JP7492615B2 - バイオセンサチップ - Google Patents
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Description
検出は、生命体又は生体物質自体を検出する方式、或いは特定の反応物と生命体又は生体物質との間の相互作用(interaction)及び反応(reaction)などを検出する方式により実行できる。このタイプの生化学センサは、半導体の製造プロセスを採用して製造でき、従って迅速に電子信号を変換でき、さらに集積回路(IC)及び微小電気機械システム(MEM)に容易に応用できる。
先進的なバイオチップは、マイクロ流体(microfluidics)を伴う複数のセンサを使用して、反応、感知及び試料管理を統合する。バイオ電界効果トランジスタ(BioFET、biological field-effect transistor又はbio-organic field-effect transistor)は、生体物質又は生命体を電気的に感知するためのトランジスタを含むバイオセンサでよい。
バイオ電界効果トランジスタは多くの面での応用が効果的であるのと同時に、その製造及び/又は操作の難度もこれに伴って上昇しており、その難度は半導体製造プロセス、生物学的応用、半導体製造プロセスの制限及び/又は限界、電子信号及び生物学的応用の感度及び解析度に起因し、並びに/或いはLSIプロセス(LSI process)の実施におけるその他の難度に由来する。
バイオセンサチップは基板及び基板上の少なくとも2つの感知ユニットを含み、2つの感知ユニットはそれぞれ基板と電気的に接続され、1つの感知ユニットは複数のバイオプローブを有し、もう1つの感知ユニットはバイオプローブを有さない。ターゲットを有する測定サンプルが2つの感知ユニットとそれぞれ接触すると、1つの感知ユニットの複数のバイオプローブは測定サンプル中のターゲットを捕捉するのに用いられ、これにより1つの感知ユニットに電圧変化が生じて、測定可能な信号変化が生じる。さらにもう1つの感知ユニットは陰性対照群(negative control)とし、陰性対照群及び信号変化により、測定サンプルのターゲットの濃度又は数量を得る。
バイオセンサチップは基板を含み、基板上に第1感知領域及び第2感知領域、並びに複数の感知ユニットを少なくとも有する。これらの感知ユニットは基板上に設置されて基板と電気的に接続され、一部の感知ユニットは基板の第1感知領域に設置され、その他の感知ユニットは基板の第2感知領域に設置される。第1感知領域内の一部の感知ユニットは複数の第1バイオプローブを有し、1つの感知ユニットはバイオプローブを有さず、第2感知領域内のその他の感知ユニットは複数の第2バイオプローブを有し、第2感知領域内の1つの感知ユニットは第2バイオプローブを有さない。測定サンプルが該第1感知領域の一部の感知ユニット及び第2感知領域のその他の感知ユニットと接触すると、第1感知領域において、一部の感知ユニットの第1バイオプローブは測定サンプルの第1ターゲットを捕捉し、これにより第1感知領域における第1バイオプローブを有する一部の感知ユニットに第1総電圧変化が生じて、測定可能な第1信号変化が生じる。さらに第1感知領域において、第1バイオプローブを有さない1つの感知ユニットを第1陰性対照とし、第1感知領域で得られた第1陰性対照群及び第1信号変化により、測定サンプルの第1ターゲットの第1濃度又は第1数量を得る。さらに第2感知領域において、その他の感知ユニットの第2バイオプローブは測定サンプルの第2ターゲットを捕捉し、これにより第2感知領域における第2バイオプローブを有するその他の感知ユニットに第2総電圧変化が生じて、測定可能な第2信号変化が生じる。さらに第2感知領域において、第2バイオプローブを有さない1つの感知ユニットを第2陰性対照群とし、第2感知領域で得られた陰性対照及び第2信号変化により、測定サンプルの第2ターゲットの第2濃度又は第2数量を得る。
図1において、バイオセンサチップ1は少なくとも第1感知ユニット20及び第2感知ユニット30からなり、第1感知ユニット20及び第2感知ユニット30はそれぞれ基板10上に設置され、基板10と電気的に接続され、第1感知ユニット20及び第2感知ユニット30はそれぞれ電気的に独立する。このほか、第1感知ユニット20はさらに複数のバイオプローブ28を有し、第2感知ユニット30はいかなるバイオプローブ28も有さず、第2感知ユニット30は第1感知ユニット20の陰性対照群(negative control)とする。
