JPH01143877A - スタウロスポリン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、血管弛緩作用、血小板凝集阻害作用を有する
新規なスタウロスポリンのアミノ酸置換酵導体に関する
。

（従来の技術および発明が解決しようとする問題点） 血管弛緩剤としては、従来、ベラパミル、ニカルジピン
等があるが１皿小板凝集阻′４舵を併せもつ殖豐は少な
い。これら系埋作用を併せもつ薬物は０便基性虚血障′
４に過用でき、このような楽物の出現が望まれている。

次弐〇 で示される化合物スタウロスポリンＦｉ、％開昭５３−
７３５０１号に記載の微生物生産物ＡＭ２２８２と同一
物質である。

（問題点を解決するための手段） 本発明は、−数式（１） ％式％ で示されるスタウロスポリン肪纒体およびその酸付加塩
ｒＣ関する。式中、ＡＶｉＣ，〜Ｃ４のアルキレン基で
あり、メチレン基あるいはエチレン基が好ましい。

付加する酸としては１例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ
化水素酸、フッ化水素酸等のハロゲン化水素酸、あるい
はギ酸、酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸等が
ある。

一般式（Ｉ）で示嘔れる化合物は、血管弛緩作用。

血圧降下作用を有する。ｔｘ、本物質が血小板凝集阻害
作用を併せ持つことが見出され比。かかる薬理作用を有
する本薬剤は、血圧降下剤としてはかシでなく、血小板
凝集抑制剤として、適応領域としては、高血圧症、梗塞
性循環不全症などに有効となルうる。

本発明の一般式（Ｉ）で示嘔れる化合物を有効成分とし
て含有するスタウロスポリン誘導体製剤は。

経口投与として錠剤、カプセル剤またはエリキシル剤の
ような調剤で、または非経口投与として。

無菌溶液剤または懸濁液剤で処方することくよｐ。

上記症状の改善を企てることができる。

本発明に使用する前記有効成分は、かかる治療を必要と
する患者に対して、患者当９０．１〜４００ダの用量範
囲で、一般に数回に分けて、したがって、１日当シ１〜
２０００ｍｇの全日用量で投与することができる。用量
は症状の程度、患者の体重および当業者が認める他の因
子によって変化させる。

錠剤、カプセル剤などに混和することができる具体的な
薬剤は１次に示すものである。トラガント、アラビアゴ
ム、コーンスターチ、ま几はゼラチンのような結合剤：
微品性セルロースのような賦形剤；コーンスターチ、前
ゼラチン化デンプン。

アルギン酸などのような膨化剤ニステアリン酸マグネシ
ウムのような飼滑剤：ショ糖、乳塘またはサッカリンの
ような甘味剤：ペパーミント、アカモノ油、ま几はチェ
リーのような香味剤、！１４剤単位形態がカプセルであ
る場合には、上記のタイプの材料に、さらに、油脂のよ
うな液状担体を含有させることができる。種々の他の材
料は、被覆剤として、また調剤単位の物理的形態を別な
方法で変化させるために存在させることができる。

注射のための無菌組成物は、注射用水のようなベヒクル
中の活性物質、ゴマ油、ヤシ油、落花生油、綿実油など
の天然産出植物油、またはエチルオレエートなどのよう
な合成脂肪ベヒクルを、溶解または懸Ｉ＠させる通常の
製剤実施にし比がって処方することができる。緩衝剤、
防腐剤、酸化防止剤などを必要に応じて混和することが
できる。

本発明の化合物（Ｉ）の製法の例を説明する。

弐〇で示される原料のスタウロスポリンに、次式（ＩＩ
Ｉ） ＨＯＯＣ−Ａ−ＮＨ−ＢＯＣ（ｎＩ） （式中、Ａｔ１Ｃ，〜Ｃ６のアルキレン基を表わし。

好ましくはメチレン基あるいはエチレン基であシ。

ＢＯＣＦｉｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を表わす。

）で示される化合物の反応性誘導体を、好ましくは不活
性溶媒中で作用させて、脱水縮合反応を行なわせること
によ９１次式（ＩＶ） で示される化合物が得られる。

使用される式（ｎＤの反応性誘導体としては、琥［［イ
ミ）’エステル、ｐ−ニトロフェニルエステル等があげ
られる。これらのうち、純品が容易に入手可能で取シ扱
いの容易な琥珀酸イミドエステルが好適である。使用で
きる不活性溶媒の例としては、ジクロロメタン、クロロ
ホルムの如き／Ｓロゲン化アルカンであり、ジクロロメ
タンま几はクロロホルムが好ましい。脱水縮合反応は常
温１例えば、１８〜２５Ｇの条件下で進行するが１反応
促進の目的で１例えば、３５〜４０ＣＫ加温できる。反
応の進行は、シリカゲル薄層クロマトグラフィー等の分
析法で容易に観察できる。反応液中よシの反応中間体（
ＩＶ）の単離は、常用される精製方法１例えば、溶媒抽
出、洗浄、あるいは再結晶によ如実施され、結晶性物質
として反応中間体（■）が得られる。

