JPH0157109B2

JPH0157109B2 -

Info

Publication number: JPH0157109B2
Application number: JP56004506A
Authority: JP
Inventors: Tsunehiko Fukuda; Sakae Kobayashi; Masahiko Fujino
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1981-01-14
Filing date: 1981-01-14
Publication date: 1989-12-04
Also published as: JPS57118563A; EP0056274B1; EP0056274A1; CA1187485A; US4416820A; DE3260136D1

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はペプチド製造に有用なトリプトフアン
誘導体に関する。トリプトフアンを含有するペプチドを製造する
にあたつては数多くの好ましくない副反応が知ら
れている。例えば、Ｎ―アシルトリプトフアンは
トリフルオロ酢酸中でカルボリンを形成すること
がある。さらにアミノ基の保護基であるｔ―ブチ
ルオキシカルボニル基、ｐ―メトキシベンジルオ
キシカルボニル基などをトリフルオロ酢酸処理に
より、またＯ―ニトロフエニルスルフエニル基を
塩酸処理などにより除去する場合には、インドー
ル基がかなりの割合で、それぞれｔ―ブチル化，
ｐ―メトキシベンジル化およびＯ―ニトロフエニ
ルスルフエニル化される。またペプチドの縮合反
応をアジド法で行う場合、トリプトフアンを含む
ペプチドではインドール基がニトロソ化される場
合がある。アミノ基の保護基を酸処理にて除去す
る際の副反応を防ぐためには、エタンジチオール
やチオアニソールなどを添加することが行なわれ
ているが、いづれも完全な解決法にはなつていな
い。またこれらの副反応を防ぐための総合的な対
策としてインドール基に保護基として、ホルミル
基やベンジルオキシカルボニル基を導入する試み
がなされた。しかし前者はその除去に、特に塩基
処理を必要とすること、また後者では保護基導入
の操作が繁雑であるためか広く利用されるに至つ
ていない。以上のような点を考慮し、本発明者ら
は、インドール基への導入が簡単に行なえ、イン
ドール基に関する種々の副反応を防ぎ、かつ通常
のペプチド合成における中間段階においては充分
安定であり、しかも合成の最終段階で簡単に除去
できるスルホン型の保護基を種々検討して本発明
を完成したものである。すなわち、本発明は一般式〔式中、R₁およびR₅は水素、メチルまたはメ
トキシを、R₂およびR₄は水素またはメチルを、
R₃はメチルまたはメトキシをそれぞれあらわし、
R₆は水素またはα―アミノ基の保護基をあらわ
す〕。ただし、R₃がメチルのときR₁およびR₅は同
時に水素であり、R₃がメトキシのときR₁および
R₅は同時に水素、メチルまたはメトキシである
か、R₁がメトキシでR₅が水素である。で示され
るトリプトフアン誘導体およびその塩に関する。トリプトフアンを有するペプチドの製造にあた
り、トリプトフアンのインドール基を一般式〔式中、R₁，R₂，R₃，R₄およびR₅は前記と同
意義を有する〕で示される置換ベンゼンスルフオ
ニル基で保護して、ペプチド結合した後、該保護
基を酸で脱離せしめることからなるペプチドの製
造法、である。一般式（）置換ベンゼンスルフオニル基とし
ては、ｐ―トルエンスルフオニル基、２，４―ジ
メトキシベンゼンスルフオニル基、ｐ―メトキシ
ベンゼンスルフオニル基、２，４，６―トリメト
キシベンゼンスルフオニル基、４―メトキシ―
２，６―ジメチルベンゼンスルフオニル基が挙げ
られる。一般式（）のトリプトフアン誘導体は、一般
式（）〔式中、R₆はα―アミノ基の保護基を、R₇は
カルボキシル基の保護基を表わす〕で示される化
合物と一般式（）〔式中、Ｘはハロゲンを、R₁，R₂，R₃，R₄，
R₅は前記と同意義を表わす〕で示される化合物
を反応させることによつて得られる。一般式
（）の化合物はＬ体、Ｄ体あるいはラセミ体の
いずれであつてもよく、また一般式（）のＸと
しては塩素が特に好ましい。上記の反応は塩基の
存在下で行なわれ、この反応はたとえば約−10℃
〜＋50℃の範囲の適宜の温度で、溶媒（例、ジメ
チルホルムアミド、ジオキサン、テトラヒドロフ
ラン、ジクロルメタン）を使用して実施してもよ
い。一般式（）のアミノ基の保護基としては、
ｔ―ブトキシカルボニル、カルボベンゾキシ、ト
リチルなどが、またカルボキシル基の保護基とし
ては、ベンジル、低級アルキルエステルなどが挙
げられる。塩基としては、スルホンアミドを形成
する際に常套的に用いられる塩基（例、水素化ナ
トリウム、水酸化ナトリウム）を使用できる。ま
た場合によつては反応に相間移動触媒（例：ベン
ジルトリエチルアンモニウムクロリド、トリオク
チルメチルアンモニウムクロリド、セチルトリメ
チルアンモニウムクロリド）を加えると好結果が
得られる。こうして得られたアミノ基、カルボキシル基、
およびトリプトフアン基が保護された一般式
（）のインドール誘導体は、所望により、公知
の方法（例、接触還元、トリフルオロ酢酸処理）
で遊離のアミノ基に変えることもでき、また公知
の方法（例、接触還元、トリフルオロ酢酸処理、
アルカリ加水分解）で遊離カルボキシル基に変え
ることもできる。さらにこの遊離カルボキシル基
は公知の手段で活性化（例、酸無水物、アジド、
活性エステル）させることもできる。本発明の一般式（）で示されるトリプトフア
ン誘導体はトリプトフアンのインドール基が保護
されたものであつて、トリプトフアンを有するペ
プチドの製造に有利に利用しうる。なお、上記アミノ基、カルボキシル基の保護、
活性化する公知手段、ペプチド合成の常套手段に
ついては、例えばM.Bodansky及びM.A.Ondetti
著、ペプチド・シンセシス（Peptide
Synthesis），Inter science，New York，1966
年；F.M.Finn及びK.Hofmann著ザ・プロテイン
ズ（The Proteins）、第２巻、H.Neurath，R.L.
