JP6736137B2 - Retinal protection composition - Google Patents
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Description
本発明は、網膜保護組成物に係り、詳しくは、ルテイン及び特定の他の成分を有効成分とする網膜保護組成物に関する。 The present invention relates to a retinal protection composition, and more particularly, to a retinal protection composition containing lutein and certain other components as active ingredients.
視細胞の修復や再生に関与している網膜色素上皮の機能は、加齢とともに低下していくことが知られている。若い頃は、体内に、細胞内に発生した活性酸素を分解するＳＯＤ酵素が十分にあり、活性酸素による悪影響を防いでいるが、加齢とともにＳＯＤ酵素の働きが低下し、網膜色素上皮の機能も低下することになる。 It is known that the function of the retinal pigment epithelium, which is involved in repair and regeneration of photoreceptor cells, decreases with age. When I was younger, there were enough SOD enzymes in my body to decompose active oxygen generated in cells, which prevented the adverse effects of active oxygen, but the function of SOD enzyme decreased with age, and the function of retinal pigment epithelium decreased. Will also decrease.
一方、ルテインは、網膜の黄斑部や水晶体にゼアキサンチンと共に存在し、ＳＯＤ様作用を有し、眼の中に生成した活性酸素を除去するといわれており、眼の機能維持や、白内障、加齢黄斑変性等の予防・治療に効果があることが知られている（例えば、特許文献１〜２参照）。 On the other hand, lutein exists along with zeaxanthin in the macula and the lens of the retina, has an SOD-like action, and is said to remove active oxygen generated in the eye, and maintains the function of the eye, cataract, and age-related macula. It is known to be effective in preventing and treating degeneration and the like (see, for example, Patent Documents 1 and 2).
本発明の課題は、網膜色素上皮細胞を活性酸素のダメージから有効に保護し、網膜障害を抑制することが可能な網膜保護組成物を提供することにある。 An object of the present invention is to provide a retinal protective composition capable of effectively protecting retinal pigment epithelial cells from damage of active oxygen and suppressing retinal disorders.
本発明者らは、網膜において重要な役割を果たす網膜色素上皮細胞の活性酸素からの保護について鋭意調査・研究した結果、ルテインと特定の他の成分とを組み合わせることにより、高い網膜色素上皮細胞保護効果が得られることを見いだし、本発明を完成するに至った。すなわち、ルテインと、網膜色素上皮細胞保護能がほとんどないか、その能力が小さい特定の他の成分を組み合わせることにより、網膜色素上皮細胞の活性酸素によるダメージをより有効に抑制することができることを見いだした。 As a result of diligent investigations and studies on protection of retinal pigment epithelial cells that play an important role in the retina from active oxygen, the present inventors have found that by combining lutein with a specific other component, high retinal pigment epithelial cell protection can be achieved. It was found that the effect was obtained, and the present invention was completed. That is, it was found that the damage of retinal pigment epithelial cells due to active oxygen can be more effectively suppressed by combining lutein with other specific components having little or little ability to protect retinal pigment epithelial cells. It was
すなわち、本発明は、ルテインと、下記（ａ）〜（ｄ）からなる群より選ばれる少なくとも１種の成分とを有効成分として含有することを特徴とする網膜保護組成物に関する。
（ａ）葛、稲、及びココヤシから選ばれる少なくとも１種の植物素材
（ｂ）アルギニン、フェニルアラニン、セリン、トレオニン、トリプトファン、及びチロシンから選ばれる少なくとも１種のアミノ酸
（ｃ）没食子酸、及びクロロゲン酸から選ばれる少なくとも１種のポリフェノール
（ｄ）ビタミンＢ１、ビタミンＤ３、ビオチン、ビタミンＫ、カルシウム、マンガン、亜鉛、鉄、モリブデン、及びクロムから選ばれる少なくとも１種のビタミン・ミネラル類
That is, the present invention relates to a retinal protection composition containing lutein and at least one component selected from the group consisting of the following (a) to (d) as active ingredients.
(A) at least one plant material selected from kudzu, rice, and coconut (b) at least one amino acid selected from arginine, phenylalanine, serine, threonine, tryptophan, and tyrosine (c) gallic acid and chlorogenic acid At least one polyphenol selected from (d) vitamin B1, vitamin D3, biotin, vitamin K, at least one vitamin/mineral selected from calcium, manganese, zinc, iron, molybdenum, and chromium
本発明の網膜保護組成物は、網膜保護作用を有する眼機能維持剤として用いることができる。 The retinal protective composition of the present invention can be used as an eye function maintaining agent having a retinal protective action.
本発明の網膜保護組成物は、ルテインと（ａ）〜（ｄ）からなる群より選ばれる少なくとも１種の成分とからなる有効成分を添加して得たものであってもよい。 The retinal protection composition of the present invention may be obtained by adding an active ingredient comprising lutein and at least one component selected from the group consisting of (a) to (d).
また、本発明の網膜保護組成物は、経口用であることが好ましく、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、又は液剤であることが好ましい。 The retinal protection composition of the present invention is preferably for oral use, and is preferably a tablet, capsule, powder, granule, or liquid.
