JPH0242018A - 医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の分野 本発明は医薬組成物に関する。さらに詳しくは、本発明
は１．２．４−トリオキサン化合物の蠕虫活性およびそ
の他の活性に関する。

発明の背景 アルテアヌイン（ａｒｔｅａｎｎｕｉｎ）またはキンガ
オス（ｑ　ｉｎｇｈａｏｓｕ）としても公知であるアル
テミシニン（ａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ）はプラスモディ
ウム・ファルシパルム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ　ｆａｌ
ｃｉｐａｒｕｍ）、マラリアの病因たる原虫に対して活
性である。該化合物は潅木アルテミシア・アニュアーエ
ル（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　　ａｎｎｕａ　Ｌ）から単離
され（例えば、サンエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、（１９
８５）、２８８，１０４９参照）、構造：ｅ を有する１、２．４−トリオキサンである。１９８８年
ｌＯ月１２日公開の欧州特許明細書２８６３１６号には
、抗マラリア剤として活性であるｌ。

２．４−トリオキサン誘導体が記載されている。

該誘導体のうちあるものは免疫抑制活性を示したと言わ
れている。かくして、該誘導体はマラリアのごとき熱帯
病の治療、または免疫学的性質の病気もしくは細菌起源
の病気の治療に有用である。

発明の要約 今回、１．２．４−１リオキサンが抗マラリア活性に加
えてさらに薬理学的活性を有することが判明した。特に
、１．２．４−トリオキサンが、限定的ではなくして、
プラスモディウム種に加えて他の原生動物に対する活性
のみならず蠕虫に対する活性も含めて蠕虫活性を有する
ことが判明した。

従って、本発明はマラリアの治療以外の治療処置のため
の蠕虫方法を提供するものである。該方法はヒトまたは
動物の治療に用いることができ、有効量の１，２．４−
トリオキサンを投与することよりなる。

また、本発明は１，２．４−トリオキサンおよび医薬上
許容される賦形剤よりなるマラリアの治療以外の蠕虫法
で用いる医薬組成物を提供するものである。

発明の開示 該１，２．４−）リオキサンは好ましくは、特に２つの
縮合環のみを有しおよび／またはシクロアルカンにおい
て５または６個の環炭素を有する化合物のように環のｅ
の側でシクロアルカンに縮合した１、２．４−トリオキ
サンである。かくして、特に好ましい化合物は式（Ａ）
および式（Ｂ）：によって示される環構造を有する。該
化合物は好ましくは３−置換のものであり、従って３−
置換シクロペンタ　［ｅ］　　１．２．　４−トリオキ
サンまたは３−置換シクロヘキサ［ｅ］　　ｌ、２．４
−トリオキサン、例えば３−置換Δ５−もしくはΔ６−
６．７ａ−ジアリールシクロペンタ［ｅ］　　ｌ、２゜
４−トリオキサンまたは３−置換Δ５−もしくはΔ’−
６，８ａ−ジアリールシクロヘキサ［ｅ］１．２．４−
トリオキサンである。該３位における典型的な置換基は
以下で述べるＲ１およびＲ２基を含む。かかる化合物は
ＥＰ２８６３１６号に記載されている方法を含む文献で
利用可能な方法によって調製できる。

さて、１．２．４−トリオキサンにより本発明にて治療
できる病気の例はトキソプラズマ症、リーシュマニア症
、肺炎、およびオンコセルカ症を包含する。

トキソプラズマ会ゴンディイ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ　
ｇｏｎ−ｄｉｉ）、全世界に分布している原生動物寄生
虫での感染は通常の患者に良性の兆候を引き起こすにす
ぎない。しかしながら、該感染は、初めて感染した後天
性免疫不全症候群（エイズ）に罹っている者、および妊
婦のような免疫無防備状態の患者に対する主要な危険招
？）［因である。現在利用可能な最も効果的な治療、ピ
リメタミンとスルホンアミド類の相乗効果的組み合わせ
またはエリスロマイシンのごときマクロライド薬剤より
も毒性が少ない効果的な薬剤に対する必要性が存在する
。

リーシュマニア・ドノバニ（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ　ｄ
ｏｎｏｖ−ａｎｉ）、砂バエによって広がる有鞭毛原生
動物での感染はカラアザール、血液、りンパ、牌臓およ
び骨髄を侵す全身形態のリーシュマニア症の病因となる
。

ニューモジステイス・カリニイイ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓ
ｔ−ｉｓ　ｃａｒｉｎｉｉ）、原生動物であると考えら
れている日和見性生物での感染は免疫無防備状態の宿主
における肺炎の基本的な原因となる。