Hill編集、Academic Press Inc.New York，
1976年；泉屋信夫他著“ペプチド合成”丸善(株)
1975年などに記載されている。次に、ペプチド縮合後、一般式（）で示され
る置換ベンゼンスルフオニル基を酸によつて脱離
させる。脱離の方法としては、公知の酸処理方
法、たとえばフツ化水素やメタンスルフオン酸
で、またはチオアニソール等の存在下にトリフル
オロ酢酸で処理することにより除去できる。フツ
化水素を作用させる場合には、−20℃から室温
（最も普通には０℃）で１時間反応することによ
り、他の保護基と共に、インドール基に導入され
たこれらの置換ベンゼンスルフオニル基も除去さ
れ遊離のトリプトフアン含有ペプチドを与える。
この際、同時にエタンジチオールやチオアニソー
ル、アニソールなどを添加しておくことが好まし
い。またトリフルオロ酢酸で除去する場合には、
チオアニソールを添加（トリフルオロ酢酸の５〜
50％）し、室温から50℃で２時間程度反応させる
のが好ましい。本発明方法は、トリプトフアン基を有するいか
なるペプチドの製造にも適用できる。例えば生理
活性ペプチドとして有用なACTH、アリテンシ
ン、ガストリン、ボンベシン、セルレイン、カル
シトニン、ガストリン、グルカゴン、ソマトスタ
チンなどが挙げられる。本発明のペプチドの製造法において、トリプト
フアン基含有化合物のインドール基を置換ベンゼ
ンスルフオニル基で保護するには、前記の一般式
（）に置換ベンゼンスルフオニル基を導入する
方法と同様の方法が採用しえ、この方法は次のよ
うな種々の特長があり、有利である。 (1) 簡便な処理（フツ化水素など）で短時間に、
ほとんど定量的に該保護基を除去することがで
きる。 (2) 該保護基は特異的選択性を有し、ペプチド合
成の途中の工程で繁用される種々の条件、たと
えばアミノ基の保護基を除去する条件（例、ト
リフルオロ酢酸処理、接触還元）やカルボキシ
ル基の保護基を除去する条件（例、トリフルオ
ロ酢酸処理、接触還元、アルカリ加水分解）に
対し分解されずきわめて安定である。 (3) 液相法によるトリプトフアン含有ペプチドの
合成は勿論のこと固相法の場合にも同様に有利
に使用しうる。 (4) ペプチドを高純度、好収率で製造できる。次に、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明する。なお、本明細書において、アミノ酸、
ペプチド、保護基、活性基等に関し、IUPAC―
IUB Commission on Biological Nomenclaure
に基づく略号あるいは当該分野における慣用略号
で表示する場合がある。それらを例示する。 Boc：ｔ―ブトキシカルボニル Aoc：ｔ―アミルオキシカルボニルＺ：カルボベンゾキシ Tr：トリチル Tos：ｐ―トルエンスルホニル Tms：２，４，６―トリメトキシベンゼン
スルフオニル Dmb：２，４―ジメトキシベンゼンスルフ
オニル Mbs：ｐ―メトキシベンゼンスルフオニル HONb：Ｎ―ヒドロキシ―５―ノルボルネン
―２，３―ジカルボキシイミド ONb：HONbエステル OSu：Ｎ―ヒドロキシスクシンイミドエス
テル ONP：パラニトロフエニルエステル OBzl：ベンジルエステル DCC：ジシクロヘキシルカルボジイミド Lys：リジン Gly：グリシン Glu：グルタミン酸 Leu：ロイシン Trp：トリプトフアン Gln：グルタミン Asn：アスパラギン Met：メチオニン His：ヒスチジン Arg：アルギニン Val：バリン Ala：アラニン PGlu：ピログルタミン酸実施例において、アミノ酸に関し、光学異性体
がありうる場合、特に明記しないかぎりＬ体を示
すものとする。また、４―メトキシ―２，６―ジ
メチルベンゼンスルフオニルはMdsと略記するこ
とがある。実施例１ Tr―Trp―OBzl（2.15ｇ，4mmol）をＮ，Ｎ―
ジメチルホルムアミド（以下DMFと略す）10ml
に溶かし、窒素ガス気流中、水素化ナトリウム
