JPH0341086A - 新規酸性多環式エーテル抗生物質およびその製造に有用な微生物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

皮果±曵赴足公立 本発明は新規酸性多環式エーテル抗生物質およびその医
薬として適当なカチオン塩に関する。本発明はまた新規
ｌ」乙ｌ二ＬＺ：乙二□　−只」蔓４Ｊ二Ｚｚ（Ａｃｔ
ｉｎｏｍａｄｕｒａ　　皿廷鮭吐吐微生物にも関する。 さらに、本発明は新規酸性多環式エーテル抗生物質およ
び既知の酸性多環式エーテル抗生物質ＵＫ−５８，８５
２を製造する方法に関する。さらにまた本発明の新規抗
生物質を動物へ投与することによる。 家禽類のコクシジウム症、家畜の腸炎および豚の赤痢の
制御のための方法に関する。本発明はまた本発明の新規
抗生物質を含む栄養飼料成分および本発明の新規抗生物
質を投与することによる、反ヒ３動物または単胃動物に
おける生育の促進および／または飼料利用の効率の改良
にも関する。 災米匁技藷 酸性多環式エーテル抗生物質はミトコンドリアにおける
陽イオン移送に対する効果により特徴付けられる一群の
化合物である。この抗生物質の群にはモネンシン；ニゲ
リシン；グリソリキシン；ディアネマイシン；サリノマ
イシン；ムタロマイシン；イオノマイシンおよびロイセ
ラマイシンのごとき良く知られた薬剤が含まれる。この
課題については−ｅｓｔｌｅｙにより総括されている“
ポリエーテル抗生物質１、＾ｄｖ、　Ａｐｐｌ、　Ｍｉ
ｃｒｏｂｉｏｌ、、　２２゜１７７、１９７７゜ すぐ前にリストした多環式エーテルはグラム陽性細菌、
菌類および原虫に対して活性がある。特にこれらの抗生
物質は強力な抗−コクシシア活性を示す。それ故これら
は種々の動物感染の処置において種々の成功度で用いら
れてきた。 圭光旦空ｒ　しよ゛と−る。１焉玄 良く知られた原虫疾患であるコクシジウム症は引き続き
重大な問題であり、その制御は獣医科学特に家禽産業に
とって経ｌ斉的に重要である。コクシジウム症は１つま
たはそれ以上のエイメリアまたはイソスポラの種の感染
の結果である（要約としてＬｕｎｄおよびＦａｒｒ“飼
料類の疾病”第５版、ＢｉｅｓＬｅｒおよびＳｃｈｗａ
ｒｔｅ編集、アイオア州立大学出版、エームス、ｌａ、
　１９６５　ｐｐ、１０５（ｉ−１０９６を参照された
い）。感染ニワトリに容易に認識できる病的状態をつく
り出すコクシジアの６つの種がある。 ヱ乙１ニア　　ｉ　（Ｅｉｍｅｒｉａ　　ｔｅｎｅｌｌ
ａ）、　　Ｅ。 主土上ｌｔ五（ｎｅｃａｔｒｉｘ）　、Ｅ、　７’灰迷
工之工（ｂｒｕｎｅｔｔｉ）　、Ｅ、ヱ立上１ユ±（ａ
ｃｅｒｖｕｌｉｎａ）、旦、マキシマ（ｎ紅辺）および
旦、主ヱしたＬ（Ｌｕ旦）は消化２１の上皮細胞の分解
により直接的にまたは毒素の産生を通して間接的に障害
を生み出す。同一の属に属してる３つの他の原虫の種は
相対的には無害である；しかしながら旦、マ孟土去（姐
旦紅、旦、ム逆三（ｎｕ紅）および旦。 １立主２ユｊ込（ｕ匹並立は体重増加を減少させ、飼料
効率を低下させ、非生産に悪影響を及ぼす。 コクシジウム症による多大な経済的損失および存在する
抗−コクシシア剤の既知の欠点などを考えるとより良い
抗−コクシシア剤のための研究を続けなければならない
。 腸炎は家畜生産者に重大な経済的ｌ置火を与えることが
できる別の疾病である。腸炎はニワトリ、ブタ、ウシお
よびヒツジに発生し、主として嫌気的細菌特に２２工２
」二丈ｊ七Σ必、ニニヱ生ｌ乏五ｌ茎（ｃｌｏｓｔｒｉ
ｄｉｕｍ　　匹吐吐岨並紅およびウィルスにより起こさ
れる。腸管毒血症（その例としてはヒツジにおける“°
過食症“）は旦、とニヱ１１乏王ｌ五（とシｈジ１駐Ｉ
Ｄ−感染により引き起こされる状態である。 ブタ赤痢は米国において診断される最も普通のブタ疾病
の１つである。さらにこの疾病は多くの他の国でも流行
しており、毎年世界中のブタ育成者に対し財産のかなり
の損失を起こさせている。 最近大きなスピロヘータがこの疾病の原因微生物である
ことが発見された。この微生物、−ヒヒ萌玉ヱ　ヒオー
°　セン−１工（■並射コａｊヱ嵯社Ｌｎｔｅｒｒｉａ
ｅ）は現在分離されており、この疾病を起こすことがで
きることが示されている（ｈｒｒｉｓ。 Ｄ、Ｌ、ら、“ブクー赤痢〜１、」・レボネマ　杢ｔヱ
土量ｌ±土主（ｋ肚並ｅｍａ　　ｈｙ、延註飢にヱｎ蛙
（新種）のブタへの接種および疾病の再現”　Ｖｅｔ。 Ｍａｄ／ＳＡＣ，６７、６１−６４，１９７２）　、工
、Ｌエヱエ皇ｌ±１孟（ｈ　ｏｄ　５ｅｎｔｅｒｒｉａ
ｅがブタ赤痢の唯一の原因微生物かどうかは知られてい
ないことは注意されたい。しかしながら入手可能なデー
タからはそれが主とした感染源であることは結論できる
であろう。畜牛のごとき反初動物およびブタのごとき単
一胃動物における成果促進（成長の速度の増加および／
または飼料利用効率の増加）は獣医科学の別の経済的に
望ましい目的である。特に興味があることは飼料利用の
効率の増加により改良された成果が達成されることであ
る。反契飼料の主栄養部分の利用の機構はよく知られて
いる。動物の第一胃中の微生物が炭水化物を分解して単
ｔＪ！Ｍを産生し、その後これらの単糖類をピルビン酸
化合物へ変換する。ピルビン酸類は微生物学的過程によ
り代謝され酢酸、酪酸、プロピオン酸（集合的に揮発性
脂肪酸として知られている）を生成する。 より詳細なｌλ論は１、ｅｎｇによる“反召動物にお番
する消化および代謝の生理学”　ｐｈｉｌｌｉｐｓｏｎ
ら編、オリエール出版、ニューキャッスルーアボンータ
イン、英国、１９７０Ｓｐｐ、４０８−４１０、を参照
されたい。 揮発性脂肪酸利用の相対的効率はＭｃＣｕ　ｌ　ｔｏｕ
ｇｈによる“飼料°゛６月１月日９日９７１．ベージ１
９　；　ＥｓｋｃｌａｕｔＪ　らによるＪ、Ａｎ、Ｓｃ
ｉ、、　３３．２８２．１９７１　；およびＣｈｕｒｃ
ｈらによる“反舞動物の消化生理学および栄養“第２巻
、１９７１．　ｐρ４６２２および６２５に記載されて
いる。酢酸および酪酸はもちろん利用されるが、プロピ
オン酸はより著しい効率で利用されている。 さらにプロピオン酸がほとんどない場合、動物はケト−
シスを起こす。それ故有益な化合物は動物の炭水化物か
らのより高い比率でのブ［１ピオン酸の産生を刺激し、
それにより炭水化物利用効率を増加させるとともにケト
−シスの発生率を低下させている。 家畜生産者に経済的損失を起こさせるさらに別の疾病は
原虫寄生体ｌ土乞ユヱ　バルバ（ＴｈｅｉＬｅｒｉａ　
　ｐａｒｖａ）により起こされるものである。その病気
、タイレリア症、はまた゛東海産熱°“　　°′海岸熱
”または“ローデシアだに熱゛としても知られている。 −１こ失１−（月狭土りシ１０−寄生体は赤血球に侵入
するがそれを破壊はしないため、急性または慢性熱性感
染を起こす。畜牛においてこの病気は、高熱、リンパ節
腫張、痩せ、および高死亡率により特徴付けられている
。この病気は西および中央アフリカにおいては非′帛に
重大な問題である。さらには°“メルク獣医学マニュア
ル”　ＳｉｅＨｍｕｎｄ　ら編、メルク＆Ｃｏ、ラーウ
ェー、Ｎ、Ｊ、、第５版、ｐｐ４３１−４３３（ｂ９７
９）を参照されたい。 １、　　”°ｔ　る−めの−段 米国特許第４，７４６，６５０号は沈水好気条件下水性
栄養培地中でのｌｚ乙土シ仁Ｚ二乙ラう　−只」（丈Ｊ
乙Ｚｘ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　□ｔｌｕａｎｇ
　Ｓｐ、ｎｏｖ、、ＡＴＣＣ３９６９７の培養によるＩ
ＩＬ５８．８５２の製造について記載している。そこに
記載されているＵＫ−５８，８５２は弐 （ｂ） の新現酸性多環式エーテルとして記載されている。 また前記１３−Ｌｌ二（ｌｊ−旦ｊ〕コヒ乙Ｌ（ＡＣ旦
り聾赳肛ＬｒｏｓｅｏｄＨｕａｎｇ　Ｓｐ、ｎｏｖ、、
