JPH0363232A - 溶剤抽出方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 本発明の分野 本発明を工、ポリマー−薬剤ミクロカプセル医薬組成物
の製造に係る改良方法に関し、該組成物は、生物分解性
または生物侵食性で生物適合性の（コ）ポリマー　マト
リックス中にカプセル封入されている、少なくとも１種
の水溶性ホルモン活性ポリペプチドおよび、場合により
、ポリマー加水分解変性剤を含有する芯よりなるもので
ある。

本発明に係る改良方法は、ポリマー−薬剤ミクロカプセ
ル医薬組ａ物中に取り造管れている揮発性溶剤の抽出方
法よりなり、この方法は、＋１１ポリマー−薬剤ミクロ
カプセル医薬組成物中に含有されている、いずれかの残
留溶剤の少なくとも一部分をマイクロカプセルから可動
化させ、それによって抽出するのに充分な時間にわたり
、該ミクロカプセルを加圧気体と接触させる工程および
（２）次いで、加圧気体および抽出されてこの気体中に
含有されている揮発性溶剤を、該ポリマー−薬剤医薬組
成物から分離する工程、を包含する。

関連刊行物の説明 残留モノマーならびに触媒および水０抽出によるポリマ
ーの精製において、超臨界流体（ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉ
ｃａｌ　ｆｌｕｉｄｓ）を使用することは公知であり、
報告されている（西ドイツ国特許ＤＥ−３３２３９４０
）。また、下記の技法が報告されている：カフェインを
１含有しないコーヒーエキスの製造におけるカフェイン
の抽出（米国特許公報３，８４３．８２４　）　；ホッ
プを液状有機溶剤で抽出することにより生成され、溶剤
残留物で汚染されているホップエキスを超臨界二酸化炭
素で抽出することによる、ホップエキスの精製（西ドイ
ツ国特許公報ＤＢ−３，１３１，４２８）　；溶剤、す
なわち超臨界ｃｏ２ＩＣよる（この場合に、超臨界ｃｏ
２の圧力は種々に制御される）、固体からの有機物質の
抽出；および有害な化合物を除去するために、オレフィ
ンまたはビニル芳香族物質を含有する無水マレイン酸コ
ポリマーの超臨界流体による抽出による精製。

本発明の夢旨 本発明は、ポリマー−薬剤ミクロカプセル医薬組成物で
あって、その薬剤が治療有効量の、少なくとも１種のホ
ルモン活性水溶性ポリペプチドである組成物の製造に係
る改良方法であり、この改良方法は、 （１）該ミクロカプセル中に含有されている、いずれか
り残留溶剤の少なくとも若干部分をミクロカプセルから
可動化し、それによって抽出するに充分の時間にわたり
、該ミクロカプセルを加圧気体と接触させる工程、およ
び次いで、 （２１この７１ＩＩ圧気体およびこの気体中に含有され
ている残留溶剤を分離する工程、 を包含する。

用語の説明 本発明の説明に使用されている用語は、それらの慣用の
物理的／化学的意味を有する。すなわち、「気体」は独
立した形状または容積を有していない流体であり、その
分子は自由流動性であり、従って物体を無制眼に膨脹さ
せ、これが含有されている容器の全容積を占有するもの
である；「流体」はその容器の外枠に一致する傾向を有
する物質である；「液体」は、構成分子が分離する傾向
を示すことなく、自由に移動する特徴を有する、非気体
状の流体で石る；「超臨界流体Ｊ　（ｓｕｐｅｒ−ｃｒ
ｉｔｉｃａｌ　ｆｌｕｉｄｓ）は、既定ｍ度において、
ソノ流体の臨界圧以上の単相流体である；ｒａｎ圧気体
」は、成る温度で、大気圧以上であるが、臨界圧以下で
ある気体である。加圧気体はまた、時には、「濃厚Ｊ　
（ｄａｎｓ８）気体とも言われる。

本発明の詳細な説明 本発明は、ポリマー−薬剤ミクロカプセル医薬組成物で
あって、生物適合性の生物侵食性カプセル封入用ポリマ
ー中にカブセル封入されている治療有効量の、少なくと
も１檜のホルモン活性水溶性ポリペプチドよ０なる組成
物の製造に係る改良方法にある。一般的に言えば、本発
明のポリマー−薬剤ミクロカプセル医薬組成物の製造方
法は、ポリマー　マトリックスを用意する工程、このポ
リマー　マトリックスなノ・ロケ９ン化炭化水素溶剤中
に溶解する工程、このポリマー−溶剤溶液中にポリペプ
チドを分散させる工程、ポリマーをハロダン化炭化水素
溶剤から、分散されている小滴状ポリペプチド上に沈殿
させ、それにより、ポリペプチドをカシセル内に封入せ
しめるために、ハロビン化炭化水素尋剤中では可溶性で
あるが、ポリマーに対しては非浴剤である、助剤を添加
する工程を包含する。これらのミクロカプセルは次いで
、洗浄し、硬化させ、次に乾燥させる。本発明による改
良方法は、生成するミクロカプセル中に含有されている
残留揮発性溶剤がミクロカプセルから抽出されるに充分
た程度に１で、かつまた充分の時間にわたり、該ミクロ
カプセルを卯圧気体と接触させ、次いでこの濃厚気体お
よびこの気体中に含有されている揮発性溶剤を分離する
ことを包含する。

一例として、ポリ（ラクチド−グリコリド）コポリマー
をハａ）ｆン化災化水素、たとえば塩化メチレンに溶解
する。この溶剤−ポリマー溶液に、急速攪拌しながら、
ポリペプチド水浴液を次いでηＤえ、エマルジョンを生
成することができる。ポリマーに対して非溶剤である、
第二の溶剤混和性物質、たとえばシリコーン油を、ゆっ
くり攪拌したから加え、ポリマー賦形剤す塩化メチレン
から沈殿させ、分散されている小滴状水を取り囲む水−
浴剤界面上に捕獲し、ミクロカプセルを得る。

