹脂の５％の懸濁液と混合する。この第２懸濁液の流速
は０．５ｍ０／分である。カラムの流出液と２つの粒状
試薬との懸濁液混合物を、３ｃｍ−’のセル定数をもつ
導電度検出器（２１３Ａ型、Ｗｅｓｃａｎ　　Ｉｎｓｔ
ｒｕｍｅｎｔｓ）の伝導度セルを通して向けた。検出器
の感度は１０ミクロシーメンスの全目盛りにセットしｔ
こ。

最初の懸濁液は、ヒドロニウムカチオンを溶離剤に供与
すると同時にナトリウムカチオンを除去することによっ
て、溶離剤を低い導電性の炭酸に転化する。同一の機構
により、試料アニオンを高度に導電性の酸に転化する。

最初の粒状試薬処理後、脱気装置は二酸化炭素をケイ素
の壁を通して拡散することによって、流れから次階除去
する。

炭酸／二酸化炭素の除去後、第２懸濁液処理は試料の酸
を共通の種、高度に導電性の塩酸に転化する。

実施例３ イオンクロマトグラフィー 溶離剤の勾配を使用して、クロマトグラフィーの分離が
進行するにつれて、溶離剤の強度を増加する。これは遅
い溶離イオンのより速い溶離を可能とする。しかしなが
ら、溶離剤の勾配を有効に実施するために、バックグラ
ウンドの信号は出来るだけ一定に維持しなくてはならな
い１５ミリモルから５０ミリモルのＫＯＨの勾配（炭酸
塩は除去されない）を段階的勾配として実施した。溶離
剤（１ｍＱＺ分）を１ミクロンより小さい完全にスルホ
ン化されたゲル化型カチオン交換体（Ｂｅｎｓｏｎ　　
ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ、不バダ州レノ）の２％の懸濁液の
１ｍＣ／分の流れと混合した。検出器はＷＡＴＥＲ３４
３０型（Ｍｉｌｌ　１ｐｏｒｅ、ＣｏｒＰ、＋マサチュ
セツツ州ミル７オード）であった。

第７図は、段階的勾配における溶離剤の流れのコンダク
タンスを示す。僅か４シクロシーメンスのコンダクタン
スの変化を測定した。粒状試薬を添加しないと、コンダ
クタンスは５ミリモルのＫＯＨについて８５ミクロシー
メンスであり、モして溶離剤の濃度が５０ミリモルのＫ
ＯＨに増加すると、８５０ミクロシーメンスに増加する
であろう。

実施例４ イオンクロマトグラフィー この実施例は、弱酸の試料のアニオン酢酸、の存在下の
、いくつかの強酸の試料のアニオン−塩素、硝酸および
硫酸−の分離および定量を記載する。

溶離剤は３．５ｍＱ／分の流速を有する、０゜０２０モ
ルの水溶液であり、そしてカラム（１０ｃｍＸ４．６ｍ
ｍ）は低い容量のアニオン交換体（Ｃａ　ｔ、Ｎｏ、２
６９０１３、ＷｅｓｃａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）で
ある・ 試料のクロマトグラフィーの分離後、溶離剤を混合１字
管に向け、ここでそれを０．２ミクロンの高い表面積の
多回大孔質のポリマー（Ｐ２Ｏ、ポリ（スチレン−ジビ
ニルベンゼン）、Ｂｅｎ５ｏｎ　　ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ
、ネバダ州レノ）の５％の懸濁液と混合する。粒状試薬
の懸濁液の流速は１ｍＱ／分である。このカラム溶離剤
および試薬の懸濁液混合物を、導電度反応器のセル（２
１３Ａ型、Ｗｅｓｃａｎ　　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）
に向ける。低いｐＨの溶離剤は溶媒ピークをもつ酢酸塩
を溶離し、そして、それぞれ、塩素、硝酸および硫酸は
８分の分離で溶離された。懸濁液の試薬は非極性溶離剤
試薬、フタル酸を、水溶液からから吸着するか、高度に
導電性の酢酸、塩酸、硝酸および硫酸の形態である試料
のアニオンに影響を及ぼさない。

