JPH0351692B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPH0351692B2 JPH0351692B2 JP54103647A JP10364779A JPH0351692B2 JP H0351692 B2 JPH0351692 B2 JP H0351692B2 JP 54103647 A JP54103647 A JP 54103647A JP 10364779 A JP10364779 A JP 10364779A JP H0351692 B2 JPH0351692 B2 JP H0351692B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glucose
- streptococci
- polysaccharide
- molecular size
- broth
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 60
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 60
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 59
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 53
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 53
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 53
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 20
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 13
- 150000003214 pyranose derivatives Chemical class 0.000 claims description 10
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 claims description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 7
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 6
- BNSTVBLCTRZUDD-KEWYIRBNSA-N N-[(3R,4S,5S,6R)-2,3,4,5-tetrahydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]acetamide Chemical compound CC(=O)NC1(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BNSTVBLCTRZUDD-KEWYIRBNSA-N 0.000 claims description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 2
- FJEKYHHLGZLYAT-FKUIBCNASA-N galp Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)N)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CNC=N1 FJEKYHHLGZLYAT-FKUIBCNASA-N 0.000 claims 2
- 229940031937 polysaccharide vaccine Drugs 0.000 claims 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 abstract description 7
- 238000002649 immunization Methods 0.000 abstract description 7
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 abstract description 6
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 abstract description 6
- 241000193985 Streptococcus agalactiae Species 0.000 abstract description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000470 constituent Substances 0.000 abstract description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 abstract 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 abstract 1
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 34
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 25
- 241000193990 Streptococcus sp. 'group B' Species 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LCTORNIWLGOBPB-GASJEMHNSA-N (3r,4s,5s,6r)-2-amino-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound NC1(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LCTORNIWLGOBPB-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000019040 Nuclear Antigens Human genes 0.000 description 2
- 108010051791 Nuclear Antigens Proteins 0.000 description 2
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 150000002386 heptoses Chemical class 0.000 description 2
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- FTHCZYMFYCBWMW-UHFFFAOYSA-N Cl.CNCO.CNCO.CNCO Chemical compound Cl.CNCO.CNCO.CNCO FTHCZYMFYCBWMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108010059712 Pronase Proteins 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- DYAHQFWOVKZOOW-UHFFFAOYSA-N Sarin Chemical compound CC(C)OP(C)(F)=O DYAHQFWOVKZOOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical class N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012863 analytical testing Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- -1 glucose amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002075 main ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 1
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J tetrasodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
- A61K39/092—Streptococcus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
- C07K16/1267—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-positive bacteria
- C07K16/1275—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-positive bacteria from Streptococcus (G)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/961—Chemistry: molecular biology and microbiology including a step of forming, releasing, or exposing the antigen or forming the hapten-immunogenic carrier complex or the antigen per se
