JPH04258292A - タバコの花芽形成時に発現する遺伝子 - Google Patents
タバコの花芽形成時に発現する遺伝子Info
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Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
【０００５】
【産業上の利用分野】この発明は、タバコの花芽形成誘
導時に発現する遺伝子に関する。
導時に発現する遺伝子に関する。
【０００６】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】植物
は、成長の最終段階において開花し、果実をつけるが、
この開花という現象を人為的に制御することができれば
、農産物の生産において多大な利益が生じる。例えば、
花卉栽培においては開花時期の制御や花の数の増加が可
能となり、葉菜の栽培においては開花しないようにする
ことが可能となれば、これらの生産に非常に有利である
。
は、成長の最終段階において開花し、果実をつけるが、
この開花という現象を人為的に制御することができれば
、農産物の生産において多大な利益が生じる。例えば、
花卉栽培においては開花時期の制御や花の数の増加が可
能となり、葉菜の栽培においては開花しないようにする
ことが可能となれば、これらの生産に非常に有利である
。
【０００７】現在、植物の開花時期を制御する方法とし
ては、日長条件や温度に感応して花をつける植物に対し
てその環境条件を人為的に変化させる方法などが知られ
ており広く実施されている。しかしながら、これらの方
法は植物の生理学的な反応を利用しているため、開花時
期を確実に制御することは困難である。
ては、日長条件や温度に感応して花をつける植物に対し
てその環境条件を人為的に変化させる方法などが知られ
ており広く実施されている。しかしながら、これらの方
法は植物の生理学的な反応を利用しているため、開花時
期を確実に制御することは困難である。
【０００８】一方、近年、植物の遺伝子工学的技術が発
展し、目的の遺伝子を植物体に導入して発現させる技術
が確立されている。例えば、ある遺伝子を植物に組込ん
で大量に発現させることにより、その遺伝子の働きを増
大させることができる。また、遺伝子をアンチセンスの
形で組込んで、その遺伝子の働きを抑制することも可能
である。同様に、遺伝子工学的技術を用いて植物の花芽
形成に関与する遺伝子を植物体に導入することにより、
開花の制御を行なうことが可能になるものと考えられる
。このような遺伝子工学的手法を用いた方法には開花の
より確実な制御および幅広い応用を期待することができ
るが、まず、花芽形成に関与する遺伝子を単離しなけれ
ばならない。
展し、目的の遺伝子を植物体に導入して発現させる技術
が確立されている。例えば、ある遺伝子を植物に組込ん
で大量に発現させることにより、その遺伝子の働きを増
大させることができる。また、遺伝子をアンチセンスの
形で組込んで、その遺伝子の働きを抑制することも可能
である。同様に、遺伝子工学的技術を用いて植物の花芽
形成に関与する遺伝子を植物体に導入することにより、
開花の制御を行なうことが可能になるものと考えられる
。このような遺伝子工学的手法を用いた方法には開花の
より確実な制御および幅広い応用を期待することができ
るが、まず、花芽形成に関与する遺伝子を単離しなけれ
ばならない。
【０００９】しかしながら、現時点では、花芽形成に関
する分子生物学的知見は非常に乏しい状態である。高等
植物の花芽分化についてはこれまでに多くの研究がなさ
れているが、その制御要因には不明の点が多く、現在に
至るまで制御機構は解明されていない。その原因として
は、花成ホルモン等の検定法が確立されていないことや
、環境調節が難しいことなどが挙げられている。したが
って、この発明の目的は、タバコの花芽形成時に発現し
て花芽の形成を制御する遺伝子を提供することにある。
する分子生物学的知見は非常に乏しい状態である。高等
植物の花芽分化についてはこれまでに多くの研究がなさ
れているが、その制御要因には不明の点が多く、現在に
至るまで制御機構は解明されていない。その原因として
は、花成ホルモン等の検定法が確立されていないことや
、環境調節が難しいことなどが挙げられている。したが
って、この発明の目的は、タバコの花芽形成時に発現し
て花芽の形成を制御する遺伝子を提供することにある。
【００１０】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成するため、タバコの培養組織を利用して花芽形成
時の分子生物学的動向の研究に勤めた。植物の組織培養
は環境調節が比較的容易であり、培地中に検定物質等を
添加してその効果を測定することが可能であるため、花
芽分化の研究手段としては有効な手段であると考えられ
る。植物の組織培養によって試験管内で花芽を形成させ
る試みはすでにいくつかの植物について行なわれており
、タバコにおいては、花軸の上皮切片を植物ホルモンを
含有する培地で培養することにより花芽形成が可能であ
ることが知られている（Ｎａｔｕｒｅ、１１５ 、８７
、１９７３）。 この方法に従い、タバコの花軸の上皮細胞をカイネチン
およびインド−ル酢酸を含有する Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ
−Ｓｋｏｏｇ培地上で培養することにより、 ７日ない
し１０日のうちに花芽を形成させることができる。本発
明者らは、このようにして調製された花芽を用いて鋭意
研究を行ない、この発明を完成するに至った。
を達成するため、タバコの培養組織を利用して花芽形成
時の分子生物学的動向の研究に勤めた。植物の組織培養
は環境調節が比較的容易であり、培地中に検定物質等を
添加してその効果を測定することが可能であるため、花
芽分化の研究手段としては有効な手段であると考えられ
る。植物の組織培養によって試験管内で花芽を形成させ
る試みはすでにいくつかの植物について行なわれており
、タバコにおいては、花軸の上皮切片を植物ホルモンを
含有する培地で培養することにより花芽形成が可能であ
ることが知られている（Ｎａｔｕｒｅ、１１５ 、８７
、１９７３）。 この方法に従い、タバコの花軸の上皮細胞をカイネチン
およびインド−ル酢酸を含有する Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ
−Ｓｋｏｏｇ培地上で培養することにより、 ７日ない
し１０日のうちに花芽を形成させることができる。本発
明者らは、このようにして調製された花芽を用いて鋭意
研究を行ない、この発明を完成するに至った。
【００１１】すなわち、この発明による、タバコの花芽
形成時に発現する遺伝子は、後掲の配列表の配列番号１
に示すアミノ酸配列を有するタンパク質をコ−ドするも
のであり、特には、配列表の配列番号２に示す塩基配列
を有する遺伝子である。この遺伝子は、例えば、以下に
記載する方法によって得ることができる。