ターゲット(図示せず)を有する測定サンプル(図示せず)が第1感知ユニット20及び第2感知ユニット30とそれぞれ接触すると、第1感知ユニット20のみがバイオプローブ28を有するため、バイオプローブ28により測定サンプル(図示せず)中のターゲット(図示せず)を捕捉でき、第1感知ユニット20はバイオプローブ28の存在により、測定可能な信号変化が生じる。第2感知ユニット30はいかなるバイオプローブ28も有さないため、いかなる信号変化も生じず、従って第2感知ユニット30の陰性対照群及び第1感知ユニット20に生じた信号変化により、測定サンプル(図示せず)のターゲット(図示せず)の濃度又は数量を得ることが可能である。
説明すべきことは、本発明が開示するバイオセンサチップ1中の第1感知ユニット20及び第2感知ユニット30は、マイクロ感応ゲートを有する電界効果トランジスタからなることであり、マイクロ感応ゲートを有する電界効果トランジスタの構造は後に詳述する。
図2Aにおいて、マイクロ感応ゲート250を有する電界効果トランジスタは、例えばNチャネル金属酸化膜半導体(NMOS)でよく、その構造はシリコン基板202、ソース(source electrode)212、ドレイン(drain electrode)214、さらにソース212とドレイン214との間にあるチャネル領域(channel region)220、チャネル領域220に設置され、シリコン基板202の表面に位置する分離層(又はフィールド酸化層と呼ぶ)230及び分離層230上に設置される金属層240を少なくとも含む。
金属層240の上方は、測定サンプル(図示せず)と接触するのに用いられるウェル領域(well region)260であり、ウェル領域260内にマイクロ感応ゲート250を有し、このマイクロ感応ゲート250及び電界効果トランジスタの金属層240は電気的に接続される。説明すべきことは、上記マイクロ感応ゲート250を有する電界効果トランジスタの形成方式が、適合する相補型金属酸化膜半導体(CMOS)の製造プロセスを利用することであり、その形成手順は本発明の主たる技術的特徴ではないため、ここでは述べない。
本発明において、測定サンプルは体液、血漿又は全血でよい。測定サンプル中のターゲットは例えば大腸菌又はウイルスなどの細菌でよい。説明すべきことは、本発明の検出を行うとき、体液、血漿又は全血のこれらの測定サンプルを緩衝溶液(buffer)で希釈して、体液、血漿又は全血中のノイズを除去する必要があり、その希釈倍数は10~100倍であることである。
図2Bにおいて、ドレイン214、ソース212をそれぞれ外部処理ユニット50と電気的に接続する。ターゲット42を有する測定サンプル40をウェル領域260内に位置させ、さらに電界効果トランジスタのマイクロ感応ゲート250と接触させるとき、同時にドレイン214に2Vの電圧を付加し、さらに基準電極52を測定サンプル40と接触させ、マイクロ感応ゲート250の電圧値変化を測定するときに必要な電圧を供給する。
マイクロ感応ゲート250のバイオプローブ28は測定サンプル40内のターゲット42を捕捉し、ターゲット42自体が電荷を帯びるため、バイオプローブ28がターゲット42を捕捉するのと同時に、マイクロ感応ゲート250の電荷分布にも影響を及ぼし、マイクロ感応ゲート250に電圧変化が生じ、これにより電界効果トランジスタ全体に測定可能な信号変化が生じる。
一定時間静置すると、第1感知ユニット20とする、マイクロ感応ゲート250を有する電界効果トランジスタはバイオプローブ28を有するため、測定サンプル40中の大腸菌42はマイクロ感応ゲート250のバイオプローブ28に捕捉される。大腸菌42の細胞壁の大半は負電荷を帯びるため、この負電荷はマイクロ感応ゲート250を有する電界効果トランジスタの電荷分布に影響を及ぼし、マイクロ感応ゲート250を有する電界効果トランジスタの電気的変化が生じ、これにより測定可能な信号変化が生じる。また、第2感知ユニット30とするもう1つの電界効果トランジスタのマイクロ感応ゲートはバイオプローブを有さず、従ってマイクロ感応ゲートを有する電界効果トランジスタはドレインに付加される電圧(Vd=2V)のみを有するため、これによって第2感知ユニット30が外部処理ユニットに伝送する信号は、陰性対照群又はブランク試験と見なすことが可能である。第1感知ユニット20が測定して得た信号変化及び第2感知ユニット30の陰性対照群により、測定サンプル40中のターゲット42、すなわち大腸菌の濃度又は数量を得ることが可能である。
図3に示す通り、本発明が開示するバイオセンサチップ1を異なるpH値の液体環境に位置させて、異なる信号反応を得る。図3において、pH=7を標準状態とし(図中Gの曲線及びBの曲線でそれぞれ示す)、バイオセンサチップ1が例えばpH値が5(pH=5)であるなど酸性環境にあるとき、左に偏移する信号反応が生じる。すなわち図中のOで示す曲線である。
