JPH02238898A - 魚の病原体の検出及び同定のためのアッセイシステム - Google Patents
魚の病原体の検出及び同定のためのアッセイシステムInfo
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- JPH02238898A JPH02238898A JP1213107A JP21310789A JPH02238898A JP H02238898 A JPH02238898 A JP H02238898A JP 1213107 A JP1213107 A JP 1213107A JP 21310789 A JP21310789 A JP 21310789A JP H02238898 A JPH02238898 A JP H02238898A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の分野〕
本発明は、種々の病原体に対して特異的である、アミノ
酸からのメラニン形成による糖発酵及び色素形成に基づ
く魚の病原体の種々の診断のためのアッセイシステムに
関する。このアッセイシステムは、種々の糖及び／又は
アミノ酸成分を存する少なくとも２種の別々の無菌の培
養培地及び同定手段、たとえばｐＨ指示薬及び同定手段
、たとえばメラニン形成手段が供給されている容器を含
んで成る．この新規の診断システムは、魚の病原体の初
期検出及び同定を可能にする。
酸からのメラニン形成による糖発酵及び色素形成に基づ
く魚の病原体の種々の診断のためのアッセイシステムに
関する。このアッセイシステムは、種々の糖及び／又は
アミノ酸成分を存する少なくとも２種の別々の無菌の培
養培地及び同定手段、たとえばｐＨ指示薬及び同定手段
、たとえばメラニン形成手段が供給されている容器を含
んで成る．この新規の診断システムは、魚の病原体の初
期検出及び同定を可能にする。
最近、魚の養殖が広まって来ており、そして養殖条件下
での魚は密集した集団で存在するので、魚の病気に対す
る研究は、疾病の病理学、ワクチン形成及び予防処置に
主にこれまで向けられて来た。容易な診断、続いて的に
合った処置はこれまで強調されておらず、そして最近、
予防処置が周囲に影響をもたらす苦情傾向であったので
、的に合った処置方法が選沢されるべきである。これま
で使用されて来た方法は、魚からサンプルを採取し、そ
してそれらを分析のための実験室に送るか（魚のスワプ
サンプルは通常、それらが実験室に達するまでに汚染性
水性植物相により劣化される）、又はそれらが検死及び
退屈な細胞学又は組織学的方法により診断される実験室
に魚を送ることによってであった．使用される細菌増殖
培地は一般的に選択的でなく、そして汚染性水性植物相
の増殖を阻止しなかった（Ｋａｒｅｌ Ｋｏｖａｃｅｋ
など．， Ａｃｔａ ｖｅｔ．Ｓｃａｎｄ １９Ｂ？．
２８ ４７．５４）。
での魚は密集した集団で存在するので、魚の病気に対す
る研究は、疾病の病理学、ワクチン形成及び予防処置に
主にこれまで向けられて来た。容易な診断、続いて的に
合った処置はこれまで強調されておらず、そして最近、
予防処置が周囲に影響をもたらす苦情傾向であったので
、的に合った処置方法が選沢されるべきである。これま
で使用されて来た方法は、魚からサンプルを採取し、そ
してそれらを分析のための実験室に送るか（魚のスワプ
サンプルは通常、それらが実験室に達するまでに汚染性
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退屈な細胞学又は組織学的方法により診断される実験室
に魚を送ることによってであった．使用される細菌増殖
培地は一般的に選択的でなく、そして汚染性水性植物相
の増殖を阻止しなかった（Ｋａｒｅｌ Ｋｏｖａｃｅｋ
など．， Ａｃｔａ ｖｅｔ．Ｓｃａｎｄ １９Ｂ？．
２８ ４７．５４）。
これらの病原体は、予定された条件下で異なった方法で
異なった糖を発酵する゛微生物であり、そしていくらか
はある一定のアミノ酸の存在下でメラニンを形成する．
従って、これは、特定の菌株の容易な同定を可能にする
。この培地は、高濃度の塩及び抗真菌剤の使用によりさ
らに選択的にされ；これらのすべては汚染性水性植物相
の増殖を阻止する。この培地は、発酵工程の読み取りを
容易にするためにｐｉ指示薬を供給される。さらに、細
菌が櫂上で増殖した後、すぐにそれらは市販のオキシダ