また、本発明は、上記本発明の網膜保護組成物を摂取させることを特徴とする眼機能維持方法（ただし、医療行為を除く）に関する。 The present invention also relates to a method for maintaining eye function (however, excluding medical practice), which comprises ingesting the above-mentioned retinal protection composition of the present invention.
本発明の網膜保護組成物によれば、網膜色素上皮細胞を活性酸素のダメージから有効に保護し、網膜障害を抑制することができる。 The retinal protective composition of the present invention can effectively protect retinal pigment epithelial cells from damage of active oxygen and suppress retinal damage.
本発明の網膜保護組成物は、ルテインと、下記（ａ）〜（ｄ）からなる群より選ばれる少なくとも１種の成分（以下、他成分ということがある）とを有効成分として含有することを特徴とする。ルテインと共に用いられる下記（ａ）〜（ｄ）の成分は、１種単独（例えば（ａ）成分）で用いてもよいし、２種以上組み合わせて用いてもよい。他成分を２種以上組み合せて用いる場合、ルテインと相乗効果の高い他成分同士を組み合わせることが好ましい。 The retinal protection composition of the present invention contains lutein and at least one component selected from the group consisting of the following (a) to (d) (hereinafter sometimes referred to as other components) as active ingredients: Characterize. The following components (a) to (d) used together with lutein may be used alone (for example, the component (a)), or may be used in combination of two or more kinds. When two or more other components are used in combination, it is preferable to combine the other components having a high synergistic effect with lutein.
本発明の網膜保護組成物は、網膜色素上皮細胞を活性酸素のダメージからより有効に保護し、網膜障害を抑制することができ、眼の加齢を遅延させ、眼の機能維持を図ることができる。また、加齢黄斑変性、網膜色素変性症、中心性網脈絡膜症、黄斑部網膜上皮形成症、黄斑円孔等の網膜疾患の発生を抑制することができる。したがって、本発明の網膜保護組成物は、眼機能維持剤、網膜保護剤、網膜障害抑制剤、網膜疾患予防剤等として用いることができる。 The retinal protective composition of the present invention more effectively protects retinal pigment epithelial cells from damage of active oxygen, can suppress retinal disorders, delay aging of the eye, and maintain the function of the eye. it can. Further, it is possible to suppress the development of retinal diseases such as age-related macular degeneration, retinitis pigmentosa, central retinochoroidopathy, macular retinal epithelium, and macular hole. Therefore, the retinal protection composition of the present invention can be used as an eye function maintenance agent, a retinal protection agent, a retinal disorder inhibitor, a retinal disease preventive agent, and the like.
［ルテイン］
本発明に用いられるルテインは、植物の葉、花、果実等に存在するカロテノイドの一種であり、植物由来のものを用いることができる。例えば、ルテインを多く含むマリーゴールド由来のものを使用することができる。また、合成により製造されたものを用いることもできる。
[Lutein]
Lutein used in the present invention is a kind of carotenoid existing in leaves, flowers, fruits and the like of plants, and plant-derived ones can be used. For example, one derived from marigold containing a large amount of lutein can be used. Moreover, the thing manufactured by synthesis can also be used.
［他成分］
（ａ）植物素材
本発明の網膜保護組成物においては、ルテインと共に、有効成分として、葛、稲、及びココヤシから選ばれる少なくとも１種の植物素材を用いることが好ましい。
[Other ingredients]
(A) Plant Material In the retinal protection composition of the present invention, it is preferable to use at least one plant material selected from kudzu, rice, and coconut as an active ingredient together with lutein.
これらの植物素材は、葉、茎、根、花、実、幹、枝等、植物のいずれの部位であってもよく、植物素材そのもの（乾燥物を含む）の他、その粉砕物、搾汁、抽出物等の植物素材処理物を用いることができる。粉砕物としては、粉末、顆粒等が挙げられる。絞汁や抽出物は、液状であってもよいが、ペースト状や乾燥粉末として用いることもできる。抽出物は、適当な溶媒を用いて抽出することに得ることができ、溶媒としては、例えば、水（熱水）、エタノール、含水エタノールを用いることができる。これらの植物素材は、市販されているものを使用することができる。 These plant materials may be any part of the plant such as leaves, stems, roots, flowers, fruits, trunks, branches, etc., in addition to the plant materials themselves (including dried products), crushed products and squeezed juices thereof. It is possible to use a processed plant material such as an extract. Examples of the crushed product include powder and granules. The squeezed juice or the extract may be liquid, but may be used as a paste or a dry powder. The extract can be obtained by extraction with a suitable solvent, and as the solvent, for example, water (hot water), ethanol, or hydrous ethanol can be used. As these plant materials, commercially available products can be used.
葛は、マメ科クズ属のつる性の多年草植物である。本発明の植物素材として用いる部位としては、花、根が好ましく、花が特に好ましい。葛花としては、蕾から全開した花までのいずれの過程で採取したものを用いてもよく、各過程で採取したものを混合して用いることもできる。葛の種類としては、特に制限はないが、プエラリア・トムソニイ（Pueraria thomsonii）、プエラリア・ロバータ（Pueraria lobata）、プエラリア・スンバーギアナ（Pueraria thunbergiana）等を例示することができる。 Kuzu is a climbing perennial plant of the genus Leguminosae. As the part used as the plant material of the present invention, flowers and roots are preferable, and flowers are particularly preferable. As Katsura flowers, those collected in any process from buds to fully-opened flowers may be used, and those collected in each process may be mixed and used. The type of kudzu is not particularly limited, but examples thereof include Pueraria thomsonii, Pueraria lobata, and Pueraria thunbergiana.
