JPH0219769A - Ｐｈ分析器及び電解質を標準化するための緩衝溶液系 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、臨床化学用分析系に関し、さらに特定的には
イオン選択性電極を用いての直接電位差測定によるイオ
ン（活性度または濃度）の特異測定のために分析系で使
用される標準化用標準及び／または対照溶液に関する。

種々のタイプのイオン選択性電極の構造のための電気活
性要素の継続的な開発は、多数の陽イオン及び陰イオン
の測定を可能にする。現在、種々の９イブのイオン選択
性電極を用いての直接電位差測定により選択性を測定て
゛きる隻なくとも３０のイオン種（陰イオン及び陽イオ
ン）がある０９８６年ベルリン、ハイデルベルグ、スズ
リンゲル　フェルラ−／発行、ダニエル・アンマン著イ
オンセレクｒイブ　マ・イクＤ　ｆｆ：、レノ）　Ｃ７
−ズグリンン；γルズ　デザイ、・　７″ンド　アフ゛
リゲション」参照）。

ガラス膜電極が水素・イオン及びナトリウムイ土二・活
性度を測定−４−るための分析化゛ｔにおいてまだ広く
使用さｔ′しているが、中イ↑！ヤリャーに基く電極が
アルカＩｊ及びアルカリ土類金属グ）測定において次第
に＠要な信義をもつようになってきている。

味に５直接型位差測定に基＜　１ｆｌｌ＋α、血清及び
血漿中の電解質測定のための分析系は、既に確立され−
（いるｐ）ｉセンサーと一緒に、−ｔ’　）・リウム、
力涜つノ１、カルシウム、リチウム及び塩素のためのイ
オン１茸択性電極を使用１−る。

血液は生理学的活動に基本的に重要な種々の成分を含む
ｉ！雑な生物学的液体である。

電解質、ならびに溶解伏聾またはコロイド大態で存在す
るタンパク質及び脂質のようなその他の物質種の両方を
含んでいる血７αの水性相におけるある物質の濃度を直
接に指示する分析技術ζま、血液異常条件下で特に基本
的な臨床情報を提供する。

この点に関して、稀釈は被検系の強度性質（濃度）の直
接測定から得られる重要な情報の損失をもたらすことが
あるかもしれない。

間接法は、要するに、稀釈用溶液の容積に１衣存し、そ
の水性部分はｌｌＸ在４るタンハク質または脂質の濃度
及び種類に依存することになる。

実際のイオン選択性電極は、内部′０照系及び特異膜体
からなる電気化学的′＃−電池であり、そｃｙ）構成〈
組成）及び機能は測定されるべきイオンの特性に１衣存
する。

残り部分の半電池は、く飽和ＫＣｉ’中のΔビＡ、Ｃｅ
のような）ｌｆｉ準電解買（液）と接触している外部ｇ
膜電極である、 膜は、測定されるべきイオンに応して種々のタイプのも
のとすることができる。

電気化学電池の電位（電流上口にお番“）る起電力；Ｅ
　Ｍ　Ｆあるいは電位差）は、膜電極及び参照電極の両
者が、被測定溶液と接触しζいるどきに生じる。

起電力は、固体／固体、固体／′液体及び液体、′液体
のそれぞれの界面で生じる一連の局部的″１．位モの合
計でＬＰ）る。

理想的には、膜とｒｇ！測定溶）αとの間に生じる電位
差は、試料中のイオンの活性度及びタイプによって左右
される。

他のすべての電位差が一定であると仮定すれば、電池の
起電力はオ・ルンスト式によって現わすことができる。

しかし実際には、電気化学系はこの埋５忠的挙動を示す
ことがない。

時にはネルンスト式からのずれは可成り大きくなり、従
って干渉イオンにより起電力へｈ−えられる付加効果を
考慮しなければならない。

ネルンスト式から発展されたニコルスキー・アイゼンマ
ン式は系を表現するための満足１べき゛卜実験的手段を
与える（前記参照） ｚｉ／ｚｊ １：トイＦ　−Ｅｏ＋５ＩｏＨ（ａ　　音Σ　ｉＫ　、
＜ａ　ρここにＩ＜６．はｊπ択系数である９ またＥ　ｏ　＝　Ｅ　？”　Ｅ　Ｒ”　Ｅ　ＤここにＥ
９は、充填溶液と嗅との間に生じる周囲電位差を含めて
の一定電位差で４らる。

