JP7197567B2 - ハイドロゲル中の個別の生物学的単位を捕捉およびバーコード付与するための方法 - Google Patents
ハイドロゲル中の個別の生物学的単位を捕捉およびバーコード付与するための方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7197567B2 JP7197567B2 JP2020512098A JP2020512098A JP7197567B2 JP 7197567 B2 JP7197567 B2 JP 7197567B2 JP 2020512098 A JP2020512098 A JP 2020512098A JP 2020512098 A JP2020512098 A JP 2020512098A JP 7197567 B2 JP7197567 B2 JP 7197567B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- barcode
- biological
- unit
- units
- nucleic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6903—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being semi-solid, e.g. an ointment, a gel, a hydrogel or a solidifying gel
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D61/00—Processes of separation using semi-permeable membranes, e.g. dialysis, osmosis or ultrafiltration; Apparatus, accessories or auxiliary operations specially adapted therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
- C12N15/1096—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA cDNA Synthesis; Subtracted cDNA library construction, e.g. RT, RT-PCR
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
- C12Q1/682—Signal amplification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
- C12Q1/6823—Release of bound markers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6869—Methods for sequencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6809—Methods for determination or identification of nucleic acids involving differential detection
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6869—Methods for sequencing
- C12Q1/6874—Methods for sequencing involving nucleic acid arrays, e.g. sequencing by hybridisation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2527/00—Reactions demanding special reaction conditions
- C12Q2527/125—Specific component of sample, medium or buffer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2535/00—Reactions characterised by the assay type for determining the identity of a nucleotide base or a sequence of oligonucleotides
- C12Q2535/122—Massive parallel sequencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2547/00—Reactions characterised by the features used to prevent contamination
- C12Q2547/10—Reactions characterised by the features used to prevent contamination the purpose being preventing contamination
- C12Q2547/107—Use of permeable barriers, e.g. waxes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2563/00—Nucleic acid detection characterized by the use of physical, structural and functional properties
- C12Q2563/149—Particles, e.g. beads
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2563/00—Nucleic acid detection characterized by the use of physical, structural and functional properties
- C12Q2563/159—Microreactors, e.g. emulsion PCR or sequencing, droplet PCR, microcapsules, i.e. non-liquid containers with a range of different permeability's for different reaction components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2563/00—Nucleic acid detection characterized by the use of physical, structural and functional properties
