JPH01307660A - 高分解能非腐食性アミノ酸分析緩衝液 - Google Patents
高分解能非腐食性アミノ酸分析緩衝液Info
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/96—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation using ion-exchange
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明はイオン交換アミノ酸分析システム、特にステン
レス鋼成分を組み入れるシステムとともに使用する水性
緩衝剤溶液の配合処方に関する。
レス鋼成分を組み入れるシステムとともに使用する水性
緩衝剤溶液の配合処方に関する。
（従来の技術）
イオン交換クロマトグラフィーにより分離を行うよう設
計されたアミノ酸分析システムを例に取れば、従来の緩
衝剤溶液の腐食性組成に対抗するためカーペンタ−（Ｃ
ａｒｐｅｎｔｅｒ） ２０及びインコネル（Ｉｎｃｏｎ
ｅｌ）のような特定の非常に高価なステンレス素材を使
用するのが通例である。専用イオン交換アミノ酸分析装
置は通常非常に精巧で、高価なものであり、したがって
広（は使用されていない。これに反し、ＨＰＬＣ（高速
液体クロマトグラフィー）装置は比較的、高価でな（、
広く使用されており、いわゆる逆相法によってアミノ酸
分析にもまた用いられている。一般に、逆相法は他の全
ての方法の標準として確立されているイオン交換法はど
満足すべきものではない。ポンプ、試料インゼクター、
モーター駆動バルブ、クロマトグラフィーカラムなどＨ
ＰＬＣシステムの構成成分はイオン交換クロマトグラフ
ィー装置のそれらと同じであるから、イオン交換カラム
をＨＰＬＣ装置に組み込んで古典的なムーア・スティン
（Ｍｏｏｒｅ ＆ ５ｔｅｉｎ）アミノ酸分析に使用し
ようとする多（の試みがなされてきた。従来のイオン交
換クロマトグラフィー緩衝剤がＨＰＬＣシステムのステ
ンレス鋼成分を急速に攻撃し、該成分の寿命を短くする
ばかりでなく、金属イオンを生じさせるので、イオン交
換樹脂の性能を急速に損なうことは早急に発見された。
計されたアミノ酸分析システムを例に取れば、従来の緩
衝剤溶液の腐食性組成に対抗するためカーペンタ−（Ｃ
ａｒｐｅｎｔｅｒ） ２０及びインコネル（Ｉｎｃｏｎ
ｅｌ）のような特定の非常に高価なステンレス素材を使
用するのが通例である。専用イオン交換アミノ酸分析装
置は通常非常に精巧で、高価なものであり、したがって
広（は使用されていない。これに反し、ＨＰＬＣ（高速
液体クロマトグラフィー）装置は比較的、高価でな（、
広く使用されており、いわゆる逆相法によってアミノ酸
分析にもまた用いられている。一般に、逆相法は他の全
ての方法の標準として確立されているイオン交換法はど
満足すべきものではない。ポンプ、試料インゼクター、
モーター駆動バルブ、クロマトグラフィーカラムなどＨ
ＰＬＣシステムの構成成分はイオン交換クロマトグラフ
ィー装置のそれらと同じであるから、イオン交換カラム
をＨＰＬＣ装置に組み込んで古典的なムーア・スティン
（Ｍｏｏｒｅ ＆ ５ｔｅｉｎ）アミノ酸分析に使用し
ようとする多（の試みがなされてきた。従来のイオン交
換クロマトグラフィー緩衝剤がＨＰＬＣシステムのステ
ンレス鋼成分を急速に攻撃し、該成分の寿命を短くする
ばかりでなく、金属イオンを生じさせるので、イオン交
換樹脂の性能を急速に損なうことは早急に発見された。
緩衝剤溶液からステンレス鋼を腐食することが知られて
いる塩素イオンのような組成分を除去することによって
この問題を克服するための多数の試みが文献に記載され
ており、その一つの例は製品として入手することができ
る。腐食は排除されたけれども、これら緩衝剤の総合的
なりロマトグラフィー性能は不幸にして専用イオン交換
アミノ酸分析システムに使用される塩化物含有緩衝剤の
それと同じではな（、それ故、専用イオン交換アミノ酸
分析器のそれと同等の性能をというユーザーの要求に適
合しない。
いる塩素イオンのような組成分を除去することによって
この問題を克服するための多数の試みが文献に記載され
ており、その一つの例は製品として入手することができ
る。腐食は排除されたけれども、これら緩衝剤の総合的
なりロマトグラフィー性能は不幸にして専用イオン交換