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明はストレプトコツカスアガラクチアエ
（Streptococcus agalactiae）（以下Ｂ群鎖状球菌
という）に対する多糖抗原製造法、それによつて
製造された抗原ないしはワクチンに関する。 グルコース２ｇ／を含有し且つPH6.5〜7.4に
緩衝されたトツド−ヘウイト氏フイヨン（Todd
−Hewitt broth）内で菌を培養し、そのブイヨ
ンから培養された菌を分離し、しかるのちその菌
から型多糖類を抽出してＢ群鎖状球菌の型多
糖類を製造することはすでに提案されている。し
かしながら、このようにして製造された多糖類は
収率が低く、しかも型特異性抗血清とのみ反応
性を示す。これについては、「The Journal of
Experi−mental Medicine」Vol 143、第258〜
269頁（1976年）のベー力（Baker）、カスペル
（Kasper）およびデービス（Davis）の論文を参
照されたい。さらに、多糖類の収率を高めるため
に培養基中のグルコースの濃度を高め且つ緩衝能
を増大させることもすでに提案されている〔ベー
力および力スペルの論文、「Infection and
lmmunity」Vol.13、189〜194頁（1976年）所載、
参照〕。さらにまた、生きたＢ型連鎖状球菌に感
染された人の血液から自然発生の抗血清を単離す
ることもすでに提案されている。しかしながら、
一般にかかる抗血清の免疫学的活性はきわめて微
弱である。 ここに本発明によつて、従来製造されたものと
は化学的組成において明らかに相違し、向上され
た免疫活性を示す、大きい分子サイズ（0.8〜６
×106d）留分を有する多糖抗原が次のようにして
製造しうることが見出された。すなわち、高濃
度、好ましくは10〜15ｇ／またはそれ以上の濃
度のグリコースを含有する栄養ブイヨン中でＢ群
連鎖状球菌を培養しそしてその際にそのブイヨン
のPH値を６乃至８、好ましくは6.8乃至7.6に保持
するのである。なおここで、「分子サイズ」とい
う言葉は分子排斥クロマトグラフイー
（molecular exclusion chromatography）によ
つて決定されるような分子量を意味するものであ
る。これらの高分子サイズの抗原は型特異抗体
に対し免疫反応性を示す。さらに本発明によつ
て、当該菌を105ダルトン以上の分イサイズを有
する成分を含んでいないブイヨン中で培養し、培
養後に当該菌をブイヨンから分離すなわち採収
し、しかるのち残存ブイヨンから0.8×106以上の
分子サイズを有する留分を含有する多糖類を回収
することによつて上記の製造法の一層の改良が遅
成されそして多糖抗原がより高い収率が得られる
ことが見出された。なお、採収された菌からの抽
出によつて付加的量ただし小量の高分子サイズの
多糖類を得ることができる。さらにまた、上記し
た本発明の方法が、ａおよびｃ型特異性抗体
に対して免疫反応性を示す高分子サイズ抗原の製
造にも同じく適用しうることが見出された。 本発明により、従来の栄養ブイヨン中に存在す
るグリコースの量、たとえばトツド−ヘウイト氏
ブイヨンの場合のような２ｇ／の量では、多糖
抗原ないしはワクチンの最高収率を得ることは不
可能であることが見出され、そしてこのグリコー
スの量を15ｇ／の量まで増加させることによつ
てて抗原の製造が効果的且つ格段と促進され高い
収率が達成されることが見出された。グルコース
の量は有害な作用を伴わずして15ｇ／以上に増
加させることが出来るけれども、15ｇ／以上に
増加させることにより得られる利点はない。グル
コースの量は少なくとも10ｇ／であることが望
ましく、好ましくは14乃至16ｇ／である。 栄養ブイヨン中のグルコースの量が約４ｇ／
またはそれ以上である場合、その栄養ブイヨンの
PHを６乃至８の範囲、特に好ましいPH値の範囲で
ある6.8乃至7.6の範囲に保持することは単に通常
のリン酸塩緩衝液のような緩衝剤を菌が導入され
る際にその栄養ブイヨンに添加するだけでは有効
的になし得ない。菌により大量のグルコースが消
費されるので遊離される酸の量はきわめて大き
く、緩衝剤をかなり高い濃度で存在させた場合で
も、緩衝剤がきかなくなる易く、PHは６以下に下
がり、そして製造される免疫物質の特異性が、明
らかに多糖類の結果として、変つてしまう。しか
しながら他方で、PH値を８以上に高めると、菌の
生長率は低下してしまう。しかして本発明によ
り、菌の培養中に間欠的または継続的にブイヨン
にアルカリ性物質を導入することが特定範囲にPH
を維持するために必要であることが見出された。
好ましいアルカリ性物質は水酸化ナトリウムであ
るが、他の強アルカリ性物質たとえば炭酸ナトリ
ウムまたは水酸化アンモニウムまたは炭酸アンモ
ニウムなども使用しうる。アルカリ性物質は水溶
液の形態で導入するのが最も好都合であり、特に
滴定薬が使用される場合は好都合である。培養は
任意常用の温度、たとえば室温またはそれより若
干高い温度（24〜40℃）で実施することができ
る。 上記した条件でＢ群連鎖状球菌を培養すると、
0.8×６×106ダルトンの分子サイズを有する画分
を含む多糖抗原が産出され、これは公知方法によ
り栄養ブイヨンから菌を分離したのちその菌から
抽出することができる。しかしながら、その多糖
の大部分の菌によつてブイヨン全体の中に放出さ
れるので、ブイヨンから最初に菌を分離し、そし
て次に残存ブイヨンから所望の高分子サイズ
（0.8〜６×106）且つ高い免疫作用を持つ多糖類
を回収することによつてより高い収率が達成され
ることが本発明によつて見出された。この回収を
好都合ならしめるためには、培養の開始時に105
以上の分子サイズを有する成分を含まない栄養ブ
イヨンすなわち培養基を使用するのが望ましいこ
とが判明した。３×104以上の分子サイズを有す
る成分を含まないものであればさらに好ましい。
Ｂ群連鎖状球菌の培養に従来使用されている栄養
ブイヨンは高分子サイズ成分を含有する動物組織
の液汁を含んでいる。たとえば、従来使用されて
いるトツド−ヘウイト氏ブイヨンはその主成分と
して牛の心臓の浸出汁を含んでいる。たとえば
105d以上の高分子サイズ成分は常用の分別ないし
分離法たとえば透析、限外過またはクロマトグ
ラフイーによつてブイヨンから除去することがで
きる。残りの、低分子サイズ成分と５〜15ｇ／
のグルコースのみを含むブイヨンはＢ群連鎖状球
菌の培養にきわめて有効である。 ブイヨンから菌をたとえば遠心沈降によつて採
収ないし分離したのちに、産出された高分子サイ
ズ多糖抗原は残存するブイヨン、すなわち上澄み
のブイヨンから容易に回収することができ、そし
てそれを低分子サイス成分から上述のごとき常用
の分別または分離法によつて容易に分離すること
ができる。さらに同り高分子サイズ（0.8×６×
106）の多糖抗原の付加的量がブイヨンから分離
された菌の抽出によつて得られる。抽出はＢ群
型連鎖状球菌から低分子サイズ多糖類を抽出する
ために従来採用されていた方法を用いて実施する
ことができる。この従来法は好ましくはエチレン
ジアミンテトラ酢酸ナトリウムを含有するサリン
緩衝液を含有する抽出媒質中にPH６〜８、室温で
数時間菌を懸濁し、そしてその媒質から菌を分離
するものである。ただし、任意の中性緩衝液が使
用しうる。 栄養ブイヨンから、あるいは菌の抽出から得ら
れる高分子サイズ多糖抗原は次のようにしてさら
に精製することができる。すなわち常用のエタノ
ール沈殿を行ない、次に酵素分解を行なつて核酸
とタンパクを除き、そしてPH7.3の0.05Mトリス
（Tris）緩衝液を用いてゲルクロマトグラフイー
を実施して0.8×106以上の分子サイズを有する画
分を単離するのである。もちろん、6.5乃至8.0の
PH値の他の緩衝剤を使用してもよい。この留分の
中の多糖類を次に塩−エタノール沈殿処理にか
け、蒸留水に再懸濁しそして凍結乾燥すると乾燥
固体の多糖抗原が得られる。一般的に言つて、
型菌の培養物の各１から１乃至８mgの精製型
多糖抗原が得られる。この精製多糖抗原はその主
成分としてシアル酸、ガラクトース、グルコース
およびグルコースアミンを含有し、そして下記単
位のくり返しからなる。 上記において、GlcNAcpはＮ−アセチルグル
コースアミン（ピラノース型）、Galはガラクト
ース（ピラノース型）、Glcpはグルコース（ピラ
ノース型）そしてα−Ｄ−NANAはシアル酸を
意味する。 この多糖抗原は従来法によつて製造されたもの
と次の点で相違する。すなわち、本発明のものは
マンノースもヘプトースも含有していないが、従
来法のものはマンノースとヘプトースの両者を含
んでいる。 ａまたはｃまたは型のＢ群連鎖状球菌を
上記と同じ工程にかけると、別種の精製された可
溶性多糖が得られ、これもその主成分としてシア
ル酸、ガラクトース、グルコースおよびグルコー
スアミンを含有している。 この多種（ａおよびｃ型）も0.8×106以上
の分子サイズを有しそして型からの場合とほぼ
同じ収率で得られる。 ａおよびｃ型多糖抗原と型の多糖抗原と
は免疫学的に別個のものであり、両者はそれぞれ
の血清型のＢ群連鎖状球菌に対して製造された型
特異性血清を用いた毛管沈殿系反応によつて容易
に区別される。この判別試験に用いる上記血清は
従来法により製造できたとえば「J.