- C12Q2563/179—Nucleic acid detection characterized by the use of physical, structural and functional properties the label being a nucleic acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2563/00—Nucleic acid detection characterized by the use of physical, structural and functional properties
- C12Q2563/185—Nucleic acid dedicated to use as a hidden marker/bar code, e.g. inclusion of nucleic acids to mark art objects or animals
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Complex Calculations (AREA)
Description
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合させて、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)ハイドロゲルマトリックス中の前記生物学的単位/バーコード単位の複合体のそれぞれの中にある生物学的単位の核酸にバーコードを付与するステップと
を含む、方法に関する。
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合させて、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位から核酸を放出させるステップと、
e)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位に由来する核酸にバーコードを付与するステップと、
f)前記各生物学的単位由来の核酸からcDNAライブラリーを合成するステップと、
g)各生物学的単位由来の前記cDNAライブラリーを増幅させるステップであって、各生物学的単位由来の前記cDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピー(clonal copies)を、各生物学的単位由来の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)任意選択で、前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含む、方法に関する。
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合させて、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位からゲノムDNAを放出させるステップと、
e)ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位に由来する前記ゲノムDNAにバーコードを付与するステップと、
f)任意選択で、各生物学的単位由来の核酸からDNAライブラリーを合成するステップと、
g)各生物学的単位由来の前記ゲノムDNAまたはDNAライブラリーを増幅させるステップであって、各生物学的単位由来の前記ゲノムDNAまたはDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)任意選択で、前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含む、方法に関する。
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合させて、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)任意選択で、前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位から核酸を放出させるステップと、
e)ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位由来の前記核酸にバーコードを付与するステップと、
f)任意選択で、各生物学的単位由来の核酸からDNAライブラリーを合成するステップと、
g)各生物学的単位由来の前記核酸またはDNAライブラリーを増幅させるステップであって、各生物学的単位由来の前記核酸またはDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位由来の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)任意選択で、前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含む、方法に関する。
a)複数の細胞の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合させて、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位から、非ヌクレオソーム結合型DNAを放出させるステップと、
e)ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位由来の前記非ヌクレオソーム結合型DNAにバーコードを付与するステップと、
f)任意選択で、各生物学的単位由来の非ヌクレオソーム結合型DNAからDNAライブラリーを合成するステップと、
g)各生物学的単位由来の前記非ヌクレオソーム結合型DNAまたはDNAライブラリーを増幅させるステップであって、各生物学的単位由来の前記非ヌクレオソーム結合型DNAまたはDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位由来の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)任意選択で、前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含む、方法に関する。
複数のバーコード単位であって、生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含み、各バーコード単位が、固有のバーコードを含む、複数のバーコード単位と、
ハイドロゲル溶液および/またはハイドロゲル溶液を調製するためのハイドロゲルモノマーと、
任意選択で、生物学的単位および/またはバーコード単位を結合するための担体と、
生化学アッセイおよび分子生物学アッセイのための試薬および溶液と、
