JPH04250843A

JPH04250843A - 巨大リポソームの製造方法及び巨大リポソーム形成用キット

Info

Publication number: JPH04250843A
Application number: JP3148195A
Authority: JP
Inventors: Yasuko Tomita; 康子富田; Junji Oyama; 淳史大山; Masanori Sakuranaga; 桜永　昌徳
Original assignee: Canon Inc
Current assignee: Canon Inc
Priority date: 1990-06-14
Filing date: 1991-05-24
Publication date: 1992-09-07
Anticipated expiration: 2016-11-12
Also published as: EP0461662B1; ATE142482T1; DE69121978T2; DE69121978D1; EP0461662A1; JP3228957B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はリポソームの製造法に関
するものであり、より詳細には巨大リポソームの簡便な
製法に関する。

【０００２】

【従来の技術】脂質の閉鎖小胞であるリポソームは、そ
の内腔中あるいは膜中に種々の物質を包含することがで
きるので薬物の生体内運搬体として数多くの研究が行わ
れている。また、リポソームは生体膜のモデルとしても
有用であり、リポソーム単独で、あるいは様々な膜蛋白
質を固定したプロテオリポソームとして広く膜の生物物
理化学的諸性質の研究に利用されている。更に、最近で
は、化粧品や食品にも応用されている。

【０００３】このようなリポソームの製法としては、種
々の方法が知られている。

【０００４】例えば、有機溶媒に脂質を溶かしナス形フ
ラスコなどのガラス容器中で有機溶媒を除去し容器内面
に脂質薄膜を形成した後、水溶液を加えてボルテックス
処理を行うボルテックス法　［Ｋ．　Ｉｎｏｕｅ；　Ｂ
ｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．　Ａｃｔａ．，　３３
９，　３９０　（１９７４）］　、脂質薄膜に水溶液を
加えて超音波処理を行う超音波処理法［Ｌ．　Ｓａｕｎ
ｄｅｒｓ，　Ｊ．Ｐｅｒｒｉｎ，　Ｄ．　Ｂ．　Ｇａｍ
ｍａｃｋ；　Ｊ．　Ｐｈａｒｍ．　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ
．，　１４，　５６７　（１９６２）］　、脂質を溶解
している有機溶媒中に水溶液を加えエマルジョンを作成
し、次いで有機溶媒を留去する逆相蒸発法［Ｆ．　Ｓｚ
ｏｋａ，　Ｆ．　Ｏｌｓｏｎ，　Ｔ．　Ｈｅａｔｈ，　
Ｗ．　Ｖａｉｌ，　Ｅ．　Ｍａｙｈｅｗ，　Ｄ．Ｐａｐ
ａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓ；　Ｂｉｏｃｈｉｍ．　Ｂｉ
ｏｐｈｙｓ．　Ａｃｔａ．，　６０１，　５５９　（１
９８０）］、脂質と界面活性剤の混合ミセルから透析に
より界面活性剤を除去する界面活性剤除去法［Ｌ．Ｔ．
　Ｍｉｍｍｓ，　Ｇ．　Ｚａｍｐｉｇｈｉ，　Ｙ．　Ｎ
ｏｚａｋｉ，　Ｃ．　Ｔａｎｆｏｒｄ，　Ｊ．　Ａ．　
Ｒｅｙｎｏｌｄｓ；　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，　２
０　，８３３　（１９８１）］、超音波処理法を行った
後に凍結融解を行う凍結融解法［Ｕ．　Ｐｉｃｋ；　Ａ
ｒｃｈ．　Ｂｉｏｃｈｅｍ．　Ｂｉｏｐｈｙｓ．，　２
１２，　１８６　（１９８１）　］及び超音波処理法の
後、ＣａＣｌ２　を添加しＥＤＴＡで処理するカルシウ
ム融合法［Ｄ．　Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓ，　
Ｗ．Ｊ．　Ｖａｉｌ，　Ｋ．　Ｊａｃｏｂｓｏｎ，　Ｇ
．　Ｐｏｓｔｅ；　Ｂｉｏｃｈｉｍ．　Ｂｉｏｐｈｙｓ
．　Ａｃｔａ．，　３９４　，４８３　（１９７５）］
等が知られており、これらの方法により多重層リポーム
、小さな一枚膜リポソーム及び大きな一枚膜リポソーム
などが作製できる。