アミノ酸分析システムに使用される塩化物含有緩衝剤の
それと同じではな（、それ故、専用イオン交換アミノ酸
分析器のそれと同等の性能をというユーザーの要求に適
合しない。
（発明が解決すべき課題）
したがって、本発明の目的は従来のＨＰＬＣクロマトグ
ラフィーシステムに用いられるステンレス鋼に対し非腐
食性であるイオン交換アミノ酸分析システム用緩衝剤溶
液を提供することである。
ラフィーシステムに用いられるステンレス鋼に対し非腐
食性であるイオン交換アミノ酸分析システム用緩衝剤溶
液を提供することである。
さらに本発明の目的は普通のステンレス鋼成分を組み入
れたＨＰＬＣシステムに使用した時に専用イオン交換ク
ロマトグラフィー装置における従来の腐食性緩衝剤溶液
によって達成されるのと同等のイオン交換クロマトグラ
フィーによるアミノ酸分離を達成することができるよう
な緩衝剤溶液を提供することである。
れたＨＰＬＣシステムに使用した時に専用イオン交換ク
ロマトグラフィー装置における従来の腐食性緩衝剤溶液
によって達成されるのと同等のイオン交換クロマトグラ
フィーによるアミノ酸分離を達成することができるよう
な緩衝剤溶液を提供することである。
さらにもう一つの本発明の目的は単純なアミノ酸混合物
、複雑なアミノ酸混合物の両方に対し妥協のない分析定
量及び分離を行うことができる緩衝剤溶液を提供するこ
とである。
、複雑なアミノ酸混合物の両方に対し妥協のない分析定
量及び分離を行うことができる緩衝剤溶液を提供するこ
とである。
その他の目的及び利点は本発明の詳細な説明が進むにし
たがって明白になるであろう。
たがって明白になるであろう。
（課題を解決するための手段）
発明の上述及びその他の目的及び利点は本質的に蒸留水
または脱イオン水からなり、 （ａ）０．５から５重量％のクエン酸ナトリウム（ｂ）
０から６重量％の硝酸ナトリウム（ｃ）０．０１から４
容量％の濃硝酸 （ｄ）Ｏから０．１重量％の安息香酸 （ｅ）０から０．００３重量％のエチル水銀チオサリチ
ル酸 を含有する１種以上の緩衝剤溶液（但し該緩衝剤溶液は
ナトリウムイオン濃度が０．１２Ｎから１．２Ｎの範囲
内にあるように配合される）により達成された。緩衝剤
溶液はその適用に応じてｐＨが１．０から６．９の範囲
内にあるように配合される。
または脱イオン水からなり、 （ａ）０．５から５重量％のクエン酸ナトリウム（ｂ）
０から６重量％の硝酸ナトリウム（ｃ）０．０１から４
容量％の濃硝酸 （ｄ）Ｏから０．１重量％の安息香酸 （ｅ）０から０．００３重量％のエチル水銀チオサリチ
ル酸 を含有する１種以上の緩衝剤溶液（但し該緩衝剤溶液は
ナトリウムイオン濃度が０．１２Ｎから１．２Ｎの範囲
内にあるように配合される）により達成された。緩衝剤
溶液はその適用に応じてｐＨが１．０から６．９の範囲
内にあるように配合される。
有用なイオン交換緩衝剤溶液は全体的又は部分的にナト
リウムの代りに（分子量の違いに応じて調整した量で）
リチウム、カリウム、ルビジウム又はセシウムを用いて
調製できることは当業者にとって理解されるであろう。
リウムの代りに（分子量の違いに応じて調整した量で）
リチウム、カリウム、ルビジウム又はセシウムを用いて
調製できることは当業者にとって理解されるであろう。
よ（知られていないが、同様にクエン酸塩の全部又は一
部の代りに他の三塩基酸塩を使用することができる。安
息香酸及びエチル水銀チオサリチル酸はかび成長抑制剤
として用いられるが、それにはフェノール、トルエン及
びオクタン酸など多（の公知の代替え品がある。
部の代りに他の三塩基酸塩を使用することができる。安
息香酸及びエチル水銀チオサリチル酸はかび成長抑制剤
として用いられるが、それにはフェノール、トルエン及
びオクタン酸など多（の公知の代替え品がある。
イオン交換クロマトグラフィーによってアミノ酸の複合
混合物の分離を行うことを含めた多（の例において、通
常単一の分析運転操作中にｐＨ値の異なった２種以上の
緩衝剤溶液を相互に切り替えながら使用する。そのよう
な緩衝剤溶液の上記に開示したガイドラインに従った組
成による好ましい組み合わせの一つを次の第１表に示す
。
混合物の分離を行うことを含めた多（の例において、通
常単一の分析運転操作中にｐＨ値の異なった２種以上の
緩衝剤溶液を相互に切り替えながら使用する。そのよう
な緩衝剤溶液の上記に開示したガイドラインに従った組