（鉱物油中含量50％、以下同じ、240mg，5mmol）
を加える。室温にて20分間反応したのち、ｐ―ト
ルエンスルホニルクロリド（950mg，5mmol）を
加える。室温で15時間反応させた後、酢酸エチル
（50ml）を加え１時間撹拌する。水（30ml）を注
意して加え、有機層を分液してとり、これを５％
炭酸水素ナトリウム水、水で洗浄する。硫酸ナト
リウムで乾燥したのち、酢酸エチルを留去する。
残留物をシリカゲル（15ｇ）のカラムクロマトグ
ラフイー（溶媒：トルエン）にて精製して、Tr
―Trp（Tos）OBzlを得る。収量1.70ｇ（61.5％）。
融点101―103℃。〔α〕²⁴ _D＋47.6゜（ｃ＝0.5，DMF）
。元素分析 C₄₄H₃₉N₂O₄Sとして計算値：C76.54；H5.55；N4.06；S4.65 実測値：C76.51；H5.55；N3.51；S4.67 実施例２ Tr―Trp（Tos）OBzl（1.3ｇ，1.88mmol）を80
％酢酸（20ml）に懸濁し、室温で１時間撹拌す
る。原料は溶け、トリフエニルメタノールが析出
するのでこれを去する。母液にパラジウム黒を
加えて室温で４時間接触還元をおこなう。触媒を
去し酢酸を留去する。残留物を水から再結晶し
て、Ｈ―Trp（Tos）―OHを得る。収量585mg
（86.9％）。融点227℃（分解）〔α〕²¹ _D―29.2゜（ｃ＝0.5、酢酸）。元素分析 C₁₈H₁₈N₂O₄S.1/2H₂Oとして計算値：C58.83；H5.21；N7.63；S8.73 実測値：C58.88；H5.23；N7.23；S8.72 実施例３ Tr―Trp―OBzl（10.8ｇ，20mmol）、水素化ナ
トリウム（1.44ｇ，30mmol）およびｐ―メトキ
シベンゼンスルホニルクロリドから実施例１と同
様にしてTr―Trp（Mbs）―OBzlを得る。収量
14.2ｇ（100％）。融点94―96℃。〔α〕²¹ _D＋43.1゜
（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₄₄H₃₉N₂O₅Sとして計算値：C74.71；H5.56；N3.96；S4.58 実測値：C75.01；H5.35；N3.93；S4.50 実施例４ Tr―Trp（Mbs）―OBzl（14.2ｇ，20mmol）を
実施例２と同様に処理してＨ―Trp（MBS）―
OHを得る。収量6.64ｇ（88.7％）。融点218―220
℃。〔α〕²⁴ _D−34.8゜（ｃ＝0.5，酢酸）。元素分析 C₁₈H₁₈N₂O₅S・1/2H₂Oとして計算値：C56.38；H5.00；N7.31 実測値：C56.43；H4.92；N7.07 実施例５ Boc―Trp―OBzl（789mg，2mmol）をジクロ
ルメタン（10ml）にとかし、セシルトリメチルア
ンモニウムクロリド（6.4mg，0.02mmol）と砕い
た水酸化ナトリウム（200mg，5mmol）を加え
る。ここに２，４―ジメトキシベンゼンスルホニ
ルクロリド（710mg，3mmol）をジクロルメタン
（３ml）に溶かした溶液を滴下する。その後室温
で30分反応させる。冷却して１規定塩酸を加えて
PH２とする。水（10ml）を加え、振とうしたのち
ジクロルメタン層を分取、同層を水洗し硫酸ナト
リウムで乾燥する。溶媒を留去してBoc―Trp
（Dmb）―OBzlを得る。これをエタノール（10
ml）に溶かし、氷冷下１規定水酸化ナトリウム水
溶液（2.2ml）を加え、室温で１時間反応させる。
エタノールを留去したのち、残留水溶液に水（20
ml）とエーテル（20ml）を加えて抽出する。水層
を冷却し、ここに10％クエン酸水溶液を加えてPH
３とする。酢酸エチルで抽出、同層を水洗し、硫
酸ナトリウムで乾燥する。溶媒を留去し、残留物
に石油エーテルを加え、これを固化せしめる。
Boc―Trp（Dmb）―OHを得る。収量737mg（73
％）。融点100℃（分解）。〔α〕²² _D―9.43゜（ｃ＝0.