ーゼ試験システムにより試験され、オキシダーゼに対し
て陽性である細菌のみが続いて確認試験により試験され
る。第１表は、水性植物相に見出される種々の病原体及
び汚染物の糖の発酵反応を示すが、しかしこれは言及さ
れる細菌種も、示される糖も制限しない。使用され得る
魚の病原体の非発酵反応、すなわちフヱニルアラニン、
トリプトファン又はチロシンもしくはそれらのアミノ酸
の混合物によるカッ色の色素の形成がアエロモナス サ
ルモニシダの検出のために存在する。
異なった糖を発酵する゛微生物であり、そしていくらか
はある一定のアミノ酸の存在下でメラニンを形成する．
従って、これは、特定の菌株の容易な同定を可能にする
。この培地は、高濃度の塩及び抗真菌剤の使用によりさ
らに選択的にされ；これらのすべては汚染性水性植物相
の増殖を阻止する。この培地は、発酵工程の読み取りを
容易にするためにｐｉ指示薬を供給される。さらに、細
菌が櫂上で増殖した後、すぐにそれらは市販のオキシダ
ーゼ試験システムにより試験され、オキシダーゼに対し
て陽性である細菌のみが続いて確認試験により試験され
る。第１表は、水性植物相に見出される種々の病原体及
び汚染物の糖の発酵反応を示すが、しかしこれは言及さ
れる細菌種も、示される糖も制限しない。使用され得る
魚の病原体の非発酵反応、すなわちフヱニルアラニン、
トリプトファン又はチロシンもしくはそれらのアミノ酸
の混合物によるカッ色の色素の形成がアエロモナス サ
ルモニシダの検出のために存在する。
本発明は、種々の病原体に対して特異的である糖発酵及
びある一定のアミノ酸によるメラニンの形成に基づいて
の魚の病原体の特異的な診断のためのアッセイシステム
に関する。このアッセイシステムは、種々の糖又はアミ
ノ酸成分を有する少なくとも２種の異なった無菌培地及
びｐＨ指示薬及び同定手段、たとえばメラニン形成手段
が供給されている容器を含んで成る。この新規の診断シ
ステムは、魚の病原体の初期検出及び同定を可能にする
。それらの抗生物質感受性の決定は続いて行なわれ得る
。
びある一定のアミノ酸によるメラニンの形成に基づいて
の魚の病原体の特異的な診断のためのアッセイシステム
に関する。このアッセイシステムは、種々の糖又はアミ
ノ酸成分を有する少なくとも２種の異なった無菌培地及
びｐＨ指示薬及び同定手段、たとえばメラニン形成手段
が供給されている容器を含んで成る。この新規の診断シ
ステムは、魚の病原体の初期検出及び同定を可能にする
。それらの抗生物質感受性の決定は続いて行なわれ得る
。
より詳しくは、本発明は、少なくとも２種の異なった培
養培地を含む（これらはお互い分かれており、それぞれ
は異なった糖及びＰ｝Ｉ指示薬を含む）容器を含んで成
る、魚の病原体の検出及び決定のためのアッセイシステ
ムに関し、ここで前記糖の発酵が魚の病原体の性質の表
示である。好ましくは、そのキットはまた、オキシダー
ゼ活性を検出するための手段も含んで成る．このアッセ
イに使用される糖の例として、マンニトール、スクロー
ス、アラビノース、セロビオース、リボース、ソルビト
ール、トレハロース、ラクトース、イノシトール、サル
シン又はガラクトースを挙げることができる。高濃度の
塩及び抗真菌剤を含む培養培地を使用することが好まし
《、そしてこれらは汚染性水性植物相の増殖を阻止する
。さらに、カッ色の形成によりアエロモナス サルモニ
シダを検出するために、糖を欠いているが、しかしフェ
ニルアラニン、トリプトファン、チロシン又はそれらの
組合せを含む培地が使用される。それらの別々の培養培
地が、バイアルのキャップからつるされた櫂の複数の表
面で供給され得る。
養培地を含む（これらはお互い分かれており、それぞれ
は異なった糖及びＰ｝Ｉ指示薬を含む）容器を含んで成
る、魚の病原体の検出及び決定のためのアッセイシステ
ムに関し、ここで前記糖の発酵が魚の病原体の性質の表
示である。好ましくは、そのキットはまた、オキシダー
ゼ活性を検出するための手段も含んで成る．このアッセ
イに使用される糖の例として、マンニトール、スクロー
ス、アラビノース、セロビオース、リボース、ソルビト
ール、トレハロース、ラクトース、イノシトール、サル
シン又はガラクトースを挙げることができる。高濃度の
塩及び抗真菌剤を含む培養培地を使用することが好まし
《、そしてこれらは汚染性水性植物相の増殖を阻止する
。さらに、カッ色の形成によりアエロモナス サルモニ
シダを検出するために、糖を欠いているが、しかしフェ
