JP7339245B2 - 均質アッセイ法 - Google Patents
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Description
とりわけ、本発明は、免疫学的測定および核酸アッセイなどであるが、これらに限定されない生物学的および化学的アッセイを実施するデバイスおよび方法に関する。
生物学的および化学的アッセイ(例えば、診断検査)では、洗浄する必要がない均質アッセイが好まれる場合が多い。本発明は、これらの目標を達成するためのデバイスおよび方法を提供する。
均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、を備え、
i.前記第1および第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含有する疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.前記第1のプレートが、その内面上に固定された前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、100um以下に等しい所定の実質的に均一な高さを有し、
iv.前記複数の粒子が、それらの表面上に固定化された前記捕捉剤を有し、前記捕捉剤が、前記分析物を特異的に結合および固定化することが可能であり、かつ
v.前記複数の粒子が、(a)前記スペーサが占める領域を除いて、前記第1のプレートの前記試料接触領域に分布し、(b)前記第1のプレート上に一時的または恒久的に固定され、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節される、デバイス。
[本発明1002]
均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、を備え、
i.前記第1および第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含有する疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.一方または両方のプレートが、その内面上に固定された前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、100um以下に等しい所定の実質的に均一な高さを有し、
iv.前記複数の粒子が、それらの表面上に固定化された前記捕捉剤を有し、前記捕捉剤が、前記分析物を特異的に結合および固定化することが可能であり、かつ
v.前記複数の粒子が、(a)前記第1の試料接触領域に分布し、(b)前記プレート上に一時的または恒久的に固定され、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節される、デバイス。
[本発明1003]
前記プレート上の前記複数の粒子の前記分布が、ランダムである、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1004]
前記複数の粒子が、前記プレート上に固定され、周期的な分布を有する、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1005]
前記スペーサが、平坦な頂部を有する、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1006]
前記複数の粒子が、前記第1のプレート上に一時的に固定され、開放構成では、前記2つのプレートが前記閉鎖構成になる前に、前記試料が前記第1のプレート上に載せられる、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1007]
前記スペーサの前記厚さが、閉鎖構成において、前記試料中の前記分析物のある特定の濃度に対して、前記粒子のうちの1つを含有する前記均一な厚さの試料の少なくとも1つの領域が、前記試料層の外側から見たときに粒子を含有しないその隣接領域と光学的に区別可能になるように構成されている、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1008]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、前記押圧が、人間の手によるものである、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1009]
前記複数の粒子のうちの1つ以上の直径が、前記スペーサの前記高さに等しい、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1010]
前記スペーサの高さが、約10umである、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1011]
前記スペーサの高さが、約5umである、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1012]
前記スペーサの高さが、約0.1um~約15umである、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1013]
前記スペーサの高さが、約0.1um~約3umである、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1014]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、一方のプレートまたは両方のプレートの前記内面の少なくとも一部分が、親水性である、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1015]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、前記スペーサ間距離が、周期的である、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1016]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、前記試料が、いかなる輸送デバイスも使用せずに対象から前記プレートへ直接載せられたものである、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1017]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、閉鎖構成における前記試料の変形後、前記圧縮力の一部または全てが除去されたとき、前記試料が、同じ最終試料厚さを維持する、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1018]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、前記スペーサが、柱形状およびほぼ均一な断面を有する、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1019]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、前記スペーサ間距離(SD)が、約120um(マイクロメートル)以下である、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1020]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、前記スペーサ間距離(SD)が、約100um(マイクロメートル)以下である、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1021]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、前記スペーサ間距離(ISD)の4乗を可撓性プレートの厚さ(h)およびヤング率(E)で割ったもの(ISD^4/(hE))が、5x10^6um^3/GPa以下である、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1022]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、前記スペーサ間距離(ISD)の4乗を可撓性プレートの厚さ(h)およびヤング率(E)で割ったもの(ISD^4/(hE))が、5x10^5um3/GPa以下である、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1023]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、前記スペーサが、柱形状、実質的に平坦な頂面、所定の実質的に均一な高さ、および前記分析物のサイズより少なくとも約2倍大きい所定の一定のスペーサ間距離を有し、前記スペーサのヤング率に前記スペーサの充填率を掛けたものが、2MPa以上であり、前記充填率が、全プレート面積に対する前記スペーサの接触面積の比であり、各スペーサに対して、前記スペーサの横寸法対その高さの比が、少なくとも1である、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1024]
前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、前記スペーサが、柱形状、実質的に平坦な頂面、所定の実質的に均一な高さ、および前記分析物のサイズより少なくとも約2倍大きい所定の一定のスペーサ間距離を有し、前記スペーサのヤング率に前記スペーサの充填率を掛けたものが、2MPa以上であり、前記充填率が、全プレート面積に対する前記スペーサの接触面積の比であり、各スペーサに対して、前記スペーサの横寸法対その高さの比が、少なくとも1であり、前記スペーサ間距離(ISD)の4乗を可撓性プレートの厚さ(h)およびヤング率(E)で割ったもの(ISD^4/(hE))が、5x10^6um^3/GPa以下である、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1025]
前記スペーサの平均幅に対する前記スペーサのスペーシング間距離の比が、2以上であり、前記スペーサの充填率に前記スペーサのヤング率を乗じたものが、2MPa以上である、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1026]
均質アッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)前記捕捉剤が、前記分析物の結合部位に特異的に結合することが可能である、前記本発明のいずれかのデバイスを取得するステップと、
(c)前記デバイスの前記試料接触領域の少なくとも一部の上に光標識を有するステップであって、前記光標識が、前記分析物に結合することが可能である、ステップと、
(d)前記プレートが開放構成にあるときに、前記プレートのうちの一方または両方の上に前記試料を載せるステップであって、開放構成において、
(e)(d)の後、前記2つのプレートを一緒にし、前記プレートを閉鎖構成へと押圧するステップであって、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節される、ステップと、
(f)前記プレートが前記閉鎖構成にある間に、前記均一な厚さの層内の前記分析物を分析するステップと
を含み、前記分析が、
i.前記試料層の外側から、(a)1つの粒子を含有する前記試料層の領域である粒子領域、および(b)前記粒子領域の周囲にある前記試料層の領域である周囲領域からの全光信号を測定することであって、前記周囲領域が、前記粒子の縁部内で50Dであり、前記Dが、前記粒子の直径である、測定することと、
ii.前記粒子領域および少なくとも2つの異なる粒子領域の周囲領域の各々からの全光信号を測定することと
を含む、方法。
[本発明1027]
前記全光信号測定のための前記粒子領域が、前記粒子直径と実質的に同じ領域を有する、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1028]
前記全光信号測定のための前記粒子領域が、前記粒子直径によって画定される領域よりも小さい、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1029]
前記均一な試料層内の前記分析物の前記分析が、各領域からの前記全光信号の平均化を含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1030]
前記均一な試料層内の前記分析物の前記分析が、(i)各粒子領域の前記全光信号の、その周囲領域の前記全光信号に対する比を測定することと、(ii)全ての粒子領域および周囲領域の対の比を平均することと、を含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1031]
前記試料を載せることの終了から、前記プレートの前記閉鎖構成への押圧の終了までの時間が、15秒未満である、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1032]
前記試料を載せることの終了から、前記プレートの前記閉鎖構成への押圧の終了までの時間が、5秒未満である、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1033]
試料中の分析物を均質に分析するための装置であって、
i.前記本発明のいずれかのデバイスと、
ii.前記試料接触領域の少なくとも一部を撮像する1つ以上の撮像装置と
を備える、装置。
[本発明1034]
迅速な多重化均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.前記プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、第1の分析物および第2の分析物を含有する疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、
iv.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、複数の第1の粒子および第2の粒子を含み、前記第1および第2の粒子が、その上にそれぞれ固定化された第1および第2の捕捉剤を有し、かつ
v.前記第1および第2の捕捉剤が、それぞれ前記第1および第2の分析物に結合し、固定化することが可能であり、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節され、前記均一な厚さの層内の前記分析物が、前記粒子によって濃縮され、これにより前記粒子上の前記捕捉分析物の信号が、前記均一な厚さの層内の他の領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
[本発明1035]
均質アッセイのためのスマートフォンシステムであって、
(a)前記本発明のいずれかのデバイスと、
(b)
i.前記試料を検出および/または撮像するための1つまたは複数のカメラ、
ii.前記検出された信号および/または前記試料の前記画像(複数可)を受信および/または処理し、かつ遠隔通信するための電子機器、信号プロセッサ、ハードウェア、およびソフトウェア、を備える、モバイル通信デバイスと、
(c)前記閉鎖構成にある前記デバイスを収容し、前記モバイル通信デバイスに係合可能であるように構成されたアダプタと
を備え、
前記モバイル通信デバイスと係合したとき、前記アダプタが、前記試料中の前記分析物の前記検出および/または撮像を容易にするように構成されている、スマートフォンシステム。
[本発明1036]
前記第1および第2の粒子が異なる、前記本発明のいずれかのデバイス、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1037]
前記第1および第2の粒子のサイズが異なる、前記本発明のいずれかのデバイス、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1038]
前記第1および第2の粒子が、フォトルミネセンス、エレクトロルミネセンス、および電気化学ルミネセンス、光吸収、反射、透過、回折、散乱、拡散、表面ラマン散乱、ならびにそれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるそれらの光学特性について異なる、前記本発明のいずれかのデバイス、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1039]
前記第1および第2の粒子の電気密度が異なる、前記本発明のいずれかのデバイス、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1040]
前記第1および第2の粒子が同じであり、前記第1および第2の分析物からの信号が異なる、前記本発明のいずれかのデバイス、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1041]
周期的に配置された粒子を有するプレートを作製する方法であって、
a.その内面上に複数のピットを含むプレートを有するステップであって、前記ピットが、周期的に配置される、ステップと、
b.前記プレートの前記内面上に複数の粒子を含有する液体を載せるステップと、
c.前記プレートを乾燥させるステップであって、このプロセス中に、少なくとも前記ピットの前記隆起部に対する毛管力により、前記粒子が前記ピット内に再分布される、ステップと
を含む、方法。
[本発明1042]
迅速な均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.前記プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含む疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、かつ
iv.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された1つまたは複数の分析物濃縮領域を備え、前記捕捉剤が、前記分析物に結合し、固定化することが可能であり、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節され、前記均一な厚さの層内の前記分析物が、前記分析物濃縮領域内で濃縮され、これにより前記分析物濃縮領域内の前記捕捉分析物の信号が、前記均一な厚さの層内の非分析物濃縮領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
[本発明1043]
前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面から延出する1つまたは複数の突出部を備え、各突出部が、前記スペーサよりも低い高さを有し、その表面のうちの少なくとも1つの上に前記分析物濃縮領域を備える、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1044]
迅速な均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.前記プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含む疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、かつ
iv.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された複数の粒子を含み、前記捕捉剤が、前記分析物に結合し、固定化することが可能であり、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節され、前記均一な厚さの層内の前記分析物が、前記粒子によって濃縮され、これにより前記粒子上の前記捕捉分析物の信号が、前記均一な厚さの層内の他の領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
[本発明1045]
迅速な均質アッセイのためのシステムであって、
(a)前記本発明のいずれかのデバイスと、
(b)前記均一な厚さの層内の前記分析物の存在および/または量を示す前記捕捉剤結合分析物からの信号を検出する検出器と、を備える、システム。
[本発明1046]
迅速な均質アッセイのためのスマートフォンシステムであって、
(a)前記本発明のいずれかのデバイスと、
(b)
i.前記試料を検出および/または撮像するための1つまたは複数のカメラ、
ii.前記検出された信号および/または前記試料の前記画像を受信および/または処理し、かつ遠隔通信するための電子機器、信号プロセッサ、ハードウェア、およびソフトウェアを備える、モバイル通信デバイスと、
(c)前記閉鎖したデバイスを保持し、モバイル通信デバイスに係合可能であるように構成されたアダプタと
を備え、
前記モバイル通信デバイスと係合したとき、前記アダプタが、前記閉鎖構成にある前記試料中の前記分析物の前記検出および/または撮像を容易にするように構成されている、スマートフォンシステム。
[本発明1047]
迅速な均質アッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)前記本発明のいずれかのデバイスを取得するステップと、
(c)前記プレートが開放構成にあるときに、前記プレートのうちの一方または両方の上に前記試料を載せるステップと、
(d)(c)の後、前記2つのプレートを一緒にし、前記プレートを前記閉鎖構成へと押圧するステップと、
(e)前記プレートが前記閉鎖構成にある間に、前記均一な厚さの層内の前記分析物を検出および分析するステップと
を含む、方法。
[本発明1048]
迅速な均質アッセイのための画像を分析する方法であって、
(a)前記閉鎖構成にある前記本発明のいずれかの前記信号の画像を取得するステップであって、前記画像が、明視野画像、暗視野画像、蛍光画像、およびリン光画像からなる群から選択される、ステップと、
(b)前記画像を分析し、前記画像内の粒子を特定し、かつ粒子サイズ、粒子の信号強度、粒子間の距離、粒子の分布、および粒子数の情報を抽出するステップと、
(c)ステップ(b)からの前記抽出された情報を分析し、前記粒子のパラメータを計算することによって、分析物濃度を推定するステップと
を含む、方法。
[本発明1049]
均質アッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能である第1および第2のプレートを取得するステップであって、
i.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、前記試料と接触するための試料接触領域を有し、