ミクロカプセルは生ＩＸ後に、適当な有機溶剤（たとえ
ばヘプタン）で、洗浄し、硬化させ、次いで、水で洗浄
し、非イオン性界面活性剤水溶液で洗浄し、次いで室温
において、減圧の下に乾燥させる。

ミクロカプセル形態のホルモン活性水溶性ポリペプチド
およびポリ（ラクチド−グリコリド）コポリマーを含有
する医薬組成物は、人間の患者の処置における、その医
薬としての使用に適しているが、この生成物は、ミクロ
生成物ル生底物の製造に使用された溶剤の若干割合をそ
の中に含有もしくは保留する傾向を有する。それら自体
は揮発性であり、純粋な液体形態で容易に蒸発する、残
留塩化メチレンおよびヘプタンは、ミクロカプセル生成
物の球状ポリマー粒子内に取り込１れているか、または
捕獲されていることから、容易には揮発しない。ミクロ
カプセル内のこの残留溶剤の濃度は、入間に使用する場
合に、生成する医薬組成物を適当でないか、または安全
でないものにするものとは考えられないが、ミクロカプ
セル生成物中の残留溶剤、特にＩ・ロダン化炭化水素、
たとえばジクｏｏメタン（塩化メチレン）およびまた、
使用できる、他の有機溶剤、たとえばヘプタンＯ濃度を
該医薬組成物中で減少させると好ましい。

従って、Ｉ、ＨＲＨ類似体をポリ（ラクチド−グリコリ
ド）コポリマーと組合せて含有するミクロカプセル医薬
組成物中のこれらの残留溶剤の量を実質的に減少させる
か、もしくは排除し、その他の点では完全た生成物を残
す処理または方法が必要である。

これらの溶剤をミクロカプセル内に保留させるのに関与
できる１つの可能な因子は溶剤がポリマー　マトリック
ス全体に非常にゆっくりと拡散することにある。これら
の溶剤のａ度は、製造７’。

セスの通常の時間、たとえば数十時間〜数日間の間、大
気圧筐たは減圧（すなわち、真空）にさらしてもきわ立
っては減じられない。小型分子のポリマー全体への拡散
速度は、その材料をそのガラス転移温度（Ｔｇ）以上の
温度に加熱するか、あるいはポリマー　マトリックスを
、この固体物質に溶解し、その容積を増大させる溶剤の
導入によって膨張（「膨潤」）させることによって、増
加することができる。

しかしながら、ＰＬＧＡ−ＬＨＲ）ｉ類似体ミクロカプ
セル生成物の意図する用途、化学組成および物理的形態
は溶剤を除去するために使用できる手段を制限する。た
とえば、この生成物は、ポリマーを軟化させることなく
、取り込１れている溶剤を迅速に分離するためＶＣ有効
Ｆｊ加熱を行なうことができない。ポリマーの軟化は各
粒子が相互に接着する（凝集）結果を１ねく。粒子の凝
集は、ミクロカプセルの注入可能性を干渉するので、望
１しくない。さらに、加熱はミクロカプセル内に含有さ
れている薬剤の分解を促進することがあり、ポリマーそ
れ自体にも有害に作用することがある。

ポリマー−薬剤ミクロカプセルからの残留溶剤の除去に
関する研究で考えられている方法の中に、ミクロカプセ
ルを超臨界ＣＯ２で処理し、残留溶剤を抽出する方法が
ある。二酸化炭素はＩＱ７２１ａｉ（３１℃において）
以上の圧力で、超臨界流体として存在する。しかしなが
ら、このような処理は、種々の程度の微小球状体（ミク
ロカプセル）の凝集および融合をもたらし、使用できた
い塊をもたらす。

本発明は、加圧気体（臨界未満）がポリマー−薬剤ミク
ロカプセル、たとえばＰＬＧＡ−ＬＨＲＩ（類似体、の
ポリマー　マトリックスを膨潤させることができ、かつ
また、取り込１れている溶剤残留物を、たとえば溶解に
よって、可動化させることができ、これによって溶剤残
留物を粒子の表面に拡ＶＩ１．させ、蒸発できるという
、予想外の驚くべき発見にもとづいている。ミクロカプ
セルを加圧気体と接触させた後に、この７ＪＯ圧気体は
慣用の通気処理によって、揮発性溶剤とともに除去する
ことができる。残留溶剤は気相中で、気体と一緒に分離
される。

膨潤および溶剤抽出効果の程度は、適用する気体圧力を
変えることによって制御することができる。望１しくは
、ハロゲン化炭化水素溶剤（たとえば塩化メチレン）の
濃度を検出限界以下に減少させる。必須ではないが、他
の有機溶剤（たとえば、へブタン）の濃度なまた、減じ
ることもできる。すなわち、このような他の有機溶剤の
濃度を減じることは本発明の方法の有用性にとって不可
欠ではない。さらに、過度の膨潤および後続の凝集をと
もなうことなく、ジクｏｏメタンおよびヘプタンのよう
た残留溶剤の除去を５Ｔ能にする気体圧力の限界が測定
された。

取り込１れている溶剤のポリマーからの拡散の速度を増
加させるための、ポリマー膨潤に係る条件の選択には、
いくつかの束縛要因が存在する。

この目的に選択される加圧気体は、各粒子の内部を貫通
し、取り込１れている溶剤残留物を可動化する、たとえ
ば溶解させる、のに充分に強い相互作用を有していなけ
ればならない。ポリマーの膨潤の目的に選ばれる加圧気
体は、このよう、り溶剤残留物が望ましくない処理用溶
剤を除去し、次いで膨潤した生成物を乾燥させた後にも
存在しうることから、低毒性を有するべきである。膨潤
の程度は、過度の膨潤が材料の軟化を導き、粒子の凝集
もしくは凝固をもたらすことができることから、制御さ
れなければならない。この処理はまた、ポリペプチド、
たとえばす７アレリン（ｎａｆａｒｅｌｉｎ）アセデー
トのようなＬＨＲＨ類似体を、完全な１１で、かつまた
抽出されずに残すもＯでたければたらす、またたとえば
各ポリペプチド粒子の溶解によるポリマー　マトリック
ス内におけるポリペプチド分布状態を変えるものであっ
てはならない。

