JPH0128A

JPH0128A - 馬用感染予防治療剤

Info

Publication number: JPH0128A
Application number: JP62-156122A
Authority: JP
Inventors: 音成　信雄; 久谷川; 船津　昭信; 高明大橋; 種子野　啓; 江藤　正信
Original assignee: 財団法人　化学及血清療法研究所
Filing date: 1987-06-22
Publication date: 1989-01-05
Anticipated expiration: 2012-11-05

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】、−−の１；本発明は、高度に精製された馬免疫グロブリン（ＩｇＧ
）を含有し、馬の感染症に対して予防または治療効果の
ある馬用感染予防治療剤に関する。

′ｔ　・の　′　　　の２馬では、母馬の免疫抗体が胎盤を通じて子馬に移行する
ことがなく、出生後初乳中に含まれる抗体を経口的に摂
取して母子免疫が成立する。この母子免疫は生後約２４
時間以内に成立するが、子馬はこの間に抗体を十分に含
む初乳を充分量摂取することが必要である。もし、母馬
の初乳中に抗体が少ないか、欠如した場合、あるいは、
母馬の事故（例えば難産、乳房炎、無孔症など）によフ
て哺乳が充分てなかった場合、または初乳を子馬が摂取
できなかった場合、子馬はいろいろな疾病の感染にさら
されることになる。

ＭｃＧｕ　ｉ　ｎｅら　（Ｊ、　　Ａｍ、　Ｖｅｔ、　
　Ｍｅｄ、　　Ａｓ５ｏｃ、、　　１７０：１３０２〜
＋３０４　　（１９７７））は、哺乳後の子馬の血中Ｉ
ｇＧＪ度が、４ｇ／Ｌ以下であることを初乳免疫グロブ
リン波動性転嫁欠損の基準とし、２〜４ｇ／Ｌのものを
一部欠損としている。被動転嫁穴ｔｌの子馬はサラブレ
ット種においては２０％以上存在し、また、２“子馬病
″の発生及び斃死と密接な相関間係をもつ血中ＩｇＧＩ
ＩＡ度２ｇ／Ｌ以下の子馬は約１０％前後も存在すると
いう。重症複合免疫欠損症の子馬のうち、初乳免疫グロ
ブリン被動性転嫁欠損のものは、生後４〜８日に発症し
、２１〜２５日に斃死するが、正常な被動性転嫁をした
ものは、平均２３日令に発症し５９日令まで生存してい
る。

現状では、この免疫抗体移行不良に基づく感染の予防や
治療法として、初乳バンクあるいは、血清バンクなどが
考えられているが、血清型の異型輸注の可能性があり、
母馬からのものに限定されているため、その適応範囲は
限定されている。

、　”　　　　ｔ　　　ｔ・　　の−１、［のこのよう
な状況下において、本発明者らは１．馬血液そのものに
由来する免疫グロブリン（ＩｇＧ）を馬に投与すること
ができれば上述したような問題が解決できるものと考え
、研究を重ねた結果、馬血液から免疫グロブリンＩｇＧ
を高純度に精製することにより本発明を完成した。

かくして、本発明に従えば、馬血液由来の免疫グ［Ｉプ
リンＩｇＧを含有する経口または静脈投与可能な馬用感
染症予防治療剤が提供される。このように馬のＩｇＧを
高純度に精製した製剤は、従来より存在しなかったもの
である。本発明おいて、原料として、一般馬あるいは免
疫馬から無菌的に採集された血清又は血漿を用いること
がてき、この原料は、単独の馬からのものでも、あるい
は複数の馬の血清あるいは血漿をプールしたものでもよ
い。

本発明に従えば、馬血清あるいは馬血漿から、次の様に
して免疫グロブリンを高純度にＭ製する。

原料となる馬血清あるいは馬血漿を、適当に希釈し蛋白
濃度を調整した後、冷却しつつアルコールを加え、沈澱
分画を繰り返しながらフィブリノーゲン、アルブミン画
分、α−グロブリン画分ならびにβ−グロブリン画分を
除去する。沈澱画分分画工程中で使用したアルコールは
、精製した免疫グロブリン画分より除くが、このとき、
免疫グロブリンの変性を防止するため、透析などの温和
な方法が好ましい。精製された免疫グロブリン画分を、
生理食塩水で所望の蛋白濃度、好ましくは４〜１５％に
なるように溶かす。当該免疫グロブリン溶液は、人体製
剤のごとく、安定剤、例えばアミノ酸類、糖類あるいは
タンパク成分を単独又は混合して添加し、液状製剤ある
いは凍結乾燥製剤とすることができる。

さらに、本発明の馬用感染予防治療剤を調製するに当た
っては、原料（馬血液、馬血漿）、精製後の免疫グロブ
リン含有液または凍結乾燥状態の免疫グロブリンを加熱
処理することが好ましい。

このような加熱処理により、速入する可能性のあるウィ
ルスを不活化することができる。加熱処理の条件は、液
状で行う場合、５０〜６０℃で０．５〜ｌＯ時間、好ま
しくは５６〜５８℃で１〜３時間、また、乾燥状態で行
う場合には６０〜７０℃で７０〜１２０時閏、好ましく
は６５〜６８℃で９０〜！００時閏である。

本発明により得られる免疫グロブリンＩｇＧの純度は９
５重量％以上であり、また、該ＩｇＧは単量体として９
５ｍｍ％以上含有されている。このような製剤は、発熱
試験等の種々の基準にも合格するものであった。