ＥＲは金属導体と指示型Ｆ！ｉ！（イオン選択性）の充
填溶液との間の電位差、及び金属導体と参照′工挿中の
標準電解液との間の電位差の両名に依存する一定電位差
である。ＥＲは試料の組成の変化には無関係である。

Ｅ、は標準電解液と測定されるべき溶液どの間に生じる
液間電位差である。

Ｅ？とＥＲとの合計は、試料組成と無関係であるすべて
の効果（起電力）を含み、ＥＤは変動性であり、試料に
よって左右される。Ｅ、は標準電解液（塩橋）と測定さ
れるべき溶液との間の界面で生じ、従って時により非常
に変動しうる。

明かに、Ｅ、は膜における電位に追加されるので、この
効果（Ｅ　ｏ）は標準電解液の適当な選択によって最小
化されなければならない（最も一般的に用いられる参照
電極は飽和ＫＣｌ（２５℃で４．２Ｍ＞または３ＭＫＣ
ｌである。

再び、イオン選択性電極及び液絡を有する電気化学電池
の起電力は、イオン活性度の対数に依存し、イオン活性
度自体は物質の化学量論量に関してのイオン濃度に依存
する。生物学的マトリックスにおいて見られるようなイ
オン濃度＞０．０ＩＭについては、濃度は活性度の代替
値となりえない。

例えば生理学的に重要なイオン及びタンパク質を含んで
いる混き電解液中の溶液によって測定された濃度と活性
度との関連を示す活性係数は、生物液体中の条件をさら
に適切に表現することになろう。

しかしこのような考え方は、直接電位差測定によって活
性係数の値を決定する器具がイオン選択性電極自体でな
ければならないという大きな困難を伴なった。

水素イオン活性度の生理学的液体中のｐＨ測定のための
活性度尺度は、首尾よく導入されてきている（「アナリ
テイカル・ケミストリイ」第５０巻、第９号、１９７８
年８月、Ｒ，Ｇ、ベイン及びＣ。

ベガのｒスタンダード・フオ・ｐＨ・ミジュアメント・
イン・アイソトニック・サリン・メディア・オブ・アイ
オニツク・ストレングスＩ　＝０．１６．参照）。

活性係数の主題は、検量の問題及び測定電池の実験配置
と密接に関連している。

本発明によれば、イオン選択性電極を有して直接電位差
測定法を用いる分析器のための標準化溶液（検量及び対
照）を、支持用または活性塩または電解質を添加するこ
とによって得られる補償を行なうことによって改善する
ことが提案される。そのような添加補償は活性係数値と
ほぼ等しくなるようなものであり、また参照標準と試料
との間の液間電位から生じる差を低減させるようなもの
である。

補正係数で表わすと、効果は下記の比によって概略示さ
れうる。

活性係数については： 液間電位差については： 病理液についての正確な検量は、上記の各比がほぼ１で
あるような、いわゆる補償標準化によって達成される。

実際には、補償は、液間電位差及び活性係数に作用する
塩で行なうことができ、例えば以下に述べるようにＮａ
Ｃｌ，ＫＣ（ｌ及びＣａＣｌ２を各測定イオンについて
最良の補償がなされかつ参照系によってデータが得られ
（Ｎａ＋及び１（＋は次光分析により、そしてＣａは原
子吸光により）ような適当な化学量論量で添加すること
により補償が達成される。

ＮＢＳ処方によってアルカリ金属類のリン酸塩を適当に
混合することによって得られる従来の、Ｈ／　Ｉ　Ｓ　
Ｅ　分析！標準他用ｖＩ衝剤対（ｐＨ７，３８４及びｐ
Ｈ６，８４０，３７℃）は、以下で表１及び表２に関連
して説明する理由により、ナトリウム、カリウム、カル
シウム及び塩素の同時標準化には不適当である。

本発明は、全血、血漿または血清におけるｐＨならびに
Ｎａ、に、Ｃｌ及びＣａイオンの同時または個別測定の
ためのイオン選択性電極手段を有する臨床化字分析器に
使用するための標準化系を提供する。この標準化系は二
つの緩衝溶液からなっている。第２のＭ＊温溶液、第１
の緩衝溶液のＤＨならびにＮａ、に、Ｃｌ及びＣａイオ
ンの非ゼロ値と相異なる９ＨならびにＮａ、に、Ｃｌ及
びＣａイオンの非ゼロ値を有する。第１及び第２Ｍ衝溶
液のそれぞれは、それぞれ特定量のナトリウム、カリウ
ム、塩素及びカルシウムイオンに加えて［グツド（Ｇｏ
ｏｄ）」のＩ！衝剤を含む、有利には、第ＬＭ！Ｉ溶液
がＨＥＰＥＳ／ＮａＨＥＰＥＳｕｗＩ剤対を４０〜６０
ミリモル／ｌの濃度で含み、第２Ｒ＆衝溶液がＭＯＰＳ
／ＮａＭＯＰＳ！ｆｔ剤対を４０〜６０ミリモル／ｌの
濃度で含む。

