JP7458050B2 - 天然酵母の胞子形成法 - Google Patents
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Description
[1]水と寒天とからなる、天然酵母の胞子形成培地、
[2]水と寒天とからなる寒天培地上で培養する工程を含む、天然酵母の胞子形成方法、
により解決することができる。
本発明の胞子形成培地または胞子形成方法は、天然酵母において胞子形成を誘導するために用いることができる。
本明細書において「天然酵母」とは、単に天然に存在する酵母を意味するものではなく、これまでの研究・開発においてその性質が充分に解析されている「実験酵母」(例えば、胞子形成の誘導方法が充分に確立されている実験酵母)とは異なり、その性質が充分に解析されていない酵母を意味する。本発明で用いることのできる「天然酵母」としては、例えば、これまでの従来公知の胞子形成培地では胞子形成を誘導できなかった酵母、あるいは、胞子形成できても胞子形成率が低かった酵母を挙げることができるが、胞子形成の誘導方法が充分に確立されている酵母であっても、本発明を適用することにより胞子形成率を更に向上させることができる酵母を用いることもできる。
本明細書において「胞子形成率が低い酵母」とは、後述する胞子形成の定量方法により、或る態様では胞子形成率が10%以下の酵母、或る態様では胞子形成率が1%以下の酵母を意味する。
本発明の胞子形成培地は、水と寒天とからなる。
寒天の濃度は、或る態様では1.5~2.0%、或る態様では1.5~1.0%であることができる。
ここで、胞子形成を妨げない量で第三成分を含むとは、第三成分を含まない本発明の胞子形成培地を用いた場合の胞子形成率に対して、第三成分を含む本発明の胞子形成培地を用いた場合の胞子形成率が、或る態様では10%以上、或る態様では50%以上、或る態様では80%以上、或る態様では90%以上、或る態様では95%以上、或る態様では100%であることを意味する。
本発明の胞子形成方法は、本発明の胞子形成培地を使用して培養を行うこと以外は、従来公知の胞子形成方法に従って実施することができる。
例えば、本発明の胞子形成方法では、予めYPD培地のような完全培地などで予備培養を行っておき、その培養物を本発明の胞子形成培地に植菌することにより本培養を実施することができる。培養温度は、例えば、18~30℃で実施することができ、5~30日程度保温する。
本実施例で用いた本発明培地と、従来公知の胞子形成培地の各組成を表1に示す。粉末寒天はシグマアルドリッチより、蒸留水は富士フィルム和光純薬より、それぞれ、購入したものを使用した。
YPD培地で予備培養を行い、その培養物を表1に示す各寒天培地に植菌して25℃で21日間保温した。顕微鏡下で酵母を300~500個程度計測し、胞子形成している細胞の割合を算出した。結果を表2に示す。
本実施例では、寒天の購入先の違いにより、実施例1で確認した胞子形成能が影響を受けるか否かを確認した。
シグマアルドリッチ社および和光純薬の寒天を使用し、2%寒天培地を作成した。それらの培地に実施例1で用いたものと同じ天然酵母リポミセス(Lipomyces)属酵母を植え付け、25℃で保温した。これら2つの培地の間に胞子形成に大きな違いは見られなかった。
本実施例では、実施例1で用いた天然酵母と共に、別種のリポミセス属酵母を加え、実施例1で用いた本発明培地により胞子形成が誘導されるか否かを確認した。
寒天培地に各酵母細胞を播種し、25℃で保温した。顕微鏡下で酵母を約400個程度計測し、胞子形成している細胞の割合を算出した。結果を表3に示す。
本参考例では、本発明培地に二価カチオン(カルシウムイオン、マグネシウムイオン)を各種濃度で添加し、前記二価カチオンの影響を検討した。
200nmol/Lの塩化カルシウムまたは塩化マグネシウムまたは両方を2%寒天培地に添加して、天然酵母の胞子形成を確認した。しかし、塩化カルシウムや塩化マグネシウムの添加有無で、胞子形成に大きな違いは認められず、少なくともこれらの二価カチオンによる胞子形成の促進効果は認められなかった。
すなわち、本参考例では、前記非特許文献1に記載のこれまでの公知知見(すなわち、二価カチオン(カルシウムイオン、マグネシウムイオン)が胞子形成促進因子である)と異なり、意外にも、二価カチオン濃度と胞子形成との間に相関は認められなかった。
Claims (2)
- 水と寒天とからなる、リポミセス スターキー(Lipomyces starkeyi)の胞子形成培地。
- 水と寒天とからなる寒天培地上で培養する工程を含む、リポミセス スターキー(Lipomyces starkeyi)の胞子形成方法。
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