JP7364252B2 - Retinal protective composition - Google Patents
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Description
本発明は、網膜保護組成物に係り、詳しくは、アスタキサンチン及び特定の他の成分を有効成分とする網膜保護組成物に関する。 The present invention relates to a retinal protective composition, and more particularly, to a retinal protective composition containing astaxanthin and certain other ingredients as active ingredients.
視細胞の修復や再生に関与している網膜色素上皮の機能は、加齢とともに低下していくことが知られている。若い頃は、体内にＳＯＤ酵素が十分にあり、活性酸素による悪影響を防いでいるが、加齢とともにＳＯＤ酵素の働きが低下し、網膜色素上皮の機能も低下することになる。 It is known that the function of the retinal pigment epithelium, which is involved in the repair and regeneration of photoreceptor cells, declines with age. When we are young, there is enough SOD enzyme in our bodies to prevent the harmful effects of active oxygen, but as we age, the function of SOD enzyme declines, and the function of the retinal pigment epithelium also declines.
一方、アスタキサンチンは、抗酸化能力が高くビタミンＥの約１０００倍の抗酸化能力があることから、生体内の抗酸化剤や眼の調節機能改善などの用途が提案されている。例えば、アントシアニン及びアスタキサンチンを主成分とした健康食品が提案されている。 On the other hand, astaxanthin has a high antioxidant capacity and has an antioxidant capacity approximately 1000 times that of vitamin E, so its uses have been proposed as an antioxidant in the body and for improving the eye's regulatory function. For example, health foods containing anthocyanin and astaxanthin as main ingredients have been proposed.
本発明の課題は、網膜色素上皮細胞を活性酸素のダメージから有効に保護し、網膜障害を抑制することが可能な網膜保護組成物を提供することにある。 An object of the present invention is to provide a retinal protective composition that can effectively protect retinal pigment epithelial cells from damage caused by active oxygen and suppress retinal damage.
本発明者らは、網膜において重要な役割を果たす網膜色素上皮細胞の活性酸素からの保護について鋭意調査・研究した結果、アスタキサンチンと特定の他の成分とを組み合わせることにより、高い網膜色素上皮細胞保護効果が得られることを見いだし、本発明を完成するに至った。すなわち、アスタキサンチンと、網膜色素上皮細胞保護能がほとんどないか、その能力が小さい特定の他の成分を組み合わせることにより、網膜色素上皮細胞の活性酸素によるダメージをより有効に抑制することができることを見いだした。 As a result of intensive investigation and research into the protection of retinal pigment epithelial cells, which play an important role in the retina, from active oxygen, the present inventors found that by combining astaxanthin with certain other components, high protection of retinal pigment epithelial cells was achieved. The inventors have found that the present invention is effective and have completed the present invention. In other words, we discovered that by combining astaxanthin with certain other ingredients that have little or no ability to protect retinal pigment epithelial cells, it is possible to more effectively suppress damage caused by active oxygen to retinal pigment epithelial cells. Ta.
すなわち、本発明は、アスタキサンチンと、甘藷若葉処理物、葛の花処理物、ビルベリー処理物、没食子酸、グルタミン酸、ヒスチジン、メチオニン、セリン、チロシン、バリン、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ３、ビタミンＫ、カルシウム化合物、亜鉛化合物、鉄化合物、モリブデン化合物、クロム化合物、及びシェラックからなる群より選ばれる少なくとも１種の成分とを有効成分として含有することを特徴とする網膜保護組成物に関する。 That is, the present invention provides astaxanthin, a processed product of sweet potato young leaves, a processed product of kudzu flowers, a processed product of bilberry, gallic acid, glutamic acid, histidine, methionine, serine, tyrosine, valine, vitamin B6, vitamin B12, vitamin C, and vitamin D3. , vitamin K, a calcium compound, a zinc compound, an iron compound, a molybdenum compound, a chromium compound, and at least one component selected from the group consisting of shellac as an active ingredient.
本発明の網膜保護組成物は、網膜保護作用を有する眼機能維持剤として用いることができる。 The retinal protective composition of the present invention can be used as an eye function maintaining agent having a retinal protective effect.
本発明の網膜保護組成物は、有効成分を添加して得たものであってもよい。 The retinal protective composition of the present invention may be obtained by adding an active ingredient.
また、本発明の網膜保護組成物は、経口用であることが好ましく、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、又は液剤であることが好ましい。 Furthermore, the retinal protective composition of the present invention is preferably for oral use, and is preferably in the form of tablets, capsules, powders, granules, or liquids.
また、本発明は、上記本発明の網膜保護組成物を摂取させることを特徴とする眼機能維持方法（ただし、医療行為を除く）に関する。 The present invention also relates to a method for maintaining eye function (excluding medical treatment), which comprises ingesting the retinal protective composition of the present invention.
本発明の網膜保護組成物によれば、網膜色素上皮細胞を活性酸素のダメージから有効に保護し、網膜障害を抑制することができる。 According to the retinal protective composition of the present invention, retinal pigment epithelial cells can be effectively protected from damage caused by active oxygen, and retinal damage can be suppressed.