ii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、
iii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された複数の粒子を含み、前記捕捉剤が、前記分析物に結合し、固定化することが可能であり、
iv.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、前記試料に接触すると試料中に溶解し、前記分析物に結合するように構成された検出剤を含み、
前記スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有する、ステップと、
(c)前記プレートが前記開放構成にあるとき、前記プレートのうちの一方または両方の上に前記試料を載せるステップであって、前記開放構成において、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の前記間隔が、前記スペーサによって調節されない、ステップと、
(d)(c)の後、前記2つのプレートを一緒にし、前記プレートを閉鎖構成へと押圧するステップであって、前記閉鎖構成において、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記2つのプレートの前記内面によって限定され、かつ前記スペーサおよび前記プレートによって調節される、ステップと、
(e)前記プレートが前記閉鎖構成にある間に、前記均一な厚さの層内の前記分析物を検出および分析するステップと、を含み、
前記捕捉剤および前記検出剤が、その異なる位置で前記分析物に結合し、前記粒子に固定化された捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチを形成するように構成され、
前記粒子、前記捕捉剤、および前記検出剤が、前記粒子関連捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチからの信号を、前記均一な厚さの層内の遊離検出剤の信号と区別可能にするように構成されている、方法。
[本発明1050]
迅速な均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.前記プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含む疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、200um以下の所定の実質的に均一な高さを有し、かつ
iv.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された1つまたは複数の分析物濃縮領域を備え、前記捕捉剤が、前記分析物に結合することが可能であり、
前記スペーサが、拡散パラメータの4倍以下である高さを有し、前記拡散パラメータが、意図されたアッセイ時間の平方根に前記試料中の前記分析物の拡散定数を乗じたものであり、前記意図されたアッセイ時間が、240秒以下であり、
2つの隣接する分析物濃縮領域間の平均距離が、前記拡散パラメータの4倍以下であり、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節され、前記均一な厚さの層内の前記分析物が、前記濃縮領域内で濃縮され、これにより前記濃縮領域内の前記捕捉分析物の信号が、前記均一な厚さの層内の非濃縮領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
[本発明1051]
前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面から延出する1つまたは複数の突出部を備え、各突出部が、前記スペーサよりも低い高さを有し、その表面のうちの少なくとも1つの上に前記分析物濃縮領域を備える、前記本発明のいずれかのデバイス。
[本発明1052]
迅速な均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.前記プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含む疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、かつ
iv.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された複数の粒子を含み、前記捕捉剤が、前記分析物に結合し、固定化することが可能であり、
前記スペーサが、拡散パラメータの3倍以下である高さを有し、前記拡散パラメータが、意図されたアッセイ時間の平方根に前記試料中の前記分析物の拡散定数を乗じたものであり、前記意図されたアッセイ時間が、240秒以下であり、
2つの隣接する粒子間の平均距離が、前記拡散パラメータの2倍以下であり、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節され、前記均一な厚さの層内の前記分析物が、前記濃縮領域内で濃縮され、これにより前記濃縮領域内の前記捕捉分析物の信号が、前記均一な厚さの層内の非濃縮領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
[本発明1053]
迅速な均質アッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)前記本発明のいずれかのデバイスを取得するステップと、
(c)前記プレートが開放構成にあるときに、前記プレートのうちの一方または両方の上に前記試料を載せるステップと、
(d)(c)の後、前記2つのプレートを一緒にし、前記プレートを前記閉鎖構成へと押圧するステップと、
(e)ステップ(d)の後、前記意図されたアッセイ時間以上の時間にわたって前記アッセイをインキュベートし、前記均一な厚さの層内の前記分析物を検出および分析するステップと
を含む、方法。
[本発明1054]
前記意図されたアッセイ時間が、0.1~240秒の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1055]
前記意図されたアッセイ時間が、1~60秒の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1056]
前記意図されたアッセイ時間が、30秒以下である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1057]
前記意図されたアッセイ時間が、10秒以下である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1058]
前記意図されたアッセイ時間が、5秒以下である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1059]
前記意図されたアッセイ時間が、1秒以下である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1060]
2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離が、50nm~200umの範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1061]
2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離が、500nm~20umの範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1062]
2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離が、500nm~10umの範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1063]
2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離が、500nm~5umの範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1064]
前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~2の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1065]
前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.1~1.5の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1066]
前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~0.5の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1067]
前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~0.2の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1068]
前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~0.1の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1069]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~5の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1070]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~1.5の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1071]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~1の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1072]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~0.5の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1073]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~0.2の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1074]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~0.1の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1075]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~0.5の範囲であり、前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~0.2の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1076]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~1の範囲であり、前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~0.5の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1077]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~2の範囲であり、前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~1の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1078]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~4の範囲であり、前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~1の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1079]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~0.5の範囲であり、前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~0.2の範囲であり、前記意図されたアッセイ時間が、120秒以下である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1080]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~1の範囲であり、前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~0.5の範囲であり、前記意図されたアッセイ時間が、60秒以下である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1081]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~2の範囲であり、前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~1の範囲であり、前記意図されたアッセイ時間が、30秒以下である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1082]
前記拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の前記平均距離の比が、0.01~4の範囲であり、前記スペーサの高さ対前記拡散パラメータの比が、0.01~1の範囲であり、前記意図されたアッセイ時間が、30秒以下である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1083]
前記分析物が、前記分析物に選択的に結合しかつ標識と会合される検出剤によって標識される、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1084]
前記検出剤が、前記プレートのうちの一方または両方の前記内面(複数可)上にコーティングされ、前記試料と接触すると前記試料中に溶解し、拡散するように構成されている、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1085]
前記試料が前記プレート(複数可)上に載せられる前に、前記検出剤が、前記試料中に予め装填される、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1086]
前記捕捉剤および前記検出剤が、その異なる位置で前記分析物に結合し、捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチを形成するように構成されている、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1087]
前記分析物が、検出剤と競合して前記捕捉剤に結合し、前記検出剤が、標識されている、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1088]
前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、増幅表面に近接する信号を増幅する信号増幅表面を備える、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1089]
前記粒子が、前記閉鎖構成にある前記層の前記厚さを調節する前記スペーサである、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1090]
前記粒子が、1nm~200umの範囲の平均直径を有するマイクロ粒子またはナノ粒子である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1091]
前記分析物濃縮領域が、1nm~200umの範囲の平均直径を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1092]
前記濃縮突出部が、1nm~200umの範囲の平均直径を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1093]
前記粒子が、0.1μm~10μmの範囲の平均直径を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1094]
前記粒子が、1nm~500nmの範囲の平均直径を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1095]
前記粒子が、0.5μm~30μmの範囲の平均直径を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1096]
前記閉鎖構成にある前記プレート間の前記間隔と前記粒子の平均直径との間の比が、1~100の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1097]
前記閉鎖構成にある前記プレート間の前記間隔と前記分析物濃縮領域の高さとの間の比が、1~100の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1098]
前記閉鎖構成にある前記プレート間の前記間隔と前記濃縮突出部の高さとの間の比が、1~100の範囲である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1099]
前記粒子が、1mm 2 当たり1~10 6 の面積密度を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1100]
前記分析物濃縮領域が、1mm 2 当たり1~10 6 の面積密度を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1101]
前記濃縮突出部が、1mm 2 当たり1~10 6 の面積密度を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1102]
前記粒子が、1mm 2 当たり1~1000の面積密度を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1103]
前記粒子が、前記粒子に近接する前記信号を増幅するように構成され、1~10000の範囲の信号増幅率を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1104]
前記検出抗体が、前記試料中の分析物濃度よりも1~1000倍高い前記均一な厚さの層内の濃度を有するように構成されている、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1105]
前記粒子および前記検出剤が、同じプレート上にある、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1106]
前記粒子および前記検出剤が、異なるプレート上にある、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1107]
前記分析物が、細胞、ウイルス、タンパク質、ペプチド、DNA、RNA、オリゴヌクレオチド、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1108]
前記分析物が、C反応性タンパク質(CRP)である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1109]
前記捕捉剤が、タンパク質、ペプチド、ペプチド模倣物、ストレプトアビジン、ビオチン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド模倣物、任意の他の親和性リガンド、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1110]
前記捕捉剤が、抗体である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1111]
前記捕捉抗体が、抗C反応性タンパク質(CRP)抗体である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1112]
前記捕捉剤が、前記分析物の存在を検出し、かつ/または量を測定するのに十分である濃度を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1113]
前記捕捉剤が、前記分析物を固定化するのに十分である濃度を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1114]
前記検出剤が、タンパク質、ペプチド、ペプチド模倣物、ストレプトアビジン、ビオチン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド模倣物、任意の他の親和性リガンド、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1115]
前記検出剤が、抗体である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1116]
前記検出抗体が、抗CRP抗体である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1117]
前記粒子が、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、PMMG、PC、COC、COP、ガラス、樹脂、アルミニウム、金もしくは他の金属、または表面が修飾されて前記捕捉剤と会合され得る任意の他の材料からなる群から選択される材料でできている、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1118]