5，
DMF）。元素分析 C₂₄H₂₈N₂O₈Sとして計算値：C57.13；H5.59；N5.55；S6.36 実測値：C57.56；H5.86；N5.30；S6.28 実施例６ Boc―Trp―OBzl（5.92ｇ，15mmol）と２，
４，６―トリメトキシベンゼンスルホニルクロリ
ド（5.33ｇ，20mmol）を水酸化ナトリウム（1.5
ｇ，37.5mmol）とセチルトリメチルアンモニウ
ムクロリド（48mg，0.15mmol）の存在下にジク
ロルメタン（100ml）中で実施例５と同様に反応、
さらに水酸化ナトリウム水溶液で加水分解して、
Boc―Trp（Tms）OHを得る。収量7.32ｇ（91.2
％）。融点82―84℃。〔α〕²⁶ _D―15.4゜（ｃ＝0.5，
DMF）。元素分析 C₂₅H₃₀O₉N₂Sとして計算値：C56.17；H5.66；N5.24；S6.00 実測値：C56.37；H5.85；N4.91；S6.07 実施例７ Boc―Trp―OBzl（789mg，2mmol）と４―メ
トキシ―２，６―ジメチルベンゼンスルホニルク
ロリド（702mg，3mmol）を水酸化ナトリウム
（200mg）、セシルトリメチルアンモニウムクロリ
ド（6.4mg，0.02mmol）の存在下にジクロルメタ
ン中で実施例５と同様に反応、さらに水酸化ナト
リウム水溶液で加水分解して、Boc―Trp（Mds）
―OHを得る。収量580mg（57.8％）。融点78―80
℃。〔α〕²⁶ _D―21.2゜（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₂₅H₃₀O₇N₂Sとして計算値：C59.74；H6.02；N5.58；S6.38 実測値：C59.83；H6.17；N5.16；S6.08 試験例当該保護トリプトフアン（0.1mmol）をエタン
ジチオール（0.5ml）とアニソール（0.1ml）の存
在下フツ化水素（１ml）で０℃、１時間処理す
る。フツ化水素を留去し、残留物を酢酸（15ml）
に溶かす。酢酸を留去したのち残留物を水（20
ml）に溶かし不溶物は去する。母液をエーテル
で抽出。水層を50mlにし、この溶液をアミノ酸分
析に付し生成したトリプトフアンの量を定量す
る。結果を表１に示す。

【表】実施例８Ｈ―Trp（Mbs）―OH（375mg，1mmol）をト
リエチルアミン（0.12ml，1.5mmol）と共に水
（２ml）に溶かし、ここに２―ｔ―ブチルオキシ
カルボニル―４，６―ジメチル―２―メルカプト
ピリミジン（290mg，1.2mmol）をジオキサン
（２ml）に溶かし溶液を加える。室温で15時間撹
拌したのち、水（10ml）とエーテル（５ml）を加
え抽出する。エーテル層を少量の５％炭酸水素ナ
トリウム水溶液で抽出する。水層を合わせ、10％
クエン酸水溶液で酸性とする。酢酸エチル（20
ml）で抽出し、同層を水洗、硫酸ナトリウムで乾
燥する。溶媒を留去し、残留物に石油エーテルを
加えて結晶化させる。Boc―Trp（Mbs）―OHを
得る。収量452mg（95.4％）。融点83―84℃。〔α〕
²³ _D―28.1゜（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₂₃H₂₆N₂O₇Sとして計算値：C58.21；H5.50；N5.90；S6.76 実測値：C58.17；H5.85；N5.46；S6.81 参考例１ Boc―Trp（Mbs）―OH（712mg，1.5mmol）と
HoNb（297mg，1.65mmol）をアセトニトリル
（10ml）に溶かし０℃に冷却する。ここにDCC
（340mg，1.65mmol）を加え、０℃で１時間、室
温で15時間反応させる。析出物を去し、母液に
Ｈ―Gly―OBzlp―トルエンスルホン酸塩（557
mg，1.65mmol）とトリエチルアミン（0.23ml）
を加える。室温で５時間反応させ溶媒を留去す
る。残留物を酢酸エチル（20ml）に溶かし、５％
炭酸水素ナトリウム水溶液、１規定塩酸および水
で洗い硫酸ナトリウムで乾燥する。溶媒を留去
し、残留物を石油エーテルで固化し取してBoc
―Trp（Mbs）―Gly―OBzlを得る。収量850mg
（91.1％）。融点72〜74℃。〔α〕²⁴ _D―15.0゜（ｃ＝0
.5，
DMF）。元素分析 C₃₂H₃₅N₃O₈Sとして計算値：C61.82；H5.67；N6.76；S5.16 実測値：C62.34；H5.74；N6.81；S4.60 参考例２ Boc―Trp（Mbs）―Gly―OBzl（622mg，
1mmol）をトリフルオロ酢酸（６ml）に溶かし、
室温で20分間反応させる。トリフルオロ酢酸を留
去し、残留物にエーテルを加え、これを固化さ
せ、取乾燥する。このトリフルオロ酢酸塩をＺ
―Gly―ONp（330mg，1mmol）とＮ―エチルモル
ホリン（0.13ml）と共にアセトニトリル（20ml）