【０００５】又、巨大リポソームの製法としては、脂質
薄膜を長時間かけて水和する静置水和法［Ａ．　Ｄａｒ
ｓｚｏｎ，　Ｃ．　Ａ．　Ｖａｎｄｅｎｂｅｒｇ，　Ｍ
．　Ｓｃｈｏｕｆｅｌｄ，　Ｍ．　Ｈ．　Ｅｌｌｉｓｍ
ａｕ，　Ｎ．　Ｃ．Ｓｐｉｔｚｅｒ，　Ｍ．　Ｍｏｎｔ
ａｌ；　Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ
．，　Ｕ．Ｓ．Ａ．，　７７，　２３９（１９８０）　
］、高塩濃度存在下で凍結融解を行った後、緩衝液に対
して透析する凍結融解透析法［Ｎ．　Ｏｋｕ，　Ｒ．　
Ｃ．　ＭａｃＤｏｎａｌｄ；　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ，　２２，　８５５　（１９８３）　］等が挙げられ
、これらの方法により一枚膜もしくは一枚〜数枚膜の巨
大リポソームを得ることができる。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】膜を介した物質移動の
研究、生体膜モデルの形成、機能膜の開発などにおいて
リポソームを人工的に形成する技術の有用性が高まって
いる。

【０００７】特に、数ミクロン超える直径の巨大リポソ
ームは、大きな保持容積が確保できる、高分子物質の保
持が可能である、光学顕微鏡での観察、マニピュレーシ
ョンが可能である等の利点を有し、極めて有用性が高い
。

【０００８】ところが、直径が数十ｎｍ程度の小さいリ
ポソームは、超音波処理法等を利用して簡単に、かつ短
時間で作製することができるが、上述の方法を用いた巨
大リポソームの作成には数日間を要し、これらの方法は
実用面で必ずしも満足できるものとはいえなかった。

【０００９】本発明の目的は、巨大リポソームを簡便か
つ短時間に調製できる方法を提供することにある。

【００１０】

【課題を解決するための手段】そこで本発明は、所定の
間隔で一対の基材を配置する工程と、該基材間にリポソ
ーム形成用材料と液媒体を含む液体を、該液体の層の膜
厚が該所定の間隔で形成されるよう挿入する工程と、該
液体を乾燥する工程と、該乾燥で得られた残渣に液媒体
を加える工程とを有することを特徴とするリポソームの
製造法を提供するものである。

【００１１】また、本発明は、所定の間隔で一対の基材
を配置する工程と、該基材間にリポソーム形成用材料と
液媒体を含む液体を、該液体の層の膜厚が該所定の間隔
で形成されるよう挿入する工程と、該液体を乾燥する工
程と、該乾燥で得られた残渣に液媒体を、該液媒体の層
の膜厚が該所定の間隔で形成されるよう加える工程とを
有することを特徴とするリポソームの製造法を提供する
ものである。

【００１２】また、本発明は、所定の間隔で一対の基材
を配置する工程と、該基材間にリポソーム形成用材料と
液媒体を含む液体を挿入する工程と、該液体を乾燥する
工程と、該乾燥で得られた残渣に液媒体を該液媒体の層
の膜厚が該所定の間隔で形成されるよう加える工程とを
有することを特徴とするリポソームの製造法を提供する
ものである。

【００１３】また、本発明は、所定の間隔で一対の基材
を配置したキット中に、リポソーム形成用材料を有する
乾燥物が該所定の間隔を埋めるよう配置されているキッ
トを用意する工程と、該キットに液媒体を加える工程と
を有することを特徴とするリポソームの製造法を提供す
るものである。

【００１４】また、本発明は、所定の間隔で一対の基材
を配置したキット中にリポソーム形成用材料を有する乾
燥物が該所定の間隔を埋めるよう配置されているキット
を用意する工程と、該キットに液媒体を、該液媒体の層
の膜厚が該所定の間隔で形成されるよう加える工程とを
有することを特徴とするリポソームの製造法を提供する
ものである。

