JPH03106896A - ３０位置換グリチルリチン誘導体及びそれを膜形成成分とするリポソーム製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明はＷｒ規な３０位置換グリチルリチン誘導体及び
それを膜形戊戊分とするリポソーム製剤に関する．特に
本発明は肝臓をターデットとする薬物を取り込むための
リポソームに関する．（従米の技術） リポソームは、脂質を水又は薬物水溶液中に懸濁させた
際に形虞される脂質２分子膜より或る閉鎖小胞であり、
その内部水相や脂質２分子膜中に種々の薬物を保持でき
ること、構威脂質が生体内で分解可能で毒性が低いこと
から、近年薬物運搬体としての利用が種々試みられてい
る．その特徴としては、体内動態改善によるｌ１ｊ作用
の低減、不安定薬物の安定化、徐放化、更に薬物を標的
部位へ直接到達させるための担体としても注目されてお
り、医学領域での研究が盛んである．従米リポソーム形
戒に用いられている脂質は、ホス７７チノルコリン“な
どのリン＃＃質が一般的であり、コレステロールや種々
の荷電脂質も用いられている．しかし、これらの脂質を
膜虞分とするリポソームは、（１）目的組織への薬物到
達性の点において未だ不十分である、（２）その内部に
保持する薬物の量に限界がある、（３）血中で不安定で
崩壊する等の問題点があり、現在までのところ実用化さ
れるには至っていない． 一方、グリチルリチン自体は種々の生物活性を有し、臨
床的にウイルス性肝炎等の肝疾患の治療剤として汎用さ
れでおり、又最近ではエイズ治療剤としての有用性も認
められている薬物である．その投与後のａＩｓ分布は投
与ルートにより相異するが、肝臓、皮膚、血漿等に比較
的多いことは知られている（　Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．
Ｂｕｌｌ，　ｖｏｌ．３２　３７３４〜３７３８（１９
８４）　］　．又、投与量の約８０％は胆汁排泄すると
言われており、グリチルリチン自体の肝臓親和性は実測
値よりもかなり高いことが予想される（　Ｊ　．Ｐｈｉ
ｒ＋ｓ．Ｓｃｉ，　ＶＯＩ，７５　６７２−６７５（１
９８６）　］　，（発明が解決しようとする課題） 本発明は目的とする組織に親和性を有する化合物でリボ
ンーム表面を修飾し、Ｈ的岨練へ薬物を選択的に到達さ
せ、蓄積することの可能なリポソーム製剤を提供するこ
とを目的とする。

（課題を解決するための手段） 本発明は下記一般式（１）で表わされる３０位置換グリ
チルリチン誘導体、及び該グリチルリチン講導体を膜形
或戊分の一戊分とするリポソーム製剤に係る． （式中Ｒは炭素数ｌ２〜１８／）　７ルキル基、ＸはＯ
又はＮ　Ｈを示す） 尚、３０位アルキル置換グリチルリチンは３０−メチル
グリチルリチンが、ケミカル・７７−マシューテイカル
・プリチン（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｖ，Ｂｕｌｌ．　）Ｖ
ＯＩ，２８　３０７８〜３０８６（１９８０）にて公知
であるが、本発明の３０位置換グリチルリチン誘導体は
従来全く文献に記載のない新規化合物である． 本発明者らは、以前より目的組織へ薬物を選択的に到達
させ、蓄積させる、リン脂質等に代わる脂質を探索し、
ドラッグキャリアへの応用を検討してきたが、今般、グ
リチルリチンの肝ｌｌＮ親和性に着目し、これをリポソ
ーム膜に組み込むことを考案した。即ち視脂質性誘導体
である３０位置換グリチルリチン誘導体を合威し、この
化合物をリボンームの脂質膜に組み込むことにより、通
常のリボンームに比べて、肝臓に対する顕著な選択的蓄
積性を有することを見出し、本発明を完虞した．上記一
般式＜１）においてＲで示される炭素数１２〜１８のア
ルキル基としては、ドデシル基、トリデンル基、テトラ
デシル基、ペンタデシル基、ヘキサデシル基、ヘプタデ
ンル基、オクタデシル基等が挙げられる．上記一般式（
１）で示される化合物のうち好ましい化合物としては、
３０−ステアリルグリチルリチン（Ｇ　Ｌ　Ｏ　Ｓ　ｔ
）、Ｎ−ステ７リルー３０−グリチルリチナミド（ＧＬ
ＮＨＳｔ）が挙げられる。

