JP7104629B2 - インフルエンザウイルスに対する抗体分子の製剤 - Google Patents

インフルエンザウイルスに対する抗体分子の製剤 Download PDF

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Description

関連出願との相互参照
本出願は、２０１６年２月２４日に出願された米国仮特許出願第６２／２９９，１６２号に対する利益を主張する。前記出願の内容は、その全体が参考として本明細書に援用される。
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子的に提出され、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる配列表を含有する。２０１７年２月２０日に作成された、前記ＡＳＣＩＩコピーは、Ｐ２０２９－７０１１ＷＯ＿ＳＬ．ＴＸＴと名付けられ、１９３，９１３バイトのサイズである。
インフルエンザは、Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ科のＲＮＡウイルス（インフルエンザウイルス）によって引き起こされる感染性疾患である。インフルエンザウイルスは、コアタンパク質に基づいてＡ、Ｂ、およびＣの３つの属に分類され、これらは、ウイルスエンベロープ糖タンパク質であるヘマグルチニン（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）により決定される亜型にさらに分けられる。インフルエンザＡウイルスは様々な哺乳動物およびトリ種に感染するが、Ｂ型およびＣ型の感染は主にヒトに限定される。Ａ型およびＢ型のみが何らかの懸念のあるヒト疾患を引き起こす。
インフルエンザウイルスの高い変異率および高頻度の遺伝子再集合は、ＨＡおよびＮＡ抗原の大きな可変性に寄与する。小さな変化を引き起こすマイナーな点変異（「抗原ドリフト」）は、比較的頻繁に生じる。抗原ドリフトは、ウイルスが免疫認識を逃れることを可能にし、大流行期間の間の度重なるインフルエンザの大流行をもたらす。ＨＡ抗原における大きな変化（「抗原シフト」）は、異なるインフルエンザＡ亜型からの遺伝子材料の再集合によって引き起こされる。新たな汎流行株をもたらす抗原シフトは、動物およびヒトの亜型間の、例えば、共感染したブタにおける再集合を介して生じる、稀な事象である。
インフルエンザＡは、季節的流行において世界中に拡散し、毎年２５０，０００人から５００，０００人の間、そして一部の汎流行年では数百万人に至る人々の死をもたらす。米国では、１９７９年から２００１年の間に毎年平均で４１，４００人の人々がインフルエンザで死亡した。
本開示は、少なくとも部分的に、本明細書で開示される機能的および構造的特性を含むヒト抗ＨＡ抗体、例えば、インフルエンザウイルスの保存領域またはエピトープに結合する抗体の発見、ならびにその使用に基づく。
したがって、本開示は、インフルエンザウイルス由来のヘマグルチニン（ＨＡ）に結合する、結合剤、例えば、抗体分子、またはその調製物もしくは単離調製物を含む製剤を特色とする。ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、広域スペクトルであり、１つを超えるＨＡ、例えば、インフルエンザＡウイルスの群１もしくは群２株の一方もしくは両方および／またはインフルエンザＢウイルスの１つもしくは複数の株に由来するＨＡに結合する。したがって、ある実施形態では、本明細書で開示される結合剤、例えば、抗体分子は、群１インフルエンザウイルスおよび群２インフルエンザウイルスによる感染を処置または予防することができる。別の実施形態では、本明細書で開示される結合剤、例えば、抗体分子は、インフルエンザＡウイルスおよびインフルエンザＢウイルスによる感染を処置または予防することができる。結合剤、例えば、抗体分子は、本明細書で開示される抗体の機能的特質を所有するように、本明細書で開示される抗体または可変領域と十分な構造的類似性を共有する。ある実施形態では、構造的類似性は、３次元構造もしくは直鎖状アミノ酸配列に関するもの、またはこれらの両方でありうる。
ある態様では、本開示は、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子、例えば、Ａｂ ０４４の１つ、２つ、もしくは３つの重鎖（ＨＣ）ＣＤＲおよび／または１つ、２つ、もしくは３つの軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲを含む抗体分子と、緩衝剤と、等張化剤とを含む製剤、例えば、医薬製剤を特色とする。
ある実施形態では、抗体分子は、約５ｍｇ／ｍＬ～約１５０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約１０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ～約３０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ～約３５ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ～約２０ｍｇ／ｍＬ、約８ｍｇ／ｍＬ～約１６ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ～約１１０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１５０ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ～約３０ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ～約４０ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約７０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ～約８０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ～約９０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ～約１１０ｍｇ／ｍＬまたは約１００ｍｇ／ｍＬ～約１２０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約１５０ｍｇ／ｍＬもしくはそれ未満、約１００ｍｇ／ｍＬもしくはそれ未満、約５０ｍｇ／ｍＬもしくはそれ未満、約２５ｍｇ／ｍＬもしくはそれ未満、約２０ｍｇ／ｍＬもしくはそれ未満、約１６ｍｇ／ｍＬもしくはそれ未満、約１０ｍｇ／ｍＬもしくはそれ未満、約８ｍｇ／ｍＬもしくはそれ未満、例えば、約５ｍｇ／ｍＬ、約８ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約１６ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３５ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１１０ｍｇ／ｍＬ、約１２０ｍｇ／ｍＬ、約１３０ｍｇ／ｍＬ、約１４０ｍｇ／ｍＬまたは約１５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。
ある実施形態では、抗体分子は、約１０～約４０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２０ｍｇ／ｍＬ～約３０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。ある実施形態では、抗体分子は、約２５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。別の実施形態では、抗体分子は、約４０ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。ある実施形態では、抗体分子は、約５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。別の実施形態では、抗体分子は、約２０ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２５ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。
ある実施形態では、抗体分子は、約５～約１０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約８ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。ある実施形態では、抗体分子は、約８ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。別の実施形態では、抗体分子は、約１０ｍｇ／ｍＬ～約２０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約１６ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。ある実施形態では、抗体分子は、約１６ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。別の実施形態では、抗体分子は、約５ｍｇ／ｍＬ～約２０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約８ｍｇ／ｍＬ～約１６ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。
ある実施形態では、抗体分子は、約２５～約１５０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約５０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、例えば、約５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。
ある実施形態では、抗体分子は、
配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＨＣ ＣＤＲ１；
配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＨＣ ＣＤＲ２；および
配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、
配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｄ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１４５）を含むＬＣ ＣＤＲ１；
配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＬＣ ＣＤＲ２；および
配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、
（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＨＣ ＣＤＲ１；
配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＨＣ ＣＤＲ２；および
配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＨＣ ＣＤＲ３
を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびに
（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｄ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１４５）を含むＬＣ ＣＤＲ１；
配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＬＣ ＣＤＲ２；および
配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＬＣ ＣＤＲ３
を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５、あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号５２、あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、