本発明の網膜保護組成物は、アスタキサンチンと、甘藷若葉処理物、葛の花処理物、ビルベリー処理物、没食子酸、グルタミン酸、ヒスチジン、メチオニン、セリン、チロシン、バリン、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ３、ビタミンＫ、カルシウム化合物、亜鉛化合物、鉄化合物、モリブデン化合物、クロム化合物、及びシェラックからなる群より選ばれる少なくとも１種の成分（以下、他成分ということがある）とを有効成分として含有することを特徴とする。アスタキサンチンと共に用いられる他成分は、１種単独で用いてもよいし、２種以上組み合わせて用いてもよい。他成分を２種以上組み合せて用いる場合、アスタキサンチンと相乗効果の高い他成分同士を組み合わせることが好ましい。 The retinal protective composition of the present invention comprises astaxanthin, a processed product of sweet potato young leaves, a processed product of kudzu flowers, a processed product of bilberry, gallic acid, glutamic acid, histidine, methionine, serine, tyrosine, valine, vitamin B6, vitamin B12, and vitamin C. , vitamin D3, vitamin K, calcium compounds, zinc compounds, iron compounds, molybdenum compounds, chromium compounds, and at least one component (hereinafter sometimes referred to as other components) selected from the group consisting of shellac as an active ingredient. It is characterized by containing. Other components used together with astaxanthin may be used alone or in combination of two or more. When using a combination of two or more other components, it is preferable to combine other components that have a high synergistic effect with astaxanthin.
本発明の網膜保護組成物は、網膜色素上皮細胞を活性酸素のダメージからより有効に保護し、網膜障害を抑制することができ、眼の加齢を遅延させ、眼の機能維持を図ることができる。また、加齢黄斑変性、網膜色素変性症、中心性網脈絡膜症、黄斑部網膜上皮形成症、黄斑円孔等の網膜疾患の発生を抑制することができる。したがって、本発明の網膜保護組成物は、眼機能維持剤、網膜保護剤、網膜障害抑制剤、網膜疾患予防剤等として用いることができる。 The retinal protective composition of the present invention can more effectively protect retinal pigment epithelial cells from damage caused by active oxygen, suppress retinal damage, delay eye aging, and maintain eye function. can. Furthermore, the occurrence of retinal diseases such as age-related macular degeneration, retinitis pigmentosa, central chorioretinopathy, macular retinal epithelial formation, and macular hole can be suppressed. Therefore, the retinal protective composition of the present invention can be used as an eye function maintaining agent, a retinal protective agent, a retinal disorder suppressant, a retinal disease preventive agent, and the like.
［アスタキサンチン］
本発明に用いられるアスタキサンチンは、カロテノイドの一種であり、抗酸化作用はビタミンＥの１０００倍といわれており、天然物由来のものであっても、合成により得られるものであってもよい。天然物由来のものとしては、例えば、ヘマトコッカス藻等の藻類、エビ・カニ等の甲殻類、サケ・タイ等の魚類などから得られるアスタキサンチンを挙げることができる。天然物由来の抽出物や化学合成品は市販されており、これら市販品を使用することができる。
[Astaxanthin]
Astaxanthin used in the present invention is a type of carotenoid, and is said to have an antioxidant effect 1000 times that of vitamin E, and may be derived from natural products or obtained synthetically. Examples of natural products include astaxanthin obtained from algae such as Haematococcus algae, crustaceans such as shrimp and crabs, and fish such as salmon and sea bream. Extracts derived from natural products and chemically synthesized products are commercially available, and these commercial products can be used.
［他成分］
（甘藷若葉処理物）
甘藷とは、ヒルガオ科に属する植物をいい、一般にサツマイモと呼ばれる。甘藷の品種は、特に限定されるものではなく、例えば、すいおう、ジョイホワイト、コガネセンガン、シロユタカ、サツマスターチ、アヤムラサキ等を挙げることができる。本発明の甘藷若葉処理物としては、甘藷若葉の粉砕物、搾汁、抽出物等の処理物を例示することができる。粉砕物としては、粉末、顆粒等が挙げられる。絞汁や抽出物は、液状であってもよいが、ペースト状や乾燥粉末として用いることもできる。抽出物は、適当な溶媒を用いて抽出することに得ることができ、溶媒としては、例えば、水（熱水）、エタノール、含水エタノールを用いることができる。
[Other ingredients]
(processed sweet potato young leaves)
Sweet potato refers to a plant belonging to the Convolvulaceae family, and is generally called sweet potato. The varieties of sweet potato are not particularly limited, and examples include Suio, Joy White, Koganesengan, Shiro Yutaka, Sweet Mustache, and Ayamurasaki. Examples of the processed product of young sweet potato leaves of the present invention include processed products such as ground products, squeezed juice, and extracts of young sweet potato leaves. Examples of the pulverized product include powder, granules, and the like. The squeezed juice or extract may be in liquid form, but it can also be used in the form of a paste or dry powder. The extract can be obtained by extraction using an appropriate solvent, and examples of the solvent that can be used include water (hot water), ethanol, and aqueous ethanol.