本発明の３０位置換グリチルリチン誘導体は、例えば、
下記反応工程式に従いｌ！！！することができる． （式中、Ｒ及びＸは前記に同じ、Ｒ゜はメチル基又はベ
ンノル基を示す） く第１工程〉 一般式（ＩＩ）のグリチルリチンの６゛及ぴ６″のカル
ボン酸基を適当な保護基で置換する必要があるため、一
般式（ＩＩ）のグリチルリチンを適当な溶媒中で塩基の
存在下又は不存在下にメチル化剤と反応させるか、或い
は適当な溶媒中でベンノルアルコールの反応性誘導体と
反応させることにより、一般式（Ｉ［Ｉ）の６゛，６”
一ノ置換グリチルリチンを得る。メチル化剤としては、
ジアゾメタン、トリメチルシリルジ７ゾメタン、ヨード
メタン、硫酸ノメチル等が挙げられる。但し、ヨードメ
タン、硫酸ジメチルは塩基の存在下に用いるのが良い．
べ冫ジルアルコールの反応性誘導体としては、ベンジル
アルコールとノアルキルカルボノイミドとの反応生威物
であるＯ−ベンジルーＮ，Ｎ’一ジアルキルイソウレ７
等が望ましい．溶媒としては反応に関与しないものであ
れば特に制限はなく、例えばＮ．Ｎ−ノメチルホルムア
ミド、ジメチルスルホキシド、エーテル、テトラヒドロ
７ラン、ベンゼン、メタノール等の各種有機溶媒を単独
で又は２種以上混合して使用できる。塩基としては、例
えばナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カ
リウムメトキシド等のアルカリ金属アルコキサイド、水
酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属水酸
化物、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム等のアルカリ金属
炭酸塩等が使用できる。

反応の割合はグリチルリチンに対しメチル化剤又はベン
ノルアルコールの反応性誘導体を１．５〜２．５倍モル
当量用いるのが好ましく、メチル化剤又はベンジルアル
コールの反応性誘導体を過剰量用いた場合、６゛，６”
，３０−｝り置換グリチルリチンが多く生威されるため
適当ではない．又、反応温度は１００℃以下、通常は室
温で行われる。得られた反応生威物はいくつかの副生成
物を含むため、カラムクロマトグラ７イー等により精製
するのが好ましい． く弟２工程〉 得られた一般式（１）の６゜，６”一ジ置換グリチルリ
チンを適当な溶媒中で、一般式（ＩＶ）で表わされる高
級アルコールの反応性誘導体と反応させるか又は縮合剤
の存在下に一般式（Ｖ）で表わされる高級アミンと反応
させることにより、一般式（ＶＩ）で表わされる化合物
を得る。溶媒としては反応に関与しないものであれば特
に制限はなく、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、
酢酸エチル、ベンゼン、トルエン、ノオキサン、テトラ
ヒド口７ラン等の各種有機溶剤を単独又は２種以上混合
して使用できる。高級７ルフールの反応性講導体として
は、高級アルコール（■）とノアルキルカルポジイミド
との反応生戊物である〇一高級アルキルーＮ，Ｎ゛−ノ
アルキルイソウレ７等が望ましい。縮合剤としてはジエ
チルリン酸冫アニド、ジ７エニルリン酸アンド等を用い
るのが有利である．反応の割合は一般式（ＩＩＩ）で表
わされる化合物に対し一般式（ｒＶ）及び一般式（Ｖ）
の化合物を１〜２倍モル当量用いるのが好ましい。又、
反応温度は１００℃以下で行うのが望ましい． 〈＄３工程〉 得られた一般式（Ｖｌ）で表わされる化合物を常法に従
って脱保護することにより一般式（１）で表わされる本
発明の化合物を得る．例えば、保護基がメチル基の場合
は水酸化カリウムーメタノール溶液中で撹拌するケン化
により、べ冫ノル基の場合はパラジウム触媒等の存在下
に接触還元する加水素分解により行われる． 尚、第１工程の最初に常法により７セチル化し、糖鎖上
の水酸基を保護すれば、ベンノルアルコール及び一般式
（ＩＶ）で表わされる高級アルコールは予め反応性誘導
体に導かな《とも、それ自体を脱水触媒下で反応させる
ことも可能である．これらの方法によって得られた化合
物（１）は濃縮、枦過、再結晶、各種クロマトグラ７イ
ー等の通常当分野で用いられる手段により単離、精製さ
れる。