使用説明書と
を含む、キットに関する。
複数のあらかじめ結合させたバーコード単位を含む担体であって、前記バーコード単位が、生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含み、各バーコード単位が、固有のバーコードを含む、担体と、
ハイドロゲル溶液および/またはハイドロゲル溶液を調製するためのハイドロゲルモノマーと、
生化学アッセイおよび分子生物学アッセイのための試薬および溶液と、
使用説明書と
を含む、キットに関する。
本発明では、以下の用語は以下の意味を有する。
(1)陰イオン性界面活性剤は、負のイオン電荷を有する界面活性剤を表す。陰イオン性界面活性剤の例として、限定するものではないが、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)、N-ラウリルサルコシン(サルコシル)、コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナトリウム、およびドデシル硫酸リチウム(LDS)が挙げられる。
(2)陽イオン性界面活性剤は、正のイオン電荷を有する界面活性剤を表す。陽イオン性界面活性剤の例として、限定するものではないが、四級アンモニウム塩、アミド結合を有するアミン、ポリオキシエチレンアルキル、および脂環式アミン、N,N,N’,N’[4]置換型エチレンジアミン、2-アルキル 1-ヒドロキシエチル 2 イミダゾリンエトキシル化アミン、およびアルキルアンモニウム塩が挙げられる。
(3)非イオン性界面活性剤は、いずれのイオン基も有さない界面活性剤を表す。非イオン性界面活性剤の例として、限定するものではないが、ポリソルベート、オクチルフェノールエトキシレート、グルカミン、Lubrol、Brij、Nonidet、ポロクサマー、Genapol、およびIgepalが挙げられる。
ポリソルベートの例として、限定するものではないが、ポリソルベート20(Tween 20)、ポリソルベート40(Tween 40)、ポリソルベート60(Tween 60)、ポリソルベート65(Tween 65)、ポリソルベート80(Tween 80)、およびポリソルベート85(Tween 85)が挙げられる。
オクチルフェノールエトキシレートの例として、限定するものではないが、Triton X-15、Triton X-35、Triton X-45、Triton X-100、Triton X-102、Triton X-114、Triton X-165(70%)、Triton X-305(70%)、Triton X-405(70%)、およびTriton X-705(70%)が挙げられる。
グルカミンの例として、限定するものではないが、N-オクタノイル-N-メチルグルカミン(MEGA-8)、N-ノナノイル-N-メチルグルカミン(MEGA-9)、およびN-デカノイル-N-メチルグルカミン(MEGA-10)が挙げられる。
Lubrolの例として、限定するものではないが、Lubrol WX、Lubrol PX、Lubrol 12A9、Lubrol 17A10、Lubrol 17A17、Lubrol N13、およびLubrol Gが挙げられる。
Brijの例として、限定するものではないが、Brij 35、Brij 58、Brij 93、Brij 97、Brij C2、Brij S2、Brij L4、Brij C10、Brij O10、Brij S10、Brij O20、Brij S20、Brij L23、およびBrij S100が挙げられる。
Nonidetの例として、限定するものではないが、Nonidet P40が挙げられる。
ポロクサマーの例として、限定するものではないが、ポロクサマー124、ポロクサマー181、ポロクサマー182、ポロクサマー184、ポロクサマー188(Pluronic F68)、ポロクサマー331、ポロクサマー407(Pluronic F127)が挙げられる。
Genapolの例として、限定するものではないが、Genapol X-080、Genapol X-100、およびGenapol C-100が挙げられる。
Igepalの例として、限定するものではないが、Igepal CA-210、Igepal CA-520、Igepal CA-630、Igepal CA-720、Igepal CO-520、Igepal CO-630、Igepal CO-720、Igepal CO-890、およびIgepal DM-970が挙げられる。
(4)双性イオン界面活性剤は、イオン基を有するが、正味の電荷を有さない界面活性剤を表す。双性イオン界面活性剤の例として、限定するものではないが、アミドスルホベタイン、アルキルベタイン、およびアンモニオプロパンスルホナート、たとえばアミドスルホベタイン-14、アミドスルホベタイン-16、3-[(3-コラミドプロピル)ジメチルアンモニオ]-1-プロパンスルホナート(CHAPS)、3-[(3-コラミドプロピル)ジメチルアンモニオ]-2-ヒドロキシ-1-プロパンスルホナート(CHAPSO)、3-(4-ヘプチル)フェニル-3-ヒドロキシプロピル)ジメチルアンモニオプロパンスルホナート(C7BzO)、EMPIGEN(登録商標)BB、3-(N,N-ジメチルオクチルアンモニオ)プロパンスルホナート分子内塩、3-(デシルジメチルアンモニオ)プロパンスルホナート分子内塩、3-(ドデシルジメチルアンモニオ)プロパンスルホナート分子内塩、3-(N,N-ジメチルミリスチルアンモニオ)プロパンスルホナート分子内塩、3-(N,N-ジメチルパルミチルアンモニオ)プロパンスルホナート分子内塩、3-(N,N-ジメチルオクタデシルアンモニオ)プロパンスルホナート分子内塩が挙げられる。
本発明は、ハイドロゲル中の個別の生物学的単位を捕捉およびバーコード付与するための方法に関する。
任意選択でスペーサー領域と、
任意選択でPCRハンドル配列と、
核酸のバーコードと、
任意選択で固有の分子の識別子配列と、
核酸配列のプライマーと
を含む。
任意選択でスペーサー領域と、
任意選択で、PCRハンドル配列と、
核酸のバーコードと、
任意選択で固有の分子の識別子配列と、
核酸配列のプライマーと
を含む。
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合化して、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)前記ハイドロゲルマトリックス中の前記生物学的単位/バーコード単位の複合体のそれぞれの中の生物学的単位の核酸にバーコードを付与するステップと
を含む。
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合化して、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位から核酸を放出するステップと、
e)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位に由来する核酸にバーコードを付与するステップと、