実施例５ イオンクロマトグラフィー この実施例は、電気化学的アンペア測定の検出を使用す
る。粒状試薬を使用して、検出器の使用電極を不活性化
または失活させうる試料中の有機化合物を吸収する。

１０ｃｍＸ７．８ｍｍのアニオン排除カラム［高い容量
、スルホン化された、８％の架橋、ポリ（スチレン−ジ
ビニルベンゼン）［脂、Ｂｅｎｓｏｎｐｏｌｙｍｅｒｉ
ｃ、ネバダ州レノ］を使用して、ビール中の亜硫酸塩を
分離する。ビールは、検出器の使用電極上に吸着しうる
有機物質を含有する。溶離剤は０．８５ｒｒｌ／分にセ
ットした、水性の０．００５モルの硫酸である。亜硫酸
塩の試料を注入し、そして亜硫酸塩は約３．５分て溶離
する。カラムの流出液を混合室に向け、ここでそれを０
．１ミクロンの高い表面積（４１５ｍ２／）の多巨大孔
質のポリ（スチレンージヒニルベンゼン）樹脂の１％の
懸濁液と混合する。次いで、この流れを、Ｐｔ＄極が＋
０．６ポルトに調節されている、アンペア測定検出器（
２７１型、Ｗｅｓｃａｎ　　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）
に向ける０粒状試薬はカラムから溶離する有機物質を吸
着するか、亜硫酸イオンの酸かおよび検出に影響を与え
ない。

実施例６ イオンクロマトグラフィー この実施例は、いくつかの普通のアルカリ金属のカチオ
ン−リチウム、ナトリウム、カリウムおよびアンモニウ
ム−の分離および定量を記載する。

水性の移動相は、２ｍ１）７分の流速の０．００３モル
のＨＮＯ，の混合物である。

試料をクロマトグラフィーの分離カラム（１０ｃｍｘ、
３．２ｍｍ）（低い容量のカチオン交換樹脂を充填した
、Ｃａ　ｔ、Ｎｏ、２６９００４、Ｗｅｓｃａｎ　　Ｉ
ｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）に向ける。

クロマトグラフィーの分離後、溶離剤を混合Ｔ字管に向
け、ここでそれを０．２ミクロンの高い容量のアニオン
交換体、水酸化物の形態、０１％の懸濁液と混合する。

懸濁液の流れの流速は１ｍ（１／分である。この混合物
を導電度検出器（２１３Ａ型、Ｗｅｓｃａｎ　　Ｉｎｓ
ｔｒｕｍｅｎｔｓ）の伝導度セルを通して向ける。この
懸濁液は溶離剤を硝酸アニオンを除去することによって
低い伝導性の水に転化する。懸濁液は又試料カチオンを
高い伝導度の塩基に転化する。この分離は１０分より短
い時間で完結し、そして試料のピークはリチウム、ナト
リウム、アンモニウムおよび次いでカリウムの順序で溶
離する。

実施例フ イオンクロマトグラフィー 原理的には、スルホン化された粒状試薬を使用して、弱
酸の塩を反応させるすることかできる。

それ以上の実施例として、５ミリモルのモリブデン酸ナ
トリウムの１ｍ（！／分の流れを、完全にスルホン化さ
れたカチオン交換粒状試薬の２％の懸濁液の１．１ｍ１
２／分の流れと反応させた。溶離剤のコンダクタンスを
、粒状試薬との反応の前および後に測定した。

表２ コンダクタンス（ミクロンーメンス） 叉皮廁　　叉瓜隼 モリブデン酸 ナトリウム、　　　　　２９９　　９５５ミリモル 最終のコンダクタンスはモリブデン酸のためである。こ
の溶離剤で分離される強酸のアニオンは酸として検出さ
れるであろう。