本発明の化合物は、得られ几この反応中間体（ＩＶ）に
好ましくは不活性溶媒中で１例えば、塩化水素を作用ざ
ぜて、脱保１ｉ（脱ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル化）
反応を行なうことＫより製造でき、目的の一般式（Ｉ）
で水堰れる化合物の塩酸塩は、常法で精製、単離するこ
とＫよシ収得される。

使用できる不活性溶媒の例としては、酢酸エチル、クロ
ロホルム、ジクロロメタンもしくはメタノールの如きア
ルコール類である。この中でメタノールが好適である。

脱保護反応は常温１例えば。

２０〜２５Ｃの条件下で進行する。反応の進行は。

高速液体クロマトグラフィー等の分析法で容易に観察可
能である。反応液中よシの新規誘導体（Ｉ）の塩酸塩の
単離け、再結晶法が最も適当であシ、その工程によシ、
結晶性物質として新規なスタウロスポリンアミノ酸置換
誘導体（Ｉ）の塩酸塩が取得できる。

まｔ、脱保護の際、塩酸の代シに臭化水素酸。

ヨウ化水素酸、７ツ化水素酸などのハロゲン化水Ｘ＃１
．ｓるいはギ酸、酢ｉ！ｌ！、ｐ−トルエンスルホン酸
などの有機酸も使用することが可能であシ。

それぞれの酸付加塩が取得できる。これらの塩は水酸化
アルカリ水溶液、好ましくは１〜２Ｎ水識化カリウム水
溶液で処理することによシ、遊離塩基の形に変換するこ
ともできる。

また１式（Ｉ）で示される化合物およびその酸付加塩で
あるスタウロスポリン誘導体のうち、人がメチレン基の
化合物に関し、前述と別経路の製造が可能でるる。すな
わち、前記した弐〇で示されるスタウロスポリンに１次
式（ｖ） Ｘ−Ｃｏ−ＣＨ，Ｘ　　　（Ｖ） （式中、Ｘは塩素または臭素を表わす。）で示される化
合物ｔ、好ましくは塩基性溶媒中で作用させ、アシル化
反応を行なうことにより１次式（Ｖｌ） （式中、Ｘは塩素または臭素を表わす。）で示される化
合物が得られる。

１史用できる塩基性溶媒の例としては、ピリジン。

２．６−ルチジン、トリエチルアミンでＴｏシ、ピリジ
ンが好適である。このアシル化反応の反応温度に関し、
前記の式（ｖ）のＸが塩素の時ＯＣが。

ま几、Ｘが臭素の時−７８Ｃが好まし匹。反応の進行は
１例えば、シリカゲル薄層クロマトグラフィーの分析法
で容易に＠察できる。反応液中よりの反応中間体（Ｖｌ
）の単離は、常法によ）実施され。

結晶性物質として反応中間体（Ｖｌ）が得られる。

その反応中間体（Ｖｌ）に、好ましくはアルコール溶媒
中でアンモニア水を作用させて、アミノ化反応を行なう
ことＫよ９１次式（■） Ｈ，ＣＮ−Ｃｏ−ＣＨ，→鴇 で示される化合物ヲ裏造できる。使用できるアルコール
溶媒は、メタノール、エタノールで、エタノールが好適
である。このアミノ化反応は常＠。

例えば、２０〜２５Ｃの条件下で進行する。反応の進行
は、シリカゲル薄層クロマトグラフィー等の分析法で容
易に測定ができる。反応液中よシ新規誘導体（■）の単
離は、常用される精製方法１例えば、シリカゲルカラム
クロマトグラフィーもしくはシリカゲル薄層クロマトグ
ラフィーによシ実施され、結晶性物質として新規なスタ
ウロスポリンアミノ酸置換体（■）が得られる。