ニルアラニン、トリプトファン、チロシン又はそれらの
組合せを含む培地が使用される。それらの別々の培養培
地が、バイアルのキャップからつるされた櫂の複数の表
面で供給され得る。
使用される培地の配合物のタイプが例として単に示され
ており、ここで糖成分は交換され得、種々の異なったｐ
Ｈ指示薬が使用され得、そして異なったペプトンもまた
使用され得る。
ており、ここで糖成分は交換され得、種々の異なったｐ
Ｈ指示薬が使用され得、そして異なったペプトンもまた
使用され得る。
阻一上
（ｇ数／ｉｆの蒸留水）
ＮａＣ ｌ １５ 〜７
０ ｇペプトン又はトリプトン ２ｇ
酵母抽出物 ２ｇ寒天
１５ｇ ＩＮのＮａ０１１
１ｙｎｌマンニトール ２〜１２
ｇプロモフェノールプルー ｌＯ〜３０■ア
ンホテリシン８ １５〜３０■シク
ロへキシミド ２５〜２００■水
１ｌ
１２１゜Ｃで２０分間殺菌し、そして次にｐｌ１７．３
±０．３での櫂の中に注ぐ。マンニトールに対する陽性
は黄色であり、そして陰性は青／緑であろう。第１表を
参照のこと。
０ ｇペプトン又はトリプトン ２ｇ
酵母抽出物 ２ｇ寒天
１５ｇ ＩＮのＮａ０１１
１ｙｎｌマンニトール ２〜１２
ｇプロモフェノールプルー ｌＯ〜３０■ア
ンホテリシン８ １５〜３０■シク
ロへキシミド ２５〜２００■水
１ｌ
１２１゜Ｃで２０分間殺菌し、そして次にｐｌ１７．３
±０．３での櫂の中に注ぐ。マンニトールに対する陽性
は黄色であり、そして陰性は青／緑であろう。第１表を
参照のこと。
■−Ｉ
（ｇ数／Ｉｆの蒸留水）
ＮａＣ ｌ １５〜７
０ ｇペプトン又はトリプトン ２ｇ
酵母抽出物 ２ｇ寒天
１５ｇ ＩＮのＮａＯＨ １
ａｌスクロース ２〜１２ｇ
フェノールレッド ５〜３０■アン
ホテリシン８ ３０〜６０■シクロ
へキシミド ２５〜２００ｍｇ水
Ｉ
ｆ１２１″Ｃで２０分間殺菌し、そして次にｐｌ１７．
３±０．３での櫂の中に注ぐ。スクロースに対する陽性
は黄色であり、そして陰性は赤／ピンクであろう。第１
表を参照のこと。
０ ｇペプトン又はトリプトン ２ｇ
酵母抽出物 ２ｇ寒天
１５ｇ ＩＮのＮａＯＨ １
ａｌスクロース ２〜１２ｇ
フェノールレッド ５〜３０■アン
ホテリシン８ ３０〜６０■シクロ
へキシミド ２５〜２００ｍｇ水
Ｉ
ｆ１２１″Ｃで２０分間殺菌し、そして次にｐｌ１７．
３±０．３での櫂の中に注ぐ。スクロースに対する陽性
は黄色であり、そして陰性は赤／ピンクであろう。第１
表を参照のこと。
■−１
（ｇ数／ｉｌの蒸留水）
ＮａＣ ｊ！ １５〜
７０ ｇベプトン／トリプトン又は同等物 ２ｇ
酵母抽出物 ２ｇ寒天
１５ｇ ＩＮのＮａＯＨ ｌ
ｒｒｄｌアンホテリシン８ ３０
〜６０■シクロへキシミド ２５〜
２００■水
１ｌ１２１℃テ２０分間殺菌し、そして次ニ
ｐＨ７． ３ ｆ ０． ３での適切な容器中に注ぐ。
７０ ｇベプトン／トリプトン又は同等物 ２ｇ
酵母抽出物 ２ｇ寒天
１５ｇ ＩＮのＮａＯＨ ｌ
ｒｒｄｌアンホテリシン８ ３０
〜６０■シクロへキシミド ２５〜
２００■水
１ｌ１２１℃テ２０分間殺菌し、そして次ニ
ｐＨ７． ３ ｆ ０． ３での適切な容器中に注ぐ。
陽性反応はカッ色を示し、そして陰性反応は色の変化は
ない。第３表を参照のこと。
ない。第３表を参照のこと。
これらの配合物は単に、表示するものであり、そして糖
及びｐＨ指示薬は交換され得る。例４はアミノ酸に関し
てである。他の糖及びｐＨ指示薬並びに種々の栄養物質
が記載されるように使用され得る．使用され得るｐｉｔ
指示薬は：アリザリン、Ｍ−ジニトロベンゾレン尿素、
ブリリアントイエローフェノールレッド、中性レッド、
ｍ−二トロフェノール、クレゾールレッド及び同様のも
のである．栄養物質は、すべてのタイプのベプトン、ト
リプトン、酵母抽出物、ビーフ抽出物及び同様のもので
ある。
及びｐＨ指示薬は交換され得る。例４はアミノ酸に関し
てである。他の糖及びｐＨ指示薬並びに種々の栄養物質
が記載されるように使用され得る．使用され得るｐｉｔ
指示薬は：アリザリン、Ｍ−ジニトロベンゾレン尿素、
ブリリアントイエローフェノールレッド、中性レッド、
ｍ−二トロフェノール、クレゾールレッド及び同様のも
のである．栄養物質は、すべてのタイプのベプトン、ト
リプトン、酵母抽出物、ビーフ抽出物及び同様のもので
ある。
サンプリング
１． 容器を開け、そして保持用キャップにより櫂を取
り除くか又は櫂形で存在しない場合、寒天表面を暴露す