本発明は、イオン選択性電極を有して電位差測定法を用
いる分析器の同時標準化のために適当な、電解質液組合
せ組成緩衝剤の処方、ならびにｐＨを提案する。

本発明によるこれらの標準化溶液を処方するための選定
要件は下記の通りであった。

３７℃で６〜８の範囲内のｐＨを有する緩衝溶液； 全血のイオン濃度とできるだけ同じようなイオン濃度を
有する溶液： 関与するイオンの変化が血液中の関与するイオンの変化
に反映された溶液； 血液中に存在しないイオンを可及的に含まない溶液； 高純度でかつ容易に市販入手できる原料から作られる溶
液； イオン濃度の差がΔＥに関して著しい差（ΔＥ＞８ｍＶ
）を与えるがそれでもなお血液中のイオン変動を反映す
るような溶液。

好ましい標準化系はこれらすべての要件に音数するもの
であるが、これらの要件のうちのいくつかが全くは満足
されなくても本発明による標準化系は適当である。

これらの処方の開始点とし文献データを採用した（Ｒ，
Ｇ、ベーラ；　Ｂ　ａｔｅｓ及びＣ，ベガ；　Ｖ　ｅ４
ａの前記文献９照〉。

一旦製造されると、緩衝溶液は、特定事項、すなわち（
１）ｐＨ、及び（２）電解質（Ｎａ＋、に＋等）の１度
の二点に関して一連の試験に１寸された。

緩衝溶液のｐＨは、指示電極としてのｐＨガラス電極と
飽和ＫＣｌ中のカロメル参照電極とを閏接合状態として
３７°Ｃで測定した。

検ＩＬ＜キャリブレーション）は、ＮＢＳ凛準９照品か
ら得られた緩衝剤、すなわち００２５モルＫｌ（２ＰＯ
，及びＮ　Ａ　２　ＨＰ　Ｏ＊　＜　３７℃でＤＨ６，
８４０）；及び０．００８６９５モルＫ　Ｈ２Ｐ　Ｏ４
及び０．０３０４３モルＮ　Ａ　２ＨＰ　４（３７℃で
ｐ）Ｉ　７．３８４）　；を用いて実施した。

ナトリウム及びカリウム組成は炎光分光分析法により照
合し、そしてカルシウムは原子吸光法により照会した。

この方法により、３７℃及び２５℃の両方での電極（Ｉ
ＳＥ）で得られた結果との比較のために、ナトリウム、
カリウノ、及びカルシウムのき計量についての照合がな
された。

電極は、純粋なＮａＣｌ溶液、ＫＣｌ溶液及びＣａＣｌ
２溶液で予め標準化されていた。

表１は、ＮＢＳ処方としたリン酸塩緩衝剤を用いて、３
７℃でｐＨ７，４、Ｉ　Ｓ　Ｏ，１６Ｍで得られた結果
の一例を示す。

表１ いて、３７℃でｐＨ６，８、Ｔ　Ｓ　　０．１６Ｍで得
られた結果の一例を示す。

これらの結果は、イオン濃度（Ｉ　Ｓ　）０．１６Ｍの
アルカリ金属リン酸塩）１ｔｆ剤を用いてのナトリウム
及びカリウムについてのイオン選択性電極の検量は、非
緩衝溶液と比較した場合に異なった測定値を与え、そし
て炭分光分析の結果よりも低い値を与え、いずれの場き
にも溶液中に存在する化学量論量よりも低い値を与える
。

表３は、上記の効果が、リン酸塩化音物により表２は、
ＮＢＳ処方としたリン酸塩緩衝剤を用て得られる緩衝剤
により生じる液絡電位により部分的にもたらされうろこ
とを示している。この点に関して、差異はナトリウムイ
オン及びカリウムイオンがリン酸塩緩衝剤によってイオ
ン会合現象を受けること含示すものである。

この効果の程度は、すべての場合に、電解質に対して「
−次」標準化溶液として挙動するＭＷＩ剤対を得るのが
明かに望ましいとさせるような著しい程度であった。そ
のような標準］ヒ溶液は、Ｎ　ａＣｌ。