Experimental Medicine」Vol59、第441〜458頁
（1934年）にランスフイールド（Lancefield）に
より記載された方法、「ibid」Vol.67、第25頁以
下（1938年）に記載された方法、「Infection and
Immunity」Vol.4、第596頁以下（1971年）にウ
イルキンソン（Wilkinson）等によつて記載され
た方法などが使用できる。 ワクチンとして使用するためには、精製多糖抗
原を発熱物質を含まない食塩溶液または他の生理
学的に許容される非毒性ビヒクルまたは媒質中に
懸濁する。所望の場合はビヒクルは常用の安定剤
などの添加物を含有させることができる。抗原の
濃度は臨界的なものでなく、広い範囲で変えうる
ものであるが、多くの場合には10乃至1000μｇ／
mlの範囲が好都合且つ適当である。この形態で４
℃で長時間保存しても安定であり、食物薬物投与
規定（Food and Drug Administration
Regulation）（第21章、第610.11〜610.13頁）に
定められている動物試験に供しても無菌、無毒、
且つ非発熱性である。本ワクチン中にはなんらの
生物学的に活性な菌体内毒素も検出されなかつた
し、またマウス、ウサギまたは霊長類動物に供与
してもなんらの系統的症侯も観察されなかつた。
本ワクチンをウサギまたは霊長類動物に注射した
際に抗体形成は全く見られなかつた。 PHが６以下に下げられるのであれば（たとえば
栄養ブイヨン中にリン酸塩緩衝剤を使用した場
合）、中分子サイズ（５〜６×105ダルトン）の多
糖を含有するワクチンを製造することができる。
このワクチンはベー力等により「J.Clin.Invest.」
Vol.61、第1107〜1110（1978年）に記載されてい
るように人体内で抗原性を有する。 かかる多糖類は上記した高分子サイズ（0.8×
６×106）の多糖類とは異なる免疫学的特性を有
するものであるが、しかしワクチンとして使用さ
れるのに十分な高い活性を有している。これら多
糖類は選択されたワクチン内の抗体を十分に高め
るのにも有効であり、従つてその抗血清のガンマ
グロブリン画分を単離することによつて受動免疫
を得るための注射用として有効な程度の十分に高
い力価を持つ抗体を得るとが可能である。 以下の第１表に多糖型抗原のワクチンとして
の免疫原性の存在を支持するデータを示す。
（Streptococcus agalactiae）（以下Ｂ群鎖状球菌
という）に対する多糖抗原製造法、それによつて
製造された抗原ないしはワクチンに関する。 グルコース２ｇ／を含有し且つPH6.5〜7.4に
緩衝されたトツド−ヘウイト氏フイヨン（Todd
−Hewitt broth）内で菌を培養し、そのブイヨ
ンから培養された菌を分離し、しかるのちその菌
から型多糖類を抽出してＢ群鎖状球菌の型多
糖類を製造することはすでに提案されている。し
かしながら、このようにして製造された多糖類は
収率が低く、しかも型特異性抗血清とのみ反応
性を示す。これについては、「The Journal of
Experi−mental Medicine」Vol 143、第258〜
269頁（1976年）のベー力（Baker）、カスペル
（Kasper）およびデービス（Davis）の論文を参
照されたい。さらに、多糖類の収率を高めるため
に培養基中のグルコースの濃度を高め且つ緩衝能
を増大させることもすでに提案されている〔ベー
力および力スペルの論文、「Infection and
lmmunity」Vol.13、189〜194頁（1976年）所載、
参照〕。さらにまた、生きたＢ型連鎖状球菌に感
染された人の血液から自然発生の抗血清を単離す
ることもすでに提案されている。しかしながら、
一般にかかる抗血清の免疫学的活性はきわめて微
弱である。 ここに本発明によつて、従来製造されたものと
は化学的組成において明らかに相違し、向上され
た免疫活性を示す、大きい分子サイズ（0.8〜６
×106d）留分を有する多糖抗原が次のようにして
製造しうることが見出された。すなわち、高濃
度、好ましくは10〜15ｇ／またはそれ以上の濃
度のグリコースを含有する栄養ブイヨン中でＢ群
連鎖状球菌を培養しそしてその際にそのブイヨン
のPH値を６乃至８、好ましくは6.8乃至7.6に保持
するのである。なおここで、「分子サイズ」とい
う言葉は分子排斥クロマトグラフイー
（molecular exclusion chromatography）によ
つて決定されるような分子量を意味するものであ
る。これらの高分子サイズの抗原は型特異抗体
に対し免疫反応性を示す。さらに本発明によつ
て、当該菌を105ダルトン以上の分イサイズを有
する成分を含んでいないブイヨン中で培養し、培
養後に当該菌をブイヨンから分離すなわち採収
し、しかるのち残存ブイヨンから0.8×106以上の
分子サイズを有する留分を含有する多糖類を回収
することによつて上記の製造法の一層の改良が遅
成されそして多糖抗原がより高い収率が得られる
ことが見出された。なお、採収された菌からの抽
出によつて付加的量ただし小量の高分子サイズの
多糖類を得ることができる。さらにまた、上記し
た本発明の方法が、ａおよびｃ型特異性抗体
に対して免疫反応性を示す高分子サイズ抗原の製
造にも同じく適用しうることが見出された。 本発明により、従来の栄養ブイヨン中に存在す
るグリコースの量、たとえばトツド−ヘウイト氏
ブイヨンの場合のような２ｇ／の量では、多糖
抗原ないしはワクチンの最高収率を得ることは不
可能であることが見出され、そしてこのグリコー
スの量を15ｇ／の量まで増加させることによつ
てて抗原の製造が効果的且つ格段と促進され高い
収率が達成されることが見出された。グルコース
の量は有害な作用を伴わずして15ｇ／以上に増
加させることが出来るけれども、15ｇ／以上に
増加させることにより得られる利点はない。グル
コースの量は少なくとも10ｇ／であることが望
ましく、好ましくは14乃至16ｇ／である。 栄養ブイヨン中のグルコースの量が約４ｇ／
またはそれ以上である場合、その栄養ブイヨンの
PHを６乃至８の範囲、特に好ましいPH値の範囲で
ある6.8乃至7.6の範囲に保持することは単に通常
のリン酸塩緩衝液のような緩衝剤を菌が導入され
る際にその栄養ブイヨンに添加するだけでは有効
的になし得ない。菌により大量のグルコースが消
費されるので遊離される酸の量はきわめて大き
く、緩衝剤をかなり高い濃度で存在させた場合で
も、緩衝剤がきかなくなる易く、PHは６以下に下
がり、そして製造される免疫物質の特異性が、明
らかに多糖類の結果として、変つてしまう。しか
しながら他方で、PH値を８以上に高めると、菌の
生長率は低下してしまう。しかして本発明によ
り、菌の培養中に間欠的または継続的にブイヨン
にアルカリ性物質を導入することが特定範囲にPH
を維持するために必要であることが見出された。
好ましいアルカリ性物質は水酸化ナトリウムであ
るが、他の強アルカリ性物質たとえば炭酸ナトリ
ウムまたは水酸化アンモニウムまたは炭酸アンモ
ニウムなども使用しうる。アルカリ性物質は水溶
液の形態で導入するのが最も好都合であり、特に
滴定薬が使用される場合は好都合である。培養は
任意常用の温度、たとえば室温またはそれより若
干高い温度（24〜40℃）で実施することができ
る。 上記した条件でＢ群連鎖状球菌を培養すると、
0.8×６×106ダルトンの分子サイズを有する画分
を含む多糖抗原が産出され、これは公知方法によ
り栄養ブイヨンから菌を分離したのちその菌から
抽出することができる。しかしながら、その多糖
の大部分の菌によつてブイヨン全体の中に放出さ
れるので、ブイヨンから最初に菌を分離し、そし
て次に残存ブイヨンから所望の高分子サイズ
（0.8〜６×106）且つ高い免疫作用を持つ多糖類
を回収することによつてより高い収率が達成され
ることが本発明によつて見出された。この回収を
好都合ならしめるためには、培養の開始時に105
以上の分子サイズを有する成分を含まない栄養ブ
イヨンすなわち培養基を使用するのが望ましいこ
とが判明した。３×104以上の分子サイズを有す
る成分を含まないものであればさらに好ましい。
Ｂ群連鎖状球菌の培養に従来使用されている栄養
ブイヨンは高分子サイズ成分を含有する動物組織
の液汁を含んでいる。たとえば、従来使用されて