る。手又は指により櫂又は寒天表面を触れないこと。
り除くか又は櫂形で存在しない場合、寒天表面を暴露す
る。手又は指により櫂又は寒天表面を触れないこと。
２． 魚の好ましい場所からサンプルを採取し、そして
殺菌したスワブ／ループにより、すべての側上に、サン
プルを穏やかに適用し、そして寒天表面の縦及び横にジ
グザグに広げることによって接種する。
殺菌したスワブ／ループにより、すべての側上に、サン
プルを穏やかに適用し、そして寒天表面の縦及び横にジ
グザグに広げることによって接種する。
３．容器中の櫂を取り換え又は蓋により表面をおおう。
但し、大気の自由な交換を可能にするために堅く密封し
ないこと。
ないこと。
４． ビブリオ アングイララム及びアエロモナス サ
ルモニシダのためには室温２０゜Ｃで４０〜４８時間及
びビブリオ サルモニシダのためには１５゜Ｃで４日間
インキユベートする。ビフ゛リオ アングイララム及び
アエロモナス サルモニシダはまた１５゜Ｃでゆっくり
ではあるが増殖するであろう。
ルモニシダのためには室温２０゜Ｃで４０〜４８時間及
びビブリオ サルモニシダのためには１５゜Ｃで４日間
インキユベートする。ビフ゛リオ アングイララム及び
アエロモナス サルモニシダはまた１５゜Ｃでゆっくり
ではあるが増殖するであろう。
猪一果
次の表により結果を分析する。糖発酵がそのパターンに
適合する場合、オキシダーゼ試験を用いることによって
結果を確認する。
適合する場合、オキシダーゼ試験を用いることによって
結果を確認する。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、魚の病原体の検出及び同定のためのアッセイシステ
ムであって、少なくとも２種の培養培地を含み（これら
はお互い分かれており、それぞれは異なった糖及びｐＨ
指示薬を含む）、そして場合によっては、発酵の後、培
養された病原体のオキシダーゼ活性を検出するための手
段を含む容器を含んで成り、又はここで、培養培地が糖
を欠いており、そして特定の魚の病原体の同定の表示で
ある色の形成及び特定の糖の発酵による特定の病原体の
検出のために糖の代わりにトリプトファン、チロシン又
はフェニルアラニンを含むことを特徴とするアッセイシ
ステム。 ２、前記手段が、病原体がオキシダーゼに対して陽性で
あるか又は陰性であるかを決定するための、培養培地上
で増殖する病原体のオキシダーゼ活性を検出するために
付与される請求項１記載のアッセイシステム。 ３、アエロモナスサルモニシダ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｓ
ａｌｍｏｎｉｃｉｄａ）の検出のために、１つの培養培
地が糖の代わりに、フェニルアラニン、トリプトファン
及びチロシンから成る群のメンバーを含み、そしてこれ
らの存在はカッ色の形成により検出される請求項１記載
のアッセイシステム。 ４、前記糖を、マンニトール、スクロース、アラビノー
ス、セロビオース、リボース、ソルビトール、トレハロ
ース、ラクトース、イノシトール、サルシン及びガラク
トースから選択する請求項１記載のアッセイシステム。 ５、カッ色の形成によりアエロモナスサルモニシダ検出
のためにフェニルアミン又はトリプトファンもしくはチ
ロシン又はそれらの混合物を含む請求項１〜４のいづれ
か１項記載のアッセイシステム。 ６、魚の病原体、ビブリオアングイララム （Ｖｉｂｒｉｏａｎｇｕｉｌｌａｒｕｍ）、ビブリオサ
ルモニシダ及びアエロモナスサルモニシダ（Ａｅｒｏｍ
ｏｎａｓｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａ）の検出のために、ア
ミノ酸形成とスクロース発酵との組合せが前記病原体の
個々を同定し、ここでビブリオアングイララムはスクロ
ースに対して陽性であり、そしてメラニンに対して陰性
であり、ビブリオサルモニシダはスクロース及びメラニ
ンに対して陰性であり、そしてアエロモナスサルモニシ
ダはスクロースに対して陰性であり、そしてメラニンに
対して陽性である請求項１記載のアッセイシステム。 ７、汚染性水性植物相の増殖を妨げる高濃度の塩及び抗
真菌剤を含む請求項１〜３のいづれか１項記載のアッセ
イシステム。 ８、前記別々の培養培地が、バイアルのキャップからつ
るされた櫂の複数の表面で供給される請求項１〜７のい
づれか１項記載のアッセイシステム。 ９、異なった培養培地が、適切な培養プレート中の多く