実施例８ イオンクロマトグラフィー この実施例において、懸濁した粒状試薬を使用して潜在
的に干渉性の金属の存在をマスクする。

マグネシウムおよびカルシウムを１０ｃｍＸ３２ｍｍの
低い容量のカチオン交換体（Ｂｅｎｓｏｎｐｏｌｙｍｅ
ｒｉｃ、不バダ州レノ）で分離する。溶離剤は硝酸でｐ
Ｈ７に調節した０、００１モルのエチレンジアミンに基
づき、そして１５ｍＱ１分の流速に調節する。１００モ
ル過剰量の鉄（ＩＩ）および０．００１モルのマグネシ
ウムおよびカルンウムの各々を含有する試料を注入し、
そしてカラムで分離する。カラムの流出液を混合Ｔ字管
に向け、ここでそれをキレート化粒状試薬と度合する。

粒状試薬は０．１ミクロンのポリ（スチレンージヒニル
ベンセン）粒子の１％の懸濁液から成る。ポリマーはす
］・リウム型のイミノジアセテート官能基をもつ高い容
量である。試薬はカラムから溶離する鉄と錯化し、こう
してマグネシウムのピークの干渉を防止する。懸濁液／
カラム流出液の流れを伝導度検出器に向け、そしてマグ
ネシウムおよびカルシウムの分離を６分のクロマトグラ
ム中に記録する。

実施例９ イオンクロマトグラフィ この実施例において、イオンクロマトグラフィを使用し
て遷移金属を分離する。水酸化物の抑制剤の粒状試薬は
これらの金属カチオンのために使用できない。なぜなら
、水酸化物は多少の遷移金属を沈澱させ、こうしてそれ
らの検出を妨害するからである。

銅（ＩＩ）、ニッケル（ＩＩ）、亜鉛（Ｉ　Ｉ）および
カドミウム（ｎ）を１５ｃｍＸ４．Ｏｍｍの低い容量の
カチオン交換カラム（Ｂｅｎｓｏｎｐｏｌｙｍｅｒｉｃ
、不バダ州レノ）で分離する。移動相は１．５ｍＩ２／
分の流速のＯ−００５モルのＢａＣ１２である。試料を
注入し、そして金属イオンは次の順序で溶離する：銅、
ニッケル、亜鉛、およびカドミウム。金属がカラムから
溶離するとき、カラム流出液を混合Ｔ字管に向け、ここ
でそれを硫酸塩の型の０．１ミクロンの高い容量の強い
塩基のカチオン交換樹脂の１％の懸濁液と混合する。反
応後、流れを伝導度検出器（２１３Ａ型、Ｗｅｓｃａｎ
　　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）に向ける。

懸濁液の試薬は、試薬上の硫酸塩でバリウムカチオンを
沈澱せることにより、溶離剤を低い伝導度の水に転化す
る。金属カチオンは金属硫酸塩として検出される。

実施例１Ｏ イオンクロマトグラフィー 低分子量の有機酸をイオン排除クロマトグラフィーによ
り分離する。この実施例において、シュウ酸、マレイン
酸、リンゴ酸、コハク酸、ギ酸および酢酸を、完全にス
ルホン化したスチレージビニルベンゼンコポリ？−（Ｐ
ｏｌｙｍｅｒｉｃ　　ｒｅｓｉｎ　　Ｃａｔ、Ｎｏ、８
２５、Ｂｅｎｓｏｎｐｏｌｙｍｅｒｉｃ、ネバダ州レノ
）を充填したガラスライニングしたカラム（３０ｃ　ｍ
　ｘ　７　。

８ｍｍ）で分離する。溶離剤は０．７ｍＱ１分の流速の
０．００３ＮのＨＣＩである。有機酸の分離後、溶離剤
を混合Ｔ字管に向け、ここでそれを銀型の０．２ミクロ
ンの高い容量のカチオン交換樹脂と混合する。この混合
物を伝導度検出器（２１３Ａ型、Ｗｅｓｃａｎ　　Ｉｎ
ｓｔｒｕｍｅｎｔＳ）の伝導度セルを通して向ける。こ
の懸濁液は、粒子上の銀カチオンで塩素アニオンを沈澱
させることにより、溶離剤を低い伝導度の水に転化する
。

