JPH03220124A - グルタミン酸拮抗剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 中枢神経系に於けるグルタミン酸レセプター機能を阻害
するグルタミン酸拮抗剤に関する。

〔従来の技術〕

グルタミン酸は中枢神経系の興奮性神経伝達物質として
大きな役割を果たしているが、その一方で、過剰のグル
タミン酸は神経細胞を破壊することが知られている。す
なわち、グルタミン酸が神経細胞に過度の興奮をひきお
こして細胞死に到らしめるものと考えられ、この現象は
興奮毒性と呼ばれている。このような興奮毒性は神経変
性障害の病因となるものであり１　グルタミン酸拮抗作
用ををする薬物は神経変性障害の治療薬として有用であ
る。

グルタミン酸拮抗剤としては１例えば６−ニトロ−ツー
シアノキノキサリン−２，３−ジオンが知られている（
Ｅｕｒ、Ｊ、Ｐｈａｒ＋ｎａｃｏｌｏｇＬ　　１５６．
　１７７１８０　（１９８８）及び　５ｃｉｅｎｃｅ、
２４１．７０１（１９８８））。

〔発明の目的〕 本発明は、グルタミン酸拮抗剤を提供するものであり、
特に、中枢神経系のグルタミン酸レセプターのグリシン
調節部位に選択的に作用する副作用の少ない医薬を提供
することを目的とする。

〔発明の構成〕

本発明のグルタミン酸拮抗剤は有効成分として下記式（
１） で表されるキノキサリン化合物〔但し上記式（１）に於
いてＲ’及びＲ２は互いに独立して水素原子（但しＲ１
及びＲ２が同時；こ水素原子の場合を除く）、ハロゲン
原子（但しＲ″及乙τＲ４が同時に水素原子の場合塩素
原子を除＜）、Ｃ，−Ｃ，アルキル基、ＣＩ　Ｃｓアル
コキ／基、カルボキシル基、又は一般式（ＩＩ） （但し上記式（ｎ）に於いてＲ’及びＲ６は互いに独立
して　水素原子、Ｃ３Ｃｓアルキル基Ｃ，−Ｃ，アンル
基、又はベンジル基を表す。）を表し、Ｒ３及びＲ４は
同時に水素原子を表すか又は互いに独立してＣＩ　Ｃｓ
アル牛ル基、アリール基１　アリル基、Ｃ３Ｃ？シクロ
アル牛ル基、又はアラルキル基を表す。〕を含有する。

当該化合物は既知化合物であり１例えば下記文私記載の
方法により製造できる。

化合物１．　　（ＩＨ，４Ｈ）　−６−カルボキシ−キ
ノキサリンー２．３−ジオン　　（ＵＳ　　３２９６２
６７） 化合物２．　　（ＩＨ，４Ｈ）−６’、？−ジアミノー
キ／−＋”ｆＵン　２，３−ジオン　（ＵＳ　　３３２
６９１５） 化合物３．（ＩＨ，４Ｈ）　−６，７−ジメチル−キノ
キサリンー２，３−ジオン　（ＵＳ　　３９９２３７８
） 化合物４．　　（ＩＨ，４Ｈ）−６，７−ジフルオロ−
キサリン−２，３−ジオン　（ＥＰ４０７４５５） 化合物５．　　（１Ｈ，４Ｈ）−６−メトキシ−キノキ
サリンー２．３−ジオン　（ＥＰ　　１０７４５５） 化合物６．６゜７−ジクロロ−１，４−ジメチルキノキ
サリン−２，３−ジオン　［Ｊ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓａｃ
。

、　１１７０−１１７６（１９６２）］化合物？、（Ｉ
Ｈ，４Ｈ）−６，７−ジブロム−キノキサリンー２．３
−ジオン　［Ｊ、　Ｃｈａｍ、　Ｓａｃ。

、　１１７０−１１７６（１９６２）］］化合物８．１
．４−ジメチルキノキサリン２゜３−ジオン　ＣＣｈｅ
ｍ、Ｂｅｒ’、、１１１（５）１７５３−１７６２（１
９？８）″ 化合物９．（１Ｈ，４Ｈ）−６７−ジアセドアミノーキ
ノキサリンー２．３−ジオン 又、化合物９は新規化合物であり実施例１の方法で合成
することができる。