形成時に発現する遺伝子は、後掲の配列表の配列番号１
に示すアミノ酸配列を有するタンパク質をコ−ドするも
のであり、特には、配列表の配列番号２に示す塩基配列
を有する遺伝子である。この遺伝子は、例えば、以下に
記載する方法によって得ることができる。
【００１２】まず、タバコの花軸上皮の切片をカイネチ
ンおよびインド−ル酢酸を含有するＭｕｒａｓｈｉｇｅ
−Ｓｋｏｏｇ培地（花芽誘導培地）上で培養する。次い
で、得られた培養組織から常法に従ってｍＲＮＡを抽出
し、さらに抽出したｍＲＮＡからｃＤＮＡライブラリ−
を作成する。次に、無処理のタバコ花軸から抽出したｍ
ＲＮＡおよび上記の培養組織から得たｍＲＮＡを用いて
、３２Ｐ等の放射性同位体で標識したｃＤＮＡプロ−ブ
をそれぞれ作成し、これらのプロ−ブと上記のｃＤＮＡ
ライブラリ−とのハイブリダイゼ−ションを行なう。ハ
イブリダイゼ−ションの結果、無処理花軸由来のプロ−
ブとはハイブリダイズせず、培養組織由来のプロ−ブと
のみハイブリダイズするｃＤＮＡクロ−ンを選択する。 このクロ−ンが有する遺伝子は、元の花軸には存在せず
花芽形成に伴なって発現が開始されたものである。すな
わち、この遺伝子は、花芽形成に関与する遺伝子である
。このうちの１つのｃＤＮＡクロ−ンを取り出して解析
することにより塩基配列を決定する。
ンおよびインド−ル酢酸を含有するＭｕｒａｓｈｉｇｅ
−Ｓｋｏｏｇ培地（花芽誘導培地）上で培養する。次い
で、得られた培養組織から常法に従ってｍＲＮＡを抽出
し、さらに抽出したｍＲＮＡからｃＤＮＡライブラリ−
を作成する。次に、無処理のタバコ花軸から抽出したｍ
ＲＮＡおよび上記の培養組織から得たｍＲＮＡを用いて
、３２Ｐ等の放射性同位体で標識したｃＤＮＡプロ−ブ
をそれぞれ作成し、これらのプロ−ブと上記のｃＤＮＡ
ライブラリ−とのハイブリダイゼ−ションを行なう。ハ
イブリダイゼ−ションの結果、無処理花軸由来のプロ−
ブとはハイブリダイズせず、培養組織由来のプロ−ブと
のみハイブリダイズするｃＤＮＡクロ−ンを選択する。 このクロ−ンが有する遺伝子は、元の花軸には存在せず
花芽形成に伴なって発現が開始されたものである。すな
わち、この遺伝子は、花芽形成に関与する遺伝子である
。このうちの１つのｃＤＮＡクロ−ンを取り出して解析
することにより塩基配列を決定する。
【００１３】
【実施例】以下、この発明の実施例を説明するが、この
発明は以下の実施例によって限定されるものではない。 （１）ｃＤＮＡライブラリ−の作成
発明は以下の実施例によって限定されるものではない。 （１）ｃＤＮＡライブラリ−の作成
【００１４】タバコ（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃ
ｕｍ ＢＹ−４）の花軸上皮切片を、カイネチン（ １
μＭ）およびインド−ル酢酸（ １μＭ）を含有する
Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ−Ｓｋｏｏｇの寒天培地上で １日
培養した。得られた培養組織１０ｇを、２０ｍｌの抽出
用緩衝液（ ４Ｍグアニジンチオシアネ−ト、 ５ｍＭ
クエン酸ナトリウム、 ０．５％ザルコシル、２０ｍＭ
β− メルカプトエタノ−ル）中においてポリトロンホ
モジェナイザ−を用いて破砕した。その後、破砕液を４
０００×ｇで２０分間遠心して分離し、上清を回収した
。
ｕｍ ＢＹ−４）の花軸上皮切片を、カイネチン（ １
μＭ）およびインド−ル酢酸（ １μＭ）を含有する
Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ−Ｓｋｏｏｇの寒天培地上で １日
培養した。得られた培養組織１０ｇを、２０ｍｌの抽出
用緩衝液（ ４Ｍグアニジンチオシアネ−ト、 ５ｍＭ
クエン酸ナトリウム、 ０．５％ザルコシル、２０ｍＭ
β− メルカプトエタノ−ル）中においてポリトロンホ
モジェナイザ−を用いて破砕した。その後、破砕液を４
０００×ｇで２０分間遠心して分離し、上清を回収した
。
【００１５】この上清を、遠心管に入れた ５．７Ｍ塩
化セシウム溶液 ４ｍｌ上に重層し、 ２８０００ｒｐ
ｍで２０時間遠心して分離した後、上清を捨てて沈殿を
回収した。この沈殿を １ｍｌの緩衝液（１０ｍＭ Ｔ
ｒｉｓ−ＨＣｌ 、１ｍＭ ＥＤＴＡ、 ０．１％ＳＤ
Ｓ）に溶解し、さらに等量のフェノ−ル：クロロホルム
：イソアミルアルコ−ル（２５：２４：１ ）を添加し
て良く混合した後遠心分離を行なって上層の水相を回収
した。得られた水相に、 ５Ｍの塩化ナトリウムを０．
２５Ｍとなるように添加し、さらに ２．５倍量のエタ
ノ−ルを添加してよく混合し、−２０℃で一晩静置した
。その後、１０，０００×ｇで２０分間遠心して分離し
、得られた沈殿を７０％エタノ−ルで洗浄して減圧乾燥
した。
化セシウム溶液 ４ｍｌ上に重層し、 ２８０００ｒｐ
ｍで２０時間遠心して分離した後、上清を捨てて沈殿を
回収した。この沈殿を １ｍｌの緩衝液（１０ｍＭ Ｔ
ｒｉｓ−ＨＣｌ 、１ｍＭ ＥＤＴＡ、 ０．１％ＳＤ
Ｓ）に溶解し、さらに等量のフェノ−ル：クロロホルム
：イソアミルアルコ−ル（２５：２４：１ ）を添加し
て良く混合した後遠心分離を行なって上層の水相を回収
した。得られた水相に、 ５Ｍの塩化ナトリウムを０．
２５Ｍとなるように添加し、さらに ２．５倍量のエタ
ノ−ルを添加してよく混合し、−２０℃で一晩静置した
。その後、１０，０００×ｇで２０分間遠心して分離し
、得られた沈殿を７０％エタノ−ルで洗浄して減圧乾燥
した。
【００１６】この乾燥標品を ５００ｕｌのＴＥ緩衝液
（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ 、１ｍＭ ＥＤＴＡ）
に溶解し、全ＲＮＡ溶液を得た。このＲＮＡ溶液を６５
℃で ５分間処理した後、氷上で急冷した。これに塩化
ナトリウム溶液を ０．５Ｍとなるように添加し、ＴＥ
緩衝液で予め平衡化したオリゴｄＴセルロ−スカラムに
かけた。次いで、カラムを約１０倍量の緩衝液（ ０．
５Ｍ塩化ナトリウム、１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ 、
１ｍＭ ＥＤＴＡ）で洗浄した後、ＴＥ緩衝液でｐｏｌ
ｙ（Ａ）＋ ＲＮＡを溶出した。
（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ 、１ｍＭ ＥＤＴＡ）
に溶解し、全ＲＮＡ溶液を得た。このＲＮＡ溶液を６５
℃で ５分間処理した後、氷上で急冷した。これに塩化
ナトリウム溶液を ０．５Ｍとなるように添加し、ＴＥ
緩衝液で予め平衡化したオリゴｄＴセルロ−スカラムに
かけた。次いで、カラムを約１０倍量の緩衝液（ ０．
５Ｍ塩化ナトリウム、１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ 、
１ｍＭ ＥＤＴＡ）で洗浄した後、ＴＥ緩衝液でｐｏｌ
ｙ（Ａ）＋ ＲＮＡを溶出した。
