JPH04134069U - 免疫測定器具 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 免疫測定器具１Ａは、吸水性を有する支持体
２と、検体を採取・保持し、支持体２へ供給する検体供
給部材６とを接合したものである。支持体２は、標識物
を担持した標識物担持部５と、検体中の特定物質（例え
ばｈＣＧ）と特異的に結合しうる物質を担持した検出部
４とを有する。検体供給部材６は、支持体２の設置面９
に対し、傾斜角度θをなして設置されている。 【効果】 測定時間が短く、また正確な測定結果が得ら
れる。

Description

【考案の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】

本考案は、免疫反応を利用して検体中の特定物質を検出する免疫測定法（イム ノアッセイ）に用いられる免疫測定器具、特に水平に設置して測定を行う免疫測 定器具に関する。

【０００２】

【従来の技術】

免疫測定法は、血液や尿のような検体中の特定物質（抗原、抗体等）の存在を 検出し、または定量するものであり、妊娠の判定や、各種疾病の診断等に広く利 用されている。

【０００３】 このような免疫測定法の一つに、アフィニティークロマトグラフィーがある。 このアフィニティークロマトグラフィーに関する技術は、例えば、特開昭６０− １３３３６８号公報、同６１−１４２４６３号公報、同６２−１６９０５４号公 報、同６２−１６９０５５号公報、同６３−２５５５１号公報、同６３−２５５ ５３号公報、同６４−３２１６９号公報等に記載されており、その概略は、次の 通りである。

【０００４】 例えば、サンドイッチ法により、女性の尿中の絨毛性性腺刺激ホルモン（ｈＣ Ｇ）を検出する場合、吸水性を有する帯状の支持体の所定部（検出部）にｈＣＧ の認識部位αと特異的に結合する抗ｈＣＧ抗体Ａを固定し、支持体の一端部に、 尿にｈＣＧの他の認識部位βと特異的に結合する標識化された抗ｈＣＧ抗体Ｂを 添加した尿サンプルを供給する。

【０００５】 尿中にｈＣＧが存在する場合には、このｈＣＧと標識付抗ｈＣＧ抗体Ｂとの複 合体が形成される。この複合体を含む尿サンプルは、毛細管現象により支持体上 を移動し、抗ｈＣＧ抗体Ａと接触して、抗ｈＣＧ抗体Ａ−ｈＣＧ−抗ｈＣＧ抗体 Ｂ−標識の複合体が形成される。標識が、例えば、有色の微粒子である場合には 、支持体が着色され、その色濃度を目視または光学的測定により調べることによ り、尿中のｈＣＧの存在が検出され、妊娠と判定される。

【０００６】 尿中にｈＣＧが存在しない場合には、複合体は形成されず、従って、標識によ る着色はなされない。

【０００７】 ところで、このようなアフィニティークロマトグラフィーにおいて、支持体へ の検体（尿サンプル）の供給は、支持体を鉛直にし、その下端を検体に浸漬する ことにより行われ、支持体上での検体の展開は、毛細管現象により検体を吸い上 げ、上方へ移動することによりなされていた。

【０００８】 しかしながら、支持体の構成材料の特性によっては、液体浸透性が低く、十分 な毛管流が得られず、よって、検体の支持体上での移動速度（展開速度）が遅く 、測定時間が長くかかるという欠点がある。

【０００９】 場合によっては、検体の供給量が不足し、これが原因で、標識化抗体の離脱や 移送が不完全であったり、検出部での呈色（着色）が不十分または不均一となっ たりし、正確な測定結果が得られないということもある。

【００１０】

【考案が解決しようとする課題】

本考案の目的は、測定時間が短く、また、正確な測定結果が得らる免疫測定器 具を提供することにある。

【００１１】

【課題を解決するための手段】

このような目的は、下記（１）〜（３）の本考案により達成される。

【００１２】 （１） 検体中の特定物質と特異的に結合しうる物質を担持した検出部を有する 吸水性の支持体と、検体を採取・保持し、前記支持体へ供給する検体供給部材と を接合してなる免疫測定器具であって、 前記検体供給部材は、前記支持体を水平に設置したとき、その先端が前記支持 体の設置面より上方に位置するように設置されていることを特徴とする免疫測定 器具。

