JPH032556A

JPH032556A - 電気泳動用媒体

Info

Publication number: JPH032556A
Application number: JP1137757A
Authority: JP
Inventors: Tsutomu Nishine; 勤西根
Original assignee: Shimadzu Corp
Current assignee: Shimadzu Corp
Priority date: 1989-05-30
Filing date: 1989-05-30
Publication date: 1991-01-08

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、電気泳動用媒体、特に、生化学や臨床分析等
の電気泳動に属する技術に用いられる電気泳動用媒体に
関する。

〔従来の技術〕

電気泳動用媒体として、たとえばポリアクリルアミドゲ
ルが使用される。このポリアクリルアミドゲルは、アク
リルアミドを重合させることによって得られる。ポリア
クリルアミドゲルは、アクリルアミドが水溶性のモノマ
ーであるため、ガラスや合成樹脂等の不透水性物質から
なるチューブの中あるいは基板の上で直接ゲル化させる
ことにより、円柱状や平板状に形成されている。そして
、チューブ中や基板上に形成されたゲルに試料を注入し
、電気泳動が行われている。

〔発明が解決しようとする課題〕

たとえば、チューブ中のゲルで分離した試料を２次元的
に電気泳動させるためには、ゲルをチューブから取り出
す必要がある。これは、分離した試料を不透水性のチュ
ーブから透過させて取出すのは物理的に不可能なためで
ある。

しかし、チューブ中のゲルを取り出したり、また取り出
されたゲルを取り扱うのは非常に困難である。たとえば
、取り出し時にゲルが切断されたり、あるいは伸びたり
曲がったりすることがある。

そのため、２次元的に電気泳動を行う場合、再現性のあ
る結果が得られにくいという問題がある。

また、電気泳動後に、分析結果を視認等するためにゲル
に対して染色を行う場合があるが、この染色時にも、同
様にゲルをチューブから取り出すので、作業性が悪いと
いう問題がある。

本発明の目的は、取扱が容易な電気泳動用媒体を提供す
ることにある。

本発明の電気泳動用媒体は、電気泳動用分離ゲルと、電
気泳動用分離ゲルを覆う絶縁フィルムとを備えている。

しかも、絶縁フィルムは、多孔を有している。

〔作用〕

本発明の電気泳動用媒体は、たとえば、ガラス等の不透
水性物質からなるチューブの内側面に多孔を有する絶縁
フィルムを配置して、その中でゲルを作成することによ
り得ることができる。

この電気泳動用媒体は、たとえば電気泳動を行った後に
、前記ガラスチューブから取り出される。

電気泳動用媒体は、絶縁フィルムで補強されているため
、取り出しが容易であり、また取り出し後の取扱が容易
である。また、絶縁フィルムは多孔を有しており、分離
した試料を外部へ透過させることができる。そのため、
電気泳動用分離ゲルをさらに絶縁フィルムから取り出す
ことなく、分離した試料の検出や２次元的に電気泳動を
行うことができる。

〔実施例〕

第１図に、本発明の一実施例に係る電気泳動用媒体を示
す。

電気泳動用媒体１は、円柱状に形成されたゲル２と、そ
のゲル２の長手方向の表面全体を覆う多孔フィルム３と
を備えている。

ゲル２は、たとえば、ポリアクリルアミドゲルが用いら
れる。その他、ポリメタクリルアミド等の一般的な電気
泳動用のゲルが用いられてもよい。

多孔フィルム３は、絶縁性物質で構成されるフィルムで
あり、たとえば、ポリエステル、ポリアミド、ポリエチ
レン等からなる。多孔フィルム３の孔の孔径は、０．１
０〜０．０１μｍ程度が望ましい。孔径が小さすぎる場
合には、試料等が透過しにくくなる。一方、孔径が大き
すぎる場合には、後述するガラスチューブ４と多孔フィ
ルム３との間に、ゲル２が漏れ出すことがある。なお、
多孔フィルム３として望ましいものは、ポリエステルフ
ィルムＩＬＥ−１０１５（商品名、旭化成■製）である
。