（葛の花処理物）
葛は、マメ科クズ属のつる性の多年草植物である。葛の花としては、蕾から全開した花までのいずれの過程で採取したものを用いてもよく、各過程で採取したものを混合して用いることもできる。葛の種類としては、特に制限はないが、プエラリア・トムソニイ（Pueraria thomsonii）、プエラリア・ロバータ（Pueraria lobata）、プエラリア・スンバーギアナ（Pueraria thunbergiana）等を例示することができる。本発明の葛の花処理物としては、葛の花の粉砕物、搾汁、抽出物等の処理物を例示することができる。粉砕物としては、粉末、顆粒等が挙げられる。絞汁や抽出物は、液状であってもよいが、ペースト状や乾燥粉末として用いることもできる。抽出物は、適当な溶媒を用いて抽出することに得ることができ、溶媒としては、例えば、水（熱水）、エタノール、含水エタノールを用いることができる。
(Kudzu flower processed product)
Kudzu is a climbing perennial plant belonging to the Fabaceae family and the genus Kudzu. Kudzu flowers may be collected at any stage from bud to fully open flower, or a mixture of kudzu flowers collected at each stage may be used. The type of kudzu is not particularly limited, but examples include Pueraria thomsonii, Pueraria lobata, and Pueraria thunbergiana. Examples of the processed product of kudzu flowers of the present invention include processed products such as crushed products, squeezed juice, and extracts of kudzu flowers. Examples of the pulverized product include powder, granules, and the like. The squeezed juice or extract may be in liquid form, but it can also be used in the form of a paste or dry powder. The extract can be obtained by extraction using an appropriate solvent, and examples of the solvent that can be used include water (hot water), ethanol, and aqueous ethanol.
（ビルベリー処理物）
ビルベリーとは、ツツジ科スノキ属の低灌木種の果実であり、ホワートルベリー、ウィンベリー、ブレーベリー、ヨーロッパブルーベリーと称されることもある。本発明のビルベリー処理物としては、ビルベリーの粉砕物、搾汁、抽出物等の処理物を例示することができる。粉砕物としては、粉末、顆粒等が挙げられる。絞汁や抽出物は、液状であってもよいが、ペースト状や乾燥粉末として用いることもできる。抽出物は、適当な溶媒を用いて抽出することに得ることができ、溶媒としては、例えば、水（熱水）、エタノール、含水エタノールを用いることができる。
(Bilberry processed product)
Bilberry is the fruit of a low-shrub species in the Ericaceae family, genus Vaccinium, and is sometimes called whirtleberry, winberry, blayeberry, or European blueberry. Examples of the processed bilberry products of the present invention include processed products such as crushed bilberry products, squeezed bilberry juice, and extracts. Examples of the pulverized product include powder, granules, and the like. The squeezed juice or extract may be in liquid form, but it can also be used in the form of a paste or dry powder. The extract can be obtained by extraction using an appropriate solvent, and examples of the solvent that can be used include water (hot water), ethanol, and aqueous ethanol.
（その他）
没食子酸は、植物由来のものであってもよいが、これに限られない。また、グルタミン酸、ヒスチジン、メチオニン、セリン、チロシン、バリン等のアミノ酸は、塩の形態を含む。塩としては、例えば、ナトリウム塩、塩酸塩等を挙げることができる。
(others)
Gallic acid may be derived from plants, but is not limited thereto. Furthermore, amino acids such as glutamic acid, histidine, methionine, serine, tyrosine, and valine include salt forms. Examples of the salt include sodium salt, hydrochloride, and the like.