この懸濁液は有機酸の分析物に影響を与えない。

分離は１２分以内に完結し、試料のピークは次の順序で
溶離する：シュウ酸、マレイン酸、リンゴ酸、コハク酸
、ギ酸および酢酸。

１ミクロンより小さい粒子懸濁液のＡｇ型カチオン交換
による、塩化物含有溶離剤の沈澱の実施例を実施した。

１０ミリモルのＮａＣｌの流れを２％の懸濁液で処理し
た。第８図は、処理しないコンダクタンスが３１４ミク
ロシーメンスであったことを示す。処理後、流れのコン
ダクタンスは２．９ミクロシーメンスであった。

実施例１１ ＨＰＬに の実施例において、ＨＰＬＣを使用して、アニオン界面
活性剤、すなわち、アルキルベンゼンスルホネートを分
離および検出する。移動相は０゜０１Ｎの（ＮＨ４）３
Ｂ＋。００．・８Ｈ２０（ホウ酸アンモニウム）および
０．０１モルのホウ酸で構成して、ｐＨ８，３の水性移
動相を生成する。アニオン界面活性剤の保持は、移動相
中のアセトニトリルの濃度を変化させ、同時にホウ酸お
よびホウ酸アンモニウムのレベルを一定に保持すること
によって制御する。勾配の溶離を使用し、アセトニトリ
ルの濃度を５０％から９０％に変化させる。

流速は１．５ｍ１２７分である。ＨＰＬＣ逆相カラム（
１５ｃｍＸ４．６ｍｍ）に、５ミクｔ７　ン（７）　シ
リカに基づく逆相結合材料（ＵＬＴＲＡＳＰＨＥＲＥ−
ＩＰ”、Ｂｅｃｋｍａｎ　　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）
を充填する。この懸濁液の検出溶液は、水酸化物の形態
の０．２ミクロンの完全にスルホン化すレｔニスチレン
ージビニルベンゼンコポリマーの５％の懸濁液である。

この懸濁溶液をカラム後に添加し、そして反応のループ
に向けた後、伝導度検出器へ流す。懸濁液の試薬は溶離
剤を弱電動性のホウ酸に転化すると同時に、試料のピー
クを高度に電動性のアルキルスルホン酸に転化する。

実施例１２ ＰＬＣ ニの実施例において、いくつかのアミンをイオン対の試
薬を使用して、ポリマーの逆相力ラムで分離する。１０
ミクロンの多巨大孔質の疎水性逆相充填物（Ｐｏｌｙｍ
ｅｒｉｃ　　Ｐ２Ｏ、Ｂｅｎ５ｏｎ　　ｐｏｌｙｍｅｒ
ｉｃ、不バダ州レノ）を含有する２５ｃｍｘ４．６ｍｍ
のカラムで、メチルアミン、ジメチルアミン、およびト
リメチルアミンを分離する。溶離剤はイオン対の試薬、
０゜００５モルのオクタンスルホン酸の２０　：　８０
メタノール／水溶液である。試料を注入し、そしてアミ
ンは１０分の期間にわたって溶離する。カラムの流出液
を混合１字管に向（づ、ここでそれをホウ酸塩の形態の
高い容量のアニオン交換樹脂から成る１％の０．１ミク
ロンの懸濁液と混合する。

次いで、流れを伝導度検出器に向ける。ホウ酸塩の粒状
試薬は、イオン対の試薬を低い電動性ホウ酸に転化し、
そして試料アミンを高度に電動性のホウ酸アンモニウム
の化合物に転化する。

実施例１３ 流れ注入分析 この実施例において、試料のイオン含量を測定する。試
料を２つの粒状試薬の混合物を含有する流れ中に注入す
る。一方の粒状試薬は１％の０１ミクロンのヒドロニウ
ムの形態の高い容量のポリマーのカチオン交換樹脂であ
る。他方の試薬は１％の０．１ミクロンの塩化物の形態
の高い容量のアニオン交換樹脂である。この試薬は試料
中のカチオンをヒドロニウムイオンに転化し、そして試
料中のアニオンを塩素イオンに転化する。試料を含有す
る流れを伝導度検出器（２１３Ａ型、Ｗｅｓｃａｎ　　
Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）に向ける。