電気泳動用媒体１は、第２図に示すように、円筒状のガ
ラスチューブ４の内部で形成される。電気泳動用媒体ｌ
を形成するには、ガラスチューブ４内面に多孔フィルム
３を配置する。そして　アクリルアミド水溶液を充填し
、ゲル化させる。なお、ガラスチューブ４以外に、絶縁
性を有する不透水性の物質、たとえばアクリル樹脂や塩
化ビニル樹脂等の合成樹脂製のチューブが用いられても
よい。

次に、前記電気泳動用媒体１を用いた電気泳動について
説明する。ここでは、蛋白質の分析を行う場合について
説明する。

電気泳動を行うには、上述したように、電気泳動用媒体
１をガラスチューブ４内で作成した状態で、ゲル２に試
料を注入する。そして、ゲル２の両端部に電解液を接触
させて電圧を印加し、たとえば等電点電気泳動を実行す
る。これにより、蛋白質は個々の等電点に応じて分離す
る。なお、電気泳動時には、発熱するため、ガラスチュ
ーブ４は冷却媒体中に置かれる。

等電点電気泳動が終了すれば、電気泳動用媒体１をガラ
スチューブ４から引き抜く。この際、電気泳動用媒体１
は、第１図に示すように、ゲル２が多孔フィルム３によ
り覆われた状態で引き抜かれる。そのため、ゲル２は、
切断等することなく容易に取り出される。ガラスチュー
ブ４から取り出された電気泳動用媒体１については、分
離した試料の検出、あるいは２次元電気泳動が行われる
。

試料の検出を行う場合には、ゲル２を多孔フィルム３か
ら取り出すことなく、直接検出することができる。また
、染色による検出を行う場合には、電気泳動用媒体１を
ＣＢＢＲ２５０中に浸漬することにより検出することが
できる。これは、染色試薬が多孔フィルム３の多孔から
ゲル２へ浸透するためである。

また、２次元電気泳動を行う場合には、電気泳動用媒体
１を、第３図に示すように、２次元電気泳動用のゲル５
上に載せる。ゲル５は、矩形状の＝５薄手のゲルであり、ゲル２と同様のゲル、たとえばポリ
アクリルアミドゲルにより形成されている。

電気泳動用媒体１は、ゲル５の長手方向の一方の端縁近
傍に短手方向と平行に配置される。この際、電気泳動用
媒体１は、取扱が容易であるため、曲がりやねじれを起
こすことなくゲル５上に配置される。２次元電気泳動は
、ゲル５の長手方向、すなわち電気泳動用媒体１の長手
方向と直交する方向に電圧を印加することにより行われ
る。この際、電気泳動用媒体１内の試料は、多孔フィル
ム３の多孔を透過し、ゲル５上を泳動する。これにより
、先に等電点電気泳動により分離した蛋白質は、さらに
、たとえば分子量に応じて分離する。なお、２次元電気
泳動では、上述のように、電気泳動用媒体１が曲がりや
ねじれを起こすことなくゲル５上に配置されているため
、再現性の優れた結果を得ることができる。

〔他の実施例〕

（ａ）前記実施例では、電気泳動用媒体を円柱状に形成
したが、電気泳動用媒体１は角柱状でもよい。

この場合、ガラスチューブ４には、角柱状のものを用い
ることとなる。

（ｂ）第４図に、電気泳動用媒体を製造するための他の
装置を示す。この装置は、電気泳動用媒体の製造及び電
気泳動の双方を行うことができる装置である。

製造装置は、主に、上端部が開口した樹脂製の容器１５
からなる。容器１５の底部近傍及び上端近傍には、容器
１５内部を底面とほぼ平行に仕切る仕切り部材１６．１
７が設けられている。これにより、容器１５は、底室１
５Ａ、中室１５Ｂ、上室１５Ｃに区画されている。それ
ぞれの仕切り部材１６．１７の中央部には、中心部に開
口１６Ｂ、１７Ｂを備えたゴム栓１６Ａ、１７Ａが設け
られている。