（実適例） 以下に実施例を示す。

実施例１ ４′−Ｎ−グリシルスタウロスホリン スｌ　＋７　ｏスホ１）　ン７２２ｍ９（１，５５ｍｍ
ｏｌ　）を乾燥ピリジン１０−に溶解し、ｏＣに冷却下
、塩化クロロアセチルｔｌｔ４下し、１時間反応させた
。反応液に水１０７を加え、クロロホルムで抽出し。

有機層を無水ｖｔｒＲす）　１）ウムで乾燥した。硫酸
ナトリウムＦ去後、溶媒を減圧除去し、その残渣を。

シリカゲルを用い九カラムクロマトグラフィー（溶出溶
媒：クロロホルム）で精製し７ｔ−、ｆｉ出液ｔ−１−
ずつ分画し、各分ｊ！ｉｔ−薄層クロマトグラフイーで
検討し〔展開系：クロロホルム−メタノール（１０二１
）１．ｌｌ値０．６０　ｉ示す分画を集め、減圧下Ｉ／
ｃ濃縮すると、淡黄色結晶４’−Ｎ−（α−クロロアセ
チル）スタウロスポリン６１８ｍｇがｉられｘ。次いで
　４　／　−Ｎ　−（α−クロロアセチル）スタウロス
ポリン２２０Ｉ！Ｉ９をエタノール４０ｗｔ［溶解し、
３０％アンモニア水５−を加え、室温下４８時間反応さ
せ友。反応液を減圧下Ｋ１１Ｉ＆縮し。

クロロホルムに溶解し次後、ヘキサンで洗浄し。

再び濃縮した。その残渣を薄層クロマトグラフィーＣ展
Ｍ溶媒：クロロホルム−メタノ−ルー　３０−アンモニ
ア水（１００：１０：１）〕にて展開し１分取した。減
圧下に濃縮すると、結晶性物質が得られ、それを溶媒〔
クロロホルム−メタノール（３：１）ＩＫ溶解後、３０
％７ンモニ７水を加えて溶出さぜることによ〕椙裂して
、結晶性の４′−Ｎ−グリシルスタウ日スポリン１５０
Ｉａ９ｉ得た（収率５２チ）。

融点１９８〜２００Ｃ Ｒｆ値〔メルク社製シリカゲルＴＬＣ，溶媒系：クロロ
ホルム−メタノール−３ｏチアンモニア水（６０：　１
０　：　１　）　）　：　０．６７ＩＨ−ＮＭＲ（ＣＤ
Ｃｌ、　、９％）　２．４４８５Ｈ１２，７５ｑ　ＩＨ
。

２、ン　８ｓ　　ＡＨ，３，５０ｓ　　２Ｈ，４，００
ｄ　　ＩＨ，５，０１ｄ　　２Ｂ。

６．６６ｑ　ＩＨ，６，７２ｔ　２Ｈ，７，２９ｂｒｔ
　ＩＨ，７，５５ｂｒｔ１Ｈ，７，４９ｂｒｔ　２Ｈ，
７，９０ｄ　ＩＨ，７，９５ｄ　ＩＨ，８，０５ｄ　Ｉ
Ｈ，９，０４ｄ　ＩＨ Ｉ　Ｒ（ＣＨＣｌ、　、ｃＷ１″−１）３１５０，３０
００，１６８０゜マススペクトル：５２３（Ｍ＋） 実施例２ ４′−Ｎ−グリシルスタウロスポリン塩酸塩スタウロス
ポリン１５０〜（０，３２ｍｍｏｌ　）をジクロロメタ
ン８−に溶解し、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグ
リシン〇−琥珀酸イミド８８ｍ９（０，３２ｍｍｏｌ　
）　ｆ加え＊］１流下２４＃間反応させた。反応液にジ
クロロメタン１ｏ−を加えた後。

１０％クエン酸水溶液で３回、５％炭酸水素ナトリウム
水溶液で３回、水、飽和食塩水で各１回。

順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナト
リウムＰ去後、溶媒を減圧除去することによって、４’
−Ｎ　−（Ｎ　−ｔｅｒｔ　−ｙ”　）キシカルボニル
グリシル）スタウロスポリン９ｏダを傅友。次いで、こ
のＮ−保護グリシン誘導体９０ダを５チ塩酸メタノール
溶液２−に溶解＃せ、２０〜２５ｃで１５分間反応させ
ることによって、　ａ　ｔｅｒｔ　−ブトキシカルボニ
ル化を行なった。反応溶媒を減圧除去し　４／　Ｎ−グ
リシルスタウロスポリン塩酸塩６７ダを得た（収率３３
％）。この生成物をメタノール−エーテルの混合溶媒に
よって再結晶を行ない、ｎ製した。