いるトツド−ヘウイト氏ブイヨンはその主成分と
して牛の心臓の浸出汁を含んでいる。たとえば
105d以上の高分子サイズ成分は常用の分別ないし
分離法たとえば透析、限外過またはクロマトグ
ラフイーによつてブイヨンから除去することがで
きる。残りの、低分子サイズ成分と５〜15ｇ／
のグルコースのみを含むブイヨンはＢ群連鎖状球
菌の培養にきわめて有効である。 ブイヨンから菌をたとえば遠心沈降によつて採
収ないし分離したのちに、産出された高分子サイ
ズ多糖抗原は残存するブイヨン、すなわち上澄み
のブイヨンから容易に回収することができ、そし
てそれを低分子サイス成分から上述のごとき常用
の分別または分離法によつて容易に分離すること
ができる。さらに同り高分子サイズ（0.8×６×
106）の多糖抗原の付加的量がブイヨンから分離
された菌の抽出によつて得られる。抽出はＢ群
型連鎖状球菌から低分子サイズ多糖類を抽出する
ために従来採用されていた方法を用いて実施する
ことができる。この従来法は好ましくはエチレン
ジアミンテトラ酢酸ナトリウムを含有するサリン
緩衝液を含有する抽出媒質中にPH６〜８、室温で
数時間菌を懸濁し、そしてその媒質から菌を分離
するものである。ただし、任意の中性緩衝液が使
用しうる。 栄養ブイヨンから、あるいは菌の抽出から得ら
れる高分子サイズ多糖抗原は次のようにしてさら
に精製することができる。すなわち常用のエタノ
ール沈殿を行ない、次に酵素分解を行なつて核酸
とタンパクを除き、そしてPH7.3の0.05Mトリス
（Tris）緩衝液を用いてゲルクロマトグラフイー
を実施して0.8×106以上の分子サイズを有する画
分を単離するのである。もちろん、6.5乃至8.0の
PH値の他の緩衝剤を使用してもよい。この留分の
中の多糖類を次に塩−エタノール沈殿処理にか
け、蒸留水に再懸濁しそして凍結乾燥すると乾燥
固体の多糖抗原が得られる。一般的に言つて、
型菌の培養物の各１から１乃至８mgの精製型
多糖抗原が得られる。この精製多糖抗原はその主
成分としてシアル酸、ガラクトース、グルコース
およびグルコースアミンを含有し、そして下記単
位のくり返しからなる。 上記において、GlcNAcpはＮ−アセチルグル
コースアミン（ピラノース型）、Galはガラクト
ース（ピラノース型）、Glcpはグルコース（ピラ
ノース型）そしてα−Ｄ−NANAはシアル酸を
意味する。 この多糖抗原は従来法によつて製造されたもの
と次の点で相違する。すなわち、本発明のものは
マンノースもヘプトースも含有していないが、従
来法のものはマンノースとヘプトースの両者を含
んでいる。 ａまたはｃまたは型のＢ群連鎖状球菌を
上記と同じ工程にかけると、別種の精製された可
溶性多糖が得られ、これもその主成分としてシア
ル酸、ガラクトース、グルコースおよびグルコー
スアミンを含有している。 この多種（ａおよびｃ型）も0.8×106以上
の分子サイズを有しそして型からの場合とほぼ
同じ収率で得られる。 ａおよびｃ型多糖抗原と型の多糖抗原と
は免疫学的に別個のものであり、両者はそれぞれ
の血清型のＢ群連鎖状球菌に対して製造された型
特異性血清を用いた毛管沈殿系反応によつて容易
に区別される。この判別試験に用いる上記血清は
従来法により製造できたとえば「J.
Experimental Medicine」Vol59、第441〜458頁
（1934年）にランスフイールド（Lancefield）に
より記載された方法、「ibid」Vol.67、第25頁以
下（1938年）に記載された方法、「Infection and
Immunity」Vol.4、第596頁以下（1971年）にウ
イルキンソン（Wilkinson）等によつて記載され
た方法などが使用できる。 ワクチンとして使用するためには、精製多糖抗
原を発熱物質を含まない食塩溶液または他の生理
学的に許容される非毒性ビヒクルまたは媒質中に
懸濁する。所望の場合はビヒクルは常用の安定剤
などの添加物を含有させることができる。抗原の
濃度は臨界的なものでなく、広い範囲で変えうる
ものであるが、多くの場合には10乃至1000μｇ／
mlの範囲が好都合且つ適当である。この形態で４
℃で長時間保存しても安定であり、食物薬物投与
規定（Food and Drug Administration
Regulation）（第21章、第610.11〜610.13頁）に
定められている動物試験に供しても無菌、無毒、
且つ非発熱性である。本ワクチン中にはなんらの
生物学的に活性な菌体内毒素も検出されなかつた
し、またマウス、ウサギまたは霊長類動物に供与
してもなんらの系統的症侯も観察されなかつた。
本ワクチンをウサギまたは霊長類動物に注射した
際に抗体形成は全く見られなかつた。 PHが６以下に下げられるのであれば（たとえば
栄養ブイヨン中にリン酸塩緩衝剤を使用した場
合）、中分子サイズ（５〜６×105ダルトン）の多
糖を含有するワクチンを製造することができる。
このワクチンはベー力等により「J.Clin.Invest.」
Vol.61、第1107〜1110（1978年）に記載されてい
るように人体内で抗原性を有する。 かかる多糖類は上記した高分子サイズ（0.8×
６×106）の多糖類とは異なる免疫学的特性を有
するものであるが、しかしワクチンとして使用さ
れるのに十分な高い活性を有している。これら多
糖類は選択されたワクチン内の抗体を十分に高め
るのにも有効であり、従つてその抗血清のガンマ
グロブリン画分を単離することによつて受動免疫
を得るための注射用として有効な程度の十分に高
い力価を持つ抗体を得るとが可能である。 以下の第１表に多糖型抗原のワクチンとして
の免疫原性の存在を支持するデータを示す。
【表】
以下に本発明を説明するための実施例を示す。
これは本発明の一層の理解を助けるためのもので
あり、本発明を限定するものではない。 型多糖抗原のくり返し単位の決定及び同定
型多糖抗原の前記くり返し単位の決定及びその確
認は下表１及び２の左欄に示す各項目を中欄に示
す方法によつて分析して得られた右欄に示す結果
を総括して得られる。 本発明の型多糖抗原（未変性型多糖抗原）
はコア抗原のくり返し単位にシアル酸が付加され
たものである。表１の結果から核抗原のくり返し
単位が決定され、表２の結果から該核抗原に付加
されたシアル酸の位置が確認される。
これは本発明の一層の理解を助けるためのもので
あり、本発明を限定するものではない。 型多糖抗原のくり返し単位の決定及び同定
型多糖抗原の前記くり返し単位の決定及びその確
認は下表１及び２の左欄に示す各項目を中欄に示
す方法によつて分析して得られた右欄に示す結果
を総括して得られる。 本発明の型多糖抗原（未変性型多糖抗原）
はコア抗原のくり返し単位にシアル酸が付加され
たものである。表１の結果から核抗原のくり返し
単位が決定され、表２の結果から該核抗原に付加
されたシアル酸の位置が確認される。
【表】
【表】
【表】
実施例
商業的供給者から下記組成のトツド−ヘウイト
氏ブイヨンを入手した。成分 ｇ／ 牛心臓浸出物（過したもの）（固体） 500 ネオペプトン（固体） 20 デキストロース ２ 塩化ナトリウム ２ 二リン酸ナトリウム 0.4 炭酸ナトリウム 2.5 このブイヨンを適当な膜を通して蒸留水に対し
て透析して100000d以上の分子サイズを有する成
分をすべて分離した。次いでオートクレーブに入
れて殺菌しそしてさらに14ｇ／の無菌グルコー
スをそのブイヨンに溶解した。 Ｂ群型連鎖鎖状球菌の入つた培養フラスコの
内容物を上記ブイヨンに導入して菌を植えそして
PH滴定によりそのPHを6.8乃至7.6の範囲内に継続
的に保持しながら該ブイヨン中で室温において菌
培養を行なつた。菌の量が３×108菌／を超過
した時に、その菌を遠心分離により採収した。 残存上澄みブイヨンを105d以上の分子サイズを
有するすべての物質を保留しつつ限外過により
１／10容量まで濃縮し、そして次に低分子サイズ
成分を除去するため蒸留水に対して徹底的に透析
した。冷無水アルコールを30容量％の量で加えそ
していくらかの外来の核酸を含有するその沈殿物
ないしは擬集物を遠心分離により分離した。 この上澄みに80容量％の冷無水アルコールを加
えそして多糖を含有する沈殿物を遠心分離した。
得られた固体ペレツトを乾燥し、そして0.01Mト
リス（ヒドロキシメチルアミノメタン）塩酸塩、