【００１３】 （２） 前記検体供給部材は、前記支持体に対し傾斜して設置されている上記（ １）に記載の免疫測定器具。

【００１４】 （３） 前記支持体は帯状をなすものであり、前記検体供給部材の幅は、前記支 持体の幅より大きい上記（１）または（２）に記載の免疫測定器具。

【００１５】

【考案の構成】

以下、本考案の免疫測定器具を添付図面に示す好適実施例に基づいて詳細に説 明する。

【００１６】 図１は、本考案の免疫測定器具の構成例を示す斜視図、図２は、図１に示す免 疫測定器具の断面側面図である。これらの図に示すように、免疫測定器具１Ａは 、吸水性を有する帯状のクロマトグラフ媒体である支持体２を有する。この支持 体２の所定部位には、測定すべき検体中の特定物質（以下、目的物質という）を 検出する検出部４と、標識物を供給する標識物担持部５とが設けられている。こ れらを図１中斜線を施して示す。

【００１７】 検出部４には、目的物質と特異的に結合しうる第１物質が担持されている。例 えば、目的物質が抗原またはハプテンである場合には、第１物質は抗体である。 この抗体としては、免疫グロブリン（ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ ）が好ましい。この抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、または それらの混合物のいずれでもよい。

【００１８】 また、逆に、目的物質が抗体である場合には、第１物質は抗原またはハプテン である。

【００１９】 このような第１物質が固定化されている領域（以下、第１物質固定領域という ）の輪郭形状（検出部４の形状）は特に限定されず、図示のごとき帯状、線状の 他、矩形、三角形、楕円形、円形、あるいは特定のキャラクター形状等いかなる ものでもよい。

【００２０】 第１物質固定領域の面積は特に限定されないが、通常、０．００１〜１cm² 程 度、特に、０．０１〜０．２cm² 程度とするのが好ましい。

【００２１】 第１物質の検出部４への担持量は特に限定されないが、通常、０．０５〜２０ ０μg 程度、特に、０．５〜１０μg 程度とするのが好ましい。

【００２２】 このような第１物質の検出部４への担持方法は、例えば、第１物質を含む液体 を、検出部４に含浸・乾燥（風乾、凍結乾燥等）するか、または検出部４に直接 スプレー・乾燥すること等により行なう。

【００２３】 標識物担持部５には、以下のような標識物が担持されている。この標識物は、 免疫測定器具１Ａが、サンドイッチ法および競合法のいずれにより測定するもの かにより異る。

【００２４】 サンドイッチ法によるものである場合、標識物は、前記第１物質と結合する認 識部位とは異る認識部位にて目的物質と特異的に結合しうる第２物質に標識を付 与したものである。

【００２５】 例えば、目的物質が抗原またはハプテンである場合には、第２物質は抗体であ る。この抗体としては、免疫グロブリン（ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、Ｉ ｇＥ）が好ましい。この抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ま たはそれらの混合物のいずれでもよい。

【００２６】 また、逆に、目的物質が抗体である場合には、第２物質は抗原またはハプテン である。

【００２７】 一方、競合法によるものである場合、標識物は、目的物質と競合して前記第１ 物質に特異的に結合しうる第３物質に標識を付与したものである。

【００２８】 例えば、目的物質が抗原またはハプテンである場合には、第３物質は、目的物 質と同様のまたは類似する抗原またはハプテンである。また、目的物質が抗体で ある場合には、第３物質は、目的物質と同様のまたは類似する抗体である。

【００２９】 標識としては、支持体２の色と異る色の微粒子（本明細書では、有色の微粒子 という）、酵素、放射性物質、蛍光物質等が挙げられるが、測定を簡易に行なえ るという点で、有色の微粒子が好ましく、以下これで代表する。

【００３０】 この有色の微粒子としては、コロイド粒子が好適に用いられる。コロイド粒子 としては、金属粒子、非金属粒子のいずれでもよい。

【００３１】 コロイド状金属粒子としては、純粋な金属または金属化合物からなるものに限 らず、金属または金属化合物をポリマー核にコーティングしたものでもよい。こ のような金属としては、プラチナ、金、銀等が挙げられ、金属化合物としては、 硝酸銀、ヨウ化銀、臭化銀、水酸化銀、酸化鉄、水酸化鉄、水和酸化鉄、水酸化 アルムニウム、水和酸化アルムニウム、水酸化クロム、水和酸化クロム、硫酸銅 、硫酸水銀、硫酸バリウム、二酸化チタン、塩化ルテニウム、塩化ロジウム、塩 化パラジウム、塩化白金酸等が挙げられる。このなかでも特に好ましいものは、 コロイド状金である。