懸濁液の試薬の流れは非常に小さいバックグラウンドの
伝導度を示す。試料は塩酸に転化され、そしてピークの
高さはもとの試料中のイオン含量に比例する。

実施例１４ 毛管ゾーン電気泳動 いくつかのアルカリ金属の分離を、毛管ゾーン電気泳動
により実施する。イオンを含有する試料を、ヒスチジン
でｐＨ６，１に調節した、２０ミリモルのモルホリノエ
タンスルホン酸（ＭＥＳ）から成る緩衝液中に溶解した
。ルヒジウム、カリウム、ナトリウムおよびリチウムの
分離を、６０ｃｍの７５ミクロンの内径溶融シリカの毛
管中で８分で実施する。印加した電圧は１５ｋＶである
。

カチオンは上に述へた順序で毛管から溶離し、そして混
合シースに向（プる。水酸化物の形態のアニオン交換体
の粒状試薬の懸濁液を試料の流れに添加し、そしてこの
混合物を伝導度検出器に向ける。

粒子の懸濁液は緩衝液の酸塩を取り上げ、同時に試料の
カチオンを反対イオンの水酸イオンに転化する。カチオ
ンは低い導電性の有機塩基の存在下に高い導電性の塩基
として検出される。

本発明の主な特徴および態様は、次の通りである５、 １、溶液中の検出可能な溶解した物質を前記溶解した物
質の存在または濃度を決定する検出手段で検出すること
からなる、溶液中のもとの分析物の存在または濃度を決
定する分析法において、工程： ａ）前記溶液を粒状試薬と混合して懸濁液を形成し、前
記粒状試薬は前記溶液を変更して、不溶性に止まる間の
もとの分析物の濃度と相関関係する、合計の検出可能な
物質の濃度を生成し、ここで粒状試薬は、それに結合し
て、抗体、抗体結合性断片、または特定の抗体結合反応
のために選択した抗原をもたず、そして ｂ）前記溶液中の前記検出可能な溶解した物質の存在ま
たは濃度を検出手段で検出する、からなることを特徴と
する方法。

２、検出可能な溶解した物質を含む溶液を検出手段に通
過させることからなる、溶液中のもとの分析物の存在ま
たは濃度を検出する上記第１項記載の方法であって、工
程： ａ）前記溶液を粒状試薬と混合して懸濁液を形成し、前
記粒状試薬は前記溶液を変更して、もとの分析物の濃度
と相関関係する、合計の可溶化した検出可能な物質の濃
度を生成し、そしてｂ）前記溶液を検出手段に通過させ
る、からなる方法。

３、前記粒状試薬は前記分析物と相互作用して、前記溶
液中の合計の検出可能な物質の対応する濃度を生成する
、上記第２項記載の方法。

４、前記粒状試薬は、前記分析物により嬉２物質と置換
する、交換可能な物質をその上にを有する分散可能なイ
オン交換粒子からなり、前記第２物質の濃度は前記溶液
中の分析物の濃度と相関関係する、上記第３項記載の方
法。

５、前記第２物質は可溶化した検出可能な物質である、
上記第４項記載の方法。

６、前記第２物質は前記溶液中の試薬と反応して、分析
物の濃度と相関関係する濃度で検出可能な溶解した物質
を提供する、上記第３項記載の方法。

７、前記粒状試薬は、前記分析物と化学的または酵素的
に反応して反応生成物を生成する粒子からなり、前記反
応生成物は検出可能な物質であるか、あるいは前記溶液
中の溶解したまたは粒状の試薬との反応！二より転化し
て検出可能な物質を生成する、上記第３項記載の方法。

８、前記溶液は干渉物質を含有し、そして粒状試薬は干
渉物質と相互作用して、イオン交換、キレート化、化学
反応、酵素反応、吸着、または吸収により前記溶液中の
そのレベルを減少させる、上記第１項記載の方法。