ざらにまた、選択された膨潤剤は生成物中１）Ｌ・ずれ
の成分とも化学的に反応してはならず、かつまた生成物
の医療上の有用な性質を変えるものであってはたらない
。

７１０圧気体としては、ＣＯ２（二酸化炭素）を使用す
ることができ、また加圧気体状ＣＯ２と気体または液体
との混合物、たとえば加圧気体状ｃｏ２と組合せた、ｃ
３Ｈ，３（ｎ−プロパン）、０５Ｈ１２（ｎ　−ペンタ
ン）またはＣ７Ｈ１６（ｎ−ヘノタン）のような気体状
または液体状η０圧０２〜Ｃ８アルカンであることもで
きる。ポリマーを膨潤させることができ、取り込まれて
いる溶剤残留物を可動化することができ、低毒性であり
、かつまたカプセル封入されたポリペプチドを化学的に
変性しない、その他の加圧気体も、上記したとおりに使
用することができる。

選択された７１０圧気体に応じて、残留溶剤を除去する
ことができる気体の圧力の限界は変わるが、超臨界圧力
を超えることはない。たとえば、室温において、ミクロ
カプセル生成物ポリマー（ＰＬＧＡ　）マ）　ＩＪツク
ス内の溶剤を気体状ＣＯ２’または他の気体とのその混
合物、特に、ＣＯ２とＣ３［（８との混合物により効果
的に可動化するための圧力の下限は、ＣＯ２圧だけで約
１１０ＰＢｉ以上であることが見い出されまた各粒子の
凝集はＣＯ２圧だけで、約２５０ｐｓｉ以上の圧力で顕
著になることが見い出された。

０３Ｈ８を添加すると、ＣＯ２の有用な分圧を高めるこ
とが見い出された。たとえば、加圧気体状ＣＯ２と液状
υ０圧プロパンとの組合せ、たとえば約１１０ｐｓｉの
プロパンと４００　ｐｈｉ　’！でｃ７ＪＯＯ２トノａ
１合せは特に好適である。本発明の目的に対して、ＣＯ
２０）圧力は約１００〜３００　ｐｌｉｉ、好１しくは
１１０〜２５０　ＰＨ１の範囲であることができる。

気体状またに液体状加圧アルカンが存在する場合には、
この圧力範囲は約１００〜５００　ｐｓｉ　、好１しく
は約１１０〜４００　ｐｅｉであることができる。

本発明の方法で処理する組成物中に使用されるポリペプ
チドは、好１しくは前方下垂体に対して作用し、生殖器
管の活性に作用を及ぼすホルモンの放出を行なう、ＬＨ
ＲＨ活性ポリペプチドであり、Ｌｌ（Ｒ［（それ自体な
らびにその合成類似体およびその医薬的に許容される塩
を包含する。本明ａｉｔで使用されているｒｊｕＲＨ類
似体」の用語は、ＬＨＲｌ（それ自体およびその合成類
似体ならびにその医薬的に許容される塩を包含する意味
を有する。

Ｔ、　ＨＲＨ類似体はアゴニスト作用またはアンタゴニ
スト作用を有する化合物を包含する。代表的なＬＨＲＨ
アゴニストは、これらに制限されないが、Ｎ５ｓｔｏｒ
等による米国特許第４．２３４．５７１号に記載されて
いる化合物を包含する。代表的なＬＨＲＩ（アンタゴニ
ストは、これらに制限されないが、Ｈｏ５ｔｏｒ等によ
る米国特許第４．８０１．５７７号に記載されている化
合物を包含する。

その他の代表的ＬＨＲＨ類似体は、下記の米国特許に、
その製造方法とともに記１１ｔされている、ＬＨＲＨア
ゴニストまたはアンタゴニスト活性を有するノナペプチ
ドおよびデカペプチドを包含する：Ａ３．Ｉ１３．３８
２　　３．８４３．０６５；３．８４９．３８９；３．
８５５．１９９　；３．８８６．１３５　；３．８９０
．４３７　；３．８９２．７２３　°３．８９６．１０
４　；３．９０１，８７２；３．９１４，４１２　３．
９１５．９４７；３．９２９．７５９３．９３７．６９
５　　３．９５３．４１６；　ろ、９７４．１３５４．
０１０．１２５　“　４，０１８．９１４　；−４，０
２２，７５９４，０２２，７６０４０２２，７６１；４
．０２４，２４８４．０３　、！！、０８２　；　４．
０７２．６６８　；　ｄ、０７５．１８９４０７５．１
９２；　４，０８６．２１９　；　４，１０１，５３８
４．１　２Ａ、５７７　；　４，１２４，５７８　；　
　４，１４３，１３３　。

４．２５３．９９７；４，２９２．３１３；および４、
ろ、！ｌ　１．７６７゜ 本発明において、最も重要であり、従って非常に好まし
いＬＨＲＨアゴニスト化合物は、米国特許第４．２３４
．５７１号の主題であるポリペプチド化合物およびそれ
らの医薬的に許容される塩である。