に溶かし、15時間室温で反応させる。溶媒を留去
し、残留物を酢酸エチル（30ml）に溶かし、１規
定アンモニア水溶液、１規定塩酸および水で洗浄
し硫酸ナトリウムで乾燥する。溶媒を留去し、残
留物にエーテルを加えて結晶化させる。酢酸エチ
ル―エーテルから再結晶して、Ｚ―Gly―Trp
（Mbs）―Gly―OBzlを得る。収量580mg（85.4
％）。融点130―131℃。〔α〕²⁴ _D―7.1゜（ｃ＝0.5，
DMF）。元素分析 C₃₇H₃₆N₄O₉S 計算値：C62.34；H5.09；N7.86；S4.50 実測値：C62.24；H5.02；N7.85；S4.78 参考例３Ｚ―Gly―Trp（Mbs）―Gly―OBzl（340mg，
0.5mmol）をエタンジオール（1.5ml）とアニソ
ール（1.5ml）存在下にフツ化水素（５ml））で０
℃，２時間処理する。フツ化水素を留去した後、
水（10ml）とエーテル（10ml）を加え不溶物を
去する。母液のエーテル層を除き、水層をさらに
一度エーテルで洗浄する。水層をアンバーライト
IR―410（酢酸型；１×10cm）に通し、通過液と
洗液を合わせて留去する。残渣をセハデツクスＧ
―25を担体とする分配カラムクロマトグラフイー
（カラムサイズ４×45cm、溶媒：ｎ―ブタノール
―酢酸―水＝４：１：５）で精製する。目的物の
分画を集め溶媒を留去する。残留物にエタノール
とエーテルを加えて結晶化させてＨ―Gly―Trp
―Gly―OHを得る。収量98mg（61.6％）。融点
245―246℃（分解）。〔α〕²¹ _D＋3.76゜（ｃ＝0.5、酢
酸）。元素分析 C₁₅H₁₈O₄N₄・1/2H₂O・1/2
CH₃COOHとして計算値：C53.77；H5.92；N15.68 実測値：C53.48；H5.88；N15.15 参考例４ Boc―Trp（Tms）―OH（504mg，1mmol），Ｈ
―Gly―OBzl・ｐ―トルエンスルホン酸塩（371
mg，1.1mmol），HONb（228mg，1.2mmol）をト
リエチルアミン（0.15ml）と共にアセトニトリル
（10ml）に溶かす。０℃でDCC（227mg，
1.1mmol）を加えて０℃で２時間、室温で15時間
反応させる。析出物を去した後、アセトニトリ
ルを留去する。残留物を酢酸エチル（20ml）に溶
かし、これを５％炭酸水素ナトリウム水溶液、１
規定塩酸、水で洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥
した後酢酸エチルを留去すると油状のBoc―Trp
（Tms）―Gly―OBzl（453mg，67％）が得られ
る。これを参考例２と同様にトリフルオロ酢酸で
処理する。ここで得られたトリフルオロ酢酸塩を
アセトニトリル（10ml）に溶かし、Ｚ―Lys（Ｚ）
―ONp（391mg，0.73mmol）とＮ―エチルモルホ
リン（0.1ml）を加える。室温で48時間反応させ
た後、溶媒を留去する。残留物を酢酸エチル（30
ml）に溶かし、これを１規定アンモニア水、１規
定塩酸および水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥
する。酢酸エチルを留去し、残留物を酢酸エチル
―エーテルから結晶化させ取して、Ｚ―Lys
（Ｚ）―Trp（TmS）―Gly―OBzlを得る。収量
303mg（48.4％）。融点98―100℃。〔α〕²⁶ _D―12.9゜
（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₅₁H₅₅N₅O₁₃Sとして計算値：C62.62；H5.67；N7.16；S3.28 実測値：C62.67；H5.60；N7.24；S3.19 参考例５Ｚ―Lys（Ｚ）―Trp（TmS）―Gly―OBzl（190
mg，0.2mmol）をエタンジオール（0.8ml）とア
ニソール（0.8ml）存在下にフツ化水素（５ml）
で０℃１時間処理する。参考例３と同様に後処理
およびセハデツクスＧ―25による精製を行なう。
目的物を含む分画を集め溶媒を留去する。残留物
を水から凍結乾燥してＨ―Lys―Trp―Gly―OH
を得る。収量80mg（88.9％）。〔α〕²² _D＋31.4゜（ｃ
＝
0.5，５％酢酸）。アミノ酸分析（４％メルカプト
エタノール含有６規定塩酸にて加水分解；以下同
じ）：Lys1.00；Trp0.84；Gly1.03。元素分析 C₁₉H₂₇N₅O₄・CH₃COOH・4H₂Oと
して計算値：C48.36；H7.54；N13.43 実測値：C47.98；H7.23；N13.26 参考例６ Boc―Trp（Mds）―OH（251mg，0.5mmol），
Ｈ―Gly―OBzl・ｐ―トルエンスルホン酸塩
（186mg，0.55mmol）およびHONb（114mg，
0.6mmol）をアセトニトリル（５ml）に溶かし０