【００１５】また、本発明は、所定の間隔で一対の基材
を配置したキットであって、該基材間には、リポソーム
形成用材料を有する乾燥物が該所定の間隔を埋めるよう
配置されていることを特徴とするキットを提供するもの
である。

【００１６】本発明で使用するリポソーム形成用材料と
しては、リポソームを形成し得るものであればどのよう
なものでも利用できるが、例えば以下のような公知の両
親媒性をもつ化合物が利用でき、具体的にはリン脂質、
糖脂質、４級アンモニウム塩等からなる脂質である。

【００１７】これらの膜形成能を持つ脂質分子は炭素が
８個以上の長鎖アルキル基と親水基とを有して構成され
、親水基が例えば

【００１８】

【化１】（ｎ≧４）などのカチオン、例えば

【００１９】

【化２】（ｎ≧４）などのアニオン、例えば

【００２０】

【化３】（ｎは≧４、Ｘ≧１）などの非イオン、例えば

【００２
１】

【化４】などの双性イオンのいずれでも良い。

【００２２】これらの脂質材料のうち、ホスファチジル
コリン（レシチン）やホスファチジルエタノールアミン
、ジホスファチジルグリセロールなどのグリセロリン脂
質：スフィンゴミエリンやセラミドシリアチン等のスフ
ィンゴリン脂質：セレブロシド、スルファチド、セラミ
ドオリゴヘキソシド等のスフィンゴ糖脂質：および親水
基として炭水化物を含むグリコシルジアシルグリセロー
ル等のグリセロ糖脂質は好ましい脂質材料であり、中で
もグリセロリン脂質、スフィンゴリン脂質等のリン脂質
は特に好ましいものである。

【００２３】前記リポソーム形成用材料のリポソーム形
成用液体中の含有量は、特に限定されるものではないが
、好ましくは液媒体１００重量部に対して０．０１〜５
０重量部、より好ましくは０．１　〜２０重量部とする
ことが望ましい。

【００２４】又、リポソーム形成用液体には、膜安定化
剤としてコレステロール、コレスタノール等のステロー
ル類、ステアリルアミン、ホスファチジン酸、ジセチル
ホスフェート等の荷電物質、トコフェロール等の酸化防
止剤を添加してもよい。

【００２５】これらの添加物の含有量は、例えばリポソ
ーム形成用材料１重量部に対し、ステロール類を０〜２
重量部、荷電物質を０〜０．５　重量部、酸化防止剤を
０〜０．２　重量部とするのが好ましい。

【００２６】リポソーム形成用液体の調製に用いる液媒
体もしくは乾燥物に加える液媒体としては、水；塩化カ
リウム、塩化ナトリウム等の無機塩類水溶液；ブドウ糖
、ショ糖、デキストリン等の糖類水溶液；などの水性液
媒体が挙げられるが、これらに限定されるものではない
。また、水性液媒体中に酵素などのタンパク質や薬剤等
、各種物質を含有させることもできる。

【００２７】前記無機塩類及び糖類の水性液媒体中にお
ける含有量は、水性液媒体１００重量部に対し０．０１
〜３０重量部、好ましくは０．１　〜１５重量部とする
ことが望ましい。

【００２８】本発明において、リポソーム形成用液体は
、所定の間隔で対向した基材間に挿入される。

【００２９】この基材としては、リポソーム形成用材料
によるラメラ構造の形成もしくはリポソームが寄り集ま
って集合され得るものであれば限定されないが、リポソ
ーム形成用液体から液媒体を蒸発除去する過程、すなわ
ち濃縮、乾燥時の濡れ性の点および入手容易性の点から
ガラス製のものが好ましい。

【００３０】基材間の所定の間隔は、例えばスペーサー
を設けることで容易に設定することができる。このスペ
ーサーとしては、例えばシリコンゴム等を利用すること
ができる。

【００３１】基材の大きさは、調整するリポソームの大
きさ、量によって種々異なる。また、基材の間隔として
は所望のリポソームの大きさによって異なるが内側の面
の間隔が０．０３〜５ｍｍ　、好ましくは０．０５〜３
ｍｍ　、より好ましくは０．０５〜１ｍｍ　の範囲に調
節するのが好ましい。