この特許の記載を引用して、ここに組入れる。これらの
ポリペプチドは次式で示されるノナペプチドおよびデカ
ペプチドならびにその医薬的に許容される塩である： （ピａ　）　Ｇｊｕ−Ｈｌｓ−Ｖ−Ｓｅｒ−Ｗ−Ｘ−Ｙ
−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｚ（１） 式（Ｉ）において、 ＶはＴｒｐ　（トリプトフィル）、ｐｈｅ　（フェニル
アラニル）″またはＮａｊ　（３＋　（ｌ−ナフチル）
−Ｌ−アラニル）であり、 Ｗは７７ｒ　（チロシル）、Ｐｈｅｊたは３−（１−ペ
ンタフルオロフェニル）−Ｌ−アラニルテア’）、Ｘは
式 ％式％ で示されろＤ−アミノ酸残基であり、この式中、Ｒを工
、 （ａ）　　置換基として３個または４＠以上の、直鎖状
低級アルキル基を有するフェニル、ナフチル、アントリ
ル、フルオレニル、７エナントリル、ビフェニルおよび
ベンズヒドリルよりなる群から選ばれる炭素環状了り−
ル含有基；またを工（ｂ）　　置換基として、３側管た
は４個以上の直鎖状低級アルキル基を有するシクロヘキ
シル、パーヒドロナフチル、パーヒドロ−２，２−ジフ
ェニルメチルおよびアダマンチルよりなる詳から選ばれ
る飽和炭素環状基、であり、 ＹｋＸロイシル、インロイシル、ノル−ロイシルまたは
Ｎ−メチル−ロイシルであり、そして２はグリシンアミ
ドまたは−ＮＨ−Ｅｌ”　（ただし、Ｒ１は低級アルキ
ル、シクロアルキル、フルオロ１ 低級アルキルまたは−Ｎｌ（−Ｃ！−ＮＨ−Ｒ２であり
、そしてＲ２は水素または低級アルキルである）である
。

最も好ましいＬＨＦＩ■アゴニスト化合物は上記式（Ｉ
）において、ｘがｓ−＜２−ナフェニルアラニル）−Ｄ
−アラニルまたは３−（２，４，６１リメチルフエニル
）−Ｄ−アラニルであり、２がグリシンアミンであり、
■がトリプトフィルまたはフェニルアラニルであり、Ｗ
がチロシルであり、モしてＹがロイシルまたはＮ−メチ
ルロイシルである化合物である。

本発明に係る方法において使用するのに特に好適ｔｌＬ
ＨＲＨ類似体は次式で示されるポリペプチドである： （ビｏ　）　Ｇｊｕ−Ｒ１８−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔ７ｒ
−３−（２−ナフチル　）　−Ｄ−Ａｆ、ａ−Ｌｅｕ　
−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｊ７−ＮＨ２（す７アレリン　ア
セテート） 最も重要であり、従って本発明において非常に好ましい
Ｉ、ＨＲＨアンタゴニスト化合物は、米国特許第４，８
０１．５７７号の主題であるポリペプチド化合物である
。これらＯポリペプチド化合物は次式で示されるノナペ
プチドおよびデカペプチド化合物またはその医薬的に許
容される塩である：Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｓｅｒ−Ｄ−に−Ｆ−
Ｇ−Ｐｒｏ−，Ｔ　　　　　　　　　（［）式（Ｉｆ）
　において、 ＡはＮ−ＡＣ３−Ｄ、Ｌ込３．４−プロリル、Ｎ−Ａ（
！−Ｄ、Ｌ−ゾロリル、ＩＩＩ−ＡＣ−Ｄ、　Ｌ−フェ
ニルアラニル、Ｎ−ＡＣ−Ｄ、　Ｌ−Ｐ−りｏ　ｏ　フ
エ＝　Ａ／アラニル、Ｎ−ＡＱ　−Ｄ、　Ｌ−ｐ−フル
オロフェニルアラニル、Ｎ−ＡＣ３−３−（１−ナフチ
ル）−Ｄ、Ｌ−アラニル、Ｎ−ＡＣ−３−（２−ナフチ
ルンーＤ、Ｌ−アラニルおよび５−Ａｃ−３−（２，４
゜６−　）　ＩＪメチルフェニル）−Ｄ、Ｌ−７ラニル
ノＤ異性体またはＬ異性体のどちらかよりなる群から選
ばれるアミノアシル残基であり、 Ｂは、Ｄ−フェニルアラニル、Ｄ−ｐ−／口ａフェニル
アラニル、Ｄ−ｐ−フルオロフェニルアラニル、Ｄ−ｐ
−二トロフェニルアラニル、２゜７−−／フエニルクリ
シル、Ｄ−α−メチル−ｐ−り００フェニルアラニルオ
、ｌＵ：３−　（２−ナフチル）−Ｄ−アラニルよりな
る群から選ばれるアミノアシル残基であり、 Ｃは、Ｄ−トＩＪ７’トファニル、Ｄ−フェニルアラニ
ル、３−（３−ビｌＪジル）−Ｄ−７９二におよび６−
（２−ナフチル）−Ｄ−アラニルよりなる群から選ばれ
るアミノアシル残基であり、Ｄ）Ｘ、Ｌ−フェニルアラ
ニル、Ｌ−チロシルおよび６−（３−ピリジル）−アラ
ニルよりなる詳から選ばれるアミノアシル残基、アルギ
ニルあるい！Ｉ″ｓ、Ｇであり、 Ｅは、３−（２−ナフチル）−Ｄ−アラニル、３−（３
−ピリジル）−Ｄ−アラニル、Ｄ−チロシル、Ｄ−トリ
ノドファニル、Ｄ−ニュチニルーリシル、ピリゾルアセ
チル−リシル、Ｄ−ＧＪｕ（ＡＡ）またはＧであり、 Ｆｔｊ、、Ｌ−ロイシル、Ｌ−ノルロイシル、Ｌ＋−７
、ＩＣニルアラニル、Ｌ−）Ｉ７７’）ファニルおよび
３−（２−ナフチル）−Ｌ−アラニルよりなる群から選
ばれるアミノアシル残基であり、Ｇは、次の構造式で示
される基よりなる群から選ばれるアミノアシル残基であ
りニ ーＨＮ−Ｃ！（−ＣＯ− （（！Ｈ２）ｎ ＮＨ ］ Ｒ−１（Ｎ−Ｃ＝ＮＲ２ 〔式中、ｎは１〜５であり、 ′Ｒｉは炭素原子１〜６個を有するアルキルまたはフル
オロアルキルであり、そして Ｒ２は水素またはＲ１であり、あるいは！’ｌ”−Ｎｌ
（−０＝ＮＲ２は、次の構造式Ｉ ■ （各式中、ｍは１〜４であり、Ａは水素または炭素原子
１〜６個を有するアルキルであり、そしてＸはハロまた
はＡである） で示される環である〕； および （各式中、Ｒ３・は水素、炭素原子１〜６個を有するア
ルキル、フェニル筐たはフェニル−低級アルキルである
）、 そして Ｊは、Ｄ−アラニンアミド、Ｄ−ａイシンアミド、グリ
シンアミドまたは−ＮＨＲ４（ただし、Ｒ４は低級アル
キルまたはＮＩ（＋？！ＯＮ［（２である）である。