オンコセルカ蟲ポルプラス（Ｏｎｃｈｏｃｅｒｃａ　ｖ
ｏｌｖｕ−１ｕｓ）、フィラリア虫での感染は、アフリ
カならびに中央アメリカおよび南アメリカで速流水近く
に住む約１７００万人の人々を悩ませているオンコセル
カ症または回旋糸状主症状に至らしめる可能性がある。

それは、最もひどいフィラリア寄生虫の一つであり、そ
の根絶のための効果的な手段がなお待たれている。さら
に、ウシにおけるオンコセル力症は肉がヒトの食用に適
さなくなるので問題となっている。

今回、１，２．４−トリオキサンが非−プスモディウム
（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）原生動物寄生虫、特に鞭毛虫
、および特にトキソプラズマ（Ｔｏｘｏｐ　ｌａｓｍａ
）、リーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ）　、ニュ
ーモジステイス（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ）種の寄生
虫に対し、および線虫寄生虫、特にフイラリア、および
特にオンコセル力種の寄生虫に対して活性を呈すること
が判明した。有用性はウシのごとき動物の病気ならびに
ヒトにおける病気にまで拡大される。

該活性は、参照として挙げるＥＰ２８６３１６号による
化合物を用いるｉｎ　ｖｉｔｒｏ試験によって示される
。かくして、本発明は、式（■）：［式中、各下付き文
字ｍおよびｎは、０または１に等しく； 記号Ｚは５，６位もしくは６．７位のエポキシド酸素原
子または５．６位もしくは６．７位において二重結合を
形成する電子対を示し；各記号Ａｒ’およびＡｒ２は同
一または異なるものであって所望により置換されていて
もよい芳香族基を示し： 各記号２皿及びＲ２は同一または異なるものであって所
望により置換されていてもよい直鎖状または分岐鎖状の
アルキル基であるか、あるいはＲ１およびＲ２はそれら
が結合している炭素原子と一緒になって、所望により、
１個またはそれ以上の酸素、硫黄または窒素原子によっ
て介在されていてもよく、かつ、所望により、１または
それ以上のアルキルもしくはアリール基または１または
それ以上の官能基で置換されていてもよい脂環式基を形
成し；および ＸおよびＹは、それぞれ、同一または異なって、水素原
子または酸素、窒素もしくは硫黄を含有する官能基を表
わす］ のｌ、２．４−トリオキサン誘導体に基づく方法および
組成物に指向される。

ｍ、　ｎ、　Ａｒ’、Ａｒ’、Ｈｌ、Ｒ２、ＸおよびＹ
の各々についての説明および好ましい定義についてはＥ
Ｐ２８６３１６−Ａ１号を参照されたし。

より具体的には、好ましいものは以下の第１表に示され
た化合物１−１２である。

第１表 化合物　式＊　　　　　Ｒ’　　　　　Ｒ２１（Ｉ　ａ
）　　　　　　　　（ＣＨ２）　４３　　　（Ｉ　ａ）
　　　　（ＣＨ２）　２０　（ＣＨ２）　！４　　　（
Ｉ　ａ）　　　　（ＣＨｚ）　２ｃｏ　（ＣＨ２）２５
　　　（Ｉａ）　　　　ＣＨｓ　　　　　　ＣＨｓ６　
　　（Ｉｂ）　　　　　　−（ＣＨ，）。

７　　　（Ｉ　ｃ）　　　−ＣＣＨｘ）ｔｏ　（Ｃ：Ｒ
２）ｘａ　　　（Ｉｃ）　　　　　　−（ｃＨｚＬ９　
　　（Ｉｃ）　　　　　　　（ＣＨ２）５１０　　　（
Ｉｄ）　　　　　　−（ＣＨｚ）ｔｌ　１　　　（Ｉ　
ｅ）　　　　　　　　（ＣＨ２）　ｓｌ　２　　　（Ｉ
　ｆ）　　　−ＣＨＩ　　　　−ＣＨ。

＊ここに、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（工ｄ）
、（ｒｅ）、（Ｉ　ｆ）は以下のとおりである（ここに
、Ｐｈはフェニル置換基を示し、ＴＯｌはトシル置換基
を示す）。