　ＡＴＣＣ３９６９の発醇で２つの関連した少量成分も
産生され、それらの各々はコクシリア症の制御に抗生物
質として有効である。２つの微少成分は下記の式（ＩＩ
）の構造であり、各々、式中ＲはＨであり、ｉｌｌはＣ
１１，であり；およびＲおよびＲ’は両方ともＣＨ，で
あ（ＩＩ） 本発明は式 （） の構造を持つ、ＣＰ−９１，２４３およびＣＰ−９１２
４４とココで称される２つの新規酸性多゛環弐エーテル
に関し、式中抗生物質ＣＰ−９１２４３においてＲはＨ
であり、抗生物質ＣＰ−９１，２４４においてはＲはＣ
１１３である。前記抗生物質の医薬として適当なカチオ
ン塩もまた本発明の範囲内に含まれる。さらに本発明は
ＡＴＣＣ５３６６６の同定特性を持つヱ迭乏／？ス旦　
旦亙土、夾１１（Ａｃｔ：ｎｏｍａｄｕｒａ　　ｒｏｓ
ｅｏｒｕ工社から得られる突然変異体であるある種の新
規微生物にも関する。 本発明の新規微生物は培養によりＣＰ−９１，２４３お
よび／またはＣＩ’−９１，２４４を産生ずることがで
きる。 ２つのそのような新規微生物はＡＴＣＣ５３８６９およ
びＡＴＣＣ５３８１０の同定時１）Ｌを持つヱｌ土１１
３ｊ　旦３　（ＡｃｔｉｎｏＩＩｌＢｄｕｒａ　　ｒｏ
ｓｅｏｒｕｆａ）である。 本発明はまた培養によりＣＰ−９１，２４３および／ま
たはＣＰ−９１，２４４を産生できる前記新規微生物の
さらなる突然変異体、形質転換体および組換え体にも関
する。さらにまだ、本発明はＡＴＣＣ５３６６６の同定
特性を持つヱノチノマ゛ゾｌ　旦亙主酉ヱＬ（紅旦ｎｏ
ｍａｄｕｒａ　　ｒｏｓｅｏｒｕｆａ）から得られる突
然変異体、そのさらなる突然変異体、形質転換体および
＆１え体である新規微生物に関し、それらすべてが培養
によりＣＰ−９１，２４３および／またはＣＰ−９１，
２４４の産生に加えてＵＫ−５８，ＦＩ５２もまた産生
ずる。まだ、さらに本発明は本発明のｉ規微生物の培養
によるＣＰ−９１，２４３、ＣＰ−９１，２４４および
既知の酸性多環式エーテル抗生物ＭＵＫ−５８，８５２
を製造する方法にも関している。本発明はまた、動物に
ＣＰ−９１２４３および／またはｃｐ−９１，２４４を
単独で、またはＵＫ−５８゜８５２と組合わせて投与す
ることによる飼鳥類のコクシジア感染、ニワトリ、豚、
若生および羊のごとき家畜の腸炎および啄赤痢を押える
ための方法に関する。動物にＣＰ−９１，２４３および
／またはｃｐ２＋、２４４を個々に、または各々お互い
とおよび／またはＵＫ−５８，８５２と組合わせて投与
し、反羽動物および単一胃動物における生育および／ま
たは飼料利用を促進するための方法も本発明の範囲内で
ある。さらにまた、本発明はＣＰ−９１，２４３および
／またはＣＰ−９１，２４４単独または１ＩＬ５８，８
５２との絹合せからなる栄養飼料！Ｊｌ成物も請求の範
囲に含んでいる。 ここでおよび付随する特許請求の範囲で使用されている
術語“″・・・・同定特性を持つアクチとヱｊｉ３　（
Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　ｒｏｓｅｐ□、”にはそ
のような術語が示ず実際のＡＴＣＣ寄託培養物のみなら
ず、そのような術語で示される寄託培養物として同一の
同定特性を持つヱ之±Ｌヱ１立旦３　（ＡｃｔｉｎｏＩ
Ｉｌａｄｕｒａ　　ｄの任意の他の微生物も同様に含ま
れるであろう。 新規酸性多環エーテル抗生物質ＣＰ−９１，２４３およ
びＣＰ−９１，２４４は、以下に記載するごと＜　ＡＴ
ＣＣ５３（ｉ６６の同定特性を持つヱＬ±Ｌニ１立　旦
亙土土ヱエ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　良上四烈１
吐１１ｕａｎｇ　ｓｐ、　ｎｏｖ、の株の突然変異によ
り得られる微生物により産生される。ヱｌ」コ住り乙ｉ
　旦玉〕コヒ乙Ｌ（主ｃａｎツ門抜ｒａ　　ｒ幻■東工
且し！ｌＡ　Ｔ　ＣＣ５３６６６は１９８７年１０月２
６日に出潮され、これについての譲受人に譲渡された出
願人の係属中の米国特許出順第１１３，５６３号に関連
してブタペスト条約の条項ひもとアメリカン　タイツ゛
　カルチ中−コレクシタン、ロックビル、メリーランド
に寄託されている。微生物の一般への利用に対するすべ
ての制限は特許の付与により永久に除去されるであろう
、Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン
（ＮＴＧ）が突然変異誘発剤として使用された。処理さ
れた微生物の単一コロニーをその生産プロフィールで試
験する。−船釣方法は水性栄養培地中、沈水好気条件下
２８°Ｃの温度で振とうしてＡＴＣＣ５３６６６を増殖
することを含んでいる。増殖のための培地の選択は決定
的ではない。 適した培地はセレロース（ｂ０，ｈ）　、コーンスター
チ（５，０ｇ）コーン浸液（５゜Ｏｇ）、Ｎ−Ｚアミン
ＹＴＴ（５，０ｇ）　（カゼインの酵素的消化物の登録
商標、ヒュムコ　シェフイールド　ケミカル　Ｃｏ、Ｉ
ｎｃ、）。 および塩化コバルト（０，００２１Ｘ）からなり、それ
を１リツトルの水に懸濁し、水酸化ナトリウムでｐｌ＋
を７．０に調製し、フエルンハッハ　フラスコに分配す
る（８００ｍ）　、オートクレーブを行って無菌化後、
フラスコに斜面地ｖ１２．濁物または凍結された成長力
のある菌糸を接種し、その後、振とう機上約２００ｒｅ
ｖ　７分でかきまぜながら２８゛Ｃの温度で７〜８日間
インキュベートする。一部５０ｆｆｉｌ！を取り、菌糸
をテフロン乳棒を持つ＆１Ｉｌａ粉砕機で、続いて超音
波細片化により均質化する。細片化した菌糸を遠心分離
し、培地を洗浄し、３００Ｉｎｉのエルジンマイヤーフ
ラスコ中５０ｍの新しい培地に再懸濁し、３２゛Ｃにて
振とうしながら２時間インキュベートする。 その後細胞を再び遠心分離し、洗浄して培地を除き、５
０−のトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン−リ
ンゴ６ＩＩＩｉ衝液、ｐＨ９，０に懸濁する。この懸濁
？夜の一部を１５０ｍｃｇ／ｍｌから１５００ｍｃｇ／
ｄの濃度のＮＴＧと１時間２５０から３００ｒｅｖ／＋
ｉｎで回転水浴振とう機上、３４°Ｃの温度にて処理す
る。処理後、細胞を遠心分離し、突然変異誘発剤を洗浄
して除き、一部を連続的に希釈し、固体栄８培地上に置
き、プレートはコロニー形成単位が斜面培養に移すのに
十分な大きさになるまで２８°Ｃでインキュベートする
。プレートおよび斜面培養に適した培地はＮ−Ｚアミン
Ａ型（ヒュムコ　シェフイールドケミカル　Ｃｏ、Ｉｎ
ｃ、）をＬＯｇ／ｌに減したＡＴＣＣ培地第１７２号で
ある。接種された斜面培養物は２８゛Ｃにて１０から１
４日間放置して増殖させるとその時間の後はすぐ試験で
きる。これは２５−の適した培地（そのような培地の１
つはセレロース、４５．０ｇ　；大豆粉、　ｌＯ，ｏｇ
　；コーン浸出液＋　１５．０　ｇ　；　ＭｎＳＯ４・
＋１！Ｑ、　０．１ｇ　ｉ　ＭｇＳＯ１７１１ｇＯ，０
，１ｇ　Ｆ塩化コバルト０．００２ｇ　；および炭酸カ
ルシウム、　３．０ｇ；　ｌリットルの水および培地の
ｐＨは７．０に調Ｍ）を含む３０〇−のエルレンマイヤ
ーフラスコに接種することにより実施された。１２１℃
にて３０分間オートクレーブして無菌化後、フラスコに
個々の斜面培養増殖懸濁液を接種し、回転振とう機上２
８゛Ｃにて７日間振とうしながらインキュベートする。 突然変異体培養物は採取した全ブイヨンのメチルイソブ
チルケトン抽出液を薄層クロマトグラフィープレート（
シリカゲル）で展開し、バニリン試薬をスプレーした後
ｉｏｏ’ｃに５分間加熱して試験することｌこより検出
する。展開系は９部のクロロホルムに対し１部のメタノ
ールから戒り、Ｒｆ（直はＣＰ−９１，２４３は約０．
２．　ＣＰ−９１，２４４は約０．４およびＵＫ−５８
