JPH01207657A - 微量試料中における化学物質濃度の測定方法 - Google Patents
微量試料中における化学物質濃度の測定方法Info
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- JPH01207657A JPH01207657A JP63031816A JP3181688A JPH01207657A JP H01207657 A JPH01207657 A JP H01207657A JP 63031816 A JP63031816 A JP 63031816A JP 3181688 A JP3181688 A JP 3181688A JP H01207657 A JPH01207657 A JP H01207657A
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野］
本発明は微量な試料溶液中の化学物質濃度の測定方法に
関する。
関する。
［従来の技術］
近年、半導体製造技術を用いて微小なイオンセンサやこ
れを用いた半導体バイオセンサの開発が行われている（
鈴木周−編、「バイオセンサー」、講談社サイエンティ
フィック、ｐ、２８．１９８４）。半導体センサの大き
さは、例えば、０．６１１１ｍＸ Ｏ，３ｍｍＸ ４ｍ
ｍ程度であり（１９８４年電気化学合同秋季大会、第３
回化学センサー研究発表会要旨集、ｐ、３）、センサの
感応部位は、その先端１ｍｍ以内に設けられているため
溶液の全量が例えば３０μ！以下であっても測定が可能
である。
れを用いた半導体バイオセンサの開発が行われている（
鈴木周−編、「バイオセンサー」、講談社サイエンティ
フィック、ｐ、２８．１９８４）。半導体センサの大き
さは、例えば、０．６１１１ｍＸ Ｏ，３ｍｍＸ ４ｍ
ｍ程度であり（１９８４年電気化学合同秋季大会、第３
回化学センサー研究発表会要旨集、ｐ、３）、センサの
感応部位は、その先端１ｍｍ以内に設けられているため
溶液の全量が例えば３０μ！以下であっても測定が可能
である。
ところで、これらのセンサで溶液中の化学物質を測定す
る場合、一定の希釈を行った方が、測定精度や測定濃度
範囲に有利な場合のあることが知られている。たとえば
酵素センサを用いて基質濃度を測定する場合には、適当
な緩衝液を選び、この中にセンサを浸漬しておき、これ
に試料溶液を添加することによって酵素の活性を最大に
引き出すことが可能になる。また、センサの種類によっ
ては基質濃度が一定値よりも高くなると出力が飽和し、
それより高い濃度での測定が不可能になる場合が多い。
る場合、一定の希釈を行った方が、測定精度や測定濃度
範囲に有利な場合のあることが知られている。たとえば
酵素センサを用いて基質濃度を測定する場合には、適当
な緩衝液を選び、この中にセンサを浸漬しておき、これ
に試料溶液を添加することによって酵素の活性を最大に
引き出すことが可能になる。また、センサの種類によっ
ては基質濃度が一定値よりも高くなると出力が飽和し、
それより高い濃度での測定が不可能になる場合が多い。
これを解決する手段として溶液の希釈を行い、センサの
測定濃度範囲を広げることが行われている。
測定濃度範囲を広げることが行われている。
［発明が解決しようとする課題］
しかし、希釈を行う場合には希釈の精度自体が測定精度
を決める要因となる。特に試料が微量になればなるほど
正確な秤量は困難になる。微量試料の秤量を目的とした
各種のピペットが市販されているが、いずれもかなり高
価であり、正確な秤量にはある程度熟練を要する。とり
わけ試料が全血のような粘度の高いものの場合にはピペ
ットでの秤量は精度が低くなる。
を決める要因となる。特に試料が微量になればなるほど
正確な秤量は困難になる。微量試料の秤量を目的とした
各種のピペットが市販されているが、いずれもかなり高
価であり、正確な秤量にはある程度熟練を要する。とり
わけ試料が全血のような粘度の高いものの場合にはピペ
ットでの秤量は精度が低くなる。
本発明は以上述べたような従来の問題点を解決するため
になされたもので、試料溶液を正確に秤量することを必
要とせずに、希釈溶液を用いた化学物質濃度の測定を行
う方法を提供することを目的とする。
になされたもので、試料溶液を正確に秤量することを必
要とせずに、希釈溶液を用いた化学物質濃度の測定を行
う方法を提供することを目的とする。