２　　　（Ｉ　ａ）　　　　（ＣＨｚ）２Ｓ　　（ＣＨ
２）！−本発明で用いるｌ、２．４−トリオキサン化合
物は、典型的には、低毒性であり、死に瀕してい・る患
者に多数回投与することが可能である。例えば、該化合
物は油中懸濁液として処方でき、単一投与として筋肉内
注射できる。非経口用の処方を用いることができるが、
該化合物を経口投与用に処方するのも本発明内のもので
ある。一般に、本発明の化合物の処方は製薬者に利用可
能な通常の技術に基づくことができる。予防治療用の錠
剤は特に適当である。この目的には、化合物をいくらか
修飾するのが望ましく、例えばヒドロキシ、カルボキシ
ル、アミノまたは他の官能性置換基を持たせることによ
り水溶性を増すことができる。適当な修飾は通常の実験
手法により達成できる。事実、本発明の利点は多くの異
なる化合物が合成経路によって利用できることである。

以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが
、本発明はそれらに限定されるものではない。

実施例１：トキソプラズマ・ゴンディイに対する活性 （ａ）マクロファージ内、放射能実験によって評価 ５Ｕｍ１２−’のヘパリンを含有するハンクスの平衡塩
溶液（ＨＢＳＳ）（４℃）３ｍｆｆで５ｗ１ｓｓ−Ｗｅ
ｂｓｔｅｒマウスの腹腔を洗浄することによって得た非
誘導ネズミ腹腔マクロファージをＦ　ｉｃｏ　ｌ　ｌ　
−Ｐａｇｕｅ（ファルマシア）５００ｘｇにおける１５
分間の遠心によって精製し、プールし、１０％熱不活性
化（５６°Ｃで６０分間）胎児ウシ血清（Ｆ　ＣＳ）を
含有する培地１９９（Ｍ１９９）中に懸濁した。

３ｘｌＯ’の量の細胞を９６−ウェルの皿（Ｃｏｓｔａ
ｒ）の各ウェル中に接種し、５％Ｃｏｔ　　９５％空気
雰囲気中、３７°Ｃにて２〜３時間粘着させた。予め加
温したＨＢＳＳで２回洗浄することによって非粘着性細
胞を除去し、Ｍ１９９−３％ＦＣ３中でトキソプラズマ
・ゴンディイのＲＧ株の３ｘｌＯ１１タキシイトで１時
間攻撃した。ＨＢＳＳで２回洗浄した後、感染した単層
にＭ１９９−１０％ＦＣ３中の種々の濃度の試験薬剤（
第１表の化合物１−１０）を摂取させた。次いで、単層
に２゜５μＣｉの［’Ｈ］　ウラシル（アメルスハーム
（Ａｍｅｒｓｈａｍ））を１８時間の間、律動的に送っ
た。

濾過手法を用いることによって、各ウェルについての酸
で沈澱可能な放射能を計測し、プロビット解析によって
ＩＣ，、を計算した。結果を以下の第２表に示す。

第２表 化合物ＮＯ抑制濃度（ＩＣ） μｇｍＱ−’ ＩＣｓ。

１．７ ＩＣ，。

６．８ ５．３ ＞１０００ ＞１０００ （ここに、「−」は４８４　ｐ　ｇ　　ｍＱ　−’まで
活性ではないことを示す） 化合物ｌおよび２が、各々、６．８および５．３μｇｍ
Ｑ−’において９０％抑制濃度（ＩＣｉｏ）であり、最
も活性であることがわかる。

（ｂ）マクロファージ内、光学顕微鏡による評価 ２ｘｌＯ’のマクロファージ細胞を４−チャンバーのガ
ラススライド（Ｌａｂ−Ｔｅｋ）の各チャンバー中に接
種した。非粘着性細胞をＨＢＳＳで除去した後、単層を
２ｘｌＯ’テイ・ゴンディイ（Ｔ、　ｇｏ−ｎｄｉｉ）
で１時間感染させ、続いて培地を含む薬剤を１８時間に
わたって添加した。単層を０．４％の９−アミノアクリ
ジン（５０％エタノール−水容ｉ／容量）で固定し、ギ
ムザ染色し、光学顕微鏡によって評価した。対照化合物
の結果を含む結果を第３表に示す。

第３表 薬バ　　　　　　　　　％鶴　　　　ｇ染小胞当りの　
　　　　　１００！ｎ当りの（μｇ　　ｍＱ−つ　　　
問　　　　平均ティ・ゴンディイ　　　　ティ・ゴンデ
ィイなし　　０　　　　　　４２　　　　　４．３　　
　　　　　　　１９１１　　６．８　　　１９　　　　
１．６　　　　　　　３８２　　５．３　　　１４　　
　　１．２　　　　　　　３５６　　５４　　　　２０
　　　　１．９　　　　　　　４３Ｐｉ　　　　　　１
４　　　　１．２　　　　　　　３３Ｐ＋５０．１＋２
５　１８　　　　１．９　　　　　　　４２Ｐ：ピリメ
タミン ｐ＋ｓ　：スルフ７ジアジンと組み合わせたピリメタミ
ン かくして、それらの各ＩＣ，。値における化合物１．２
および６の化合物での処理の後の感染マクロファージの
Ｍ微鏡調査により、トキソプラズマの細胞内増殖の抑制
が確認された。この活性はピリメタミン、およびスルフ
ァジアジンと組み合わせたピリメタミンの活性に匹敵す
るものであった。

