JPH0335144A - Rotary cuvette - Google Patents
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Abstract
Description
（産業上の利用分野）
本発明は臨床検査等において、液状検体分析に使用する
ロータリー・キューベットに関する。
（従来の技術及び問題点）
予め試薬を収容した円盤に、液状検体を容れ、試薬と検
体とを反応°させて分析を行うための自動装置及びロー
タリー・キューベットが知られている。
このロータリー・キューベットの一例が、特開昭６３−
７５６４１号公報に記載されている。
上記ロータリー・キューベットは第６図、第７図に示す
如く、円盤（１）の回転中心側に検体（８）を収容する
検体注入室（２）を形成し、外周部に試薬（９）を収容
した反応室（３）を形成しており、検体注入室（２）と
反応室（３）とは細い通路（５）で連通している。
希釈された検体（８）が検体注入室（２）に収容される
が、試薬（９）と検体（８）の反応は多くの場合、時間
を管理して行なっているため、希望するときまで検体（
８）と試薬は隔離し、両者の接触を妨げている。
円盤（１）を回転させると、検体（８）は遠心力によっ
て通路（５）を通り反応室（３）に流入して試薬（９）
に到達し反応する。
公知の測光装置（７）により、反応室（３）の天井面と
底面に形成した光学窓（３５）（３６）を透して光を当
て、試薬と反応後の検体の光学特性の変化、例えば光吸
収度、透明度、色度、反射屈折率等の変化を測定する。
上記ロータリー・キューベットでは、検体（８〉中の目
的物質を測定する際、必然的に検体中の共存物質の影響
を受けるため、正確な測定を行なうことは困難であった
。
例えば、検体（８）に赤褐色のビリルビンが存在してい
ると、試薬による呈色反応はビリルビンの赤褐色の影響
を受けてプラス側にずれ、又、検体（８）にアスコルビ
ン酸が存在していると、試薬による呈色反応は、アスコ
ルビン酸による反応阻害を受けてマイナス側にずれ、測
定に精度が出ない。
精度の良い測定を行なうには、測定に先立ってビリルビ
ンやアスコルビン酸を除去することであるが、上記ロー
タリー・キューベットでは不可能である。
第８図は、従来知られている他の公知例であって、円盤
（１）の半径方向に中心から外方へ向かって検体注入室
（２）、試薬収容室（３０）、反応室（３）を配置し、
該反応室の下方に上澄液収容室（４０）を配し、各部屋
が通路（１６）（１７）（１８）によって繋がってた構
成である（特公昭４９−２０１１６号）。
上記第８図のロータリー・キューベットは、検体（８）
と試薬（９）との反応時に測定の支障となる沈澱物が生
成される場合、その沈澱物を除去することを目的とする
ものである。
即ち、検体注入室（２）に収容した検体（８）と試薬収
容室（３０）、に収容した試薬（９）とを、円盤（１）
の回転によって反応室（３）に導いて反応させ、反応に
よって生じる沈澱物を反応室の凹み部（３９）に溜める
。円盤（１）の回転を停止させて、反応室の検体（８）
の上澄液のみを重力により上澄液収容室（４０〉〈流下
させ、再び円盤（１）を回転させて上澄液収容室（４０
）から通路（１９）を経て、円盤（１）の外側に配備し
た測光室（４３）に導くのである。
上記のロータリー・キューベットにおいて、試薬収容室
（３０）にビリルビンやアスコルビン酸を除去する第１
試薬（９）、上澄液収容室（４０）に実際の検査に必要
な反応を行なわしめる第２試薬（図示せず）を収容して
おき、反応室（３）にて、検体（８）と第１試薬（９）
を反応せしめてビリルビンやアスコルビン酸を除去し、
上澄液収容室にて検体（８）と第２試薬（９１）を反応
させて、これを測定することが可能である。
しかし、上記ロータリー・キューベットは、円盤（１）
の上部と下部に部屋を形成しなけばならず、製造上、円
盤（１）を上澄液収容室（４０）を含む下部体（１１）
と、検体注入室（２）、試薬収容室（３０）及び反応室
（３）を含む上部体（１２）及び上部体の各部屋の天井
となる蓋板（１４）が必要となり、構造が複雑となる。
又、上澄液収容室（４０）内の検体（８）を測光するた
めに、円盤（１）の外側に、上面と下面に光学窓を有す
る測光室（４３）を連接し、該測光室に溜まった検体（
８）を公知の測光装置によって測定しなければならず、
装置全体が複雑となり、大型化する問題がある。
本発明は、検体中の共存物質の影響を受けることなく、
目的物質を正確に測定でき、又、検体を２段階反応せし
めて行なう検査も簡単にでき、且つ自動分析装置の小形
化に寄与できるロータリー・キューベットを明らかにす
るものである。
（課題を解決する為の手段）
本発明は、液状検体分析用遠心装置に用いるロータリー
・キューベットにおいて、回転中心側に検体（８）を収
容する検体注入室（２）、該検体注入室（２）の半径方
向外側に第１反応室（３）、該第１反応室（３）の半径
方向外側に第２反応室（４）が形成され、検体注入室（
２）の上部に第１反応室（３）に連通ずる第１通路（５
）が開設され、第１反応室（３）には円盤の外周側の後
壁（３２）に第１通路に対向して凹部（３３）及び該凹
部（３３）の下方に第２反応室（４）に連通ずる第２通
路（６）が開設され、更に凹部（３３）と第２通路（６
）との間において第１反応室の後壁（３２）から堰（３
４）を突設したものである。
（作 用）
例えば予め、第１反応室（３）に第１試薬（９）、第２
反応室（４）に第２試薬（９１）を収容しておき、静止
状態の円盤（１）の検体注入室（２）に検体（８）を注
入する（第２図）。
円盤（１）を回転させると、検体（８）に遠心力が作用
し、検体（８）は第１通路（５）を通って第１反応室（
３）に流入し、該通路に対向して形成された凹部（３３