前記粒子が、タンパク質安定剤で処理されている、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1119]
前記捕捉剤が、前記粒子と結合している、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1120]
前記粒子が、
a.N-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)による活性化、
b.BSA溶液によるブロッキング、および
c.捕捉剤溶液とのインキュベート
によって調製される、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1121]
前記液体試料が、羊水、房水、硝子体液、血液(例えば、全血、分画血液、血漿、または血清)、母乳、脳脊髄液(CSF)、耳垢(cerumen)(耳垢(earwax))、乳糜、糜汁(chime)、内リンパ液、外リンパ液、糞便、呼気、胃酸、胃液、リンパ液、粘液(鼻漏および痰を含む)、心膜液、腹膜液、胸膜液、膿、粘膜の分泌物、唾液、呼気凝縮液、皮脂、精液、喀痰、汗、関節液、涙、嘔吐物、尿、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される生体試料から作られる、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1122]
前記試料が、川、湖、池、海、氷河、氷山、雨、雪、下水、貯水池、水道水、または飲料水からなる群から選択される供給源からの環境液体試料、土壌、堆肥、砂、岩、コンクリート、木材、レンガ、下水からの固体試料、およびそれらの任意の組み合わせである、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1123]
前記試料が、空気、水中排熱口、産業排気、車両排気、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される供給源からの環境気体試料である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1124]
前記試料が、生の材料、調理済み食品、植物および動物の食物源、予め加工済みの食品、および部分的または完全に加工済みの食品、ならびにそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される食品試料である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1125]
前記検出剤が、標識剤である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1126]
前記検出剤が、フルオロフォアで標識される、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1127]
前記フルオロフォアが、Cy5である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1128]
前記粒子が、標識と会合され、前記検出剤が、前記検出剤が前記標識に近接しているときに前記粒子会合標識のシグナルを消光するように構成された消光剤である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1129]
前記検出器が、前記分析物の存在および/または量を示す前記分析物濃縮領域または粒子から発せられる前記信号を検出する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1130]
前記信号が、
i.フォトルミネセンス、エレクトロルミネセンス、および電気化学ルミネセンスから選択されるルミネセンス、
ii.光吸収、反射、透過、回折、散乱、もしくは拡散、
iii.表面ラマン散乱、
iv.抵抗、静電容量、およびインダクタンスから選択される電気インピーダンス、
v.磁気緩和能、または
vi.i~vの任意の組み合わせ
である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1131]
前記モバイル通信デバイスが、試験結果を医療専門家、医療施設、または保険会社に通信するように構成されている、前記本発明のいずれかのスマートフォンシステム。
[本発明1132]
前記モバイル通信デバイスが、前記対象に関する情報を前記医療専門家、医療施設、または保険会社に通信するようにさらに構成されている、前記本発明のいずれかのスマートフォンシステム。
[本発明1133]
前記モバイル通信デバイスが、医療専門家から処方、診断、または勧告を受信するように構成されている、前記本発明のいずれかのスマートフォンシステム。
[本発明1134]
前記モバイル通信デバイスが、wifiまたはセルラーネットワークを介して遠隔地と通信する、前記本発明のいずれかのスマートフォンシステム。
[本発明1135]
前記モバイル通信デバイスが、携帯電話である、前記本発明のいずれかのスマートフォンシステム。
[本発明1136]
前記試料接触部位が、前記撮像ステップ(e)の前に洗浄されない、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1137]
前記撮像ステップ(e)の前に前記試料接触領域を洗浄することをさらに含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1138]
前記分析物の存在を判定すること、および/または前記分析物の量を測定することをさらに含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1139]
前記計算されたパラメータが、分析される全ての粒子からの平均信号強度を含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1140]
前記計算されたパラメータが、分析される全ての粒子からの最高信号強度を含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1141]
前記計算されたパラメータが、分析される全ての粒子からの信号強度分布を含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1142]
前記計算されたパラメータが、閾値より大きい信号強度で分析される全ての粒子の数を含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1143]
前記計算されたパラメータが、前記画像の第1の領域内で分析される全ての粒子からの平均信号強度を含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1144]
前記計算されたパラメータが、前記画像の第1の領域内で分析される全ての粒子からの最高信号強度を含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1145]
前記計算されたパラメータが、前記画像の第1の領域内で分析される全ての粒子からの信号強度分布を含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1146]
前記計算されたパラメータが、閾値より大きい信号強度で前記画像の第1の領域内において分析される全ての粒子の数を含む、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1147]
前記分析物が、タンパク質、ペプチド、核酸、合成化合物、および無機化合物の検出における分析物である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1148]
前記試料が、羊水、房水、硝子体液、血液(例えば、全血、分画血液、血漿、または血清)、母乳、脳脊髄液(CSF)、耳垢(cerumen)(耳垢(earwax))、乳糜、糜汁(chime)、内リンパ液、外リンパ液、糞便、呼気、胃酸、胃液、リンパ液、粘液(鼻漏および痰を含む)、心膜液、腹膜液、胸膜液、膿、粘膜の分泌物、唾液、呼気凝縮液、皮脂、精液、喀痰、汗、関節液、涙、嘔吐物、および尿から選択される生体試料である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1149]
前記スペーサが、柱の形状を有し、前記柱の幅対高さの比が、1以上である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1150]
前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられた前記試料が、未知の体積を有する、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1151]
前記スペーサが、柱の形状を有し、前記柱が、実質的に均一な断面を有する、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1152]
前記試料が、ある特定の疾患の病期と相関する化合物または生体分子の検出、精製、および定量化のためのものである、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1153]
前記試料が、感染症および寄生虫病、外傷、心血管疾患、癌、精神疾患、神経精神疾患、肺疾患、腎疾患、ならびに他のおよび器質性疾患に関連している、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1154]
前記試料が、微生物の検出、精製、および定量化に関連している、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1155]
前記試料が、環境、例えば、水、土壌、または生体試料からのウイルス、真菌、および細菌に関連している、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1156]
前記試料が、食品の安全性または国家安全保障を危険にさらす化学化合物または生体試料、例えば、毒性廃棄物、炭疽の検出、定量化に関連している、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1157]
前記試料が、医療用モニターまたは生理学的モニターにおけるバイタルパラメータの定量化に関連している、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1158]
前記試料が、グルコース、血液、酸素レベル、総血球数に関連している、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1159]
前記試料が、生体試料からの特定のDNAまたはRNAの検出および定量化に関連している、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1160]
前記試料が、ゲノム分析のための染色体およびミトコンドリア内のDNAにおける遺伝子配列の配列決定および比較に関連している、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1161]
前記試料が、例えば、医用薬剤の合成または精製中に反応生成物を検出することに関連している、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1162]
前記試料が、細胞、組織、体液、および排泄物である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1163]
前記試料が、タンパク質、ペプチド、核酸、合成化合物、無機化合物の前記検出における試料である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1164]
前記試料が、ヒト、獣医、農業、食品、環境、および薬物検査の分野における試料である、前記本発明のいずれかのデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、または方法。
[本発明1165]
前記試料が、血液、血清、血漿、鼻腔ぬぐい液、鼻咽頭洗浄液、唾液、尿、胃液、脊髄液、涙、排泄物、粘液、汗、耳垢、油、腺分泌物、脳脊髄液、組織、精液、膣液、腫瘍組織由来の間質液、眼液、脊髄液、咽頭ぬぐい液、呼吸、毛髪、指の爪、皮膚、生検、胎盤液、羊水、臍帯血、リンパ液、体腔液、喀痰、膿、微生物叢、胎便、母乳、呼気凝縮液鼻咽頭洗浄液、鼻腔ぬぐい液、咽頭ぬぐい液、排泄物試料、毛髪、指の爪、耳垢、呼気、結合組織、筋肉組織、神経組織、上皮組織、軟骨、癌試料、または骨から選択される生体試料である、前記本発明のいずれかの方法またはデバイス。
以下の詳細な説明は、限定ではなく例として本発明のいくつかの実施形態を図示する。存在する場合、本明細書で使用されるセクションの見出しおよび任意のサブタイトルは、単に構成上の目的のためであり、決して説明される主題を限定するものとして解釈されるべきではない。セクションの見出しおよび/またはサブタイトル下の内容は、セクションの見出しおよび/またはサブタイトルに限定されず、本発明の説明全体に適用される。
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本開示が属する分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと同様または同等の任意の方法および材料も本教示の実施または試験に使用され得るが、いくつかの例示的な方法および材料がここで記載される。
に等しいパラメータを指し、式中、Dは、試料中の分析物の拡散定数であり、tは、意図されたアッセイ時間であり(すなわち、拡散パラメータは、試料中の分析物の拡散定数の平方根に意図されたアッセイ時間を乗じたものに等しい)、意図されたアッセイ時間は、時間パラメータである。例えば、試料中の分析物の拡散定数が1×10-7cm2/秒である場合、意図されたアッセイ時間は60秒であり、拡散パラメータは24um(ミクロン)である。一般的な分析物拡散定数のいくつかは、PBS中のIgG:3×10-7cm2/秒、血液中のIgG:1×10-7cm2/秒、および血液中の20bp DNA:4×10-7cm2/秒である。
本発明の1つの目的は、「ワンステップ」で均質アッセイを実施することである。「ワンステップ」アッセイとは、アッセイにおいて、アッセイ上の試料を滴下し、信号を読み取り、その間に他のステップ(例えば、洗浄)がないことを意味する。アッセイとしては、タンパク質アッセイおよび核酸アッセイが挙げられるが、これらに限定されない。
CROFでは、部分的に、CROFが数秒で開放構成から閉鎖構成に変化し、圧縮(すなわち、指を使用した押圧)によって押し付けられるため、分析物は、試料層内の各領域に対してより均一に分布される。
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、を備え、
i.第1および第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含有する疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.第1のプレートが、その内面上に固定されたスペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、スペーサが、100um以下に等しい所定の実質的に均一な高さを有し、
iv.複数の粒子が、それらの表面上に固定化された捕捉剤を有し、捕捉剤が、分析物を特異的に結合および固定化することが可能であり、かつ
v.複数の粒子が、(a)スペーサが占める領域を除いて、第1のプレートの試料接触領域に分布し、(b)第1のプレート上に一時的または恒久的に固定され、
開放構成では、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されず、試料が、プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
開放構成において試料が載せられた後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節される、デバイス。
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、を備え、
i.第1および第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含有する疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.一方または両方のプレートが、その内面上に固定されたスペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、スペーサが、100um以下に等しい所定の実質的に均一な高さを有し、
iv.複数の粒子が、それらの表面上に固定化された捕捉剤を有し、捕捉剤が、分析物を特異的に結合および固定化することが可能であり、かつ
v.複数の粒子が、(a)第1の試料接触領域に分布し、(b)プレート上に一時的または恒久的に固定され、
開放構成では、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されず、試料が、プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
開放構成において試料が載せられた後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節される、デバイス。
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)捕捉剤が、分析物の結合部位に特異的に結合することが可能である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイスを取得するステップと、
(c)デバイスの試料接触領域の少なくとも一部の上に光標識を有するステップであって、光標識が、分析物に結合することが可能である、ステップと、
(d)プレートが開放構成にあるときに、プレートのうちの一方または両方の上に試料を載せるステップであって、開放構成において、
(e)(d)の後、2つのプレートを一緒にし、プレートを閉鎖構成へと押圧するステップであって、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節される、ステップと、
(f)プレートが閉鎖構成にある間に、均一な厚さの層内の分析物を分析するステップと、を含み、分析が、
i.試料層の外側から、(a)1つの粒子を含有する試料層の領域である粒子領域、および(b)粒子領域の周囲にある試料層の領域である周囲領域からの全光信号を測定することであって、周囲領域が、粒子の縁部内で50Dであり、Dが、粒子の直径である、測定することと、
ii.粒子領域および少なくとも2つの異なる粒子領域の周囲領域の各々からの全光信号を測定することと、を含む、方法。
i.先行する実施形態のいずれかに記載のデバイスと、
ii.試料接触領域の少なくとも一部を撮像する1つの撮像装置または複数の撮像装置と、を備える、装置。
(a)先行する実施形態のいずれかに記載のデバイスと、
(b)
i.試料を検出および/または撮像するための1つまたは複数のカメラ、
ii.検出された信号および/または試料の画像(複数可)を受信および/または処理し、かつ遠隔通信するための電子機器、信号プロセッサ、ハードウェア、およびソフトウェア、を備える、モバイル通信デバイスと、
(c)閉鎖構成にあるデバイスを収容し、モバイル通信デバイスに係合可能であるように構成されたアダプタと、を備え、
モバイル通信デバイスと係合したとき、アダプタが、試料中の分析物の検出および/または撮像を容易にするように構成されている、スマートフォンシステム。
試料中の分析物を検出するワンステップアッセイを達成するために、本発明の重要なアプローチは、洗浄することなく試料中で「見える」(すなわち、試料の残りの部分から区別可能である)捕捉分析物を作製することである。「捕捉分析物」という用語は、捕捉剤によって選択的に(すなわち、特異的に)捕捉されている分析物を指す。
(i)試料中の1つまたは複数の位置(「濃縮位置」と呼ばれる)に結合標識を集中させる一方で、試料の他の位置における結合標識の濃度を低減する。
(ii)分析物濃縮領域におけるローカルバックグラウンド信号(C-LBS)を低減し、C-LBSは、濃縮表面の前にある試料体積(したがって、試料体積は局所的な試料厚さ(分析物濃縮領域から前部プレートの内面まで)によって発生するバックグラウンド信号に、その位置における濃縮表面の面積を乗じたものとして定義される。例えば、濃縮突出部の位置にあるC-LBS(突出部頂面のみが分析物濃縮領域を有する)は、試料体積のバックグラウンド信号であり、体積は、突出部の頂部と頂部プレート表面との間の距離に、関心のある位置における突出部の頂部の面積を乗じたものに等しい。この例では、明らかに、突出部が高いほど、ローカルバックグラウンド体積が小さくなり、したがってC-LBSが小さくなる。
(iii)増幅表面上に結合標識を選択的に(すなわち、結合標識のみ、非結合標識のみ)付着させ、増幅表面は、標識が表面に付着しているか、または表面から短い距離内(例えば、1um未満)にあるときのみ標識のシグナルを増幅する。
(iv)標識を有する表面に結合消光剤を選択的に付着させ、標識表面は、消光剤が表面に付着しているか、または表面から短い距離内(例えば、1um未満)にあるときのみシグナルを低減する。
(v)それらの組み合わせ。
標識分析物/結合標識を濃縮するための本発明の実施形態の例が、以下に示される。
試料-プレートサンドイッチの前部プレートを通して発せられる光信号を撮像するために検出器が使用される場合、2D画像が取得される。
本発明によると、アッセイは、以下の3つのアプローチを使用することによって、短いアッセイ時間(すなわち、高速化)を有することができる:(a)2つのプレートを使用して試料をプレート間に挟持し薄層にすること、および2つのプレート間の間隔(したがって、試料の少なくとも一部の厚さ)を小さいサイズに制限することによって(例えば、拡散パラメータが小さいほど拡散時間が短くなるため、間隔は拡散パラメータ(定義で定義された)以下である)、(b)2つの隣接する分析物濃縮領域間の平均横方向距離(すなわち、分析物濃縮領域間距離(IACD)を小さくすること(例えば、IACDは拡散パラメータの2倍以下である)、ならびに(c)(a)および(b)。
本発明によると、2つのプレート間の間隔、したがって試料厚さは、スペーサを使用することによって制御される。
2.1 濃縮表面を有するRHA.