成による好ましい組み合わせの一つを次の第１表に示す
。
第 １ 表
塩化物無含有加水分解物緩衝液
（実施例）
次に本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明する。
実施例１
第１表に示した塩化物無含有緩衝液を用いて行った複合
混合物の分離は伝統的な塩化物含有緩衝液を用いた場合
と非常によく対比し得るものであった。密接溶出ダブレ
ット（ｄｏｕｂｌｅｔｓ）の分解能（谷間対ピークの比
）は７５％程度であった。これらのダブレット（典型的
にはトレオニン／セリン）は従来技術の塩化物無含有緩
衝液を用いると一般に５０％未満の分解能を示す。比較
のため塩化物含有緩衝液システム及び塩化物無含有緩衝
液システムにより同一サンプルから分離されたアミノ酸
の量を第２表に示す。
混合物の分離は伝統的な塩化物含有緩衝液を用いた場合
と非常によく対比し得るものであった。密接溶出ダブレ
ット（ｄｏｕｂｌｅｔｓ）の分解能（谷間対ピークの比
）は７５％程度であった。これらのダブレット（典型的
にはトレオニン／セリン）は従来技術の塩化物無含有緩
衝液を用いると一般に５０％未満の分解能を示す。比較
のため塩化物含有緩衝液システム及び塩化物無含有緩衝
液システムにより同一サンプルから分離されたアミノ酸
の量を第２表に示す。
第２表
塩化物含有、塩化物無含有緩衝液の
谷間対ピーク比（分解能％）
さらにこれらの塩化物無含有緩衝液を用い６個月以上に
わたり７００種以上の試料分析をイオン交換樹脂の支持
体がステンレス鋼填結ディスクである自動アミノ酸分析
器を用いて行った。この実験を通じてカラム分解能に顕
著な低下はな（、イオン交換樹脂が分解しているという
兆候は見られなかった。従来の塩化物含有緩衝剤を用い
ると、ディスクは溶解し、そのため機械的な破損を生じ
る前に金属イオンがイオン交換樹脂の性能を損なってし
まうであろう。
わたり７００種以上の試料分析をイオン交換樹脂の支持
体がステンレス鋼填結ディスクである自動アミノ酸分析
器を用いて行った。この実験を通じてカラム分解能に顕
著な低下はな（、イオン交換樹脂が分解しているという
兆候は見られなかった。従来の塩化物含有緩衝剤を用い
ると、ディスクは溶解し、そのため機械的な破損を生じ
る前に金属イオンがイオン交換樹脂の性能を損なってし
まうであろう。
実施例２
実施例１と同じ緩衝剤の組合わせを用い、１７種のアミ
ノ酸及びＮＨ，の混合試料１種について一連の実験を行
い、保持時間及び測定濃度再現性を測定した。保持時間
の変動係数は０．０５から０．４３％の範囲にあり、平
均値は０．２３％であった。濃度の変動係数（第３表）
は０．４４から１．７０％の範囲にあり、平均値は０．
８３％であった。
ノ酸及びＮＨ，の混合試料１種について一連の実験を行
い、保持時間及び測定濃度再現性を測定した。保持時間
の変動係数は０．０５から０．４３％の範囲にあり、平
均値は０．２３％であった。濃度の変動係数（第３表）
は０．４４から１．７０％の範囲にあり、平均値は０．
８３％であった。
これらの結果はこれら緩衝剤溶液の分離性能は従来の塩
化物含有緩衝剤のそれと全く同じであることを示してい
る。
化物含有緩衝剤のそれと全く同じであることを示してい
る。
実施例３
生理学的液体中の遊離アミノ酸をイオン交換クロマトグ
ラフィーによって分離する場合にキー分離をナトリウム
系緩衝剤でなくリチウム系緩衝剤溶液を用いるだけで行
うことができる。この種のリチウム系緩衝剤溶液の好ま
しい組成を以下の第４表に示す。
ラフィーによって分離する場合にキー分離をナトリウム
系緩衝剤でなくリチウム系緩衝剤溶液を用いるだけで行
うことができる。この種のリチウム系緩衝剤溶液の好ま
しい組成を以下の第４表に示す。
第 ４ 表 塩化物無含有生理学的緩衝液この組成の緩
衝剤溶液を用いて行った分離及びピーク分解能は生理学
的液体について従来法のリチウム系塩化物含有緩衝剤溶
液を用いて得られたのと同等に満足すべきものである。
衝剤溶液を用いて行った分離及びピーク分解能は生理学
的液体について従来法のリチウム系塩化物含有緩衝剤溶
液を用いて得られたのと同等に満足すべきものである。
ここに述べた例及び態様は説明のみを目的としたもので
あり、それに鑑みた種々の変更及び変化は当業者に想定
されるであろうし、本願発明の精神及び範囲内及び前記