f)前記各生物学的単位由来の核酸からcDNAライブラリーを合成するステップと、
g)前記各生物学的単位由来のcDNAライブラリーを増幅させるステップであって、前記各生物学的単位由来のcDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位由来の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含み得る。
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合化して、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位からゲノムDNAを放出するステップと、
e)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位に由来するゲノムDNAにバーコードを付与するステップと、
f)任意選択で、前記各生物学的単位由来の核酸からDNAライブラリーを合成するステップと、
g)前記各生物学的単位由来のゲノムDNAまたはDNAライブラリーを増幅させるステップであって、前記各生物学的単位由来のゲノムDNAまたはDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含み得る。
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合化して、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)任意選択で、前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位から核酸を放出するステップと、
e)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位に由来する核酸にバーコードを付与するステップと、
f)任意選択で、前記各生物学的単位由来の核酸からDNAライブラリーを合成するステップと、
g)前記各生物学的単位由来の核酸またはDNAライブラリーを増幅させるステップであって、前記各生物学的単位由来の核酸またはDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位由来の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含み得る。
a)複数の細胞の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合化して、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位から非ヌクレオソーム結合型DNAを放出するステップと、
e)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位に由来する非ヌクレオソーム結合型DNAにバーコードを付与するステップと、
f)任意選択で、前記各生物学的単位由来の非ヌクレオソーム結合型DNAからDNAライブラリーを合成するステップと、
g)前記各生物学的単位由来の非ヌクレオソーム結合型DNAまたはDNAライブラリーを増幅させるステップであって、前記各生物学的単位由来の非ヌクレオソーム結合型DNAまたはDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位由来の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含み得る。
複数のバーコード単位と、
ハイドロゲル溶液および/またはハイドロゲル溶液を調製するためのハイドロゲルモノマーと、
生化学および分子生物学のアッセイのための試薬および溶液と、
使用説明書と
を含む。
あらかじめ結合した複数のバーコード単位を含む担体と、
ハイドロゲル溶液および/またはハイドロゲル溶液を調製するためのハイドロゲルモノマーと、
生化学および分子生物学のアッセイのための試薬および溶液と、
使用説明書と
を含む。
本発明を、以下の実施例により示す。しかしながら、本発明はこれら実施例の特定の詳細に限定されないことを理解されたい。
本発明は、個別の生物学的単位(すなわち細胞もしくは細胞群、ウイルス、オルガネラ、高分子複合体、または生体高分子)の捕捉に関する。
単一細胞のトランスクリプトームのプロファイリングは、本発明の方法を使用して行うことができる多くの生化学および分子生物学のアッセイのうちの1つである(図8)。
フェーズ化は、本発明の方法を使用して行うことができる別の分子生物学アッセイである(図9)。
Claims (19)
- ハイドロゲル中の個別の生物学的単位を捕捉するための方法であって、
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、バーコード単位の数が生物学的単位の数と等しいか生物学的単位の数よりも多い、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合させて、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)ハイドロゲルマトリックス中の前記生物学的単位/バーコード単位の複合体のそれぞれの中にある生物学的単位の核酸にバーコードを付与するステップと、
を含み、各バーコード単位が固有のバーコードを含む、方法。 - 個別の生物学的単位における遺伝子発現を解析するための方法であって、
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、バーコード単位の数が生物学的単位の数と等しいか生物学的単位の数よりも多く、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合させて、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位から核酸を放出させるステップと、
e)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位に由来する前記核酸にバーコードを付与するステップと、
f)各生物学的単位由来の核酸からcDNAライブラリーを合成するステップと、
g)各生物学的単位由来の前記cDNAライブラリーを増幅させるステップであって、各生物学的単位由来の前記cDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位由来の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)任意選択で、前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含む、方法。 - 個別の生物学的単位における遺伝子型を解析するための方法であって、