【００１７】得られた溶出液に １／１０量の ５Ｍ塩
化ナトリウム溶液および ２．５倍量のエタノ−ルを添
加して混合し、−７０℃で静置した。その後、１０，０
００×ｇで遠心分離を行ない、得られた沈殿を７０％エ
タノ−ルで洗浄して乾燥することによりｐｏｌｙ（Ａ）
＋ ＲＮＡ １０ ｕｇを得た。このｐｏｌｙ（Ａ）＋
ＲＮＡを水１０ｕｌに溶解し、そのうちの２ｕｌを用
いてｃＤＮＡライブラリ−を作成した。ｃＤＮＡライブ
ラリ−の作成は、アマシャム社製のλｇｔ１１ｃＤＮＡ
合成システムおよびｃＤＮＡクロ−ニングシステムを使
用し、その仕様書に従うことにより行なった。 （２）スクリ−ニング
化ナトリウム溶液および ２．５倍量のエタノ−ルを添
加して混合し、−７０℃で静置した。その後、１０，０
００×ｇで遠心分離を行ない、得られた沈殿を７０％エ
タノ−ルで洗浄して乾燥することによりｐｏｌｙ（Ａ）
＋ ＲＮＡ １０ ｕｇを得た。このｐｏｌｙ（Ａ）＋
ＲＮＡを水１０ｕｌに溶解し、そのうちの２ｕｌを用
いてｃＤＮＡライブラリ−を作成した。ｃＤＮＡライブ
ラリ−の作成は、アマシャム社製のλｇｔ１１ｃＤＮＡ
合成システムおよびｃＤＮＡクロ−ニングシステムを使
用し、その仕様書に従うことにより行なった。 （２）スクリ−ニング
【００１８】上記の培養組織から得たｐｏｌｙ（Ａ）＋
ＲＮＡ ２ｕｇおよび［α− ３２Ｐ］ｄＣＴＰ（３
０００ Ｃｉ ／ミリモル、１０μＣｉ／ｕｌ）１０ｕ
ｌを、３０ｕｌの反応液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ
（ｐＨ ７．６）、２ｍＭ ＤＴＴ、５ｍＭ ＭｇＣ
ｌ２ 、 ４０ｍＭ ＫＣｌ、１ｍＭ ｄＧＴＰ、ｄＡ
ＴＰおよびｄＴＴＰ、５ｕＭ ｄＣＴＰ、２０ユニット
のヒト胎盤ＲＮＡｓｅインヒビタ−、２ｕｇ オリゴｄ
Ｔプライマ−、４０ユニットの逆転写酵素）中において
、３７℃で１時間反応させてｃＤＮＡプロ−ブを作成し
た。無処理の花軸から抽出したｐｏｌｙ（Ａ）＋ ＲＮ
Ａについても、同様の方法で、ｃＤＮＡプロ−ブを作成
した。
ＲＮＡ ２ｕｇおよび［α− ３２Ｐ］ｄＣＴＰ（３
０００ Ｃｉ ／ミリモル、１０μＣｉ／ｕｌ）１０ｕ
ｌを、３０ｕｌの反応液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ
（ｐＨ ７．６）、２ｍＭ ＤＴＴ、５ｍＭ ＭｇＣ
ｌ２ 、 ４０ｍＭ ＫＣｌ、１ｍＭ ｄＧＴＰ、ｄＡ
ＴＰおよびｄＴＴＰ、５ｕＭ ｄＣＴＰ、２０ユニット
のヒト胎盤ＲＮＡｓｅインヒビタ−、２ｕｇ オリゴｄ
Ｔプライマ−、４０ユニットの逆転写酵素）中において
、３７℃で１時間反応させてｃＤＮＡプロ−ブを作成し
た。無処理の花軸から抽出したｐｏｌｙ（Ａ）＋ ＲＮ
Ａについても、同様の方法で、ｃＤＮＡプロ−ブを作成
した。
【００１９】次に、上記のｃＤＮＡライブラリ−を構成
するファ−ジを大腸菌に感染させてＬＢ寒天培地上で増
殖させ、約１４００個のファ−ジのＤＮＡをそれぞれ２
枚のナイロンメンブレンに写し取った。
するファ−ジを大腸菌に感染させてＬＢ寒天培地上で増
殖させ、約１４００個のファ−ジのＤＮＡをそれぞれ２
枚のナイロンメンブレンに写し取った。
【００２０】ファ−ジＤＮＡを写し取ったナイロンメン
ブレンと上で作成したｃＤＮＡプロ−ブとを、 ６×Ｓ
ＳＣ（ ０．９Ｍ塩化ナトリウム、０．０９Ｍクエン酸
ナトリウム）、０．１％ＳＤＳ、 ５×デンハルト溶液
（ ０．１％フィコ−ル、 ０．１％ポリビニルピロリ
ドン、 ０．１％ウシ血清アルブミン）、および５０ｕ
ｇ／ｍｌ変性サケ精子ＤＮＡを含有する溶液中において
、６５℃で２０時間ハイブリダイズさせた。その後、メ
ンブレンを取出し、 ２×ＳＳＣおよび ０．５％ＳＤ
Ｓを含有する溶液を用いて６５℃で １時間洗浄した。 このメンブレンを乾燥した後、Ｘ線フィルムを密着させ
て感光させた。
ブレンと上で作成したｃＤＮＡプロ−ブとを、 ６×Ｓ
ＳＣ（ ０．９Ｍ塩化ナトリウム、０．０９Ｍクエン酸
ナトリウム）、０．１％ＳＤＳ、 ５×デンハルト溶液
（ ０．１％フィコ−ル、 ０．１％ポリビニルピロリ
ドン、 ０．１％ウシ血清アルブミン）、および５０ｕ
ｇ／ｍｌ変性サケ精子ＤＮＡを含有する溶液中において
、６５℃で２０時間ハイブリダイズさせた。その後、メ
ンブレンを取出し、 ２×ＳＳＣおよび ０．５％ＳＤ
Ｓを含有する溶液を用いて６５℃で １時間洗浄した。 このメンブレンを乾燥した後、Ｘ線フィルムを密着させ
て感光させた。
【００２１】その結果、培養組織から得たプロ−ブとの
みハイブリダイズして無処理の花軸から得たプロ−ブと
はハイブリダイズしないクロ−ンを１０個選択すること
ができた。そのうちの１個のクロ−ンについて解析を進
めたところ、このクロ−ンのインサ−トは約 ３００塩
基対と小さいものであることが判明した。そこで、より
長いインサ−トを有するクロ−ンを得るために、このク
ロ−ンのインサ−ト部分をプロ−ブとして、さらにｃＤ
ＮＡライブラリ−のスクリ−ニングを行なった。
みハイブリダイズして無処理の花軸から得たプロ−ブと
はハイブリダイズしないクロ−ンを１０個選択すること
ができた。そのうちの１個のクロ−ンについて解析を進
めたところ、このクロ−ンのインサ−トは約 ３００塩
基対と小さいものであることが判明した。そこで、より
長いインサ−トを有するクロ−ンを得るために、このク
ロ−ンのインサ−ト部分をプロ−ブとして、さらにｃＤ
ＮＡライブラリ−のスクリ−ニングを行なった。
【００２２】このスクリ−ニングにより、約 １．８Ｋ
塩基対のインサ−トを有するクロ−ンが得られた。この
クロ−ンのインサ−ト部分をプラスミドベクタ−（Ｂｌ
ｕｅｓｃｒｉｐｔ、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社製）にサブ
クロ−ニングし、ダイデオキシ法によりその塩基配列を
決定した。決定されたインサ−ト部分の塩基配列および
その塩基配列がコ−ドするアミノ酸配列を、後掲の配列
表に、それぞれ配列番号２および配列番号１として示す
。このインサ−トの長さは１８１２塩基対であり、 ４
８５個のアミノ酸をコ−ドするオ−プンリ−ディングフ
レ−ムを有する。
塩基対のインサ−トを有するクロ−ンが得られた。この
クロ−ンのインサ−ト部分をプラスミドベクタ−（Ｂｌ
ｕｅｓｃｒｉｐｔ、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社製）にサブ
クロ−ニングし、ダイデオキシ法によりその塩基配列を
決定した。決定されたインサ−ト部分の塩基配列および
その塩基配列がコ−ドするアミノ酸配列を、後掲の配列
表に、それぞれ配列番号２および配列番号１として示す
。このインサ−トの長さは１８１２塩基対であり、 ４
８５個のアミノ酸をコ−ドするオ−プンリ−ディングフ
レ−ムを有する。
【００２３】
【発明の効果】この発明によるタバコの遺伝子は、花芽
形成時に発現するものであり、したがって花芽の形成に
関与する遺伝子である。このため、この遺伝子を植物体