のウェル中に供給される請求項１〜７のいづれか１項記
載のアッセイシステム。 １０、種々の糖の魚の病原体による発酵の決定により、
フェニルアラニン、トリプトファン又はチロシンとそれ
らの反応により及びそれらのオキシダーゼ活性を確定す
ることにより魚の病原体の特異的同定のための選択的ア
ッセイシステム。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IL87533A IL87533A0 (en) | 1988-08-23 | 1988-08-23 | Assay system for fish pathogens |
| IL087533 | 1988-08-23 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02238898A true JPH02238898A (ja) | 1990-09-21 |
Family
ID=11059178
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1213107A Pending JPH02238898A (ja) | 1988-08-23 | 1989-08-21 | 魚の病原体の検出及び同定のためのアッセイシステム |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH02238898A (ja) |
| AU (1) | AU4008889A (ja) |
| DK (1) | DK411789A (ja) |
| GB (1) | GB2223580A (ja) |
| IE (1) | IE892696L (ja) |
| IL (1) | IL87533A0 (ja) |
| NO (1) | NO893378L (ja) |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2547622C3 (de) * | 1975-10-24 | 1978-05-11 | C.H. Boehringer Sohn, 6507 Ingelheim | Test-Set |
| GB8416045D0 (en) * | 1984-06-22 | 1984-07-25 | Unilever Plc | Carrying out microchemical and microbiological tests |
-
1988
- 1988-08-23 IL IL87533A patent/IL87533A0/xx unknown
-
1989
- 1989-08-09 GB GB8918170A patent/GB2223580A/en not_active Withdrawn
- 1989-08-21 JP JP1213107A patent/JPH02238898A/ja active Pending
- 1989-08-22 IE IE892696A patent/IE892696L/xx unknown
- 1989-08-22 AU AU40088/89A patent/AU4008889A/en not_active Abandoned
- 1989-08-22 DK DK411789A patent/DK411789A/da not_active Application Discontinuation
- 1989-08-22 NO NO89893378A patent/NO893378L/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK411789A (da) | 1990-02-24 |
| DK411789D0 (da) | 1989-08-22 |
| IE892696L (en) | 1990-02-23 |
| NO893378L (no) | 1990-02-26 |
| AU4008889A (en) | 1990-03-01 |
| NO893378D0 (no) | 1989-08-22 |
| GB8918170D0 (en) | 1989-09-20 |
| IL87533A0 (en) | 1989-01-31 |
| GB2223580A (en) | 1990-04-11 |
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