，８５２に対しては約０．７であった。そのようにして
２つの突然変異培養物をた得、それはＣＰ−９１，２４
３，ＣＰ−９１，２４４およびＵＫ−５８，８５２を産
生ずる。これらの突然変異体はファイザーＩｎｃ、の培
養物収集物においてＦＤ２８４５５およびＦＤ２８５１
８と同定されている。このようにして得られた突然変異
体の形態学的および培養的特性はΔ、旦（２灰１工（ｎ
思肛妊紅ＡＴＣＣ５３６６６に記載されているものと本
質的に同しである。これらの突然変異体の区別特性はそ
れらのＣＦ３Ｉ、２４３およびＣＰ−９１，２４４の混
合物を産生ずる能力である。 突然変異体の培養および抗生物質ＣＰ−９１，２４３お
よびＣＰ−９１，２４４の単離は従前の多環式エーテル
抗生物質を得る発酵に用いられたものと類似の条件下実
施されるであろう０例えば米国特許第４．３６１，６４
９号を参照されたい、培養は好適には水性栄養培地中好
適には沈水好気条件下かきまぜながら２４°Ｃから３６
°Ｃの温度で行われる。培養に有用な栄養培地には糖、
デンプンおよびグリセロールのごとき吸収可能な炭素源
；カゼイン、カゼイン酵素的消化物、大豆ミール、綿実
ミール、ビーナツツミール、小麦グルテン、大豆粉、血
液ミール、肉ミールおよび魚ミールのごとき有機窒素源
を含んでいる。塩化ナトリウムおよび炭酸カルシウムの
ごとき鉱物塩および鉄、マグネシウム、銅、亜鉛、コバ
ルトおよびマンガンのごとき微量元素同様に、穀物可溶
化物、魚ミール綿実池−ルおよび酵母抽出物のごとき増
殖物質源もまた有利な結果では利用されるであろう。発
酵の間に過剰の泡立ちが起こったら、野菜油またはシリ
コンのごとき消泡剤が発酵培地に添加される。沈水地端
のための容器中の培地の通気は好適には１分当り発酵プ
ロスの容景当りＡから２容量の無菌空気の速度でブイヨ
ン内へ噴霧器を通して強制的に行う。かきまぜは発酵分
野の者には一般的ななじみのかきまぜ機により維持され
る。かき混ぜの速度は用いられるかき混ぜ機の型に依存
する０発酵器は通常量当り３００から１７００回転で動
いているがフラスコの振とうば通常量当り３００から７
００の周期で行われる。 もらろん、微生物の移動およびその増殖を通して無菌条
件は維持されなければならない。 本発明に従った抗生物質の製造のための接種材料は本発
明の所望の微生物培養物の斜面培養物からの、または前
記培養物または前記培養物の解凍菌糸懸濁液を接種した
ルー瓶からの増殖物を用いて得られるであろう、斜面お
よびルー瓶上の微生物の初期の増殖に適した固体培地は
＾ＴＣＣ培地第１７２号である。突然変異研究で前に説
明した液体培地は凍結に先立った生長力のある菌糸の調
製に適している。得られる増殖物は振とうフラスコまた
は接種物容器へ接種するために使用されるが、接種物容
器は振とうフラスコから種を得てもよい。 振とうフラスコ中の最大増殖には通常４から８日で達す
るが、一方接種物容器に沈水した接種材料では通常量も
好適な期間である４から５日であろう。 発酵の間の抗生物質産生の進行は前に記載したごとくバ
ニリン試薬でスプレーすることにより可視化された薄層
クロマトグラフィーまたは展開プレートに枯草菌をまい
た脳心臓浸出液寒天を層積し、３７℃で１６時間インキ
エベートして抗生物質を可視化することにより定性的に
モニターできる。 薄層クロマトグラフィーは発酵ブイヨンから抽出された
粗および精製物質の成分の分析にも有用な手段である。 前記突然変異体の発酵により産生される抗生物質ＣＰ−
９１，２４３，ＣＰ−９１，２４４およびＵＫ−５８，
８５２は菌糸中、およびブイヨン中に蓄積され、採取さ
れた全未濾過発酵ブイヨン、即ち全ブイヨンを自然のま
まのｐｌ＋でクロロホルム、酢酸エチル、メチルイソブ
チルケトンまたはブタノールのごとき有機溶媒で抽出す
ることにより分離および回収できる。もしくは容易なら
ないエマルジョンの問題を避けるため菌糸体を分離し、
それと清澄化ブイヨンは個々に有機溶媒で抽出される。 溶媒抽出液を濃縮すると水っぽいシロップとなり、カラ
ムクロマトグラフィーにより純粋なＣＰ−９１，２４３
，ＣＰ−９１，２４４およびＵＫ−５８，８５２を得る
。 本発明の抗生物質の分離および回収の典型的方法は以下
のごとくである：突然変異体の発酵による全ブイヨンが
メチルイソブチルケトンで抽出された。真空下拙出液を
渾発させると赤っぽい抽状物を与え、それはシリカゲル
のカラム上に注入された。シリカゲルカラムは次にクロ
ロホルム／メタノール（ｂ９：１）で？容出され、を容
素７夜は薄層クロマトグラフィーにより試験された。　
ＣＰ−９１，２４３ＣＰ−９１，２４４およびＵＫ−５
８，８５２に冨む分画が合併され、４縮または蒸発乾固
された。蒸発乾固された各々の抗生物質含有分画を酢酸
エチルに溶解し、これらの分画は個々のシリカゲルカラ
ム上へ注入された。シリカゲルカラムは次に酢酸エチル
で溶出され再び溶出液は薄層クロマトグラフィーにより
試験された。ＣＰ−９１，２４３およびＣＰ−９１，２
４４を含む分画は酢酸エチルから結晶化し、−力ＵＫ−
５８，８５２はへキサンから結晶化した。 本発明の抗生物質は菌糸体に関連した発酵物から、噴霧
乾燥を含む既知の方法による全ブイヨンの蒸発により、
またはｎ過または遠心分離によりブイヨンからの菌糸体
の分離により回収できる。 そのようにして得られる菌糸体生成物は菌糸体の表面お
よびその隙間に抗生物質を含み、菌糸体は有用な担体と
なっている。 ファイザーＩｎｃ、の培養収集物においてＦＤ２８４５
５およびＦＤ２８５１８と同定された突然変異体はブタ
ペスト条約の条項のもと、寄託物の永続性を提供する公
認受託機関であるアメリカン　タイプカルチャーコレク
ション、ロックビル、メリーランドに寄託されており、
もし本出願に特許が？＝Ｊ与されたら公衆においても容
易にそれが手に入るであろう。 培養物ＦＤ　２８４５５は１３賢Ｌｉ１：仁ｉ　旦

【〕
コヒ乙Ｌ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　□　　ＡＴＣ
Ｃ５３８６９という呼称が与えられている。培養物ＦＤ
２８５１８はヱ？＋３　　ｏ−Ｍ−１ｒｎｔｙ　　（Ａ
ｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　ｒｏｓｅｏｒｕｊ３１　　
ＡＴＣＣ５３８７０という呼称が与えられている。 本出願が係属中の間は３７Ｃ，Ｆ、Ｒ，１，１４および
３５Ｕ、Ｓ。 Ｃ，１２２のもと、および本出願が出願されている国の
外国特許法に従って米国特許商標庁の長官により寄託物
が入手可能かどうか決定される。寄託された微生物の公
衆への入手のすべての制限はそれについての特許の付与
により永久に除去されるであろう。 一二？ＪＪＪ二−二□　　　０ｆＯＪｔｚ７　　　　（
へｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ■■址吐吐　ＡＴＣＣ５３８
６９およびＡＴＣＣ５３８７０の培養特性は１Σトｌ〕
ＬＺ二’１４　　ｏｆｔｔｂ７　　（ＡｃＬｉｎｏ＋ｎ
ａｄｕｒａ　　皿旦鮭並紅のそれと本質的に同一である
が、ＡＴＣＣ５３８６９およびＡＴＣＣ５３８７０はさ
らにＣＰ−９１，２４３およびＣＰ−９１，２４４を生
産する。 ヱ９　　／７”／”　　ロゼオルフ　（＾ｃｔｉｎｏ＋
＊ａｄｕｒａ■廷肛娃紅　ＡＴＣＣ５３６６６の分類学
上の調査がり、）ｌ。 Ｈｕａｎｇにより実施され、以下の記述がなされている
。 培養物は斜面培地からＡＴＣＣ第１７２号ブイヨンに植
付けられ振とう機上２８°Ｃにて４日間増殖させる。 ２０分遠心分離し、無菌蒸留水で３回洗浄し、放線菌の
構成菌の同定に普通に使用される培地上に植付ける。 培養物は２８°Ｃでインキエベートされ、結果は種々の