ＫＣｌ及びＣａＣｌ２を含む水溶液と同様に挙動するが
その、Ｈは血液及び未希釈血清中のｐＨ、ナトリウノ４
、カリウノ１、カルシウム及び塩素を測定するための分
析系の標準化のために適切であるものである。

この理由のために、本発明では、標示ｐ　Ｉ−（範囲＜
０〜８）内に緩衝剤を調製できるようなｐｌ−［値を有
するエタン及びプロパンスルホン酸の形のいくつかの誘
導体（すなわち”Ｇｏｏｄ」の緩衝剤：ＴＢＳ）（ＥＰ
ＥＳ、ＭＯＰＳ及びＭＯＰＳＯ＞に注目した。

Ｎ（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ−エタンス
ルホン酸 （２５°Ｃにおけるｐｋａ　　７．５６５）Ｎ（トリス
ヒドロキシメチル）メチルアミノエタンスルホン酸 Ｈ＋ ３（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルポン酸（２０℃ニＪ
３　ｆｔ　Ｚｌ　ｐｋａ　　７．２）ＭＯＰＳＯＯ’Ｍ
−ｃｏ□−ｃｏ−ｃ＋−＋２ｓｏ。

Ｍ−ノ　　　１ ３（Ｎ−モルホリノ）−２−ヒドロキシプロパンスルポ
ン酸 （２０”Ｃにおけるｐｋａ　　６．９５）本発明の目的
を達成するのに、不完全解離に関する面の補償の問題を
解決することが主要な準備事項であると考えられた。

この状態の分析は、トリスヒドロキシメチルアミノメタ
ン（トリス）−トリスＨＣｌの対（２５℃でｐＨ，７，
５）に基くＭ部系を９照として用いることにより実施さ
れた。このものは実験作業中にナトリウム、カリウムま
たはカルシウムのいずれに対しても結き能をほとんど示
さないことが示された。

−例として、表４は所与の濃度の溶液中のＳＣＥ電極に
対してのＣａ電極の起電力の変動を示す。

表土 溶液１　　　　溶液２　　　溶液３ ２５°Ｃ＋４２．３請Ｖ　　　　　　＋４２．５ｎ＋Ｖ
　　　　＋４２．６ｎＶ３７℃　　　＋４２．８請Ｖ　
　　　　　＋４２．８請Ｖ　　　　＋４２．ｈＶ溶液１
　１鴎Ｈトリス／トリスｌｌｃ＆　　　（３７℃で９Ｈ
７，２，２５℃で、１１７．５）１８０ｍＭ　　ＮａＣ
ｌ ＩＪ　　ＣａＣｌ２ 溶液２　　１０ｍＭ）リス／トリスｌＩＣｌ１５２Ｊ　
　ＮａＣｌ ｆｍＭ　ＣａＣＬ ン容＞１！３　　１００ｍＭ）リス／トリ２ＨＣｌ８０
ｍＨＮａＣｔ！ １ｓＭ　　ＣａＣｌ２ 表５は、種々のトリス／ｌ−リスＨＣρ濃度におけるＳ
ＣＥに対してのＩＳＥについてのナトリウム及びカリウ
ムの変動を示す。

人旦 ン容液１　　　ン容液２ トリス／トリスＨＣ／ｉ過度（ミリモルｔ！＞ｔ　　　
　　　　５０２５℃での電極電位＜ｄ）　　−１１，１
１０，９３７℃での電極電位（ｍＶ）　　−１３，３−
１２，８８力ニワニワ、へｎ佼（ ）　’ｊ　ス／’　）　’Ｉ　Ｉ　ＨＣｅ　１ｆｌ１１
度（ミリｔｅ／ｌり　　　＋　　　　　　　　０５０２
５ででの電極電位（ｍＶ）　　＋５６．７　　棒５６９
３７°Ｃて゛の電極電位（慣■）　・４７．６　　＋４
７．６ｉＦＮ７（１ｔｄ（リス・′トリスｌｌＣｅ　　
　　　３７″Ｃでｐｉ１７．２１４０ｍＮ　　ＮａＣｌ ３＋ｅＨＫＣＮ ン容ンα２　５０翔Ｈトリス／）リス）ｉｌＪ１４０Ｊ
　　ＮａＣｌ ５ｍＭ　　ＫＣｌ 、８液３　　１００ｍＭ　　）リス／トリスｌＩＣｌ１
４０ｍＭ　　ＮａＣｌ ３論Ｍ　　ＫＣ７！ 溶液３ １０．９ １２．７ 罎５６９ ＋４７　に の予備分析結果を用いて、最良の緩衝効果、及びナトリ
ウム、カリウム及びカルシウムに対して最小の銘１ヒ（
結な）効果を与えるｙｌｌ街灯を探究した。