）に溜まり、下方に流れ落ちることはない（第３図）。
円盤（１）の回転を止めると検体（８）は重力によって
堰（３４）を越えて第１反応室（３）の底に流れ落ち、
第１試薬（９）に接する（第４図）。
検体と第１試薬を所定の゛時間だけ反応（以下、インキ
ューベーション）させた後、再び円盤（１）を回転させ
る。
インキューベーションによって第１試薬（９）と反応を
了えた検体（８）は遠心力の作用により第２通路（６）
から第２反応室（４）に流入し、該反応室内に収容され
た第２試薬（９１〉に接する（第５図）。この時、第２
通路（６）と凹部（３３）との間には堰（３４）が突設
されており、該堰（３４）に阻まれて検体（８）が凹部
（３３）に逆流することはない。円盤（１）の回転を止
めて、第２反応室（４）内で所定時間だけ２回目のイン
キューベーションを行なう。
次に、公知の検査例えば光学特性を調べる場合は測光装
置（７）によって、第２反応室（４）の天井面と底面と
に形成さた光学窓（４１）（４２）を通して検体に光を
当て、検体の光学特性の変化、例えば光吸収度、不光学
度、色度、反射屈折率等の変化を測定する。
上記の如く、第１反応室（３）の後壁には遠心力を受け
て検体を一時的に保持する凹部（３３）を有しており、
２回繰り返される遠心操作の内、第１回目の遠心操作中
は、遠心力によって検体（８）は四部（３３）に保持さ
れ、下方に流れ落ちたり、第１反応室（３）を素通りし
て、第２通路（６）から第２反応室（４）に流出するこ
とはない。
従って、検体注入室（２）に注入した検体（８）を遠心
力作用で一旦第１反応室（３）の凹部（３３）に溜めお
き、次に回転を停止することにより、これを−挙に第１
反応室（３）の底部に流し落として、第１試薬と反応さ
せることができるため、インキューベーションの時間管
理を極めて正確に行なうことができる。
凹部（３３）と第２通路（６）との間には堰（３４）が
突設されているため、２回目の遠心操作の際、第２反応
室（４）の底に溜まった検体（８）が凹部（３３）に逆
流することは防止される。２回目の遠心操作で検体は第
２通路（６）から第２反応室（４）に流出して、第２反
応室（４）での２回目の反応が確実に行なわれる。
又、本発明のロータリー・キューベットの円盤（１）上
の半径方向に直列に形成された検体注入室（２）、第１
反応室（３）及び第２反応室（４）の円盤の周方向の配
列は、測定検体数又は測定項目に応じて適宜選択できる
。
（実施例）
第１、第２図は、本発明に係る小形のプラスチック製の
使い捨てロータリー・キューベットを示している。ここ
で用いられるプラスチック材料は、ポリエチレン等の比
較的硬い材料で、また検体の分析に用いる試薬と反応し
ない材料ならば、その材質は問わない。
後記する光学窓（３５） （３６）、（４１） （４２
）については上記条件の他に光学的に優れることを条件
として加えれば、ポリエチレン等その材質は問わない。
好ましくはこのプラスチック材料は熱溶着、接着剤、超
音波接合の利く材質が望ましい。
又、ロータリー・キューベットは通常は、多くのプラス
チック製品のキューペットの場合と同様に親水性の材料
で形成される。そうでない場合は、公知の方法でこれを
処理し、検体と接する表面を親水性とする。また、後記
する第１、第２通路（５）（６）は疎水性を、有してい
ることが望ましい。
実施例ではロータリー・キューベットを構成する円盤（
１）は２又は、それ以上の透明プラスチック部品によっ
て形成されている。
下部材（１１〉の中央部に回転駆動軸（図示せず）に嵌
合する保合部（１３）が形成され、下部材の上面に係合
部（１３）を中心に夫々同じ個数の検体注入室（２）、
第１反応室（３）、第２反応室（４）が円陣に且つ、半
径線上に並んで開設されている。
上部材（１２）は各部屋の天井壁となる蓋であり、通常
、第１試薬（９）を第１反応室（３）に、第２試薬（９
１）を第２反応室（４）にそれぞれ予め収容した後、下
部材に接合されている。
以下の説明で各部屋の前壁（２１）、（３１）とは円盤
（１）の回転中心側の壁であり、後壁（２２） （３２
）とは円盤（１）の外周側の壁である。
各検体注入室（２）の後壁（２２）は上部が外側に緩や
かに傾斜しており、該後壁（２２）の上端に第１反応室
（３）に連通ずる細い第１通路（５）が形成されている
。検体注入室（２）の天井壁には検体、注入口（２３）
が開設されている。
各第１反応室（３）の後壁（３２）の上部には前記第１
通路（５）に対向して凹部（３３）が形成され、該凹部
（３３）の下方に第２反応室（４）に連通ずる細い第２
通路（６）を開設している。
第１、第２通路（５） （６）の内径は、物理的外力を
加えなれけば検体が通過せず、円盤の回転による遠心力
によって検体が通過できる大きさとする。
前記四部（３３）は、対応する検体注入室（２）に注入
された検体の全量を受容するのに充分な容量を有してい
る。
第１反応室（３）の後壁（３２）の下部は底側から徐々
に外側に傾斜して第２通路（６）に向かっており、第２
通路（６）の上方に於て、前壁側に向けて堰（３４）が
形成されている。
各第１反応室（３）は検体注入室（２）に比較して充分
な容量を有しており、遠心操作中に空気による検体移動
の妨害は生じない。
第１反応室（３）の天井壁、及び底壁は平らで平行な測
光用の光学窓（３５） （３６）となっている。
各第２反応室（４）の天井壁、及び底壁も平らで平行な
測光用の光学窓（４１）（４２）となっている。
各第１反応室（３）と各第２反応室（４）の形状はその
底面積が両者同一であれば円筒形でも方形でも。
又、他の形状でも可い。この理由は夫々の光学的測定デ
ータに互換性を持たせるためである。
第１反応室（３）及び第２反応室（４）には、検査項目
に対応して各種の試薬が収容されるが、第１反応室（３
）に収容される第１試薬（９）は乾燥試薬、好ましくは