時間に、しかし最も普通には１４日目に読み取る０色は
普通の用語で記載されているが、正確な色は立立二　ハ
ーモニー　マニュアル第４版からの色チンプと比較する
ことにより決定された。全細胞アミノ酸分析の方法はｌ
１ｅｃｋｅｒによる　蝕鮭。 門１ｃｒｏｂｉｏ１．　１２．４２１−４２３．１９６
４に記載されている方法である。全細胞の糖はＬｅｃｈ
ｅｖａｌｉｅｒ、　　Ｊ。 Ｃａｂ、　　Ｃｌ１ｎ、　Ｍｅｄ　、　１１．９３４−
９４４．１９６８；および５ｔａｎｅｃｋおよびＲｏｂ
ｅｒｔｓ４４２ＬＬ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　＋　２８
゜２２６−２３１．１９７４．に記載されている方法で
分析した。 比較のために１じｌ／ニニｌラー　ｏ−を垂（Ｊζ２１
−（紅ｔｉｎｏａ＋ａｄｕｒａ　　ｒｏｓｅｏｒｕ工ａ
Ｊ−ＡＴＣＣ３９，６９７のタイプ培養物が使用された
。 培養物の特性付けのために使用された同定培地およびそ
の組成のための参照文献は以下のごとくである： １、）リプトン−酵母抽出物ブイヨン−（ＩｓＰＨＩ培
地、デイフコ）。 ２、酵母抽出物−麦芽抽出物寒天−（ＩＳＩ’１２培池
、デイフコ）。 ３、オートミール寒天＝（ＩＳｌｌｌ１３培地、デイフ
コ）。 ４４無機塩−デンブン寒天−（ｂｓＰＷ４培地、デイフ
コ）。 ５、グリセロール−アスパラギン寒天−（ＩＳＩＪ５培
地、デイフコ）。 ６、プペトンー酵母抽出物鉄寒天−（ＩＳＰ１６１Δ地
、デイフコ）。 ７、ツァペックーシｇ糖寒天−５，＾Ｊａｋｓｍａｎ　
、放射菌、第２巻、培地番号１、ｐ、３２８．１９６１
゜８、グルコース−アスパラギン寒天−上記文献、培地
番号２、ｐ３２Ｂ。 ９、ベネットの寒天−上記文献、培地番号３０゜Ｐ３３
１゜ １０、エマーフンの寒天−上記文献、培地番号２日、Ｐ
３３１゜ １１、栄養寒天−上記文献、培地番号１４、ｐ３３０゜
１２、ゴートン、スミスのチロシン寒天−Ｒ，Ｅ、Ｇｏ
ｒｄｏｎおよびＭ、Ｍ、Ｓｍ１ｔｈ　、　Ｊ、　　Ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｌ　　６９：１４７−１５０．１９５５゜ １３、カゼイン寒天−上記文献。 】４．リンゴ酸カルシウム寒天−５，Ａ、Ｗａｋｓｍａ
ｎ。 Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　　Ｒｅｖ、　　２ｉ：　１−２
９．１９５７゜１５、ゼラチン−Ｒ，Ｅ、Ｇｏｒｄｏｎ
およびＪ、Ｍ、Ｍｉｈｍ、　ｊ。 Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、、　７３　：　１５−２Ｌ　１９
５７゜１６、デンプン−上記文献。 １７、有機硝酸ブイヨン−上記文献。 １８、デキストロース硝酸ブイヨン−３，ＡＪａｋｓ＊
ａｎ。 放線菌、第２巻、培地番号１　、　ｐ３２８．１９６１
゜３０ｇのシヨ車唐が３ｇのデキストロースに置）桑さ
れ、寒天が除かれている。 １９、ポテトニンジン寒天−Ｍ、Ｐ、Ｌｅｃｈｅｖａｌ
ｉｅｒ、Ｊ。 Ｌａｂ、　　ａｎｄ　　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　　Ｍｅｄ、
＋　ＬＬ　：　９３４−９４４＋１９７８　；　Ｌかし
、３０ｇのポテト、２．５ｇのニンジンおよび２０ｇの
寒天のみを使用する。 ２０．２％水道水寒天 ２１、ボーズの１１鉱物寒天−Ｇ、Ｆ、Ｇａｕｚｅら、
アンクゴニスト様放射菌の分類における問題点、英語版
、ｐ１３．１９５７　。 ２２、ボーズの１２有機寒天−上記文献。 ２３、スキムミルク−デイフコ ２４、セルロース利用 ａ）　　　Ｈ，Ｌ、Ｊｅｎｓｅｎ、　　Ｐｒｏｃ、　　
Ｌｉｎｎ、　　Ｓｏｃ、　　Ｎ、Ｓ、Ｗ、５５：２３１
−２４８．１９３０　。 ｂ）　　Ｍ、ＬｅｖｉｎｅおよびＨ，Ｗ、５ｃｈｏｅｎ
ｌｅｉｎ、培養培地編集、培地番号２５１１．１９３０
゜ ２５、有機酸の利用−Ｒ，Ｅ、Ｇｏｒｄｏｎら、Ｉｎｔ
、　Ｊ、　鉦Ｉ。 鉦魁牡困ＨＢ　：　５，１−６３．１９７４　。 ２６、淡水化物からの酸産生−上記文献。 ２７、馬尿酸エステルおよびニスキュリンの加水分２８
゜ ２９゜ ３０゜ ３１゜ 解−上記文献。 アデニン、ピポキサンチン、キサンチンおよび尿素の分
解−上記文献。 リヅチームへの抵抗−上記文献。 炭水化物利用−Ｃ−２培地、Ｈ，Ｎｏｎｏｍｕｒａおよ
びＹ、０ｈａｒａ＋ＪＬＰｅｒｍｅｎＬ、　　Ｔｅｃｈ
ｎｏｌ、＋　４９　：　８８７−８９４、１９７１　。 塩度範囲−＾ＴＣＣ培地１７２　、ＡＴＣＣ培養物収集
カタログ、１５版、ｐ、６０８．１９８２　。 勿」Ｌ抽」ロ紅ユｊ４芽」創矩虹０天−増殖良、ピンク
−赤から赤色（６＋Ａｉａ、マｉａ、　６ｉａ）　、盛
り上り、しわがよる、白色空中菌糸体；背面赤色（７ｉ
ａ）　；可溶性色素なし。 を二上主二ｔ＋ｄｌ［ｉ天−増殖中程度、クリーム色（
２ｃａ）　。 わずかに盛り上り、平滑、または分離されたコロニーと
して出現；空中菌糸前かられずか、白色；背面クリーム
色（２ｃａ）　　；可溶性色素なし。 飢世−−゛ンプン究天−地殖不良から中程度、無色から
クリーム色（２ｃａ）　、希薄、平滑；空中菌糸体、無
かられずか白色；背面は表面と同し：可溶性色素なし。 セロ−ルーアスパーギン　　−増殖、不良から中程度；
クリーム色（２ｃａ）　、ピンク色から赤色の点（６ｅ
ａ、　　６　′／２ｇａ）　　；空中菌糸体熱かられず
か、白色；背面無色からクリーム色（２ｃａ）　、赤色
の点；可溶性色素なし。 ッ　ペ・　−ショ　寒　−増殖不良から中程度、クリー
ム色（２ｃａ）、ピンク色から赤色の点あり（５ｅａ、
　６　ｙ２ｉａ）　　；空中菌糸体熱かられずか、白色
；背面無色からクリーム色（２ｃａ）　　；可溶性色素
なし。 グ１コースーアスパーギンｇ　　−を０殖中程度から良
、ピンクから赤色（６′／２Ｉ！ａ、　　６　ｙ２ｈａ
）　、盛り上がり；平滑、粒状からしわ状；空中菌糸体
白色から淡いピンク色（６ｅａ）　　；背面赤色Ｃ６’
Ａｇａ、６＋Ａｉａ）　；可溶性色素、淡い黄色かかっ
た（３ｃａ）　。 ゴー　ン・スくスのチロシン寒　−増殖中程度から良、
ピンク−オレンジ色（５ｅａ）　、中程度の盛り上がり
、しわがよる；空中菌糸体熱かられずか、白色；背面は
表面と同し；可溶性色素、黄色がかった色（２１ｃ）。 １ンゴ　カルシ　ム東　−増殖わずか、無色、希薄、平
滑、空中菌糸体なし；背面無色；可溶性色素なし。 ２−増殖中程度から良、ピンク−オレ ンジからオレンジ色（４ｉａ、　５ｉａ）　、中程度の
盛り上がり、しわがあり、空中菌糸体なし；背面は黄色
がかった淡いピンク色（３ｉａ　、　５ｅａ）　；褐色
（３１ｃ）の可溶性色素。 二重ヱ上夏寒天−増殖良、赤色から暗赤色（６％ｎｅ、
６　％ｎｇ）　、盛り上がり、しわがある：空中菌糸体
は白色からピンク色（６ｅａ）　　；背面は赤色（６＋
ＡＩｃ）Ｈ褐色（３ｎｅ）の可溶性色素。 エマーフンの糸　−増殖良から秀、オレンジ色（５１ａ
、　５ｎａ）　、盛り上がり、しわがあり、白色空中菌
糸体がある；背面はオレンジ色（５ｉｃ）Ｈ可溶性色素
なし。 東隻寒天−増殖中程度、淡いオレンジ色（５ｅａ、５ｉ
ａ）。 わずかに盛り上がり、平滑、または分離されたコロニー
として出現し、空中菌糸体なし；背面は淡いオレンジ色
（５ｉａ）；可溶性色素なし。 亙立土ｌ寒天−増殖中程度から良、淡いオレンジ色（４
ｉａ）　、中程度に盛り上がり、平滑からしわがあるも
のも；空中菌糸体はわずかで白色；背面は淡いオレンジ
色（４ｉａ）　；可溶性色素なし。 ヱ１１１寒天−増殖中程度から良、淡いオレンジ色（５
ｉａ）　、中程度に盛り上がり、平滑からしわがあるも
のも；空中菌糸体はわずかで白色：背面は表面と同し；