本発明の網膜保護組成物は、網膜保護作用を有する眼機能維持剤として用いることができ、かかる眼機能維持剤は、アスタキサンチン及び所定の他成分を含有し、眼機能維持に用いられる点において、製品として他の製品と区別することができるものであれば特に制限されるものではない。例えば、本発明に係る製品の本体、包装、説明書、宣伝物のいずれかに網膜保護効果、網膜障害抑制効果、網膜疾患予防効果等の眼の機能維持効果の機能がある旨を表示したものが本発明の範囲に含まれる。例えば、医薬品（医薬部外品を含む）や、化粧品や、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品等の所定機関より効能の表示が認められた機能性食品などのいわゆる健康食品等を挙げることができる。いわゆる健康食品においては、「眼（目）の黄斑部の色素量を維持する」、「加齢による眼（目）の悩みに」、「光の刺激から眼（目）を保護する」、「ブルーライト対策に」、「液晶ライト対策に」、「読書、パソコン、スマホに疲れたら」、「ぼんやりが気になる方に」、「コントラスト感度の改善に」、「疲れ眼（目）に」、「眼（目）の調子を整える」、「眼（目）の疲れを取る」等を表示したものを例示することができる。本発明の網膜保護組成物は、上記の効果が気になる人であれば性別や年齢に関係なく摂取することができるが、本発明の網膜保護組成物の効果をより有効に享受することができることから、疾病者を除く健常者が摂取することが望ましい。また、長時間、眼を酷使する作業を行う者が摂取することが望ましく、特にパソコンなどで長時間作業を行うデスクワーク者が摂取することが望ましい。 The retinal protective composition of the present invention can be used as an eye function maintaining agent having a retinal protective effect, and the eye function maintaining agent contains astaxanthin and other predetermined components, and is used for maintaining eye function. There are no particular restrictions on the product as long as it can be distinguished from other products. For example, the main body, packaging, instruction manual, or advertising material of the product according to the present invention indicates that it has an eye function maintenance effect such as a retinal protective effect, a retinal disorder suppressing effect, or a retinal disease preventive effect. are included within the scope of the present invention. For example, so-called health foods such as pharmaceuticals (including quasi-drugs), cosmetics, and functional foods whose efficacy has been approved by designated organizations such as foods for specified health uses, foods with nutritional function claims, and foods with functional claims. can be mentioned. So-called health foods include things like ``maintaining the amount of pigment in the macular area of the eye'', ``relieving eye problems due to aging'', ``protecting the eye from light stimulation'', and `` ``For measures against blue light'', ``For measures against LCD light'', ``For those who are tired from reading, computers, and smartphones'', ``For those who are concerned about blurriness'', ``For improving contrast sensitivity'', ``For tired eyes (eyes)'' , ``Adjust the condition of the eyes'', ``Relieve eye fatigue'', etc. can be exemplified. The retinal protective composition of the present invention can be taken by anyone who is concerned about the above-mentioned effects regardless of gender or age; however, the retinal protective composition of the present invention may be taken more effectively. Therefore, it is desirable that healthy people, excluding sick people, take it. It is also desirable for people who do work that puts a lot of strain on their eyes to take it for long periods of time, especially those who work at desks and work on computers for long periods of time.
また、本発明の網膜保護組成物の形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、液剤、粒状剤、棒状剤、板状剤、ブロック状剤、固形状剤、丸状剤、ペースト状剤、クリーム状剤、カプレット状剤、ゲル状剤、チュアブル状剤、スティック状剤等を挙げることができる。これらの中でも、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、液剤の形態が特に好ましい。具体的には、サプリメントや、ペットボトル、缶、瓶等に充填された容器詰飲料や、水（湯）、牛乳、果汁、青汁等に溶解して飲むためのインスタント粉末飲料、インスタント顆粒飲料を例示することができる。これらは食事の際などに手軽に飲用しやすく、また嗜好性を高めることができるという点で好ましい。 In addition, the retinal protective composition of the present invention may be in the form of, for example, a tablet, capsule, powder, granule, liquid, granule, rod, plate, block, solid, or pill. , paste-like agents, cream-like agents, caplet-like agents, gel-like agents, chewable agents, stick-like agents, and the like. Among these, tablet, capsule, powder, granule, and liquid forms are particularly preferred. Specifically, supplements, packaged beverages filled in plastic bottles, cans, bottles, etc., instant powdered beverages and instant granular beverages that can be dissolved in water (hot water), milk, fruit juice, green juice, etc. can be exemplified. These are preferable because they are easy to drink during meals and can enhance palatability.
本発明の網膜保護組成物におけるアスタキサンチン及び他成分（有効成分）の含有量としては、その効果の奏する範囲で適宜含有させればよい。 As for the content of astaxanthin and other ingredients (active ingredients) in the retinal protection composition of the present invention, they may be included as appropriate within the range where their effects are achieved.
一般的には、本発明の網膜保護組成物が医薬品やサプリメント（錠剤，カプセル剤）の場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．０１～１００質量％含まれていることが好ましく、０．１～８５質量％含まれていることがより好ましく、０．５～７０質量％含まれていることがさらに好ましい。 Generally, when the retinal protective composition of the present invention is a medicine or a supplement (tablet, capsule), it is preferable that the active ingredient is contained in an amount of 0.01 to 100% by mass of the total on a dry mass basis. , more preferably 0.1 to 85% by mass, and even more preferably 0.5 to 70% by mass.
本発明の網膜保護組成物が容器詰飲料（液剤）である場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．０１～１５質量％含まれていることが好ましく、０．０３～１２．５質量％含まれていることがより好ましく、０．０５～１０質量％含まれていることがさらに好ましい。 When the retinal protective composition of the present invention is a packaged beverage (liquid), it is preferable that the active ingredient is contained in an amount of 0.01 to 15% by weight, and preferably 0.03 to 12% by weight, based on the total dry weight. The content is more preferably 5% by mass, and even more preferably 0.05 to 10% by mass.
また、本発明の網膜保護組成物がインスタント粉末飲料（粉末剤）、インスタント顆粒飲料（顆粒剤）である場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．１～８０質量％含まれていることが好ましく、０．５～７０質量％含まれていることがより好ましく、１～６０質量％含まれていることがさらに好ましい。 Furthermore, when the retinal protective composition of the present invention is an instant powder drink (powder) or an instant granule drink (granule), the active ingredient is contained in an amount of 0.1 to 80% by mass of the total in terms of dry mass. The content is preferably 0.5 to 70% by mass, more preferably 1 to 60% by mass.