稲は、イネ科イネ属の植物である。本発明の植物素材として用いる部位としては、玄米の外皮や胚が好ましく、具体的には、玄米を精白する際に副産物として得られる米ぬかを用いることが好ましい。稲の種類としては、特に制限はなく、ジャポニカ種、インディカ種等を挙げることができる。 Rice is a plant belonging to the genus Poaceae. As the part used as the plant material of the present invention, the hulls and embryos of brown rice are preferable, and specifically, rice bran obtained as a by-product when whitening brown rice is preferably used. The type of rice is not particularly limited, and examples thereof include Japonica variety and Indica variety.
ココヤシは、ヤシ科の植物であり、本発明の植物素材として用いる部位としては、果実（胚乳）が好ましい。 Coconut is a plant of the palm family, and the part used as the plant material of the present invention is preferably fruit (endosperm).
（ｂ）アミノ酸
本発明の網膜保護組成物においては、ルテインと共に、有効成分として、アルギニン、フェニルアラニン、セリン、トレオニン、トリプトファン、及びチロシンから選ばれる少なくとも１種のアミノ酸（塩を含む）を用いることが好ましい。塩としては、例えば、ナトリウム塩、塩酸塩等を挙げることができる。
(B) Amino Acid In the retinal protection composition of the present invention, it is preferable to use at least one amino acid (including salt) selected from arginine, phenylalanine, serine, threonine, tryptophan, and tyrosine as an active ingredient together with lutein. preferable. Examples of the salt include sodium salt and hydrochloride.
（ｃ）ポリフェノール
本発明の網膜保護組成物においては、ルテインと共に、有効成分として、没食子酸、及びクロロゲン酸から選ばれる少なくとも１種のポリフェノールを用いることが好ましい。
(C) Polyphenol In the retinal protective composition of the present invention, it is preferable to use at least one polyphenol selected from gallic acid and chlorogenic acid as an active ingredient together with lutein.
（ｄ）ビタミン・ミネラル類
本発明の網膜保護組成物においては、ルテインと共に、有効成分として、ビタミンＢ１、ビタミンＤ３、ビオチン、ビタミンＫ、カルシウム、マンガン、亜鉛、鉄、モリブデン、及びクロムから選ばれる少なくとも１種のビタミン・ミネラル類を用いることが好ましい。なお、本発明のミネラル類としてのカルシウム、マンガン、亜鉛、鉄、モリブデン、及びクロムは、これらの金属を含む化合物の形態を含む。
(D) Vitamin/Minerals In the retinal protective composition of the present invention, the active ingredient is selected from vitamin B1, vitamin D3, biotin, vitamin K, calcium, manganese, zinc, iron, molybdenum, and chromium together with lutein. It is preferable to use at least one vitamin/mineral. In addition, calcium, manganese, zinc, iron, molybdenum, and chromium as minerals of the present invention include forms of compounds containing these metals.
本発明の網膜保護組成物は、網膜保護作用を有する眼機能維持剤として用いることができ、かかる眼機能維持剤は、ルテイン及び所定の他成分を含有し、眼機能維持に用いられる点において、製品として他の製品と区別することができるものであれば特に制限されるものではない。例えば、本発明に係る製品の本体、包装、説明書、宣伝物のいずれかに網膜保護効果、網膜障害抑制効果、網膜疾患予防効果等の眼の機能維持効果の機能がある旨を表示したものが本発明の範囲に含まれる。例えば、医薬品（医薬部外品を含む）や、化粧品や、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品等の所定機関より効能の表示が認められた機能性食品などのいわゆる健康食品等を挙げることができる。いわゆる健康食品においては、「眼（目）の黄斑部の色素量を維持する」、「加齢による眼（目）の悩みに」、「光の刺激から眼（目）を保護する」、「ブルーライト対策に」、「液晶ライト対策に」、「読書、パソコン、スマホに疲れたら」、「ぼんやりが気になる方に」、「コントラスト感度の改善に」、「疲れ眼（目）に」、「眼（目）の調子を整える」、「眼（目）の疲れを取る」等を表示したものを例示することができる。本発明の網膜保護組成物は、上記の効果が気になる人であれば性別や年齢に関係なく摂取することができるが、本発明の網膜保護組成物の効果をより有効に享受することができることから、疾病者を除く健常者が摂取することが望ましい。また、眼を長時間酷使する作業を行う者が摂取することが望ましく、特にパソコンなどで長時間作業を行うデスクワーク者が摂取することが望ましい。 The retinal protective composition of the present invention can be used as an eye function maintaining agent having a retinal protecting effect, and such an eye function maintaining agent contains lutein and a predetermined other component, and is used for maintaining eye function. The product is not particularly limited as long as it can be distinguished from other products. For example, the body of the product according to the present invention, the packaging, instructions, or any of the advertised items that indicate that there is a function of maintaining the function of the eye, such as a retinal protective effect, a retinal disorder suppressing effect, a retinal disease preventing effect, etc. Within the scope of the invention. For example, so-called health foods such as pharmaceuticals (including quasi-drugs), cosmetics, foods for specified health uses, foods with nutritional function, foods with functional claims, etc. Can be mentioned. In so-called health foods, "maintain the pigment amount in the macula of the eye (eye)," "worry of the eye (eye) due to aging", "protect the eye (eye) from light stimulation", " "For blue light measures", "For liquid crystal light measures", "If you are tired of reading, PC, smartphone", "For people who are uncomfortable", "For improving contrast sensitivity", "For tired eyes (eyes)" , "Tones eyes", "removes eyes", etc. can be exemplified. The retinal protection composition of the present invention can be ingested by any person who is concerned about the above effects regardless of sex or age, but the effects of the retinal protection composition of the present invention can be more effectively enjoyed. Therefore, it is desirable that healthy people except sick people should take it. In addition, it is desirable that it is taken by a person who works for overworking the eyes for a long time, and particularly it is desirable that it is taken by a deskworker who works for a long time on a personal computer or the like.