さらに−層好ましいＬＨＲ［（アンタゴニスト化合物は
、ＡがＮ−Ａｃ−Ｄ−Ｎａｊ　＋２１　またはＮ　−Ａ
ｃ　−Ｄ−ｐｃｉ−Ｐｈｅであり、ＢがＤ−ｐＦ−Ｐｈ
ｅ　４たはＤ−ｐｃｊ−ＰｂＪであり、ＣがＤ−Ｔｒｐ
　、　Ｄ−Ｎａｊ　（２１またはＰａｌ　（３１であり
、ＤがＰａＪ　（３１、Ｔｙｒ　、Ａｒｇ　、　Ｄｅｈ
　、　Ｍｂｈ　、　Ｂｔｈ　”またはｐｈａであり、Ｅ
がＤ−Ｔｒｐ　、％Ｄ−Ｔ７ｒ　５Ｄ−ＮａＪ　（２１
、Ｄ−Ｐａ、！　＋３１、Ｄ−Ｄｅｈ　、　Ｄ−Ｍｂｈ
　、　Ｄ−Ｐｈｅ　”またはＤ−Ｂｔｈであり、νがＬ
ｓｕｌたはＰｈｅであり、ＧがＤｅｈ　。

Ｂｔｈ、　Ｍｂｈ　’！たはＰｈｅであり、セしてＪが
Ｄ−ＡｆａＮＨ２’ＥたはＧｊ７ＮＨ２である化合物で
ある。

最も好適なＬＨＲＨアンタゴニスト化合物は、ＡがＮ−
Ａｃ−Ｄ−ｎａｊ　（２）であり、ＢがＤ−ｐＣｊ−Ｐ
ｈｅであり、 ＣがＤ−Ｔｒｐ　”またはＤ−ＰａＪＬｔ３１であり、
ＤがＴｙｒ　、　Ａｒｇ　５Ｄｅｈ　％Ｍｂｈ　、　Ｂ
ｔｈ　ｉたはＰｈｅであり、 ＫがＤ−Ｔｒｐ　、　Ｄ−Ｐａｌ　＋３１、Ｄ−Ｎａｊ
　（２３、Ｄ−Ｔ７ｒ　。

Ｄ−Ｄｅｈ　、　−Ｍｂｈ　、　Ｄ−Ｂｔｈ　４たはＤ
−Ｐｈ　ａであり、ＦがＴ、ｅｕであり、 ＧがＤｅｈ　、　Ｍｂｈ　、　Ｂｔｈ−ｉたはＰｈｅで
あり、そして ＪがＤ−ＡｅａＮＨ２である、 化合物である。

上記ＬＨＲＨアンタゴニスト化合物の中でｔ！！ｊＩＣ
好ましい化合物は次式で示されるポリペプチド化合物で
ある： Ａ−Ｂ−０−Ｓｅｒ−Ｄ−に−Ｆ−Ｇ−Ｐｒｏ−Ｊ　　
　　（■）（式中、ＡはＮ−Ａｃ−Ｄ−Ｎａ２　（２）
であり、ＢはＤ−ｐ（Ｊ−Ｐｈｅであり、ＣはＤ−Ｐａ
ｌ　（３）であり、Ｄは’ｌ’ｙｒであり、Ｗ　ｔ！　
Ｄ−ＤａｈおよびＤ−ｐａＪ　（３１カら選ばれ、Ｆは
ＬθＵであり、ＧはＤｅｈでありそしてＪはＡ４ａ−Ｎ
Ｈ２である）。式（ＩＩ）で示されるポリペプチド化合
物の場合に、最も好ましくは、Ａ、　Ｂ、　Ｏ。

Ｄ、　？、　ＧおよびＪは上記の意味の全部を有し、そ
してＥはＤ−Ｄｓｈである。

［ｅｎｔ等による米国特許第４．６７５．１８９号には
、生物適合性の生物分解性ポリマー中にカプセル封入さ
れている水溶性ホルモン活性ポリペプチドおよび場合に
より、ポリマー加水分解変性剤よりなる、新規な持効性
ミクロカプセル組成物が記載されている。

さらに特に、この特許は、黄体形成ホルモン放出ホルモ
ン（Ｌ）！ＲＥ（）類似体を少なくとも１ケ月間にわた
り持効放出するようにデザインされており、ミクロカプ
セル形態に調製されている医薬ｍａ物を包含しており、
この組成物は、カプセル封入用に使用されるポリマーの
約０．０１〜４０．０重量％、好１しくに０．１〜１０
．０重ｔ％の量で、Ｌｆ（ＲＨ類似体またはその医薬的
に許容される塩の少たくとも１種を含有するものである
。

生物適合性であり、かつまた生物分解性および（または
）生物侵食性であるという要件に適合する多くのポリマ
ーが開発されている。適当なポリマーの例はまた、Ｋａ
ｎｔ等による米国粋許第４，６７５．１８９号に記載さ
れている。

好１しくは、本発明に係る方法で処理される組成物に使
用するポリマー　マトリックスは、単独モノマーとして
または主要七ノマーとして乳酸およびコモノマーとして
グリコール酸から製造されるポリマーであり、後者のコ
ポリマーは「ポリ（ラクチド−グリコリド）コポリマー
」または「ポリ（乳酸−グリコール酸）コポリマー」（
ＰＬＧＡ　）の用語で示される。

