JPH0276819A - 脂肪酸組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は脂肪酸組成物に関する。

〔従来の技術〕

シクロスポリンは、例えば腎臓、心臓及び肝臓などの臓
器の移植を受ける患者の免疫系を抑制するために開発さ
れた、重要な新しい薬物である。シクロスポリンが乾唐
、リウマチ性関節炎及び早３１．ＩＩ　糖尿病のような
症状に非常に広く用いられることは、現在明らかである
。疾患の経過が免疫系の一部の異常作用に関係するよう
な症状にシクロスポリンが有効であることが考えられる
が、これはまだ確実ではない。

シクロスポリンは１１個のアミノ酸を含有する異常な環
式ペプチドである。これらの１つは炭素数９のオレフィ
ン系不飽和化合物である。変性シクロスポリンも生物学
的活性を有するが、この活性に関してはオレフィン系ア
ミノ酸が重要であるように思われる。シクロスポリンと
そめ生物学的に活性な同族体くシクロスポリン様化合物
）は全て、胸腺、リンパ球、その他の組織内で検出され
るシクロフィリンとして公知の蛋白質系に結合する。シ
クロスポリンと関連化合物の生物学的活性はそれらがシ
クロフィリンに特異的に結合しうるか否かに依存するよ
うに思われる。

残念なことには、シクロスポリンは多くの副作用を有し
、その１つは特に重要であり、せいぜい軽度ないし中程
度の症状の疾病状態へのこの薬物の使用を制限している
。この副作用は、シクロスポリンが腎機能の障害をもた
らすことである。この腎障害の機構はまだ不明であるが
、腎臓への血流量を減する血管の収縮が重要な役割を演
するように思われる。この血管収縮作用の機構も不明で
あるが、アラキドン酸から誘導される高活性血管収縮剤
であるトロンボキサンＡ２の産生増加に関係すると考え
られる。

シクロスポリンをα−リノリン酸の代謝産物すなわち魚
油中に多少豊富に検出されるエイコサペンタエン酸（Ｅ
ＰＡ）とドコサヘキサエン酸（Ｄ　ＨＡ）と組合せて投
与することによって、シクロスポリンの腎副作用を軽減
させることも提案されている。動物では、この処置が腎
臓内のトロンボキサンＡ２の濃度（トロンボキサンＡ２
の代謝産物トロンボキサンＢ２として測定したＴＸＡ２
）を低下させ、血管収縮と腎障害を減するという実験上
の証拠がある。

必須脂肪酸の関係とその考察 哺乳動物の体内で相互転換不能であるが、脂肪酸代謝に
ついての次の概要図に示す関係を有する２系列の必須脂
肪酸（Ｅ　Ｆ　Ａ）が存在する：第１表 デルタ−６デサチエラーゼ 伸長 デルタ−５ｆサチユラーゼ 伸長 デルタ−４デサチユラーゼ ↓ ２２：５　チルター４．７，１０．１３．１６　　　　
　２２：６　　ダルター４．７，１０，１３，１６．１
９本発明は、シクロスポリンと必須脂肪酸との新たに知
られた関係に依存する。上述したように、魚油中に存在
する脂肪酸のＴＸＡ２濃度への拮抗作用によってシクロ
スポリンの不利な効果を改善することが提案されている
。しかし、魚油中に存在する脂肪酸はアラキドン酸から
形成される有害と考えられる血管収縮性トロンボキサン
Ａ２１１を減するのみでなく、ＤＧＬＡとプロスタサイ
クリンとからのプロスタグランジンＥｌ　　（ＰＧＥＩ
）及びアラキドン酸からのＰＧＥ２のような血管拡張性
代謝産物の産生をも減する。従って、魚油脂肪酸は少な
くとも単独で用いる場合のシクロスポリンと併用するた
めに最良の作用剤ではない。しかし、ＤＧＬＡはアキラ
ドン酸とは異なり、血管拡張性であるかまたはこの点に
関して生物学的に不活性である代謝産物を生ずるため、
常に血管拡張作用を有する。ＤＧＬＡとアラキドン酸の
両方は腎組織中にかなり多量に検出される。ＤＧＬＡと
アラキドン酸の両方の血管拡張性代謝産物は正常な腎血
流量の維持に重要であると考えられる。ＤＧＬＡは血管
収縮性代謝産物を有しないので、腎臓内のＤＣ；ＬＡ濃
度を高める作用剤を用いることが最も望ましい。