一方、本発明のリポソーム製剤は上記一般式（１）で表
わされる３０位置換グリチルリチン誘導体を膜形或或分
の一成分として含有する．リポソームはそのＷ４造から
大きく分類すると多重膜リポソーム（ＭＬＶ，　　ｍｕ
ｌｔｉｌａｍｅｌｌａｒｖｅｓｉｅｌｅｓ）、小さな一
枚膜リポソーム（Ｓ　Ｕ　Ｖ　，ｓｍａｌｌ　　ｕｎｉ
ｌｍ＋＊ｅｌｌａｒ　　ｖｅｓｉｅｌｅｓ）や大きな一
枚膜リポソーム（Ｌ　Ｕ　Ｖ　ｔ　　ｌａｒＦＩｅ　　
ｕｎｉｌａｓｅｌｌａｒｖｅｓｉｃｌｅｓ）がある．本
発明のリポソームはいずれの構造にすることも可能であ
る． 本発明のリポソームにおいて使用される他の膜形或威分
としては、ホス７アチジルコリン、ホス７アチジルエタ
／−ル７ミン、ホス７アチジルセリン、ホス７アチジル
イノシトール、リゾホス７アチジルコリン、ス７インゴ
ミエリン、卵黄レシチン、大豆レシチン等の天然もしく
は合戊のリン脂質又は水素添加リン脂質、グリセロ糖脂
質、ノアルキル型合成界面活性剤等の１種又は２種以上
の混合系が挙げられる． 本発明のリポソームはコレステロールやコレスタン等の
ステロールを膜安定化剤として含ませ、膜形虞虞分１部
に対し、０〜２部の範囲内、特に膜形威虞分に対し、ほ
ぼ同量添加するのが有利である． 一方、３０位置換グリチルリチン誘導体は上記リン脂質
等の膜形戊或分に対して必要量を、好ましくは１％〜５
０％（．／．）含有させるのが望ましい．３０位置換グ
リチルリチン誘導体が少ない場合、ノセチルホス７エー
ト、ホス７アチジン酸、〃冫グリオシド等の荷電脂質を
加えるのが有利である。

尚、本発明のリポソームには脂質過酸化を防ぐ目的でビ
タミンＥのトコ７エロール類等の抗酸化剤を添加しても
よい． 本発明のリポソームの調製法には待に限定はなく、これ
まで知られている種々の方法が利用できる． 例えば、３０位置換グリチルリチン誘導体、リン脂質等
の他の膜形戒威分、膜安定化剤、必要であれば荷電ｍ質
、その他の親脂質性添加物及び脂質２分子膜中に保持さ
れる親脂質性の薬物である場合には該薬物を、クロロホ
ルム、エタノール等の有機溶媒に溶解し、溶媒を減圧留
去して薄膜を形處させ、これに親水性薬物の場合は該薬
物を加えた水溶液、好ましくはａｔＩｉｉ液を加え、得
られた混液を攪拌振とうし、必要であれば超音波照射し
、懸濁液となし、次いで未封入薬剤を透析、デル枦過あ
るいは遠心分離等により除去して、リポソーム製剤とす
ることができる． 本発明のリポソームに保持させる薬剤としては、ｌｌＦ
ｉｌにＷ積することにより薬理効果を高めることが可能
な薬剤、特にグルタチオン、メチオニン、プロトボル７
イリンナトリウム、アスパラギン酸塩、Ｄ−ベニシラミ
ン、グルココルチコイド、Ｎ一アセチルシステイン、イ
ンター７エロン等の肝臓疾患治療剤、ＥＤＴＡ，ジエチ
レントリ７ミン五酢酸（Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａ　）、デ７エロ
キサミン等の解毒剤、トリブシン、セラベブターゼ、プ
ａナーゼ、塩化リゾチーム、グルコアミラーゼ、コラデ
ナーゼ、カタラーゼ、メタロチオネイン、スーパーオキ
サイドノスムターゼ等の酵素剤、ノデオキシチミノン、
アデニンアラビノサイド（Ａ　ｒａ−　Ａ　）’ｌの抗
ウイルス剤等が好ましい， このリポソームＭＭはその＊ま注射剤等の使用に供する
ことができる。或いは生埋食塩水等で洗浄後、必要によ
り凍結乾燥し、種々の製剤形態、例えば、経口剤、経皮
剤として使用することも可能である． 更に、本発明のリボゾーム製剤は、グリチルリチン自体
が持つ種々の薬埋作用を発揮することも期待される．例
えば、ウイルス性肝炎等肝疾患の治療剤、エイズ治療剤
、免疫賦活剤などとして利用できる．この場合、本リポ
ソーム製剤に保持させる薬剤としては、グリチルリチン
との相加的或いは相乗的薬理効果を発揮しうる薬剤が好
適である． （実　施　例） 以下に参考例、実施例、実験例を挙げて説明する． 参考例１６゜，６″一ノベンジルグリチルリチン（ＧＬ
−２Ｂｎ）の合威 ＣＩｕｅ（Ｐｈａｒ（Ｂｕｌｌ．　ｖｏｌ．３１　　１
８６６−１８７３（１９８３）に記載の方法に準じて６
゛，６″′一ノペンジルグリチルリチン（ＧＬ−２８ｎ
）を合威した．ベンジルアルコール１０８ｇ　（１，０
曽ｏｆ）及びクシクロヘキシルカルボノイミド（Ｄ　Ｃ
　Ｃ　）　２０６ｇ　（１，Ｏｍｏｌ）を６０℃の温浴
中に均一に溶解させた後、触媒量の塩化第一銅を加え、
ＩＲでノイミドの吸収帯が確認されなくなるまで撹袢し
た．次に反応液をヘキサン２００−に溶解させ、中性ア
ルミナ力ラムに付して塩化第一銅を除去した後、ヘキサ
ンを減圧留去し、Ｏ−ベンノルーＮ，Ｎ’−７シクロヘ
キンルイソウレアを３００ｇ得た。