【００３２】図１および図２にリポソーム形成用の一対
の基材を所定の間隔で配置した配置図の一例を示した。この例では、上部基材としてカバーグラスを、下部基材
としてスライドグラスを、スペーサーとしてはシリコン
ゴムを利用し、上下基材面の間隔は約０．１ｍｍ　であ
る。

【００３３】なお、基材間（いわゆるキャビティー内）
に充填するリポソーム形成用液体中でのリポソーム形成
材料はどのような存在状態でも使用することができる。例えば超音波処理法などで作製した小さな一枚膜リポソ
ームとして用いてもよいし、又、脂質薄膜を単にボルテ
ックス処理しただけでもよい。さらにリポソーム形成用
液体にタンパク質などの物質を含有させたり、タンパク
質を含むプロテオリポソームを用いることも可能で、こ
の場合には内部にタンパク質を含んだ巨大なプロテオリ
ポソームを短時間に生成することができる。

【００３４】基材間に充填されたリポソーム形成材料を
含有するリポソーム形成用液体からの液媒体の蒸発除去
、すなわち、濃縮、乾燥は、室温にて行なうことができ
るが、短時間でリポソームを調製したい場合には、例え
ばオーブンなどによる加熱を利用しても良い。その際の
加熱温度は、リポソーム形成用の液体の組成に応じて適
宜選択すれば良い。また、液媒体が蒸発しさえすれば図
１に示す基材の配置図において、４ならびに５で示す側
面のいずれもがあいている必要はなく一方がふさがって
いてもよい。

【００３５】濃縮、乾燥後の水和は、液媒体（特に水）
を基材間に挿入し静置することによって実施することが
できるが、使用するリポソーム形成用材料の相転移温度
が室温以上の場合は、その脂質材料固有の相転移温度以
上に加温しながら水和を行なう。

【００３６】本発明の方法による短時間での巨大リポソ
ーム生成メカニズムは、以下のように推定される。すな
わち、リポソームは脂質材料等のリポソーム形成用材料
が水和しラメラ構造（二分子膜）を形成している状態の
時に作成されやすいため、一旦水和させてラメラ構造も
しくはリポソームを形成した後に、適当な条件で乾燥し
、再び水和すると、簡便な工程でリポソームが生成する
と考えられる。ここで、乾燥あるいは水和を所定間隔で
形成された液体の層から行うと、液媒体の蒸発あるいは
水和に伴い基材面に沿ってラメラ相もしくはリポソーム
が寄り集まって濃縮され、乾燥後再び水和等の工程時に
容易にこれらの融合、膨潤が生じ短時間に巨大リポソー
ムが生成するのではないかと推測される。

【００３７】つまり、本発明では、基材面に沿ってラメ
ラ相もしくはリポソームが寄り集まりやすくするため、
リポソーム形成用材料と液媒体を含む液体を該液体の層
の膜厚が所定の間隔で形成されるよう挿入する工程とし
たり、リポソーム形成用材料を有した乾燥物に液媒体を
該液媒体の層の膜厚が所定の間隔で形成されるよう加え
る工程とする。また、上記工程を得た乾燥物は、所定の
間隔を埋めるよう配置されている。

【００３８】以上のように、本発明によってリポソーム
を作製すると、短時間で簡便に巨大なリポソームを調製
することができ、生体膜研究のためのモデル物質として
、あるいは薬物のキャリア等として適用できる。

【００３９】

【実施例】次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明
する。実施例１２０ｍＭのアゾレクチン（大豆フォスファチジルコリン
、ｔｙｐｅ〓Ｓ；　Ｓｉｇｍａ社）−クロロホルム溶液
０．５ｍｌ　をナス型フラスコに入れ、ロータリーエバ
ポレータを用いて溶媒を留去した後、デシケータに入れ
真空ポンプを用いて溶媒を完全に除いて脂質薄膜を作っ
た。次いで０．１　Ｍの塩化カリウム水溶液０．５ｍｌ
　を加えボルテックスミキサーで２分間処理して脂質薄
膜を分散させた。