また、本発明の網膜保護組成物の形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、液剤、粒状剤、棒状剤、板状剤、ブロック状剤、固形状剤、丸状剤、ペースト状剤、クリーム状剤、カプレット状剤、ゲル状剤、チュアブル状剤、スティック状剤等を挙げることができる。これらの中でも、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、液剤の形態が特に好ましい。具体的には、サプリメントや、ペットボトル、缶、瓶等に充填された容器詰飲料や、水（湯）、牛乳、果汁、青汁等に溶解して飲むためのインスタント粉末飲料、インスタント顆粒飲料を例示することができる。これらは食事の際などに手軽に飲用しやすく、また嗜好性を高めることができるという点で好ましい。 The form of the retinal protection composition of the present invention includes, for example, tablets, capsules, powders, granules, liquids, granules, rods, plates, blocks, solids, and pills. , Pastes, creams, caplets, gels, chewables, sticks and the like. Among these, tablets, capsules, powders, granules, and liquids are particularly preferable. Specifically, supplements, bottled beverages filled in PET bottles, cans, bottles, etc., instant powdered beverages and instant granular beverages to be dissolved in water (hot water), milk, fruit juice, green juice, etc. Can be illustrated. These are preferable in that they can be easily taken at meals and the taste can be enhanced.
本発明の網膜保護組成物におけるルテイン及び他成分（有効成分）の含有量としては、その効果の奏する範囲で適宜含有させればよい。 The content of lutein and other components (active ingredients) in the retinal protection composition of the present invention may be appropriately contained within the range where the effect is exhibited.
一般的には、本発明の網膜保護組成物が医薬品やサプリメント（錠剤，カプセル剤）の場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．０１〜１００質量％含まれていることが好ましく、０．１〜８５質量％含まれていることがより好ましく、０．５〜７０質量％含まれていることがさらに好ましい。 Generally, when the retinal protection composition of the present invention is a drug or supplement (tablet, capsule), it is preferable that the active ingredient is contained in an amount of 0.01 to 100% by mass based on the dry mass. 0.1 to 85 mass% is more preferable, and 0.5 to 70 mass% is further preferable.
本発明の網膜保護組成物が容器詰飲料（液剤）である場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．０１〜１５質量％含まれていることが好ましく、０．０３〜１２．５質量％含まれていることがより好ましく、０．０５〜１０質量％含まれていることがさらに好ましい。 When the retinal protection composition of the present invention is a packaged beverage (solution), it is preferable that the active ingredient is contained in an amount of 0.01 to 15% by mass based on the dry mass, and 0.03 to 12. The content is more preferably 5% by mass, further preferably 0.05 to 10% by mass.
また、本発明の網膜保護組成物がインスタント粉末飲料（粉末剤）、インスタント顆粒飲料（顆粒剤）である場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．１〜８０質量％含まれていることが好ましく、０．５〜７０質量％含まれていることがより好ましく、１〜６０質量％含まれていることがさらに好ましい。 Moreover, when the retina protective composition of the present invention is an instant powder drink (powder) or an instant granule drink (granule), the active ingredient is contained in an amount of 0.1 to 80% by mass based on the dry mass. It is preferable that the content is 0.5 to 70% by mass, more preferably 1 to 60% by mass.
本発明の効果をより有効に発揮させるためには、有効成分が乾燥質量換算で本発明の網膜保護組成物全体（水分を除く）の８０質量％以上含まれていることが好ましく、９０質量％以上含まれていることがより好ましく、９５質量％以上含まれていることがさらに好ましく、１００質量％であることが特に好ましい。さらに、本発明の網膜保護組成物が成分（ａ）〜（ｄ）のいずれかを含有する場合、その含有される成分は、本発明における有効成分のみで構成されることが好ましい。すなわち、本発明の網膜保護組成物が例えば成分（ａ）（植物素材）を含む場合には、葛、稲、及びココヤシ以外の植物素材を含まないように構成することが好ましい。 In order to exert the effect of the present invention more effectively, it is preferable that the active ingredient is contained in an amount of 80% by mass or more based on the dry mass of the entire retinal protection composition (excluding water), and 90% by mass. The above content is more preferable, the content is more preferably 95% by mass or more, still more preferably 100% by mass. Furthermore, when the retinal protection composition of the present invention contains any of the components (a) to (d), it is preferable that the contained component is composed of only the active ingredient of the present invention. That is, when the retinal protection composition of the present invention contains, for example, the component (a) (plant material), it is preferable that the composition not contain any plant material other than kudzu, rice, and coconut.