ナトリウム及びカリウムについて使用された標準化系は
、トリス／′トリスＨＣｔ’の１ｍＭ緩衝液く２５℃で
１］Ｈ７，５）、１４０ｎＭ　　Ｎａ＋及び５＋ａＭＫ
＋のちの、及びｉｏｏｍＭ　　Ｎａ及び３ｍＭＫ＋のも
ので＋ｌ’１つな。

表６は、ナＩ・リウム及びカリウム測定に対するＨＥＰ
ＥＳ／’Ｎａ＋−ＩＥＰＥＳ緩衝剤対（３７°ＣでｐＨ
７，４＞の濃度の影響を示す。

ＨＥＰＥ５７’ＮａＨＥＰＥＳｆｉ度 ２５℃にＪ）（するＮａ 濃度（ミリモル／〕） ３７°ＣにおけるＮａ 、過度（ミリモを／ρ） ３７℃てＪ）参照に るΔＣｌ １＋ＥＰ　ＥＳ／ｌ４ａｔｔＥＰ　ＥＳ濃度２５°Ｃに
おけるＫｆｉ度 （ミリそル／ｌ） ３７’Ｃにおけるに濃度 （こリモル＃Ｉ） ３７℃での参照に るΔＣｚ ＨＥＰＥＳ／Ｎａ）ｌピＰＥＳｉ過度 （ミリモルフ′り ２５℃におけるＣａ０ く過度くミリモル／ｅ） ３７℃におけるＣａ− 濃度（ミリモル／ｌ） ３７℃での９照に るΔＣｚ 六コ［ ナトリウム 、８液Ｂ　【８渣Ｃイ容液Ｄ　ン容液Ｅ１．４　　−３ ３゜６　−７１ ｂ）　カリウム 、８液＾　Ｃ容液Ｂｌ容ｆ夜Ｃ ィ容液Ｄ　？容液Ｅ ４．９　　４．８ ４９　　　４．９　　４．９ Ｃ）　カルシウム 溶液＾（ｇ液Ｂ溶液Ｃ溶液り溶液Ｅ Ｏ，９８０，９６０，９６０，８７ ＋　　　０．９５　０，９７　０．８９５０ＩＩＩＭま
での１（ＥＰＥＳ／ＮａＨＥＰＥＳ、好ましくはこの緩
衝剤対の４０〜ｂ ついては、緩衝剤によるイオンｊ１１化による効果は排
除されうろ。そしてその星巽は飽和Ｋ　ＣＮ絡において
生じる液間電位差によるものである。

この仮説を確認するため、カルシウム電極におけるカル
シウム濃度を、参照電極としてすＩ・リウム電極を用い
て、一定のナトリウムイオン濃度の一連の溶液で測定し
た。

検量は、１４０潰Ｍ　　Ｎａ＋のトリス、／”’　ｌ−
リス１−Ｉ　Ｃｌ（０，０ＩＭ）緩ｉ液〈２５°Ｃ７”
ｐｌ−１７，５）中で１ｍＭ及び３１＾ＭＣａ”につい
て実施した。

結果を表７に示す。一連の２１１１定溶液はＨＥ　Ｐ　
Ｅ　Ｓ　／　Ｎ　ａ　ｌ（Ｅ　Ｐ　Ｅ　Ｓ　４度におい
て差異があった。

１１ＥＰＥｓ／ＮａｌｌＥＰＥＳ ｍＭ 去１− Ｎａ＋参照電極に対 しての、２５℃にお ＳＣＥに対しての、 ２５°Ｃにおける イオン濃度を一定に維持することによって得られたこれ
らの実験結果は、液間電位差（対参照Ｓ　Ｃ：　Ｅ　）
により与えられる効果（影ｓ＋）が決定的であることを
示すものである。

ナ［・リウノー及びカリウムと比較してカルシウムにつ
いてより大きな精度差（約２倍濃度）はカルシラノ、イ
オンの（ナトリウム及びカリウムイオンと比較しての）
２倍の電荷によるものである。