【００４０】前記脂質薄膜の分散液２０μｌ　を図１に
示すガラス基材間に注入、充填し、２０℃、３０％ＲＨ
の雰囲気下で４時間放置して濃縮、乾燥後、水２０μｌ
　を注入、充填し、更に３０分間静置して巨大リポソー
ムを作製した。

【００４１】得られた巨大リポソームを光学顕微鏡によ
り観察したところ、直径が数十ミクロンの巨大リポソー
ムが多数生成していた。

【００４２】次に、光学顕微鏡観察による巨大リポソー
ム粒子の粒度分布を図３に示す。巨大リポソームの平均
粒径は３６ミクロン、標準偏差は１３（サンプル数５０
）であった。実施例２実施例１と同様にして脂質薄膜を形成した後、０．０２
Ｍの塩化ナトリウム水溶液０．５ｍｌ　を加えボルテッ
クスミキサーで１分間処理し、次いで水浴型超音波発振
装置（ソニファイアーＢ−１５型、ホップホーン使用；
Ｂｒａｎｓｏｎ　社製）で３０分間処理してリポソーム
分散液を得た。

【００４３】前記リポソーム分散液２０μｌ　を実施例
１と同様に基材間に注入、充填し、濃縮、乾燥後水和し
、平均粒径３２ミクロンの巨大リポソームを作製した。実施例３実施例１と同様にして脂質薄膜を形成した後、０．１　
Ｍのグルコース水溶液０．５ｍｌ　を加え、ボルテック
スミキサーで２分間処理して脂質薄膜を分散させた。

【００４４】次いで、脂質薄膜の分散液０．５ｍｌ　を
図４および図５に示すガラス基材間に注入、充填し、５
０℃のオーブン中で２時間、濃縮、乾燥後、水０．５ｍ
ｌ　を注入、充填し、更に１時間静置して平均粒径４８
ミクロンの巨大リポソームを作製した。実施例４クロロホルム（１ｍｌ）に卵黄ホスファチジルコリン（
ｔｙｐｅ〓−Ｅ；Ｓｉｇｍａ　社）１３．５ｍｇ及びス
テアリルアミン１．５ｍｇ　を加えて調製した溶液をナ
ス型フラスコに入れ実施例１と同様にして脂質薄膜を形
成した後、０．０５Ｍのサッカロース水溶液１ｍｌを加
え、ボルテックスミキサーで３分間処理して脂質薄膜を
分散させた。

【００４５】そして、脂質薄膜の分散液０．７ｍｌ　を
実施例３と同様にして基材間で濃縮、乾燥後、水１ｍｌ
を添加し、１時間静置して平均粒径３６ミクロンの巨大
リポソームを作製した。実施例５Ｏｅｓｔｅｒｈｅｌｔらの方法によってＨａｌｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ　ｈａｌｏｂｉｕｍＲＪ株から抽出した紫
膜をＨｕａｎｇ　らの方法に従って界面活性剤Ｔｒｉｔ
ｏｎＸ−１００（和光純薬工業社製）で処理し、紫膜か
ら脂質を取り除き膜蛋白質であるバクテリオロドプシン
を得た。前記バクテリオロドプシン６０μｇ　を実施例
２と同様にして得られたリポソーム分散液０．５ｍｌ　
に加え、水浴型超音波発振装置（ソニファイアーＢ−１
５型、ホップホーン使用、Ｂｒａｕｓｏｎ　社製）で３
分間処理してプロテオリポソーム分散液を得た。

【００４６】得られたプロテオリポソーム分散液を実施
例１と同様に基材間で濃縮、乾燥後、水和し、平均粒径
３６ミクロンの巨大プロテオリポソームを作製した。

【００４７】

【発明の効果】本発明のリポソーム製法によれば、リポ
ソーム形成材料を含有する水性液媒体を基材間に注入、
充填し、乾燥後、水和することにより、直径が数十ミク
ロンを越える巨大リポソームを簡単に、そして従来に比
べて短時間に調整することが可能となった。

【００４８】また、得られた巨大なリポソームは内部に
大きな保持容積を持つので、薬剤や酸素などのタンパク
質を保持するキャリアとして利用できるとともに、光学
顕微鏡での観察の実施が可能であるので生化学の基礎的
研究や応用に有効である。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の方法におけるリポソームの製造のため
に基材を配置した状態を示す平面図である。