次１ニグリチルリチン３０．３ｇ　（３７ｍｓｏｌ）を
６０曽ｌのＮ，Ｎ−ノメチルホルムアミド（Ｄ　Ｍ　Ｆ
　’）に溶解させた後、水冷下にＯ−ベンジルーＮ，Ｎ
’−ジシクロヘキシルイソウレア２３．２ｇ（７４輪曽
０１）のＤＭＦ溶液４０−をゆっくりと滴下し、一昼夜
撹拌した．析出した白色沈澱を枦過し、枦液を減圧濃縮
し、黄褐色物質を得た．これをシリカデルカラムクロマ
トグラ７イー（溶出？ｌｋ：　クロロホルムーメタノー
ル系）で単離、精製を行い、６’，６″一ジベンジルグ
リチルリチン（ＧＬ−２Ｂｎ）の白色固体を１０．３．
得た（収率２７．８％）．融点１７６〜１７８℃．実施
例１　　３０−ステアリルグリチルリチン（ＧＬＯＳｔ
）の合威 ステアリルアルコール１．７１ｇ　（６．３ｍｍｏｌ）
及びＤＣ　Ｃ　Ｉ．２４［＋　（６．０１１１１１０１
）を８５℃の油浴中で融解、均一混合した後、そのまま
の温度で触媒量の塩化第一銅を加え、ＴＲでノイミドの
吸収帯が確認されなくなるまで攪拌した． 次に、参考例１で得たＧ　Ｌ　−　２　Ｂｎ　４．ＯＯ
ｇ（４．０ｉ＋ｓｏｌ）のＤＭＦ溶液２０一を反応液中
に加えて８５℃の油洛中で４時間攪件した。この反応液
に酢酸エチル２０一を加えて混合し、析出した白色沈澱
を枦別し、枦液を濃縮乾固し、暗緑色の生戊物を得た。

これをシリカデルなラムクロマトグラ７４−１出［：　
クロロホルム−７タ／−ル系）テ単離、精製を行い、３
０−ステ７リル−６゛，６”一ノベンジルグリチルリチ
ン（ＧＬＯＳｔ−２Ｂｎ）の白色固体を２．９ｇ得た（
収率５７％）．’Ｈ−ＮＭＲスペクトル δ（ＣＤＣＩ３／ＣＤ，ＯＤ＝１／１）１．２８　（　
ｂｒｓ＝　　一（Ｃ　Ｈ　ｚ）ｎ　　）５．２７（ｍｅ
　　φ一（型よー） ５．６８（ｓ，　　｝！−１２） ７．３８（ｍ，　　　φ一） 次に二ｅｎＧ　Ｉ−　Ｏ　Ｓ　ｔ　−　２　Ｂｎ　１，
５０ｇ　（１．２ｍｍｏｌ）をプロビルアルコールー酢
酸エチル混合溶媒に溶解し、触媒としてＰｄｌＣ約１ｇ
を加え、水素ス流下、室温で加水素分解反応を行った。