実施例３ ａ／−Ｎ−β−アラニルスタウロスポリン塩酸塩、ｚｐ
ルウロスボリン　００　ｌ７１ｇ　（０，４３ｍｍｏｌ
　）　ｔ−ジクロロメタン１ｏｒ１１ｔに溶解し、Ｎ−
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−β−γラニン〇−琥珀
酸イミドエステル１２０ダ（ｏ、４３　ｍｍｏｌ　）を
加え、還流下４８時間反応させた。反応液にジクロロメ
タン１０−を加え、１Ｑチクエン酸水溶液で３回、５チ
炭酸水素ナトリウム水溶液で３回、水、飽和食塩水で各
１回、順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫
酸す）　１）ウムＦ去後、溶媒を減圧除去すること忙よ
って、　４’−Ｎ　−（Ｎ　−ｔｅｒｔ−ブトキシカル
ボニル−β−アラニル）スタウロスホ１）ン９９ダを得
比。次に、このＮ−保繰β−アラニン誘導体９９ＩＲ９
を５チ塩酸メタノ一ル溶液２ｍＫ溶解させ、２０〜２５
Ｃで１５分間反応させる仁とによって脱保護化を行なっ
た。反応液を減圧濃縮して　ａｌ−Ｎ−β−７ラニルス
タウロスボリン塩酸塩８２ダを得た（収率３３チ）。こ
の生成物をメタノール−エーテル混合溶媒によ郵再結晶
を行ない、精製した。

息Ｈ−ＮＭＲｘぺＩ　）　ル（ＤＭＳＯ−ｄ６．ｐｅａ
）：２．４５ｓ　３Ｈ，２，４９ｓ　５Ｈ，２，５５ｔ
　２Ｈ，２，７３ｑ　ＩＨ。

２．７８　ｓ　ＡＨ，３，２２ｔ　２Ｈ，４，０２ｄ　
ＩＨ，５，０２ｄ　２Ｈ。

６．６８　ｑ　ＩＨ，６，７５ｔ　２Ｈ，７，５０ｂｒ
ｔ　ＩＨ，７，３７ｂｒｔＩＨ，７，５２ｂｒｔ　２Ｈ
，７，９３ｄ　ＩＨ，７，９８ｄ　ＩＨ，８，０６ｄ　
ｌ）１．９．０２　ｄ　ＩＨ Ｉｎスペクトル（ＫＢｒ、、ｌＷ″″１）５４５０，３
０８０゜１６８０．１６４２ マススペクトル：　５４５（Ｍ”）、５２Ｇ実施例４ 摘出血管弛緩作用 家兎胸部大動脈ヲジャーナル・ファーマコロジカル・エ
クスベリメンタル・テラピー、２３１巻１４１〜１４５
頁（１９８４）Ｋ示すごとく摘出し、血管条片を作成し
た。ま友、実験方法も上記雑誌記載条件に準じた。

実験方法の概略を記す。血管条片標品を１０ｍのクレー
ブス・へンゼライト液中で１等尺性懸垂嘔ぜ、収Ｊ１ｉ
！惹起物質−ＫＣＩ　（Ｒａｇ　６０　ｍＭ　）　ｆ添
加し、予端収＊ｔ−行なった。七の後、洸伊し。

ＫＣｌ　（ｚｌｏ、２０．３Ｇ、４０．６０ｍＭと累積
添加し。

収ａｔ−Ｘ起させ、その張力を無添加コントロールとし
友。妊らに、況浄後の血管検品に、　４’−Ｎ−グリシ
ルスタウロスポリン塩酸塩ま友は４’−Ｎ−β−７ラニ
ルスタウロスポリン塩＃ｌ塩を５μｆ／ｄ添加し、１時
間ブレインキュベーションした。その後。

ＫＣＩを累積的に添加しく１０〜６０ｍＭ）、収縮抑制
反応を観察した。

結果を第１図ａ　、ｂＫ示す。４′−Ｎ−グリシルスタ
ウロスポリン塩酸塩および４’−Ｎ−β−７ラニルスタ
ウロスボリン塩酸塩は、収縮惹起物質・ＫＣＩ（終濃度
６０　ｍＭ　）収縮において、無添加コントロールに比
較し、７０〜８０％の血管収縮抑制効果が認められ、血
管弛緩薬として有用である。