製造することができる、好適たモノマーおよびコモノマ
ーの組合せは多数存在するが、最も効果的なポリマー　
マトリックスは、乳酸だけから製造されるポリマーまた
は乳酸とグリコール酸とから製造され、グリコール酸が
コモノマーとして、１００：０〜約４０：６０（乳酸ニ
ゲリコール酸）のモル比で存在するポリマーである。最
も好適には、７５　：　２５〜５０　：５０のモル比を
有するポリ（乳酸−グリコール酸）コポリマー（ＰＬＧ
Ａ）を使用する。

ポリ（乳酸−グリコール酸）コポリマーは、好１しくは
約２０．０００〜約１００．０００の分子量範囲を有す
る。特定のポリマーの分子量はその七ノマー構成とは独
立している。すなわち、ポリマーはそれらＯモノマー組
成およびそれらの分子量の両方を変えることができ、こ
れらは本発明に係る方法で処理する組成物に使用される
ポリマーの範囲および意味に包含される。

ＰＬＧＡポリマー　マトリックスおよびポリマー−薬剤
ミクロカプセルの製造はＫｅｎｔ等による米国特許第４
．６７５．１８９号および１３ｏｓｗｅｌ１等による米
国特許第３．７７３．９１９号に記載されており、これ
らの記載をここに引用して組入れる。

ＰＬＧＡポリマー　マトリックスの製造に使用されうる
ハロゲン化有機溶剤はＣ１〜Ｃ４ハａｌｆン化炭化水素
、たとえば塩化メチレン、エチレン　ジクロライド、エ
チレン　クロライド、２．２．２−トリクｏｏエタンな
どである。

コアセルベーション剤と言われる非溶剤はカプセル用ポ
リマーに対して非溶剤である、いずれの溶剤混和性ポリ
マー系鉱油または植物油化合物であることができる。−
例として、シリコーン油、落花生油、大豆油、トウモロ
コシ油、綿実油、ヤシ油、アマニ油などを使用すること
ができる。

ミクロカプセルは生成後に、次の追加の工程のうちの１
つまたは全部で処理することができる：洗浄、硬化およ
び乾燥。たとえば、これらのミクロカプセルは適当な有
機溶剤で洗浄し、硬化させ、水で洗浄し、非イオン性界
面活性剤水溶液で洗浄し、次いで室温において減圧（真
空）の下に乾燥させることができる。

ミクロカシセルは、使用される技法に応じて、約１〜約
５００ミクロンの範囲の径を有することができる。好１
しくは、ミクロカプセルの径は約５〜２００１クロンで
ある。

表および図面を包含する次側は、本発明の２〜３の具体
例を説明するだけのものであり、本発明の範囲を制限し
ようとするものではない。別設のことわりがたいかぎり
、部およびパーセンテージはいずれも重量によるもので
あり、また＠度はいずれも摂氏＆　（”Ｃ）である。

比較例１ この例は、慣用の超臨界ＣＯ２抽出技法を使用すること
によって、ＰＬＧＡ−す７アレリン　アセテートミクロ
カプセルをさらに精製する方法が充分ではないことを示
すものである。この一般的技法は、ｒＤｅｎａｅ　Ｇａ
５ｅｓ　ｆｏｒ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄＲｅｆ
ｉｎｉｎｇＪ　、８ｔｈａｌ　、ｇ、ｕｉｒｉｎおよび
Ｇｅｒａｒｄ　。

１９８６年、Ｓｐｒｉｎｇ１３ｒ出版社、Ｂｅｒｌｉｎ
　１８６１ＣｔｉＯｎ　：　［［、’ｌ　ＯＰｒｅｐａ
ｒａｔｌｖｅ　　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　。

４４〜４６頁に記ｉｉ２されている。

３種の実験を行ない、ＰＬＧＡミクロカプセルの試料を
超臨界ＣＯ２と接触させた。

Ｂ、Ｉ　　ＰＬＧＡミクロカプセル３．８ｇの試料を慣
用の管状抽出器に入れた。慣用の技法を使用し、この試
料を含有する管状抽出器に、二酸化炭素を２５〜２７℃
で４０００　ｐｈｉで、２時間、４〜５ｙ／分の速度で
通した。試料は固形ペレット状物に融合した。

Ｂ、２　　ＰＬＧＡミクロカプセル０．３Ｈの試料を、
気体／液体導入口を有するガラス製高圧反応フラスコ中
に入れ、フラスコをシールした。この７うスコに、二酸
化炭素（ｆ　０００　ｐＢｉ　）をゆっくり通した。フ
ラスコの温度は室＠以下に維持した。

ミクロカプセル試料は、二酸化炭素と接触すると直ちに
凝集した。

Ｂ、３　　この実験は、上記例Ｂ２の修正方法である。

Ｆ　Ｔ、（）Ａ−ナフアレリン　アセテート　ミクロカ
プセル０．３ｇの試料を、気体／液体導入口を有するが
ラス製高圧反応フラスコ中に入れ、７クスコをシールし
た。このフラスコに、液状二酸化炭素を１０００　ｐｓ
ｉで充填した。次いで、二酸化炭素を除去した。この処
理は２回、反復した。ミクロカプセル試料はこれらの実
験条件の下に凝集した。

慣用の超臨界ＣＯ２抽出技術を使用すると、凝集が生じ
、従ってこのような処理が生成物の１体性を破壊するこ
とから満足なもので＆工ないが、残留物の分析（慣用の
ガスクロマドグラフィ）は、生成する生成物中の塩化メ
チレン濃度が検出限界以下であり、そしてアルカン濃度
（”７Ｈ１６およびＣ５によ、）が０．５％より少ない
ことを示した。ＰＩ、ＧＡ−ナフアレリン　アセテート
　ミクロカプセル中の、典型的対照（非抽出）の塩化メ
チレンおよびヘプタンの濃度はそれぞれ、０．５〜２．
５％および８〜１２％であり、上記の場合には、それぞ
れ０．１６％および１１．３％である。