ＤＧＬＡは図示した経路によって食餌用リノール酸から
形成されるので、転化の第１段階はヒトにおいて特に緩
慢であり、実際に律速段階である。食餌用リノール酸の
投与はヒトのＧＬＡ濃度を高めるために有利でないこと
が判明しているが、これとは対照的に、ＧＬＡ投与によ
って律速段階を短絡することはヒトのＧＬＡ濃度を高め
ることになる。ＧＬＡの形成は本質的に緩慢であること
の他に、老化、アトピー性障害、糖尿病、カテコールア
ミン、アルコール、コレステロール、及び亜鉛欠乏を含
めた広範囲な要素によって阻害される。

ＧＬＡまたはＤＧＬＡの投与はヒトにおけるＧＬＡｊｆ
ｆｉ度を高める効果的な方法である。ＤＧＬＡの若干は
アラキドン酸に転化されるが、この段階も緩慢であるの
で、このような投与後にＤＧＬＡ／アキラドン酸の比は
上昇する。さらに、ＧＬＡの投与はある一定の障害を有
する患者におけるトロンボキサンＢ２の形成を阻害する
ことが判明している（下記の第２表参照）。

これらの研究では、ＧＬＡを月見草オイルとして投与し
た。トロンボキサン形成の阻害の機構は不明である。し
かし、ＤＧＬＡはＰＧＥ　１を生じさせ、ＰＧＥＩがサ
イクリックＡＭＰの濃度を高める。サイクリックＡＭＰ
はリン脂質からのアラキドン酸の可動化に影響し、その
ためにアラキドン酸からトロンボキサンとその他の代謝
産物への転化に影響を与えることが分っている酵素、ホ
スホリパーゼＡ２を阻害する。

月経前症候群患者１８６±４４ｎｇ／ｉｆ　１４１±５
９ｎｇ／　ｍｌｐ＜０．０１し一ノー病症候群患者２０
８±３６ｎｇ／ｍ１１７９±１８ｎｇ／　ｍｌ　ｐ＜Ｏ
，’０５〔発明が解決しようとする課題〕 従って、本発明はシクロスポリンとその誘導体の副作用
、特に腎副作用を抑制するために、シクロスポリンとそ
の誘導体と共に（化学結合体を含めて）ＧＬＡまたはＤ
ＧＬＡを投与することを提案する。これはＤＧＬＡから
の血管拡張性代謝産物の形成を高め、また可能ならばア
ラキドン酸からのトロンボキサン形成を減することによ
って達成される。

さらに、本発明はシクロスポリンの副作用を患っている
か、または患う危険性のある患者に脂肪酸を投与するこ
とをも含有するシクロスポリンの副作用を抑制する方法
と共に、活性薬物としてのシクロスポリンの使用をも含
有する、シクロスポリンの副作用を抑制する薬物の製造
方法をも含む。

ＧＬＡまたはＤＧＬＡは、魚油中に検出される脂肪酸で
あるＥＰＡ、２２：５　ｎ−３及びＤＨＡと任意に組合
せることができる。これらの脂肪酸もトロンボキサンを
減すると考えられる。さらに、これらの脂肪酸はＤＧＬ
Ａをアラキドン酸に転化させる酵素５−デサチヱラーゼ
を阻害することによって、ＤＧＬＡ／アラキドン酸の比
を高めると考えられる。

ＧＬＡ、ＤＧＬＡ、ＥＰＡ、２２：５ｎ−３及びＤ　Ｈ
Ａは１ｑ〜１００ｇ７日、好ましくは５０ｍｇ〜１０ｇ
７日の用量でそれぞれ投与される。これらは１日１回投
与するかまたは２４時間を通して分割投与される。

シクロスポリンとその関連化合物は０．１〜２００■／
ｋｇ／日　（約５ｍｇ〜１５ｇ／日、好ましくは５〜２
０■／ｋｇ／日　（約０．２５〜１．５ｇ／日）の用量
で投与される。