0.001M塩化カルシウムおよび0.001M塩化マグネ
シウムを含有するPH7.3の緩衝溶液に懸濁した。
この懸濁液を0.5ｇ／の濃度でリボヌクレアー
ゼとデオキシリボスクレアーゼを用いて37℃で３
時間ずつ２回分解させ、次に1.0ｇ／の濃度で
プロナーゼを用いて２回分解させて所望されない
核酸とタンパクを破壊した。 酵素処理された上記液をPH7.3の0.01Mトリス
塩酸塩で平衡化されたセフアロース4B
（Sepharose 4B）のカラムのクロマトグラフイー
にかけて分留し、低分子サイズ（105以下）の物
質を含有している画分を分離した。高分子サイズ
画分（８〜11×105）を溶離し、１つに集め、そ
して４倍量の無水エタノールと混合し高分子サイ
ズ多糖を沈殿させた。この沈殿物を遠心分離し、
そして凍結乾燥した。しかして、上記に定義した
型抗原の構造単位のくり返しよりなる精製され
た乾燥固体生成物を得た。この方法により、型
菌の各１のロツトから総じて約５乃至15mgの多
糖抗原（mw.0.8〜５×106）が収得された。 低分子サイズの多糖型抗原のために従来技術
で用いられているのと同じ方法を用いて採収され
た菌を抽出することによつて上記と同じ分子サイ
ズの抗原が少量であるが得られた。一般的に、菌
の各１から約１乃至４mgの抗原がこの方法によ
つて収得された。 上記と同様にして、ただし型の代りに他の型
のＢ群連鎖鎖状球菌を用いて、その他の型に特異
性を持つ抗原が得られた。 型の代りにａ型またはｃ型Ｂ群連鎖状球
菌を用いた場合では、乾燥固体形状で得られた精
製高分子サイズ多糖抗体は0.8〜５×106dの分子
サイズを有している。型の代りに型Ｂ群連鎖
状球菌を上記方法に用いると、乾燥固体形状で得
られる精製された高分子サイズ多糖抗体はその主
たる化学成分としてシアル酸、ガラクトース、グ
ルコースおよびグルコースアミンを含みそして
0.8〜５×106dの分子サイズを有する。これは上
述したランスフイールドの方法で試験すると、
型および型多糖抗原と免疫学的に区別される。 ワクチンとして使用する場合には、上記により
得られた乾燥型多糖抗原の100μｇ／mlを標準
食塩溶液に含有する懸濁物を調製し、これを0.5
mlの量で皮下注射する。本発明により製造された
高分子サイズの多糖抗原を低分子サイズ（５〜６
×105）の多糖抗原を共に高い免疫産出作用を有
し、選択されたワクチン注射を受けた者の中に特
定抗体を0.1乃至2000μｇ／ml坑血清の割合でつく
り出す。これは栄養ブイヨンにトリチウム化した
酢酸エステルを導入して内在的に標識を付した多
糖抗原をトレーサとして用いた抗血清の放射線免
疫分析によつて測定できる。まれには非免疫化さ
れた成人がその血清に非常に高いレベルで型特異
性抗体を有していることがあるが、きわめて大き
い集団から選別してその人が血漿が積極的免疫に
有用な十分に高い力価を持つガンマ画分をつくる
ためのプールしうるような人達を選択することが
必要であろう。非免疫化された成人からプールさ
れたガンマグロブリンのいくつかのロツトを抗
型多糖抗体について分析試験した結果では、わず
かに５〜20μ／mlの血清を含有しているにすぎな
いことが判つている。このような低い力価のグロ
ブリンを静脈注射して免疫を得るには悪い反作用
の危険を伴なう禁止的大量の投与が必要になる。 栄養ブイヨンから得た、あるいは上記のように
型菌を抽出して得た0.5〜６×106の分子サイズ
を持つ多糖抗原をワクチン注射された選択された
人達の血清をプールすれば、200μｇ／mlあるい
はそれ以上の特異的抗体濃度を持つものが容易に
得られる。このような高い力価のプールされ、濃
縮された血清は通常の方法で容易に分別して最大
限に多量の型特異性抗体を含み且つ少なくとも
2000μｇ／mlの比活性をもつ十分に高活性のグロ
ブリンを得さしめる。以下、この力価の多糖抗原
に対する抗体を得るための具体的実験プロセスを
記載する。 50μｇの上記多糖抗原が、50のヒト個体（ボラ
ンテイア）に皮下投与された。免疫前及び免疫後
４週間の血清が集められた。これら免疫前後の血
清における抗体レベルを放射線源を用いる抗原結
合アツセイによつて測定された。本アツセイにお
いては、外部的にラベルされた多糖抗原の100μ
ｇ（多糖抗原10nｇを含有する。）が血清100μｇ
に対して加えられた。この混合物を室温で１時
間、４℃で一晩インキユーベートした。抗体を冷
却飽和硫酸アンモニウム（50％ｖ／ｖ）を用い
て、沈降させた。上清に残存する非沈降多糖抗原
のカウント数は、抗体濃度に反比例する。上記免
疫された50個体の内15個体の血清は、少なくとも
200μｇ／mlの比抗体濃度を有した。血漿が血液
から分離されプールされた。標準免疫グロブリン
プールを調整し免疫グロブリンを濃縮した。この
濃縮免疫グロブリンは、2000μｇ／mlの比抗体濃
度を有した。したがつて、これにより得た過度免
疫グロブリンは適当な生理学的に許容されるキヤ
リヤーたとえば標準食塩溶液に溶解して皮下注射
または筋肉注射により投与された場合には0.3乃
至１ml、好ましくは約0.5mlの小量の投与で効果
を発揮し、例えば感染又は潜在感染新生児に対し
て、治療上又は十分な抗体を与える。キヤリヤー
中のこのグロブリンの濃度は５乃至20重量％であ
りうる。本過度免疫グロブリンは受動積極免疫を
与えるために妊娠している女性にもその分娩前に
投与することができ、また生後１ケ月以内の乳児
にも投与することができる。 上記と同様の効果は前記のごとくして製造され
たＢ群連鎖状球菌の他の型に特異性を持つ抗原を
用いても得ることができる。
氏ブイヨンを入手した。成分 ｇ／ 牛心臓浸出物（過したもの）（固体） 500 ネオペプトン（固体） 20 デキストロース ２ 塩化ナトリウム ２ 二リン酸ナトリウム 0.4 炭酸ナトリウム 2.5 このブイヨンを適当な膜を通して蒸留水に対し
て透析して100000d以上の分子サイズを有する成
分をすべて分離した。次いでオートクレーブに入
れて殺菌しそしてさらに14ｇ／の無菌グルコー
スをそのブイヨンに溶解した。 Ｂ群型連鎖鎖状球菌の入つた培養フラスコの
内容物を上記ブイヨンに導入して菌を植えそして
PH滴定によりそのPHを6.8乃至7.6の範囲内に継続
的に保持しながら該ブイヨン中で室温において菌
培養を行なつた。菌の量が３×108菌／を超過
した時に、その菌を遠心分離により採収した。 残存上澄みブイヨンを105d以上の分子サイズを
有するすべての物質を保留しつつ限外過により
１／10容量まで濃縮し、そして次に低分子サイズ
成分を除去するため蒸留水に対して徹底的に透析
した。冷無水アルコールを30容量％の量で加えそ
していくらかの外来の核酸を含有するその沈殿物
ないしは擬集物を遠心分離により分離した。 この上澄みに80容量％の冷無水アルコールを加
えそして多糖を含有する沈殿物を遠心分離した。
得られた固体ペレツトを乾燥し、そして0.01Mト
リス（ヒドロキシメチルアミノメタン）塩酸塩、
0.001M塩化カルシウムおよび0.001M塩化マグネ
シウムを含有するPH7.3の緩衝溶液に懸濁した。
この懸濁液を0.5ｇ／の濃度でリボヌクレアー
ゼとデオキシリボスクレアーゼを用いて37℃で３
時間ずつ２回分解させ、次に1.0ｇ／の濃度で
プロナーゼを用いて２回分解させて所望されない
核酸とタンパクを破壊した。 酵素処理された上記液をPH7.3の0.01Mトリス
塩酸塩で平衡化されたセフアロース4B
（Sepharose 4B）のカラムのクロマトグラフイー
にかけて分留し、低分子サイズ（105以下）の物
質を含有している画分を分離した。高分子サイズ
画分（８〜11×105）を溶離し、１つに集め、そ
して４倍量の無水エタノールと混合し高分子サイ
ズ多糖を沈殿させた。この沈殿物を遠心分離し、
そして凍結乾燥した。しかして、上記に定義した
型抗原の構造単位のくり返しよりなる精製され
た乾燥固体生成物を得た。この方法により、型
菌の各１のロツトから総じて約５乃至15mgの多
糖抗原（mw.0.8〜５×106）が収得された。 低分子サイズの多糖型抗原のために従来技術
で用いられているのと同じ方法を用いて採収され
た菌を抽出することによつて上記と同じ分子サイ
ズの抗原が少量であるが得られた。一般的に、菌
の各１から約１乃至４mgの抗原がこの方法によ