例１ 生成物（例ＡによるＰＬＧＡ−ナフアレリン　アセテー
ト　ミクロカノセル）の試料をスチール製加圧容器に入
れ、適当な制御装置を使用することにより、減圧（１１
１！ＩＨｇ　）からさらに高い圧力（約２５０　ｐＢｉ
　）−１で、なめらかにかっまたサイクル様相で変化す
る圧力で、二酸化炭素気体のゆっくりした速度の流れに
さらした。圧力の最高値からの降下は、内部圧の結果に
よる生成物粒子の破裂を防止するために、ゆっくりと行
なった。ηＵ圧サイクルを６５回反復した後に、試料を
取り出し、インビトロ　す７アレリン　アセテート放出
試験で、その溶剤含有量およびその性能に関して評価し
た。この試験から、材料υ医薬としての性能が予想でき
る。

未処理試料の溶剤含有量はへブタン６．０％およびジク
ロロメタン４００　ｐｐｍ　（部／百方）（０，０４％
）であった。これに対し、気体抽出で処理した試料はへ
７″メン５．１％およびａ　ｏ　ｐｐｍ（０，００８％
）以下のジクロロメタンを含有していた。８０　ｐ’ｐ
ｍはこのジクロロメタンに個する分析法の検出限界であ
る。インビトロでの薬剤放出は、試料のこの処理がその
医薬的性能特性に作用を及ぼさなかったことを示した。

また、抽出前および抽出後の生成物の顕微鏡検査は、粒
子が形状または大きさの点で、有意に変化していないこ
とを示した。

例２ 例１に記載　Ｏ）方法と同様の方法によるが、気体圧力
を１６０〜２３０　ｐＢｉの限界に変えて、第二の生成
物試料を抽出した。この試料は初めには、ヘプタン９．
９優およびククａロメタン０．６６％（６６００ｐｐｍ
　）を＠有していた。加圧二酸化炭素で処理した後に、
ヘプタン含有量は８．６％に減少し、そしてジクロロメ
タンレベルｋｓ　８０　ｐｐｍ　ヨり低くなった。これ
は、この処理中に真空の適用が不必要であることを示し
ている。

例３ この例はη０圧気体状ＣＯ２と組合せて、η口座炭化水
素（類）を使用した場合の効果を示すものであり、ポリ
マー　マトリックスの膨＠には液状ＤＯ圧ＣＯ２を使用
を使用した。試料は、慣用の技法を使用する各実験にお
いて、下記の表に記載の加圧気体と接触させた。

下記の実験で使用されている。「観勘１セル」（ｓｉｇ
ｈｔ　ｃｅｌｌ）は、工ｎｆｅｒｎｏ　Ｍａｎｕｆａｃ
ｔｕｒｉｎｇＳｕｐｐｏｒｔ　ＣＯｒｐＯｒａｔｉＯｎ
　、　８ｈｒｓｖｅ　ｐｏｒｔ　、　ＬＯｕｉｏｌａ−
ｎａから入手できろ’ｒｒａｎ日ｐａｒｅｎｔ　Ｌｉｑ
ｕｉｄ　ＬｅｖｅｌＧａｇｅΦ１である。このｒ−ジの
各末端に、パルプ、圧力ｒ−ジ、充填ラインたどをつけ
た。試料は、この器具の１端のネジをはずし、試料を装
入し、器具を元の状態に戻すことによって、装填した。

各末端にコツトンＯ栓を使用し、目に見える状態で液化
気体中に懸濁されている試料を保持した。内部作業体積
は５０−であった。溶剤残留物は重量／重量％（溶剤の
重量／微小球状体の重量）で測定した。この試料中の対
照（未処理）の場合の塩化メチレンおよびヘプタンの濃
度は、それぞれ約Ｑ、１６　’ｌおよび１１．３％であ
った。

３、Ｉ　　　ＰＬＧＡミクａカプセル試料０．４ｇをガ
ラスおよびステンレススチール製観醐セル上においた。

液状−ｆａパン（ＬＰ）約５０−を、室温で、その蒸気
圧１１０　ｐｓｉで導入した（観測セル全容積の７５４
）。このセルを１時間の間、時々振盪し、次□いで一夜
の間、放置した。朝方に、ＬＰを分離し、このセルに新
しいＬｐを再充填した。セルは次の８時間にわたり、時
々振盪した。このセルを再度、−夜の間装置し、次いで
排液、充填および振盪の処理をもう一度繰返した。ＰＬ
ＧＡミクロカプセルのＬＰ中における総経過時間は４２
時間であった。このミクロカプセルは、′ＬＰ中に懸濁
させると、自由流動性のスラリーを形成した。このセル
の圧力を取り除き、装填物を取り除いた後に、この粉末
状物は、処理前と同一に見えたが、粘着性は少なくなり
、か一つまた一層自由流動性であるように見えた。０Ｈ
２ＣＪ。約０．０５％およびヘプタン９％が検出された
。

３−２ＰＬＧＡミクロカプセル試料約０−８　Ｉｉを観
測セル中に入れた。ＬＰ約５０−を導入し、次Ｌ・でＣ
Ｏ２を段階的に卯えた。Ｓ濁されても・るミクロカプセ
ルの粘着性を観察するために、二酸化炭素の各添加後毎
に、セルを振盪した。総セル圧力はｊ　１　（］　（Ｌ
Ｐのみ）９日１および添２７０００２１６０．１８０．
２００．２５０．３００．４００　ｐ１３１に相当した
。ミクロカプセルは次第に粘着性になり、Ａ　００　ｐ
ｈｉで、全部が凝集して、セル表面内側に接着した。こ
れを混合液相状態で一夜の間、放置しく　１９．５時間
）、排液し、次いで圧力を取り除いた。ミクロカプセル
を工柔軟で、開放構造の塊へ多少融合した。ＣＨｇＣｊ
２は検出されず、そしてヘプタン１．０％が検出された
。