９、前記粒状試薬は前記溶液中に止まって前記検出手段
を通過する、上記第１，２．３．４．５．６．７または
８項記載の方法。

ｌＯ１前記粒状試薬はイオン交換材料、化学試薬、吸着
剤、結合した酵素を有する粒子、またはそれに結合した
干渉物質のための結合相手を有する粒子である、上記第
１．２．３．４．５．６．７または８項記載の方法。

１１前記分析物の溶液を複数の粒状試薬と混合する、上
記第１．２．３．４．５．６．７または８項記載の方法
。

１２、連続流の試料入口、溶解した試料の種を検出する
検出手段、および前記連続流の試料入口および検出手段
と連絡する流れ通路を含む接続手段からなる試料を検出
する装置において、２ミクロンより小さい粒子サイズを
有する試薬粒子のだめの粒状試薬の溜手段、および流れ
制御手段からなり、前記流れ制御手段は、前記粒状試薬
の溜および接続手段の流れ通路と連絡し、前記流れ通路
中に入る粒状試薬を計量し、前記検出手段は粒状試薬の
存在下に溶解した試料の種を検出する手段である、こと
を特徴とする装置。

１３、前記検出手段は、粒状試薬によって架橋または妨
害されない電極を有する伝導度メーターである、上記第
１２項記載の装置。

１４、前記電極は最大の粒状試薬の粒子の直径の１０倍
より小さい直径を有する孔をもたず、そして前記電極は
前記粒子の直径の少なくとも２倍である空間を有する、
上記１＠１３項記載の装置。

１５、前記接続手段の流れ通路は、最大の粒状試薬の粒
子の直径の少なくとも１０倍の内径を有する、上記第１
２項記載の装置。

１６、前記粒状試薬の溜手段は、粒状試薬を懸濁して維
持する手段を含む、上記第１２項記載の装置。

１７、粒状試薬の溜手段は加圧気体入口手段を有する圧
力容器である、上記第１２項記載の装置。

１８、流れ制御手段は流れ制御弁を含む、上記第１７項
記載の装置。

１９、前記溜は加圧されていない容器であり、そして流
れ制御手段は計量ポンプを含む、上記第１２項記載の装
置。

２０、粒状試薬の溜は、２ミクロンより小さい粒子サイ
ズを有する粒状試薬の液状懸濁液を含有する、上記嬉１
２項記載の装置。

２１、粒状試薬の粒子サイズは１００オングストローム
〜０．１ミクロンである、上記第２０項記載の装置。

２２、前記検出手段は、粒状試薬によって架橋または妨
害されない電極を有する伝導度メーターである、上記第
２０項記載の検出器。

２３、前記電極は最大の粒状試薬の粒子の直径の１０倍
より小さい直径を有する孔をもたず、そして前記電極は
前記粒子の直径の少なくとも２倍である空間を有する、
上記第２２項記載の装置。

２４、前記接続手段の流れ通路は、最大の粒状試薬の粒
子の直径の少なくとも１０倍の内径を有する、上記第２
０項記載の装置。

２５、連続流の試料源を含み、連続流の試料入口は連続
流の試料源と連絡する、上記第１２項記載の装置。

２６、連続流の試料源は試料を液体の流れ中に導入する
試料注入手段であり、前記試料注入手段は連続流担体液
体入口および前記連続流の試料入口と連絡する出口を有
する、上記第２５記載の装置。

２７、カラムのセパレーターまたは毛管ゾーンの電気泳
動のセパレーターを含み、連続流の試料入口は前記カラ
ムのセパレーターまたは毛管シンの電気泳動のセパレー
ターの出口と連絡している、上記第１２項記載の装置。