脂肪酸とシクロスポリンの両方は経口的もしくは非経口
的にまたは他の便利な経路によって投与することができ
る。皮膚疾患に用いるためには、シクロスポリン０．１
　ｎｇ／　１００■／−１好ましくは０．１　ｎｇ−１
ｔｎｇ／　ｍｌを含む製剤と、脂肪酸０．１　ｎｇ／　
１００ｍｇ／　ｒｄ、好ましくは０．１　ｎｇ−１０■
／ｄを含む製剤を用いた局所投与が可能である。脂肪酸
とシクロスポリンを異なる時に、異なる経路で投与する
ことができるが、シクロスポリンは強い疎水性を有する
ので、局所投与用及び例えば経口投与用、非経口投与用
には、シクロスポリンを脂肪酸中に実際に溶解すること
が便利である。

シクロスポリンなる用語はシクロスポリン自体を包含す
るのみでなく、シクロスポリン誘導体と、シクロフィリ
ンに特異的に結合するためにシクロスポリンに関係する
ことが分っている、シクロスポリン様活性を有する化合
物をも含む。

さらに、脂肪酸はグリセリド、塩、エステル、アミドと
してまたは体内で脂肪酸に転化することによって体組織
内の脂肪酸レベルを高めるような、薬理学的に許容され
る他の形式で投与することができ、ここでのＥＦＡへの
言及はこのような形式を含むものとする。

酸自体または酸の天然のグリセリドエステルの効果と一
致する効果によって立証されるような、これらの同等物
もここに述べる経路に入れることによって投与される。

従って、体内で脂肪酸自体の重要な効果をこれらの化合
物が有することが、これらが有用な誘導体であることの
間接的な証明であるが、例えばペリツク（Ｐｅｌｉｃｋ
）らの「脂質とリボ蛋白質の分析（Ａｎａｌｙｓｉｓ　
ｏｆＬｉｐｉｄｓ　ａｎｄ　Ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ
）Ｊバーキンス（Ｐｅｒｋｉｎｓ）編集、アメリカ石油
化学協会（Ａｍｅｒｉｃａｎ　ＯｉｌＣｈｅｍｉｓｔｓ
　５ｏｃｉｅｔｙ）　（アメリカ合衆国、イリノイ州、
シャンペイン）２３頁の方法のような、標章方法による
血液、体脂またはその他のＵ織中の濃度のガスクロマト
グラフィー分析によって転化を直接示すこともできる。

血漿サンプル（１ｍｆ）をクロロホルム：メタノール（
２：１）によって抽出する方法が大体において適してい
る。抽出液は硫酸ナトリウムを通して濾過し、蒸発乾固
させ、クロロホルム：メタノール０．５ｍｌ中に加える
。脂質分画を薄層クロマトグラフィーまたはシリカゲル
プレートによって分離する。必須脂肪酸含量を最も敏感
に表示すると考えられるリン脂質分画を三フッ化ホウ素
−メタノールによってメチル化する。生成した脂肪酸メ
チルエステルを、１０％シラー（ｓｉｌａｒ）　／クロ
ロホルム（Ｃｈｒｏｍｏｓｏｒｂ）ＷＡＷ　１０６／２
３０を充填した６フイートカラム付きヒユーレット−パ
ラカード（Ｉｌｅｈｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄ）５８８
０ガスクロマド装置を用いて分離、測定した。キャリヤ
ーガスはヘリウム（３０ｍ／／分）である。オーブン温
度を１６５℃から１９０℃へ２℃／分の速度で上昇する
ようにプログラムする。デテクター温度は２２０℃であ
り、インジェクター温度は２００℃である。保持時間と
ピーク面積はヒヱーレットーパッカードレベル４インテ
グレータによって自動的に算出する。ピークは標準の脂
肪酸メチルエステルとの比較によって同定する。

パンク 種々の活性物質を共に含む組成物を形成することが望ま
しい場合には、個別投与用また一部一括／一部個別投与
用に提供された物質を適当な相対的量で含むバックを製
造することができ、このようなバックの使用も本発明の
範囲に含まれる。

食ｔｇｍｉ助艮覚 本発明を主として治療方法及び医薬品組成物に関連して
述べるが、食餌用添加物の性質を有するγ−リルン酸、
その他の酸をシクロスポリン摂取者に用いられる食餌用
マーガリンまたはその他の食品に混入できることは理解
されよう。

γ−リルン　とその他の酸のノ態と（給源本発明に従っ
て用いられるγ−リルン酸とジホモ−γ−リルン酸の生
理的に等価な便利な誘導体には、他の酸の場合と同様に
、塩、アミド、グリセリドエステルとアルキル（例えば
Ｃ７〜Ｃ４アルキル）エステルを含めたエステル、及び
リン脂質がある。