結合標識を濃縮するためのデバイスは、2つのプレートの間に試料(分析物を有する)が挟持された2つのプレート(または閉鎖チャネル)を備え、プレートのうちの一方または両方は、プレートの内面上に分析物濃縮領域を有し、分析物濃縮領域は、直接または間接的に結合標識に選択的に結合する捕捉剤を有する(すなわち、分析物濃縮領域は、プレートの残りの領域よりも結合標識に結合する親和性が高い)。
結合標識を濃縮するためのデバイスは、2つのプレートの間に試料(分析物を有する)が挟持された2つのプレート(または閉鎖チャネル)を備え、プレートのうちの一方または両方は、突出部を有し、突出部は、突出部の表面のうちの少なくとも1つの上に分析物濃縮領域を有し、分析物濃縮領域は、標識分析物/結合標識および/または標識される分析物に選択的に結合する捕捉剤を有する。
図3は、プレート上に「突出部」柱および「スペーサ」柱を備えた均質アッセイのためのデバイスの例示的な実施形態の概略図を示す。(a)上面図および(b)断面図。図に示されるように、突出部柱は、デバイス内のスペーサよりも低い高さを有する。いくつかの実施形態では、突出部およびスペーサが同様の形状を有する一方で、他の実施形態では、それらの形状は異なる。
(a)突出部の1つまたはいくつかの表面をコーティングデバイスの表面上の試薬と接触させることであって、試薬は、標識分析物/結合標識および/または標識される分析物に選択的に結合するように構成された捕捉剤を含む。
(b)突出部の1つまたはいくつかの表面を結合層で蒸発させることであって、結合層は、デバイスを試薬中に浸漬するときに捕捉剤に結合する。
(c)突出部および/または後部平面の1つまたはいくつかの表面を結合阻止層で蒸発させることであって、結合阻止層は、捕捉剤に結合することを妨げられ、一方で、結合阻止層のない表面は、捕捉剤に結合することが可能である。
(d)上記の方法の組み合わせ。
標識分析物/結合標識を濃縮するためのデバイスは、2つのプレートの間に試料(分析物を有する)が挟持された2つのプレート(または閉鎖チャネル)を備え、1つのビーズまたは複数のビーズが試料中に配置され、ビーズは、ビーズの表面上に分析物濃縮領域を有し、分析物濃縮領域は、標識分析物/結合標識および/または標識される分析物に選択的に結合する捕捉剤を有する。
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能である第1および第2のプレートを取得するステップであって、
i.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、試料と接触するための試料接触領域を有し、
ii.プレートのうちの一方または両方が、スペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、
iii.プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された複数のビーズを含み、捕捉剤が、分析物に結合し、固定化することが可能であり、
iv.プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面上に、試料に接触すると試料中に溶解し、分析物に結合するように構成された検出剤を含み、
スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有する、ステップと、
(c)プレートが開放構成にあるとき、プレートのうちの一方または両方の上に試料を載せるステップであって、開放構成において、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されない、ステップと、
(d)(c)の後、2つのプレートを一緒にし、プレートを閉鎖構成へと押圧するステップであって、閉鎖構成において、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、2つのプレートの内面によって限定され、かつスペーサおよびプレートによって調節される、ステップと、
(e)プレートが閉鎖構成にある間に、均一な厚さの層内の分析物を検出するステップと、を含み、
捕捉剤および検出剤は、その異なる位置で分析物に結合し、ビーズに固定化された捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチを形成するように構成され、
ビーズ、捕捉剤、および検出剤は、粒子関連捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチからの信号を、均一な厚さの層内の遊離検出剤の信号と区別可能にするように構成されている。
(a)閉鎖構成にある実施形態AB1に記載のデバイスにおいて信号の画像を取得するステップであって、画像が、明視野画像、暗視野画像、蛍光画像、およびリン光画像からなる群から選択される、ステップと、
(b)画像を分析し、画像内のビーズを特定し、かつビーズサイズ、ビーズの信号強度、ビーズ間の距離、ビーズの分布、およびビーズ数の情報を抽出するステップと、
(c)ステップ(b)からの抽出された情報を分析し、ビーズのパラメータを計算することによって、分析物濃度を推定するステップと、を含む。
ある特定の実施形態では、プレート上の濃縮ビーズの周期的な配置は、以下の点で有利である:1)周期性は、ビーズ凝集の可能性を低減する、2)慎重に設計されたビーズ間間隔は、各ビーズの濃縮空間(ある特定の期間内に全ての分析物が個々のビーズによって吸収され得るビーズ周囲の空間)が互いと有意に重なり合っていない場合、最大の濃縮効率を確実にし、それにより各個々のビーズを最大限活用する。
免疫学的測定に加えて、本発明は、均質核酸ハイブリダイゼーションアッセイにも使用される。
1.捕捉プローブのビーズへの結合.ビオチン化捕捉プローブをストレプトアビジンコーティングビーズ(Piece、直径10μm)上でコーティングする。
2.ビーズのブロッキング.捕捉プローブコーティングビーズを4℃で一晩、PBS中の4%BSAによってブロックし、使用前にPBSTによって6回洗浄する。
3.第1のプレートのコーティング.ステップ2からのビーズ1μL(ビーズ濃度107~108/mL)をガラススライド(Fisher Scientific)上に滴下し、室温で空気乾燥させる。
4.均質アッセイ.目的の標的核酸を含有する試料1μLおよびCy5標識検出プローブ1μLを、ガラススライド上のコーティングビーズの領域上に滴下する。混合物を、10μmの柱を備えたXプレート(第2のプレート)によってすぐにコーティングし、1分間インキュベートする。
5.撮像.洗浄することなく、蛍光顕微鏡によって蛍光画像を撮影する。
本発明のいくつかの実施形態によると、RHAはまた、ある特定の領域(例えば、分析物濃縮領域、濃縮突出部、またはビーズ)が非標識分析物を捕捉する競合アッセイにも使用され得る。これらの場合、非標識分析物は、標識検出剤と競合して、捕捉剤に結合する。捕捉分析物の信号は、捕捉剤を有するある特定の領域(分析物濃縮領域、濃縮突出部、またはビーズ)がバックグラウンドの非結合標識検出剤と比較してより低い信号レベルを示すという点で、バックグラウンド信号と区別可能である。均質は、洗浄のステップを使用しない。均質アッセイもオンステップであり、試料を1つのプレート上に滴下し、プレートを閉鎖し、信号を読み取る準備ができる。
本明細書に開示されるデバイス、装置、システム、および方法に関して、プレートおよび/または試料の操作または取り扱いのために人間の手が使用され得る。いくつかの実施形態では、プレートを閉鎖構成へと押圧するために、人間の手が使用され得る。いくつかの実施形態では、試料を薄層に押圧するために、人間の手が使用され得る。手押圧が用いられる様式は、2016年8月10日に出願されたPCT出願(米国指定)第PCT/US2016/045437号および2016年9月14日に出願された第PCT/US0216/051775号、ならびに2016年12月9日に出願された米国仮出願第62/431,639号、2017年2月8日に出願された第62/456,287号、2017年2月7日に出願された第62/456,065号、2017年2月8日に出願された第62/456,504号、および2017年2月16日に出願された第62/460,062号に記載および/または要約されており、これらは全て、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本発明の別の態様は、均質アッセイのための多重化能力を備えたデバイスおよび方法を提供することである。
(1)異なるタイプの標識が異なる種の分析物に直接付着しているか、または対応する種の分析物に結合する異なる検出剤。
(2)異なる種の分析物を捕捉するために異なるタイプのビーズが使用され、ビーズのタイプは、検出方法によって区別可能である。
(3)(1)および(2)の組み合わせ。
いくつかの実施形態では、アッセイは、サンドイッチアッセイであり、捕捉剤および検出剤は、その異なる位置で分析物に結合し、捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチを形成するように構成されている。
(a)N-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)による活性化、
(b)BSA溶液によるブロッキング、および
(c)捕捉剤溶液とのインキュベート、によって調製される。
本発明の別の態様は、均質アッセイのためのシステムを提供する。いくつかの実施形態では、システムは、上述のデバイスと、均一な厚さの層内の分析物を検出する検出器と、を備える。
i.フォトルミネセンス、エレクトロルミネセンス、および電気化学ルミネセンスから選択されるルミネセンス、
ii.光吸収、反射、透過、回折、散乱、または拡散、
iii.表面ラマン散乱、
iv.抵抗、静電容量、およびインダクタンスから選択される電気インピーダンス、
v.磁気緩和能、または
vi.i~vの任意の組み合わせ、である。
(a)前述の実施形態のいずれかに記載のデバイスと、
(b)
i.試料を検出および/または撮像するための1つまたは複数のカメラ、
ii.検出された信号および/または試料の画像を受信および/または処理し、かつ遠隔通信するための電子機器、信号プロセッサ、ハードウェア、およびソフトウェア、を備える、モバイル通信デバイスと、
(c)閉鎖したデバイスを保持し、モバイル通信デバイスに係合可能であるように構成されたアダプタと、を備え、
モバイル通信デバイスと係合したとき、アダプタは、閉鎖構成にある試料中の分析物の検出および/または撮像を容易にするように構成されている。
いくつかの実施形態では、均質アッセイで検出される分析物としては、細胞、ウイルス、タンパク質、ペプチド、DNA、RNA、オリゴヌクレオチド、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
多重化BEST
NA1.