２８、前記カラムのセパレーターはイオン交換カラムま
たはクロマトグラムのセパレーターのカラムである、上
記第２７項記載の装置。

２９、前記クロマトグラムのセパレーターのカラムは高
圧液体クロマトグラフィー〇カラムである、上記第２８
項記載の装置。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明の装置の高性能液体クロマトグラフィ
ー（ＨＰ　Ｌ　Ｃ）およびイオン交換クロマトグラフィ
ー（ＩＣ）の概略的表示である。 第２図は、本発明の装置の流れ注入分析ＣＦＩＡ）の概
略的表示である。 第３図は、本発明の装置の毛管ゾーン電気泳動（ＣＺＥ
）の概略的表示である。 第４図は、実施例１に記載する炭酸塩／重炭酸塩溶離剤
に粒状試薬を添加する効果を示す。 第５図および第６図は、実施例１に記載するクロマトグ
ラムである。 第７図は、実施例３に記載する水酸化物溶離剤の勾配粒
状試薬を添加する効果を示す。 第８図は、実施例１０に記載する塩化物溶離剤の勾配粒
状試薬を添加する効果を示す。 ２溜 ４　　管および計量ポンプ 試料注入弁 分離カラム 導管 検出器 導管 モニター 記録装置 試薬の溜 試薬の溜 撹拌装置 ポンプ ポンプ 試薬の溜 気体入口、流体の溜 計量弁、管および計量ポンプ 試料注入弁 導管 導管 伝導度セル 導管 モニタ 記録装置 試薬の溜 試薬の溜 撹拌装置 ポンプ ポンプ 気体入口 計量弁 緩衝液の溜 管 試料注入装置 分離毛管 ソース 出口 高い電圧源 緩衝液の溜 伝導度セル 導管 モニタ 記録装置 試薬の溜 試薬の溜 撹拌装置 計量ポンプ 計量ポンプ 試薬の溜 気体入口 計量弁 ポンプ ポンプ 磨１′＄Ｉ 第２図 第３図 手続補正書 平成１年７月２６日 特許庁長官　　吉　１）文　毅　　殿 １、事件の表示 平成１年特許願第１４４２８４号 ２、発明の名称 粒状試薬の懸濁液を使用する流体の分析３、補正をする
者 事件との関係　　　特許出願人 名称　サラセブ・インコーホレーテッド（１）明細書第
３３頁８〜９行の「導管３８の入口」を「導管４４Ｊと
訂正する。 （２）同第３８頁第１行の「導管１０．をｒ導管８０．
に訂正する。 く３）同第３８頁第１７行の［ポンプ１０２および１０
４」をｒポンプ１１２および１１４Ｊと訂正する。 （４）同第４４頁第１２〜１３行の「ハース」の後にｒ
社」を挿入する。 （５）同第４４頁第１３行のｒＨａａｓＢの後にｒＣｏ
４を挿入する。 以上 ５、補正命令の日付　　自発 ６、補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄 ７、補正の内容 別紙のとおり

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、溶液中の検出可能な溶解した物質を前記溶解した物
   質の存在または濃度を決定する検出手段で検出すること
   からなる、溶液中のもとの分析物の存在または濃度を決
   定する分析法において、工程： ａ）前記溶液を粒状試薬と混合して懸濁液を形成し、前
   記粒状試薬は前記溶液を変更して、不溶性に止まる間の
   もとの分析物の濃度と相関関係する、合計の検出可能な
   物質の濃度を生成し、ここで粒状試薬は、それに結合し
   て、抗体、抗体結合性断片、または特定の抗体結合反応
   のために選択した抗原をもたず、そして ｂ）前記溶液中の前記検出可能な溶解した物質の存在ま
   たは濃度を検出手段で検出する、 からなることを特徴とする方法。 ２、連続流の試料入口、溶解した試料の種を検出する検
   出手段、および前記連続流の試料入口および検出手段と
   連絡する流れ通路を含む接続手段からなる試料を検出す
   る装置において、２ミクロンより小さい粒子サイズを有
   する試薬粒子のための粒状試薬の溜手段、および流れ制
   御手段からなり、前記流れ制御手段は、前記粒状試薬の
   溜および接続手段の流れ通路と連絡し、前記流れ通路中
   に入る粒状試薬を計量し、前記検出手段は粒状試薬の存
   在下に溶解した試料の種を検出する手段である、ことを
   特徴とする装置。