前記製造装置には、多孔フィルムからなる円筒状のチュ
ーブ１３が、その下端部と上部とがそれぞれ開口１６Ｂ
、１７Ｂにより支持されて装着される。また、中室１５
Ｂ内にパラフィンオイル１８が充填される。そして、チ
ューブ１３の下端の開口部をゴム栓１９により封止し、
上端の開口部からアクリルアミド水溶液を充填し、ゲル
化させる。これにより、電気泳動用媒体１１が作成され
る。

こうして得られた電気泳動用媒体１１は、容器１５に装
着したままで電気泳動を行うことができる。この場合に
は、第５図に示すように、チューブ１３の下端のゴム栓
１９を取り外し、底室１５Ａ及び上室１５Ｃを電解液２
０で満たす。そして、チューブ１３の上端と下端とに電
圧を印加することにより、電気泳動を行うことができる
。なお、この場合、パラフィンオイル１８は、電気泳動
時に生じる熱を吸収する役割を果たす。電気泳動が終了
した後、電気泳動用媒体１１は、容器１５から取り出さ
れる。そして、軽く洗浄された後、検出や２次元電気泳
動が行われる。

（Ｃ）電気泳動用媒体は、平板状に形成されてもよい。

次に、これについて説明する。

第６図に、平板状の電気泳動用媒体の縦方向部分断面図
を示す。この電気泳動用媒体２１では、平板状のゲル２
２の底面及び側面部分が多孔フィルム２３により覆われ
ている。

このような電気泳動用媒体２１を製造するためには、た
とえば、第７図に示すような装置を用いる。この装置は
、主に、平面形状が矩形状のガラス板２４と、ガラス板
２４の両側縁部に配置された１対の角柱状のスペーサ２
５．２５と、ガラス板２４とほぼ同一形状を有する蓋体
（図示せず）とから構成されている。

この装置により電気泳動用媒体２１を製造するためには
、まず、ガラス板２４の表面と１対のスペーサ２５．２
５の対面する側面とを覆う多孔フィルムを配置する。そ
して、多孔フィルムの中央部にアクリルアミド水溶液を
滴下し、スペーサ２５．２５上に蓋体を載せる。これに
より、アクリルアミド水溶液が多孔フィルム上を四方に
広がってガラス板２４の表面前面を覆うこととなる。こ
の状態でゲル化すれば、第６図に示すような電気泳動用
媒体２１が得られる。

なお、この実施例では、多孔フィルムとして、両側縁部
にあらかしめ１対のスペーサが設けられたものを用いて
もよい。この場合には、多孔フィルムが平板状のゲルの
底面のみを覆った電気泳動用媒体が製造される。

（ｄ）多孔フィルムは、前記第７図の実施例のように、
ゲルの少なくとも一主面を泳動方向にわたって覆ってい
ればよく、必ずしも全周側面を覆う必要はない。

〔発明の効果〕

本発明では、電気泳動用分離ゲルを、多孔を有する絶縁
フィルムにより覆っている。そのため、取扱の容易な電
気泳動用媒体を得ることができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の一実施例に係る電気泳動用媒体を示す
縦断面図、第２図は電気泳動用媒体をガラスチューブ内
に形成した状態を示す縦断面図、第３図は２次元電気泳
動状態を示す平面図、第４図は他の実施例に係る電気泳
動用媒体の製造装置の縦断面図、第５図はその装置を用
いて電気泳動を行っている状態を示す縦断面図、第６図
はさらに他の実施例に係る電気泳動用媒体を示す縦断面
部分図、第７図はその電気泳動用媒体の製造装置を示す
斜視図である。１．１１．２１・・・電気泳動用媒体、２，２２・・・
ゲル、３，１３．２３・・・多孔フィルム。特許出願人　　株式会社島津製作所代理人　　　弁理士　小　野　由己男

Claims

【特許請求の範囲】

（１）電気泳動用分離ゲルと、前記電気泳動用分離ゲルを覆う絶縁フィルムとを備え、前記絶縁フィルムは多孔を有している、電気泳動用媒体。