つて収得された。 上記と同様にして、ただし型の代りに他の型
のＢ群連鎖鎖状球菌を用いて、その他の型に特異
性を持つ抗原が得られた。 型の代りにａ型またはｃ型Ｂ群連鎖状球
菌を用いた場合では、乾燥固体形状で得られた精
製高分子サイズ多糖抗体は0.8〜５×106dの分子
サイズを有している。型の代りに型Ｂ群連鎖
状球菌を上記方法に用いると、乾燥固体形状で得
られる精製された高分子サイズ多糖抗体はその主
たる化学成分としてシアル酸、ガラクトース、グ
ルコースおよびグルコースアミンを含みそして
0.8〜５×106dの分子サイズを有する。これは上
述したランスフイールドの方法で試験すると、
型および型多糖抗原と免疫学的に区別される。 ワクチンとして使用する場合には、上記により
得られた乾燥型多糖抗原の100μｇ／mlを標準
食塩溶液に含有する懸濁物を調製し、これを0.5
mlの量で皮下注射する。本発明により製造された
高分子サイズの多糖抗原を低分子サイズ（５〜６
×105）の多糖抗原を共に高い免疫産出作用を有
し、選択されたワクチン注射を受けた者の中に特
定抗体を0.1乃至2000μｇ／ml坑血清の割合でつく
り出す。これは栄養ブイヨンにトリチウム化した
酢酸エステルを導入して内在的に標識を付した多
糖抗原をトレーサとして用いた抗血清の放射線免
疫分析によつて測定できる。まれには非免疫化さ
れた成人がその血清に非常に高いレベルで型特異
性抗体を有していることがあるが、きわめて大き
い集団から選別してその人が血漿が積極的免疫に
有用な十分に高い力価を持つガンマ画分をつくる
ためのプールしうるような人達を選択することが
必要であろう。非免疫化された成人からプールさ
れたガンマグロブリンのいくつかのロツトを抗
型多糖抗体について分析試験した結果では、わず
かに５〜20μ／mlの血清を含有しているにすぎな
いことが判つている。このような低い力価のグロ
ブリンを静脈注射して免疫を得るには悪い反作用
の危険を伴なう禁止的大量の投与が必要になる。 栄養ブイヨンから得た、あるいは上記のように
型菌を抽出して得た0.5〜６×106の分子サイズ
を持つ多糖抗原をワクチン注射された選択された
人達の血清をプールすれば、200μｇ／mlあるい
はそれ以上の特異的抗体濃度を持つものが容易に
得られる。このような高い力価のプールされ、濃
縮された血清は通常の方法で容易に分別して最大
限に多量の型特異性抗体を含み且つ少なくとも
2000μｇ／mlの比活性をもつ十分に高活性のグロ
ブリンを得さしめる。以下、この力価の多糖抗原
に対する抗体を得るための具体的実験プロセスを
記載する。 50μｇの上記多糖抗原が、50のヒト個体（ボラ
ンテイア）に皮下投与された。免疫前及び免疫後
４週間の血清が集められた。これら免疫前後の血
清における抗体レベルを放射線源を用いる抗原結
合アツセイによつて測定された。本アツセイにお
いては、外部的にラベルされた多糖抗原の100μ
ｇ（多糖抗原10nｇを含有する。）が血清100μｇ
に対して加えられた。この混合物を室温で１時
間、４℃で一晩インキユーベートした。抗体を冷
却飽和硫酸アンモニウム（50％ｖ／ｖ）を用い
て、沈降させた。上清に残存する非沈降多糖抗原
のカウント数は、抗体濃度に反比例する。上記免
疫された50個体の内15個体の血清は、少なくとも
200μｇ／mlの比抗体濃度を有した。血漿が血液
から分離されプールされた。標準免疫グロブリン
プールを調整し免疫グロブリンを濃縮した。この
濃縮免疫グロブリンは、2000μｇ／mlの比抗体濃
度を有した。したがつて、これにより得た過度免
疫グロブリンは適当な生理学的に許容されるキヤ
リヤーたとえば標準食塩溶液に溶解して皮下注射
または筋肉注射により投与された場合には0.3乃
至１ml、好ましくは約0.5mlの小量の投与で効果
を発揮し、例えば感染又は潜在感染新生児に対し
て、治療上又は十分な抗体を与える。キヤリヤー
中のこのグロブリンの濃度は５乃至20重量％であ
りうる。本過度免疫グロブリンは受動積極免疫を
与えるために妊娠している女性にもその分娩前に
投与することができ、また生後１ケ月以内の乳児
にも投与することができる。 上記と同様の効果は前記のごとくして製造され
たＢ群連鎖状球菌の他の型に特異性を持つ抗原を
用いても得ることができる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 本質的に下記製成単位 ［上記において、GlcNAcpはＮ−アセチルグ
ルコースアミン（ピラノース型）、Galpはガラク
トース（ピラノース型）、Glcpはグルコース（ピ
ラノース型）そしてα−Ｄ−NANAはシアル酸
を意味する］の繰り返しからなり、0.8×106以上
の分子サイズを有する、Ｂ群型連鎖状球菌に特
異性のある精製された形態の多糖抗原。 ２ 連鎖状球菌を栄養ブイヨン中で培養すること
よりなる、Ｂ群型連鎖状球菌に対する多糖ワク
チンとして使用するための抗原の製造法におい
て、該栄養ブイヨンに少なくとも10ｇ／のグル
コースを導入してそして該栄養ブイヨンのPHの６
乃至８に保持して0.8×106以上の分子サイズを有
する断片を含む多糖抗原を得ることを特徴とする
方法。 ３ 該連鎖状球菌の培養中に栄養ブイヨンにアル
カリ性物質を導入して該PH値を維持することを特
徴とする特許請求の範囲第２項に記載の方法。 ４ 該PH値を6.8乃至7.6に維持することを特徴と
する特許請求の範囲第２項に記載の方法。 ５ グルコースの量を約14乃至16ｇ／とするこ
とを特徴とする特許請求の範囲第２項に記載の方
法。 ６ 培養の開始時に栄養ブイヨンから105以上の
分子サイズを有する成分を除きそして連鎖状球菌
の採集後に８×105乃至11×105の範囲の分子サイ
ズを有する断片を含む多糖抗原を回収することを
特徴とする特許請求の範囲第２項に記載の方法。 ７ ３×104以上の分子サイズを有する成分を栄
養ブイヨンから除きそして14乃至16ｇ／の濃度
を与える量のグルコースを添加することを特徴と
する特許請求の範囲第２項に記載の方法。 ８ 本質的に下記組成単位 ［上記において、GlcNAcpはＮ−アセチルグ
ルコースアミン（ピラノース型）、Galpはガラク
トース（ピラノース型）、Glcpはグルコース（ピ
ラノース型）、Glcpはグルコース（ピラノース
型）そしてα−Ｄ−NANAはシアル酸を意味す
る〕の繰り返しからなり、0.8×106以上の分子サ
イズを有する、Ｂ群型連鎖状球菌に特異性のあ
る精製された形態の多糖抗原を10乃至1000μｇ／
mlを含有している生理学的に許容される非毒性ビ
ヒクルよりなることを特徴とするＢ群型連鎖状
球菌に対するワクチン。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/934,214 US4207414A (en) | 1978-08-16 | 1978-08-16 | Polysaccharide antigens |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5533474A JPS5533474A (en) | 1980-03-08 |
| JPH0351692B2 true JPH0351692B2 (ja) | 1991-08-07 |
Family
ID=25465175
Family Applications (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10364779A Granted JPS5533474A (en) | 1978-08-16 | 1979-08-16 | Vaccine and its manufacture |
| JP63197290A Expired - Lifetime JPH0674211B2 (ja) | 1978-08-16 | 1988-08-09 | Ｂ群ＩａＩｃ型連鎖状球菌特異性多糖抗原 |
| JP63197291A Granted JPS6485925A (en) | 1978-08-16 | 1988-08-09 | B group ii type streptococci idiosyncratic polysaccharide antigen |