【図２】図１の配置の断面図である。

【図３】実施例１で作製した巨大リポソームの光学顕微
鏡観察による粒度分布を示すグラフである。

【図４】本発明の方法によるリポソームの製造のために
基材を配置した他の状態を示す平面図である。

【図５】図４の配置の断面図である。

【符号の説明】

１　　スライドガラス２　　カバーガラス３　　シリコンゴム４　　側面５　　側面

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　所定の間隔で一対の基材を配置する工
程と、該基材間にリポソーム形成用材料と液媒体を含む
液体を、該液体の層の膜厚が該所定の間隔で形成される
よう挿入する工程と、該液体を乾燥する工程と、該乾燥
で得られた残渣に液媒体を加える工程とを有することを
特徴とするリポソームの製造法。
【請求項２】　　前記リポソーム形成用材料がリン脂質
である請求項１に記載のリポソーム製造法。
【請求項３】　　前記液媒体が塩類を含有するものであ
る請求項１に記載のリポソーム製造法。
【請求項４】　　前記液媒体が糖類を含有するものであ
る請求項１に記載のリポソーム製造法。
【請求項５】　　前記基材がガラスである請求項１に記
載のリポソーム製造法。
【請求項６】　　前記液媒体が蛋白質を含有するもので
ある請求項１に記載のリポソーム製造法。
【請求項７】　　所定の間隔で一対の基材を配置する工
程と、該基材間にリポソーム形成用材料と液媒体を含む
液体を、該液体の層の膜厚が該所定の間隔で形成される
よう挿入する工程と、該液体を乾燥する工程と、該乾燥
で得られた残渣に液媒体を、該液媒体の層の膜厚が該所
定の間隔で形成されるよう加える工程とを有することを
特徴とするリポソームの製造法。
【請求項８】　　前記リポソーム形成用材料がリン脂質
である請求項７に記載のリポソーム製造法。
【請求項９】　　前記液媒体が塩類を含有するものであ
る請求項７に記載のリポソーム製造法。
【請求項１０】　　前記液媒体が糖類を含有するもので
ある請求項７に記載のリポソーム製造法。
【請求項１１】　　前記基材がガラスである請求項７に
記載のリポソーム製造法。
【請求項１２】　　前記液媒体が蛋白質を含有するもの
である請求項７に記載のリポソーム製造法。
【請求項１３】　　所定の間隔で一対の基材を配置する
工程と、該基材間にリポソーム形成用材料と液媒体を含
む液体を挿入する工程と、該液体を乾燥する工程と、該
乾燥で得られた残渣に液媒体を該液媒体の層の膜厚が該
所定の間隔で形成されるよう加える工程とを有すること
を特徴とするリポソームの製造法。
【請求項１４】　　前記リポソーム形成用材料がリン脂
質である請求項１３に記載のリポソーム製造法。
【請求項１５】　　前記液媒体が塩類を含有するもので
ある請求項１３に記載のリポソーム製造法。
【請求項１６】　　前記液媒体が糖類を含有するもので
ある請求項１３に記載のリポソーム製造法。
【請求項１７】　　前記基材がガラスである請求項１３
に記載のリポソーム製造法。
【請求項１８】　　前記液媒体が蛋白質を含有するもの
である請求項１３に記載のリポソーム製造法。
【請求項１９】　　所定の間隔で一対の基材を配置した
キット中に、リポソーム形成用材料を有する乾燥物が該
所定の間隔を埋めるよう配置されているキットを用意す
る工程と、該キットに液媒体を加える工程とを有するこ
とを特徴とするリポソームの製造法。
【請求項２０】　　所定の間隔で一対の基材を配置した
キット中にリポソーム形成用材料を有する乾燥物が該所
定の間隔を埋めるよう配置されているキットを用意する
工程と、該キットに液媒体を、該液媒体の層の膜厚が該
所定の間隔で形成されるよう加える工程とを有すること
を特徴とするリポソームの製造法。
【請求項２１】　　所定の間隔で一対の基材を配置した
キットであって、該基材間には、リポソーム形成用材料
を有する乾燥物が該所定の間隔を埋めるよう配置されて
いることを特徴とするキット。