表８は種々の４度のＭＯＰＳ／ＮａＭＯＰＳ緩衝液です
トリウム及びカリウムについて実施した同様な実験の結
果を示す。

老」し ａ）　　ナトリウム １　２　３・ Ｍ０ＰＳ／ＮａＭＯＰＳ濃度　　１ ２５℃におけるＮａ　　１０１ 濃度（ミリモル／ｌ） ３７℃におけるＮａ　　１００ ミリモ＃　１ ｂ）　カリウム Ｍ０ＰＳ／ＮａＭＯＰＳ濃度　　１　　１０　　２５　
　５０　１００２５℃におけるに濃度　３　　３．２　
２．９　　３　２．９（ミリモル／ｌ） ３７℃におけるに濃度　３　　３，０５　２．９　２．
９　２．８５（ミリモル　ｌ この状況はＨＥＰＥＳ７’ＮａＨＥＰＥＳの場合のよう
には単純ではない。

この場合にも、この緩衝剤ＭＯＰＳ／ ＮａＭＯＰＳの５ミリモル／ｌ、好ましくは４０〜６０
ミリモル／ｌ（ｍＭ）の濃度を考慮すると、ナトリウム
及びカリウノ、に対する影響は予期されたものと同等と
考えられる。

ＭＯＰ　Ｓ／　ＮａＭＯＰ　Ｓ及びＨＥＰＥＳ／Ｎａ１
（ＥＰＥＳの両方について、本発明による実験を実施し
た。５０ミリモル／ｌの濃度を有する榎ｗｉ溶液を作り
、イオン濃度及び液絡に関して、実験により必要である
ことが示された補償を実施した。

予期値と比較しての化学量論量的 濃度についてなされるべき補正 Ｎａ”　　　　Ｋ”　　　　Ｃａ〜 ■ＥＰＥＳ／ＮａＨＥＰＥＳ ５０ミリモル／ｌｔ４ｚ＋４ｚ＋８ｚ ＭＯＰＳ／ＮａＭＯＰＳ ５０ミリモル／ｌ　　　＋１＄　　　　＋Ｉ＄　　　　
＋２１（ＭＯＰＳ／ＮａＭＯＰＳ）を得るために行なっ
た。

水素イオン活性度は、飽和Ｋ（Ｊ中のカロメル電極を用
い、ガラス電極及び開路を有する系で３７℃で測定した
。標準化はＮＢＣ処方のリン酸塩［衝溶液（３７℃で７
．３８４及び６．８４０）で行なった。

緩衝剤の化学量論組成を表９に示す。

次の実験は、二つの上記Ｍ街溶液について、それらの合
計モル濃度を一定に維持しつつく５０ミリモル／ｌ）、
それらの相対的割合を適切に変えることによって所要の
ｐｔ−を値、すなわち３７℃におけるｐＨ７，３８４（
ＩＩＥＰＥｓ／ＮａＨＥＰＥＳ）及びｐＨ６，８４０壱
づし ＾）　ＨＥＰＥＳ／ＮａＨＥＰＥＳ　Ｍ清液　３７°Ｃ
でｐＩ（７，３８４ミリモル／ｐ ＮａＨＥＰＥＳ　　　　　　　　　　２７．５ＨＥＰＥ
Ｓ　　　　　　　　　　　　２２．３６ＮａＣＮ　　　
　　　　　　　　　　１１９ＫＩＪ　　　　　　　　　
　　　　　　５．２ＣａＣ（２］、、８ ＋２０ｍｇ／ｌの硝酸フェニル水銀（Ｃ６Ｈｓ）１６０
ＨｃａＨｓＨｇＮＯ３）Ｂ）　ＭＯＰＳ／ＮａＭＯＰＳ
　　Ｐｉ衝清液３７℃でｐＨ６，８４０ミリモル／ｌ ＮａＭＯＰＳ　　　　　　　　　　　２３．２５Ｍ０Ｐ
３　　　　　　　　　　　　２８．７６ＮａＣ（７７，
７５ ＫＣＺ　　　　　　　　　　　　　　　２．０２ＣａＣ
ｌ！２　　　　　　　　　　　３．０６＋２０ｍｇ／ｌ
．の硝酸フェニル水銀 表１０は本発明による溶液の挙動を証明するために用い
られる対照方法の一例である。