Family Applications After (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63197290A Expired - Lifetime JPH0674211B2 (ja) | 1978-08-16 | 1988-08-09 | Ｂ群ＩａＩｃ型連鎖状球菌特異性多糖抗原 |
| JP63197291A Granted JPS6485925A (en) | 1978-08-16 | 1988-08-09 | B group ii type streptococci idiosyncratic polysaccharide antigen |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4207414A (ja) |
| EP (1) | EP0008969B1 (ja) |
| JP (3) | JPS5533474A (ja) |
| AT (1) | ATE7761T1 (ja) |
| CA (1) | CA1154382A (ja) |
| DE (1) | DE2967036D1 (ja) |
| DK (1) | DK341679A (ja) |
Families Citing this family (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4324887A (en) * | 1978-08-16 | 1982-04-13 | President And Fellows Of Harvard College | Type II group B Streptococci polysaccharide |
| US4439422A (en) * | 1980-01-02 | 1984-03-27 | Research Corporation | Group B Streptococcus antigens and vaccines |
| IE51174B1 (en) * | 1980-04-14 | 1986-10-29 | Merck & Co Inc | Group b streptococcal capsular polysaccharides |
| US4413057A (en) * | 1980-04-14 | 1983-11-01 | Merck & Co., Inc. | Group B streptococcal capsular polysaccharides |
| US4396763A (en) * | 1981-01-14 | 1983-08-02 | Meiji Milk Products Company Limited | High molecular polysaccharide MPS-80 |
| US4425330A (en) | 1981-05-20 | 1984-01-10 | Cornell Research Foundation, Inc. | Bovine mastitis vaccine and method for detecting efficacy thereof |
| US4476119A (en) * | 1981-08-04 | 1984-10-09 | Fidia S.P.A. | Method for preparing ganglioside derivatives and use thereof in pharmaceutical compositions |
| US4716223A (en) * | 1981-08-04 | 1987-12-29 | Fidia, S.P.A. | Method for preparing ganglioside derivatives and use thereof in pharmaceutical compositions |
| WO1987006267A1 (en) * | 1986-04-16 | 1987-10-22 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Bacterial antigens, antibodies, vaccines, and methods of manufacture |
| US5302386A (en) * | 1986-04-16 | 1994-04-12 | Brigham And Women's Hospital, Inc. | Bacterial antigens, antibodies, vaccines and methods of manufacture |
| FR2627779B1 (fr) * | 1988-02-26 | 1991-03-15 | Sodima Union Coop Agricoles | Procede d'epaississement d'un produit du type lait fermente, notamment de yaourt et nouveau polysaccharide utile pour la mise en oeuvre de ce procede |
| US5648241A (en) * | 1989-09-15 | 1997-07-15 | The General Hospital Corporation | Conjugate vaccine against group B streptococcus |
| US5212075A (en) * | 1991-04-15 | 1993-05-18 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for introducing effectors to pathogens and cells |
| DE69330464T2 (de) * | 1992-09-24 | 2001-11-08 | Brigham And Women S Hospital B | Gruppe b streptococcus typ ii und typ v polysaccharid-protein konjugate als impfstoffe |
| ZA937034B (en) * | 1992-09-24 | 1995-06-23 | Brigham & Womens Hospital | Group B streptococcus type II and type V polysaccharide-protein conjugate vaccines |
| US6284884B1 (en) | 1995-06-07 | 2001-09-04 | North American Vaccine, Inc. | Antigenic group B streptococcus type II and type III polysaccharide fragments having a 2,5-anhydro-D-mannose terminal structure and conjugate vaccine thereof |
| US6426074B1 (en) * | 1997-03-19 | 2002-07-30 | The Brigham And Women's Hospital Inc. | Group B Streptococcus vaccine |
| US7204993B2 (en) * | 2004-03-18 | 2007-04-17 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Streptococcus agalactiae vaccine |
| US7858101B2 (en) | 2004-11-01 | 2010-12-28 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Modified streptococcal polysaccharides and uses thereof |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE191752C (ja) * | ||||