（ａ）配列番号２５、あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および
（ｂ）配列番号５２、あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、
（ａ）配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および
（ｂ）配列番号５２を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。
ある実施形態では、緩衝剤は、約５ｍＭ～約１５０ｍＭ、例えば、約１０ｍＭ～約１００ｍＭ、約２０ｍＭ～約７５ｍＭ、約３０ｍＭ～約５０ｍＭ、約１０ｍＭ～約５０ｍＭ、約５０ｍＭ～約１００ｍＭ、約１００ｍＭ～約１５０ｍＭ、約１０ｍＭ～約３０ｍＭ、約２０ｍＭ～約４０ｍＭ、約３０ｍＭ～約５０ｍＭ、約４０ｍＭ～約６０ｍＭ、約５０ｍＭ～約７０ｍＭ、約６０ｍＭ～約８０ｍＭ、約７０ｍＭ～約９０ｍＭまたは約８０ｍＭ～約１００ｍＭ、例えば、約１５０ｍＭもしくはそれ未満、約１００ｍＭもしくはそれ未満、約７５ｍＭもしくはそれ未満、約５０ｍＭもしくはそれ未満、約２５ｍＭもしくはそれ未満または約１０ｍＭもしくはそれ未満、例えば、約５ｍＭ、約１０ｍＭ、約２０ｍＭ、約３０ｍＭ、約４０ｍＭ、約５０ｍＭ、約６０ｍＭ、約７０ｍＭ、約８０ｍＭ、約９０ｍＭ、約１００ｍＭ、約１１０ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１４０ｍＭまたは約１５０ｍＭの濃度で存在する。
ある実施形態では、緩衝剤は、約２０ｍＭ～約６０ｍＭ、例えば、約３０～約５０ｍＭ、例えば、約４０ｍＭの濃度で存在する。ある実施形態では、緩衝剤は、約４０ｍＭの濃度で存在する。
ある実施形態では、緩衝剤は、クエン酸バッファ、リン酸バッファ、またはクエン酸－リン酸バッファである。ある実施形態では、緩衝剤は、クエン酸－リン酸ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は、約２０ｍＭ～約６０ｍＭ、例えば、約３０～約５０ｍＭ、例えば、約４０ｍＭの濃度のクエン酸－リン酸ナトリウムを含む。
ある実施形態では、緩衝剤は、約５．５～約７、例えば、約６～約６．５、例えば、約５．５、約６、約６．５、または約７のｐＨをもたらす。ある実施形態では、緩衝剤は、クエン酸－リン酸ナトリウムを含み、約６～約６．５、例えば、約６または約６．５のｐＨをもたらす。
ある実施形態では、等張化剤は、約１０ｍＭ～約５００ｍＭ、約５０ｍＭ～約２００ｍＭ、例えば、約６０ｍＭ～約１９０ｍＭ、約７０ｍＭ～約１８０ｍＭ、約８０ｍＭ～約１７０ｍＭ、約９０ｍＭ～約１６０ｍＭ、約１００ｍＭ～約１５０ｍＭ、約１４５ｍＭ～約１５５ｍＭ、約１４０ｍＭ～約１６０ｍＭ、約１３５ｍＭ～約１６５ｍＭ、約１３０ｍＭ～約１７０ｍＭ、約１２０ｍＭ～約１８０ｍＭ、約１１０ｍＭ～約１９０ｍＭ、約１００ｍＭ～約２００ｍＭ、約５０ｍＭ～約１００ｍＭ、約１００ｍＭ～約１５０ｍＭまたは約１５０ｍＭ～約１２０ｍＭ、例えば、約２００ｍＭもしくはそれ未満、約１５０ｍＭもしくはそれ未満、約１００ｍＭもしくはそれ未満または約７５ｍＭもしくはそれ未満、例えば、約５０ｍＭ、約６０ｍＭ、約７０ｍＭ、約８０ｍＭ、約９０ｍＭ、約１００ｍＭ、約１１０ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１５０ｍＭ、約１６０ｍＭ、約１７０ｍＭ、約１８０ｍＭ、約１９０ｍＭまたは約２００ｍＭの濃度で存在する。
ある実施形態では、等張化剤は、約５０～約２００ｍＭ、約７５ｍＭ～約１５０ｍＭ、約１２０ｍＭ～約１８０ｍＭ、例えば、約１４０～約１６０ｍＭ、例えば、約１５０ｍＭの濃度で存在する。
ある実施形態では、等張化剤は、塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、等張化剤は、塩化ナトリウムを含み、約１４０～約１６０ｍＭ、例えば、約１５０ｍＭの濃度で存在する。
ある実施形態では、等張化剤は、約２５０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２６０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３４０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２７０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３３０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２８０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３２０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２８５ｍＯｓｍ／Ｌ～約３１０ｍＯｓｍ／Ｌまたは約２９０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３００ｍＯｓｍ／Ｌ、例えば、約２５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２６０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２７０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２８０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２９０ｍＯｓｍ／Ｌ、約３００ｍＯｓｍ／Ｌ、約３１０ｍＯｓｍ／Ｌ、約３２０ｍＯｓｍ／Ｌ、約３３０ｍＯｓｍ／Ｌ、約３４０ｍＯｓｍ／Ｌまたは約３５０ｍＯｓｍ／Ｌの張性（またはオスモル濃度）をもたらす。
ある実施形態では、製剤は、約５．５～約７、例えば、約６～約６．５、例えば、約５．５、約６、約６．５または約７のｐＨを有する。
ある実施形態では、製剤は、