℃でトリエチルアミン（0.08ml）とDCC（124mg，
0.6mmol）を加える。以後参考例４と同様に後処
理して油状のBoc―Trp（Mds）―Gly―OBzl
（300mg，96.9％）を得る。このものをと同様にト
リフルオロ酢酸で処理し、次いでＮ―エチルモル
ホリン（0.07ml）存在下にＺ―Lys（Ｚ）―ONp
（268mg，0.5mmol）と反応させ、後処理精製して
Ｚ―Lys（Ｚ）―Trp（Mds）―Gly―OBzlを得る。
収量132mg（32％）。融点120℃。〔α〕²⁶ _D―10.6゜（
ｃ
＝0.5，DMF）。元素分析 C₅₁H₅₅N₅O₁₁Sとして計算値：C64.74；H5.86；N7.40；S3.39 実測値：C64.77；H5.80；N7.60；S3.30 参考例７Ｚ―Lys（Ｚ）―Trp（Mds）―Gly―OBzl（76
mg，0.08mmol）をエタンジチオール（0.32ml）
とアニソール（0.32ml）存在下にフツ化水素（３
ml）で０℃１時間処理する。以後参考例５と同様
に後処理、精製を行ないＨ―Lys―Trp―Gly―
OHを得る。収量29mg（80.5％）。〔α〕²² _D＋28.9゜
（ｃ＝0.5，５％酢酸）。アミノ酸分析：Lys1.00；
Trp0.82；Gly1.01。元素分析 C₁₉H₂₇N₅O₄・CH₃COOH・4H₂Oと
して計算値：C48.36；H7.54；N13.43 実測値：C48.07；H7.33；N13.16 参考例８ Boc―Trp（Tms）―OH（2.94ｇ，5.5mmol）
とHONb（1.08ｇ，6mmol）をアセトニトリル
（10ml）に溶かし、０℃でDCC（1.24ｇ，6mmol）
を加える。０℃で１時間室温で15時間反応させて
活性エステルを調整する。他方Boc―Ala―Val
―Gly―OBzl（2.18ｇ，5mmol）をトリフルオロ
酢酸（15ml）に溶かし、室温で20分反応させる。
トリフルオロ酢酸を留去し、残留物にエーテルを
加えてこれを固化させ取、乾燥する。これをア
セトニトリル（20ml）に溶かし、トリエチルアミ
ン（0.7ml）で中和する。ここに先の不溶物を
去した活性エステルの溶液を加えて室温で15時間
反応させる。反応液に水（100ml）と酢酸エチル
（150ml）を加えて抽出する。有機層を５％炭酸水
素ナトリウム水溶液、１規定塩酸および水で順次
洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥する。溶媒を留去
し、残留物を酢酸エチル―エーテルから再結晶し
て、Boc―Trp（Tms）―Ala―Val―Gly―OBzl
を得る。収量3.50ｇ（82.2％）。融点115―117℃。
〔α〕²⁴ _D―6.74゜（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₄₂H₅₃N₅O₁₂Sとして計算値：C59.21；H6.27；N8.22；S3.76 実測値：C59.36；H6.45；N8.14；S3.70 参考例９ Boc―Trp（Tms）―Ala―Val―Gly―OBzl
（3.40ｇ，3.99mmol）を参考例８と同様にトリフ
ルオロ酢酸で処理する。得られたトリフルオロ酢
酸塩をDMF（10ml）に溶かし、トリエチルアミン
（0.66ml）とBoc―Gln―ONb（1.79ｇ，4.4mmol）
を加え、室温で15時間反応させる。参考例８と同
様に抽出精製し、メタノール―エーテルから２度
再結晶してBoc―Gln―Trp（Tms）―Ala―Val
―Gly―OBzlを得る。収量2.60ｇ（66.4％）。融点
210―211℃。〔α〕²⁴ _D―7.73゜（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₄₇H₆₁N₇O₁₄S・1/2H₂Oとして計算値：C57.07；H6.32；N9.91；S3.24 実測値：C57.08；H6.23；N9.98；S3.10 参考例 10 Boc―Gln―Trp（Tms）―Ala―Val―Gly―
OBzl（2.54ｇ，2.59mmol）を参考例８と同様にト
リフルオロ酢酸で処理する。得られたトリフルオ
ロ酢酸塩をDMF（10ml）に溶かし、トリエチルア
ミン（0.44ml）とBoc―Asn―ONp（1.10ｇ，
3.12mmol）を加え、室温で48時間反応させる。
反応液にエーテル（50ml）を加え、生じた沈殿を
取する。これを熱アセトニトリルで洗い、Boc
―Asn―Gln―Trp（Tms）―Ala―Val―Gly―
OBzlを得る。収量2.70ｇ（95.4％）。融点236℃
（分解）。〔α〕²⁴ _D―25.4゜（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₅₁H₆₇O₁₆N₉Sとして計算値：C55.98；H6.17；N11.52；S2.93 実測値：C55.86；H6.18；N11.55；S2.95 参考例 11 Boc―Asn―Gln―Trp（Tms）―Ala―Val―