凍結乾燥粉末もしくは錠剤状に製剤化された試薬でなれ
ばならない。
第２反応室（４）に収容される第２猷薬（９１）は液状
であっても可い。
然して、分析すべき検体１例えば、血漿・血清もしくは
尿のごとき体液成分を、ピペットまたは適当な用具によ
って検体注入口（２３）から検体注入室（２）に注入す
る。この場合検体（８）は原濃度もしくは希釈液によっ
て希釈されたちのどちらかを用いる。注入される液量は
分析に使用される試薬の種類により左右されることがあ
り、検体注入室（２）の容量よりも少な−く、第１反応
室（３）の底に溜まったとき、液面が第２通路（６）の
高さに達しなければよい。
１回目の遠心操作中に、検体（８）は第１通路（５）を
通過し、第１反応室（３）中の凹部（３３）に留とまる
。
１回目の遠心操作を終了した時点で検体（８）は四部（
３３）より第１反応室（３）の底部に一挙に落下し、第
１反応室（３）の底に保持されている第１試薬（９）を
溶解し、第１のインキューベーションが行なわれる。こ
こでの反応は、反応試薬を２種類に分ける反応であれば
、その原理を問わないが、検体中に存在している測定目
的物質以外の物質が測定値へ悪影響を及ぼすことを回避
するため、これ等阻害物質を除去する反応が適している
。
第１反応室（３）は、ここでの反応液の液面高さが第２
通路（６）の高さまで達しないように設計されているた
め、円盤（１）が停止している状態では、第１反応室（
３）内の検体（８）が第２反応室（４）に流出すること
はない。
検体（８）が第１反応室（３）の底部に落下した時点で
、ロータリー・キューベットに対して若干の振動を与え
、検体（８）と第１試薬（９）との反応を促進させる。
第１反応室（３）に検体（８）が存在する間は任意の温
度に昇温もしくは降温されて恒温に保持される。
第１反応室（３）の天井壁及び底壁に光学窓（３５）（
３６）が設けられているため、必要に応じて、第１反応
室（３）内の検体を光学測定することができる。
第１反応室（３）において、所定の時間存在した検体と
試薬の混合液は、再び遠心操作によって第２通路（６）
を通過して第２反応室（４）に到達する。
検体（８）は第２反応室（４）に保持された第２試薬（
９１）に接して２回目の反応が行なわれる。
また２回目の遠心操作終了後、ロータリー・キューベッ
トに対して２回目のインキュベーションを行ないロータ
リー・キューベットに対して若干の振動を与えて反応を
促進させる。第１反応室（３）の場合と同様に検体（８
）は第２反応室（４）に存在している間、任意の温度に
昇温もしくは降温され恒温に保持される。
第２反応室（４）内での光学的変化の、測定は任意のタ
イミングで行なわれ、任意回数測定された時に測定の全
工程が終了し、該ロータリー・キューベットは廃棄され
る。
又、検体の分析に際し、各検体注入室（２）には原濃度
または希釈された異なった検体または同じ検体を収納し
て検体の分析を行なうことができる。
次に、具体例を示す。(Industrial Application Field) The present invention relates to a rotary cuvette used for liquid sample analysis in clinical testing and the like. (Prior Art and Problems) Automatic devices and rotary cuvettes are known for carrying out analysis by placing a liquid specimen in a disk containing reagents in advance and reacting the reagent with the specimen. An example of this rotary cuvette is
It is described in Publication No. 75641. As shown in FIGS. 6 and 7, the rotary cuvette has a sample injection chamber (2) that accommodates the sample (8) on the rotation center side of the disk (1), and a reagent (9) on the outer periphery. The sample injection chamber (2) and the reaction chamber (3) communicate with each other through a narrow passageway (5). The diluted sample (8) is stored in the sample injection chamber (2), but since the reaction between the reagent (9) and the sample (8) is often time-controlled, it can be carried out until the desired time. Specimen (
8) and reagents are separated to prevent contact between the two. When the disk (1) is rotated, the specimen (8) flows into the reaction chamber (3) through the passage (5) due to centrifugal force, and the reagent (9) flows into the reaction chamber (3).