本発明の効果をより有効に発揮させるためには、有効成分が乾燥質量換算で本発明の網膜保護組成物全体（水分を除く）の８０質量％以上含まれていることが好ましく、９０質量％以上含まれていることがより好ましく、９５質量％以上含まれていることがさらに好ましく、１００質量％であることが特に好ましい。 In order to more effectively exhibit the effects of the present invention, it is preferable that the active ingredient is contained in an amount of 80% by mass or more of the entire retinal protective composition of the present invention (excluding water) in terms of dry mass, and preferably 90% by mass. It is more preferable that the content is at least 95% by mass, even more preferably 95% by mass or more, and particularly preferably 100% by mass.
本発明の網膜保護組成物の摂取量としては特に制限はないが、本発明の効果をより顕著に発揮させる観点から、１日当たりの有効成分の摂取量が、０．１ｍｇ／日以上となるように摂取することが好ましく、１ｍｇ／日以上となるように摂取することがより好ましく、２ｍｇ／日以上となるように摂取することが特に好ましい。その上限は特に制限されないが、例えば、４ｇ／日であり、好ましくは２ｇ／日である。 There is no particular restriction on the amount of the retinal protective composition of the present invention to be ingested, but from the viewpoint of more significantly exerting the effects of the present invention, the amount of active ingredient ingested per day should be 0.1 mg/day or more. It is preferable to ingest it at a dose of 1 mg/day or more, more preferably at a dose of 1 mg/day or more, and particularly preferably at a dose of 2 mg/day or more. The upper limit is not particularly limited, but is, for example, 4 g/day, preferably 2 g/day.
本発明の網膜保護組成物は、1日の摂取量が前記摂取量となるように、１つの容器に、又は例えば２～３の複数の容器に分けて、1日分として収容することができる。 The retinal protective composition of the present invention can be stored in one container or divided into a plurality of containers, for example, 2 to 3, so that the daily intake amount is the above-mentioned intake amount. .
アスタキサンチン及び他成分の配合質量比としては、乾燥質量換算で、０．５：１～７０：１の範囲であることが好ましく、０．７５：１～６０：１の範囲であることがより好ましく、１：１～６０：１の範囲であることがさらに好ましく、１：１～５０：１の範囲であることが特に好ましい。アスタキサンチン及び他成分の配合比が、上記範囲であることにより、本発明の効果をより有効に発揮することができる。 The blended mass ratio of astaxanthin and other components is preferably in the range of 0.5:1 to 70:1, more preferably in the range of 0.75:1 to 60:1, in terms of dry mass. , more preferably in the range of 1:1 to 60:1, particularly preferably in the range of 1:1 to 50:1. When the blending ratio of astaxanthin and other components is within the above range, the effects of the present invention can be more effectively exhibited.
本発明の網膜保護組成物は、必要に応じて、経口剤として許容される有効成分以外の成分を添加して、公知の方法によって製造することができる。 The retinal protective composition of the present invention can be produced by a known method by adding ingredients other than the active ingredients that are acceptable for oral administration, if necessary.
また、本発明の経口剤としての網膜保護組成物としては、有効成分を含有する網膜保護組成物の他、食品に対して有効成分を添加して得た網膜保護組成物（網膜保護食品）を挙げることができ、例えば、通常の食品（天然の食品を含む）に比して本発明の有効成分含有量を増加させた食品や、本発明の有効成分を通常含まない食品に対して有効成分を添加した食品を挙げることができる。有効成分の添加は、それぞれの成分を別々に添加してもよいし、同時に添加してもよく、また、有効成分以外の他の成分と共に添加してもよい。 In addition to retinal protective compositions containing active ingredients, retinal protective compositions as oral preparations of the present invention include retinal protective compositions obtained by adding active ingredients to foods (retinal protective foods). For example, foods with an increased content of the active ingredient of the present invention compared to normal foods (including natural foods), or foods that do not normally contain the active ingredient of the present invention. Examples include foods that have been added with. The active ingredients may be added separately, simultaneously, or together with other ingredients other than the active ingredients.
本発明の網膜保護食品としては、例えば、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料、スムージー、青汁等の飲料；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、中華麺、即席麺等の麺類；飴、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子、パン等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳、ヨーグルト等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及びその加工食品；ソース、醤油等の調味料；カレー、シチュー、親子丼、お粥、雑炊、中華丼、かつ丼、天丼、牛丼、ハヤシライス、オムライス、おでん、マーボドーフ、餃子、シューマイ、ハンバーグ、ミートボール、各種ソース、各種スープ等のレトルトパウチ食品などを挙げることができる。 Examples of the retinal protective food of the present invention include beverages such as carbonated drinks, nutritional drinks, fruit drinks, lactic acid drinks, smoothies, and green juice; frozen desserts such as ice cream, ice sorbet, and shaved ice; soba, udon, harusame, and Chinese noodles. , noodles such as instant noodles; confectionery such as candies, candies, gum, chocolate, tablets, snack foods, biscuits, jellies, jams, creams, baked goods, bread; processed marine and livestock foods such as kamaboko, ham, sausage; Dairy products such as processed milk, fermented milk, and yogurt; Oils and fats such as salad oil, tempura oil, margarine, mayonnaise, shortening, whipped cream, and dressing; and processed foods thereof; Seasonings such as sauces and soy sauce; Curry, stew, oyakodon, Examples include retort pouch foods such as porridge, rice porridge, Chinese rice bowl, katsudon, tempura bowl, beef bowl, hashed rice, omelet rice, oden, marbodorf, gyoza, shumai, hamburger steak, meatballs, various sauces, and various soups.