バイオセンサチップ1が例えばpH値が8(pH=8)であるなどアルカリ性環境にあるとき、右に偏移する信号反応が生じる。すなわち図中のYで示す曲線である。このことから、本発明が開示するバイオセンサチップ1の信号反応及び液体のpH値は関係することがわかる。
この大腸菌の検査において、本発明が開示するバイオセンサチップ1表面のバイオプローブは大腸菌プローブであり、このとき測定サンプルは大腸菌を有する全血であり、その体積は100μLである。大腸菌を有する全血の測定サンプルを図2Bのようなウェル領域260内に位置させることにより、マイクロ感応ゲート250の大腸菌プローブ28は全血(測定サンプル)中の大腸菌を捕捉でき、信号の変化により106cfu/mLの大腸菌濃度を測定できる。図4にBで示す曲線の通りである。既存の検出方法と比較して、その感度は10~1000倍に達し、測定サンプルは余計な培養時間を必要としないため、検出に必要な時間を大幅に低下させる。
この無菌の全血の検査において、バイオセンサチップ1表面のバイオプローブ28は同様に大腸菌プローブであり、同様に無菌の全血(測定サンプル)を図2B中のウェル領域260内に位置させる。全血の測定サンプル内にいかなる大腸菌もないため、マイクロ感応ゲート250の大腸菌プローブ28はいかなる大腸菌も捕捉せず、従っていかなる信号も生成されない。図5に示す通りである。
図6において、バイオセンサチップ2は少なくとも2つの感知領域60A及び60Bを有し、第1感知領域60A内に複数の第1感知ユニット70を有し、第2感知領域60B内に複数の第2感知ユニット80を有する。複数の第1感知ユニット70及び複数の第2感知ユニット80はそれぞれ基板60と電気的に接続され、複数の第1感知ユニット70の間は互いに並列の方式で電気的に接続され、複数の第2感知ユニット80は互いに並列の方式で電気的に接続され、第1感知領域60A内の複数の第1感知ユニット70及び第2感知領域60Bの複数の第2感知ユニット80は互いに電気的に独立する。第1感知領域60Aの一部の第1感知ユニット70は第1バイオプローブ78を有し、第1感知領域60Aの1つの第1感知ユニット72はいかなるバイオプローブも有さず、同様に、第2感知領域60Bの一部の第2感知ユニット80は第2バイオプローブ88を有し、第2感知領域60Bの1つの第2感知ユニット82はいかなるバイオプローブも有さない。
この実施例において、第1バイオプローブ78及び第2バイオプローブ88は異なるバイオプローブであり、同一の測定サンプル中の2つの異なるターゲットを捕捉するのに用いられる。
第1バイオプローブ78は例えば大腸菌などの細菌を捕捉するのに用いられ、第2バイオプローブ88はウイルスを捕捉するのに用いられ、その反対でもよい。その他の実施例において、バイオセンサチップ2は4つ、6つ、又はより多くの感知領域に区分することもでき、異なる感知領域の複数の感知ユニットは、同一の測定サンプル中の複数の異なるターゲットを捕捉するための異なるバイオプローブを有する。これにより、より迅速に単一の測定サンプル中から測定サンプル中の各種ターゲットを検出でき、後続の関連スタッフに提供してより精確な判断又は研究を行う。
さらに並列方式で第1感知領域60Aの複数の第1感知ユニット70が出力する合計の第1電圧値変化を計算し、この出力する合計の第1電圧値変化に対応する第1信号変化が生じる。このほか、第1感知領域60Aの1つの第1感知ユニット72はいかなる第1バイオプローブ78も有さず、この第1感知ユニット72も同様に測定サンプルと接触するが、第1ターゲットを捕捉する第1バイオプローブ78を有さないため、マイクロ感応ゲートを有する電界効果トランジスタのドレイン(図2Bに示す)に付加される電圧(Vd=2V)のみを有する。従ってこの第1感知ユニット72が外部処理ユニットに伝送する信号は、陰性対照群又はブランク試験と見なすことが可能である。この陰性対照群(又はブランク試験)及び第1信号変化により、測定サンプル内の第1ターゲットの総数量又は総濃度を判断する。
この陰性対照群(又はブランク試験)及び第2信号変化により、測定サンプル内の第2ターゲットの総数量又は総濃度を判断する。バイオセンサチップ2が同一測定サンプル内の複数の異なるターゲットの数量又は濃度を検出することにより、後続の関連スタッフに迅速に提供し、研究して判断できる。これにより、既存技術のバイオセンサチップがターゲットの存在の有無を検出することしかできず、ターゲットを定量又は定性できないという技術的課題を解決した。
2 バイオセンサチップ
10 基板
60 基板
202 シリコン基板
212 ソース
214 ドレイン
220 チャネル領域
230 分離層
240 金属層
250 マイクロ感応ゲート
260 ウェル領域
28 バイオプローブ
30 第2感知ユニット
40 測定サンプル
42 ターゲット
50 外部処理ユニット
52 基準電極
60A 第1感知領域
60B 第2感知領域
70 第1バイオプローブを有する第1感知ユニット
72 第1バイオプローブを有さない第1感知ユニット
78 第1バイオプローブ
80 第2バイオプローブを有する第2感知ユニット
82 第2バイオプローブを有さない第2感知ユニット
88 第2バイオプローブ
Claims (8)
- 基板、及び前記基板上の少なくとも2つの感知ユニットを含み、
各前記感知ユニットは前記基板と電気的に接続され、
1つの前記感知ユニットは複数のバイオプローブを有し、もう1つの前記感知ユニットは前記バイオプローブを有さず、
前記2つの感知ユニットはマイクロ感応ゲートであり、前記基板及び前記2つの感知ユニットは電界効果トランジスタを構成し、
ターゲットを有する測定サンプルが前記2つの感知ユニットとそれぞれ接触すると、前記感知ユニットの前記バイオプローブは前記測定サンプル中の前記ターゲットを捕捉し、これにより1つの前記感知ユニットに電圧変化が生じて、測定可能な信号変化が生じ、さらにもう1つの前記感知ユニットは陰性対照(negative control)とし、前記陰性対照及び前記信号変化により、前記測定サンプルの前記ターゲットの濃度又は数量を得る、
バイオセンサチップ。 - 前記測定サンプルの前記ターゲットは細菌又はウイルスであることを特徴とする、請求項1に記載のバイオセンサチップ。
- 前記測定サンプルは血漿又は全血であることを特徴とする、請求項1又は2に記載のバイオセンサチップ。
- 第1感知領域及び第2感知領域を少なくとも有する基板、並びに複数の感知ユニットを含み、
前記感知ユニットは前記基板上に設置されて前記基板と電気的に接続され、
一部の前記感知ユニットは前記基板の前記第1感知領域に設置され、その他の前記感知ユニットは前記基板の前記第2感知領域に設置され、
前記第1感知領域内の一部の前記感知ユニットは複数の第1バイオプローブを有し、1つの前記感知ユニットは前記第1バイオプローブを有さず、
前記第2感知領域内のその他の前記感知ユニットは複数の第2バイオプローブを有し、前記第2感知領域内の1つの前記感知ユニットは前記第2バイオプローブを有さず、
前記感知ユニットはマイクロ感応ゲートであり、前記基板及び前記感知ユニットは電界効果トランジスタを構成し、
測定サンプルが前記第1感知領域の一部の前記感知ユニット及び前記第2感知領域のその他の前記感知ユニットと接触すると、前記第1感知領域において、一部の前記感知ユニットの前記第1バイオプローブは前記測定サンプルの第1ターゲットを捕捉し、これにより前記第1感知領域における前記第1バイオプローブを有する一部の前記感知ユニットに第1総電圧変化が生じて測定可能な第1信号変化が生じ、
前記第1感知領域において、前記第1バイオプローブを有さない1つの前記感知ユニットを第1陰性対照とし、前記第1感知領域で得られた前記第1陰性対照及び前記第1信号変化により、前記測定サンプルの前記第1ターゲットの第1濃度又は第1数量を得、
前記第2感知領域において、その他の前記感知ユニットの前記第2バイオプローブは前記測定サンプルの第2ターゲットを捕捉し、これにより前記第2感知領域における前記第2バイオプローブを有するその他の前記感知ユニットに第2総電圧変化が生じて測定可能な第2信号変化が生じ、
前記第2感知領域において、前記第2バイオプローブを有さない1つの前記感知ユニットを第2陰性対照とし、前記第2感知領域で得られた前記第2陰性対照及び前記第2信号変化により、前記測定サンプルの前記第2ターゲットの第2濃度又は第2数量を得る、
バイオセンサチップ。 - 前記第1感知領域の前記感知ユニットは互いに電気的に接続され、前記第2感知領域のその他の前記感知ユニットは互いに電気的に接続され、前記第1感知領域の前記感知ユニット及び前記第2感知領域のその他の前記感知ユニットは互いに電気的に独立することを特徴とする、請求項4に記載のバイオセンサチップ。
- 前記測定サンプルは血漿又は全血であることを特徴とする、請求項4に記載のバイオセンサチップ。
- 前記第1ターゲット及び前記第2ターゲットは異なることを特徴とする、請求項4に記載のバイオセンサチップ。
- 前記第1ターゲットは細菌であり、前記第2ターゲットはウイルスであることを特徴とする、請求項4に記載のバイオセンサチップ。
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