reach and react. A known photometric device (7) shines light through optical windows (35) (36) formed on the ceiling and bottom of the reaction chamber (3), and changes in the optical properties of the sample after reaction with the reagent. For example, changes in light absorption, transparency, chromaticity, reflective refractive index, etc. are measured. With the above-mentioned rotary cuvette, when measuring the target substance in the sample (8), it is inevitably affected by the coexisting substances in the sample, making it difficult to perform accurate measurements. If reddish-brown bilirubin is present in sample (8), the color reaction caused by the reagent will be influenced by the reddish-brown color of bilirubin and will shift to the positive side. The color reaction is inhibited by ascorbic acid and shifts to the negative side, resulting in inaccurate measurements.The best way to perform accurate measurements is to remove bilirubin and ascorbic acid prior to measurement. This is not possible with the rotary cuvette described above. Fig. 8 shows another conventionally known example, in which the sample injection chamber (2) extends outward from the center in the radial direction of the disk (1). , a reagent storage chamber (30), a reaction chamber (3) are arranged,
A supernatant liquid storage chamber (40) is arranged below the reaction chamber, and each chamber is connected by passages (16), (17), and (18) (Japanese Patent Publication No. 49-20116). The rotary cuvette shown in Figure 8 above is the specimen (8).
The purpose of this method is to remove a precipitate that may interfere with measurement if it is generated during the reaction between the reagent (9) and the reagent (9). That is, the sample (8) accommodated in the sample injection chamber (2) and the reagent (9) accommodated in the reagent storage chamber (30) are transferred to the disk (1).
The mixture is guided into the reaction chamber (3) by rotation and reacted, and the precipitate produced by the reaction is collected in the recess (39) of the reaction chamber. Stop the rotation of the disk (1) and remove the sample (8) from the reaction chamber.
Only the supernatant liquid is allowed to flow down to the supernatant liquid storage chamber (40) by gravity, and the disk (1) is rotated again to drain the supernatant liquid into the supernatant liquid storage chamber (40).
) through a passageway (19) to a photometry chamber (43) located outside the disk (1). In the above rotary cuvette, the first stage for removing bilirubin and ascorbic acid is placed in the reagent storage chamber (30).
A reagent (9) and a second reagent (not shown) for carrying out the reaction necessary for the actual test are stored in the supernatant storage chamber (40), and the sample (8) is stored in the reaction chamber (3). and the first reagent (9)
to remove bilirubin and ascorbic acid,
It is possible to react the specimen (8) and the second reagent (91) in the supernatant storage chamber and to measure the reaction. However, the above rotary cuvette has a disk (1)
Chambers must be formed in the upper and lower parts of the disc (1) due to manufacturing reasons.
In addition, the upper body (12) including the sample injection chamber (2), reagent storage chamber (30), and reaction chamber (3) and the lid plate (14) that serves as the ceiling of each room of the upper body are required, resulting in a complicated structure. becomes. In addition, in order to photometer the sample (8) in the supernatant liquid storage chamber (40), a photometry chamber (43) having optical windows on the upper and lower surfaces is connected to the outside of the disk (1). Samples collected in (
8) must be measured by a known photometric device,
There is a problem that the entire device becomes complicated and large. The present invention is not affected by coexisting substances in the specimen,
The purpose of the present invention is to reveal a rotary cuvette that can accurately measure a target substance, easily conduct a test by subjecting a specimen to a two-step reaction, and contribute to miniaturization of automatic analyzers. (Means for Solving the Problems) The present invention provides a rotary cuvette for use in a centrifugal device for liquid sample analysis, including a sample injection chamber (2) that accommodates a sample (8) on the rotation center side; A first reaction chamber (3) is formed radially outward of the first reaction chamber (3), a second reaction chamber (4) is formed radially outward of the first reaction chamber (3), and a sample injection chamber (
2), there is a first passageway (5) communicating with the first reaction chamber (3).
) is opened in the first reaction chamber (3), and a recess (33) is formed in the rear wall (32) on the outer peripheral side of the disk opposite to the first passage, and a second reaction chamber ( A second passage (6) communicating with the recess (33) and the second passage (6) is opened.
) from the rear wall (32) of the first reaction chamber to the weir (3
4) is installed protrudingly. (Function) For example, the first reagent (9) and the second reagent are placed in the first reaction chamber (3) in advance.
A second reagent (91) is stored in the reaction chamber (4), and a specimen (8) is injected into the specimen injection chamber (2) of the stationary disk (1) (FIG. 2). When the disk (1) is rotated, centrifugal force acts on the sample (8), and the sample (8) passes through the first passage (5) and enters the first reaction chamber (
3) and a recess (33) formed opposite to the passage.