グルタミン酸は哺乳類の中枢神経における興奮性神経伝
達物質の１つであり、グルタミン酸作動神経は特に大脳
皮質から視床、線条体への経路、小脳や海鳥において確
認されている。グルタミン酸作動神経におけるグルタミ
ン酸レセプターとしては現在のところキスカル酸（ＱＡ
）レセプター、カイニン酸（ＫＡ）レセプターおよびＮ
−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）レセプター
と呼ばれる少なくとも３種類のサブタイプが存在するこ
とが確ｚ忍され、このうちＮＭＤＡレセプターは口重乳
動物のみに存在することが知られている。

Ｎ　Ｍ　Ｄ　Ａレセプターに働く拮抗剤としては主に３
つの型が知られている。１つはレセプターそのものへの
競合的拮抗剤であり、例えばＣＰＰ　（３−（２−カル
ボキシピペラジン−４−イル）プロパン−１−リン酸）
、ＡＰ−５（２−アミノ−５−ホスホノペンタン酸）　
、ＡＰ−７（２−アミノ−７−ホスホノへブタン酸）な
どが知られている。もう１つはレセプターに付随して存
在するイオンチアンネルの遮断剤であり例えば！ＪＫ−
８０１（Ｄ　−５−メチル−１０１１−ジヒドロ−５Ｈ
−ジベンゾ〔ａｄ〕サイクロヘプテン−５，１０−イミ
ン）などが知られている。さらに１つはレセプターに付
随して存在するグリシン調節部位の阻害剤であり。

例えば７−クロロキヌレン酸が知られている。

一方、最近の基礎的研究の急速な進展によって、グルタ
ミン酸の興奮性伝達物質としての生理的役割が解明され
るとともに種々の病態との゛関連についても解明が進み
つつある。その結果、神経細胞の興奮毒性は例えばアル
ツハイマー病、舞踏病、を髄小脳変性症、卒中発作、脳
性麻厚、てんかん、低血糖佐神経障害、脳虚血、−酸化
炭素中毒等の神経変性障害の原因となることが示唆され
ている。

このような状況下に本発明者は、前記キノキサリン誘導
体が易１０Ａレセプターの拮抗剤なかんずくグリシン調
節部位の選択的阻害剤となることを見出したものである
。

本発明の有効成分である。肋記式（Ｉ）でしめされるキ
ノキサリン誘導体は強いグルタミン酸拮抗作用を示すの
で、上記のまうな神経変性障害の治療薬として有効であ
り、しかもＮ　Ｍ　Ｄ　Ａレセプターのグリシン調節部
位を選択的に阻害するので副作用の少ない優れた医薬品
になるものと期待される本発明のグルタミン酸拮抗剤は
経口的または非経口的に投与することができる。すなわ
ち通常用いられる投与形態、例えば錠剤、カプセル剤、
シロップ剤、懸濁液等の型で経口的に投与することがで
き、あるいは溶液、乳剤、懸濁液等の液剤の型にしたも
のを注射剤として投与することができる。半開の型で直
腸投与することもできる。このような投与剤型は通常の
担体、賦型剤、結合剤、安定剤などと有効成分を配合す
ることにより一般的方法に従って製造することができる
。注射剤型で用し）る場合には緩衝剤、溶解補助剤、等
張剤等を添加することもてきる。

投与量、投与回数は症状、年令、体重、投与形態等によ
って異なるが、経口投与する場合には通常は成人に対し
１日あたり１〜１００ｍｇ、非経口投与する場合には０
．１〜１０ｍｇを１回または数回に分けて投与すること
ができる。

以下に実施例により本発明を詳述する。

実施例１　　　（ＩＨ，４Ｈ）−６，７−ジアセドアミ
ノーキノキサリンー２，３−ジオン（ＩＨ，４Ｈ）　−
６，７−シアミツ−キノキサリンー２．３−ジオン９６
ｎ＋ｇ、無水酢酸２ｍｌ及びジメチルスルホキシド５ｍ
ｌの混合液を室温で３時間３０分攪拌し１反応液を水６
０ｍ１中に注入した。析出晶を濾取し、メタノールで洗
浄しくＩＨ４Ｈ）−６，７−ジアセドアミノーキノキサ
リンー２．３−ジオン８５ｍｇ（収率　５８％）を得た
融点　　３００℃以上 ＩＲ（ＫＢｒ）　　；１７２０．　１６９０．　１６６
：ｌＣｍ 実旅例２ 本発明グルタミン酸拮抗剤の有効成分である一般式（１
）で示されるキノキサリン誘導体がＮ　Ｍ　Ｄ　Ａレセ
プターに働く拮抗剤であることは、Ｎ　！Ｊ　［１Ａイ
オンチ丁ンネルにグルタミン酸依存性に結合した〔３Ｈ
）　＆ＩＫ−８０１をその結合部位から排除する能力を
測定することによって示すことができる。