３．３　　ＰＬＧＡミクロカプセル試料１．１ｙを、観
測セルの内部に配置した透明た１、Ｏｃｍより７°ラス
チツク製管に、粗く詰めた。この管に、二酸化炭素を１
８〜２０℃および２００　ｐｈｉ　（一定）で、２０〜
３０−７分（８７Ｐ）の速度で２４時間通した。ミクロ
カプセル（粉末）のカラムは固化したが、モーターおよ
び乳棒により、その元の稠度に容易に再粉砕された。残
留ＱＦ１２’ＪＱは検出されず、そしてヘプタン５．８
優が検出された。

３．４　　ＰＬＧＡミクロカプセル試料０．５ｇを微細
な粉末に粉砕し、観測セル中に、ヘプタン２５−ととも
□入れ、セルをシールした。１８〜２０℃において、総
圧力が２００　ｐｈｉになる１で、二酸化炭素をこのセ
ル中にゆっくり導入した。このセルを時々、振盪し、次
いで一夜の間、放置し、次いでヘプタンおよび二酸化炭
素を取り除いた。二酸化炭素の下での総時間は約１８時
間であった。

塊状粉末試料が得られた。ｃＨ２ａｔ、、は検出されず
、そしてヘプタン４．３％が検出された。

３．５　　上記例４・４に記載の方法を反復するが、ヘ
プタ７０代りに、ペンタン２５−を使用し、かつまた、
二酸化炭素圧は４００ｐθ１にし、二酸化炭素の下での
総時間は約４時間にした。塊状粉末試料が得られた。Ｏ
Ｈ２Ｃ１２約０．１２５％およびヘプタン０６８５％が
検出された。すなわち、充分の０Ｈ２（Ｊ２が除去され
た。

６．６　　微細粉末状のＰＬＧＡミクロカプセル試料４
．２８ｇを、６０−のフリットガラス　フィルターＯ−
ト（４，０径の中度有孔度のもの）中に、０．６ｃｒｎ
の深さ１で充填した。このｏ　−）を、慣用の加圧容器
内に直立状態で設置した。このｏ　−）の軸部な二酸化
炭素導入管に連結した。この容器を密封し、次いで二酸
化炭素を２００　ｐｓｉまで加圧導入した。二酸化炭素
はこυｏ　−）を上方に向って流動させた。この容器は
、１９〜２０℃の温度において、Ｑ、３　ｃｆｍ　（８
ＴＲ）　（ロータメーターで測定）の流速で導入された
二酸化炭素により２００　ｐ１３１に２４時間維持した
。次いで、この容器を脱気処理し、試料を固形ディスク
状物として取り出した。０Ｈ２Ｃ１２は検出されなかっ
たが、へゾテート約７．４％が検出された。

例Ｂ、１、Ｂ、２．３．１．３．２．６．６．３．５お
よび６．６０結果を表■に１とめて示す。

手 続 補 正 書 （自発） 平底 年 月２７日

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. （１）ポリマー−薬剤ミクロカプセル医薬組成物であり
   、その薬剤が治療有効量の、少なくとも１種のホルモン
   活性の水溶性ポリペプチドである医薬組成物の製造にお
   ける改良方法であつて、この方法が、 （イ）該ミクロカプセル中に含有されている、いずれか
   の残留溶剤の少なくとも若干部分を、該ミクロカプセル
   から可動化させ、抽出するのに充分の時間にわたり、該
   ミクロカプセルを加圧気体と接触させ、次いで （ロ）この加圧気体およびこの気体中に含有されている
   該残留溶剤を除去する、 工程を包含する改良方法。
2. （２）加圧気体がＣＯ＿２単独ならびにＣＯ＿２とＣ＿
   ３Ｈ＿８、Ｃ＿５Ｈ＿１＿２およびＣ＿７Ｈ＿１＿６の
   うちの１種との混合物から選ばれる、請求項１に記載の
   方法。
3. （３）加圧気体を、ＣＯ＿２圧だけで、約１１０ｐｓｉ
   〜約２５０ｐｓｉの範囲の圧力に維持する、請求項１に
   記載の方法。
4. （４）加圧気体がＣ＿３Ｈ＿８とＣＯ＿２との混合物で
   ある、請求項２に記載の方法。
5. （５）Ｃ＿３Ｈ＿８を約１１０ｐｓｉｇで存在させ、か
   つまたＣＯ＿２を約４００ｐｓｉｇで存在させる、請求
   項４に記載の方法。
6. （６）加圧気体を一定の圧力に維持する、請求項１に記
   載の方法。
7. （７）ポリペプチドがＬＨＲＨおよびその合成類似体か
   ら選択される、ＬＨＲＨ様活性を有するホルモン活性ポ
   リペプチドであり、そしてミクロカプセル組成物中に、
   カプセル封入に使用されるポリマーの約０．０１〜約４
   ０．０重量％の量で存在する、請求項１に記載の方法。
8. （８）ポリマーマトリックスが、乳酸対グリコール酸モ
   ノマー比１００：０〜約４０：６０を有し、かつまた分
   子量約２０，０００〜約１００，０００を有するポリ（
   乳酸−グリコール酸）コポリマー（ＰＬＧＡ）である、
   請求項１に記載の方法。
9. （９）ポリペプチドがナフアレリン（ｎａｆａｒｅｌｉ
   ｎ）およびその医薬的に許容される塩、もしくは Ｎ−Ａｃ−Ｄ−Ｎａｌ（２）−Ｄ−ｐＣｌ−Ｐｈｅ−Ｄ
   −Ｐａｌ（３）−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｄｅｈ−Ｌｅｕ
   −Ｄｅｈ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−ＮＨ＿２およびその医薬的
   に許容される塩から選ばれる、請求項７に記載の方法。
10. （１０）請求項１の方法によつて製造されるミクロカプ
    セル生成物。