可溶性色素なし。 ポー　　ニンジン東−−増殖不良から中程度、クリーム
から淡いピンク色（２ｃａ、４ｃａ）　、希薄かられず
かな盛り上がり；空中菌糸体はわずかで白色；背面クリ
ームから淡いピンク色（４ｃａ）　；可溶性色素なし。 本道永寒失−増殖不良、無色からクリーム色（ｌ’ＡＣ
ａ）、希薄、平滑；空中菌糸体はわずかで白色；背面は
表面と同じ；可溶性色素なし。 ボーズの　　ｌＪ　　−増殖中程度、ピンクから赤色（
５ｃａ、　６１ａ）、赤い点（６１ｃ）　、わずかに盛
り土がり、平滑；空中菌糸体熱かられずか、白色；背面
は表面と同じ；可溶性色素なし。 ボーズの　　ｌｈｌ　　−増殖中程度から良、ピンク−
オレンジ色（５ｉａ）　、中程度に盛り上がり、わずか
にしわがある；空中菌糸体はわずかで白色；背面は表面
と同し；可溶性色素なし。 星凰迫立貫〜インキュベーション７週間後でも使用され
たどの培地上に胞子は観察されなかった。 しかしながらポテト　ニンジン寒天上、菌糸の゛膨潤が
終期に、側面または層間で起こり；それらは単一でなめ
らかであった。それらは球体（卵形から楕円）であり直
径１．２−２．５ｍまたは１．２−２．２Ｘ０．９−１
．８−と測定された。類似の構造体は酵母抽出物−麦芽
抽出物、オー）Ｇ−ル寒天、水道水寒天、ゼラチン寒天
、ツアペック−シー１糖寒天、およびボーズ鉱物培地ｌ
上にも観察された。 生［−メラニンは産生されない；硫化水素は産生されな
い；ゼラチンは液化した；デンプンは加水分解されない
；硝酸は亜硝酸に還元されたニジエンセンのセルロース
ブイヨン上でわずかに増殖するが、レバノン、シェーン
ラインのセルロースブイヨン上では増殖しない：両方の
セルロースブイヨン上で崩解しない：ξミルクで凝固お
よびペプトン化；リンゴ酸カルシウムの消化、陰性；チ
ロシン消化陽性；カゼイン消化陽性。 炭化水素利用；グルコース、ラムノースおよびスクロー
スは利用された；アラビノース、フルクトース、イノシ
トール、マンニトール、ラフィノースおよびキシロース
は利用されない。 陽性テストとしては、酢酸、プロピオン酸およびピルビ
ン酸の利用；グルコース、ラムノース、マルトースおよ
びトレハロースからの酸産生が含まれる。 以下の試験は陰性であった：アデニン、キサンチン、ピ
ホキサンチンおよび尿素の分解；ニスキュリンおよび馬
尿酸エステルの加水分解；リゾチームへの抵抗性；安息
香酸、クエン酸、デキストリン、乳酸、リンゴ酸、ムチ
ン酸、シュウ酸、石炭酸およびコハク酸の利用；アラビ
ノース、フルクトース、イノシトール、セロビオース、
ズルシトール、エリスリトール、ガラクトース、グリセ
ロール、ラクトース、マンノース、リボースサリシン、
ソルビトール、ソルボースおよびデンプンからの酸産生
。 全槻兇公捉−全細胞加水分解物はメソジアミノピメリン
酸、ガラクトース、グルコース、マジロース、リボース
およびラムノースを含んでいる。 中程度の増殖　良好な増殖　中程度の増殖　増殖しない
７　’）＋　／　　？　’ｌ　−工ＬｊＥ〕＝」２二Ｌ
１：　（へｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ皿型肛妊紅Ａ　Ｔ　
ＣＣ５３６６６はメラニンを産生できないこと；ピンク
、ピンク−オレンジ、オレンジから赤色の基体の菌糸体
；および全細胞成分としてのメソ−ジアミノピメリン酸
およびマズロースの存在で特徴付けられる。７週間にも
のぼる長期のインキュベーションにもかかわらず、培養
物は胞子を作らなかったが、いくつかの培地において菌
糸の膨潤が起こった。 ヱｍヱｊ立７　（Ａｃｔｉｎｏ＊ａｄｕｒａ■５ｅｏｒ
ｕｆ紅ＡＴＣＣ５３６６６はほとんどの培養特性および
ほとんどすべての生化学的性質がヱＬ±Ｌヱ１４　％　
（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　ｒｏｓｅ肛１紅１１ｕ
ａｎｇ　ＡＴＣＣ３９，６９７と同一である。ゼラチン
寒天およびデンプン寒天上、ＡＴＣＣ５３６６６のコロ
ニーは淡いクリーム色というより淡いオレンジ色であっ
た。 チオシン寒天およびエマーソンの寒天上、それらは褐色
というよりいくらかの濃淡のあるオレンジ色であった。 ＡＴＣＣ５３６６６はΔ、旦ｊ」コピ乙Ｌ（皿工狸り佳
り−に似あわずミルクを凝固させる。これらの相異はさ
さいなことでありくそれ故培養物ＡＴＣ，Ｃ５３６６６
はΔ、旦ｐ　（ｒｏｓｅｏｒｕｆａｌの新株と考えられ
る。 微生物ヱｌｊうにＬＬｉ　旦ＩＪコピ乙Ｌ（危１辷μ懸
ム■　ｒｏｓｅｏｒ吐紅のさらなる突然変異体、形質転
換および突然変異体の組換え体もまた本発明の範囲内で
あり、その微生物はＡＴＣＣ５３６６６の同定特性を持
ち、および前記微生物の突然変異体はＡＴＣＣ５３８６
９またはＡＴＣＣ５３８７０の同定特性を持つものを含
んでいる。そのようなさらなる突然変異体は自発的にも
現われ、また当業者には既知の方法により誘導できる。 同様に、微生物の形質転換体および組換え体は当業者に
はよく知られた種々の古典的およびバイオテクノロジー
技術により得ることができる。すべてのそのような突然
変異体、形質転換体および組換え体は、もしそれらが抗
生物質ＣＰ−９１，２４３およびＣＰ−９１，２４４の
一つまたは両方を産生ずるならば本発明の範囲に含まれ
る。培養により、抗生物質ＣＰ−９１，２４３および／
またはＣＰ−９１，２４４の産生に加え、ＵＫ−５８，
８５２もまた産生ずるような前記さらなる突然変異体、
形質転換体および組換え体も本発明の範囲に含まれる。 本発明の新規酸性多環式エーテル抗生物質の−（ン　互
上旦での抗菌活性が常法により試験され、１つまたはそ
れ以上の微生物に対する一Ｃｇ／ｌｒｉでの最小阻害濃
度（ＭＩＣ）が測定された。１つのそのような方法は抗
生物質感度試験における国際共同研究により推奨されて
いる方法（Ｅｒｉｃｃｓｓｏｎおよび５ｈｅｒｒｉｓ、
Ａｃｔａ　　ＰａｔｈＯｌＯｌＣａｅＬ　　Ｍｉｃｒｏ
ｂｉｏｌｏ　１ａＳｃａｎｄｉｎａｖ　　増刊、２１７
．　　セクションＢ、６４−６８［１９７１１）であり
、脳心臓浸出液（Ｂｌｌ＋）寒天、および接種反復装置
を用いる。−夜増殖させたチューブを標準接種物として
使用するために１００倍に希釈する（約０．００２ｄ中
２０，０００−１００，０００の細胞を寒天表面に植付
ける：２０Ｉｄの８１１１寒天／皿）、１２の試験化合
物の２倍希釈液を用いる（試験薬剤の初！Ｕｌ濃度は２
００＋ｃｇ　／　ｄである）。３７°Ｃで１８時間後に
プレートを読み取る時車−コロニーは無視する。 試験微生物の感受率（ＭＩＣ）は肉眼で判断して増殖を
完全に阻害することができる最も低い化合物濃度として
受入れる。 ニワトリにおけるコクシジア感染に対するＣＰ９１．２
４３．　ＣＰ−９１，２４４およびその塩の効力データ
は以下の方法により得られた。３つの群の生まれて１０
日口の病原体を持たない白色レグホンのオスのひよこに
研究する化合物またはそのナトリウムおよび／またはカ
リウム塩を均一に分散させたマツシュ規定食を与える。 この飼料にして２４時間後各々ひよこに経口で試験する
に仁スＪｕ（旦ｍａｒし柱の特定の種の卵母細胞を接種
する。他の生後１０日のひよこの３つの群には問題化合
物またはその塩なしの同一のマツシュ規定食を与える。 それらもまた２４時間後感染させて感染対照物とする。 さらに別の生後１０日のひよこ３つの群に抗生物質を含
まない同一のマツシュ規定食を与え、それらはコクシジ
アに感染させない。これらは正常対照物として働く、処
置の結果は６日後に評価する。 抗コクシジア活性の測定に使用された判定基準はＪ、Ｅ
、Ｌｙｎｃｈによる°′抗コクシジア活性の第一次評価
の新しい方法”蝕、ムＶａｔ、　　カッ−１坐、３２４
３２６、１９６１に従ったＯから４の病変評点を用いる
。 活性は各々の処置群の病変評点を感染対照物の病変評点