表１０ ａ）　ＩＩＥＰＥＳ／Ｎａ１ｌＥＰＥＳ　）ＪＥ　ｍ液
ｐＨメーター３７℃　ｐＨメーター３７℃開液絡　　　
　　透析膜（ヘモガス分析器＋３０６）ｐｌ＋　　　　
７．３９０　　　　　　　　　７．３８４炎分光分析　
　　　　　　　ｌ５Ｅ Ｎａ”　　　１４６　　　　　　　　　　　１４０Ｋ”
　　　　５．２　　　　　　　　　　　５．０原子吸光 Ｃａ”　　　１，０８　　　　　　　　　　１．００ｂ
）　ＭＯＰＳ／ＮａＭＯＰＳ）ＪＪ　衝液１１８メータ
ー３７℃　ｐｔｌメーター３７℃開液絡　　　　透析膜
（ヘモガス分析器＋３０６）ｐＨ６，８５０６，８４０ 炎分光分析　　　　　　　　１ｓＩＥ Ｎａ”　　　１０１　　　　　　　　　　　１．００Ｋ
”　　　　２．０２　　　　　　　　　　２００原子吸
光 Ｃａ”　　　３，０６　　　　　　　　　　３．００こ
れらの標準化系のために使用される塩は安定であり、市
販されており、また電極における測定を妨害しない。硝
酸フェニル水銀は、防腐剤として作用し、溶液を滅菌処
理する必要なく細菌やカビの生育を防止し、そしてｐＨ
、ナトリウム、カリウム及びカルシラ１１のための電極
を、所定濃度において干渉したり、損傷したりしない。

本発明による標準化溶液は、活性係数から生じる誤差及
び液絡電位差の存在によって生じる誤差を低減して通常
の血７α、血清または血漿の試料についての全タンパク
、コレステロール、トリグリセライド及び血漿水含量等
の結果を与える。これらは間接法（例えば炭分光分析法
または稀釈ＩＳＥ法）によりナトリウノ、及びカリウム
について測定され、また在来の市販器具によって行なわ
れる比較法によりｐＨ及びイオン化カルシウムについて
測定される。