［課題を解決するための手段］
本発明は、微量試料中の化学物質濃度を測定する方法に
おいて、粗秤量された試料溶液を一定量の希釈液で希釈
した第１の希釈溶液を用いて第１の化学物質濃度測定を
行う工程と、前記第１の希釈溶液をさらに一定量の希釈
液で希釈した第２の希釈溶液を用いて第２の化学物質濃
度測定を行う工程と、前記第１および第２の濃度測定値
を用いて試料溶液中の化学物質濃度を求める工程とを有
してなることを特徴とする微量試料中における化学物質
濃度の測定方法である。
おいて、粗秤量された試料溶液を一定量の希釈液で希釈
した第１の希釈溶液を用いて第１の化学物質濃度測定を
行う工程と、前記第１の希釈溶液をさらに一定量の希釈
液で希釈した第２の希釈溶液を用いて第２の化学物質濃
度測定を行う工程と、前記第１および第２の濃度測定値
を用いて試料溶液中の化学物質濃度を求める工程とを有
してなることを特徴とする微量試料中における化学物質
濃度の測定方法である。
［作用］
測定溶液中の化学物質の濃度と装置からの出力の間に第
１図に示したような相関関係が成立する場合において、
粗秤量された試料溶液の正確な量をＶ、はじめに添加し
た希釈液のｍをｖｌ、このときの測定値を８１．２回目
に添加した希釈液の母を■２．２回目の測定値を８２と
すると、Ｓｌ、Ｓ２はそれぞれ濃度Ｃ１、Ｃ２に対応す
る。試料の濃度がＣで表されるとすれば次式の関係が成
り立つ。
１図に示したような相関関係が成立する場合において、
粗秤量された試料溶液の正確な量をＶ、はじめに添加し
た希釈液のｍをｖｌ、このときの測定値を８１．２回目
に添加した希釈液の母を■２．２回目の測定値を８２と
すると、Ｓｌ、Ｓ２はそれぞれ濃度Ｃ１、Ｃ２に対応す
る。試料の濃度がＣで表されるとすれば次式の関係が成
り立つ。
Ｃ−Ｖ＝Ｃ＋ ・（Ｖ＋１）
Ｃ−Ｖ＝Ｃ２・（ｖ十Ｖ１＋Ｖ２）
よって
すなわち、試料溶液を正確に秤量することなく試料中の
化学物質の濃度を算出することが可能である。
化学物質の濃度を算出することが可能である。
ただし実際の測定では溶液の希釈倍率を変えた場合には
、測定溶液中の伯の成分の濃度（例えば緩衝物質の濃度
など）が異なってくるため、希釈倍率によって検量線が
変化する場合がある。この場合には第一の希釈倍率、第
二の希釈倍率の両方について検量線を作成しておき、そ
れぞれの検量線から求めた濃度（Ｃ＋ 、Ｃ２）を用い
れば同様の算出が可能である。
、測定溶液中の伯の成分の濃度（例えば緩衝物質の濃度
など）が異なってくるため、希釈倍率によって検量線が
変化する場合がある。この場合には第一の希釈倍率、第
二の希釈倍率の両方について検量線を作成しておき、そ
れぞれの検量線から求めた濃度（Ｃ＋ 、Ｃ２）を用い
れば同様の算出が可能である。
［実施例〕
次に本発明の実施例について図面を参照して詳細に説明
する。
する。
第２図は電界効果型イオンセンサの感応部にグルコース
オキシダーゼを固定化したグルコースセンサチップ１を
用いて測定溶液２中の物質濃度測定を行う方法を示す説
明図である。まず、グルコースセンサチップ１を２０μ
！の希釈液（０，１５）ＩＮａＣｌを含む２０ｍＨＨＥ
ＰＥＳ−ＮａＯｔｔ緩衝液）に浸漬し、ここに正確に１
０μｌの種々の濃度の標準溶液を注入口３より添加した
。このときの標準溶液の濃度と、ｌ５ＦＥＴアンプ４お
よび信号処理装置５によって得られた出力Ｓ１について
の検量線を第３図（ａ）に示す。また、希釈液の量を４
０μβにしたときの同様の検量線を第３図（ｂ）に示す
。
オキシダーゼを固定化したグルコースセンサチップ１を
用いて測定溶液２中の物質濃度測定を行う方法を示す説
明図である。まず、グルコースセンサチップ１を２０μ
！の希釈液（０，１５）ＩＮａＣｌを含む２０ｍＨＨＥ
ＰＥＳ−ＮａＯｔｔ緩衝液）に浸漬し、ここに正確に１
０μｌの種々の濃度の標準溶液を注入口３より添加した
。このときの標準溶液の濃度と、ｌ５ＦＥＴアンプ４お
よび信号処理装置５によって得られた出力Ｓ１について
の検量線を第３図（ａ）に示す。また、希釈液の量を４
０μβにしたときの同様の検量線を第３図（ｂ）に示す
。
以上のようにして得られた検量線を用い、次のようにし
て試料溶液中のグルコース濃度を求めた。
て試料溶液中のグルコース濃度を求めた。
まず、センサチップ１を２０μｌの希釈液に浸漬し、こ
のとぎの電位をＯとした。これにグルコース濃度１５０
＋ｎｇ／ｄＪ！の試料溶液の適当量（Ｖｐｐ）を注入口