【００３２】 コロイド状非金属粒子としては、例えば、ポリスチレン（ポリスチレンラテッ クス）、セファロース、セルロース、セファデックス、色素重合体等のポリマー よりなるものや、セレン、テルル、硫黄等の粒子が挙げられる。

【００３３】 このような有色の微粒子の平均粒径は、０．１〜１００nm程度、特に、１０〜 ３０nm程度が好ましい。

【００３４】 このような有色の微粒子の支持体２上での色は、微粒子の種類および粒径に依 存して異る。例えば、コロイド状金の場合、橙色〜赤〜青にわたる色を生じる。

【００３５】 第２物質または第３物質と、標識との結合は、本考案の技術分野において一般 に知られた方法により行なえばよい。

【００３６】 このような標識物が担持される領域（以下、標識物担持領域という）の輪郭形 状（標識物担持部５の形状）は特に限定されず、図示のごとき帯状の他、線状、 矩形、三角形、楕円形、円形、あるいは特定のキャラクター形状等いかなるもの でもよい。また、標識物担持領域は、支持体２の長手方向および／または幅方向 に２以上に分割されていてもよい。

【００３７】 標識物担持領域の面積は特に限定されないが、サンドイッチ法、競合法共に、 通常、合計面積０．０５〜５cm² 程度、特に、０．１〜３cm² 程度とするのが好 ましい。

【００３８】 また、標識物の標識物担持部５への担持量は特に限定されないが、サンドイッ チ法、競合法共に、通常、１〜１００μl 程度、特に、５〜２０μl 程度とする のが好ましい。

【００３９】 このような標識物の標識物担持部５への担持方法は、例えば、標識物を含む液 体を、標識物担持部５に含浸・乾燥（風乾、凍結乾燥等）するか、または標識物 担持部５に直接スプレー・乾燥すること等により行なう。

【００４０】 なお、免疫測定器具１Ａにおいて、検出部４と標識物担持部５との平均離間距 離は、５〜７０mm程度、特に、１０〜５０mm程度とするのが好ましい。

【００４１】 支持体２の構成材料としては、繊維質、または例えば、発泡体、ハニカム構造 体等の多孔質材料や微細顆粒状薄層のような非繊維質のものが挙げられるが、繊 維質のもの、特に、繊維の織物、編物または不織布であるのが好ましい。

【００４２】 支持体２が織物の場合、その織り方は、例えば、平織、斜文織、朱子織等、い かなるものでもよい。

【００４３】 支持体２が編物の場合、その編み方は、例えば、よこ編（平編）、たて編（ト リコット編）、丸編、平打ち、メリヤス編等、いかなるものでもよい。

【００４４】 なお、支持体２が織物、編物の場合、その織り方、編み方は、規則性のあるも のが好ましく、支持体２が不織布の場合、繊維の配設密度（気孔率）が均一なも のが好ましい。これにより、検体の移動が均一になされ、検出部４における色ム ラが防止され、測定精度が向上する。

【００４５】 繊維質の支持体２における繊維としては、レーヨン、キュプラ、ポリエステル （ＰＥＴ、ＰＢＴ等）、ポリプロピレン、ナイロン、テトロン、アセテート、ビ ニロン、アクリル等の化学繊維、綿、絹、亜麻、大麻、ラミー、羊毛等の天然繊 維、またはこれらのうちの２種以上を組合せたものを用いることができるが、そ のなかでも、レーヨン、キュプラ、ポリエステル、ポリプロピレン、ナイロン、 テトロン、またはこれらのうちの２種以上を組合せたものが好ましい。これらの 繊維を用いた場合には、標識物担持部５からの標識物の離脱（放出）が円滑にな され、測定感度の向上および測定時間の短縮を図ることができる。

【００４６】 なお、２種以上の繊維を組合せたものとしては、２種以上の繊維の混紡、２種 の繊維をそれぞれ縦糸と横糸としたもの、２種以上の素材を組み合せた分割糸等 が挙げられ、その比率も特に限定されない。