実施例５ 血小板凝集阻害作用 家兎動脈より３．８チクエン酸ナトリウム１／１０容を
添加して採血した血液ｉ、９００回転１５分間遠心し、
血小板多血漿（ＰＲＰ　）を調製した。次に、血小板凝
集計のキュベツトにＰＲＰ　４００μｔ。

塩化カルシウム（終濃度１ｍＭ）溶液２５μｔ。

ＰＢＳ　２５μｔ、４’−Ｎ−グリシルスタウロスポリ
ン塩酸塩または４′−Ｎ−β−アラニルスタウロスポリ
ン塩酸塩の１４ＤＭＳＯ溶液２５μｔを加えて混和し、
５７（：、１０分間インキュベートした後、攪拌しなが
ら、コラーゲン（終濃度２．５μｒ／ｄ）溶液またはＡ
ＤＰ（終濃度１０μＭ）溶液２５μｍｔ−添加し、血小
板凝集阻害活性を測定し友。結果を第２図および第５図
に示す。

４′−Ｎ−グリシルスタウロスポリン塩酸塩および４／
−Ｎ−β−アラニルスタウロスポリン塩酸塩は。

コラーゲン凝集、ＡＤＰＭ集において１強い血小板凝集
阻害作用を示した。

実施例６ 血圧降下作用 ジャーナル・ファーマコロジカル・エクスヘリメンタル
・テラビー、２３３巻、４５４〜４５８頁（１，９８５
）に記載の方法に準じ、雑犬を用い。

４’−Ｎ−グリシルスタウロスポリン塩酸塩１．Ｑｌｎ
９／ユ、ｉ、ｖ、を右内側伏在静脈投与し、大腿動脈圧
をポリグラフで測定し友。結果ｔ−第１表および第４図
に示す。４′−Ｎ−グリシルスタウロスポリン塩酸塩は
１．０〜／ｋｇ、ｉ、ｖ、で血圧降下作用を示した。

また、その効果は、単回投与にもかかわらず持続的であ
つ九〇 第１表　　静脈内投与における薬物の効果実施例７ ４′−Ｎ−グリシルスタウロスポリン塩酸塩にかえテ４
’−Ｎ−／リシルスタウロスポリンを用い、実施例４お
よび５と同一の実験を実施した（ただし。

４′−Ｎ−スタウロスポリンの濃度をその塩酸塩と同一
′ａｙに合ぜ友）ところ、４’−Ｎ−グリシルスタウロ
スポリン塩酸塩と同一の効果が得られ九〇（発明の効果
） 本発明化合物は、血管収縮ま友は血小板凝集に対して有
効である。また、血圧降下作用をも有する。高血圧症ば
かりではなく、異常な血管収縮や。

血小板凝集に伴う血流不全、虚血等の諸症状１例えば、
脳血流不全、脳便基、脳血管しン縮に伴う症状、狭心症
、冠動脈レン縮に伴う症状などく有効であると考えられ
る。

【図面の簡単な説明】

第１図ａ、ｂは４′−Ｎ−グリシルスタウロスポリン塩
酸塩、４’−Ｎ−β−７ラニルスタウロスボリン塩酸塩
投与による収縮惹起物質・ＫＣＩ添加によって生じる血
管収縮の阻害効果を示すグラフ。 第２図は４′−Ｎ−グリシルスタウロスポリン塩酸塩、
　４’−Ｎ−β−アラニルスタウロスポリン塩酸塩投与
によるコラーゲン添加によって生じる血小板凝集の阻害
効果を示すグラフ、第３図は４’−Ｎ−グリシルスタウ
ロスポリン塩ａ［Ｅ、　４’−Ｎ−β−アラニルスタウ
ロスポリン塩酸塩投与によるＡＤＰ添加によって生じる
血小板凝集の阻害効果を示すグラフ、第４図は４′−Ｎ
−グリシルスタウロスポリン塩酸塩投与による犬血圧に
及ぼす効果と時間との関係を示すグラフである。 第３図 ［ＦＪ　　間　　（分） 第４図 時　　間　（分）

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、ＡはＣ＿１〜Ｃ＿４のアルキレン基を表わす。 ）で示される化合物およびその酸付加塩であるスタウロ
   スポリン誘導体。
2. （２）Ａがメチレン基である特許請求の範囲第１項記載
   のスタウロスポリン誘導体。
3. （３）Ａがエチレン基である特許請求の範囲第１項記載
   のスタウロスポリン誘導体。