) and does not flow downward (Figure 3). When the rotation of the disk (1) is stopped, the sample (8) flows down by gravity over the weir (34) to the bottom of the first reaction chamber (3).
It comes into contact with the first reagent (9) (Figure 4). After the specimen and the first reagent are allowed to react for a predetermined period of time (hereinafter referred to as incubation), the disk (1) is rotated again. The specimen (8) that has reacted with the first reagent (9) through incubation is transferred to the second passage (6) by the action of centrifugal force.
flows into the second reaction chamber (4) and comes into contact with the second reagent (91) accommodated in the reaction chamber (Fig. 5).
A weir (34) is provided protruding between the passageway (6) and the recess (33), and the sample (8) will not flow back into the recess (33) due to the weir (34) blocking it. The rotation of the disk (1) is stopped, and a second incubation is performed for a predetermined period of time in the second reaction chamber (4). Next, when performing a known test such as examining optical characteristics, light is applied to the specimen using a photometer (7) through optical windows (41) and (42) formed on the ceiling and bottom of the second reaction chamber (4). and measure changes in the optical properties of the specimen, such as changes in light absorption, opacity, chromaticity, and reflective refractive index. As mentioned above, the rear wall of the first reaction chamber (3) has a recess (33) that temporarily holds the specimen under centrifugal force.
During the first centrifugation operation, which is repeated twice, the sample (8) is held in the fourth part (33) by the centrifugal force, and does not flow down or pass through the first reaction chamber (3). , it does not flow out from the second passageway (6) to the second reaction chamber (4). Therefore, the sample (8) injected into the sample injection chamber (2) is temporarily stored in the recess (33) of the first reaction chamber (3) by centrifugal force, and then the rotation is stopped. 1st to
Since it can be poured down to the bottom of the reaction chamber (3) and reacted with the first reagent, the incubation time can be managed very accurately. Since a weir (34) is provided protruding between the recess (33) and the second passageway (6), during the second centrifugation operation, the sample collected at the bottom of the second reaction chamber (4) is removed. 8) is prevented from flowing back into the recess (33). In the second centrifugation operation, the specimen flows out from the second passageway (6) into the second reaction chamber (4), and the second reaction in the second reaction chamber (4) is reliably performed. Further, the sample injection chambers (2), the first
The circumferential arrangement of the disks in the reaction chamber (3) and the second reaction chamber (4) can be appropriately selected depending on the number of samples to be measured or the measurement items. (Example) Figures 1 and 2 show a small plastic disposable rotary cuvette according to the present invention. The plastic material used here does not matter as long as it is a relatively hard material such as polyethylene and does not react with the reagent used for analyzing the sample. Optical windows (35) (36), (41) (42) to be described later
), the material may be used, such as polyethylene, as long as it is optically excellent in addition to the above conditions. Preferably, the plastic material is a material that can be bonded by heat, adhesive, or ultrasonic bonding. Rotary cuvettes are also typically constructed of hydrophilic materials, as are many plastic cupettes. If this is not the case, it is treated by a known method to render the surface in contact with the specimen hydrophilic. Further, it is desirable that the first and second passages (5) and (6) described later have hydrophobicity. In the example, a disk (
1) is formed by two or more transparent plastic parts. A retaining part (13) that fits into a rotational drive shaft (not shown) is formed in the center of the lower member (11), and the same number of specimens are formed on the upper surface of the lower member around the engaging part (13). injection chamber (2),
A first reaction chamber (3) and a second reaction chamber (4) are arranged in a circle and lined up on a radial line. The upper member (12) is a lid that serves as the ceiling wall of each room, and usually carries the first reagent (9) into the first reaction chamber (3) and the second reagent (9) into the first reaction chamber (3).
1) are placed in the second reaction chamber (4) in advance and then joined to the lower member. In the following explanation, the front walls (21) and (31) of each room are the walls on the rotation center side of the disk (1), and the rear walls (22) (32
) is the outer wall of the disk (1). The upper part of the rear wall (22) of each sample injection chamber (2) is gently inclined outward, and the upper end of the rear wall (22) has a narrow first passage (5) communicating with the first reaction chamber (3). ) is formed. There are specimen and injection ports (23) on the ceiling wall of the specimen injection room (2).
has been established. The upper part of the rear wall (32) of each first reaction chamber (3) is provided with the first
A recess (33) is formed opposite to the passage (5), and a narrow second chamber is formed below the recess (33) and communicates with the second reaction chamber (4).
Passageway (6) has been opened. The inner diameters of the first and second passages (5) and (6) are set to such a size that the sample will not pass through unless a physical external force is applied, but the sample will be able to pass through due to the centrifugal force generated by the rotation of the disk. The four parts (33) have sufficient capacity to receive the entire amount of specimen injected into the corresponding specimen injection chamber (2). The lower part of the rear wall (32) of the first reaction chamber (3) gradually slopes outward from the bottom side toward the second passageway (6).
A weir (34) is formed above the passageway (6) toward the front wall. Each first reaction chamber (3) has a sufficient capacity compared to the sample injection chamber (2), so that air does not interfere with sample movement during centrifugation. The ceiling wall and bottom wall of the first reaction chamber (3) are flat and parallel optical windows (35) and (36) for photometry. The ceiling wall and bottom wall of each second reaction chamber (4) are also flat and parallel optical windows (41, 42) for photometry. The shapes of each first reaction chamber (3) and each second reaction chamber (4) may be cylindrical or rectangular as long as their bottom areas are the same. Also, other shapes are possible. The reason for this is to make each optical measurement data compatible. The first reaction chamber (3) and the second reaction chamber (4) accommodate various reagents corresponding to the test items.