本発明の網膜保護組成物の摂取量としては特に制限はないが、本発明の効果をより顕著に発揮させる観点から、１日当たりの有効成分の摂取量が、１ｍｇ／日以上となるように摂取することが好ましく、５ｍｇ／日以上となるように摂取することがより好ましく、１０ｍｇ／日以上となるように摂取することが特に好ましい。その上限は特に制限されないが、例えば、４ｇ／日であり、好ましくは２ｇ／日である。 The intake of the retinal protection composition of the present invention is not particularly limited, but from the viewpoint of more significantly exhibiting the effects of the present invention, the active ingredient is ingested at a dose of 1 mg/day or more. It is preferable to ingest at 5 mg/day or more, more preferably at 10 mg/day or more. The upper limit is not particularly limited, but is, for example, 4 g/day, preferably 2 g/day.
本発明の網膜保護組成物は、1日の摂取量が前記摂取量となるように、１つの容器に、又は例えば２〜３の複数の容器に分けて、1日分として収容することができる。 The retinal protection composition of the present invention can be stored as one day in one container or divided into, for example, a plurality of containers such as 2-3 so that the daily intake becomes the above intake. ..
ルテイン及び他成分の配合質量比としては、乾燥質量換算で、０．５：１〜７０：１の範囲であることが好ましく、０．７５：１〜６０：１の範囲であることがより好ましく、１：１〜６０：１の範囲であることがさらに好ましく、１：１〜５０：１の範囲であることが特に好ましい。ルテイン及び他成分の配合比が、上記範囲であることにより、本発明の効果をより有効に発揮することができる。 The blending mass ratio of lutein and other components is preferably in the range of 0.5:1 to 70:1, and more preferably in the range of 0.75:1 to 60:1 in terms of dry mass. , 1:1 to 60:1, more preferably 1:1 to 50:1. When the compounding ratio of lutein and other components is within the above range, the effects of the present invention can be more effectively exhibited.
本発明の網膜保護組成物は、必要に応じて、経口剤として許容される有効成分以外の成分を添加して、公知の方法によって製造することができる。 The retinal protection composition of the present invention can be produced by a known method by adding components other than the active ingredient acceptable as an oral preparation, if necessary.
また、本発明の経口剤としての網膜保護組成物としては、有効成分を含有する網膜保護組成物の他、食品に対して有効成分を添加して得た網膜保護組成物（網膜保護食品）を挙げることができ、例えば、通常の食品（天然の食品を含む）に比して本発明の有効成分含有量を増加させた食品や、本発明の有効成分を通常含まない食品に対して有効成分を添加した食品を挙げることができる。有効成分の添加は、それぞれの成分を別々に添加してもよいし、同時に添加してもよく、また、有効成分以外の他の成分と共に添加してもよい。 Further, as the retinal protection composition as an oral preparation of the present invention, in addition to the retinal protection composition containing the active ingredient, a retinal protection composition obtained by adding the active ingredient to food (retinal protection food) Examples thereof include, for example, foods in which the content of the active ingredient of the present invention is increased as compared with normal foods (including natural foods), and active ingredients for foods that do not usually contain the active ingredient of the present invention. Foods to which is added can be mentioned. The active ingredient may be added separately, simultaneously, or may be added together with other ingredients than the active ingredient.
本発明の網膜保護食品としては、例えば、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料、スムージー、青汁等の飲料；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、中華麺、即席麺等の麺類；飴、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子、パン等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳、ヨーグルト等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及びその加工食品；ソース、醤油等の調味料；カレー、シチュー、親子丼、お粥、雑炊、中華丼、かつ丼、天丼、牛丼、ハヤシライス、オムライス、おでん、マーボドーフ、餃子、シューマイ、ハンバーグ、ミートボール、各種ソース、各種スープ等のレトルトパウチ食品などを挙げることができる。 Examples of the retina-preserving food of the present invention include carbonated drinks, nutritional drinks, fruit drinks, lactic acid drinks, smoothies, drinks such as green juice; frozen desserts such as ice cream, ice sorbet, shaved ice; buckwheat, udon, harusame, Chinese noodle , Instant noodles, etc.; candy, candy, gum, chocolate, tablets, snacks, biscuits, jellies, jams, creams, baked goods, breads, etc.; processed fish and livestock products such as kamaboko, ham, sausages; Dairy products such as processed milk, fermented milk and yogurt; oils and fats such as salad oil, tempura oil, margarine, mayonnaise, shortening, whipped cream, dressing and processed foods; seasonings such as sauces and soy sauces; curry, stew, oyakodon, Retort pouch foods such as porridge, porridge, Chinese rice bowl, katsudon, tempura bowl, beef bowl, hayashi rice, omelet rice, oden, marbo doff, gyoza, shumai, hamburger, meatballs, various sauces, and various soups can be mentioned.