| CH131283A (de) * | 1928-03-06 | 1929-01-31 | Elektro Osmose Aktiengesellsch | Verfahren zur Reindarstellung von spezifischem Streptokokken-Pseudoglobulin aus Blutserum, sowie aus Exsudaten und Transsudaten erkrankter Individuen. |
| US3301848A (en) * | 1962-10-30 | 1967-01-31 | Pillsbury Co | Polysaccharides and methods for production thereof |
| US3856775A (en) * | 1969-07-14 | 1974-12-24 | Ajinomoto Kk | {62 -(1{43 3)-glucans |
-
1978
- 1978-08-16 US US05/934,214 patent/US4207414A/en not_active Ceased
-
1979
- 1979-08-07 CA CA000333322A patent/CA1154382A/en not_active Expired
- 1979-08-13 DE DE7979400567T patent/DE2967036D1/de not_active Expired
- 1979-08-13 AT AT79400567T patent/ATE7761T1/de not_active IP Right Cessation
- 1979-08-13 EP EP79400567A patent/EP0008969B1/en not_active Expired
- 1979-08-15 DK DK341679A patent/DK341679A/da not_active Application Discontinuation
- 1979-08-16 JP JP10364779A patent/JPS5533474A/ja active Granted
-
1988
- 1988-08-09 JP JP63197290A patent/JPH0674211B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-08-09 JP JP63197291A patent/JPS6485925A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5533474A (en) | 1980-03-08 |
| EP0008969A2 (en) | 1980-03-19 |
| JPH0561255B2 (ja) | 1993-09-06 |
| JPS6485924A (en) | 1989-03-30 |
| CA1154382A (en) | 1983-09-27 |
| ATE7761T1 (de) | 1984-06-15 |
| DE2967036D1 (en) | 1984-07-12 |
| DK341679A (da) | 1980-02-17 |
| JPS6485925A (en) | 1989-03-30 |
| JPH0674211B2 (ja) | 1994-09-21 |
| EP0008969A3 (en) | 1980-08-06 |
| US4207414A (en) | 1980-06-10 |
| EP0008969B1 (en) | 1984-06-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0351692B2 (ja) | ||
| US4496538A (en) | Haemophilus influenzae b polysaccharide-diphtheria toxoid conjugate vaccine | |
| Verwey | A type-specific antigenic protein derived from the Staphylococcus | |
| Baker et al. | Studies on immunization against plague: I. The isolation and characterization of the soluble antigen of Pasteurella pestis | |
| US4459286A (en) | Coupled H. influenzae type B vaccine | |
| CA1272952A (en) | Glycoproteinic conjugates having trivalent immunogenic activity | |
| CA1155057A (en) | Vaccine and method of making | |
| Felton et al. | Pneumococcal antigenic polysaccharide substances from animal tissues | |
| US4816253A (en) | Novel mutant strain of Listeria monocytogenes and its use in production of IgM antibodies and as an immunotherapeutic agent | |
| US4644059A (en) | Haemophilus influenzae B polysaccharide-diptheria toxoid conjugate vaccine | |
| EP0120532B1 (en) | Mucoid exopolysaccharide vaccine against pseudomonas aeruginosa | |
| EP0302887B1 (en) | Bacterial antigens, antibodies, vaccines, and methods of manufacture | |
| US4567041A (en) | Mutant strain of Listeria monocytogenes and its use in production of IgM antibodies and as an immunotherapeutic agent | |
| Anderson et al. | Isolation of the capsular polysaccharide from culture supernatant of Haemophilus influenzae type b | |
| US5989542A (en) | Capsular polysaccharides from enterococci | |
| US4367222A (en) | Immune globulin specific to Group B streptococci | |
| US4356263A (en) | Method of making a polysaccharide vaccine | |
| US4367223A (en) | Vaccine against Group B streptococci | |
| US4367221A (en) | Immunization against Group B streptococci | |
| US4220638A (en) | Antigenic complex from N. Gonorrhoeae | |
| US3674863A (en) | Polyvalent immunizing agents and methods for their production | |
| Tai et al. | Haemophilus influenzae type b polysaccharide-protein conjugate vaccine | |
| USRE31672E (en) | Polysaccharide antigens | |
| US3542920A (en) | Tetanus vaccine and process for preparing it | |
| US6722062B2 (en) | Capsular polysaccharides from enterococci |