内に組込んで発現させたり、逆にアンチセンスＲＮＡ技
術を用いてこの遺伝子の発現を抑制することにより、開
花の制御が可能となる。
形成時に発現するものであり、したがって花芽の形成に
関与する遺伝子である。このため、この遺伝子を植物体
内に組込んで発現させたり、逆にアンチセンスＲＮＡ技
術を用いてこの遺伝子の発現を抑制することにより、開
花の制御が可能となる。
【００２４】
【配列表】配列番号：１
配列の長さ：４８５
配列の型：アミノ酸
配列の種類：タンパク質
ハイポセティカル配列：Ｎｏ
アンチセンス：Ｎｏ
起源
生物名：ニコチアナ・タバカム（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ
Ｔａｂａｃｕｍ ）株名：ＢＹ−４ 分化の程度：ジャ−ムライン ハプロタイプ：ジプロイド 組織の種類：花軸（培養組織） 直接の起源 ライブラリ−名：タバコ花軸培養組織由来ｃＤＮＡライ
ブラリ− 配列
Ｔａｂａｃｕｍ ）株名：ＢＹ−４ 分化の程度：ジャ−ムライン ハプロタイプ：ジプロイド 組織の種類：花軸（培養組織） 直接の起源 ライブラリ−名：タバコ花軸培養組織由来ｃＤＮＡライ
ブラリ− 配列
【００２５】
Ｍｅｔ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｌ
ｙｓ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｇｌ
ｕ Ｔｙｒ Ｌｙｓ
５ １０
１５
Ｖａｌ Ｌｙｓ Ａｓｐ Ｍｅｔ Ｓｅ
ｒ Ｇｌｎ Ａｌａ Ａｓｐ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ａｒｇ
Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ｇｌｕ
２０
２５
３０
Ｌｅｕ Ａｌａ Ｇｌｕ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｍｅｔ
Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｍｅｔ Ａｌａ Ｃｙｓ Ａ
ｒｇ Ｔｈｒ Ｇｌｕ
３５
４０
４５ Ｐｈｅ Ｇ
ｌｙ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｈｅ Ｌｙ
ｓ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｇｌｙ
Ｓｅｒ
５０
５５ ６
０ Ｌｅｕ Ｈｉｓ Ｍｅｔ
Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｖａｌ
Ｌｅｕ Ｉｌｅ Ｇｌｕ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ
６５ ７０
７５
Ａｌａ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｇ
ｌｕ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｔｒｐ Ｃｙｓ Ｓｅｒ Ｃｙ
ｓ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ｓｅｒ
８０
８５
９０
Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ａｌａ Ａｌａ
Ａｌａ Ａｌａ Ｉｌｅ Ａｌａ Ａｒｇ Ａｓｐ
Ｓｅｒ Ａｌａ Ａｌａ
９５
１００
１０５ Ｖａｌ
Ｐｈｅ Ａｌａ Ｔｒｐ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ｔ
ｈｒ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｇｌｕ Ｔｙｒ Ｔｒｐ Ｔｒ
ｐ Ｃｙｓ
１１０
１１５ １
２０ Ｔｈｒ Ｇｌｕ Ａｒ
ｇ Ａｌａ Ｌｅｕ Ａｓｐ Ｔｒｐ Ｇｌｙ Ｐｒｏ
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｐｒｏ Ａｓｐ Ｌｅｕ
１２５ １３
０ １３５
Ｉｌｅ Ｖａｌ Ａｓｐ Ａｓｐ
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｌ
ｅｕ Ｉｌｅ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ｇｌｙ
１４０
１４５
１５０
Ｖａｌ Ｌｙｓ Ａｌａ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｇｌ
ｕ Ｐｈｅ Ａｌａ Ｌｙｓ Ａｓｎ Ｇｌｙ Ｔｈｒ
Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ａｓｐ
１５５
１６０
１６５ Ｐｒｏ
Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ａｓｐ Ａｓｎ Ａｌａ
Ｇｌｕ Ｐｈｅ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔ
ｈｒ Ｉｌｅ
１７０
１７５
１８０ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ｇ
ｌｕ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｔｈｒ Ａｓｐ Ｐｒ
ｏ Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｔｙｒ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｍｅｔ
１８５ １
９０ １９５
Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｌｅｕ
Ｖａｌ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｇｌｕ Ｇｌｕ
Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｖａｌ
２０
０ ２０５
２１０
Ｌｙｓ Ａｒｇ Ｌｅｕ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｍ
ｅｔ Ｇｌｎ Ａｌａ Ａｓｎ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｅ
ｕ Ｌｅｕ Ｐｈｅ Ｐｒｏ
２１５
２２０
２２５ Ａｌ
ａ Ｉｌｅ Ａｓｎ Ｖａｌ Ａｓｎ Ａｓｐ Ｓｅｒ
Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｐｈｅ
Ａｓｐ Ａｓｎ
２３０
２３５
２４０ Ｌｅｕ Ｔｙｒ
Ｇｌｙ Ｃｙｓ Ａｒｇ Ｈｉｓ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｐ
ｒｏ Ａｓｐ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｍｅｔ Ａｒｇ Ａｌ
ａ
２４５
２５０ ２５５
Ｔｈｒ Ａｓｐ Ｖａｌ Ｍｅ
ｔ Ｉｌｅ Ａｌａ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ａｌａ
Ｌｅｕ Ｖａｌ Ａｌａ Ｇｌｙ Ｔｙｒ
２
６０ ２６５
２７０
Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｖａｌ Ｇｌｙ Ｌｙｓ
Ｇｌｙ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｌａ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｌ
ｙｓ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｇｌｙ
２７５
２８０
２８５ Ａ
ｌａ Ａｒｇ Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｇｌ
ｕ Ｉｌｅ Ａｓｐ Ｐｒｏ Ｉｌｅ Ｃｙｓ Ａｌａ
Ｌｅｕ Ｇｌｎ
２９０
２９５
３００ Ａｌａ Ｔｈｒ
Ｍｅｔ Ｇｌｕ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｖａｌ
Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｖａｌ Ｖ
ａｌ
３０５
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Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｖａｌ Ａ
ｓｐ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈ
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３２０ ３２５
３３０
Ｉｌｅ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ａｓｐ Ｈｉｓ
Ｍｅｔ Ａｒｇ Ｌｙｓ Ｍｅｔ Ｌｙｓ Ａｓｎ
Ａｓｎ Ａｌａ Ｉｌｅ Ｖａｌ
３３５
３４０
３４５
Ｃｙｓ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｇｌｙ Ｈｉｓ Ｐｈｅ Ａ
ｓｐ Ａｓｎ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ａｓｐ Ｍｅｔ Ｌｅ
ｕ Ｇｌｙ Ｌｅｕ
３５０
３５５
３６０ Ｇｌｕ Ｔｈ
ｒ Ｔｙｒ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ａｒｇ
Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｎ
Ｔｈｒ
３６５
３７０ ３７５
Ａｓｐ Ａｒｇ Ｔｒｐ
Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｐｒｏ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｓ
ｅｒ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｉｌｅ Ｖａｌ Ｌｅｕ
３８０ ３８５
３９０
Ａｌａ Ｇｌｕ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｌｅ
ｕ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｃｙｓ Ａｌａ
Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｈｉｓ Ｐｒｏ
３９５
４００
４０５
Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｖａｌ Ｍｅｔ Ｓｅｒ Ｃｙｓ
Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｉ
ｌｅ Ａｌａ Ｇｌｎ
４１０
４１５
４２０ Ｌｅｕ Ｇ
ｌｕ Ｌｅｕ Ｔｒｐ Ａｓｎ Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｓｅ
ｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｔｙｒ Ｇｌｕ Ｌｙｓ
Ｌｙｓ
４２５
４３０ ４３
５ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ｖａｌ
Ｌｅｕ Ｐｒｏ Ｌｙｓ Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ａｓｐ
Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ａｌａ Ａｌａ Ｌｅｕ
４４０ ４４５
４５０
Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｌ
ｅｕ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｌｙ
ｓ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ａｓｐ
４５５
４６０
４６５
Ｇｌｎ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ
Ｖａｌ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｇｌｙ Ｐｒｏ
Ｔｙｒ Ｌｙｓ Ｐｒｏ
４７０
４７５
４８０ Ａｌａ
Ｈｉｓ Ｔｙｒ Ａｒｇ Ｔｙｒ
４８５ 配列番号：２ 配列の長さ：１８１２塩基 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジ−：直鎖状 配列の種類：ｃＤＮＡ ｔｏ ｍＲＮＡハイポセティカ
ル配列：Ｎｏ アンチセンス：Ｎｏ 起源 生物名：ニコチアナ・タバカム（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ
ｔａｂａｃｕｍ ）株名：ＢＹ−４ 分化の程度：ジャ−ムライン ハプロタイプ：ジプロイド 組織の種類：花軸（培養組織） 直接の起源 ライブラリ−名：タバコ花軸培養組織由来ｃＤＮＡライ
ブラリ− 配列
ｙｓ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｇｌ
ｕ Ｔｙｒ Ｌｙｓ
５ １０
１５
Ｖａｌ Ｌｙｓ Ａｓｐ Ｍｅｔ Ｓｅ
ｒ Ｇｌｎ Ａｌａ Ａｓｐ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ａｒｇ
Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ｇｌｕ
２０
２５
３０
Ｌｅｕ Ａｌａ Ｇｌｕ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｍｅｔ
Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｍｅｔ Ａｌａ Ｃｙｓ Ａ
ｒｇ Ｔｈｒ Ｇｌｕ
３５
４０
４５ Ｐｈｅ Ｇ
ｌｙ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｈｅ Ｌｙ
ｓ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｇｌｙ
Ｓｅｒ
５０
５５ ６
０ Ｌｅｕ Ｈｉｓ Ｍｅｔ
Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｖａｌ
Ｌｅｕ Ｉｌｅ Ｇｌｕ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ
６５ ７０
７５
Ａｌａ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｇ
ｌｕ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｔｒｐ Ｃｙｓ Ｓｅｒ Ｃｙ
ｓ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ｓｅｒ
８０
８５
９０
Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ａｌａ Ａｌａ
Ａｌａ Ａｌａ Ｉｌｅ Ａｌａ Ａｒｇ Ａｓｐ
Ｓｅｒ Ａｌａ Ａｌａ
９５
１００
１０５ Ｖａｌ
Ｐｈｅ Ａｌａ Ｔｒｐ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ｔ
ｈｒ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｇｌｕ Ｔｙｒ Ｔｒｐ Ｔｒ
ｐ Ｃｙｓ
１１０
１１５ １
２０ Ｔｈｒ Ｇｌｕ Ａｒ
ｇ Ａｌａ Ｌｅｕ Ａｓｐ Ｔｒｐ Ｇｌｙ Ｐｒｏ
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｐｒｏ Ａｓｐ Ｌｅｕ
１２５ １３
０ １３５
Ｉｌｅ Ｖａｌ Ａｓｐ Ａｓｐ
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｌ
ｅｕ Ｉｌｅ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ｇｌｙ
１４０
１４５
１５０
Ｖａｌ Ｌｙｓ Ａｌａ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｇｌ
ｕ Ｐｈｅ Ａｌａ Ｌｙｓ Ａｓｎ Ｇｌｙ Ｔｈｒ
Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ａｓｐ
１５５
１６０
１６５ Ｐｒｏ
Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ａｓｐ Ａｓｎ Ａｌａ
Ｇｌｕ Ｐｈｅ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔ
ｈｒ Ｉｌｅ
１７０
１７５
１８０ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ｇ
ｌｕ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｔｈｒ Ａｓｐ Ｐｒ
ｏ Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｔｙｒ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｍｅｔ
１８５ １
９０ １９５
Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｌｅｕ
Ｖａｌ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｇｌｕ Ｇｌｕ
Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｖａｌ
２０
０ ２０５
２１０
Ｌｙｓ Ａｒｇ Ｌｅｕ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｍ
ｅｔ Ｇｌｎ Ａｌａ Ａｓｎ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｅ
ｕ Ｌｅｕ Ｐｈｅ Ｐｒｏ
２１５
２２０
２２５ Ａｌ
ａ Ｉｌｅ Ａｓｎ Ｖａｌ Ａｓｎ Ａｓｐ Ｓｅｒ
Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｐｈｅ
Ａｓｐ Ａｓｎ
２３０
２３５
２４０ Ｌｅｕ Ｔｙｒ
Ｇｌｙ Ｃｙｓ Ａｒｇ Ｈｉｓ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｐ
ｒｏ Ａｓｐ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｍｅｔ Ａｒｇ Ａｌ
ａ
２４５
２５０ ２５５
Ｔｈｒ Ａｓｐ Ｖａｌ Ｍｅ
ｔ Ｉｌｅ Ａｌａ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ａｌａ
Ｌｅｕ Ｖａｌ Ａｌａ Ｇｌｙ Ｔｙｒ
２
６０ ２６５
２７０
Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｖａｌ Ｇｌｙ Ｌｙｓ
Ｇｌｙ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｌａ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｌ
ｙｓ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｇｌｙ
２７５
２８０
２８５ Ａ
ｌａ Ａｒｇ Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｇｌ
ｕ Ｉｌｅ Ａｓｐ Ｐｒｏ Ｉｌｅ Ｃｙｓ Ａｌａ
Ｌｅｕ Ｇｌｎ
２９０
２９５
３００ Ａｌａ Ｔｈｒ
Ｍｅｔ Ｇｌｕ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｖａｌ
Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｖａｌ Ｖ
ａｌ
３０５
３１０ ３１５
Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｖａｌ Ａ