レセプターそのものへの競合的拮抗剤としての性質は、
　ＮＭＤＡレセプターそのものに結合した〔’Ｈ］　Ｇ
ｌｕ（グルタミン酸）またはＣ３ＨＥＣＰＰを排除する
能力を測定するこ止によって示すことができ、グリシン
調節部位の阻害剤であることは。

グリシン調節部位に結合したＣ　３Ｈ）　Ｇｌｙ　　（
グリシン）を排除する能力を測定することによって示す
ことができる。

これらの活性はＩＣ，。で示すこともでき、この値は〔
’Ｈ］　ＭＫ−８０１，Ｃ’Ｈ）　Ｇｌｕ、　　Ｃ’Ｈ
３ＣＰＰおよびＣ”Ｈ）　Ｇｌｙの５０％を排除するに
要する供試化合物の濃度（μＭ）を表わす。

試験方法は次のとおりである。

［’Ｈ］！Ｊに一８０１結合試験 粗シナプス膜標品をウィスター系雄性ラット全脂より調
整したのち、５０ｍＭ）ＩＪス酢酸緩衝液（ｐＨ７，４
）を用いて、　５００．ＯＯｇ、　３０分間の遠心分離
による洗浄操作を３回行った。沈渣は０，３２Ｍショ糖
水溶液に懸濁状態で一８０℃にて凍結保存した。使用時
には、凍結懸濁液を室温融解後０　、　０８　％　ト　
リ　ト　ンＸ−１００で　２　℃、　　１０　分間の前
処理を行った。前処理ののち、上述の遠心分離洗浄操作
を２回行った標品を結合実験に供した。結合実験は膜標
品（約２５０μｇ蛋白）を５％Ｍ　Ｃ’Ｈ）　ＭＫ−８
０１（２９、４Ｃｉ／ｍｍｏ＋）と２℃または３０℃で
３０分間反応させて行った。反応は、ワットマンＧＰ／
Ｂグラスフィルターを用いた吸引濾過法により停止した
。フィルター上の放射活性は、液体シンチレーション法
（測定効率４０−４２％）により測定した。

非特異的結合は０．１ｍＭ　　ＭＫ−８０１存在下の放
射活性より算出した。

Ｃ’Ｈ〕Ｇｌｕ結合試験 脳シナプス膜標品調整、ウィスター系雄性うッ）　（２
００−２５ｈ）の全脂から粗シナプス膜標品を調整した
のち、５０ｍ！、ｌ）リス酢酸緩衝液（ｐＨ７，４）に
懸濁して、　５０，０００ｇ、　３０分間の遠心分離に
よる洗浄操作を３回繰り返したのち、標品を０．　３２
Ｍショ糖水溶液に懸濁状態で一８０℃にて凍結保存した
。使用時には、凍結懸濁液を室温融解後０　、　０８　
％　ト　リ　ト　ンχ　−１００で　２　℃、　　１０
　分間の前処理を行った。処理後遠心分離洗浄操作を２
回行った。

Ｃ３Ｈ）　Ｇｌｕ結合実験：膜標品（約１００μｇ蛋白
）を１０　ｎＭ　Ｃ”Ｈ）　Ｇｌｕ　　（３０Ｃｉ／ｍ
ｍｏｌ）と５０ｍＭ）リス酢酸緩衝＃（ｐ）４７．４）
中２℃、１０分間反応させて行った。反応は、ワットマ
ンＧＦ／Ｂグラスフィルターを用いた吸引濾過法により
停止した。Ｎ　Ｍ　Ｄ　Ａ感受件結合は０　、　　ｌ　
ｄ　ＮＭＤＡの存在下の結合（Ｎ！、ＩＯＡ非感受性結
合）を全結合から差し引くことにより算出した。