均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、を備え、
vi.第1および第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
vii.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含有する疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
viii.第1のプレートが、その内面上に固定されたスペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、スペーサが、100um以下に等しい所定の実質的に均一な高さを有し、
ix.複数の粒子が、それらの表面上に固定化された捕捉剤を有し、捕捉剤が、分析物を特異的に結合および固定化することが可能であり、かつ
x.複数の粒子が、(a)スペーサが占める領域を除いて、第1のプレートの試料接触領域に分布し、(b)第1のプレート上に一時的または恒久的に固定され、
開放構成では、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されず、試料が、プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
開放構成において試料が載せられた後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の前記均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節される、デバイス。
均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、を備え、
vi.第1および第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
vii.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含有する疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
viii.一方または両方のプレートが、その内面上に固定されたスペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、スペーサが、100um以下に等しい所定の実質的に均一な高さを有し、
ix.複数の粒子が、それらの表面上に固定化された捕捉剤を有し、捕捉剤が、分析物を特異的に結合および固定化することが可能であり、かつ
x.複数の粒子が、(a)第1の試料接触領域に分布し、(b)プレート上に一時的または恒久的に固定され、
開放構成では、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されず、試料が、プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
開放構成において試料が載せられた後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節される、デバイス。
プレート上の複数の粒子の分布が、ランダムである、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
複数の粒子が、プレート上に固定され、周期的な分布を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサが、平坦な頂部を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
複数の粒子が、第1のプレート上に一時的に固定され、開放構成では、2つのプレートが閉鎖構成になる前に、試料が第1のプレート上に載せられる、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサの厚さが、閉鎖構成において、試料中の分析物のある特定の濃度に対して、粒子のうちの1つを含有する均一な厚さの試料の少なくとも1つの領域が、試料層の外側から見たときに粒子を含有しないその隣接領域と光学的に区別可能になるように構成されている、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、押圧が、人間の手によるものである、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
複数の粒子のうちの1つ以上の直径が、スペーサの高さに等しい、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサの高さが、約10umである、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサの高さが、約5umである、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサの高さが、約0.1um~約15umである、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサの高さが、約0.1um~約3umである、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
一方のプレートまたは両方のプレートの内面の少なくとも一部分が、親水性である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサ間距離が、周期的である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
試料が、いかなる輸送デバイスも使用せずに対象からプレートへ直接載せられたものである、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
閉鎖構成における試料の変形後、圧縮力の一部または全てが除去されたとき、試料が、同じ最終試料厚さを維持する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサが、柱形状およびほぼ均一な断面を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサ間距離(SD)が、約120um(マイクロメートル)以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサ間距離(SD)が、約100um(マイクロメートル)以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサ間距離(ISD)の4乗を可撓性プレートの厚さ(h)およびヤング率(E)で割ったもの(ISD^4/(hE))が、5x10^6um^3/GPa以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサ間距離(ISD)の4乗を可撓性プレートの厚さ(h)およびヤング率(E)で割ったもの(ISD^4/(hE))が、5x10^5um3/GPa以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサが、柱形状、実質的に平坦な頂面、所定の実質的に均一な高さ、および分析物のサイズより少なくとも約2倍大きい所定の一定のスペーサ間距離を有し、スペーサのヤング率にスペーサの充填率を掛けたものが、2MPa以上であり、充填率が、全プレート面積に対するスペーサの接触面積の比であり、各スペーサに対して、スペーサの横寸法対その高さの比が、少なくとも1である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサが、柱形状、実質的に平坦な頂面、所定の実質的に均一な高さ、および分析物のサイズより少なくとも約2倍大きい所定の一定のスペーサ間距離を有し、スペーサのヤング率にスペーサの充填率を掛けたものが、2MPa以上であり、充填率が、全プレート面積に対するスペーサの接触面積の比であり、各スペーサに対して、スペーサの横寸法対その高さの比が、少なくとも1であり、スペーサ間距離(ISD)の4乗を可撓性プレートの厚さ(h)およびヤング率(E)で割ったもの(ISD^4/(hE))が、5x10^6um^3/GPa以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
スペーサの平均幅に対するスペーサのスペーシング間距離の比が、2以上であり、スペーサの充填率にスペーサのヤング率を乗じたものが、2MPa以上である、先行するデバイス実施形態のいずれかに記載のデバイス。
均質アッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)捕捉剤が、分析物の結合部位に特異的に結合することが可能である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイスを取得するステップと、
(c)デバイスの試料接触領域の少なくとも一部の上に光標識を有するステップであって、光標識が、分析物に結合することが可能である、ステップと、
(d)プレートが開放構成にあるときに、プレートのうちの一方または両方の上に試料を載せるステップであって、開放構成において、
(e)(d)の後、2つのプレートを一緒にし、プレートを閉鎖構成へと押圧するステップであって、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節される、ステップと、
(f)プレートが閉鎖構成にある間に、均一な厚さの層内の分析物を分析するステップと
を含み、分析が、
i.試料層の外側から、(a)1つの粒子を含有する試料層の領域である粒子領域、および(b)粒子領域の周囲にある試料層の領域である周囲領域からの全光信号を測定することであって、周囲領域が、粒子の縁部内で50Dであり、Dが、粒子の直径である、測定することと、
ii.粒子領域および少なくとも2つの異なる粒子領域の周囲領域の各々からの全光信号を測定することと
を含む、方法。
全光信号測定のための粒子領域が、粒子直径と実質的に同じ領域を有する、先行する実施形態のいずれかに記載の方法。
全光信号測定のための粒子領域が、粒子直径によって画定される領域よりも小さい、先行する実施形態のいずれかに記載の方法。
均一な試料層内の分析物の分析が、各領域からの全光信号の平均化を含む、先行する実施形態のいずれかに記載の方法。
均一な試料層内の分析物の分析が、(i)各粒子領域の全光信号の、その周囲領域の全光信号に対する比を測定することと、(ii)全ての粒子領域および周囲領域の対の比を平均することと、を含む、先行する実施形態のいずれかに記載の方法。
試料を載せることの終了から、プレートの閉鎖構成への押圧の終了までの時間が、15秒未満である、先行する実施形態のいずれかに記載の方法。
試料を載せることの終了から、プレートの閉鎖構成への押圧の終了までの時間が、5秒未満である、先行する実施形態のいずれかに記載の方法。
試料中の分析物を均質に分析するための装置であって、
i.先行する実施形態のいずれかに記載のデバイスと、
ii.試料接触領域の少なくとも一部を撮像する1つ以上の撮像装置と
を備える、装置。
迅速な多重化均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、第1の分析物および第2の分析物を含有する疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.プレートのうちの一方または両方が、スペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、
iv.プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面上に、複数の第1の粒子および第2の粒子を含み、第1および第2の粒子が、その上にそれぞれ固定化された第1および第2の捕捉剤を有し、かつ
v.第1および第2の捕捉剤が、それぞれ第1および第2の分析物に結合し、固定化することが可能であり、
開放構成では、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されず、試料が、プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
開放構成において試料が載せられた後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節され、均一な厚さの層内の分析物が、粒子によって濃縮され、これにより粒子上の捕捉分析物の信号が、均一な厚さの層内の他の領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
均質アッセイのためのスマートフォンシステムであって、
(a)先行する実施形態のいずれかに記載のデバイスと、
(b)
i.試料を検出および/または撮像するための1つまたは複数のカメラ、
ii.検出された信号および/または試料の画像(複数可)を受信および/または処理し、かつ遠隔通信するための電子機器、信号プロセッサ、ハードウェア、およびソフトウェア、を備える、モバイル通信デバイスと、
(c)閉鎖構成にあるデバイスを収容し、モバイル通信デバイスに係合可能であるように構成されたアダプタと
を備え、
モバイル通信デバイスと係合したとき、アダプタが、試料中の分析物の検出および/または撮像を容易にするように構成されている、スマートフォンシステム。
第1および第2の粒子が異なる、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、スマートフォンシステム、および方法。
第1および第2の粒子のサイズが異なる、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、スマートフォンシステム、および方法。
第1および第2の粒子が、フォトルミネセンス、エレクトロルミネセンス、および電気化学ルミネセンス、光吸収、反射、透過、回折、散乱、拡散、表面ラマン散乱、ならびにそれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるそれらの光学特性について異なる、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、スマートフォンシステム、および方法。
第1および第2の粒子の電気密度が異なる、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、スマートフォンシステム、および方法。
第1および第2の粒子が同じであり、第1および第2の分析物からの信号が異なる、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、スマートフォンシステム、および方法。
NJ1.
周期的に配置された粒子を有するプレートを作製する方法であって、
(1)その内面上に複数のピットを備えるプレートを有するステップであって、ピットが周期的に配置されている、ステップと、
(2)プレートの内面上に複数の粒子を含有する液体を載せるステップと、
(3)プレートを乾燥させるステップであって、このプロセス中に、少なくともピットの隆起部に対する毛管力により、粒子がピット内に再分布される、ステップと
を含む、方法。
AA1-1.
迅速な均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含む疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.プレートのうちの一方または両方が、スペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、かつ
iv.プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された1つまたは複数の分析物濃縮領域を備え、捕捉剤が、分析物に結合し、固定化することが可能であり、
開放構成では、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されず、試料が、プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
開放構成において試料が載せられた後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節され、均一な厚さの層内の分析物が、分析物濃縮領域内で濃縮され、これにより分析物濃縮領域内の捕捉分析物の信号が、均一な厚さの層内の非分析物濃縮領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
AA2.
プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面から延出する1つまたは複数の突出部を備え、各突出部が、スペーサよりも低い高さを有し、その表面のうちの少なくとも1つの上に分析物濃縮領域を備える、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
AB1.
迅速な均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと
を備え、
i.プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含む疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.プレートのうちの一方または両方が、スペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、かつ
iv.プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された複数の粒子を含み、捕捉剤が、分析物に結合し、固定化することが可能であり、
開放構成では、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されず、試料が、プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
開放構成において試料が載せられた後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節され、均一な厚さの層内の分析物が、粒子によって濃縮され、これにより粒子上の捕捉分析物の信号が、均一な厚さの層内の他の領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
C1.
迅速な均質アッセイのためのシステムであって、
(a)先行する実施形態のいずれかに記載のデバイスと、
(b)均一な厚さの層内の分析物の存在および/または量を示す捕捉剤結合分析物からの信号を検出する検出器と、を備える、システム。
D1.
迅速な均質アッセイのためのスマートフォンシステムであって、
(a)先行する実施形態のいずれかに記載のデバイスと、
(b)
i.試料を検出および/または撮像するための1つまたは複数のカメラ、
ii.検出された信号および/または試料の画像を受信および/または処理し、かつ遠隔通信するための電子機器、信号プロセッサ、ハードウェア、およびソフトウェアを備える、モバイル通信デバイスと、
(c)閉鎖したデバイスを保持し、モバイル通信デバイスに係合可能であるように構成されたアダプタと
を備え、
モバイル通信デバイスと係合したとき、アダプタが、閉鎖構成にある試料中の分析物の検出および/または撮像を容易にするように構成されている、スマートフォンシステム。
AE1.
迅速な均質アッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)先行する実施形態のいずれかに記載のデバイスを取得するステップと、
(c)プレートが開放構成にあるときに、プレートのうちの一方または両方の上に試料を載せるステップと、
(d)(c)の後、2つのプレートを一緒にし、プレートを閉鎖構成へと押圧するステップと、
(e)プレートが閉鎖構成にある間に、均一な厚さの層内の分析物を検出および分析するステップと
を含む、方法。
迅速な均質アッセイのための画像を分析する方法であって、
(a)閉鎖構成にある先行する実施形態のいずれかに記載の信号の画像を取得するステップであって、画像が、明視野画像、暗視野画像、蛍光画像、およびリン光画像からなる群から選択される、ステップと、
(b)画像を分析し、画像内の粒子を特定し、かつ粒子サイズ、粒子の信号強度、粒子間の距離、粒子の分布、および粒子数の情報を抽出するステップと、
(c)ステップ(b)からの抽出された情報を分析し、粒子のパラメータを計算することによって、分析物濃度を推定するステップと
を含む、方法。
均質アッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能である第1および第2のプレートを取得するステップであって、
v.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、試料と接触するための試料接触領域を有し、
vi.プレートのうちの一方または両方が、スペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、
vii.プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された複数の粒子を含み、捕捉剤が、分析物に結合し、固定化することが可能であり、
viii.プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面上に、試料に接触すると試料中に溶解し、分析物に結合するように構成された検出剤を含み、
スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有する、ステップと、
(c)プレートが開放構成にあるとき、プレートのうちの一方または両方の上に試料を載せるステップであって、開放構成において、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されない、ステップと、
(d)(c)の後、2つのプレートを一緒にし、プレートを閉鎖構成へと押圧するステップであって、閉鎖構成において、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、2つのプレートの内面によって限定され、かつスペーサおよびプレートによって調節される、ステップと、
(e)プレートが閉鎖構成にある間に、均一な厚さの層内の分析物を検出および分析するステップと、を含み、
捕捉剤および検出剤が、その異なる位置で分析物に結合し、粒子に固定化された捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチを形成するように構成され、
粒子、捕捉剤、および検出剤が、粒子関連捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチからの信号を、均一な厚さの層内の遊離検出剤の信号と区別可能にするように構成されている、方法。
AA1-2.