望ましい場合には、天然酸または合成酸をそれ自体とし
てまたは誘導体として、許容可能な薬剤用ビヒクルと組
合せることによって、本発明に用いるための医薬品組成
物を製造することができる。しかし、少なくともγ−リ
ルン酸をγ−リルン酸含量の高い入手可能なオイル（こ
こでは「オイル」と呼ぶ）として用意することが現在便
利である。

Ｔ−リルン酸含量の高いオイルの現在公知の天然の供給
源は殆んど存在しない（有意な量のジホモ−γ−リルン
酸を含む天然の供給源は知られていない）。現在入手可
能な１つの供給源は、例えばエノセラ・ビニニス・エル
見草種の種子であり、これらからのオイル抽出物はＴ−
リルン酸（約８％）とリノール酸（約７２％）をそれら
のグリセリドとして、他のグリセリドと共に含む（％は
脂肪酸全体に基づく）。γ−リルン酸の他の供給源は例
えば±−ラゴ・オフィシナリスのようなルリチシャ（Ｂ
ｏｒａｇｅ）種であり、これは１ニーカーあたりの現在
の収量は低いが、エノセラオイルよりもＴ−リルン酸を
豊富に含む供給源である。発酵によって培養可能な菌類
に関する最近の研究は、菌類によるオイル供給源を有望
なものにしている。

オイルは、例えば種子を不完全蒸煮した後の低温圧縮、
スクリュー圧縮、または溶媒抽出のような従来の抽出方
法の１つによって種子から抽出される。

メチルエステルとしてのこのオイルの典型的なサンプル
の分留は、次の相対的割合を示す：パルミチン酸エステ
ル　　　６．１５ ステアリン酸エステル　　　１．６ オレイン酸エステル　　　１０．１５ リノール酸エステル　　　７２．６ γ−リルン酸エステル　　８．９ 上記の種子オイル抽出物はそれ自体として用いることが
できるが、望ましい場合には、例えば分留して、腫瘍脂
肪酸成分としてγ−リルン酸とリノール酸のトリグリセ
リドを含む油状組成物を得ることができ、必要とあれば
γ−リルン酸を主成分とすることも可能である。種子オ
イル抽出物はジホモ−γ−リルン酸が存在する場合にこ
れに対して安定化効果を及ぼすように思われる。

血亘醸立仮衿皿 ２２：４と２２：５　ｎ−６酸の天然供給源には、屠殺
場から入手した副腎（２２：５）と腎臓（２２：４）が
あり、２２：４はアメリカ産カミ゛ンキガメ（八ｍｅｒ
ｉｃａｎＳｎａｐｐｉｎｇ　Ｔｕｒｔｌｅ）の脂肪中に
存在する。ｎ−３酸は魚油から入手可能であり、特に２
０：５ｎ−３と２２：６　ｎ−３は魚油から得られる。

酸はこれらの供給源から、例えば緩和な非酸化性条件下
でのケン化及びこれに続く分取気液クロマトグラフィー
による精製によって単離される。酸の合成も困難ではあ
るが、不可能ではなく、酸の一供給源となりうる。

１Ｍ立旦工■爪展 組成物は、例えばウィリアムス（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）の
英国特許明細書第１．０８２，６２４号（以下これを参
考とする）に詳細に述べられているような、またいずれ
にせよ特定の種類の製剤に関して一般に非常に良く知ら
れた適当な薬剤用ビヒクルに溶解した、経口投与、直腸
投与または非経口投与に適した形態で便宜的に存在する
。従って、例えば錠剤、カプセル剤、消化可能な液剤も
しくは粉剤を必要に応じて製造することができ、γ−リ
ルン酸または他の酸を皮層を通して吸収させる場合には
局所用製剤を製造することができる。遊離酸を可溶化す
るアルブミンを用いて、加水分解エノセラ油の注射液を
製造することができる。

製剤に保存剤を混入することが有利である。

約０．１重量％濃度のα−トコフェロールがこのために
適していることが判明している。

如何なる用量単位中に存在する活性物質の絶対量も投与
速度と投与形式に適当である量を超えてはならないが、
他方では少ない投与回数によって好ましい投与速度の達
成を可能にするために充分な量であることが望ましいこ
とは理解されよう。投与速度はさらに、望ましい正確な
薬理学的作用に依存する。