ｓｐ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈ
ｒ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ａｓｐ Ｉｌｅ
３２０ ３２５
３３０
Ｉｌｅ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ａｓｐ Ｈｉｓ
Ｍｅｔ Ａｒｇ Ｌｙｓ Ｍｅｔ Ｌｙｓ Ａｓｎ
Ａｓｎ Ａｌａ Ｉｌｅ Ｖａｌ
３３５
３４０
３４５
Ｃｙｓ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｇｌｙ Ｈｉｓ Ｐｈｅ Ａ
ｓｐ Ａｓｎ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ａｓｐ Ｍｅｔ Ｌｅ
ｕ Ｇｌｙ Ｌｅｕ
３５０
３５５
３６０ Ｇｌｕ Ｔｈ
ｒ Ｔｙｒ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ａｒｇ
Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｎ
Ｔｈｒ
３６５
３７０ ３７５
Ａｓｐ Ａｒｇ Ｔｒｐ
Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｐｒｏ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｓ
ｅｒ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｉｌｅ Ｖａｌ Ｌｅｕ
３８０ ３８５
３９０
Ａｌａ Ｇｌｕ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｌｅ
ｕ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｃｙｓ Ａｌａ
Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｈｉｓ Ｐｒｏ
３９５
４００
４０５
Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｖａｌ Ｍｅｔ Ｓｅｒ Ｃｙｓ
Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｉ
ｌｅ Ａｌａ Ｇｌｎ
４１０
４１５
４２０ Ｌｅｕ Ｇ
ｌｕ Ｌｅｕ Ｔｒｐ Ａｓｎ Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｓｅ
ｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｔｙｒ Ｇｌｕ Ｌｙｓ
Ｌｙｓ
４２５
４３０ ４３
５ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ｖａｌ
Ｌｅｕ Ｐｒｏ Ｌｙｓ Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ａｓｐ
Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ａｌａ Ａｌａ Ｌｅｕ
４４０ ４４５
４５０
Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｌ
ｅｕ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｌｙ
ｓ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ａｓｐ
４５５
４６０
４６５
Ｇｌｎ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ
Ｖａｌ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｇｌｙ Ｐｒｏ
Ｔｙｒ Ｌｙｓ Ｐｒｏ
４７０
４７５
４８０ Ａｌａ
Ｈｉｓ Ｔｙｒ Ａｒｇ Ｔｙｒ
４８５ 配列番号：２ 配列の長さ：１８１２塩基 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジ−：直鎖状 配列の種類：ｃＤＮＡ ｔｏ ｍＲＮＡハイポセティカ
ル配列：Ｎｏ アンチセンス：Ｎｏ 起源 生物名：ニコチアナ・タバカム（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ
ｔａｂａｃｕｍ ）株名：ＢＹ−４ 分化の程度：ジャ−ムライン ハプロタイプ：ジプロイド 組織の種類：花軸（培養組織） 直接の起源 ライブラリ−名：タバコ花軸培養組織由来ｃＤＮＡライ
ブラリ− 配列
【００２６】
ＧＡＡＧＡＧＡＡＡＡ ＡＡＧＣＣＴＣＴＣＡ ＡＡＴ
ＣＴＣＡＴＣＴ ＣＴＡＡＣＣＡＣＣＣ ＡＡＴＴＴＣ
ＴＣＡＴ ＡＣＴＣＧＣＴＣＴＡ ６０ＣＣＣ
ＡＴＧ ＧＣＴ ＣＴＡ ＴＴＡ ＧＴＣ ＧＡＧ
ＡＡＧ ＡＣＣ ＡＣＣ ＴＣＴ ＧＧＣ ＣＧＣ Ｇ
ＡＧ ＴＡＣ ＡＡＧ １０８ＧＴＣ ＡＡ
Ｇ ＧＡＣ ＡＴＧ ＴＣＴ ＣＡＧ ＧＣＣ ＧＡＴ
ＴＴＣ ＧＧＣ ＣＧＧ ＣＴＴ ＧＡＡ ＡＴＣ
ＧＡＧ ＣＴＧ １５６ＧＣＣ ＧＡＡ Ｇ
ＴＴ ＧＡＡ ＡＴＧ ＣＣＴ ＧＧＴ ＣＴＣ ＡＴ
Ｇ ＧＣＴ ＴＧＴ ＣＧＴ ＡＣＴ ＧＡＡ ＴＴＴ
ＧＧＣ ２０４ＣＣＴ ＴＣＡ ＣＡＧ
ＣＣＡ ＴＴＴ ＡＡＡ ＧＧＴ ＧＣＴ ＡＡＧ Ａ
ＴＴ ＡＣＴ ＧＧＡ ＴＣＴ ＴＴＡ ＣＡＴ ＡＴ
Ｇ ２５２ＡＣＣ ＡＴＴ ＣＡＡ ＡＣＴ
ＧＣＡ ＧＴＴ ＴＴＧ ＡＴＴ ＧＡＡ ＡＣＣ
ＣＴＴ ＡＣＴ ＧＣＴ ＴＴＧ ＧＧＴ ＧＣＴ
３００ＧＡＡ ＧＴＴ ＡＧＡ ＴＧＧ ＴＧ
Ｔ ＴＣＴ ＴＧＣ ＡＡＣ ＡＴＣ ＴＴＣ ＴＣＣ
ＡＣＴ ＣＡＡ ＧＡＴ ＣＡＣ ＧＣＣ
３４８ＧＣＴ ＧＣＴ ＧＣＣ ＡＴＴ ＧＣＡ Ｃ
ＧＴ ＧＡＣ ＡＧＣ ＧＣＣ ＧＣＣ ＧＴＧ ＴＴ
Ｃ ＧＣＧ ＴＧＧ ＡＡＧ ＧＧＴ ３９
６ＧＡＧ ＡＣＴ ＣＴＧ ＣＡＧ ＧＡＧ ＴＡＴ
ＴＧＧ ＴＧＧ ＴＧＴ ＡＣＴ ＧＡＧ ＡＧＧ Ｇ
ＣＡ ＣＴＴ ＧＡＣ ＴＧＧ ４４４ＧＧ
Ｔ ＣＣＡ ＧＧＴ ＧＧＴ ＧＧＧ ＣＣＣ ＧＡＣ
ＴＴＧ ＡＴＣ ＧＴＣ ＧＡＣ ＧＡＴ ＧＧＴ
ＧＧＴ ＧＡＴ ＧＣＴ ４９２ＡＣＡ Ｃ
ＴＣ ＴＴＧ ＡＴＴ ＣＡＴ ＧＡＧ ＧＧＴ ＧＴ
Ｔ ＡＡＧ ＧＣＡ ＧＡＡ ＧＡＡ ＧＡＧ ＴＴＴ
ＧＣＴ ＡＡＧ ５４０ＡＡＴ ＧＧＧ
ＡＣＡ ＡＴＣ ＣＣＡ ＧＡＴ ＣＣＴ ＡＡＣ Ｔ
ＣＴ ＡＣＣ ＧＡＴ ＡＡＴ ＧＣＴ ＧＡＧ ＴＴ
Ｔ ＣＡＧ ５８８ＣＴＴ ＧＴＡ ＣＴＴ
ＡＣＴ ＡＴＴ ＡＴＴ ＡＡＧ ＧＡＡ ＡＧＴ
ＴＴＧ ＡＡＧ ＡＣＴ ＧＡＴ ＣＣＴ ＴＴＡ Ａ
ＡＡ ６３６ＴＡＴ ＡＣＣ ＡＡＧ ＡＴ
Ｇ ＡＡＧ ＧＡＡ ＡＧＡ ＣＴＣ ＧＴＣ ＧＧＴ
ＧＴＴ ＴＣＴ ＧＡＧ ＧＡＡ ＡＣＴ ＡＣＣ