従って本発明の効果は、イオン選択性電極を用いる化学
分析器で血液、血清または血漿中のｐＨ及び電解質の同
時測定を行なうのに適当であり、また前述のこれらのも
のの量の個別の測定のための器具と比較する標準化系処
方を提供するものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、全血、血漿または血清におけるｐＨならびにＮａ、
   Ｋ、Ｃｌ及びＣａイオンの同時または個別測定のための
   イオン選択性電極手段を有する臨床化字分析器に使用す
   るための標準化系であって：その系は二つの緩衝溶液か
   らなり、その第２の緩衝溶液が第１の緩衝溶液のｐＨな
   らびにＮａ、Ｋ、Ｃｌ及びＣａイオンの非ゼロ値と相異
   なるｐＨならびにＮａ、Ｋ、Ｃｌ及びＣａイオンの非ゼ
   ロ値を有し、第１及び第２の緩衝溶液のそれぞれがそれ
   ぞれ特定量のナトリウム、カリウム、塩素及びカルシウ
   ムイオンに加えて「グッド（Ｇｏｏｄ）」の緩衝剤を含
   んでいることを特徴とする上記標準化系。 ２、第１緩衝溶液がＨＥＰＥＳ／ＮａＨＥＰＥＳの緩衝
   剤対を４０〜６０ミリモル／ｌの濃度で含んでいる請求
   項１記載の標準化系。 ３、第２緩衝溶液がＭＯＰＳ／ＮａＭＯＰＳの緩衝剤対
   を４０〜６０ミリモル／ｌの濃度で含んでいる請求項１
   または２記載の標準化系。 ４、第１緩衝溶液が７．４５以上でなく７．３５以下で
   もないある特定の値のｐＨを有し、そして、第２緩衝溶
   液が６．９０以上でなく６．８０以下でもないある特定
   の値のｐＨを有する、請求項１〜３のいずれかに記載の
   標準化系。 ５、第１緩衝溶液が下記の元素をイオンとして実質的に
   下記の合計量で含む請求項１〜４のいずれかに記載の標
   準化系： Ｎａ１４６．５ミリモル／ｌ Ｋ５．２ミリモル／ｌ Ｃａ１．８ミリモル／ｌ Ｃｌ１２８ミリモル／ｌ。 ６、第２緩衝溶液が下記の元素をイオンとして実質的に
   下記の量で含む請求項１〜５のいずれかに記載の標準化
   系： Ｎａ１０１ミリモル／ｌ Ｋ２ミリモル／ｌ Ｃａ３ミリモル／ｌ Ｃｌ８３ミリモル／ｌ ７、第１及び第２緩衝溶液のそれぞれが硝酸フェニル水
   銀を５〜２０ｍｇ／ｌの濃度で含む請求項１〜６のいず
   れかに記載の標準化系。 ８、分析器のイオン選択性電極手段は、ＫＣｌ充填溶液
   を有する一つの銀／塩化銀またはカロメル標準参照電極
   に対しての五つのイオン特異性電極の電位によってｐＨ
   、Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋、Ｃａ＾＋＾＋及びＣｌ＾−の同時
   測定を行なう請求項１〜７のいずれかに記載の標準化系
   。 ９、少なくとも３ｍＭのＫＣｌ、ただし好ましくは３５
   ℃で飽和された状態の塩橋条件下のＩＥＳ（参照電極と
   してのＡｇ／ＡｇＣｌまたはカロメル）を介して全血、
   血漿または血清中のｐＨ、ナトリウム、カリウム、カル
   シウム及び塩素の同時または個別測定を可能とするよう
   に臨床化学分析器において使用するための二つの緩衝溶
   液からなる標準化系であつて： その設定第１標準は、実質的に下記の割合の４０〜６０
   ミリモル／ｌ、好ましくは約５０ミリモル／ｌのＨＥＰ
   ＥＳ／ＮａＨＥＰＥＳ緩衝剤対とこれに添加されたＮａ
   ＾＋、Ｋ＾＋、及びＣａ＾＋＾＋イオンとによって得ら
   れるｐＨ７．４（±０．０５）であることを特徴とする
   上記標準化系； ＮａＨＥＰＥＳ２７．５ミリモル／ｌ ＨＥＰＥＳ２２．３６ミリモル／ｌ ＮａＣｌ１１９ミリモル／ｌ ＫＣｌ５．２ミリモル／ｌ ＣａＣｌ＿２１．８ミリモル／ｌ。 １０、実質的に下記の割合の４０〜６０ミリモル／ｌ、
   好ましくは約５０ミリモル／ｌのＭＯＰＳ／ＮａＭＯＰ
   Ｓ緩衝剤対とこれに添加されたＮａ＾＋、Ｋ＾＋及びＣ
   ａ＾＋＾＋イオンとによって得られるｐＨ６．８５（±
   ０．０５）における第２の検量点を設定するために第１
   標準と濃度が異なる複数種のイオンを含む請求項９記載
   の標準化系： ＮａＭＯＰＳ２３．２５ミリモル／ｌ ＭＯＰＳ２８．７６ミリモル／ｌ ＮａＣｌ７７．７５ミリモル／ｌ ＫＣｌ２．０２ミリモル／ｌ ＣａＣｌ＿２３．０６ミリモル／ｌ １１、ナトリウム、カリウム、カルシウム及び塩素の各
   イオンは、未知試料に関して測定されるべき各イオンに
   ついての活性係数差から生じる誤差を補償しかつ低減さ
   せるような、また、上記の４０〜６０ミリモル／ｌ、好
   ましくは約５０ミリモル／ｌのＨＥＰＥＳ／ＮａＨＥＰ
   ＥＳ及びＭＯＰＳ／ＮａＭＯＰＳ濃度における緩衝剤組
   成について観察される液間電位の存在により生じる効果
   を最小化させるような、化学量論濃度で溶液中に存在す
   る、請求項１０記載の標準化系。 １２、ＩＳＥを介してのナトリウム、カリウム、カルシ
   ウム及び塩素についての第１点（ｐＨ７．４）の検量は
   、イオン濃度及び液絡によるすべての効果を補償するよ
   うな化学量論量で各イオンを添加することにより、それ
   ぞれ５ｍＭ（±０．５ｍＭ）、１ｍＭ（±０．２５ｍＭ
   ）、１２０ｍＭ（±５ｍＭ）及び１４０ｍＭ（±１０ｍ
   Ｍ）で得る請求項１１記載の標準化系。 １３、第２検量点を設定する溶液は、５０ミリモル／ｌ
   及びｐＨ６．８５（±０．５）でＭＯＰＳ／ＮａＭＯＰ
   Ｓ緩衝剤対を含み；またＨＥＰＥＳ／ＮａＨＥＰＥＳ溶
   液によつて与えられる標準において供給される起電力に
   関して、（参照電極としての、飽和ＫＣｌまたは３ＭＫ
   Ｃｌ中のＡｇＣｌまたはカロメルに対しての）各電極に
   ついてΔｍＶ≧３ｍＶ（これよりも決して低くない）を
   生じさせることによりナトリウム、カリウム、カルシウ
   ム及び塩素についての検量を可能とする；請求項１１記
   載の標準化系。 １４、緩衝剤特性を変更させず、そして好ましくは５〜
   ２０ｍｇ／ｌの範囲内の濃度の硝酸フェニル水銀からな
   る防腐及び安定化剤の溶液を含む請求項９記載の標準化
   系。