〔実施例〕

有効成分に関する以外は慣用の方法によって製造される
次の実施例によって本発明の種々な形態を説明する： 実施例１ 経口投与用 シクロスポリンと脂肪酸との次の組合せを含む軟質ゼラ
チン・カプセル剤。

！久口各１（ツ２　　　　　ＧＬＡ　　　　　　則ｐＡ
　　　　　　　ＥＰＡ　　　　　　　興へＡ　　　３０
ｍｇ　　２００ｍｇ ８　　３０ｍｇ　　３００ｍｇ　　　　　　２００ｍｇ
Ｃ３０ｍｇ　　１００ｍｇ　　１００ｍｇ　　１００ｍ
ｇ　　５０ｍｇＤ　　　３０ｍｇ　　　　　　３００ｍ
ｇＥ　　１００ｍｇ　　４００ｍｇ Ｆ　　１００ｍｇ　　３００ｍｇ　　　　　　１００ｍ
ｇＧ　　１００ｍｇ　　１００ｍｇ　　１００ｍｇ　　
ｌｏＯｍｇ　　５０ｍｇＨ１００ｍｇ　　４００ｍｇ　
　　　　　２００ｍｇカプセルの代わりに５ｒｎｌのエ
マルジョン中に上記量の有効成分を含む乳剤。

実施例２ 非経口的投与用 植物油ベース中に上記Ａ−Ｈの有効成分量を含む無菌ア
ンプル剤。

実施例３ 静脈吉役星里 外注用脂質の標準溶液に加えることのできるＡ−Ｈに指
定した有効成分量を含む５ｒｎｌの無菌アンプル中製剤
とした乳剤。

実施例４ 局所投与用 下記の有効成分を含有し、標準方法を用いて製造した軟
膏とクリーム（重量基準）：（本頁以下余白） 〃胞　　ルｉ　　　、１！Ｕユ　　」Ｖ　　辺仇Ａ　　
　Ｏ，ＯＬＸ　　　　２Ｘ　　　　　　　　　　０．５
ＸＥ　　　Ｏ，０５χ　　　　４２　　　　１２　　　
　１２　　　０．３ＸＣ０，ＩＸ５χ Ｄ　　　０．１５！　　　　　　　　　　２ＸＥ　　　
Ｏ，１！　　　　　　　　　　　２２　　　　１χＦ　
　　０．０５Ｘ　　　　３Ｘ　　　　　　　　　　１２
　　　０．５％代理人　弁理士　小　川　信　−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、シクロスポリンとＧＬＡもしくはＤＧＬＡまたは体
   内でこれらに転化可能なこれらの誘導体を単独でまた薬
   剤用の希釈剤またはキャリヤーに溶解して含む組成物。 ２、２０：５、２２：５及び２２：６酸または体内でこ
   れらに転化可能なこれらの誘導体から選択したｎ−３必
   須脂肪酸をも含有する請求項１記載の組成物。 ３、脂肪酸（または各脂肪酸）１ｍｇ〜１００ｇ／日、
   好ましくは５０ｍｇ〜１０ｇ／日とシクロスポリン５ｍ
   ｇ〜１５ｇ／日、好ましくは２５０ｍｇ〜１．５ｇ／日
   を投与するための剤形で提供される請求項１または２記
   載の組成物。 ４、脂肪酸（または各脂肪酸）０．１ｎｇ〜１００ｍｇ
   ／ｍｌ、好ましくは０．１ｎｇ〜１０ｍｇ／ｍｌと、シ
   クロスポリン０．１ｎｇ〜１００ｍｇ／ｍｌ、好ましく
   は０．１ｎｇ〜１ｍｇ／ｍｌを含む、局所投与用の請求
   項１または２記載の組成物。 ５、シクロスポリンの投与に伴う副作用、特に腎副作用
   を抑制した薬物の製造への請求項１、２または３に記載
   の有効性分の使用。 ６、シクロスポリンの投与に伴う副作用、特に腎副作用
   を抑制した薬物の製造への請求項１、２または３に記載
   の必須脂肪酸の使用。 ７、請求項１、２または３記載の組成物の成分を副作用
   を患っているか、または患う危険性のあるヒトに同時に
   または継続的に投与することから成る、シクロスポリン
   投与に伴う副作用、特に腎副作用を抑制する方法。