Gly―OBzl（2.62ｇ，2.39mmol）をDMF（20ml）
に溶かし、パラジウム黒を触媒にして室温で４時
間接触還元を行なう。触媒を去し、DMFを留
去する。残留物に酢酸エチルを加えて結晶化させ
これを取する。Boc―Asn―Gln―Trp（Tms）
―Ala―Val―Gly―OHを得る。収量2.39ｇ
（99.6％）。融点220℃（分解）。〔α〕²⁴ _D―24.7゜（
ｃ
＝0.5，DMF）。元素分析 C₄₄H₆₁N₉O₁₆S・1/2H₂Oとして計算値：C52.16；H6.17；N12.44；S3.17 実測値：C52.24；H6.22；N12.54；S3.55 参考例 12 Boc―Asn―Gln―Trp（Tms）―Ala―Val―
Gly―OH（2.01ｇ，2mmol）とHONb（432mg，
2.4mmol）をDMF（15ml）に溶かし、０℃でDCC
（618mg，3mmol）を加える。０℃で２時間、室
温で15時間反応させて活性エステルを調整する。
他方Boc―His―Leu―Met―NH₂（1.10ｇ，
2.2mmol）を参考例８と同様にトリフルオロ酢酸
処理する。このトリフルオロ酢酸塩を、不溶物を
去した上記活性エステルの母液に溶かし、トリ
エチルアミン（0.56ml，4mmol）を加える。室温
で３日反応させる。反応液にエーテル（50ml）を
加え、沈殿を取する。これを85％アセトニトリ
ルから再沈殿する。Boc―Asn―Gln―Trp
（Tms）―Ala―Val―Gly―His―Leu―Met―
NH₂を得る。収量2.37ｇ（85.4％）。融点250℃
（分解）。〔α〕²⁴ _D―18.1゜（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₆₁H₈₉N₁₅O₁₈S₂・2H₂Oとして計算値：C51.57；H6.60；N14.79；S4.51 実測値：C51.54；H6.41；N14.27；S4.45 参考例 13 Boc―Asn―Gln―Trp（Tms）―Ala―Val―
Gly―His―Leu―Met―NH₂（2.24ｇ，
1.62mmol）を参考例８と同様にトリフルオロ酢
酸処理する。得られたトリフルオロ酢酸塩をBoc
―Gly―ONb（653mg，1.94mmol）と共にDMF
（15ml）に溶かし、ここにトリエチルアミン
（0.46ml，3.24mmol）を加える。室温で15時間反
応させた後、アセトニトリルを加えて生じた沈殿
を取する。これを85％アセトニトリルから再沈
殿して、Boc―Gly―Asn―Gln―Trp（Tms）―
Ala―Val―Gly―His―Leu―Met―NH₂を得る。
収量1.92ｇ（82.2％）。融点251℃（分解）。〔α〕²⁴ _D
―17.3゜（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₆₃H₉₂N₁₆O₁₉S₂・3H₂Oとして計算値：C50.58；H6.60；N14.98；S4.29 実測値：C50.61；H6.30；N14.67；S4.57 参考例 14 Boc―Gly―Asn―Gln―Trp（Tms）―Ala―
Val―Gly―His―Leu―Met―NH₂（1.90ｇ，
1.32mmol）を参考例８と同様にトリフルオロ酢
酸処理する。得られたトリフルオロ酢酸塩をBoc
―Leu―ONp（558mg，1.58mmol）と共にDMF
（10ml）に溶かし、トリエチルアミン（0.37ml，
264mmol）を加える。室温で15時間反応させた
後、参考例13と同様に後処理、精製して、Boc―
Leu―Gly―Asn―Gln―Trp（Tms）―Ala―Val
―Gly―His―Leu―Met―NH₂を得る。収量1.78
ｇ（86.7％）。融点254℃（分解）。〔α〕²⁴ _D―23.6゜
（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₆₉H₁₀₃N₁₆O₁₉S₂・3H₂Oとして計算値：C51.50；H6.87；N14.80；S3.99 実測値：C51.73；H6.64；N14.58；S4.08 参考例 15 Boc―Leu―Gly―Asn―Gln―Trp（Tms）―
Ala―Val―Gly―His―Leu―Met―NH₂（1.09
ｇ，0.7mmol）をトリフルオロ酢酸（10ml）で室
温20分間処理する。濃塩酸（0.3ml）を加えてか
らトリフルオロ酢酸を留去する。残留物にエーテ
ルを加え沈殿を取し、乾燥する。これをAoc―
Arg（Tos）―OH（372mg，0.84mmol），１―ヒド
ロキシベンゾトリアゾール（123mg，0.91mmol）
およびトリエチルアミン（0.2ml）と共にDMF
（５ml）に溶かす。０℃にて１―シクロヘキシル