ｒ’Ｈ］　ＣＰＰ結合試験 ラット全脳から調整した粗シナプス膜標品を、５０＋Ｉ
Ｍ）リス酢酸緩衝液（ｐＨ７，４）を用いて、５０．０
００ｇ、　３０分間の遠心分離による洗浄操作を３回行
った。得られた沈渣は０．３２Ｍショ糖水溶液に懸濁し
て、−８０℃にて凍結保存した。使用時には９本凍結懸
濁液を室温融解後、０．０８％トリトンＸ−１００で２
℃、１０分間の前処理を行った。前処理標品は、洗浄操
作を２回行ったのちの結合実験に供した。結合実験はこ
の懸濁液（約２５０μｇ蛋白）を同ＩＪＥ衝液中で１０
μＭ［”Ｈ）　ＣＰＰ　　（３０、７Ｃｉ／ｍｍｏｌ）
と２℃、１０分間反応させて行った。反応は、ワットマ
ンＧＦ／Ｂグラスフィルターを用いた吸引濾過法により
停止した。非特異的結合は１　ｍＭ　Ｇｌｕ存在下の放
射活性より算出した。

［３）１）　Ｇｌｙ結合試験 脳シナプス膜標品調整：ラット全脂から粗シナプス膜標
品を調整後、本標品を５０ｍ）Ｊ）＋Ｊス酢酸緩衝液（
ｐＨ７，４）を用いて、５０，０００ｇ、　３０分間の
遠心分離による洗浄操作を３回行った。沈渣は０．３２
シ１シヨ請水溶液に懸濁状態で一８０℃にて凍結保存し
た。使用時には、凍結懸濁液を室温融躬後、０．０８％
トリトンＸ−１００で２℃ｌＯ分間の前処理を行った。

前処理後、前述の洗浄接作を２回行った標品を実験に供
した。

Ｃ３ＨＥ　Ｇｌｙ結合実験：シナプスｙ標品（約１５０
−２００μｇ蛋白＞　　１０ｎＭ［’Ｈ〕Ｇａｙ　　（
４０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）と２℃、１０分間反応させて行っ
た。

反応は、ワットマンＧＦ／Ｂグラスフィルターを用いた
吸引濾過法により停止した。

非特異的結合は１ｍＭＧ！ｕ存在下の放射活性より算出
した。

試験結果 （１）本願化合物群より代表的化合物についてＣ”Ｈ３
ＵＫ−８０１結合の阻害活性を以下の表１に示した。

表１ （被験化合物１ μｇ　／　ｍ

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） で表されるキノキサリン化合物〔但し上記式（ I ）に
   於いて、Ｒ＾１及びＲ＾２は互いに独立して水素原子（
   但しＲ＾１及びＲ＾２が同時に水素原子の場合を除く）
   、ハロゲン原子（但しＲ＾３及びＲ＾４が同時に水素原
   子の場合塩素原子を除く）、Ｃ＿１−Ｃ＿５アルキル基
   、Ｃ＿１−Ｃ＿５アルコキシ基、カルボキシル基、又は
   一般式（II） ▲数式、化学式、表等があります▼（II） （但し上記式（II）に於いてＲ＾５及びＲ＾６は互いに
   独立して水素原子、Ｃ＿１−Ｃ＿５アルキル基、Ｃ＿１
   −Ｃ＿５アシル基、又はベンジル基を表す。）を表し、
   Ｒ＾３及びＲ＾４は同時に水素原子を表すか、又は互い
   に独立してＣ＿１−Ｃ＿５アルキル基、アリール基、ア
   リル基、Ｃ＿３−Ｃ＿７シクロアルキル基、又はアラル
   キル基を表す。〕を有効成分として含有するグルタミン
   酸拮抗剤。
2. （２）神経変性障害の治療薬である請求項１記載のグル
   タミン酸拮抗剤。
3. （３）（１Ｈ，４Ｈ）−６，７−ジブロモキノキサリン
   −２，３−ジオンである請求項１記載のグルタミン酸拮
   抗剤。
4. （４）下記一般式（III） ▲数式、化学式、表等があります▼（III） （但し上記式（III）に於いてＲ＾７及びＲ＾８がアル
   カノイルアミノ基をあらわす。）で表される化合物。
5. （５）（１Ｈ，４Ｈ）−６，７−ジアセトアミノキノキ
   サリン−２，３−ジオンである請求項４記載の化合物。