【００４７】 また、繊維の径は特に限定されないが、０．１〜１００μm 程度、特に、２〜 ３０μm 程度とするのが好ましい。

【００４８】 なお、支持体２は、図示のような１層構成のものに限らず、同一または異る構 成のものを２層以上積層したものでもよい。

【００４９】 また、支持体２には親水化処理を施す（例えば、所定の透水率調整剤を付与す る）こともできる。この場合、透水率調整剤としては、例えば、ドデシル硫酸ナ トリウム、デオキシコール酸ナトリウム、トリトンＸ１００、ツィーン２０、ツ ィーン８０、スパン２０、スパン８０等の界面活性剤、ポリエリレングリコール 、ゼラチンや牛血清アルブミン等のタンパク質、ポリビニルアルコール、ポリビ ニルピロリドン等が挙げられる。

【００５０】 支持体２のＡＭＭＩ規格における透水率（以下、単に透水率という）は、差圧 ３００mmHgのとき、０．０１〜２０ l/min・cm²程度あるのが好ましい。このよう な透水率とすることにより、支持体２上での検体の展開速度を速くし、また、検 出部４において色ムラ等が生じるのを防止することができる。

【００５１】 支持体２の寸法は特に限定されないが、支持体２の長さは、１０〜１５０mm程 度、特に、３０〜１２０mm程度が好ましく、幅は、３〜２５mm程度、特に、５〜 １５mm程度が好ましく、厚さは、０．０１〜１mm程度、特に、０．０５〜０．５ mm程度が好ましい。

【００５２】 また、支持体２の色は、無彩色、特に、白色またはこれに近似した色が好まし いが、その他の色でもよい。

【００５３】 このような支持体２は、ケース７（図１中では点線で示す）内に収納され、保 護されている。

【００５４】 このケース７には、検出部４に対応する位置に開口または透明体よりなる窓８ が形成されている。この窓８にて検出部４の呈色状態を観察または測定する。

【００５５】 ケースの構成材料としては、検体等に対し、不活性なものが好ましく、例えば 、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ＰＥＴ、Ｐ ＢＴのようなポリエステル、ポリカーボネート、ポリメチルメタクリレート、Ａ ＢＳ樹脂等の各種樹脂、各種ガラス、アルミナ、シリカ等のセラミックス、ある いはステンレス、アルミニウム等の金属等が挙げられる。

【００５６】 このようなケースは、支持体２を保護する役割を有するとともに、免疫測定器 具１Ａを把持し、操作する際に、操作性や衛生の面で都合が良く、また、測定に 際し、免疫測定器具１Ａを載置するのにも適している。

【００５７】 なお、本考案では、このようなケース７に代わり、支持体２の裏面に板上の保 持部材を接着してもよく、また、支持体２自体が十分な剛性を有するものであれ ば、このような保持部材を設けなくてもよい。

【００５８】 支持体２の標識物担持部５側の端部３には、検体を採取・保持し、支持体２へ 供給する検体供給部材６の基端部が接合されている。

【００５９】 この検体供給部材６は、支持体２を水平に設置したとき、その先端６０が支持 体２の水平な設置面９より上方に位置するように設置されている。

【００６０】 すなわち、図２に示すように、検体供給部材６は、支持体２に対し、所定角度 傾斜して設置されている。

【００６１】 このような構成とすることにより、検体供給部材６に保持されている検体は、 毛細管現象に加え、重力の作用により下方へ流下するため、この流速が速くなり 、支持体２の端部３への検体の供給が促進され、測定時間の短縮が図れる。

【００６２】 検体供給部材６の傾斜角度（検体供給部材６と支持体２の設置面９とのなす角 度）θは、１〜７０°程度、特に１０〜６０°程度とするのが好ましい。傾斜角 度θが１°未満では、検体供給部材６内での検体の流下速度が十分に増加せず、 また、傾斜角度θが７０°を越えると、検体の流下速度が速過ぎ、支持体２での 展開速度を上回るため、検体供給部材６と支持体２との接合部に過剰な検体が滞 留してしまうからである。