The first reagent (9) contained in ) must be a dry reagent, preferably a lyophilized powder or a reagent formulated in tablet form. The second capstone (91) accommodated in the second reaction chamber (4) may be in liquid form. Thus, the specimen 1 to be analyzed, for example, a body fluid component such as plasma, serum or urine, is injected into the specimen injection chamber (2) through the specimen injection port (23) using a pipette or a suitable tool. In this case, the specimen (8) is used either at its original concentration or diluted with a diluent. The amount of liquid injected may depend on the type of reagent used for analysis, and when it is less than the capacity of the sample injection chamber (2) and accumulates at the bottom of the first reaction chamber (3), It is sufficient that the liquid level does not reach the height of the second passage (6). During the first centrifugation operation, the specimen (8) passes through the first passageway (5) and remains in the recess (33) in the first reaction chamber (3). At the end of the first centrifugation, the sample (8) was divided into four parts (
33) to the bottom of the first reaction chamber (3), dissolves the first reagent (9) held at the bottom of the first reaction chamber (3), and performs the first incubation. It will be done. The principle of the reaction does not matter as long as it divides the reaction reagent into two types, but in order to avoid substances other than the measurement target substance present in the sample from having an adverse effect on the measured value. , reactions that remove these inhibitors are suitable. In the first reaction chamber (3), the liquid level of the reaction liquid is at the second level.
Since it is designed so that it does not reach the height of the passage (6), when the disk (1) is stopped, the first reaction chamber (
The sample (8) in 3) will not flow out into the second reaction chamber (4). When the specimen (8) falls to the bottom of the first reaction chamber (3), a slight vibration is applied to the rotary cuvette to promote the reaction between the specimen (8) and the first reagent (9). . While the specimen (8) is present in the first reaction chamber (3), the temperature is raised or lowered to an arbitrary temperature and maintained at a constant temperature. Optical windows (35) (
36), the sample in the first reaction chamber (3) can be optically measured if necessary. The sample and reagent mixture that has existed for a predetermined time in the first reaction chamber (3) is transferred to the second passage (6) by centrifugation again.
and reaches the second reaction chamber (4). The specimen (8) is transferred to the second reagent (4) held in the second reaction chamber (4).
91), a second reaction is carried out. Further, after the second centrifugation operation is completed, the rotary cuvette is subjected to a second incubation, and a slight vibration is applied to the rotary cuvette to promote the reaction. As in the case of the first reaction chamber (3), the sample (8
) is raised or lowered to an arbitrary temperature and maintained at a constant temperature while it is in the second reaction chamber (4). Measurement of optical changes within the second reaction chamber (4) is performed at arbitrary timings, and when measurements have been made an arbitrary number of times, the entire measurement process is completed and the rotary cuvette is discarded. In addition, when analyzing a sample, each sample injection chamber (2) can contain different samples or the same sample at an original concentration or dilution, and the sample can be analyzed. Next, a specific example will be shown.
【具体例 １】
共存物質の影響を除く方法
測定項目 コレステロール
検体
血清を希釈状で希釈したもの
第１試薬
・ビリルビン酸化酵素
・コレステロールエステラーゼ
・４−アミノアンチピリン
第２試薬
・コレステロール酸化酵素
・Ｎ−エチル−Ｎ
−（２−ヒドロキシ−３・−スルホプロピル）−３，５
−ジメトキシアニリンナトリウム第１反応
検体を第１試薬に加えて、４分間インキュベーションす
る。
検体中に含まれるビリルビンは、第１試薬との反応によ
って消去される。
第２反応
第１反応後の検体を第２試薬に加えて、５分間インキュ
ベーションする。
検体は青色発色反応を示す。
効果２
第１反応によってビリルビンは消去されているため、第
２反応による黄色発色反応の測定値にビリルビンの影響
はない。[Specific example 1] Method to eliminate the influence of coexisting substances Measurement items Cholesterol sample diluted serum First reagent, bilirubin oxidase, cholesterol esterase, 4-aminoantipyrine Second reagent, cholesterol oxidase, N-ethyl -N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5
- Add sodium dimethoxyaniline first reaction sample to first reagent and incubate for 4 minutes. Bilirubin contained in the specimen is eliminated by reaction with the first reagent. Second reaction: Add the sample after the first reaction to the second reagent and incubate for 5 minutes. The specimen shows a blue color reaction. Effect 2 Since bilirubin has been eliminated by the first reaction, there is no effect of bilirubin on the measured value of the yellow coloring reaction by the second reaction.