反応終了後Ｐｄ／Ｃを自然枦過で枦別し、ＰＭを濃縮乾
固し、３〇一ステアリルグリチルリチン（ＧＬＯＳｔ）
の白色結晶を１．２ｇ得た（収率９９％）． 赤外＠収スペクトル（Ｋ　Ｂ　ｒ）ｃｍ−３４３１（Ｏ
Ｈ），　　２９２６，　　２８５４（（ＣＨ２）ｎ）Ｉ
１７２９．　　１６６１（Ｃ　＝　０　）７アーストア
トミツクボンバードメント質量スペクトル（ＦＡＲＭＳ
） ｍ／ｚ　：　１０９７［Ｍ＋Ｎａｌ” ７０Ｓ［Ｍ　　　　　Ｃ　　Ｉ　２８　　１　７０　　
。１十’　Ｈ　−　Ｎ　Ｍ　Ｒスペクトル δ（ＣＤＣＬ／ＣＤ，ＯＤ＝１／１） １．２７　（　ｂｒｓ＝　　　（Ｃ　Ｈ　ｚ）ｎ−　）
４．５０（ｄ＋　　　Ｊ＝７Ｈｚｅ　　　ａｎｏｓｅｒ
ｉｃ−Ｈ）４．６３（ｄ，　　　Ｊ　　＝　７　　Ｈｚ
．　　　ａｎｏａｅｒｉｅ−　Ｈ　）５．６３（ｓ，　
　Ｉ｛−１２） １３Ｃ　−　Ｎ　Ｍ　Ｒスペクトル δ（ＣＤＣＩ３／ＣＤ，ＯＤ＝４／３）２０１，７，　
　１７７，５，　　１７２．３，　　１７２，０，　　
１７１，１，１２８．６，　　１０４．７，　　１０４
，３，　　９０，３，　　８２，３，７６．４，　　７
６，０，　　７５，８，　　７５，０，　　７５．０，
　　７２，０，６５，１，　　６２，３，　　５５，８
，　　４８．９，　　４６，０，　　４４，５，４３，
８，　　４１．５，　　３９，８．　　３９，６，　　
３８，２，　　３７，２，３３，２，　　３２．３，　
　３２．２，　　３１，５，　　３０，０，　　３０，
０，２９，９，　　２９，７．　　２９，５，　　２９
，１，　　２８．９，　　２８，６，２７，８，　　２
６，９，　　２６，８，　　２８，４，　　２６．３，
　　２３，６，２３，０，　　１９．０，　　１７，７
，　　１６，６，　　１６，３，　　１４．２実施例２
　Ｎ−ステアリルー３０−グリチルリチナミド（ＧＬＮ
ＨＳｔ）の合成 参考例１で得たＧ　Ｌ　−　２　Ｂｎ　４，ＯＯｇ　（
４．Ｏｗｎｏｌ）、ステアリルアミン　１，６１１１　
（６，Ｏ−ｓｉｏｌ）及びＩ’）ＭＦ１００ｍｌを加え
て溶解し、次に氷水浴中で撹件しながら、テトラエチル
アンモニウム０．８３ｍｌ（６．０？一０１）、ノエチ
ノレリン酸ンアニド０．９８ｇ　（６．０一一０１）を
順次滴下し、室温で１夜撹袢した．反応液に酢酸エチル
約１ｌを加えて希釈し、１０％クエン酸、５％炭酸水素
ナトリウム、次いで飽和食塩水で順次洗浄し、芒硝で乾
燥後、溶媒を濃縮乾固し、白色固形物質を得た。これを
シリカデル力ラムクロマトグラ７イー（溶出液；クロロ
ホルムーメタノール系）で単離、精製を行い、６゜，６
”−ノベンノル−Ｎ−ステアリルー３０−グリチルリチ
ナミド（Ｇ■、ＮＨＳｔ−２Ｂｎ）の白色固体を３．０
０ｇ得た（収率６０％）。