迅速な均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含む疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.プレートのうちの一方または両方が、スペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、スペーサが、200um以下の所定の実質的に均一な高さを有し、かつ
iv.プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された1つまたは複数の分析物濃縮領域を備え、捕捉剤が、分析物に結合することが可能であり、
スペーサが、拡散パラメータの4倍以下である高さを有し、拡散パラメータが、意図されたアッセイ時間の平方根に試料中の分析物の拡散定数を乗じたものであり、意図されたアッセイ時間が、240秒以下であり、
2つの隣接する分析物濃縮領域間の平均距離が、前記拡散パラメータの4倍以下であり、
開放構成では、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されず、試料が、プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
開放構成において試料が載せられた後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節され、均一な厚さの層内の分析物が、濃縮領域内で濃縮され、これにより濃縮領域内の捕捉分析物の信号が、均一な厚さの層内の非濃縮領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面から延出する1つまたは複数の突出部を備え、各突出部が、スペーサよりも低い高さを有し、その表面のうちの少なくとも1つの上に分析物濃縮領域を備える、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス。
迅速な均質アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含む疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.プレートのうちの一方または両方が、スペーサを備え、スペーサのうちの少なくとも1つが、試料接触領域内にあり、スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、かつ
iv.プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された複数の粒子を含み、捕捉剤が、分析物に結合し、固定化することが可能であり、
スペーサが、拡散パラメータの3倍以下である高さを有し、拡散パラメータが、意図されたアッセイ時間の平方根に試料中の分析物の拡散定数を乗じたものであり、意図されたアッセイ時間が、240秒以下であり、
2つの隣接する粒子間の平均距離が、拡散パラメータの2倍以下であり、
開放構成では、2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、プレート間の間隔が、スペーサによって調節されず、試料が、プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
開放構成において試料が載せられた後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、層の均一な厚さが、プレートの内面によって限定され、かつプレートおよびスペーサによって調節され、均一な厚さの層内の分析物が、濃縮領域内で濃縮され、これにより濃縮領域内の捕捉分析物の信号が、均一な厚さの層内の非濃縮領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
迅速な均質アッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)先行する実施形態のいずれかに記載のデバイスを取得するステップと、
(c)プレートが開放構成にあるときに、プレートのうちの一方または両方の上に試料を載せるステップと、
(d)(c)の後、2つのプレートを一緒にし、プレートを閉鎖構成へと押圧するステップと、
(e)ステップ(d)の後、意図されたアッセイ時間以上の時間にわたってアッセイをインキュベートし、均一な厚さの層内の分析物を検出および分析するステップと
を含む、方法。
意図されたアッセイ時間が、0.1~240秒の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
意図されたアッセイ時間が、1~60秒の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
意図されたアッセイ時間が、30秒以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
意図されたアッセイ時間が、10秒以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
意図されたアッセイ時間が、5秒以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
意図されたアッセイ時間が、1秒以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離が、50nm~200umの範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離が、500nm~20umの範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離が、500nm~10umの範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離が、500nm~5umの範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~2の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.1~1.5の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~0.5の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~0.2の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~0.1の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~5の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~1.5の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~1の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~0.5の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~0.2の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~0.1の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~5の範囲であり、スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~0.2の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~1の範囲であり、スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~0.5の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~2の範囲であり、スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~1の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~4の範囲であり、スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~1の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~0.5の範囲であり、スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~0.2の範囲であり、意図されたアッセイ時間が、120秒以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~1の範囲であり、スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~0.5の範囲であり、意図されたアッセイ時間が、60秒以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~2の範囲であり、スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~1の範囲であり、意図されたアッセイ時間が、30秒以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
拡散パラメータに対する2つの隣接する分析物濃縮領域または粒子間の平均距離の比が、0.01~4の範囲であり、スペーサの高さ対拡散パラメータの比が、0.01~1の範囲であり、意図されたアッセイ時間が、30秒以下である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
(サンドイッチアッセイ)
AA1
分析物が、分析物に選択的に結合しかつ標識と会合される検出剤によって標識される、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
検出剤が、プレートのうちの一方または両方の内面(複数可)上にコーティングされ、試料と接触すると試料中に溶解し、拡散するように構成されている、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料がプレート(複数可)上に載せられる前に、検出剤が、試料中に予め装填される、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
捕捉剤および検出剤が、その異なる位置で分析物に結合し、捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチを形成するように構成されている、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
AA2
分析物が、検出剤と競合して捕捉剤に結合し、検出剤が、標識されている、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
プレートのうちの一方または両方が、それぞれの内面上に、増幅表面に近接する信号を増幅する信号増幅表面を備える、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、閉鎖構成にある層の厚さを調節するスペーサである、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、1nm~200umの範囲の平均直径を有するマイクロ粒子またはナノ粒子である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
分析物濃縮領域が、1nm~200umの範囲の平均直径を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
濃縮突出部が、1nm~200umの範囲の平均直径を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、0.1μm~10μmの範囲の平均直径を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、1nm~500nmの範囲の平均直径を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、0.5μm~30μmの範囲の平均直径を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
閉鎖構成にあるプレート間の間隔と粒子の平均直径との間の比が、1~100の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
閉鎖構成にあるプレート間の間隔と分析物濃縮領域の高さとの間の比が、1~100の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
閉鎖構成にあるプレート間の間隔と濃縮突出部の高さとの間の比が、1~100の範囲である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、1mm2当たり1~106の面積密度を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
分析物濃縮領域が、1mm2当たり1~106の面積密度を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
濃縮突出部が、1mm2当たり1~106の面積密度を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、1mm2当たり1~1000の面積密度を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、粒子に近接する信号を増幅するように構成され、1~10000の範囲の信号増幅率を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
検出抗体が、試料中の分析物濃度よりも1~1000倍高い均一な厚さの層内の濃度を有するように構成されている、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子および検出剤が、同じプレート上にある、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子および検出剤が、異なるプレート上にある、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
分析物が、細胞、ウイルス、タンパク質、ペプチド、DNA、RNA、オリゴヌクレオチド、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
分析物が、C反応性タンパク質(CRP)である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
捕捉剤が、タンパク質、ペプチド、ペプチド模倣物、ストレプトアビジン、ビオチン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド模倣物、任意の他の親和性リガンド、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
捕捉剤が、抗体である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
捕捉抗体が、抗C反応性タンパク質(CRP)抗体である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
捕捉剤が、分析物の存在を検出し、かつ/または量を測定するのに十分である濃度を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
捕捉剤が、分析物を固定化するのに十分である濃度を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
検出剤が、タンパク質、ペプチド、ペプチド模倣物、ストレプトアビジン、ビオチン、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド模倣物、任意の他の親和性リガンド、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
検出剤が、抗体である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
検出抗体が、抗CRP抗体である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、PMMG、PC、COC、COP、ガラス、樹脂、アルミニウム、金もしくは他の金属、または表面が修飾されて前記捕捉剤と会合され得る任意の他の材料からなる群から選択される材料でできている、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、タンパク質安定剤で処理されている、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
捕捉剤が、前記粒子と結合している、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
粒子が、
(d)N-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)による活性化、
(e)BSA溶液によるブロッキング、および
(f)捕捉剤溶液とのインキュベート
によって調製される、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
液体試料が、羊水、房水、硝子体液、血液(例えば、全血、分画血液、血漿、または血清)、母乳、脳脊髄液(CSF)、耳垢(cerumen)(耳垢(earwax))、乳糜、糜汁(chime)、内リンパ液、外リンパ液、糞便、呼気、胃酸、胃液、リンパ液、粘液(鼻漏および痰を含む)、心膜液、腹膜液、胸膜液、膿、粘膜の分泌物、唾液、呼気凝縮液、皮脂、精液、喀痰、汗、関節液、涙、嘔吐物、尿、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される生体試料から作られる、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、川、湖、池、海、氷河、氷山、雨、雪、下水、貯水池、水道水、または飲料水からなる群から選択される供給源からの環境液体試料、土壌、堆肥、砂、岩、コンクリート、木材、レンガ、下水からの固体試料、およびそれらの任意の組み合わせである、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、空気、水中排熱口、産業排気、車両排気、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される供給源からの環境気体試料である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、生の材料、調理済み食品、植物および動物の食物源、予め加工済みの食品、および部分的または完全に加工済みの食品、ならびにそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される食品試料である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
検出剤が、標識剤である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
検出剤が、フルオロフォアで標識される、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
フルオロフォアが、Cy5である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
A8.2
粒子が、標識と会合され、検出剤が、検出剤が標識に近接しているときに粒子会合標識のシグナルを消光するように構成された消光剤である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
検出器が、分析物の存在および/または量を示す分析物濃縮領域または粒子から発せられる信号を検出する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
信号が、
i.フォトルミネセンス、エレクトロルミネセンス、および電気化学ルミネセンスから選択されるルミネセンス、
ii.光吸収、反射、透過、回折、散乱、または拡散、
iii.表面ラマン散乱、
iv.抵抗、静電容量、およびインダクタンスから選択される電気インピーダンス、
v.磁気緩和能、または