対照実験により、それらのＩＣ，。値の４倍までの濃度
において、１．２．４−トリオキサンが、形態学的基準
およびトリパンブルー染色排除試験によって評価した未
感染マクロファージの活性またはマクロファージを再感
染するそれらの能力によって判断した細胞外ティ・ゴン
ディイの活性いずれにも影響を与えないことが示された
。

（ｃ）ヒーラ細胞内、光学顕微鏡による評価６−ウェル
のプラスチック製マルチ皿（９，６ｃｍ２、ヌンク（Ｎ
ｕｎｃ）、ロスキルデ（Ｒｏｓｋｉ　１ｄａ）、デンマ
ーク）上で増殖する融合性上皮様ヒーラ（ＡＴＣＣＣＣ
ＬＺ）細胞単層を用いた。ＨＢＳＳで洗浄した後、単層
をＭ１９９−３％ＦＣ５中の３ｘｌＯ’ｍ１２−’ティ
・ゴンディイ（ウェル当りの合計量、３ｍＱ）で１時間
感染させ、ＨＢＳＳで２回洗浄し、２２時間にわたって
薬剤をＭ１９９−１０％ＦＣ３とともに添加した。次い
で、単層を固定し、ギムザ染色し、光学顕微鏡で評価し
た。結果を以下の第４表に示す。

第４表 ％感染　　　　感染小泡当りの 繕胞　　　　　平均ティ・ゴンディイ ４９　　　　　８．１ ２３　　　　　１．８ ２３　　　　　１．３ 翻 （μｇ　ｍＦ’） なし　　Ｏ １６，８ ２５，３ １００！１泊当りの ティ・ボンデ（イ ティ・ゴンディイを上皮様細胞系（ヒーラ）の細胞に保
持させた場合に化合物ｌおよび２は寄生虫の増殖を阻止
できたので、ｌ、２．４−トリオキサンの抗トキソプラ
ズマ活性はレスピラトリーバーストのごときマクロファ
ージの特異的機構によって引き起こされたものではない
ことになる。

さらに、異なる濃度の１，２．４−）リオキサンで２４
時間ブレインキュベートしたマクロファージ−は活性と
はならず、１．２．４−トリオキサンの存在なくしては
ティ・ゴンディイの増殖を抑制できなかった（データは
示さず）。

実施例２：オンコセル力・グトウローザ（Ｏｎｃ−ｈｏ
ｃｅｒｃａ　ｇｕｔｔｕｒｏｓａ）に対する活性オンコ
セル力・グトゥローザに対するｉｎ　ｖｉｔｒ。

試験はオンコセルカ・ポルプラスに対する活性について
の有効なモデルである。

（ａ）運動性による評価 まず、寄生虫、培地、血清、細胞および試験薬剤を用い
、寄生虫オンコセル力・グトゥローザに対する試験薬剤
（第１表の化合物Ｌ　２．３．４．５．７．８．９．１
１、および１２）の試験をジャーナル−オブ・ヘルミン
スＱ、　Ｈｅ１ｍ１ｎｔｈ）　（１９８７）、６０．２
７１に記載されている方法に従って行った。

最も驚くべき結果が、１日内に該虫の運動を止めた化合
物９によって示された。化合物４．５、および１１も１
日の暴露にて有意に効果を示した。

比較すると、アルチエ−チル（ａｒｔｅｅｔｈｅｒ）が
１日後に３０％だけ運動性を減少させたのに対し、アル
テミシニンは効果がなかった。２〜３日の暴露により、
化合物２．８．９および１２も顕著に抑制した。誘導期
間の後、化合物Ｉおよび７は、７日のうちに運動性を完
全に停止させた。かくして、７日後には、化合物１，２
．４．５．７．８．９．１１および１２は運動性を１０
０％減少させた。

化合物３はこの試験ではあまり効果的でなかった。

これらの結果は、市販の抗蠕虫剤についての同一の条件
下で報告されている結果（ジャーナル・オプ・ヘルミン
ス（Ｊ、　Ｈｅ１ｍ１ｎｔｈ）、（１９８７）、６０．
２７１参照）に好都合に匹敵するものであつ第２に、寄
生虫、培地および薬剤を用い、試験化合物（第１表の２
．３．４．７．８．９および１２化合物）を試験した。