の請求の範囲の範囲内に含まれるものと理解すべきであ
る。
あり、それに鑑みた種々の変更及び変化は当業者に想定
されるであろうし、本願発明の精神及び範囲内及び前記
の請求の範囲の範囲内に含まれるものと理解すべきであ
る。
代叩人 弁理ト 松水宜？？
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１）本質的にハロゲンを含有せず、三塩基有機酸のア
ルカリ金属塩、アルカリ金属硝酸塩、硝酸及び防黴剤を
含有したイオン交換法による混合アミノ酸試料成分分離
用改良水性緩衝剤溶液。 （２）アルカリ金属がナトリウム、リチウム及びカリウ
ムからなる群から選ばれる請求項１記載の緩衝剤溶液。 （３）三塩基有機酸がクエン酸である請求項２記載の緩
衝剤溶液。 （４）クエン酸ナトリウムが０．５から５重量％の間に
あり、硝酸ナトリウムが０から６重量％の間にあり、濃
硝酸が０．０１から４容量％の間にあり、安息香酸が０
から０．１重量％の間にあり、エチル水銀チオサリチル
酸が０から０．００３重量％の間にある請求項３記載の
緩衝剤溶液。 （５）ｐＨが３．２８であり、クエン酸ナトリウム濃度
が１．７２１重量％であり、硝酸濃度が１．６容量％で
あり、安息香酸濃度が ０．０２５重量％である請求項４記載の緩衝剤溶液。 （６）ｐＨが６．３９であり、クエン酸ナトリウム濃度
が１．７２１重量％であり、硝酸ナトリウム濃度が４．
６８重量％であり、硝酸濃度が０．００５容量％であり
、エチル水銀チオサリチル酸濃度が０．００１重量％で
ある請求項４記載の緩衝剤溶液。 （７）ｐＨが３．９８であり、クエン酸リチウム濃度が
１．３４８重量％であり、硝酸リチウム濃度が２重量％
であり、硝酸濃度が１．５容量％であり、安息香酸濃度
が０．０２５重量％である請求項２記載の緩衝剤溶液。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/187,702 US4959176A (en) | 1988-04-29 | 1988-04-29 | High resolution non corrosive amino acid analysis buffer solutions |
| US187.702 | 1988-04-29 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01307660A true JPH01307660A (ja) | 1989-12-12 |
Family
ID=22690106
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1106102A Pending JPH01307660A (ja) | 1988-04-29 | 1989-04-27 | 高分解能非腐食性アミノ酸分析緩衝液 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4959176A (ja) |
| JP (1) | JPH01307660A (ja) |
| DE (1) | DE3910856A1 (ja) |
| SE (1) | SE8901563L (ja) |
Families Citing this family (8)
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|---|---|---|---|---|
| US5866429A (en) * | 1991-04-03 | 1999-02-02 | Bloch; Will | Precision and accuracy of anion-exchange separation of nucleic acids |
| CA2063855C (en) * | 1991-04-03 | 1997-08-26 | Will Bloch | Precision and accuracy of anion-exchange separation of nucleic acids |
| US6500360B2 (en) * | 1999-06-18 | 2002-12-31 | Bernard Bendiner | Sorbic acid and/or its derivatives, such as potassium sorbate, as a preventative for rust, corrosion and scale on metal surfaces |