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、バーコード単位の数が生物学的単位の数と等しいか生物学的単位の数よりも多く、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合させて、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位からゲノムDNAを放出させるステップと、
e)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位に由来する前記ゲノムDNAにバーコードを付与するステップと、
f)任意選択で、各生物学的単位由来の核酸からDNAライブラリーを合成するステップと、
g)各生物学的単位由来の前記ゲノムDNAまたはDNAライブラリーを増幅させるステップであって、各生物学的単位由来の前記ゲノムDNAまたはDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)任意選択で、前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含む、方法。 - 個別の生物学的単位のハプロタイプを解析するための方法であって、
a)複数の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、バーコード単位の数が生物学的単位の数と等しいか生物学的単位の数よりも多く、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合させて、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)任意選択で、前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位から核酸を放出させるステップと、
e)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位由来の前記核酸にバーコードを付与するステップと、
f)任意選択で、各生物学的単位由来の核酸からDNAライブラリーを合成するステップと、
g)各生物学的単位由来の前記核酸またはDNAライブラリーを増幅させるステップであって、各生物学的単位由来の前記核酸またはDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位由来の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)任意選択で、前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含む、方法。 - 個別の生物学的単位のエピゲノムを解析するための方法であって、
a)複数の細胞の生物学的単位を複数のバーコード単位と接触させて、生物学的単位/バーコード単位の複合体を形成するステップであって、バーコード単位の数が生物学的単位の数と等しいか生物学的単位の数よりも多く、各バーコード単位が固有のバーコードを含み、前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段を含む、ステップと、
b)前記生物学的単位/バーコード単位の複合体をハイドロゲル溶液と接触させるステップと、
c)前記ハイドロゲル溶液を重合させて、ハイドロゲルマトリックスに前記生物学的単位/バーコード単位の複合体を埋め込むステップと、
d)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位から、非ヌクレオソーム結合型DNAを放出させるステップと、
e)前記ハイドロゲルマトリックス中の各生物学的単位由来の前記非ヌクレオソーム結合型DNAにバーコードを付与するステップと、
f)任意選択で、各生物学的単位由来の非ヌクレオソーム結合型DNAからDNAライブラリーを合成するステップと、
g)各生物学的単位由来の前記非ヌクレオソーム結合型DNAまたはDNAライブラリーを増幅させるステップであって、各生物学的単位由来の前記非ヌクレオソーム結合型DNAまたはDNAライブラリーの増幅が、前記固有のバーコードのクローンコピーを、各生物学的単位由来の増幅産物に組み込む、ステップと、
h)任意選択で、前記増幅産物をシーケンシングするステップと
を含む、方法。 - 生物学的単位/バーコード単位の複合体の大部分が、生物学的単位とバーコード単位を1:1の比で含む、請求項1、2、3、4または5に記載の方法。
- 前記生物学的単位が、担体に固定される、請求項1~6のいずれか1項に記載の方法。
- 前記バーコード単位が、担体に固定される、請求項1~6のいずれか1項に記載の方法。
- 前記生物学的単位または前記バーコード単位が、ハイドロゲル層にある担体に固定される、請求項7または8に記載の方法。
- 前記固有のバーコードが、各バーコード単位に関する複数のクローンコピーに存在する、請求項1~9のいずれか1項に記載の方法。
- 前記固有のバーコードが、核酸配列のバーコードを含む、請求項1~10のいずれか1項に記載の方法。
- 前記固有のバーコードが、核酸配列のプライマーをさらに含む、請求項1~11のいずれか1項に記載の方法。
- 前記核酸配列のプライマーが、ランダムな核酸配列のプライマーおよび/または特定の核酸配列のプライマーを含む、請求項12に記載の方法。
- 前記バーコード単位が、前記生物学的単位への結合に関与する少なくとも1つの手段をさらに含む、請求項1~13のいずれか1項に記載の方法。
- 前記生物学的単位への結合に関与する前記少なくとも1つの手段が、タンパク質、ペプチド、および/もしくはそれらのフラグメント;抗体および/もしくはそのフラグメント;核酸;炭水化物;ビタミンおよび/もしくはその誘導体;補酵素および/もしくはその誘導体;受容体リガンドおよび/もしくはその誘導体;ならびに/または疎水基を含む、請求項14に記載の方法。
- 前記各バーコード単位が、ビーズからなる、請求項1~15のいずれか1項に記載の方法。
- 前記バーコード付与のステップが、プライマー・テンプレートアニーリング、プライマー誘導型の伸長および/またはライゲーションにより、ハイドロゲルマトリックス中で実施される、請求項1~16のいずれか1項に記載の方法。
- 前記個別の生物学的単位が、細胞、細胞群、ウイルス、核、ミトコンドリア、葉緑体、生体高分子、エキソソーム、染色体、連結性が保存された転位DNAフラグメント、および/または核酸フラグメントを含む、請求項1~17のいずれか1項に記載の方法。