―３―（２―モルホリノエチル）―カルボジイミ
ドメソ―ｐ―トルエンスルホネート（381mg，
0.84mmol）を加え、０℃で２時間、室温で48時
間反応させる。以後参考例13と同様に後処理精製
して、Aoc―Arg（Tos）―Leu―Gly―Asn―Gln
―Trp（Tms）―Ala―Val―Gly―His―Leu―
MetNH₂を得る。収量942mg（70.0％）。融点196
―199℃（分解）。〔α〕²⁴ _D―18.5゜（ｃ＝0.5，DMF）
。元素分析 C₈₃H₁₂₃N₂₁O₂₃S₃・H₂Oとして計算値：C52.53；H6.64；N15.50；S5.07 実測値：C52.37；H6.69；N15.09；S5.37 参考例 16 Aoc―Mrg（Tos）―Leu―Gly―Asn―Gln―
Trp（Tms）―Ala―Val―Gly―His―Leu―Met
―NH₂（920mg，0.49mmol）を参考例８と同様に
トリフルオロ酢酸処理する。得られたトリフルオ
ロ酢酸塩をBoc―Gln―ONb（245mg，0.6mmol）
およびトリエチルアミン（0.14ml）と共にDMF
（10ml）に溶かし室温で15時間反応させる。参考
例13と同様に後処理、精製してBoc―Gln―Arg
（Tos）―Leu―Gly―Asn―Gln―Trp（Tms）―
Ala―Val―Gly―His―Leu―Met―NH₂を得る。
収量670mg（68.6％）。融点245℃（分解）。〔α〕²¹ _D
―24.1゜（ｃ＝0.5，DMF）。元素分析 C₈₇H₁₂₉N₂₃O₂₅S₃・2H₂Oとして計算値：C51.49；H6.51；N15.88；S4.74 実測値：C51.45；H6.71；N15.84；S5.19 参考例 17 Boc―Gln―Arg（Tos）―Leu―Gly―Asn―
Gln―Trp（Tms）―Ala―Val―Gly―His―Leu
―Met―NH₂（650mg，0.326mmol）を参考例８と
同様にトリフルオロ酢酸処理する。得られたトリ
フルオロ酢酸塩をＺ―PGlu―ONb（139mg，
0.42mmol）およびＮ―エチルモルホリン（0.083
ml）と共にDMF（10ml）に溶かし室温で15時間反
応させる。以後参考例13と同様に後処理精製して
Ｚ―pGlu―Gln―Arg（Tos）―Leu―Gly―Asn
―Gln―Trp（Tms）―Ala―Val―Gly―His―
Leu―Met―NH₂を得る。収量540mg（77.5％）。
融点247℃（分解）。〔α〕²⁴ _D―27.0゜（ｃ＝0.5，
DMF）。元素分析 C₉₅H₁₃₂N₂₄O₂₇S₃・4H₂Oとして計算値：C51.61；H6.38；N15.20；S4.35 実測値：C51.40；H6.14；N15.26；S5.00 参考例 18 Ｚ―pGlu―Gln―Arg（Tos）―Leu―Gly―
Asn―Gln―Trp（Tms）―Ala―Val―Gly―His
―Leu―Met―NH₂（150mg，0.07mmol）をアニ
ソール（0.21ml）とエタンジチオール（0.21ml）
存在下にフツ化水素（３ml）で０℃１時間処理す
る。フツ化水素を留去し、残留物に水（20ml）と
エーテル（20ml）を加えて不溶物を去する。母
液の水層を取りさらに１度エーテルで洗浄する。
水層をアンバーライトIR―410（酢酸型）のカラ
ム（１×10cm）に通じ、洗液も合わせて凍結乾燥
する。得られた粗製物をセハデツクスＧ―25を
担体とする分配カラムクロマトグラフイーで精製
する（カラムサイズ：1.5×45cm；溶媒，ｎ―ブ
タノール：酢酸：水＝４：１：５）。純粋な目的
物を含む分画を集め溶媒を留去する。残留物を水
から凍結乾燥してpGlu―Gln―Arg―Leu―Gly
―Asn―Gln―Trp―Ala―Val―Gly―His―Leu
―Met―NH₂（ボンベシン）を得る。収量72mg
（63.5％）。〔α〕²² _D―53.5゜（ｃ＝0.5，５％酢酸）
。ア
ミノ酸分析：His0.96；Arg1.01；Trp0.92；
Asp1.06；Glu3.23；Gly1.99；Ala1.00；
Val0.93；Met0.92；Leu1.96。元素分析 C₇₁H₁₁₀N₂₄O₁₈S・2CH₃CooH・3H₂O
として計算値：C47.53；H6.97；N18.74；S1.79 実測値：C47.65；H7.03；N18.46；S2.21

Claims

【特許請求の範囲】１一般式〔式中、R₁およびR₅は水素、メチルまたはメ
トキシを、R₂およびR₄は水素を、R₃はメチルま
たはメトキシをそれぞれあらわし、R₆は水素ま
たはα―アミノ基の保護基をあらわす。ただし、
R₃がメチルのときR₁およびR₅は同時に水素であ
り、R₃がメトキシのときR₁およびR₅は同時に水
素、メチルまたはメトキシであるか、R₁がメト
キシでR₅が水素である。〕で示されるトリプトフ
アン誘導体およびその塩。