６８４ＡＣＴ ＧＧＡ ＧＴＴ ＡＡＧ Ａ
ＧＧ ＣＴＴ ＴＡＴ ＣＡＧ ＡＴＧ ＣＡＧ ＧＣ
Ｔ ＡＡＴ ＧＧＡ ＡＣＴ ＴＴＧ ＣＴＴ
７３２ＴＴＣ ＣＣＴ ＧＣＴ ＡＴＴ ＡＡＴ
ＧＴＴ ＡＡＴ ＧＡＴ ＴＣＴ ＧＴＴ ＡＣＣ Ａ
ＡＧ ＡＧＣ ＡＡＧ ＴＴＣ ＧＡＣ ７
８０ＡＡＣ ＴＴＧ ＴＡＣ ＧＧＡ ＴＧＣ ＣＧＣ
ＣＡＣ ＴＣＡ ＣＴＧ ＣＣＣ ＧＡＴ ＧＧＴ
ＣＴＣ ＡＴＧ ＡＧＧ ＧＣＴ ８２８Ａ
ＣＴ ＧＡＴ ＧＴＴ ＡＴＧ ＡＴＴ ＧＣＣ ＧＧ
Ａ ＡＡＧ ＧＴＴ ＧＣＣ ＣＴＴ ＧＴＴ ＧＣＴ
ＧＧＴ ＴＡＴ ＧＧＡ ８７６ＧＡＴ
ＧＴＣ ＧＧＣ ＡＡＧ ＧＧＴ ＴＧＴ ＧＣＴ Ｇ
ＣＴ ＧＣＣ ＴＴＧ ＡＡＡ ＣＡＡ ＧＣＣ ＧＧ
Ｔ ＧＣＣ ＣＧＴ ９２４ＧＴＧ ＡＴＴ
ＧＴＧ ＡＣＣ ＧＡＧ ＡＴＴ ＧＡＣ ＣＣＴ
ＡＴＣ ＴＧＴ ＧＣＴ ＣＴＣ ＣＡＧ ＧＣＴ Ａ
ＣＣ ＡＴＧ ９７２ＧＡＡ ＧＧＣ ＣＴ
Ｃ ＣＡＧ ＧＴＣ ＣＴＴ ＡＣＴ ＣＴＡ ＧＡＧ
ＧＡＴ ＧＴＣ ＧＴＴ ＴＣＴ ＧＡＴ ＧＴＴ
ＧＡＴ １０２０ＡＴＣ ＴＴＴ ＧＴＣ Ａ
ＣＣ ＡＣＧ ＡＣＣ ＧＧＴ ＡＡＣ ＡＡＧ ＧＡ
Ｃ ＡＴＴ ＡＴＣ ＡＴＧ ＧＴＴ ＧＡＣ ＣＡＣ
１０６８ＡＴＧ ＡＧＧ ＡＡＧ ＡＴＧ
ＡＡＧ ＡＡＣ ＡＡＴ ＧＣＣ ＡＴＴ ＧＴＴ Ｔ
ＧＣ ＡＡＣ ＡＴＴ ＧＧＴ ＣＡＣ ＴＴＴ
１１１６ＧＡＣ ＡＡＣ ＧＡＡ ＡＴＣ ＧＡＣ
ＡＴＧ ＣＴＴ ＧＧＴ ＣＴＣ ＧＡＧ ＡＣＣ
ＴＡＣ ＣＣＴ ＧＧＴ ＧＴＣ ＡＡＧ １
１６４ＡＧＧ ＡＴＣ ＡＣＡ ＡＴＴ ＡＡＧ ＣＣ
Ｔ ＣＡＡ ＡＣＣ ＧＡＣ ＡＧＡ ＴＧＧ ＧＴＣ
ＴＴＣ ＣＣＴ ＧＡＣ ＡＣＣ １２１２
ＡＡＣ ＡＧＴ ＧＧＣ ＡＴＣ ＡＴＴ ＧＴＣ Ｔ
ＴＧ ＧＣＴ ＧＡＧ ＧＧＴ ＣＧＴ ＣＴＣ ＡＴ
Ｇ ＡＡＣ ＴＴＧ ＧＧＡ １２６０ＴＧＴ
ＧＣＣ ＡＣＡ ＧＧＡ ＣＡＣ ＣＣＴ ＡＧＴ
ＴＴＴ ＧＴＧ ＡＴＧ ＴＣＧ ＴＧＣ ＴＣＧ Ｔ
ＴＣ ＡＣＴ ＡＡＣ １３０８ＣＡＡ ＧＴ
Ｃ ＡＴＴ ＧＣＣ ＣＡＡ ＣＴＣ ＧＡＧ ＴＴＧ
ＴＧＧ ＡＡＴ ＧＡＡ ＡＡＧ ＡＧＣ ＡＧＴ
ＧＧＧ ＡＡＧ １３５６ＴＡＴ ＧＡＧ Ａ
ＡＧ ＡＡＡ ＧＴＧ ＴＡＴ ＧＴＣ ＴＴＧ ＣＣ
Ａ ＡＡＡ ＣＡＣ ＣＴＣ ＧＡＣ ＧＡＧ ＡＡＧ
ＧＴＴ １４０４ＧＣＴ ＧＣＡ ＣＴＴ
ＣＡＴ ＣＴＣ ＧＧＡ ＡＡＧ ＣＴＣ ＧＧＡ Ｇ
ＣＣ ＡＡＧ ＣＴＴ ＡＣＣ ＡＡＡ ＣＴＴ ＴＣ
Ｇ １４５２ＡＡＧ ＧＡＴ ＣＡＡ ＧＣＴ
ＧＡＣ ＴＡＣ ＡＴＴ ＡＧＣ ＧＴＴ ＣＣＡ
ＧＴＴ ＧＡＧ ＧＧＴ ＣＣＴ ＴＡＣ ＡＡＧ
１５００ＣＣＴ ＧＣＴ ＣＡＣ ＴＡＣ ＡＧ
Ｇ ＴＡＣ ＴＧＡＧＣＧＡＡＡＡ ＣＡＡＡＴＣＧＡ
ＣＡ ＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡ
１５４８ＧＣＡＴＴＧＴＣＧＣ ＧＧＣＡＴＧＡＴＴＧ
ＴＴＴＴＧＣＡＴＴＴ ＡＡＴＡＣＴＴＴＧＡ ＴＴ
ＴＴＧＴＴＴＡＧ ＧＡＴＡＣＴＡＧＴＡ １６０
８ＴＴＴＴＧＡＡＴＡＴ ＴＧＧＴＧＧＴＧＡＴ ＡＴ
ＡＴＴＴＧＧＧＡ ＧＧＡＡＧＴＧＧＣＡ ＴＧＴＴＴ
ＴＧＣＴＧ ＧＡＡＡＡＧＡＡＡＴ １６６８ＧＧ
ＧＴＣＴＴＡＴＴ ＴＧＡＡＡＧＴＡＡＧ ＡＣＣＡＡ
ＡＡＴＧＴ ＧＴＴＧＡＡＴＡＡＧ ＡＴＴＡＴＧＧＴ
ＴＧ ＧＴＧＧＴＧＴＧＡＴ １７２８ＡＴＧＡＴ
ＡＴＴＧＴ ＡＧＴＡＡＧＴＴＡＧ ＡＡＣＣＡＴＴＴ
ＧＣ ＴＴＴＴＴＧＧＴＧＴ ＡＴＧＧＴＴＴＴＴＧ
ＴＴＴＣＡＡＧＡＡＡ １７８８ＴＣＡＡＡＧＣＡ
ＡＣ ＡＣＴＴＴＴＡＣＣＴ ＴＴＴＣ
１８１２
ＣＴＣＡＴＣＴ ＣＴＡＡＣＣＡＣＣＣ ＡＡＴＴＴＣ
ＴＣＡＴ ＡＣＴＣＧＣＴＣＴＡ ６０ＣＣＣ
ＡＴＧ ＧＣＴ ＣＴＡ ＴＴＡ ＧＴＣ ＧＡＧ
ＡＡＧ ＡＣＣ ＡＣＣ ＴＣＴ ＧＧＣ ＣＧＣ Ｇ
ＡＧ ＴＡＣ ＡＡＧ １０８ＧＴＣ ＡＡ
Ｇ ＧＡＣ ＡＴＧ ＴＣＴ ＣＡＧ ＧＣＣ ＧＡＴ
ＴＴＣ ＧＧＣ ＣＧＧ ＣＴＴ ＧＡＡ ＡＴＣ
ＧＡＧ ＣＴＧ １５６ＧＣＣ ＧＡＡ Ｇ
ＴＴ ＧＡＡ ＡＴＧ ＣＣＴ ＧＧＴ ＣＴＣ ＡＴ
Ｇ ＧＣＴ ＴＧＴ ＣＧＴ ＡＣＴ ＧＡＡ ＴＴＴ
ＧＧＣ ２０４ＣＣＴ ＴＣＡ ＣＡＧ
ＣＣＡ ＴＴＴ ＡＡＡ ＧＧＴ ＧＣＴ ＡＡＧ Ａ
ＴＴ ＡＣＴ ＧＧＡ ＴＣＴ ＴＴＡ ＣＡＴ ＡＴ
Ｇ ２５２ＡＣＣ ＡＴＴ ＣＡＡ ＡＣＴ
ＧＣＡ ＧＴＴ ＴＴＧ ＡＴＴ ＧＡＡ ＡＣＣ
ＣＴＴ ＡＣＴ ＧＣＴ ＴＴＧ ＧＧＴ ＧＣＴ
３００ＧＡＡ ＧＴＴ ＡＧＡ ＴＧＧ ＴＧ
Ｔ ＴＣＴ ＴＧＣ ＡＡＣ ＡＴＣ ＴＴＣ ＴＣＣ
ＡＣＴ ＣＡＡ ＧＡＴ ＣＡＣ ＧＣＣ
３４８ＧＣＴ ＧＣＴ ＧＣＣ ＡＴＴ ＧＣＡ Ｃ
ＧＴ ＧＡＣ ＡＧＣ ＧＣＣ ＧＣＣ ＧＴＧ ＴＴ
Ｃ ＧＣＧ ＴＧＧ ＡＡＧ ＧＧＴ ３９
６ＧＡＧ ＡＣＴ ＣＴＧ ＣＡＧ ＧＡＧ ＴＡＴ
ＴＧＧ ＴＧＧ ＴＧＴ ＡＣＴ ＧＡＧ ＡＧＧ Ｇ
ＣＡ ＣＴＴ ＧＡＣ ＴＧＧ ４４４ＧＧ
Ｔ ＣＣＡ ＧＧＴ ＧＧＴ ＧＧＧ ＣＣＣ ＧＡＣ
ＴＴＧ ＡＴＣ ＧＴＣ ＧＡＣ ＧＡＴ ＧＧＴ
ＧＧＴ ＧＡＴ ＧＣＴ ４９２ＡＣＡ Ｃ
ＴＣ ＴＴＧ ＡＴＴ ＣＡＴ ＧＡＧ ＧＧＴ ＧＴ
Ｔ ＡＡＧ ＧＣＡ ＧＡＡ ＧＡＡ ＧＡＧ ＴＴＴ
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Ｔ ＣＡＧ ５８８ＣＴＴ ＧＴＡ ＣＴＴ
ＡＣＴ ＡＴＴ ＡＴＴ ＡＡＧ ＧＡＡ ＡＧＴ
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ＡＡ ６３６ＴＡＴ ＡＣＣ ＡＡＧ ＡＴ
Ｇ ＡＡＧ ＧＡＡ ＡＧＡ ＣＴＣ ＧＴＣ ＧＧＴ
ＧＴＴ ＴＣＴ ＧＡＧ ＧＡＡ ＡＣＴ ＡＣＣ
６８４ＡＣＴ ＧＧＡ ＧＴＴ ＡＡＧ Ａ
ＧＧ ＣＴＴ ＴＡＴ ＣＡＧ ＡＴＧ ＣＡＧ ＧＣ
Ｔ ＡＡＴ ＧＧＡ ＡＣＴ ＴＴＧ ＣＴＴ
７３２ＴＴＣ ＣＣＴ ＧＣＴ ＡＴＴ ＡＡＴ
ＧＴＴ ＡＡＴ ＧＡＴ ＴＣＴ ＧＴＴ ＡＣＣ Ａ
ＡＧ ＡＧＣ ＡＡＧ ＴＴＣ ＧＡＣ ７
８０ＡＡＣ ＴＴＧ ＴＡＣ ＧＧＡ ＴＧＣ ＣＧＣ
ＣＡＣ ＴＣＡ ＣＴＧ ＣＣＣ ＧＡＴ ＧＧＴ
ＣＴＣ ＡＴＧ ＡＧＧ ＧＣＴ ８２８Ａ
ＣＴ ＧＡＴ ＧＴＴ ＡＴＧ ＡＴＴ ＧＣＣ ＧＧ
Ａ ＡＡＧ ＧＴＴ ＧＣＣ ＣＴＴ ＧＴＴ ＧＣＴ
ＧＧＴ ＴＡＴ ＧＧＡ ８７６ＧＡＴ
ＧＴＣ ＧＧＣ ＡＡＧ ＧＧＴ ＴＧＴ ＧＣＴ Ｇ
ＣＴ ＧＣＣ ＴＴＧ ＡＡＡ ＣＡＡ ＧＣＣ ＧＧ
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ＧＴＧ ＡＣＣ ＧＡＧ ＡＴＴ ＧＡＣ ＣＣＴ
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ＣＣ ＡＴＧ ９７２ＧＡＡ ＧＧＣ ＣＴ
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