本発明の眼機能維持方法としては、上記説明した本発明の網膜保護組成物を摂取させることを特徴とするが、医療行為は含まれない。本発明の網膜保護組成物は、疾病者を除く健常者が摂取させることが望ましい。また、長時間、眼を酷使する作業を行う者に摂取させることが望ましく、特にパソコンなどで長時間作業を行うデスクワーク者に摂取させることが望ましい。本発明の方法としては、例えば、レストラン等の飲食店において、本発明の網膜保護食品を提供することにより、眼機能維持効果を得る方法を挙げることができる。 The eye function maintenance method of the present invention is characterized by ingesting the above-described retinal protective composition of the present invention, but does not include medical treatment. It is desirable that the retinal protective composition of the present invention be ingested by healthy people, excluding diseased people. It is also desirable to have it ingested by people who do work that puts a lot of strain on their eyes for long periods of time, and it is especially desirable to have it ingested by people who work at desks and work on computers for long periods of time. Examples of the method of the present invention include a method of obtaining the effect of maintaining eye function by providing the retinal protective food of the present invention in a restaurant or other eating establishment.
以下、本発明を実施例に基づき説明する。
［実施例１］
１．細胞培養
（１）３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター内で、７５ｃｍ２フラスコを用いて、ヒト網膜色素上皮細胞（ＡＲＰＥ－１９）を培養した。培地はＤＭＥＭ培地とＦ－１２ＨＡＭ培地を１：１で混合し、ＦＢＳが１０％となるように調製したものを用いた。
（２）トリプシン処理により浮遊させた細胞を、７５ｃｍ２フラスコから９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅの各ｗｅｌｌに１．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で播種した。
（３）３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター内で７２時間前培養した。
（４）各ｗｅｌｌより培地を除去後、所定濃度に調製した被験物質含有培地を２００μＬずつ添加し、ＣＯ２インキュベーター内で２０時間培養した。
Hereinafter, the present invention will be explained based on examples.
[Example 1]
1. Cell Culture (1) Human retinal pigment epithelial cells (ARPE-19) were cultured in a 75 cm 2 flask at 37° C. in a 5% CO 2 incubator. The medium used was a mixture of DMEM medium and F-12HAM medium at a ratio of 1:1, and the FBS content was adjusted to 10%.
(2) Cells suspended by trypsin treatment were seeded from a 75 cm 2 flask into each well of a 96-well plate at a cell density of 1.0×10 4 cells/well.
(3) Precultured for 72 hours at 37°C in a 5% CO 2 incubator.
(4) After removing the medium from each well, 200 μL of a test substance-containing medium prepared to a predetermined concentration was added and cultured in a CO 2 incubator for 20 hours.
なお、アスタキサンチンと他成分との併用サンプルについては、それぞれ２倍濃度の被験物質含有培地を調製し、１００μＬずつ添加することで目的の濃度とした。また、ｃｏｎｔｒｏｌは、被験物質をＤＭＳＯに溶解したものに対しては０．５％ＤＭＳＯ含有培地を用いて調製し、その他の被験物質に対しては０．２５％ＤＭＳＯ含有培地を用いて調製した。 For samples containing astaxanthin and other components in combination, a medium containing the test substance at twice the concentration was prepared, and 100 μL of each was added to achieve the desired concentration. Control was prepared using a medium containing 0.5% DMSO for the test substance dissolved in DMSO, and a medium containing 0.25% DMSO for other test substances. .
アスタキサンチンについては、市販のアスタキサンチンを用いた。アスタキサンチンと共に用いる他成分としては、表１～表４に示す物質を用いた。 As for astaxanthin, commercially available astaxanthin was used. As other ingredients used together with astaxanthin, the substances shown in Tables 1 to 4 were used.
（５）２０時間培養後、無血清培地で１．５ｍＭまたは２．５ｍＭに調製した過酸化水素水を５０μＬ添加し２０時間培養した。他成分が、植物素材、ビタミン類のものについては、過酸化水素水終濃度３００μＭとし、他成分が、アミノ酸、ミネラル類、ポリフェノールのものについては、過酸化水素水終濃度５００μＭとした。ｃｏｎｔｒｏｌについては、試験区と過酸化水素水終濃度を合わせた。 (5) After culturing for 20 hours, 50 μL of hydrogen peroxide solution adjusted to 1.5mM or 2.5mM in a serum-free medium was added and cultured for 20 hours. When the other ingredients were plant materials and vitamins, the final concentration of the hydrogen peroxide solution was 300 μM, and when the other ingredients were amino acids, minerals, and polyphenols, the final concentration of the hydrogen peroxide solution was 500 μM. As for control, the final concentration of hydrogen peroxide solution was the same as that of the test group.