vi.i~vの任意の組み合わせ
である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
モバイル通信デバイスが、試験結果を医療専門家、医療施設、または保険会社に通信するように構成されている、先行する実施形態のいずれかに記載のスマートフォンシステム。
モバイル通信デバイスが、試験結果を医療専門家、医療施設、または保険会社に通信するように構成されている、先行する実施形態のいずれかに記載のスマートフォンシステム。
モバイル通信デバイスが、医療専門家から処方、診断、または勧告を受信するように構成されている、先行する実施形態のいずれかに記載のスマートフォンシステム。
モバイル通信デバイスが、wifiまたはセルラーネットワークを介して遠隔地と通信する、先行する実施形態のいずれかに記載のスマートフォンシステム。
モバイル通信デバイスが、携帯電話である、先行する実施形態のいずれかに記載のスマートフォンシステム。
試料接触部位が、撮像ステップ(e)の前に洗浄されない、先行する実施形態のいずれかに記載の方法。
撮像ステップ(e)の前に試料接触領域を洗浄することをさらに含む、実施形態1~5のいずれかに記載の方法。
分析物の存在を判定すること、および/または分析物の量を測定することをさらに含む、先行する実施形態のいずれかに記載の方法。
計算されたパラメータが、分析される全ての粒子からの平均信号強度を含む、実施形態AE2に記載の方法。
計算されたパラメータが、分析される全ての粒子からの最高信号強度を含む、実施形態AE2に記載の方法。
計算されたパラメータが、分析される全ての粒子からの信号強度分布を含む、実施形態AE2に記載の方法。
計算されたパラメータが、閾値より大きい信号強度で分析される全ての粒子の数を含む、実施形態AE2に記載の方法。
計算されたパラメータが、画像の第1の領域内で分析される全ての粒子からの平均信号強度を含む、実施形態AE2に記載の方法。
計算されたパラメータが、画像の第1の領域内で分析される全ての粒子からの最高信号強度を含む、実施形態AE2に記載の方法。
計算されたパラメータが、画像の第1の領域内で分析される全ての粒子からの信号強度分布を含む、実施形態AE2に記載の方法。
計算されたパラメータが、閾値より大きい信号強度で画像の第1の領域内において分析される全ての粒子の数を含む、実施形態AE2に記載の方法。
分析物が、タンパク質、ペプチド、核酸、合成化合物、および無機化合物の5つの検出における分析物である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、羊水、房水、硝子体液、血液(例えば、全血、分画血液、血漿、または血清)、母乳、脳脊髄液(CSF)、耳垢(cerumen)(耳垢(earwax))、乳糜、糜汁(chime)、内リンパ液、外リンパ液、糞便、呼気、胃酸、胃液、リンパ液、粘液(鼻漏および痰を含む)、心膜液、腹膜液、胸膜液、膿、粘膜の分泌物、唾液、呼気凝縮液、皮脂、精液、喀痰、汗、関節液、涙、嘔吐物、および尿から選択される生体試料である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
スペーサが、柱の形状を有し、柱の幅対高さの比が、1以上である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
プレートのうちの一方または両方の上に載せられた試料が、未知の体積を有する、先行する実施形態のいずれかに記載の方法。
スペーサが、柱の形状を有し、柱が、実質的に均一な断面を有する、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、ある特定の疾患の病期と相関する化合物または生体分子の検出、精製、および定量化のためのものである、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、感染症および寄生虫病、外傷、心血管疾患、癌、精神疾患、神経精神疾患、肺疾患、腎疾患、ならびに他のおよび器質性疾患に関連している、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、感染症および寄生虫病、外傷、心血管疾患、癌、精神疾患、神経精神疾患、肺疾患、腎疾患、ならびに他のおよび器質性疾患に関連している、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、環境、例えば、水、土壌、または生体試料からのウイルス、真菌、および細菌に関連している、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、食品の安全性または国家安全保障を危険にさらす化学化合物または生体試料、例えば、毒性廃棄物、炭疽の検出、定量化に関連している、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、医療用モニターまたは生理学的モニターにおけるバイタルパラメータの定量化に関連している、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、グルコース、血液、酸素レベル、総血球数に関連している、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、生体試料からの特定のDNAまたはRNAの検出および定量化に関連している、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、ゲノム分析のための染色体およびミトコンドリア内のDNAにおける遺伝子配列の配列決定および比較に関連している、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、例えば、医用薬剤の合成または精製中に反応生成物を検出することに関連している、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、細胞、組織、体液、および排泄物である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、タンパク質、ペプチド、核酸、合成化合物、無機化合物の前記検出における試料である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、ヒト、獣医、農業、食品、環境、および薬物検査の分野における試料である、先行する実施形態のいずれかに記載のデバイス、キット、システム、スマートフォンシステム、および方法。
試料が、血液、血清、血漿、鼻腔ぬぐい液、鼻咽頭洗浄液、唾液、尿、胃液、脊髄液、涙、排泄物、粘液、汗、耳垢、油、腺分泌物、脳脊髄液、組織、精液、膣液、腫瘍組織由来の間質液、眼液、脊髄液、咽頭ぬぐい液、呼吸、毛髪、指の爪、皮膚、生検、胎盤液、羊水、臍帯血、リンパ液、体腔液、喀痰、膿、微生物叢、胎便、母乳、呼気凝縮液鼻咽頭洗浄液、鼻腔ぬぐい液、咽頭ぬぐい液、排泄物試料、毛髪、指の爪、耳垢、呼気、結合組織、筋肉組織、神経組織、上皮組織、軟骨、癌試料、または骨から選択される生体試料である、先行する実施形態のいずれかに記載の方法またはデバイス。
均質QMAX免疫学的測定-ヒトCRP(C反応性タンパク質)に対する
ここで、我々は、本発明の一実施形態によるヒトCRPに対する均質QMAX免疫学的測定の実験について説明する。
1.捕捉抗体のビーズへの結合.製造業者のプロトコルに従って、NHS活性化ビーズ(Pierce、直径10μm)を抗CRPマウスモノクローナル捕捉抗体(Fitzgerald)に結合させた。
2.ビーズのブロッキング.抗体結合ビーズを4℃で一晩、PBS中の4%BSAによってブロックし、使用前にPBSTによって6回洗浄した。
3.第1のプレートのコーティング.ステップ2からのビーズ1μL(ビーズ濃度107~108/mL)をガラススライド(Fisher Scientific)上に滴下し、室温で空気乾燥させた。
4.均質QMAXアッセイ.10μg/mLの濃度の1μLのCRP分析物(Fitzgerald)および1μLのCy5標識抗CRPマウスモノクローナル検出抗体(Fitzgerald)をスライドガラス上のコーティングされたビーズの領域上に滴下した。異なる濃度のCy5標識抗CRP検出抗体(A、800μg/mL;B、100μg/mL;C、50μg/mL;D、25μg/mL、およびE、0μg/mL)を別々に試験した。混合物を10μmのスペーサを備えたXプレート(第2のプレート)によってすぐにコーティングし、室温で30秒間インキュベートした。
5.撮像.洗浄することなく、蛍光顕微鏡(Ex 640nm、Em 670~690nm)によって蛍光画像を撮影した。
ビーズ増強速度試験(BEST)の構造例
1.ビーズ増強速度試験(BEST)の例示的な実施形態-ビーズベース:
1つの例示的なデバイスは、第1のプレートと、第2のプレートと、第2のプレート上のスペーサのアレイと、ビーズと、濃縮領域と、を備える。
第1のプレート:サイズ24mm×32mm、厚さ1mmのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)またはガラス
第2のプレート:サイズ22mm×25mm、厚さ175umのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)であり、片側に柱スペーサのアレイを備える。柱スペーサは、横方向サイズが30×40um、高さが10umであり、スペーサ間距離は、アレイに対して80umである。
ビーズ:直径10umのプラスチックビーズ(アクリルまたはポリスチレンとして)であり、面積密度が100/mm2~1000/mm2であり、第2のプレート上で均一に予め乾燥される。
濃縮領域:全てのビーズの表面上
別の例示的なデバイスは、第1のプレートと、第2のプレートと、第2のプレート上のスペーサアレイと、ビーズと、濃縮領域と、を備える。
第1のプレート:サイズ24mm×32mm、厚さ1mmのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)またはガラス
第2のプレート:サイズ22mm×25mm、厚さ50umのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)であり、片側に柱スペーサのアレイを備える。柱スペーサは、横方向サイズが20×20um、高さが20umであり、スペーサ間距離は、アレイに対して150umである。
ビーズ:金属表面(金または銀として)を有する直径20umのビーズであり、面積密度が100/mm2~1000/mm2であり、第2のプレート上で均一に予め乾燥される。
濃縮領域:全てのビーズの表面上
別の例示的なデバイスは、第1のプレートと、第2のプレートと、第1のプレート上のピットアレイと、第2のプレート上のスペーサのアレイと、ビーズと、濃縮領域と、を備える。
第1のプレート:サイズ24mm×32mm、厚さ1mmのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)またはガラスであり、片側にピットアレイを備える。ピットは、横方向サイズが12um×12um、深さが6umであり、ピット間距離は、50umである。
第2のプレート:サイズ22mm×25mm、厚さ175umのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)であり、片側に柱スペーサのアレイを備える。柱スペーサは、横方向サイズが20×20um、高さが10umであり、スペーサ間距離は、100umである。
ビーズ:金属表面(金または銀として)を有するか、または有しない直径10umのビーズであり、面積密度が100/mm2~1000/mm2であり、第1のプレート上およびピットの内側の大部分で均一に予め乾燥される。
濃縮領域:全てのビーズの表面上
別の例示的なデバイスは、第1のプレートと、第2のプレートと、第1のプレート上の第1のタイプの柱(スペーサ)のアレイと、第2のタイプの柱(突出部)のアレイと、濃縮領域と、を備える。
第1のプレート:サイズ24mm×32mm、厚さ1mmのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)またはガラスであり、片側に2つの柱アレイを備える。第1のタイプの柱は、横方向サイズが20×20um、高さが10umであり、柱間距離は、150umである。第2のタイプの柱は、横径が10um、高さが8umであり、柱間距離は、50umである。2つの柱アレイは、互いに混ざり合っている。
第2のプレート:サイズ22mm×25mm、厚さ150umのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)であり、平坦な表面を有する。
濃縮領域:突出部の頂面上。または突出部の側面の表面上。または突出部の全ての表面上。
別の例示的なデバイスは、第1のプレートと、第2のプレートと、第1のプレート上の第1のタイプの柱(スペーサ)のアレイと、第2のタイプの柱(突出部)のアレイと、濃縮領域と、を備える。
第1のプレート:サイズ24mm×32mm、厚さ1mmのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)またはガラスであり、片側に2つの柱アレイを備える。第1のタイプの柱は、横方向サイズが30×30um、高さが15umであり、柱間距離は、120umである。第2のタイプの柱は、横径が15um、高さが10umであり、柱間距離は、60umである。2つの柱アレイは、互いに混ざり合っている。第2のタイプの柱は、全ての表面上において金でコーティングされている。
第2のプレート:サイズ22mm×25mm、厚さ100umのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)であり、平坦な表面を有する。
濃縮領域:突出部の頂面上。または突出部の側面の表面上。または突出部の全ての表面上。
別の例示的なデバイスは、第1のプレートと、第2のプレートと、第1のプレート上の第1のタイプの柱(突出部)のアレイと、第2のプレート上の第2のタイプの柱(スペーサ)のアレイと、濃縮領域と、を備える。
第1のプレート:サイズ24mm×32mm、厚さ1mmのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)またはガラスであり、片側に突出部柱アレイを備える。突出部柱は、横径が10umの柱、高さが5umであり、柱間距離は、50umである。
第2のプレート:サイズ22mm×25mm、厚さ50umのプラスチック(アクリルまたはポリスチレンとして)であり、平坦な表面を有する。スペーサ柱は、横方向サイズが20×20um、高さが10umであり、柱間距離は、150umである。
濃縮領域:突出部の頂面上。または突出部の側面の表面上。または突出部の全ての表面上。
本発明は、様々な構成要素が互いに矛盾しない限り、複数の方法で組み合わされ得る、様々な実施形態を含む。実施形態は、単一の発明出願とみなされるべきである。各出願は、参照として他の出願を有し、個別の独立したものとしてではなくその全体において、かつあらゆる目的のために参照される。これらの実施形態は、本出願の開示だけでなく、本明細書で参照され、組み込まれ、または優先権が主張される文書も含む。
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法を説明するために使用される用語は、本出願、または2016年8月10日および2016年9月14日にそれぞれ出願されたPCT出願(米国を指定)第PCT/US2016/045437号および第PCT/US0216/051775号、2017年2月7日に出願された米国仮出願第62/456065号、2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456287号、および2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456504号で定義されており、それらの出願の全ては、あらゆる目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、試料の検出、分析、および定量化のためにQカード、スペーサ、および均一な試料厚さの実施形態を含むか、または使用することができる。いくつかの実施形態では、Qカードは、試料の少なくとも一部を均一性の高い層にするのに役立つスペーサを備える。スペーサの構造、材料、機能、バリエーション、および寸法、ならびにスペーサおよび試料層の均一性は、本明細書に開示されているか、または2016年8月10日および2016年9月14日にそれぞれ出願されたPCT出願(米国を指定)第PCT/US2016/045437号および第PCT/US0216/051775号、2017年2月7日に出願された米国仮出願第62/456065号、2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456287号、および2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456504号に列挙、記載、および要約されており、それらの出願の全ては、あらゆる目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、試料の検出、分析、および定量化のためにQカードを含むか、または使用することができる。いくつかの実施形態では、Qカードは、Qカードの操作および試料の測定を容易にするのに役立つヒンジ、ノッチ、凹部、およびスライダーを備える。ヒンジ、ノッチ、凹部、およびスライダーの構造、材料、機能、バリエーション、および寸法は、本明細書に開示されているか、または2016年8月10日および2016年9月14日にそれぞれ出願されたPCT出願(米国を指定)第PCT/US2016/045437号および第PCT/US0216/051775号、2017年2月7日に出願された米国仮出願第62/456065号、2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456287号、および2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456504号に列挙、記載、および要約されており、それらの出願の全ては、あらゆる目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、試料の検出、分析、および定量化のためにQカードを含むか、または使用することができる。いくつかの実施形態では、Qカードは、カードがスマートフォン検出システムによって読み取られることを可能にするスライダーと共に使用される。Qカード、スライダー、およびスマートフォン検出システムの構造、材料、機能、バリエーション、寸法、および接続は、本明細書に開示されているか、または2016年8月10日および2016年9月14日にそれぞれ出願されたPCT出願(米国を指定)第PCT/US2016/045437号および第PCT/US0216/051775号、2017年2月7日に出願された米国仮出願第62/456065号、2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456287号、および2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456504号に列挙、記載、および要約されており、それらの出願の全ては、あらゆる目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、様々なタイプの検出方法を含むか、またはそれらに使用され得る。検出方法は、本明細書に開示されているか、または2016年8月10日および2016年9月14日にそれぞれ出願されたPCT出願(米国を指定)第PCT/US2016/045437号および第PCT/US0216/051775号、2017年2月7日に出願された米国仮出願第62/456065号、2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456287号、および2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456504号に列挙、記載、および要約されており、それらの出願の全ては、あらゆる目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、分析物検出に使用される様々なタイプの標識、捕捉剤、および検出剤を用いることができる。標識は、本明細書に開示されているか、または2016年8月10日および2016年9月14日にそれぞれ出願されたPCT出願(米国を指定)第PCT/US2016/045437号および第PCT/US0216/051775号、2017年2月7日に出願された米国仮出願第62/456065号、2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456287号、および2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456504号に列挙、記載、および要約されており、それらの出願の全ては、あらゆる目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、様々なタイプの分析物(バイオマーカーを含む)の操作および検出に適用され得る。分析物は、本明細書に開示されているか、または2016年8月10日および2016年9月14日にそれぞれ出願されたPCT出願(米国を指定)第PCT/US2016/045437号および第PCT/US0216/051775号、2017年2月7日に出願された米国仮出願第62/456065号、2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456287号、および2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456504号に列挙、記載、および要約されており、それらの出願の全ては、あらゆる目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、様々な用途(分野および試料)に使用され得る。用途は、本明細書に開示されているか、または2016年8月10日および2016年9月14日にそれぞれ出願されたPCT出願(米国を指定)第PCT/US2016/045437号および第PCT/US0216/051775号、2017年2月7日に出願された米国仮出願第62/456065号、2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456287号、および2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456504号に列挙、記載、および要約されており、それらの出願の全ては、あらゆる目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、データ転送、ストレージ、および/または分析のためにクラウド技術を用いることができる。関連するクラウド技術は、本明細書に開示されているか、または2016年8月10日および2016年9月14日にそれぞれ出願されたPCT出願(米国を指定)第PCT/US2016/045437号および第PCT/US0216/051775号、2017年2月7日に出願された米国仮出願第62/456065号、2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456287号、および2017年2月8日に出願された米国仮出願第62/456504号に列挙、記載、および要約されており、それらの出願の全ては、あらゆる目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる。