本発明の眼機能維持方法としては、上記説明した本発明の網膜保護組成物を摂取させることを特徴とするが、医療行為は含まれない。本発明の網膜保護組成物は、上記の効果が気になる人であれば性別や年齢に関係なく摂取させことができるが、本発明の網膜保護組成物の効果をより有効に享受することができることから、疾病者を除く健常者に摂取させることが望ましい。また、眼を長時間酷使する作業を行う者に摂取させることが望ましく、特にパソコンなどで長時間作業を行うデスクワーク者に摂取させることが望ましい。発明の方法としては、例えば、レストラン等の飲食店において、本発明の網膜保護食品を提供することにより、眼機能維持効果を得る方法を挙げることができる。 The method for maintaining eye function of the present invention is characterized by ingesting the retinal protection composition of the present invention described above, but does not include medical practice. The retinal protection composition of the present invention can be ingested regardless of gender or age if the person is concerned about the above effects, but the effects of the retinal protection composition of the present invention can be more effectively enjoyed. Because it is possible, it is desirable to have healthy people excluding sick people ingest it. In addition, it is desirable to ingest it by a person who works for overworking the eyes for a long time, and in particular, it is desirable that it be ingested by a deskworker who works for a long time on a personal computer or the like. Examples of the method of the invention include a method of obtaining an eye function maintaining effect by providing the retinal protection food of the present invention in a restaurant such as a restaurant.
以下、本発明を実施例に基づき説明する。
［実施例１］
１．細胞培養
（１）３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター内で、７５ｃｍ２フラスコを用いて、ヒト網膜色素上皮細胞（ＡＲＰＥ−１９）を培養した。培地はＤＭＥＭ培地とＦ−１２ＨＡＭ培地を１：１で混合し、ＦＢＳが１０％となるように調製したものを用いた。
（２）トリプシン処理により浮遊させた細胞を、７５ｃｍ２フラスコから９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅの各ｗｅｌｌに１．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で播種した。
（３）３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター内で７２時間前培養した。
（４）各ｗｅｌｌより培地を除去後、所定濃度に調製した被験物質含有培地を２００μＬずつ添加し、ＣＯ２インキュベーター内で２０時間培養した。
Hereinafter, the present invention will be described based on examples.
[Example 1]
1. Cell Culture (1) Human retinal pigment epithelial cells (ARPE-19) were cultured using a 75 cm 2 flask in a 37° C., 5% CO 2 incubator. The medium used was a mixture of DMEM medium and F-12HAM medium in a ratio of 1:1 and prepared so that FBS was 10%.
(2) The cells suspended by the trypsin treatment were inoculated from a 75 cm 2 flask into 96 well plates of each well at a cell density of 1.0×10 4 cells/well.
(3) Precultured at 37° C. in a 5% CO 2 incubator for 72 hours.
(4) After removing the medium from each well, 200 μL each of the test substance-containing medium prepared to a predetermined concentration was added, and the cells were cultured in a CO 2 incubator for 20 hours.
なお、ルテインと他成分との併用サンプルについては、それぞれ２倍濃度の被験物質含有培地を調製し、１００μＬずつ添加することで目的の濃度とした。また、ｃｏｎｔｒｏｌは、被験物質をＤＭＳＯに溶解したものに対しては０．５％ＤＭＳＯ含有培地を用いて調製し、その他の被験物質に対しては０．２５％ＤＭＳＯ培地を用いて調製した。 In addition, regarding the combined use sample of lutein and other components, a test substance-containing medium having a double concentration was prepared, and 100 μL of each medium was added to obtain a target concentration. In addition, control was prepared using a medium containing 0.5% DMSO for the test substance dissolved in DMSO, and 0.25% DMSO medium for the other test substances.
ルテインについては、市販のルテインを用いた。ルテインと共に用いる他成分としては、表１〜表４に示す物質を用いた。 Regarding lutein, commercially available lutein was used. As the other components used together with lutein, the substances shown in Tables 1 to 4 were used.
（５）２０時間培養後、無血清培地で１．５ｍＭまたは２．５ｍＭに調製した過酸化水素水を５０μＬ添加し２０時間培養した。他成分が、植物素材、ビタミン類のものについては、過酸化水素水終濃度３００μＭとし、他成分が、アミノ酸、ミネラル類、ポリフェノールのものについては、過酸化水素水終濃度５００μＭとした。ｃｏｎｔｒｏｌについては、試験区と過酸化水素水終濃度を合わせた。 (5) After culturing for 20 hours, 50 μL of hydrogen peroxide solution adjusted to 1.5 mM or 2.5 mM in a serum-free medium was added and culturing was continued for 20 hours. When the other ingredients were plant materials and vitamins, the final concentration of hydrogen peroxide solution was 300 μM, and when the other ingredients were amino acids, minerals and polyphenols, the final concentration of hydrogen peroxide solution was 500 μM. For control, the test plot and the final concentration of hydrogen peroxide solution were matched.