２．ＴＧＦβ１の発現解析
（１）２０時間培養後、培養した細胞から培地を除去し、ＣｅｌｌＡｍｐＴＭ Ｄｉｒｅｃｔ ＲＮＡ Ｐｒｅｐ Ｋｉｔ ｆｏｒ ＲＴ－ＰＣＲ（Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ）（Ｔａｋａｒａ製）を用いて、ＲＮＡを回収し、Ｎ＝３のサンプルを混合して１つのＲＮＡサンプルとした。
（２）ＲＮＡサンプルをＲｎａｓｅ－ｆｒｅｅ ｗａｔｅｒを用いて３倍希釈した。
（３）検量線を作成するため、１つのサンプルを３倍、９倍希釈した。Ｏｎｅ Ｓｔｅｐ ＳＹＢＲ（登録商標） ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔＴＭ ＲＴ－ＰＣＲ Ｋｉｔ ＩＩ（Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ）（Ｔａｋａｒａ製）を用いてＰＣＲを実施した。プライマーはＴＧＦβ１（ＱＩＡＧＥＮ製）とＲＰＬＰ０（ＱＩＡＧＥＮ製）を使用した。
（４）１倍、３倍、９倍希釈したサンプルから作成した検量線を用いて、各サンプルにおける遺伝子発現量を算出した。解析は相対定量により行い、ＲＰＬＰ０（ハウスキーピング遺伝子）を内部標準としてｍＲＮＡ量を補正した。
2. Expression analysis of TGFβ1 (1) After culturing for 20 hours, the medium was removed from the cultured cells, RNA was collected using CellAmp TM Direct RNA Prep Kit for RT-PCR (Real Time) (manufactured by Takara), and N= The three samples were mixed to form one RNA sample.
(2) The RNA sample was diluted 3 times using Rnase-free water.
(3) To create a calibration curve, one sample was diluted 3 times and 9 times. PCR was performed using One Step SYBR (registered trademark) PrimeScript ™ RT-PCR Kit II (Perfect Real Time) (manufactured by Takara). The primers used were TGFβ1 (manufactured by QIAGEN) and RPLP0 (manufactured by QIAGEN).
(4) Gene expression levels in each sample were calculated using a standard curve created from samples diluted 1-fold, 3-fold, and 9-fold. The analysis was performed by relative quantification, and the amount of mRNA was corrected using RPLP0 (housekeeping gene) as an internal standard.
その結果を表１～表４、及び図１～図８に示す。 The results are shown in Tables 1 to 4 and FIGS. 1 to 8.
各図は、左から、「コントロール（過酸化水素添加）」、「アスタキサンチンの単独添加」、「他成分の単独添加」、「アスタキサンチン＋他成分添加」の結果を表す。また、グラフ下部の説明における数値は、サンプル濃度を示し、例えば、図１の左上のグラフの「ＡＳＴ_２．５」は、アスタキサンチン２．５（μｇ／ｍＬ）を示す。添加成分の濃度単位は、すべてのグラフにおいて、μｇ／ｍＬである。縦軸は「％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ」を示す。 Each figure represents, from the left, the results of "control (addition of hydrogen peroxide)," "addition of astaxanthin alone," "addition of other components alone," and "addition of astaxanthin + other components." Further, the numerical value in the explanation at the bottom of the graph indicates the sample concentration; for example, "AST_2.5" in the upper left graph of FIG. 1 indicates astaxanthin 2.5 (μg/mL). The concentration unit of added components is μg/mL in all graphs. The vertical axis indicates "% of control".
甘藷については、生若葉の微粉砕末を用いた。
葛については、花の熱水抽出物（乾燥粉末）を用いた。
ビルベリーについては、市販品の果実の乾燥粉末を用いた。
ブルーベリーについては、市販品の果実の乾燥粉末を用いた。
For sweet potato, finely ground powder of fresh young leaves was used.
For kudzu, a hot water extract (dry powder) of the flower was used.
For bilberry, a commercially available dried fruit powder was used.
For blueberries, commercially available dried fruit powder was used.
表１～表４、及び図１～図８に示すように、アスタキサンチンと、本発明の特定の他成分を組み合わせることにより、ヒト網膜色素上皮細胞（ＡＲＰＥ－１９）の酸化ストレスによるＴＧＦβ１の発現量が相乗的に低下した。したがって、本発明の網膜保護組成物によれば、網膜色素上皮細胞を有効に保護することができる。 As shown in Tables 1 to 4 and Figures 1 to 8, by combining astaxanthin and specific other components of the present invention, the expression level of TGFβ1 due to oxidative stress in human retinal pigment epithelial cells (ARPE-19) decreased synergistically. Therefore, according to the retinal protective composition of the present invention, retinal pigment epithelial cells can be effectively protected.