１日後、化合物４．８、および９について直ちに応答が
誘起された。２〜３日後、はとんど効果を示さなかった
化合物３を除き、化合物２．７、および１２も１以下ま
で運動性を減少させた。しかしながら、４日および７日
の間に、すべての試験化合物は虫の運動性を完全に止め
た。これらの条件下、市販の抗蠕虫剤およびアルチミジ
ンも約３０〜４０％だけ運動性を減少させｔこ。アルチ
エ−チル 後、各々、運動性を４８よび２まで減少させた。

（ｂ）テトラゾリウム比色試験による評価適当な比色ア
ッセイは、３−　［４．５−ジエチルチアゾール−２−
イル］−２．４−ジフェニルチトラゾリウムブロミドに
よって生じたテトラゾリウムカチオンからの７オルマザ
ン、青色染料、の形成を用いる（ジャーナル・オブ・ヘ
ルミンス（Ｊ．　Ｈｅｌｍｉｎｔｈ）　　（１９８７）
　、６０，　２７　１）。

最初に、寄生虫、培地、細胞および試験薬剤を用い、化
合物１、２、３、４、５、７、８、９、１１および１２
をアルチミジンおよびアルチエ−チルとともに試験した
。アルチミジンは効果がなく、すべての試験化合物はア
ルチエ−チルよりも良好であり、７オルマザン形成の約
４０％抑制を引き起こした。事実、すべてのこれらの試
験化合物は５ｘｌＯ−’にて５０％以上の抑制を引き起
こした。

化合物９、１１および１２は９０％以上の抑制を与えた
。

第２に、寄生虫、培地および試験薬剤を用い、化合物２
、３、４、７、８、９、および１２、アルチミジンおよ
びアルチエ−チルを試験した。アルチエ−チルは効果が
なく、アルチミジンは約２５％まで抑制し、化合物３を
除き、すべての試験化合物はフォルマザン形成を８０％
以上抑制した。

実施例３：リーシュマニア・ドノバニ（Ｌｅｉｓｈｍ−
ａｎｉａ　ｄｏｎｏｖａｎｉ）に対する活性公表された
プロトコル（ジャーナル・オブ・アンティマイクロバイ
アル・ケモス（Ｊ．　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏ−ｂｉａｌ　
Ｃｈｅｍｏｔｈ）　（　１　９　８　４　）　、ｌ　４
、４６３）に従って、リーシュマニア・ドノバニＨＵ３
の鞭毛虫で感染させたマウス腹腔マクロファージに対し
、いくつかの化合物を試験した。

３０μＭにおいて、３５〜９７％抑制の範囲の活性が４
種の薬剤、すなわち化合物Ｌ　２、７およびＩＯで示さ
れた。他の化合物は活性がより低かった。ｌの薬剤、化
合物１はｌＯμＭにて高い活性（７０％抑制）を示した
。この化合物は４。

５μｍ付近のＥＤ．。を有していた。

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. （１）１，２，４−トリオキサンおよび医薬上許容され
   る賦形剤よりなることを特徴とするマラリアの治療以外
   の殺寄生生物治療に用いる医薬組成物。
2. （２）プラスモディウム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）種以
   外の原生動物に対して用いる請求の範囲第（１）項記載
   の医薬組成物。
3. （３）蠕虫に対して用いる請求の範囲第（１）項記載の
   医薬組成物。
4. （４）トキソプラズマ症、リーシュマニア症、肺炎、お
   よびオンコセルカ症から選択される病気の治療に用いる
   請求の範囲第（１）項記載の医薬組成物。
5. （５）該１，２，４−トリオキサンが３−置換シクロア
   ルカン［ｅ］−１，２，４−トリオキサン、特に３−置
   換Δ＾５−もしくはΔ＾６−シクロペンタ［ｅ］１，２
   ，４−トリオキサンまたは３−置換Δ＾５−もしくはΔ
   ＾６−シクロヘキサ［ｅ］１，２，４−トリオキサンで
   ある請求の範囲第（１）項〜第（４）項いずれか１項に
   記載の医薬組成物。
6. （６）該１，２，４−トリオキサンが３−置換Δ＾５−
   もしくはΔ＾６−６，７ａ−ジアリールシクロペンタ［
   ｅ］１，２，４−トリオキサンまたは３−置換Δ＾５−
   もしくはΔ＾６−６，８ａ−ジアリールシクロヘキサ［
   ｅ］１，２，４−トリオキサンである請求の範囲第（５
   ）項記載の医薬組成物。