本発明による製剤の投与方法は特に限定されない。子馬
の腸管での免疫グロブリンの吸収能力が持続されている
生後２４時間以内なら経口でもよく、それ以降は静脈注
射による投与が好ましい。このようにして、本発明に従
えば、馬、特に抗体のレベルが正常でない子馬に本発明
の製剤をｔ受与することにより、種々の疾病の感染を予
防することができ、あるいは、そのような感染に起因す
る症状を軽減し治癒することができる。

以下に実施例を示すが、本発明はこれに限定されるもの
ではない。

実ＪＬ医−１抗凝固剤存在下に、無菌的に採集した馬面液４０しを遠
心分離し、約２ＯＬの血漿を得た。これを精製水で３イ
ａに希釈した後、イオン強度０．０３、ｐＨ７，０に調
整し、エタノールを終濃度８％になるように加え、フィ
ブリノーゲン画分の除去を行った。遠心分離後の上清に
、−５〜−６℃でエタノールを終濃度２０％になるよう
に加え、遠心分離後沈澱物を回収した・　この操作で、
主としてアルブミン画分を除去した。回収した沈澱物を
酢酸ナトリウム溶液に悲濁し、ｐ　Ｈを５．１〜５，２
、イオン強度を０．０１３とした後、エタノールを加え
て終濃度１８％とし、遠心分離により沈澱を除去した。

得られた上溝を、イオン強度０．０５、ｐＨ７，０に調
整し、エタノール濃度を２５％として−５〜−７℃で分
画し、遠心分離後、免疫グロブリン沈澱物を約３００ｇ
得た。この免疫グロブリン沈澱物を生理食塩水で溶解し
た後、人工腎臓を用いて透析により残存するエタノール
を除去した。該免疫グロブリン溶液を５７℃で２時間加
熱した。

安定剤として、グリシン及びマンニトールを添加し、蛋
白濃度を約５％に調整して無菌ろ過を行った。それを分
注、凍結乾燥して最終製品２．５ｇ、２５本を得た。

本則を注射用蒸留水５０＋ｗＬで溶解して、純度及び単
量体含有量を検討した。結果は、第１図及び第２図のＨ
ＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）チャー１・に示
すように、免疫グロブリン純度９７％、単量体含量は９
６％であり、高度に梼製され、工程中の変性もうけてい
ないことが確かめられた。

支Ｅ１副実施例１と同様に採血分離した馬血漿２００Ｌ（３５頭
分プール）を用いて、分画、脱アルコール、職菌ろ過を
行った後、分注、凍結乾燥し、最終製品２．５ｇ　／ｖ
ｉａｌ　２６０本を得た。

実施例１と同様の試験を実施し、同様の試験成績を得た
。

大」Ｌ例−」。

上記実施例１に従って調整した高度精製馬免疫グロブリ
ンの安全性を確認する目的で、発熱試験（ウサギ）、異
常毒性回定試験（モルモット）、無菌試験、マウス急性
毒性試験、ピーグル大による血圧降下試験を実施した。

結果は第１表に示したことく、すべての試験に適合し、
本則の安全性が確認された。

第１表宜」Ｌη−１上記実施例２に従って調製した高度精製免疫グロブリン
を出生直後の子馬に投与し、その安全性を検討した。子
馬は２頭用いた。１頭につき出生当日と翌日に、それぞ
れ２ｇ、２本の計４本、免疫グロブリンにして１０８相
当を投与した。投与前１時閏より観察を始め、投与後６
時閏まで３０分ごとに観察して、体側、呼吸数、心拍数
等を測定した。すべての項目において特記すべき変化は
認められず、本則の安全性が確認された。

支ｍ実施例２でｉ！ｌｉｍｂた馬免疫グロブリン製剤の有効
性を確認する目的で腰帯から感染を引きおこした子馬へ
の投与試験を行った。該子馬は、自然分娩により出生し
、初乳の摂取量が少なかった為出生後５日ごろ請帯から
の感染を引きおこし、−帯炎、関節炎ならびに関節の腫
れを伴発していた。

それにより、高熱がつづき、食欲もなく、元気のない状
態であった。

そこで、本発明の馬免疫グロブリン製剤を５８静脈注射
した。注射後１日目より熱が下がりはじめ食欲もとりも
どし元気が回復した。注射後５日目に再び本則５ｇを静
脈し、免疫グロブリンレベルの維持につとめた。この結
果、注射後７日目ごろより謄帯炎、閏節炎もおさまり腫
れも引き、通常の子馬と同程度の運動機能を回復した。

その後も順調な回復を見、正常な生活を送っている。

従って、本発明の馬免疫グロブリン製剤の有効性が確認
できた。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明の製剤における免疫グロブリン（Ｉ　
ｇＧ）の純度を示すＨＰＬＣチャートであり、また、第
２図は、本発明の製剤における免疫グロブリン（ＩｇＧ
）の単量体含有量を示すＨＰＬＣチャートである。第１　（￥１侃１＋時間

Claims

【特許請求の範囲】

（１）馬血液由来の免疫グロブリン（ＩｇＧ）を含有す
る経口または静脈投与可能な馬用感染予防治療剤。
（２）馬血液由来の免疫グロブリン（ＩｇＧ）を９５重
量％以上の純度で含有し、該ＩｇＧの単量体含有量が９
５重量％以上である特許請求の範囲第１項記載の馬用感
染予防治療剤。
（３）馬血液由来の免疫グロブリンが、液状または凍結
乾燥状態で含有されている特許請求の範囲第１項記載の
馬用感染予防治療剤。
（４）馬血液由来の免疫グロブリンが、液状又は乾燥状
態で加熱処理されたものである特許請求の範囲第１項記
載の馬用感染予防治療剤。