’Ｈ−ＮＭＲスペクトル δ（ＣＤＣＩ，／ＣＤ．ＯＤ＝１／１）１．２６　（　
ｂｒｓｌ　　　　（ｃ　Ｉ｛　ｘ）ｎ　　］５．２０（
鎗，　　φ一５＝エ１ｊ−■一一）５．６０（ｓ．　　
Ｈ−１２＞ ７．３０（曽，　φ一） 次にＧ　Ｌ　Ｎ　Ｈ　Ｓ　Ｌ　−　２　Ｂ　ｎ　２，５
ｇ　（２．０ｍ−ｏｆ）をエタノール５０ｍＮに溶解し
、触媒としてＰｄ／Ｃ，約１ｇを加え、水素ス流下、室
温で加水素分解反応を行つた。反応終了後Ｐｄ／Ｃを自
然枦過で枦別し、枦液を濃縮乾固し、未精１ｔＮ−ステ
アリル−３０−グリチルリチナミド（ＧＬＮＨＳｔ）の
白色固体１．９ｇを得た．このうち０．７３ｇを逆相カ
ラムクロマトグラ７イー（Ｏ　Ｄ　Ｓ系、溶出液：メタ
ノールー２％酢酸水溶液系）で単離、精製を行い、Ｎ−
ステ７リルー３０−グリチルリチナミド（Ｇ　Ｌ　Ｎ　
Ｈ　Ｓ　ｔ）の白色固体を０．４７ｇ得た（収率５７％
）．融点：１６８℃（分解） 赤外吸収スペクトル（Ｋ　Ｂ　ｒ）ｃ１ｌ３３７０（Ｏ
｝Ｉ），２９２５−　　２８５４（（ＣＨ２）ｎ），１
７３６．　　１６４６（Ｃ　＝　Ｏ　）７アーストアト
ミツクボンパードメント質量スペクトル（ＦＡＢＭＳ） Ｍ／　２　：　１０７４［Ｍ　十Ｈド ７０４［Ｍ　−　Ｃ　Ｉ２｝｛　，，Ｏ　ｌｆｆｌ”Ｈ
−ＮＭＲスペクトル δ（ＣＤＣＩ３／ＣＤ，ＯＤ＝１／１）１．２６　（　
ｂｒｓ＝　　−（Ｃ　Ｈ　２）ｎ−　）４．５０（ｄ，
　　Ｊ　＝　７　Ｈｚ＊　　ａｎｏｍｅｒｉｃ　−　Ｈ
　）４．６１（ｄ，　　Ｊ＝７Ｈｚ，　　ａｎｏ＋ａｅ
ｒｉｃ−Ｈ）５．６５（ｓｙ　　Ｈ−１２） コＣ−ＮＭＲスペクトル δ（Ｃ［）Ｃｌ３／ＣＤ３０Ｄ＝１／】）２０１．８，
　　１７７，４，　　１７１，６，　　１７１．５，　
　１７１，２，１２８，５，　　１０５．２，　　１０
４，４，　　９０，２，　　８２．９，７６，５，　　
７６．１，　　７６，０，　　７５，２，　　７５，０
，　　７２，０，７１．９，　　６２．４，　　５５．
８．　　４８，７．　　４６．０，　　４４，０，４３
，８．　　４１．８，　　３９，９，　　３９，８，　
　３９．７，　　３８，０，３７．３，　　３３．２，
　　３２．３，　　３２，２，　　３１．６，　　３０
，０，２９，７，　　２９，５，　　２８．９，　　２
７，８，　　２７，４．　　２６．８．２６，３，　　
２３．６，　　２３，０，　　１９，０，　　１７，７
，　　１６．８，１６．３，　　１４．２ 実施例３　　ＧＬＯＳｔ含有リボンームの調製ナス型フ
ルペン中に水素添加卵黄レシチン（ＰＣ　）　７３．７
ｍｇ　＜１００μｍｏｌ）、コレステロール（　Ｃ　ｂ
　）４０．７ｍｇ　　（１００μ−ｏｆ）、　Ｇ　Ｌ　
Ｏ　　Ｓ　ｔ　　２７．１ｍｇ　　（２５μｓｏｌ）及
びクロロホルム１００−を加えて均一に溶解した後、エ
バボレイトし、ナス型フルペン内壁に半透明の膜を形威
させた．これに２０μＣ；／ＩＩＩ１の０．１ｍＭイヌ
リンーリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）５−を添加し、ポル
テツクスミキサー、超音波振とう器等を用い、撹拌、振
とうした。溶液が一様になった後、ブルーブ型超音波破
砕磯で１時間超音波照射し、ＳＵＶ型リポソームを得た
．これを透析用セル（３０ｎｍボリカーボネート膜）に
入れ、リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で４日間透析し、未
封入イヌリンを除去した。