本開示による本発明対象のさらなる例は、以下の列挙された段落に記載されている。
Claims (40)
- アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、複数の粒子と、捕捉剤と、を備え、
i.前記第1および第2のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含有する、または含有する疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.前記第1のプレートが、その内面上に固定された前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、100um以下に等しい所定の実質的に均一な高さを有し、
iv.前記複数の粒子が、それらの表面上に固定化された前記捕捉剤を有し、前記捕捉剤が、前記分析物を特異的に結合および固定化することが可能であり、かつ
v.前記複数の粒子が、(a)前記スペーサが占める領域を除いて、前記第1のプレートの前記試料接触領域に分布し、(b)前記第1のプレート上に一時的または恒久的に固定され、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節される、デバイス。 - (i)一方または両方のプレートが、可撓性であり、
(ii)前記スペーサが、柱形状、実質的に平坦な頂面、所定の実質的に均一な高さ、および所定のスペーサ間距離を有し、
(iii)前記スペーサのヤング率に前記スペーサの充填率を掛けたものが、2MPa以上であり、前記充填率が、全プレート面積に対する前記スペーサの接触面積の比であり、
(iv)前記スペーサ間距離が、2つの隣接するスペーサ間の距離である、請求項1に記載のデバイス。 - 前記プレート上の前記複数の粒子の前記分布が、ランダムである、請求項1に記載のデバイス。
- 前記複数の粒子が、前記プレート上に固定され、周期的な分布を有する、請求項1に記載のデバイス。
- 前記スペーサが、平坦な頂部を有する、請求項1に記載のデバイス。
- 前記複数の粒子が、前記第1のプレート上に一時的に固定され、開放構成では、前記2つのプレートが前記閉鎖構成になる前に、前記試料が前記第1のプレート上に載せられる、請求項1に記載のデバイス。
- 前記スペーサの前記厚さが、閉鎖構成において、前記試料中の前記分析物のある特定の濃度に対して、前記粒子のうちの1つを含有する前記均一な厚さの試料の少なくとも1つの領域が、前記試料層の外側から見たときに粒子を含有しないその隣接領域と光学的に区別可能になるように構成されている、請求項1に記載のデバイス。
- 前記複数の粒子のうちの1つ以上の直径が、前記スペーサの前記高さに等しい、請求項1に記載のデバイス。
- 前記スペーサの高さが、10umである、請求項1に記載のデバイス。
- 前記スペーサの高さが、5umである、請求項1に記載のデバイス。
- 前記スペーサの高さが、0.1um~15umである、請求項1に記載のデバイス。
- 前記スペーサの高さが、0.1um~3umである、請求項1に記載のデバイス。
- 前記デバイスが、2つのプレートと、スペーサと、を備え、一方のプレートまたは両方のプレートの前記内面の少なくとも一部分が、親水性である、請求項1に記載のデバイス。
- 前記試料が、いかなる輸送デバイスも使用せずに対象から前記プレートへ直接載せられたものである、請求項1に記載のデバイス。
- 前記スペーサが、柱形状およびほぼ均一な断面を有する、請求項1に記載のデバイス。
- 前記スペーサが、柱形状、実質的に平坦な頂面、所定の実質的に均一な高さ、および前記分析物のサイズより少なくとも2倍大きい所定の一定のスペーサ間距離を有し、前記スペーサのヤング率に前記スペーサの充填率を掛けたものが、2MPa以上であり、前記充填率が、全プレート面積に対する前記スペーサの接触面積の比であり、各スペーサに対して、前記スペーサの横寸法対その高さの比が、少なくとも1である、請求項1に記載のデバイス。
- 前記スペーサが、柱形状、実質的に平坦な頂面、所定の実質的に均一な高さ、および前記分析物のサイズより少なくとも2倍大きい所定の一定のスペーサ間距離を有し、前記スペーサのヤング率に前記スペーサの充填率を掛けたものが、2MPa以上であり、前記充填率が、全プレート面積に対する前記スペーサの接触面積の比であり、各スペーサに対して、前記スペーサの横寸法対その高さの比が、少なくとも1であり、前記スペーサ間距離(ISD)の4乗を可撓性プレートの厚さ(h)およびヤング率(E)で割ったもの(ISD^4/(hE))が、5x10^6um^3/GPa以下である、請求項1に記載のデバイス。
- 前記スペーサの平均幅に対する前記スペーサのスペーシング間距離の比が、2以上であり、前記スペーサの充填率に前記スペーサのヤング率を乗じたものが、2MPa以上である、請求項2に記載のデバイス。
- アッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)前記捕捉剤が、前記分析物の結合部位に特異的に結合することが可能である、請求項1に記載のデバイスを取得するステップと、
(c)前記デバイスの前記試料接触領域の少なくとも一部の上に光標識を有するステップであって、前記光標識が、前記分析物に結合することが可能である、ステップと、
(d)前記プレートが開放構成にあるときに、前記プレートのうちの一方または両方の上に前記試料を載せるステップであって、開放構成において、
(e)(d)の後、前記2つのプレートを一緒にし、前記プレートを閉鎖構成へと押圧するステップであって、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節される、ステップと、
(f)前記プレートが前記閉鎖構成にある間に、前記均一な厚さの層内の前記分析物を分析するステップと
を含み、前記分析が、
i.前記試料層の外側から、(a)1つの粒子を含有する前記試料層の領域である粒子領域、および(b)前記粒子領域の周囲にある前記試料層の領域である周囲領域からの全光信号を測定することであって、前記周囲領域が、前記粒子の縁部内で50Dであり、前記Dが、前記粒子の直径である、測定することと、
ii.前記粒子領域および少なくとも2つの異なる粒子領域の周囲領域の各々からの全光信号を測定することと
を含む、方法。 - 前記全光信号測定のための前記粒子領域が、前記粒子直径と実質的に同じ領域を有する、請求項19に記載の方法。
- 前記全光信号測定のための前記粒子領域が、前記粒子直径によって画定される領域よりも小さい、請求項19に記載の方法。
- 前記均一な試料層内の前記分析物の前記分析が、各領域からの前記全光信号の平均化を含む、請求項19に記載の方法。
- 前記均一な試料層内の前記分析物の前記分析が、(i)各粒子領域の前記全光信号の、その周囲領域の前記全光信号に対する比を測定することと、(ii)全ての粒子領域および周囲領域の対の比を平均することと、を含む、請求項19に記載の方法。
- 前記試料を載せることの終了から、前記プレートの前記閉鎖構成への押圧の終了までの時間が、15秒未満である、請求項19に記載の方法。
- 前記試料を載せることの終了から、前記プレートの前記閉鎖構成への押圧の終了までの時間が、5秒未満である、請求項19に記載の方法。
- 試料中の分析物を均質に分析するための装置であって、
i.請求項1に記載のデバイスと、
ii.前記試料接触領域の少なくとも一部を撮像する1つ以上の撮像装置と
を備える、装置。 - 迅速な多重化アッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.前記プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、第1の分析物および第2の分析物を含有する疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、
iv.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、複数の第1の粒子および第2の粒子を含み、前記第1および第2の粒子が、その上にそれぞれ固定化された第1および第2の捕捉剤を有し、かつ
v.前記第1および第2の捕捉剤が、それぞれ前記第1および第2の分析物に結合し、固定化することが可能であり、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節され、前記均一な厚さの層内の前記分析物が、前記粒子によって濃縮され、これにより前記粒子上の前記捕捉分析物の信号が、前記均一な厚さの層内の他の領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。 - アッセイのためのスマートフォンシステムであって、
(a)請求項1または27に記載のデバイスと、
(b)
i.前記試料を検出および/または撮像するための1つまたは複数のカメラ、
ii.前記検出された信号および/または前記試料の前記画像(複数可)を受信および/または処理し、かつ遠隔通信するための電子機器、信号プロセッサ、ハードウェア、およびソフトウェア、を備える、モバイル通信デバイスと、
(c)前記閉鎖構成にある前記デバイスを収容し、前記モバイル通信デバイスに係合可能であるように構成されたアダプタと
を備え、
前記モバイル通信デバイスと係合したとき、前記アダプタが、前記試料中の前記分析物の前記検出および/または撮像を容易にするように構成されている、スマートフォンシステム。 - 前記第1および第2の粒子が異なる、請求項28に記載のスマートフォンシステム。
- 前記第1および第2の粒子のサイズが異なる、請求項28に記載のスマートフォンシステム。
- 前記第1および第2の粒子が、フォトルミネセンス、エレクトロルミネセンス、および電気化学ルミネセンス、光吸収、反射、透過、回折、散乱、拡散、表面ラマン散乱、ならびにそれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるそれらの光学特性について異なる、請求項28に記載のスマートフォンシステム。
- 前記第1および第2の粒子の電気密度が異なる、請求項28に記載のスマートフォンシステム。
- 前記第1および第2の粒子が同じであり、前記第1および第2の分析物からの信号が異なる、請求項28に記載のスマートフォンシステム。
- 迅速なアッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.前記プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含む疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、かつ
iv.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された複数の粒子を含み、前記捕捉剤が、前記分析物に結合し、固定化することが可能であり、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節され、前記均一な厚さの層内の前記分析物が、前記粒子によって濃縮され、これにより前記粒子上の前記捕捉分析物の信号が、前記均一な厚さの層内の他の領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。 - 迅速なアッセイのためのシステムであって、
(a)請求項1、27、または34のいずれか一項に記載のデバイスと、
(b)前記均一な厚さの層内の前記分析物の存在および/または量を示す前記捕捉剤結合分析物からの信号を検出する検出器と、を備える、システム。 - 迅速なアッセイのためのスマートフォンシステムであって、
(a)請求項1、27、または34のいずれか一項に記載のデバイスと、
(b)
i.前記試料を検出および/または撮像するための1つまたは複数のカメラ、
ii.前記検出された信号および/または前記試料の前記画像を受信および/または処理し、かつ遠隔通信するための電子機器、信号プロセッサ、ハードウェア、およびソフトウェアを備える、モバイル通信デバイスと、
(c)前記閉鎖したデバイスを保持し、モバイル通信デバイスに係合可能であるように構成されたアダプタと
を備え、
前記モバイル通信デバイスと係合したとき、前記アダプタが、前記閉鎖構成にある前記試料中の前記分析物の前記検出および/または撮像を容易にするように構成されている、スマートフォンシステム。 - 迅速なアッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)請求項1、27、または34のいずれか一項に記載のデバイスを取得するステップと、
(c)前記プレートが開放構成にあるときに、前記プレートのうちの一方または両方の上に前記試料を載せるステップと、
(d)(c)の後、前記2つのプレートを一緒にし、前記プレートを前記閉鎖構成へと押圧するステップと、
(e)前記プレートが前記閉鎖構成にある間に、前記均一な厚さの層内の前記分析物を検出および分析するステップと
を含む、方法。 - (a)前記閉鎖構成にある画像を取得することであって、前記画像が、明視野画像、暗視野画像、蛍光画像、およびリン光画像からなる群から選択される、ことと、
(b)前記画像を分析し、前記画像内の粒子を特定し、かつ粒子サイズ、粒子の信号強度、粒子間の距離、粒子の分布、および粒子数の情報を抽出することと、
(c)ステップ(b)からの前記抽出された情報を分析し、前記粒子のパラメータを計算することによって、分析物濃度を推定することと
をさらに含む、請求項37に記載の方法。 - アッセイを実施する方法であって、
(a)分析物を含有する疑いがある試料を取得するステップと、
(b)開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能である第1および第2のプレートを取得するステップであって、
i.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、前記試料と接触するための試料接触領域を有し、
ii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、
iii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された複数の粒子を含み、前記捕捉剤が、前記分析物に結合し、固定化することが可能であり、
iv.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、前記試料に接触すると試料中に溶解し、前記分析物に結合するように構成された検出剤を含み、
前記スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有する、ステップと、
(c)前記プレートが前記開放構成にあるとき、前記プレートのうちの一方または両方の上に前記試料を載せるステップであって、前記開放構成において、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の前記間隔が、前記スペーサによって調節されない、ステップと、
(d)(c)の後、前記2つのプレートを一緒にし、前記プレートを閉鎖構成へと押圧するステップであって、前記閉鎖構成において、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記2つのプレートの前記内面によって限定され、かつ前記スペーサおよび前記プレートによって調節される、ステップと、
(e)前記プレートが前記閉鎖構成にある間に、前記均一な厚さの層内の前記分析物を検出および分析するステップと、を含み、
前記捕捉剤および前記検出剤が、その異なる位置で前記分析物に結合し、前記粒子に固定化された捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチを形成するように構成され、
前記粒子、前記捕捉剤、および前記検出剤が、前記粒子関連捕捉剤-分析物-検出剤サンドイッチからの信号を、前記均一な厚さの層内の遊離検出剤の信号と区別可能にするように構成されている、方法。 - 迅速なアッセイのためのデバイスであって、
第1のプレートと、第2のプレートと、スペーサと、を備え、
i.前記プレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成へと互いに対して移動可能であり、
ii.前記プレートの各々が、そのそれぞれの内面上に、分析物を含む疑いがある試料と接触するための試料接触領域を有し、
iii.前記プレートのうちの一方または両方が、前記スペーサを備え、前記スペーサのうちの少なくとも1つが、前記試料接触領域内にあり、前記スペーサが、所定の実質的に均一な高さを有し、かつ
iv.前記プレートのうちの一方または両方が、前記それぞれの内面上に、捕捉剤が上に固定化された複数の粒子を含み、前記捕捉剤が、前記分析物に結合し、固定化することが可能であり、
前記スペーサが、拡散パラメータの3倍以下である高さを有し、前記拡散パラメータが、意図されたアッセイ時間の平方根に前記試料中の前記分析物の拡散定数を乗じたものであり、前記意図されたアッセイ時間が、240秒以下であり、
2つの隣接する粒子間の平均距離が、前記拡散パラメータの2倍以下であり、
前記開放構成では、前記2つのプレートが、部分的または全体的に分離され、前記プレート間の間隔が、前記スペーサによって調節されず、前記試料が、前記プレートのうちの一方または両方の上に載せられ、
前記開放構成において前記試料が載せられた後に構成される前記閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、2つのプレートによって非常に均一な厚さの層に圧縮され、前記層の前記均一な厚さが、前記プレートの前記内面によって限定され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調節され、前記均一な厚さの層内の前記分析物が、前記濃縮領域内で濃縮され、これにより前記濃縮領域内の前記捕捉分析物の信号が、前記均一な厚さの層内の非濃縮領域から発せられる信号と区別可能である、デバイス。
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