２．ＴＧＦβ１の発現解析
（１）２０時間培養後、培養した細胞から培地を除去し、ＣｅｌｌＡｍｐＴＭ Ｄｉｒｅｃｔ ＲＮＡ Ｐｒｅｐ Ｋｉｔ ｆｏｒ ＲＴ−ＰＣＲ（Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ）（Ｔａｋａｒａ製）を用いて、ＲＮＡを回収し、Ｎ＝３のサンプルを混合して１つのＲＮＡサンプルとした。
（２）検量線を作成するため、１つのサンプルを３倍、９倍希釈した。Ｏｎｅ Ｓｔｅｐ ＳＹＢＲ（登録商標） ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔＴＭ ＲＴ−ＰＣＲ Ｋｉｔ ＩＩ（Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ）（Ｔａｋａｒａ製）を用いてＰＣＲを実施した。プライマーはＴＧＦβ１（ＱＩＡＧＥＮ製）とＲＰＬＰ０（ＱＩＡＧＥＮ製）を使用した。
（３）１倍、３倍、９倍希釈したサンプルから作成した検量線を用いて、各サンプルにおける遺伝子発現量を算出した。解析は相対定量により行い、ＲＰＬＰ０（ハウスキーピング遺伝子）を内部標準としてｍＲＮＡ量を補正した。
2. Expression analysis of TGFβ1 (1) After culturing for 20 hours, the medium was removed from the cultured cells, RNA was recovered using CellAmp ™ Direct RNA Prep Kit for RT-PCR (Real Time) (manufactured by Takara), and N= The three samples were mixed into one RNA sample.
(2) To prepare a calibration curve, one sample was diluted 3 times and 9 times. PCR was carried out using One Step SYBR (registered trademark) PrimeScript ™ RT-PCR Kit II (Perfect Real Time) (manufactured by Takara). As the primers, TGFβ1 (manufactured by QIAGEN) and RPLP0 (manufactured by QIAGEN) were used.
(3) The gene expression level in each sample was calculated using a calibration curve prepared from 1-fold, 3-fold, and 9-fold diluted samples. The analysis was performed by relative quantification, and the mRNA amount was corrected using RPLP0 (housekeeping gene) as an internal standard.
その結果を表１〜表４、及び図１〜図７に示す。 The results are shown in Tables 1 to 4 and FIGS. 1 to 7.
各図は、左から、「コントロール（過酸化水素添加）」、「ルテインの単独添加」、「他成分の単独添加」、「ルテイン＋他成分添加」の結果を表す。また、グラフ下部の説明における数値は、サンプル濃度を示し、例えば、図１の左上のグラフの「ルテイン_０．６２」は、ルテイン０．６２（μｇ／ｍＬ）を示す。添加成分の濃度単位は、すべてのグラフにおいて、μｇ／ｍＬである。縦軸は「％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ」を示す。 Each figure shows the results of "control (addition of hydrogen peroxide)", "single addition of lutein", "single addition of other component", and "addition of lutein+other component" from the left. The numerical value in the description below the graph indicates the sample concentration, and for example, “lutein_0.62” in the upper left graph of FIG. 1 indicates lutein 0.62 (μg/mL). The concentration unit of the added component is μg/mL in all graphs. The vertical axis represents “% of control”.
葛については、花の熱水抽出物（乾燥粉末）を用いた。
米ぬかについては、市販品を用いた。
ココナッツについては、市販のココナッツミルクを乾燥後、油分を除いたものを用いた。
ヨモギについては、生葉の微粉砕末を用いた。
マキベリーについては、市販品の果実の乾燥粉末を用いた。
For kudzu, a hot water extract of flowers (dry powder) was used.
A commercial item was used for the rice bran.
Regarding the coconut, a commercially available coconut milk was dried and the oil was removed.
For mugwort, finely ground powder of fresh leaves was used.
For maki berries, a commercially available dried fruit powder was used.
表１〜表４、及び図１〜図７に示すように、ルテインと、本発明の特定の他成分を組み合わせることにより、ヒト網膜色素上皮細胞（ＡＲＰＥ−１９）の酸化ストレスによるＴＧＦβ１の発現量が相乗的に低下した。したがって、本発明の網膜保護組成物によれば、網膜色素上皮細胞を有効に保護することができる。 As shown in Tables 1 to 4 and FIGS. 1 to 7, the expression level of TGFβ1 due to the oxidative stress of human retinal pigment epithelial cells (ARPE-19) was obtained by combining lutein with a specific other component of the present invention. Has decreased synergistically. Therefore, the retinal protective composition of the present invention can effectively protect retinal pigment epithelial cells.
［実施例２］（錠剤の製造）
下記成分からなるタブレット（２００ｍｇ）を製造した。
[Example 2] (Production of tablets)
A tablet (200 mg) consisting of the following ingredients was produced.