で割ることにより測られる。 動物飼料の評価は一般に直接動物に飼料を与えることに
より決定されてきた。英国特許出願第１．１９７，８２
６号は±ｌ　旦１−９−での第−胃技術について詳述し
ており、それにより微生物により引き起こされる飼料に
おきる変化がより容易に測定され、動物飼料の評価が非
常に正確になった。この技術は器具の使用を含んでおり
、その中で動物の消化過程が行われ、±７＋？上旦で研
究される。 動物飼料、第−前接種物および種々の発育促進剤をその
中へ導入し、注意深く制御された条件下実験室ユニット
から引き出し、微生物による飼料の消費の間起こった変
化を批判的におよび累進的に研究する。胃液のプロピオ
ン酸含量の増加は、飼料組成物中の発育促進剤により引
き起こされた全体の反劉動物の望ましい応答を示してい
る。プロピオン酸含量の変化は対照胃液に観察されるプ
１．Ｉピオン酸含量のパーセントとして表現される。長
期に王之　互生で飼料を与える研究が、胃液中のプロピ
オン酸増加と改良された動物動作の間の信頼できる相関
を示すために使用された。 市販の肥畜飼料に加えて干し草で飼料を与えた孔形成済
のメス中から胃液を集める。胃液は直らにチーズ布を通
して濾過し、４０ｍ１．を４００＋ｎｇの標準基！　（
６８％コーンスターチ＋１７％セルロース＋−１５％抽
出された大豆ミール）　、１０ｄのｐＨ６，８の緩衝液
および試験する化合物を含む５０ｍのコニカルフラスコ
に添加する。フラスコに酸素を除いた窒素を約２分通し
、振とう水浴中３９゛Ｃにて約１６時間インキユヘート
する。すべての試験は３回繰り返す。 インキュベーシゴン後　飼料の５ｄを１−の２５％メタ
リン酸と混合する。１０分１０．２５ｄのギ酸を添加し
、混合物は１５００ｒｐｍで１０分間遠心分離する。 試料はり、１４．ＫｅｌｌｏｇＳＪ、Ｄａｉｒｙ、５ｃ
ｉｅｎｃｅ　　５２．１６９０゜１９６９の方法により
ガスクロマトグラフィーにより分析する。未処置および
処置インキユヘーシゴンフラスコからの試料の酢酸、プ
ロピオン酸および酪酸のピーク高を決定する。 飼鳥類におけるコクシジウム症、ニワトリ、豚、畜牛お
よび羊のごとき家畜の腸炎および豚赤痢の処置に使用す
るためには、本発明の化合物は適した担体中経口で投与
される。都合が良いのは、薬物治療は単に飲料水または
飼鳥類の飼料中で実施され、そのため薬物の治療量は日
常の飲料水または飼鳥類飼料と伴に摂取される。薬剤は
好適には液体、水可溶性濃縮物（水可溶生塩の水性溶液
のごとき）の形で飲料水の中へ直接測り込むことができ
、また１１；１もっての混合物または濃縮物の形でのご
とく飼料中へ直接混合できる。担体中の治療薬の混合物
または濃縮物が飼料中に薬剤を包含させるために使用さ
れる。適した担体は必要に応じ、水、種々のミールのご
とき液体または固体である；例えば通常に飼鳥類の飼料
として用いられているごとき大豆油ミール、亜麻仁油ミ
ール、トウモロコシ穂軸藁−ルおよび鉱物混合物。特に
有効な担体はそれぞれの動物飼料それ自身である；即ち
そのような飼料の一部、さらに菌糸体を担体として使用
できる。担体は前もっての混合物がブレンドされる仕上
りの飼料中の活性物質の均一な分布を容易にする０本強
力薬剤のほんの少しの比率が必要とされるのでこのこと
は重要である。本化合物が前もっての混合物へ、続いて
飼料内へ十分混ぜ合わされることば重要である。この点
で、本薬剤は大豆油、コーン油、綿実油等のごとき適し
た油状媒質または揮発性有機溶媒に分散または）容解さ
れ、次に担体と瓜ぜ合わされる。仕上りの飼料中の薬剤
量は適当な比率の前もっての混合物と飼料を混ぜ合わせ
て治療薬の望ましいレベルを得るので、′ａ縮物中の活
性物質の比率は広い範囲に変化できる。 高度に強力な濃縮物は製造者により大豆油ミールおよび
前記の他のミールのごときタンパク質系担体と混ぜ合わ
され、動物へ直接与えるのに適した濃縮補充物が産生さ
れる。そのような例においては動物は通常の規定量を消
費することになる。 もしくは、そのような濃縮補充物は直接飼料に添加され
、本発明の化合物の治療有効覆を含む栄養的に物品のと
れた仕上りの飼料が製造される。混合物はツインシェル
ブレンダーのごとき常法により十分に混ぜ合わされ均一
性を確かにする。 もちろん、当業者にとってここに説明された化合物の使
用量が異った環境では変化することは明らかであろう。 例えば、発育期の間の飼鳥類のコクシジア症の処置にお
いては（即ちひよこの最初の６から１２週の間）低レベ
ルの薬物治療が効果的予防分量である。確立された感染
の処置においては感染を打ち負かせるためより高いレベ
ルが必要であろう。飼料中の使用レベルは一般的にＩ５
から１２０ｐｐｍの範囲であろう。飼料水で投与する場
合、その濃度は、薬物治療の同し日用量（即ち１５から
１２０ｐｐＩ！＋）を提供するものであろうし、飼料の
平均−日消費量の水の平均−日消費量に対する重要比に
より係数がかけられるであろう。 本発明の抗生物質は遊離酸としてもまたはその陽イオン
塩としても投与できる０例えば本抗生物質のナトリウム
またはカリウム塩を持いることができる。そのような塩
は当業者にはよく知られた方法により形成される。抗生
物質ＣＰ−９１、２４３およびＣＰ−９１２４４は個々
にまたは互いおよび／またはＵＫ−５８，８５２と組合
わせて投与できる。抗生物質ＣＰ−９１，２４３、ＣＰ
−９１，２４４およびＵＫ−５８，８５２は粗生成物の
形または所望の効能濃度で抗生物質を含む乾燥発酵ブイ
ヨンとして使用できる。 本発明は以下の実施例により例示される。しかしながら
本発明がこれらの実施例の特定の細部に制限されるわけ
ではないことに注意されたい。 実施例１ アクチノマ゛シー　ｏ−ｔｉｔｖ−二Ｚ＋（八ｃｔｉｎ
ｏｍａｄｕｒａｒｏｓｅｏｒｕＬＪ　ＦＤ２８４５５　
（ＡＴＣＣ５３８６９の−およ、こと−抗生上１し月ｌ
暖 Ａ、接種［１６復渉製 下記の組成を持つ無菌水性培地を準備する。 −Ｊ！Ｌ−ｉ−ズ立互Ｚ１上上土 セルロース　　　　　　　１０．０ コーンスターチ　　　　　　５．０ コーン浸出液　　　　　　　５．Ｏ ＮＺア呉ンＹＴＴ　”　　　　　　　　５．０塩化コバ
ルト　　　　　　０．００２ 本カゼインの酵素消化物のための登録商標、ヒュムコ　
シェフイールド　ケミカル　ＣＯ＋　Ｉｎｃ。 ＋１１１を７，０に！Ｊｇ整後、培地を２８００ｒｊ！
のフエルンハソハフラスコに分配しく８００ｍり　、綿
栓／紙栓をして１２１”Ｃ（ｂ５ｐ、ｓ、ｉ、）で６０
分間オートクレーブし無菌化する。冷後培地にＦ１１２
８４５５の斜面培養物からの生きている細胞懸濁液を接
神する。フラスコは２８゛Ｃにて回転振とう機上、１＋
Ａから２％インチの変位および分当り１５０から２００
の周期で６日間振とうする。 Ｂ、　　　およびＣＰ−９１４３ＣＩ＋−９１２４４お
よびＵＫ８００−の増殖した培養物を含むフエルンバッ
ハフラスコを下記の組成の８リツトルの無菌培地を含む
１４りントルの発酵容器に接＋ｊＭする（それには４−
の消泡剤が添加されている）； −皮一発一　　　　ＬｉｋＺ」ｌ上止 セレロース　　　　　　　５５．０ 大豆籾　　　　　　　　　１０．０ コーン浸出液　　　　　　１５．０ 血液ミール　　　　　　　１０．０ Ｍｎ５Ｏａ　ＨＩＩＪ　　　　　　　　Ｏ，１片ｇｓｏ
、・７ＨｚＯＯ，ｌ ＣｏＣ１ｘ　・６Ｈｔ０　　　　　　　０．００２炭酸
カルシウム　　　　　　３．０ ρ１１を６．９．７．０に調整 発酵は３０°にて１分当り５００回転で１毘拌しながら
、１分当りブイヨン容星当り０．７５容批の空気を通気
しながら、かなりの活性が産生されるまで実ｊｌｉ　シ
タ。ブイヨン中（ＤＣＰ−９１，２４３／ＣＰ−９１，
２４４７ＵＫ５８．８５２および回収の流れは９：ｌク