【具体例 ２】
共存物質の影響を除く方法
測定項目 コレステロール
検体
血清を希釈液で希釈したもの
第１試薬
・アスコルビン酸酸化酵素
・コレステロールエステラーゼ
・４−アミノアンチピリン
第２試薬
・コレステロール酸化酵素
・Ｎ−エチル−Ｎ
−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−
ジメトキシアニリンナトリウム第１反応
検体を第１試薬に加えて、３分間インキュベーションす
る。
検体中に含まれるアスコルビン酸は、第１試薬との反応
によって消去される。
第２反応
第１反応後、第２試薬に第１反応液を加えて、４．５分
間インキュベーションする。
検体は青色発色反応を示す。
効果
第１反応によってアスコルビン酸は消去されているため
、第２反応の呈色反応測定値にはアスコルビン酸の影響
はない。[Specific example 2] Method to eliminate the influence of coexisting substances Measurement items Cholesterol sample serum diluted with diluent First reagent, ascorbate oxidase, cholesterol esterase, 4-aminoantipyrine Second reagent, cholesterol oxidase, N- Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-
Add the sodium dimethoxyaniline first reaction sample to the first reagent and incubate for 3 minutes. Ascorbic acid contained in the specimen is eliminated by reaction with the first reagent. Second Reaction After the first reaction, the first reaction solution is added to the second reagent and incubated for 4.5 minutes. The specimen shows a blue color reaction. Effect Since ascorbic acid is eliminated by the first reaction, there is no effect of ascorbic acid on the color reaction measurement value of the second reaction.
【具体例 ３】
共存物質を除く方法
測定項目 トリグリセライド
検体
血清を希釈液で希釈したもの
第１試薬
・グロセロールキナーゼ
・Ｌ−グリセロール−３
一ホスフェイトオキシダーゼ
・アデノシン５′−三すン酸二ナトリづム三水和物
・Ｎ−エチル−Ｎ
−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−アニ
シジンナトリウム
第２試薬
・リパーゼ
・４−アミノアンチピリン
第１反応
検体を第１試薬に加えて、３分間インキュ−ベションす
る。
血清中に存在する遊離のグリセロールは、リパーゼと４
−アミノアンチピリンを含まない第１試薬と反応して消
去される。
第２反応
第１反応後の検体を第２試薬に加え、４〜５分間インキ
ュベーションして発色させる。
効果
第１反応によってグリセロールは消去されているので、
吸光度の測定には影響しない。[Specific example 3] Method for removing coexisting substances Measurement items Triglyceride sample Serum diluted with diluent 1st reagent Glycerol kinase L-glycerol-3 monophosphate oxidase Adenosine 5'-trisunate di Add sodium trihydrate, N-ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-m-anisidine sodium second reagent, lipase, 4-aminoantipyrine first reaction sample to the first reagent. and incubate for 3 minutes. Free glycerol present in serum is combined with lipase and 4
- is eliminated by reaction with a first reagent that does not contain aminoantipyrine. Second reaction: Add the sample after the first reaction to the second reagent and incubate for 4 to 5 minutes to develop color. Effect Since glycerol is eliminated by the first reaction,
Does not affect absorbance measurements.
【具体例 ４】
２回反応によって検査する方法
測定項目 遊離脂肪酸
検体
血清を希釈液で希釈したもの
第１試薬
・アシル−ＣｏＡシンセターゼ
・コエンザイムへ三リチウム
・アデノシン５′−三リン酸二ナトリウム三水和物
・４−アミノアンチピリン
第２試薬
・アシル−ＣｏＡオキシターゼ
・Ｎ−エチル−Ｎ−（２−スルホプロピル）−ｍ−トル
イジンナトリウム
・Ｎ−エチルマレイミド
第１反応
検体を第１試薬に加えて、５分間インキュベーションす
る。
第２反応
第１反応後の検体を第２試薬に加え５分間インキュベー
ションして発色させる。
効果
第１反応後に残存するＣｏＡは発色反応を妨害する作用
があるが、Ｎ−エチルマレイミドによって反応妨害は排
除され、吸光度の測定に影響しない。
（発明の効果）
従来より知られるロータリー・キューベットにおける分
析法は、測定試薬を保持する試薬容器を兼ねた反応室が
ひとつの測定項目に対して１室だけであったために、多
くの成分を含む体液の分析においては、共存物質の影響
を回避することのできる２液法測定を行うことは困難で
あった。
本発明では測定試薬を保持する反応室を２室設けて、シ
ーケンシャルに検体を移動させることにより、簡単にロ
ータリー・キューベットにおける二液性測定が可能にな
った。
また、従来のロータリー・キューベットと同様に１液法
測定を行う場合には、第１、第２反応室（３）（４）の
何れかの試薬を除いておくことにより、従来より知られ
るロータリー・キューベットと同様の性能とすることが
できる。
更に、本発明のロータリーキューペットは円盤（１）上
に、検体注入室（２）、第１反応室（３）及び第２反応
室（４）が半径方向に直列に並んだ簡単な構成であるか
ら、製造も容易である。[Specific example 4] Test method using two reactions Measurement items Free fatty acid sample Serum diluted with diluent First reagent Acyl-CoA synthetase To coenzyme Trilithium Adenosine 5'-triphosphate disodium trihydrate 4-aminoantipyrine second reagent, acyl-CoA oxidase, N-ethyl-N-(2-sulfopropyl)-m-toluidine sodium, N-ethylmaleimide first reaction sample to the first reagent, Incubate for 5 minutes. Second reaction The sample after the first reaction is added to the second reagent and incubated for 5 minutes to develop color. Effect CoA remaining after the first reaction has the effect of interfering with the coloring reaction, but the reaction interference is eliminated by N-ethylmaleimide and does not affect the absorbance measurement. (Effect of the invention) In the conventional analysis method using a rotary cuvette, there was only one reaction chamber for one measurement item, which also served as a reagent container for holding measurement reagents. In the analysis of body fluids, it has been difficult to perform two-liquid measurements that can avoid the effects of coexisting substances. In the present invention, by providing two reaction chambers for holding measurement reagents and moving the specimen sequentially, it has become possible to easily carry out two-component measurement in a rotary cuvette. In addition, when performing one-liquid measurement as in the conventional rotary cuvette, by removing either the reagent from the first or second reaction chamber (3) or (4), it is possible to The performance can be similar to that of a rotary cuvette. Furthermore, the rotary cupette of the present invention has a simple configuration in which a sample injection chamber (2), a first reaction chamber (3), and a second reaction chamber (4) are arranged in series in the radial direction on the disk (1). Therefore, it is easy to manufacture.