イヌリンの取り込み率は透析前後の放射活性を測定して
算出した，ＧＬＯＳｔのリポソーム膜への包埋率は高速
液体クロマトグフ７イー（ＨＰＬＣ）法により［ＪＶ２
５４ｎ−で測定した。又、粒径はコールターＮ４＜コー
ルターエレクトロニクス社ｇＩ）により測定した。

尚、対照としてＧＬＯＳｔの代りにリン酸ノセチル（Ｄ
　Ｃ　Ｐ　）１３．９ｍｇ（２５μｓｏｌ）を添加した
ものを、上記と同様の方法で調製して測定を行った．結
果を第１表に示す。

第　１　表 トを放血致死させ、各臓器を摘出し、そこに残存する放
射活性を測定し、組織分布を投与量の百分率（％）で求
めた。結果を第２表に示す。

第　２　表 このことより、ＧＬＯＳｔを組み込んだものでもＳＵＶ
型リポソームを形威していることが確認された。又、Ｇ
ＬＯＳｔはリポソーム膜中に定量的に包埋していること
が確認された． 実施例４　グルタチオン封入ＧＬＯＳｔ含有リポソーム
のｍｓ！ 上記実施例３においてイヌリンの代りにグルタチオンを
用い、同様の方法により、ＳＵＶ型グルタチオン封入リ
ポソームを調製した． 実験例１　リボンームの臓器蓄積性 実施例３によって得られたリポソームをラットに静注し
、４時間後の血液及び尿を採取後、ラッＧＬＯＳｔ包埋
ＳＵＶ型リポソームは肝臓に４２．３７％と対照のリポ
ソームの４倍以上、投与量の４０％以上が蓄積し、従米
のリポソームよりも顕者な選択性を持って肝臓に蓄積す
ることが判明した． 尚、膵臓、肺及び腎臓には各リポソームとも殆ど蓄積し
ていない． 実験例２　リポソームの初代培養肝実質細胞による取り
込み量の測定 初代培養肝実質細胞は中村らの方法〔実験医学６　　１
１０５〜１１１３（１９８８）　）に準じて調製した．
ｌＩＩち、コラデナーゼかん流法に上り得たラット肝実
質細胞を、直径３５ｍｍのコラーデンコートしたデイシ
ュに１０’ｃｅｌｌずつ蒔き込み、２４時間以上培養し
たものを用いた（全て無菌操作）．これに上記リポソー
ム製剤を２０μｌずつ添加し、３７℃、１時間インキュ
ベーＦ後、上溝を除去し、細胞内に残存する放射活性を
測定し、＃Ｉｔ＆内取り込み量（総脂質！／細胞タンパ
クｊｉ　（ｎｍｏｌ／　ｋｇ）　）を算出した．結果を
第３表に示す。

ＰＪ３　　表 （発明の効果） 本発明の３０位置換グリチルリチン誘導体包埋りボソー
ムは、臓器選択的蓄積性を示すことから、薬物の目的組
織到達性を改善するためのドラッグキャリアとして有用
である。特に、肝＊Ｍ積性を目的とする薬剤を封入する
ためのリポソーム製剤として有用である． （以　上） 出　願　人　　大鵬薬品工業株式会社 代　理　人　　弁理士　田　村　　巌 ＧＬＯＳｔ包埋ＳＵＶ型リポソームは対照のリポソーム
の４倍以上多く肝実質細胞に取り込まれていることが確
認された．このことから、ｉｎｖｉｖｏでの肝臓への取
り込みの差において、肝実質細胞の寄与が一つの要因で
あることが示唆された．手 続 補 正 書 ７． 補正の内容 平或 ２ 羊１０月 ２４日 （１） 明細書第２５頁第９行

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中Ｒは炭素数１２〜１８のアルキル基、ＸはＯ又は
   ＮＨを示す）で表わされる３０位置換グリチルリチン誘
   導体。
2. （２）請求項１記載の３０位置換グリチルリチン誘導体
   を膜形成成分の一成分とすることを特徴とするリボソー
   ム製剤。