- 前記細胞または細胞群が、in vitroの培養物中の細胞、幹細胞、腫瘍細胞、組織生検細胞、血液細胞、および組織切片の細胞を含む、請求項18に記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022200037A JP2023030031A (ja) | 2017-05-05 | 2022-12-15 | ハイドロゲル中の個別の生物学的単位を捕捉およびバーコード付与するための方法 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201762502180P | 2017-05-05 | 2017-05-05 | |
US62/502,180 | 2017-05-05 | ||
PCT/IB2018/000612 WO2018203141A1 (en) | 2017-05-05 | 2018-05-04 | Methods for trapping and barcoding discrete biological units in hydrogel |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022200037A Division JP2023030031A (ja) | 2017-05-05 | 2022-12-15 | ハイドロゲル中の個別の生物学的単位を捕捉およびバーコード付与するための方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020518292A JP2020518292A (ja) | 2020-06-25 |
JP7197567B2 true JP7197567B2 (ja) | 2022-12-27 |
Family
ID=62705617
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020512098A Active JP7197567B2 (ja) | 2017-05-05 | 2018-05-04 | ハイドロゲル中の個別の生物学的単位を捕捉およびバーコード付与するための方法 |
JP2022200037A Pending JP2023030031A (ja) | 2017-05-05 | 2022-12-15 | ハイドロゲル中の個別の生物学的単位を捕捉およびバーコード付与するための方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022200037A Pending JP2023030031A (ja) | 2017-05-05 | 2022-12-15 | ハイドロゲル中の個別の生物学的単位を捕捉およびバーコード付与するための方法 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20180320173A1 (ja) |
EP (2) | EP4345159A3 (ja) |
JP (2) | JP7197567B2 (ja) |
KR (1) | KR20200004335A (ja) |
CN (1) | CN111148846B (ja) |
AU (1) | AU2018262331A1 (ja) |
CA (1) | CA3062248A1 (ja) |
GB (1) | GB2577214B (ja) |
SG (1) | SG11201910195WA (ja) |
WO (1) | WO2018203141A1 (ja) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB201622222D0 (en) | 2016-12-23 | 2017-02-08 | Cs Genetics Ltd | Reagents and methods for molecular barcoding of nucleic acids of single cells |
EP3870721A1 (en) | 2018-10-26 | 2021-09-01 | Illumina Inc | Modulating polymer beads for dna processing |
WO2021011895A1 (en) * | 2019-07-18 | 2021-01-21 | Celldom, Inc. | Methods and devices for single cell barcoding |
EP4073245A1 (en) * | 2019-12-12 | 2022-10-19 | Keygene N.V. | Semi-solid state nucleic acid manipulation |
WO2023139272A1 (en) | 2022-01-24 | 2023-07-27 | Scipio Bioscience | Gelation device with piston |
EP4272764A1 (en) | 2022-05-03 | 2023-11-08 | Scipio Bioscience | Method of complexing biological units with particles |
WO2024013218A1 (en) | 2022-07-12 | 2024-01-18 | Paris Sciences Et Lettres | Method for spatial tracing and sequencing of cells or organelles |
CN115463622A (zh) * | 2022-08-03 | 2022-12-13 | 广东纤友朵美生物科技有限公司 | 一种基于氧化果胶的凝胶及其制备方法 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2015200541A1 (en) | 2014-06-24 | 2015-12-30 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Digital pcr barcoding |
US20150376609A1 (en) | 2014-06-26 | 2015-12-31 | 10X Genomics, Inc. | Methods of Analyzing Nucleic Acids from Individual Cells or Cell Populations |
WO2016118915A1 (en) | 2015-01-22 | 2016-07-28 | Becton, Dickinson And Company | Devices and systems for molecular barcoding of nucleic acid targets in single cells |
WO2016130704A2 (en) | 2015-02-10 | 2016-08-18 | Illumina, Inc. | Methods and compositions for analyzing cellular components |
JP2016533187A (ja) | 2013-08-28 | 2016-10-27 | セルラー リサーチ, インコーポレイテッド | 大規模並列単一細胞分析 |