第１図は本発明の一例を示すロータリー・キューベット
を一部破断した平面図、第２図は第１図の■−■線に沿
った拡大断面図、第３図は１回目の遠心操作の状態を示
す断面図、第４図は検体が第１反応室の底に溜まってい
る状態の断面図、第５図は２回目の遠心操作終了後、検
体が第２反応室の底に溜まっている状態を示す断面図、
第６図は従来例のロータリー・キューベットの一部を破
断した平面図、第７図は第６図■−■線に沿う断面図、
第８図は他の従来例の断面図である。
（１）・・・円 盤
（３）・・・第１反応室
（４）・・・第２反応室
（６）・・・第２通路
（９）・・・第１試薬
（２）・・・検体注入室
（３３）・・・凹 部
（５〉・・・第１通路
（８）・・・検 体
（９１）・・・第２試薬
第７図
第８図Fig. 1 is a partially cutaway plan view of a rotary cuvette showing an example of the present invention, Fig. 2 is an enlarged sectional view taken along the line ■-■ in Fig. 1, and Fig. 3 is the first centrifugation operation. Figure 4 is a cross-sectional view showing the state where the sample has accumulated at the bottom of the first reaction chamber, and Figure 5 is a cross-sectional view showing the state where the sample has accumulated at the bottom of the second reaction chamber after the second centrifugation operation. A cross-sectional view showing the state in which
Fig. 6 is a partially cutaway plan view of a conventional rotary cuvette, Fig. 7 is a sectional view taken along the line ■-■ in Fig. 6,
FIG. 8 is a sectional view of another conventional example. (1)...Disk (3)...First reaction chamber (4)...Second reaction chamber (6)...Second passageway (9)...First reagent (2)... ...Sample injection chamber (33)...Concavity (5>...First passage (8)...Sample (91)...Second reagent Fig. 7 Fig. 8
Claims (1)
ベットにおいて、回転中心側に検体（８）を収容する検
体注入室（２）、該検体注入室（２）の半径方向外側に
第１反応室（３）、該第１反応室の半径方向外側に第２
反応室（４）が形成され、検体注入室（２）の上部に第
１反応室（３）に連通する第１通路（５）が開設され、
第１反応室（３）には円盤の外周側の後壁（３２）に第
１通路に対向して凹部（３３）及び該凹部（３３）の下
方に第２反応室（４）に連通する第２通路（６）が開設
され、凹部（３３）と第２通路（６）との間に堰（３４
）が第１反応室の後壁に突設されているロータリー・キ
ューベット。 ［２］第２反応室（４）の天井面と底面とに光学測定用
の光学窓（４１）（４２）が形成されている特許請求の
範囲第１項に記載のロータリー・キューベット。[Scope of Claims] [1] In a rotary cuvette used in a centrifugal device for sample analysis, a sample injection chamber (2) that accommodates a sample (8) on the rotation center side, and a radial direction of the sample injection chamber (2). A first reaction chamber (3) on the outside, and a second reaction chamber (3) on the outside in the radial direction of the first reaction chamber.
A reaction chamber (4) is formed, and a first passageway (5) communicating with the first reaction chamber (3) is established in the upper part of the sample injection chamber (2).
The first reaction chamber (3) has a recess (33) in the rear wall (32) on the outer peripheral side of the disc facing the first passage, and a portion below the recess (33) that communicates with the second reaction chamber (4). A second passage (6) is opened, and a weir (34) is opened between the recess (33) and the second passage (6).
) is a rotary cuvette protruding from the rear wall of the first reaction chamber. [2] The rotary cuvette according to claim 1, wherein optical windows (41) and (42) for optical measurement are formed on the ceiling and bottom surfaces of the second reaction chamber (4).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17068789A JP2731423B2 (en) | 1989-06-30 | 1989-06-30 | Rotary cuvette |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17068789A JP2731423B2 (en) | 1989-06-30 | 1989-06-30 | Rotary cuvette |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0335144A true JPH0335144A (en) | 1991-02-15 |
| JP2731423B2 JP2731423B2 (en) | 1998-03-25 |
Family
ID=15909533
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17068789A Expired - Lifetime JP2731423B2 (en) | 1989-06-30 | 1989-06-30 | Rotary cuvette |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2731423B2 (en) |
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