【００６３】 検体供給部材６の構成材料としては、吸水性を有するものであればいかなるも のでもよく、前記支持体２の構成材料と同様のものが挙げられるが、特に、繊維 質または非繊維質の多孔質材料が好ましい。

【００６４】 この多孔質材料としては、例えば、濾紙等の紙類、前述したような織物、編み 物、不織布、ＰＶＡ架橋物の発泡体、発泡ポリウレタン、発泡ポリエチレン、発 泡ポリプロピレンのような発泡ポリオレフィン等の発泡体、素焼等の多孔質セラ ミックス、前記繊維よりなるメッシュの積層体、ガラス繊維や炭素、金属等の繊 維の積層体が挙げられる。

【００６５】 このような多孔質材料のうち、それ自体親水性に乏しいものは、前記と同様の 親水化処理を施すことにより使用可能となる。

【００６６】 検体供給部材６の透水率は、特に限定されないが、前記支持体２の透水率と同 等かまたはそれより大きい値とするのが好ましい。

【００６７】 検体供給部材６の寸法は特に限定されないが、検体供給部材の長さは２０〜１ ００mm程度、特に３０〜７０mm程度が好ましく、厚さは、０．５〜２０mm程度、 特に３〜１０mm程度が好ましい。また、検体供給部材６の幅は、図１および図２ に示す構成例では、前記支持体２の幅と同程度とされる。

【００６８】 なお、支持体２の端部３と検体供給部材６との接合は、両者が単に接触または 押圧接触している場合の他、接着または融着等により両者間に結合力を持たせた 状態としてもよい。

【００６９】 次に、免疫測定器具１Ａを用いた免疫測定方法を、サンドイッチ法および競合 法により、それぞれ、尿中の絨毛性性腺刺激ホルモン（ｈＣＧ）を検出する場合 について説明する。

【００７０】 １）サンドイッチ法 支持体２の検出部４には、第１物質として、ｈＣＧの認識部位αと特異的に結 合する抗ｈＣＧ抗体Ｘが固定化されており、標識物担持部５には、ｈＣＧの他の 認識部位βと特異的に結合する標識付抗体Ｙが担持されている。

【００７１】 ケース７を把持し、検体、すなわち、測定対象である尿またはこれを含む尿サ ンプル（以下、尿サンプルという）を検体供給部材６に直接かけるか、または尿 サンプル中に検体供給部材６を浸漬すると、尿サンプルは検体供給部材６内に浸 透して保持される。

【００７２】 次に、支持体２が水平となるように免疫測定器具１Ａを置くと、検体供給部材 ６が水平な設置面９に対し角度θで傾斜するので、毛細管現象および重力の作用 により、尿サンプルは下方へ流下する。

【００７３】 この流下した尿サンプルは、支持体２の端部３に供給され、支持体２の毛細管 現象により支持体上を水平方向に移動（展開）し、まず標識物担持部５に到達す る。尿中にｈＣＧが存在する場合には、標識物担持部５において、尿サンプル中 のｈＣＧと標識付抗体Ｙとの複合体が形成される。

【００７４】 さらに、尿サンプルは、支持体２上を検出部４の方へ移動するが、このとき、 形成されたｈＣＧ−標識付抗体Ｙの複合体は、標識物担持部５から離脱し、尿サ ンプルの移動に伴って移動する。

【００７５】 尿サンプルが検出部４に到達すると、この複合体は、検出部４に固定化された 抗ｈＣＧ抗体Ｘと接触して反応し、抗ｈＣＧ抗体Ｘ−ｈＣＧ−標識付抗体Ｙの複 合体が形成され、固定される。

【００７６】 標識が、例えば、有色の微粒子である場合には、検出部４が着色され、その色 濃度を窓８から目視観察または光学的測定により調べることにより、尿中のｈＣ Ｇの存在が検出または定量化される。

【００７７】 尿中にｈＣＧが存在しない場合には、複合体は形成されず、従って、検出部４ の標識による着色はなされない。

【００７８】 ２）競合法 支持体２の検出部４には、第１物質として、ｈＣＧと特異的に結合する抗ｈＣ Ｇ抗体Ｘが固定化されており、標識物担持部５には、ｈＣＧと競合して前記抗ｈ ＣＧ抗体Ｘと特異的に結合する標識付ｈＣＧ様物質Ｚが担持されている。

【００７９】 前記サンドイッチ法と同様にして尿サンプルを検体供給部材６に供給すると、 同様に尿サンプルは端部３に供給され、さらに支持体２の毛細管現象により支持 体２上を水平方向に移動（展開）し、まず標識物担持部５に到達し、さらに、支 持体２の検出部４の方へ移動する。尿サンプルが標識物担持部５を通過する際、 標識付ｈＣＧ様物質Ｚは、標識物担持部５から離脱し、尿サンプルの移動に伴っ て移動する。

【００８０】 尿中にｈＣＧが存在する場合、尿サンプルが検出部４に到達すると、検出部４ においては、ｈＣＧと標識付ｈＣＧ様物質Ｚとが競合して抗ｈＣＧ抗体Ｘと結合 し、抗ｈＣＧ抗体Ｘ−ｈＣＧおよび抗ｈＣＧ抗体Ｘ−標識付ｈＣＧ様物質Ｚが所 定の比率で形成され、固定される。

【００８１】 標識が、例えば、有色の微粒子である場合には、検出部４が着色されるが、そ の色濃度は、尿中のｈＣＧ量が少ないほど濃くなる。よって、その色濃度を窓８ から目視観察または光学的測定により調べることにより、尿中のｈＣＧの存在が 検出または定量化される。

【００８２】 尿中にｈＣＧが存在しない場合には、検出部４に抗ｈＣＧ抗体Ｘ−標識付ｈＣ Ｇ様物質Ｚによる複合体のみが形成され、従って、検出部４は、最も濃い色濃度 に着色される。

【００８３】 このような測定においては、検体供給部材６が傾斜しているため、重力の作用 により尿サンプルの流下速度が速くなり、支持体２の端部３への検体の供給が迅 速になされ、また、その供給量も十分に確保される。

【００８４】 さらに、支持体２は水平に設置されているので、尿サンプルの移動（展開）に 際し、従来のように支持体２を鉛直に設置する場合のように、重力によるマイナ スの影響を受けず、尿サンプルの支持体２上での移動速度が速くなる。特に、支 持体２の透水率を前記のような値とすることにより、十分な毛管流が得られ、尿 サンプルの支持体２上での移動速度が速くなるとともに、標識物の標識物担持部 ５からの離脱やその後の移動が十分になされ、検出部４において均一な呈色が得 られる。

【００８５】 以上のことから、測定時間の大幅な短縮および測定精度の向上が可能となる。 図３は、本考案の免疫測定器具の他の構成例を示す斜視図である。同図に示す免 疫測定器具１Ｂは、検体供給部材６の形状が前記免疫測定器具１Ａと異なってお り、それ以外は同様である。

【００８６】 即ち、免疫測定器具１Ｂにおける検体供給部材６の幅は、支持体２の幅より大 きくなっている。これにより、尿のような検体を検体供給部に直接かける場合に 、その操作が容易かつ確実となる。

【００８７】 しかも、検体供給部材６が保持する検体の蓄積量が増すので、検体が高速で流 下する状態をより長時間維持することができ、よって、測定時間の更なる短縮が 図れるとともに、支持体２への検体の供給量が十分に確保されるため、均一な反 応が得られ、呈色ムラ等もなくなるため、測定精度が向上する。

【００８８】 この場合、検体供給部材６の幅は、支持体２の幅の１０５〜３００％程度、特 に１５０〜２００％程度とするのが好ましく、具体的には、４〜４５mm程度、特 に６〜３０mm程度とするのが好ましい。

【００８９】 なお、同様の目的で、検体供給部材６の厚さを厚くしてもよい。この場合、検 体供給部材６の厚さは、前述した厚さの１０５〜３００％程度、特に１５０〜２ ００％程度とするのが好ましく、具体的には、０．７５〜４０mm程度、特に４〜 １２mm程度とするのが好ましい。

【００９０】 さらに、検体供給部材６の幅および厚さの双方を増大させてもよい。

【００９１】 図４は、本考案の免疫測定器具のさらに他の構成例を示す断面側面図である。 同図に示す免疫測定器具１Ｃは、検体供給部材６の形状が前記免疫測定器具１Ａ と異なっている。

【００９２】 即ち、免疫測定器具１Ｃにおける検体供給部材６は、支持体２を水平に設置し たとき、その先端６０が支持体２の設置面９より上方に位置するように湾曲して いるものである。

【００９３】 このような形状の検体供給部材６においても、前記免疫測定器具１Ａと同様に 、検体の流下速度を速くし、支持体２の端部３への検体の供給を促進することが できる。

【００９４】 なお、検体供給部材６の湾曲形状は特に限定されず、例えば、円弧状、楕円状 、放物線状、双曲線状、またはこれらの２以上の組み合せ、あるいはその他任意 の曲線が可能であり、さらには、直線部分と上記のような湾曲部とを組み合わせ たものでもよい。

【００９５】 このような全部または一部が湾曲した検体供給部材６においても、前記と同様 、傾斜角度θの平均は１〜７０°程度、特に１０〜６０°程度とするのが好まし い。

【００９６】 以上、本考案の免疫測定器具を図示の構成例について説明したが、本考案はこ れらに限定されるものではない。

【００９７】 本考案の考案測定器具は、免疫測定の分野において広範に用いられ、上記尿中 のｈＣＧの検出（妊娠の判定）の他、例えば、尿中のアルブミン、グロブリン、 ＬＨ等の各種尿中成分、または、血液や血漿中のホルモン、薬物等の血中に存在 する各種成分の検出等にも適用することができる。

【００９８】

【実施例】

以下、本考案の免疫測定器具の具体的実施例について説明する。

【００９９】 （実施例１） 図１および図２に示す構成の免疫測定器具を製造した。各条件は、次のとおり である。

【０１００】支持体 ナイロン／テトロン混紡の編み物（厚さ０．３mm）を幅１２mm×長さ１２０mm に裁断し、これを支持体とした。

【０１０１】 この支持体の透水率を測定したところ、ＡＭＭＩ規格における透水率が、差圧 ３００mmHgのとき、４．２ l/min・cm²であった。

【０１０２】ケース 前記支持体をポリエチレン製のケースに収納した。このケースには、直径８mm の窓が形成されている。

【０１０３】検体供給部材 幅１２mm×長さ６０mm×厚さ４mmの発泡ポリオレフィンよりなる検体供給部材 を前記支持体の端部３に接合（押圧接触）した。この、検体供給部材の支持体と 接合した側の端部を斜めにカットし、傾斜角度θが３０°となるように設置した 。

【０１０４】第１物質の固定化 支持体の端部３から２０mmの位置に検出部を設定し、この検出部に、第１物質 として、ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン（ｈＣＧ）と特異的に結合する抗ｈＣＧ抗 体（ウサギ由来ＩｇＧ）を、次の方法により固定化した。

【０１０５】 抗ｈＣＧ抗体の濃度を１０mg/ml に調整した液を、極細のニードルにより一定 速度で送出し、支持体２上を幅方向に一定速度で移送することにより検出部に抗 ｈＣＧ抗体を固定化した。

【０１０６】 抗ｈＣＧ抗体を固定化した領域の形状は、細線形であり、その面積は、０．０ ５cm² とした。また、抗ｈＣＧ抗体の担持量は、１μg であった。

【０１０７】標識物の固定化 支持体の端部３から１０mmの位置に標識物担持部を設定し、この標識物担持部 に標識物を担持した。

【０１０８】 標識物は、文献 G.Frens, Nature Physical Science vol.241,1990(1) P20-22 に記載された方法により調整した平均粒径２０nmのコロイド状金（標識）に、前 記ｈＣＧと結合する認識部位とは異る認識部位にて前記ｈＣＧと特異的に結合す る抗ｈＣＧ抗体（マウス由来ＩｇＧ）を物理的に吸着させたものである。その作 製方法は、次の通りである。

【０１０９】 まず、pH８．０のリン酸緩衝液（３mM）中に上記免疫グロブリンを溶解し、こ れに上記コロイド状金の懸濁液を加え、４℃で２４時間攪拌し、免疫グロブリン をコロイド状金に物理的に吸着させた。次いで、この標識物を遠心分離により回 収し、pH７．０のリン酸緩衝液（２０mM）に再懸濁し、１％牛血清アルブミンを 加えて標識物懸濁液を調整した。