JP2017506877A (ja) | 2013-12-30 | 2017-03-16 | アトレカ インコーポレイテッド | 核酸バーコードを用いた単一細胞と関連づけられた核酸の分析方法 |
WO2017075265A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | The Broad Institute, Inc. | Multiplex analysis of single cell constituents |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2528577C (en) | 2003-06-20 | 2012-08-07 | Illumina, Inc. | Methods and compositions for whole genome amplification and genotyping |
WO2010017264A2 (en) * | 2008-08-05 | 2010-02-11 | Cornell University | Photo-crosslinked nucleic acid hydrogels |
GB2512213B (en) * | 2010-10-08 | 2015-02-11 | Harvard College | High-throughput single cell barcoding |
CA2861387A1 (en) * | 2012-02-02 | 2013-08-08 | Invenra, Inc. | High throughput screen for biologically active polypeptides |
KR102090851B1 (ko) * | 2012-08-14 | 2020-03-19 | 10엑스 제노믹스, 인크. | 마이크로캡슐 조성물 및 방법 |
CA2894694C (en) | 2012-12-14 | 2023-04-25 | 10X Genomics, Inc. | Methods and systems for processing polynucleotides |
US9644204B2 (en) | 2013-02-08 | 2017-05-09 | 10X Genomics, Inc. | Partitioning and processing of analytes and other species |
EP3828285B1 (en) | 2013-05-23 | 2023-12-13 | The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University | Transposition into native chromatin for personal epigenomics |
US10395758B2 (en) | 2013-08-30 | 2019-08-27 | 10X Genomics, Inc. | Sequencing methods |
WO2015061719A1 (en) * | 2013-10-25 | 2015-04-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Method and apparatus for tracking cell identity |
ES2890078T3 (es) | 2013-12-20 | 2022-01-17 | Illumina Inc | Conservación de la información de conectividad genómica en muestras de ADN genómico fragmentado |
PL3108009T3 (pl) | 2014-02-18 | 2021-10-11 | Illumina, Inc. | Sposoby i kompozycje do profilowania dna |
CA2953469A1 (en) | 2014-06-26 | 2015-12-30 | 10X Genomics, Inc. | Analysis of nucleic acid sequences |
AU2015284464B2 (en) | 2014-06-30 | 2021-06-17 | Illumina, Inc. | Methods and compositions using one-sided transposition |
CA2964799A1 (en) | 2014-10-17 | 2016-04-21 | Illumina Cambridge Limited | Contiguity preserving transposition |
-
2018
- 2018-05-04 SG SG11201910195W patent/SG11201910195WA/en unknown
- 2018-05-04 CN CN201880041302.XA patent/CN111148846B/zh active Active
- 2018-05-04 AU AU2018262331A patent/AU2018262331A1/en active Pending
- 2018-05-04 GB GB1917721.1A patent/GB2577214B/en active Active
- 2018-05-04 WO PCT/IB2018/000612 patent/WO2018203141A1/en active Application Filing
- 2018-05-04 KR KR1020197034770A patent/KR20200004335A/ko active IP Right Grant
- 2018-05-04 EP EP24150478.6A patent/EP4345159A3/en active Pending
- 2018-05-04 EP EP18733327.3A patent/EP3619325B1/en active Active
- 2018-05-04 JP JP2020512098A patent/JP7197567B2/ja active Active
- 2018-05-04 CA CA3062248A patent/CA3062248A1/en active Pending
- 2018-05-04 US US15/971,417 patent/US20180320173A1/en active Pending
-
2022
- 2022-12-15 JP JP2022200037A patent/JP2023030031A/ja active Pending
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016533187A (ja) | 2013-08-28 | 2016-10-27 | セルラー リサーチ, インコーポレイテッド | 大規模並列単一細胞分析 |