［実施例２］（錠剤の製造）
下記成分からなるタブレット（２００ｍｇ）を製造した。
[Example 2] (Manufacture of tablets)
A tablet (200 mg) consisting of the following ingredients was manufactured.
アスタキサンチン ４ｍｇ
ビルベリー抽出物 ６０ｍｇ
ブルーベリー抽出物 ５０ｍｇ
甘藷若葉末 ５０ｍｇ
ステアリン酸カルシウム ５ｍｇ
アルギニン １．５ｍｇ
グルタミン酸 １．５ｍｇ
トリプトファン １ｍｇ
シェラック ５ｍｇ
ビタミンＢ６ ０．５ｍｇ
ビタミンＢ１２ ０．５ｍｇ
塩化鉄 ０．２５ｍｇ
グルコン酸亜鉛 ０．５ｍｇ
セルロース 残部
Astaxanthin 4mg
Bilberry extract 60mg
Blueberry extract 50mg
Sweet potato young leaf powder 50mg
Calcium stearate 5mg
Arginine 1.5mg
Glutamic acid 1.5mg
Tryptophan 1mg
Shellac 5mg
Vitamin B6 0.5mg
Vitamin B12 0.5mg
Iron chloride 0.25mg
Zinc gluconate 0.5mg
cellulose remainder
上記錠剤は一日に１粒を噛まずに水と共に服用する。 Take one tablet per day with water without chewing.
［実施例３］（カプセル剤の製造）
下記混合物３００ｍｌをソフトカプセルに封入し、カプセル剤を製造した。
[Example 3] (Manufacture of capsules)
300 ml of the following mixture was encapsulated in soft capsules to produce capsules.
アスタキサンチン ２％
紅花油 ５０％
ビルベリーエキス ２０％
ブルーベリーエキス １５％
ミツロウ １０％
葛の花エキス ２％
水溶性β－カロテン末 ０．２％
ビタミンＢ１２ ０．０１％
ビオチン ０．０１％
没食子酸 ０．０１％
ビタミンＥ ０．０１％
塩化鉄 ０．０１％
ゼラチン 残部
Astaxanthin 2%
Safflower oil 50%
Bilberry extract 20%
Blueberry extract 15%
Beeswax 10%
Kuzu flower extract 2%
Water-soluble β-carotene powder 0.2%
Vitamin B12 0.01%
Biotin 0.01%
Gallic acid 0.01%
Vitamin E 0.01%
Iron chloride 0.01%
gelatin remainder
上記カプセル剤は、一日に１粒を噛まずに水と共に服用する。 The above capsule should be taken one capsule a day with water without chewing.
［実施例４］（顆粒剤の製造）
下記成分を混合して常法により顆粒剤（３０００ｍｇ）を製造した。
[Example 4] (Manufacture of granules)
Granules (3000 mg) were prepared by mixing the following ingredients in a conventional manner.
アスタキサンチン ３ｍｇ
没食子酸 ５０ｍｇ
アスパルテーム ５００ｍｇ
グルタミン酸 ５０ｍｇ
チロシン ５０ｍｇ
バリン ３０ｍｇ
ビタミンＣ １０００ｍｇ
ビタミンＤ３ １０ｍｇ
塩化カルシウム ２ｍｇ
塩化モリブデン １ｍｇ
デンプン ３４０ｍｇ
麦芽糖 残部
Astaxanthin 3mg
Gallic acid 50mg
Aspartame 500mg
Glutamic acid 50mg
Tyrosine 50mg
Valine 30mg
Vitamin C 1000mg
Vitamin D3 10mg
Calcium chloride 2mg
Molybdenum chloride 1mg
Starch 340mg
maltose remainder
上記顆粒剤は一日に１包を水と共に服用する。 Take one packet of the above granules a day with water.
［実施例６］（液剤の製造）
下記成分からなる液剤（３０ｍＬ）を製造した。
[Example 6] (Production of liquid agent)
A liquid preparation (30 mL) consisting of the following components was produced.
アスタキサンチン ４ｍｇ
エリスリトール ２５０ｍｇ
ビルベリー抽出物 ２００ｍｇ
カシス抽出物 ２００ｍｇ
ビタミンＣ １２００ｍｇ
クエン酸 １５０ｍｇ
バリン ２０ｍｇ
ビタミンＫ ５ｍｇ
塩化鉄 ０．５ｍｇ
水 残部
Astaxanthin 4mg
Erythritol 250mg
Bilberry extract 200mg
Blackcurrant extract 200mg
Vitamin C 1200mg
Citric acid 150mg
Valine 20mg
Vitamin K 5mg
Iron chloride 0.5mg
water remainder
上記液剤は一日１瓶を飲用する。 Drink one bottle of the above solution a day.
本発明の網膜保護組成物は、高い網膜保護効果を有し、経口剤として用いることができることから、本発明の産業上の有用性は高い。 The retinal protective composition of the present invention has a high retinal protective effect and can be used as an oral preparation, so the industrial utility of the present invention is high.
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