ロロホルム：メタノールから成る系で展開するシリカゲ
ル薄層クロマトグラフィープレートを用いることにより
視覚化された。プレートはバニリン試薬（３％濃硫酸を
含む１００ａ＋１のエタノールに６ｇのバニリンを熔解
）でスプレーされ、１００℃にて５分間加熱された。抗
生物質は赤色がかった青いスポットとして現れる。もし
くは０．４−の２．３．５−１−リフ１ニル−２Ｈ−テ
トラゾリウムクロリド５％溶液が添加してあり、枯草菌
を植付けた寒天をブロードに層積し、１６時間３７°Ｃ
でインキエベートすると赤の背景に対し無色の領域とし
て抗生物質が可視化される。 ２つの１４リツトル発酵容器の発酵ブイヨンを合併する
ことにより得られる全ブイヨン（ｂ５リツトル）を等量
のメチルイメプチルケトンど２０分間既１′１３する。 水相および溶媒相を分離し、水相は捨て溶媒を濃縮する
と油状物（２４ｇ）を得た。この濃縮物は５．５ｃｍ　
Ｘ　８　ｃｍガラスカラム中の７００ｇのシリカゲル（
７０−２３０メツシユ、ユニバーサル　アブソーパンツ
）上、クロロホルム：メタノール（ｂ９：１）を溶出液
として用いるクロマトグラフィーを行ったｅｆＬ速は１
０　ｄ　／　＠　ｉ　ｎで１分に付き１分画を取った。 これらの分画はクロロホルム：メタノール（９：１）の
系で展開する薄層クロマトグラフィー（アナルテク　シ
リカゲル（、Ｆプレート）により試験し、前記のごとく
バニリン試薬とスプレー／加熱することにより視覚化さ
れた。はとんどＣＰ−９１，２４３，ＣＰ−９１，２４
４またはＵＫ−５８，８５２を含む分画を抗生物質ごと
に合併しｖＡ縮すると０．７ｇのｃｐ−９１，２４３，
４，’９ｇのＣＰ−９１，２４４および３．６ｇのＵＫ
−５８，８５２を得た。 ＣＩ’−９１、２４４を含む濃縮物は２．５ｃｕ　Ｘ　
１００（傷ガラスカラム中２００ｇのシリカゲル（７０
−２３０メツシユ、ユニバーサル　アブソーパンツ）と
、酢酸エチルを溶出液として使用するクロマトグラフィ
ーを再び行った。ｆＬ速は１０ｍｆｆ１／＋ｓｉｎであ
り、１分毎に１つの分画とした０分画は前記のごとく薄
層クロマトグラフィーにより試験し、ＣＰ−９１，２４
４に富んだ分画を濃縮し、酢酸エチルから結晶化し８５
０■のＣＦ３Ｉ、２４４を得た。 ＣＰ−９１、２４３およびｔｌＫ−５８，８５２分画も
同様の方法でクロマトグラフィーを行い２８０ＩＩＩｇ
のｃＰ−９１，２４３（酢酸エチルから結晶化）および
１．５ｇのＵＫ−５８，８５２（ヘキサンから結晶化さ
れた）を得た。 ＣＰ−９１，２４３およびＣＰ−９１，２４４の構造同
定は抗生物質のナトリウム塩のＣ−Ｃ−１３Ｎ？、元素
分析およびＦＡＢ／バＳに基づき、既知の抗生物質ＵＫ
　５８．ｆｌ１５２およびＵＫ６１．６８９と比較して
行った。 ＣＰ−９１，２４３は以下のデータを与えた：麟ｐ１７
８−１８０℃、 〔α）　：’　＝７．６＠（ｃ・Ｉ、ＣＩＩＪＩＩ）お
よびＦＡＢ／ＭＳ９９６（Ｍ＋Ｎａ）　’ 元素分析：　Ｃ５ｏｌｌｔｉＯ＋Ｊａ　ＨｚＯとして計
算（ａ　：　Ｃ，５９，２２；　　）１，８．４７実測
値：　Ｃ，５９，２２；　　１１．８．２３Ｃ−１３ｎ
ｍｒ　　（ｃＤＣＺｔ（２滴のｃｏｓｏｏを含む）中の
化学シフト（ρｐｍ）で水素の数を括弧内に示しである
］　：１７９．３（０）　、　１０７．６　（０）　、
　１０３．３　（ｂ）　、　１０２．５（ｂ）　、９８
．０　（ｂ）　。 ９７．０（０）、　８７．１（ｂ）、　８４．８（０）
、　８４．３（０）、　８２．６（ｂ）。 ８２．４（ｂ）、　　８１．８（ｂ）、　　８１．０（
ｂ）、　　８０．２（ｂ）、　　７６．０（ｂ）７５．
８（ｂ）、　　７３．４（ｂ）、　　７Ｌ４（ｂ）、　
　７０．９（ｂ）、　　７０．２（ｂ）。 ６７．９（ｂ）、　　６７．６（ｂ）、　　５９．６（
３Ｌ　　４５．４（２）、　　４４．７（ｂ）。 ３９．９（ｂ）、　　３９．０（２）、　　３６．６（
２）、　　３３．８（ｂ）、　　３３．８（２）。 ３３．５（ｂ）、　　３３．５（２）、　　３３．０１
）、　　３２．５（２）、　　３２．５（２）。 ３２．３（２）、　　３２．３（２Ｌ　　３１．４（２
）、　　３１．０（２）、　　２７．５（３）。 ２６．９（２）、　　２６．１（３）、　　２３．２（
３）、　　１８．１（３）、　　１７．９（３）。 １７．４（３）　　１６．８（３）、　１２．３（３）
、　１０．９（３）　　および１’０．３　（３） ＣＰ−９１，２４４は以下のデータを写えた：ＩＩｌρ
１５４−１５７’ｃ（α）　：Ｓ　＝−４，ｓｏ（ｃ・
ｌ、　Ｃ１１３０１１）およびＦＡＢ／ＭＳＩＯＩＯＣ
Ｍ＋Ｎａ）”　　ｒ 元素分析：　Ｃｓ＋ＨｓｓＯ＋、Ｎａとして計算値二ｌ
’＋６０．６５；　　１１，８．５９実測イ直　：　Ｃ
，６０，４１，１１，８，５８Ｃ−１３ｎｍｒ　　（ｃ
Ｄ（Ｊｚ中の化学シフト（ｐｐｆｆｉ）で括弧内に水素
原子の数を示しである〕　： １７９．３（０）、　１０７．６（０）、　１０３．２
（ｂ）、　１０２．５（ｂ）、　９８．０（０）。 ９７．０（０）、　８７．１（ｂ）、　８４．７（０）
、　８４．３（０）、　８２．６（ｂ）８２．４（ｂ）
、　８１．８（ｂ）、　８０．９（ｂ）、　８０．３（
ｂ）、　８０．０（ｂ）。 ７５．８（ｂ）、７４．７（ｂ） ６７．８（ｂ）、６７．５（ｂ） ４４．８（ｂ）、　　４０．０（ｂ） ３３．７（ｂ）、　　３３．６（ｂ）。 ３２．４（２Ｌ　　３１．７（２） ２７．０（２）、２６．９（２Ｌ １８．１（３）、　　１７．５（３） および１０．４　（３） それ故ＣＰ−９１，２４３ ７３，１（ｂ） ５９．６（３）。 ３９、０　（２） ３３．６　（２） ３１．５（２） ２６．１（３）。 １７．０（３） ７１．７（ｂ） ５６．８（３）。 ３６．６（２）。 ３３．２（ｂ）。 ３０．７（２）。 ２３．３（３）。 １２．４（３）。 ７０．２（ｂ） ４５．７（２） ３３．９（２）。 ３２．６（２）。 ２７．７（３） １８．４（３） １１．１（３） およびＣＰ−９１，２４４ の構造式は （式中ＣＰ−９１，２４３においてはＲはＨであり、ｃ
ｐ９１２４４においてはＲはＣＨＩである）と決定され
た。 実施例２ ７’）ｆ）”？’ｌ−扛朴互（Ａｃｔｉｎｏｓａｄｕｒ
ａ卦旦ユ匡ＦＤ２８５１８（ＡＴＣＣ３０のＵ別包 実施例１に記載した方？五に従ってアクチノマヅ４　　
ｐ　（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　ｒｏｙ辿亘紅ＡＴ
ＣＣ５３８７０が発酵され、ブイヨン（ｂ５リツトル）
が抽出され、溶媒相が濃縮され油状物（ｂ７ｇ）を得た
。濃縮物は実施例１に記載した方法に従ってクロマトグ
ラフィーが行われた。はとんどＣＰ−９１，２４３ＣＰ
−９１，２４４またはＵＫ−５８，８５２を含む分画を
抗生物質ごとに合併し、！縮すると５ｇのＣＰ−９１，
２４３゜３．５ｇのＣＰ−９１，２４４および２．５ｇ
のｔｌＫ−５８，８５２を得た。 ｖＸｍ物は実施例１に記載した方法に従ってさらにクロ
マトグラフィーを行い結晶化し、その濃縮液から１．２
８のＣＰ−９１，２４３，４８０■のＣＰ−９１，２４
４および１９０ｎ＋ｇのＵＫ−５８，８５２を得た。 （外４名）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中ＲはＨまたはＣＨ＿３） の抗生物質および医薬として適当なカチオン塩。 ２、微生物￥アクチノマヅラ￥￥ロゼオルファ￥（￥Ａ
   ｃｔｉｎｏｍｄｕｒａ￥￥ｒｏｓｅｏｒｕｆａ￥）の突
   然変異体（前記微生物はＡＴＣＣ５３６６６の同定特性
   を持っている）、またはさらなるその突然変異体、形質
   転換体または組換え体であって、培養により特許請求の
   範囲第１項記載の抗生物質または特許請求の範囲第１項