JP2017506877A (ja) | 2013-12-30 | 2017-03-16 | アトレカ インコーポレイテッド | 核酸バーコードを用いた単一細胞と関連づけられた核酸の分析方法 |
WO2015200541A1 (en) | 2014-06-24 | 2015-12-30 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Digital pcr barcoding |
US20150376609A1 (en) | 2014-06-26 | 2015-12-31 | 10X Genomics, Inc. | Methods of Analyzing Nucleic Acids from Individual Cells or Cell Populations |
WO2016118915A1 (en) | 2015-01-22 | 2016-07-28 | Becton, Dickinson And Company | Devices and systems for molecular barcoding of nucleic acid targets in single cells |
WO2016130704A2 (en) | 2015-02-10 | 2016-08-18 | Illumina, Inc. | Methods and compositions for analyzing cellular components |
WO2017075265A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | The Broad Institute, Inc. | Multiplex analysis of single cell constituents |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Acc. Chem. Res.,2016年12月28日,vol.50,p.22-31 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
GB2577214A (en) | 2020-03-18 |
GB201917721D0 (en) | 2020-01-15 |
CA3062248A1 (en) | 2018-11-08 |
CN111148846B (zh) | 2024-06-18 |
SG11201910195WA (en) | 2019-11-28 |
EP4345159A2 (en) | 2024-04-03 |
AU2018262331A8 (en) | 2019-12-12 |
WO2018203141A1 (en) | 2018-11-08 |
JP2020518292A (ja) | 2020-06-25 |
EP4345159A3 (en) | 2024-06-05 |
GB2577214B (en) | 2021-10-06 |
EP3619325A1 (en) | 2020-03-11 |
CN111148846A (zh) | 2020-05-12 |
AU2018262331A1 (en) | 2019-11-21 |
KR20200004335A (ko) | 2020-01-13 |
US20180320173A1 (en) | 2018-11-08 |
EP3619325B1 (en) | 2024-01-24 |
EP3619325C0 (en) | 2024-01-24 |
JP2023030031A (ja) | 2023-03-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7197567B2 (ja) | ハイドロゲル中の個別の生物学的単位を捕捉およびバーコード付与するための方法 | |
US10988760B2 (en) | Sample preparation on a solid support | |
AU2018312560B2 (en) | Hydrogel beads for nucleotide sequencing | |
AU2019220559B2 (en) | DNA sequencing using hydrogel beads | |
JP6769969B2 (ja) | 核酸配列決定ライブラリーを作製するためのプロセス及びシステム、並びにこれらを使用して作製したライブラリー | |
CN109486902B (zh) | 核酸扩增 | |
EP3095879B1 (en) | Nucleic acid amplification | |
WO2020086843A1 (en) | Modulating polymer beads for dna processing | |
WO2009098039A1 (en) | System and method for improved signal detection in nucleic acid sequencing | |
EP4272764A1 (en) | Method of complexing biological units with particles | |
Bigdeli | Single Cell Genomics in Alginate Microspheres |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200109 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210428 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20211228 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220201 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220418 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220628 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220729 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20221115 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20221215 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7197567 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |