JPH0372606B2 - - Google Patents
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- JPH0372606B2 JPH0372606B2 JP56072415A JP7241581A JPH0372606B2 JP H0372606 B2 JPH0372606 B2 JP H0372606B2 JP 56072415 A JP56072415 A JP 56072415A JP 7241581 A JP7241581 A JP 7241581A JP H0372606 B2 JPH0372606 B2 JP H0372606B2
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Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J19/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J19/18—Stationary reactors having moving elements inside
- B01J19/1868—Stationary reactors having moving elements inside resulting in a loop-type movement
- B01J19/1881—Stationary reactors having moving elements inside resulting in a loop-type movement externally, i.e. the mixture leaving the vessel and subsequently re-entering it
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00049—Controlling or regulating processes
- B01J2219/00051—Controlling the temperature
- B01J2219/00074—Controlling the temperature by indirect heating or cooling employing heat exchange fluids
- B01J2219/00087—Controlling the temperature by indirect heating or cooling employing heat exchange fluids with heat exchange elements outside the reactor
- B01J2219/00094—Jackets
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- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は沈殿による血漿フラクシヨンの製法に
関する。
関する。
アルブミンおよびグロブリンはヒトおよび獣医
学における多くの用途において使用されている。
これら蛋白質はヒトあるいは動物の血漿からの分
別沈殿により得られる。従来かかる沈殿ははじめ
に血漿を反応器に入れそして沈殿剤を徐々に入れ
ることにより個々のフラクシヨンを取得するバツ
チ方式で行われている。この不連続的方法の欠点
は、長い滞留時間のゆえに非常に時間がかかりそ
してそれにもかかわらず分離困難な沈殿が生ずる
ことにある。
学における多くの用途において使用されている。
これら蛋白質はヒトあるいは動物の血漿からの分
別沈殿により得られる。従来かかる沈殿ははじめ
に血漿を反応器に入れそして沈殿剤を徐々に入れ
ることにより個々のフラクシヨンを取得するバツ
チ方式で行われている。この不連続的方法の欠点
は、長い滞留時間のゆえに非常に時間がかかりそ
してそれにもかかわらず分離困難な沈殿が生ずる
ことにある。
それゆえ、妥当な時間内で良好に分離されうる
沈殿を生ずる分別法を見出すという課題が存在し
ていた。
沈殿を生ずる分別法を見出すという課題が存在し
ていた。
本発明によれば、分別されるべく血漿、沈殿剤
および緩衝液が循環される場合にこの課題が解決
されうることが見出された。
および緩衝液が循環される場合にこの課題が解決
されうることが見出された。
従つて本発明の目的は、一定の温度でそして緩
衝液の存在下に血漿を沈殿剤と混合し、そして析
出した血漿蛋白質を分離することによる血漿フラ
クシヨンの製法において、血漿、沈殿剤、緩衝液
および析出した蛋白質からなる混合物を、循環ポ
ンプと結合している閉鎖系の管循環路からなる環
状反応器中に導入することを特徴とする方法にあ
る。
衝液の存在下に血漿を沈殿剤と混合し、そして析
出した血漿蛋白質を分離することによる血漿フラ
クシヨンの製法において、血漿、沈殿剤、緩衝液
および析出した蛋白質からなる混合物を、循環ポ
ンプと結合している閉鎖系の管循環路からなる環
状反応器中に導入することを特徴とする方法にあ
る。
本発明方法の特に好ましい態様は、その排出口
が循環ポンプの入口と結合し且つその流入口がこ
の循環ポンプの出口と結合している、攪拌容器か
らなる環状反応器中に血漿、沈殿剤、緩衝液およ
び析出した蛋白質からなる混合物を循環させ、血
漿、沈殿剤および緩衝液をその系の高速で乱流し
ている帯域中に別々に導入し、そして攪拌容器排
出口とポンプ入口との間に設けられている分岐導
管により血漿、沈殿剤および緩衝液の供給量に相
当する量の反応混合物を継続してその系から取り
出すことである。
が循環ポンプの入口と結合し且つその流入口がこ
の循環ポンプの出口と結合している、攪拌容器か
らなる環状反応器中に血漿、沈殿剤、緩衝液およ
び析出した蛋白質からなる混合物を循環させ、血
漿、沈殿剤および緩衝液をその系の高速で乱流し
ている帯域中に別々に導入し、そして攪拌容器排
出口とポンプ入口との間に設けられている分岐導
管により血漿、沈殿剤および緩衝液の供給量に相
当する量の反応混合物を継続してその系から取り
出すことである。
本発明による方法の一種の「環状反応器」中で
行われる。この環状反応器は攪拌容器および、循
環ポンプから連結されている閉鎖系の循環系を構
成する導管から構成されている。
行われる。この環状反応器は攪拌容器および、循
環ポンプから連結されている閉鎖系の循環系を構
成する導管から構成されている。
本方法において特に望ましいもう一つの態様
は、環状反応器から取り出された反応混合物を、
析出した蛋白質を分離する前にある滞留域を通過
させることである。
は、環状反応器から取り出された反応混合物を、
析出した蛋白質を分離する前にある滞留域を通過
させることである。
攪拌容器は慣用の様式でありそして沈殿媒質の
PH値および温度の測定および規制のためそして内
容物の加熱または冷却および回転のための構造を
備えている。加熱または冷却は二重マントル、外
部もしくは内部蛇管等により行われうる。容器内
容物はモーターにより駆動される攪拌器を用いる
か、不活性気体の導入によるかあるいは流入する
沈殿媒質の衝撃により回転される。循環路に導入
されるべき媒質についての流入口および排出口は
任意に配備できうるが、しかしながらなかんずく
容器の底部に排出口が設置されそして流入管が上
部からきて液面の下に届くのが好ましい。容器出
口は循環ポンプの入口と結合しており、そしてこ
のポンプの出口は容器の流入口と結合している。
容器排出口とポンプ入口との間には、バルブで止
めることができそして分離処置(例えば濾過器あ
るいは遠心分離器)へつながつている分岐導管が
設けられている。特に高速乱流する領域例えばポ
ンプ入口にはさらに分別されるべき媒質、沈殿剤
および緩衝液のための計量ポンプからの供給管が
通じている。循環ポンプとしては運搬性能の大き
いポンプ、なかんずくパツキングボツクスのない
渦巻きポンプが使用され、計量ポンプとしてはホ
ースポンプ、歯車ポンプ、ピストンポンプあるい
は薄膜ポンプが適している。
PH値および温度の測定および規制のためそして内
容物の加熱または冷却および回転のための構造を
備えている。加熱または冷却は二重マントル、外
部もしくは内部蛇管等により行われうる。容器内
容物はモーターにより駆動される攪拌器を用いる
か、不活性気体の導入によるかあるいは流入する
沈殿媒質の衝撃により回転される。循環路に導入
されるべき媒質についての流入口および排出口は
任意に配備できうるが、しかしながらなかんずく
容器の底部に排出口が設置されそして流入管が上
部からきて液面の下に届くのが好ましい。容器出
口は循環ポンプの入口と結合しており、そしてこ
のポンプの出口は容器の流入口と結合している。
容器排出口とポンプ入口との間には、バルブで止
めることができそして分離処置(例えば濾過器あ
るいは遠心分離器)へつながつている分岐導管が
設けられている。特に高速乱流する領域例えばポ
ンプ入口にはさらに分別されるべき媒質、沈殿剤
および緩衝液のための計量ポンプからの供給管が
通じている。循環ポンプとしては運搬性能の大き
いポンプ、なかんずくパツキングボツクスのない
渦巻きポンプが使用され、計量ポンプとしてはホ
ースポンプ、歯車ポンプ、ピストンポンプあるい
は薄膜ポンプが適している。
装置の大きさにより導管およびポンプは二重マ
ントル、加熱蛇管および冷却蛇管等により温度調
節されるかあるいは計量ポンプを有するすべての
環状反応器が温度調節された空間内に保管され
る。
ントル、加熱蛇管および冷却蛇管等により温度調
節されるかあるいは計量ポンプを有するすべての
環状反応器が温度調節された空間内に保管され
る。
装置のための材料としてはガラス、ほうろう、
耐蝕性合成物質あるいは金属例えば特殊鋼が適し
ている。材料の選択はまず第一に装置の大きさに
従う。小さい装置はガラスおよび/または合成物
質からでも製作されうるが、大きな装置には金
属、ガラスあるいはほうろうが採択される。
耐蝕性合成物質あるいは金属例えば特殊鋼が適し
ている。材料の選択はまず第一に装置の大きさに
従う。小さい装置はガラスおよび/または合成物
質からでも製作されうるが、大きな装置には金
属、ガラスあるいはほうろうが採択される。
攪拌容器の大きさは反応せしめられるべき量に
より、0.5〜100なかんずく0.5〜10に及
ぶ。他の装置部分のスケールは攪拌容器の大きさ
にそれぞれ適合される。
より、0.5〜100なかんずく0.5〜10に及
ぶ。他の装置部分のスケールは攪拌容器の大きさ
にそれぞれ適合される。
添付図面は本発明により使用されるべき装置の
好ましい構造を示すものである。攪拌機構2を有
する攪拌容器1が導管3を経て循環ポンプ4と結
合している。ポンプ4から導管5が再び攪拌容器
1に戻つている。導管3から導管6が分岐しそし
て滞留域6aを経て分離機構(図示せず)に至
る。この導管6はバルブ7によつて閉鎖しうる。
ポンプ4の入口には他に計量ポンプ8,10およ
び12が導管9,11および13を経て結合して
いる。攪拌容器は二重マントル14により温度調
節される。全装置は、破線15により示されてい
る温度調節空間中に存在していることもできる。
好ましい構造を示すものである。攪拌機構2を有
する攪拌容器1が導管3を経て循環ポンプ4と結
合している。ポンプ4から導管5が再び攪拌容器
1に戻つている。導管3から導管6が分岐しそし
て滞留域6aを経て分離機構(図示せず)に至
る。この導管6はバルブ7によつて閉鎖しうる。
ポンプ4の入口には他に計量ポンプ8,10およ
び12が導管9,11および13を経て結合して
いる。攪拌容器は二重マントル14により温度調
節される。全装置は、破線15により示されてい
る温度調節空間中に存在していることもできる。
本発明による方法はなかんずくヒトもしくは動
物の血漿または血漿フラクシヨンの分別に使用さ
れるが、しかしまた他の蛋白質の分別にも使用さ
れうる。
物の血漿または血漿フラクシヨンの分別に使用さ
れるが、しかしまた他の蛋白質の分別にも使用さ
れうる。
沈殿剤は沈殿されるべき物質に適合しているべ
きであつて、ヒトあるいは動物の血漿にはなかん
ずく(NH4)2SO4溶液、例えばエタノールのよう
なアルコール、あるいは例えばポリエチレングリ
コールのようなポリエーテルアルコールが使用さ
れる。沈殿剤の量もまた沈殿されるべき蛋白フラ
クシヨンの種類および量に従うものでそして予備
試験により吟味されるべきある。
きであつて、ヒトあるいは動物の血漿にはなかん
ずく(NH4)2SO4溶液、例えばエタノールのよう
なアルコール、あるいは例えばポリエチレングリ
コールのようなポリエーテルアルコールが使用さ
れる。沈殿剤の量もまた沈殿されるべき蛋白フラ
クシヨンの種類および量に従うものでそして予備
試験により吟味されるべきある。
沈殿にとつて至適なPH値を一定に保持するため
には酸またはアルカリ、または慣用の緩衝液が用
いられる。
には酸またはアルカリ、または慣用の緩衝液が用
いられる。
分別されるべき媒質、沈殿剤、緩衝液および析
出された蛋白質からなる混合物は循環ポンプを用
いて攪拌容器から取り出され攪拌容器へ再び送ら
れる。その間に分岐点で継続的にこの混合物の一
部分が取り出されそして分離機構において沈殿し
た蛋白質から分離される。同時に分別されるべき
媒質、沈殿剤および緩衝液の相当する合計量が計
量ポンプにより再びその系に追加され、その結
果、系中ではずつと物質収支の釣合つた状態とな
る。各成分の追加はその際連続的に行われねばな
らないのではなくて、間欠的に行うこともでき
る。全体の環状反応器中における濃度偏差が分離
されるべき蛋白質フラクシヨンにとつて忍容され
うる限界内にあることが重要である。
出された蛋白質からなる混合物は循環ポンプを用
いて攪拌容器から取り出され攪拌容器へ再び送ら
れる。その間に分岐点で継続的にこの混合物の一
部分が取り出されそして分離機構において沈殿し
た蛋白質から分離される。同時に分別されるべき
媒質、沈殿剤および緩衝液の相当する合計量が計
量ポンプにより再びその系に追加され、その結
果、系中ではずつと物質収支の釣合つた状態とな
る。各成分の追加はその際連続的に行われねばな
らないのではなくて、間欠的に行うこともでき
る。全体の環状反応器中における濃度偏差が分離
されるべき蛋白質フラクシヨンにとつて忍容され
うる限界内にあることが重要である。
本発明による方法により分離容易な綿状沈澱物
として蛋白質が取得される。遠心分離を利用すれ
ば受器は順次空にできるであろう。これは綿状沈
澱物の蛋白質の分離に必要な遠心分離力が非常に
低いからである。本発明の環状反応器を用いた場
合は、反応器内の滞留時間が短いので、原料処理
量が既知の沈澱法と比べて幾倍かに増大される。
さらに、比較的長い作業時間に際しておそれられ
るべき微生物による汚染の危険が存在しないこと
が示された。
として蛋白質が取得される。遠心分離を利用すれ
ば受器は順次空にできるであろう。これは綿状沈
澱物の蛋白質の分離に必要な遠心分離力が非常に
低いからである。本発明の環状反応器を用いた場
合は、反応器内の滞留時間が短いので、原料処理
量が既知の沈澱法と比べて幾倍かに増大される。
さらに、比較的長い作業時間に際しておそれられ
るべき微生物による汚染の危険が存在しないこと
が示された。
実施例 1
添付図面による攪拌容器1は容量1.5を有し、
ガラスからなる二重壁をなしておりそして−2℃
に調節されている。導管3および5は断熱ガラス
二重管からなる。パツキングボツクスのない渦巻
きポンプ4は攪拌容器1および導管3および5の
内容物を毎時200の推進出力で循環させる。ホ
ースポンプ8,10および12はこの系に毎時
800mlのヒトの血漿、毎時93mlのエタノールおよ
び系中のPH値が7.4となるだけの慣用の緩衝液
(PH4.8)に導入する。バルブ7で連続的に毎時
900mlの反応液が取り出され、このものから遠心
分離により毎時約10gの鈍化されたフイブリノー
ゲンフラクシヨンが分離される。
ガラスからなる二重壁をなしておりそして−2℃
に調節されている。導管3および5は断熱ガラス
二重管からなる。パツキングボツクスのない渦巻
きポンプ4は攪拌容器1および導管3および5の
内容物を毎時200の推進出力で循環させる。ホ
ースポンプ8,10および12はこの系に毎時
800mlのヒトの血漿、毎時93mlのエタノールおよ
び系中のPH値が7.4となるだけの慣用の緩衝液
(PH4.8)に導入する。バルブ7で連続的に毎時
900mlの反応液が取り出され、このものから遠心
分離により毎時約10gの鈍化されたフイブリノー
ゲンフラクシヨンが分離される。
実施例 2
実施例1におけると同様であるが攪拌容器1と
して3.0の容量を有する二重壁のガラス容器を
有する装置中に温度−6℃でPH7.6で毎時800mlの
ヒトの血漿、毎時280mlのエタノールならびに緩
衝溶液を加え、そして毎時1000mlの反応液をとり
出す。毎時約50gの鈍化された免疫グロブリンフ
ラクシヨンが取得される。
して3.0の容量を有する二重壁のガラス容器を
有する装置中に温度−6℃でPH7.6で毎時800mlの
ヒトの血漿、毎時280mlのエタノールならびに緩
衝溶液を加え、そして毎時1000mlの反応液をとり
出す。毎時約50gの鈍化された免疫グロブリンフ
ラクシヨンが取得される。
添付図面は本発明方法において使用される装置
の好ましい構造を示したものである。
の好ましい構造を示したものである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 血漿を一定の温度でそして緩衝液の存在下に
沈澱剤と混合し、そして析出する血漿蛋白質を分
離することにより血漿フラクシヨンを調製するに
あたり、血漿、沈澱剤、緩衝液および析出した蛋
白質からなる混合物を循環ポンプと結合されてい
る閉鎖系の管循環路からなる環状反応器中に導入
することを特徴とする、血漿フラクシヨンの調製
方法。 2 その排出口が循環ポンプの入口と結合しそし
てその流入口がこの循環ポンプの出口と結合して
いる攪拌容器からなる循環反応器中で血漿、沈澱
剤、緩衝液および析出した蛋白質からなる混合物
を循環させ、血漿、沈澱剤および緩衝液は循環ポ
ンプ入口と結合している分別されるべき媒質、沈
澱剤および緩衝液のためのそれぞれの給送ポンプ
からの供給管を通じて別々にその系中に導入さ
れ、そして攪拌容器排出口とポンプ入口との間に
設けられた分岐導管により血漿、沈澱剤および緩
衝液の供給量に相当する量の反応混合物を継続し
てその系から取り出すことを特徴とする、前記特
許請求の範囲第1項に記載の方法。 3 環状反応器から取り出された反応混合物を、
析出した蛋白質を分離する前にある滯留域を通過
させることを特徴とする、前記特許請求の範囲第
1項に記載の方法。
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