| US6969587B2 (en) | 2000-04-04 | 2005-11-29 | Taylor Paul D | Detection of nucleic acid heteroduplex molecules by anion-exchange chromatography |
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| US20070111964A1 (en) | 2005-08-17 | 2007-05-17 | Fleming And Company, Pharmaceuticals | Vitamin B12 nasal spray and method of use |
| KR20140101010A (ko) * | 2006-06-23 | 2014-08-18 | 파 파마슈티컬, 인크. | 비내 전달용 시아노코발라민 저점도 수성 제형 |
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| JPS6182167A (ja) * | 1984-09-28 | 1986-04-25 | Shimadzu Corp | アミノ酸分析方法 |
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| US4401624A (en) * | 1982-03-08 | 1983-08-30 | Atwater Charles B | Buffered solutions which have a reduced corrosive nature |
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| US4743393A (en) * | 1986-06-06 | 1988-05-10 | Basf Corporation | Antifreeze concentrates and coolants containing heteropolymolybdate compounds |
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1988
- 1988-04-29 US US07/187,702 patent/US4959176A/en not_active Expired - Fee Related
-
1989
- 1989-04-04 DE DE3910856A patent/DE3910856A1/de active Granted
- 1989-04-27 JP JP1106102A patent/JPH01307660A/ja active Pending
- 1989-04-28 SE SE8901563A patent/SE8901563L/ not_active Application Discontinuation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS567180A (en) * | 1979-06-28 | 1981-01-24 | Fujitsu Ltd | Character recognizing method for optical character reader |
| JPS6182167A (ja) * | 1984-09-28 | 1986-04-25 | Shimadzu Corp | アミノ酸分析方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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| US4959176A (en) | 1990-09-25 |
| SE8901563D0 (sv) | 1989-04-28 |
| DE3910856A1 (de) | 1989-11-09 |
| SE8901563L (sv) | 1989-10-30 |
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