   記載の抗生物質および式 ▲数式、化学式、表等があります▼ の抗生物質を製造できる前記突然変異体、さらなる突然
   変異体、形質転換体または組換え体。 ３、ＡＴＣＣ５３８６９またはＡＴＣＣ５３８７０の同
   定特性を持つ特許請求の範囲第２項記載の￥アクチノマ
   ヅラ￥￥ロゼオルフア￥（￥Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ
   ￥￥ｒｏｓｅｏｒｕｆａ￥）またはその突然変異体、形
   質転換体または組換え体であって、培養により特許請求
   の範囲第１項に記載された抗生物質を製造できるもの。 ４、特許請求の範囲第１項記載の式の抗生物質の製造方
   法であって、微生物￥アクチノマヅラ￥￥ロゼオルフア
   ￥（￥Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ￥￥ｒｏｓｅｏｒｕｆ
   ａ￥）の突然変異体（前記微生物はＡＴＣＣ５３６６６
   の同定特性を持つ）またはそのさらなる突然変異体、形
   質転換体または組換え体（前記突然変異体、さらなる突
   然変異体、形質転換体または組換え体は前記抗生物質を
   製造できる）を沈水好気発酵条件下、同化可能な炭素、
   窒素および無機塩源を含む水性栄養培地中で発酵させる
   ことからなる方法。 ５、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中ＲはＨおよび／またはＣＨ＿３） の抗生物質の製造方法であって、微生物￥アクチノマヅ
   ラ￥￥ロゼオルフア￥（￥Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ￥
   ￥ｒｏｓｅｏｒｕｆａ￥）の突然変異体（前記微生物は
   ＡＴＣＣ５３６６６の同定特性を持つ）またはそのさら
   なる突然変異体、形質転換体または組換え体（前記突然
   変異体、さらなる突然変異体、形質転換体または組換え
   体は前記抗生物質を製造できる）を沈水好気発酵条件下
   、同化可能な炭素、窒素および無機塩源を含む水性栄養
   培地中で発酵させることからなる方法。 ６、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ の抗生物質の製造方法であって、微生物￥アクチノマヅ
   ラ￥￥ロゼオルフア￥（￥Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ￥
   ￥ｒｏｓｅｏｒｕｆａ￥）の突然変異体（前記微生物は
   ＡＴＣＣ５３６６６の同定特性を持つ）またはそのさら
   なる突然変異体、形質転換体または組換え体（前記突然
   変異体、さらなる突然変異体、形質転換体または組換え
   体は前記抗生物質を製造できる）を沈水好気発酵条件下
   、同化可能な炭素、窒素および無機塩源を含む水性栄養
   培地中で発酵させることからなる方法。 ７、培養により前記抗生物質を製造でき、ＡＴＣＣ５３
   ８６９またはＡＴＣＣ５３８７０の同定特性を持つ￥ア
   クチノマヅラ￥￥ロゼオルフア￥（￥Ａｃｔｉｎｏｍａ
   ｄｕｒａ￥￥ｒｏｓｅｏｒｕ−ｆａ￥）またはその突然
   変異体、形質転換体または組換え体が発酵される特許請
   求の範囲第４，５または６項記載の方法 ８、さらに、前記抗生物質を単離することからなる特許
   請求の範囲第４，５，６または７項記載の方法。 ９、家禽類におけるコクシジア感染を制御する方法であ
   って、抗コクシジア有効量の： （ａ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質：または （ｂ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類；または （ｃ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質およびＵＫ
   −５８，８５２；または （ｄ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類およびＵ
   Ｋ−５８，８５２を前記家禽類に投与することからなる
   方法。 １０、家禽類のための栄養飼料組成物であって；（ａ）
   特許請求の範囲第１項記載の抗生物質：または （ｂ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類；または （ｃ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質およびＵＫ
   −５８，８５２；または （ｄ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類およびＵ
   Ｋ−５８，８５２を前記家禽類のコクシジア感染の制御
   に有効量からなる組成物。 １１、家畜における腸炎の治療方法であり前記家畜に対
   して腸炎治療量の： （ａ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質：または （ｂ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類；または （ｃ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質およびＵＫ
   −５８，８５２；または （ｄ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類およびＵ
   Ｋ−５８，８５２を投与することからなる方法。 １２、家畜のための栄養飼料組成物であり；（ａ）特許
   請求の範囲第１項記載の抗生物質：または （ｂ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類；または （ｃ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質およびＵＫ
   −５８，８５２；または （ｄ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類およびＵ
   Ｋ−５８，８５２の前記家畜の腸炎治療に有効量からな
   る組成物。 １３、豚赤痢の治療のための方法で豚に： （ａ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質：または （ｂ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類；または （ｃ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質およびＵＫ
   −５８，８５２；または （ｄ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類およびＵ
   Ｋ−５８，８５２を投与することからなる方法。 １４、反芻動物または単一胃動物における発育促進およ
   び／または飼料利用の効率促進の方法で、前記動物に発
   育促進および／または飼料利用の効率促進量の： （ａ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質：または （ｂ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類；または （ｃ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質およびＵＫ
   −５８，８５２；または （ｄ）特許請求の範囲第１項記載の抗生物質類およびＵ
   Ｋ−５８，８５２を投与することからなる方法。