３より添加しく第１の希釈溶液）、出力電圧の変化を求
めた（３１ｍＶ）。これにざらに２０μβの希釈液を添
加しく第２の希釈溶液）、出力電圧を測定した（３２ｍ
Ｖ、）。試料溶液の量を変化させて測定を行ったところ
、表−１に示すような結果が得られた。
のとぎの電位をＯとした。これにグルコース濃度１５０
＋ｎｇ／ｄＪ！の試料溶液の適当量（Ｖｐｐ）を注入口
３より添加しく第１の希釈溶液）、出力電圧の変化を求
めた（３１ｍＶ）。これにざらに２０μβの希釈液を添
加しく第２の希釈溶液）、出力電圧を測定した（３２ｍ
Ｖ、）。試料溶液の量を変化させて測定を行ったところ
、表−１に示すような結果が得られた。
表−１
表−１で明らかなように試料溶液の量が２０％程度異な
る場合にもかなり正確な濃度が得られる。
る場合にもかなり正確な濃度が得られる。
なお、本実施例では希釈液の添加量を２回とも同量（２
０ＬＩＮ ＞としたが、異なった量を用いてもよい。同
量にした場合には同一の操作の繰り返しですみ、機構的
にはより単純化されたものとなり、これまでの−段の希
釈系をそのまま用いることも可能である。
０ＬＩＮ ＞としたが、異なった量を用いてもよい。同
量にした場合には同一の操作の繰り返しですみ、機構的
にはより単純化されたものとなり、これまでの−段の希
釈系をそのまま用いることも可能である。
［発明の効果］
以上説明したように、本発明の測定方法を用いれば、試
料溶液の量を正確に秤量することなく、試料中の化学物
質の濃度を測定することが可能である。
料溶液の量を正確に秤量することなく、試料中の化学物
質の濃度を測定することが可能である。
従って試料溶液が微量であっても試料中の化学物質濃度
を正確に定量することができ、測定精度の向上が達成さ
れる。
を正確に定量することができ、測定精度の向上が達成さ
れる。
第１図は測定溶液濃度に対する装置からの出力の検量線
の一例を示す図、第２図は本発明の一実施例の説明図、
第３図は本発明の一実施例における２通りの希釈倍率で
の検量線を示す図である。 １・・・グルコースセンサチップ
の一例を示す図、第２図は本発明の一実施例の説明図、
第３図は本発明の一実施例における２通りの希釈倍率で
の検量線を示す図である。 １・・・グルコースセンサチップ
Claims (1)
- （１）微量試料中の化学物質濃度を測定する方法におい
て、粗秤量された試料溶液を一定量の希釈液で希釈した
第１の希釈溶液を用いて第１の化学物質濃度測定を行う
工程と、前記第１の希釈溶液をさらに一定量の希釈液で
希釈した第２の希釈溶液を用いて第２の化学物質濃度測
定を行う工程と、前記第１および第２の濃度測定値を用
いて試料溶液中の化学物質濃度を求める工程とを有して
なることを特徴とする微量試料中における化学物質濃度
の測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63031816A JPH01207657A (ja) | 1988-02-16 | 1988-02-16 | 微量試料中における化学物質濃度の測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63031816A JPH01207657A (ja) | 1988-02-16 | 1988-02-16 | 微量試料中における化学物質濃度の測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01207657A true JPH01207657A (ja) | 1989-08-21 |
Family
ID=12341617
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63031816A Pending JPH01207657A (ja) | 1988-02-16 | 1988-02-16 | 微量試料中における化学物質濃度の測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH01207657A (ja) |
-
1988
- 1988-02-16 JP JP63031816A patent/JPH01207657A/ja active Pending
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