【０１１０】 このようにして調整した標識物懸濁液５μl （吸光度５３０nmで６０（セル長 １cm）を示すような量）を標識物担持部に滴下して含浸させ、これを室温で３０ 分間乾燥して標識物を担持させた。

【０１１１】 標識物を担持した領域の形状は、四角形とし、その面積は、０．５cm² とした 。

【０１１２】 次に、下記のような検体の調整を行ない、この検体に対し、上記免疫測定器具 を用いて、サンドイッチ法により免疫測定を行なった。

【０１１３】検体の調整 ヒト尿に対し、ｈＣＧが２００mU/ml となるように調整した尿サンプルを作製 した。

【０１１４】測定方法 前記尿サンプル２mlを検体供給部材に含浸させた後、支持体を水平となるよう に免疫測定器具を載置し、この状態で、尿サンプルが支持体の端部に移行した瞬 間からの経過時間と、支持体上での尿サンプルの検出部方向への移動距離とを測 定した。その結果を図５のグラフに示す。

【０１１５】 （実施例２） 検体供給部の傾斜角度θを６０°とした以外は実施例１と同様の免疫測定器具 を製造し、同様の測定方法で測定を行った。その結果を図５のグラフに示す。

【０１１６】 （実施例３） 検体供給部材の形状を図３に示す形状とし、その寸法を幅４０mm×長さ６０mm ×厚さ６mmとし、さらに傾斜角度θを６０°とした以外は実施例１と同様の免疫 測定器具を製造し、同様の測定方法で測定を行った。その結果を図５のグラフに 示す。

【０１１７】 （比較例） 支持体と検体供給部材とが同一平面上に位置する（θ＝０）ように接合した以 外は実施例１と同様の免疫測定器具を製造した。この免疫測定器具を検体供給部 材が下になるように鉛直に保持し、検体供給部材を尿サンプルに浸漬し、尿サン プルが支持体の端部に移行した瞬間からの経過時間と、支持体上での尿サンプル の検出部方向（上方向）への移動距離とを測定した。その結果を図５のグラフに 示す。

【０１１８】 図５のグラフに示すように、本考案の実施例１〜３は、いずれも、比較例に比 べ尿サンプルの支持体上での移動速度（展開速度）が速く、従って、測定時間が 短縮されることがわかる。

【０１１９】 また、実施例１〜３における各免疫測定器具の検出部を観察したところ、均一 に呈色しており、呈色ムラはなかった。

【０１２０】

【考案の効果】

以上述べたように、本考案の免疫測定器具によれば、支持体に十分な量の検体 を迅速に供給することができるので、測定時間の短縮および測定精度の向上を図 ることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本考案の免疫測定器具の構成例を示す斜視図で
ある。

【図２】図１に示す免疫測定器具の断面側面図である。

【図３】本考案の免疫測定器具の他の構成例を示す斜視
図である。

【図４】本考案の免疫測定器具の他の構成例を示す断面
側面図である。

【図５】実施例における尿サンプルの支持体上での移動
距離の経時変化を示すグラフである。

【符号の説明】

１Ａ、１Ｂ、１Ｃ 免疫測定器具 ２ 支持体 ３ 端部 ４ 検出部 ５ 標識物担持部 ６ 検体供給部材 ６０ 先端 ７ ケース ８ 窓 ９ 設置面

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)考案者 山本 茂博 神奈川県足柄上郡中井町井ノ口1500番地 テルモ株式会社内 (72)考案者 宮本 郁夫 神奈川県足柄上郡中井町井ノ口1500番地 テルモ株式会社内

Claims (3)

【実用新案登録請求の範囲】
1. 【請求項１】 検体中の特定物質と特異的に結合しうる
   物質を担持した検出部を有する吸水性の支持体と、検体
   を採取・保持し、前記支持体へ供給する検体供給部材と
   を接合してなる免疫測定器具であって、前記検体供給部
   材は、前記支持体を水平に設置したとき、その先端が前
   記支持体の設置面より上方に位置するように設置されて
   いることを特徴とする免疫測定器具。
2. 【請求項２】 前記検体供給部材は、前記支持体に対し
   傾斜して設置されている請求項１に記載の免疫測定器
   具。
3. 【請求項３】 前記支持体は帯状をなすものであり、前
   記検体供給部材の幅は、前記支持体の幅より大きい請求
   項１または２に記載の免疫測定器具。