ルテイン（マリーゴールド抽出物） １０ｍｇ
ビルベリー抽出物 ６０ｍｇ
ブルーベリー抽出物 ５０ｍｇ
ステアリン酸カルシウム ５ｍｇ
アルギニン １．５ｍｇ
フェニルアラニン １．５ｍｇ
トリプトファン １ｍｇ
クロロゲン酸 １ｍｇ
ビタミンＢ１ ０．５ｍｇ
ビタミンＫ ０．５ｍｇ
塩化カルシウム ０．５ｍｇ
グルコン酸亜鉛 ０．５ｍｇ
セルロース 残部
Lutein (marigold extract) 10mg
Bilberry extract 60mg
Blueberry extract 50mg
Calcium stearate 5mg
Arginine 1.5mg
Phenylalanine 1.5 mg
Tryptophan 1 mg
Chlorogenic acid 1 mg
Vitamin B1 0.5 mg
Vitamin K 0.5mg
Calcium chloride 0.5mg
Zinc gluconate 0.5mg
Cellulose balance
上記錠剤は一日に２粒を噛まずに水と共に服用する。 The above tablets are taken with water without chewing 2 tablets a day.
［実施例３］（カプセル剤の製造）
下記混合物をソフトカプセルに封入し、カプセル剤を製造した。
[Example 3] (Production of capsule)
The following mixture was enclosed in a soft capsule to manufacture a capsule.
重量比
ルテイン（マリーゴールド抽出物） ３０％（ルテインとして２０ｍｇ）
紅花油 ５０％
ミツロウ １０％
葛の花エキス ２％
ブルーベリーエキス １％
水溶性β−カロテン末 ０．２％
ヘマトコッカス藻色素 ０．２％
ビタミンＢ１２ ０．０１％
ビオチン ０．０１％
没食子酸 ０．０１％
ビタミンＥ ０．０１％
塩化鉄 ０．０１％
Weight ratio Lutein (marigold extract) 30% (20 mg as lutein)
Safflower oil 50%
Beeswax 10%
Kuzu flower extract 2%
Blueberry extract 1%
Water-soluble β-carotene powder 0.2%
Hematococcus algal pigment 0.2%
Vitamin B12 0.01%
Biotin 0.01%
Gallic acid 0.01%
Vitamin E 0.01%
Iron chloride 0.01%
上記カプセル剤は、一日に１粒を噛まずに水と共に服用する。 The above capsules are taken with water without chewing one capsule per day.
［実施例４］（顆粒剤の製造）
下記成分を混合して常法により顆粒剤（３０００ｍｇ）を製造した。
[Example 4] (Production of granules)
The following components were mixed to prepare a granule (3000 mg) by a conventional method.
ルテイン（マリーゴールド抽出物） １５ｍｇ
松樹皮抽出物 ５０ｍｇ
ココナッツミルク ２００ｍｇ
アスパルテーム ５００ｍｇ
チロシン ５０ｍｇ
トレオニン ５０ｍｇ
トリプトファン ３０ｍｇ
クロロゲン酸 ２０ｍｇ
ビタミンＢ１ ５ｍｇ
ビタミンＫ ５ｍｇ
塩化カルシウム ２ｍｇ
グルコン酸銅 １ｍｇ
デキストリン 残部
Lutein (marigold extract) 15mg
Pine bark extract 50mg
Coconut milk 200mg
Aspartame 500mg
Tyrosine 50mg
Threonine 50 mg
Tryptophan 30mg
Chlorogenic acid 20mg
Vitamin B1 5 mg
Vitamin K 5mg
Calcium chloride 2mg
Copper gluconate 1mg
Dextrin balance
上記顆粒剤は一日に１包を水と共に服用する。 The above granules are taken once a day with water.
［実施例６］（液剤の製造）
下記成分からなる液剤（１２５ｍＬ）を製造した。
[Example 6] (Production of liquid agent)
A liquid agent (125 mL) composed of the following components was produced.
ルテイン（マリーゴールド抽出物） １８ｍｇ
ビルベリー抽出物 １５０ｍｇ
カシス抽出物 ５０ｍｇ
米ぬか抽出物 ２５ｍｇ
ビタミンＣ １０ｍｇ
クエン酸 ５ｍｇ
アルギニン １．５ｍｇ
フェニルアラニン １．５ｍｇ
トリプトファン １ｍｇ
ビタミンＢ１ ０．５ｍｇ
ビタミンＫ ０．５ｍｇ
塩化カルシウム ０．５ｍｇ
グルコン酸亜鉛 ０．５ｍｇ
水 残部
Lutein (marigold extract) 18mg
Bilberry extract 150mg
Cassis extract 50mg
Rice bran extract 25mg
Vitamin C 10mg
Citric acid 5mg
Arginine 1.5mg
Phenylalanine 1.5 mg
Tryptophan 1 mg
Vitamin B1 0.5 mg
Vitamin K 0.5mg
Calcium chloride 0.5mg
Zinc gluconate 0.5mg
Remaining water
上記液剤は一日１パックを飲用する。 The above liquid medicine is to be drunk one pack per day.
本発明の網膜保護組成物は、高い網膜保護効果を有し、経口剤として用いることができることから、本発明の産業上の有用性は高い。
The retinal protective composition of the present invention has a high retinal protective effect and can be used as an oral preparation, so that the industrial usefulness of the present invention is high.
Claims (2)
The retinal protective composition according to claim 1, which is an eye function maintaining agent having a retinal protective effect.
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