（ａ）約１０～約４０ｍｇ／ｍＬの濃度の、例えば、約２０～約３０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２５ｍｇ／ｍＬの濃度の本明細書に記載の抗体分子；
（ｂ）約２０ｍＭ～６０ｍＭ、例えば、約３０～約５０ｍＭ、例えば、約４０ｍＭの濃度の緩衝剤、例えば、クエン酸－リン酸ナトリウム；および
（ｃ）約７５～約１５０ｍＭの濃度の、約１２０ｍＭ～約１８０ｍＭ、例えば、約１４０～約１６０ｍＭ、例えば、約１５０ｍＭの濃度の等張化剤、例えば、塩化ナトリウム、
を含み、製剤のｐＨは、約５．５～約６．５、例えば、約６または約６．５である。
ある実施形態では、製剤は、約６のｐＨで、約２５ｍｇ／ｍＬの本明細書に記載の抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。
ある実施形態では、製剤は、界面活性剤、例えば、非イオン性界面活性剤をさらに含む。
ある実施形態では、界面活性剤は、約０．００５％～約０．１％（ｗ／ｖ）、例えば、約０．０１％～約０．０５％、約０．０１５％～約０．０４％、約０．０２％～約０．０３％、約０．０１％～約０．０３％、約０．０２％～約０．０４％、約０．０１％～約０．０２５％、約０．０２５％～約０．１％、約０．００５％～約０．０５％または約０．０５％～約０．１％、例えば、約０．１％もしくはそれ未満、約０．０７５％もしくはそれ未満、約０．０５％もしくはそれ未満、約０．０２５％もしくはそれ未満または約０．０１％もしくはそれ未満、例えば、約０．００５％、約０．０１％、約０．０１５％、約０．０２％、約０．０２５％、約０．０３％、約０．０３５％、約０．０４％、約０．０５％、約０．０６％、約０．０７％、約０．０８％、約０．０９％または約０．１％の濃度で存在する。
ある実施形態では、界面活性剤は、約０．０１％～約０．０５％、例えば、約０．０２５％の濃度で存在する。
ある実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）である。ある実施形態では、界面活性剤はポリソルベート８０であり、約０．０１％および約０．０５％、例えば、約０．０２５％の濃度で存在する。
ある実施形態では、製剤は、
（ａ）約１０～約４０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２０～約３０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２５ｍｇ／ｍＬの濃度の本明細書に記載の抗体分子；
（ｂ）約２０ｍＭ～約６０ｍＭの濃度の、例えば、約３０～約５０ｍＭ、例えば、約４０ｍＭの濃度の緩衝剤、例えば、クエン酸－リン酸ナトリウム；
（ｃ）約７５ｍＭ～約１５０ｍＭの濃度の、約１２０ｍＭ～１８０ｍＭ、例えば、約１４０～約１６０ｍＭ、例えば、約１５０ｍＭの濃度の等張化剤、例えば、塩化ナトリウム；および
（ｄ）約０．０１％～約０．０４％、例えば、約０．０２５％の濃度の界面活性剤、例えば、ポリソルベート８０，
を含み、医薬組成物のｐＨは、約５．５～約６．５、例えば、約６または約６．５である。
ある実施形態では、製剤は、約２５ｍｇ／ｍＬの本明細書で記載される抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０２５％のポリソルベート８０を、約６のｐＨで含む。
ある実施形態では、製剤は、約２５ｍｇ／ｍＬの本明細書で記載される抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０２５％のポリソルベート８０を、約６．５のｐＨで含む。
ある実施形態では、製剤は、約２５ｍｇ／ｍＬの本明細書で記載される抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約７５ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０２５％のポリソルベート８０を、約６．５のｐＨで含む。
ある実施形態では、製剤は、安定剤をさらに含む。
ある実施形態では、安定剤は、約０．１％～約１０％（ｗ／ｖ）、例えば、約０．２％～約５％、約０．５％～約１．５％、約０．５％～約１％、約１％～約２％、例えば、約５％もしくはそれ未満、約４％もしくはそれ未満、約３％もしくはそれ未満、約２％もしくはそれ未満、約１％もしくはそれ未満、約０．５％もしくはそれ未満または約０．２％もしくはそれ未満、例えば、約０．６％、約０．８％、約１％、約１．５％、約２％、約３％、約４％または約５％の濃度で存在する。
ある実施形態では、安定剤はアミノ酸である。ある実施形態では、アミノ酸は、グリシン、ヒスチジン、アルギニン、メチオニン、プロリン、リシン、グルタミン酸、またはこれらの組合せである。ある実施形態では、製剤は、グリシン、ヒスチジン、またはアルギニンのうちの１つ、２つ、または全てを含む。ある実施形態では、アミノ酸はグリシンである。ある実施形態では、製剤は、約０．５％～約２％、例えば、約１％の濃度で存在するグリシンを含む。
ある実施形態では、製剤は、
（ａ）約１０～約４０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２０～約３０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２５ｍｇ／ｍＬの濃度の本明細書に記載の抗体分子；
（ｂ）約２０ｍＭ～約６０ｍＭ、例えば、約３０～約５０ｍＭ、例えば、約４０ｍＭの濃度の緩衝剤、例えば、クエン酸－リン酸ナトリウム；
（ｃ）約７５ｍＭ～約１５０ｍＭ、約１２０ｍＭ～約１８０ｍＭ、例えば、約１４０～約１６０ｍＭ、例えば、約１５０ｍＭの濃度の等張化剤、例えば、塩化ナトリウム；
（ｄ）約０．０１％～約０．０４％、例えば、約０．０２５％の濃度の界面活性剤、例えば、ポリソルベート８０；および
（ｃ）約０．５％～約２％、例えば、約１％の濃度の安定剤、例えば、グリシン、
を含み、医薬組成物のｐＨは、約５．５～約６．５、例えば、約６または約６．５である。
ある実施形態では、製剤は、約２５ｍｇ／ｍＬの本明細書で記載される抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０２５％のポリソルベート８０、約１％のグリシンを、約６のｐＨで含む。
ある実施形態では、製剤は、炭水化物、例えば、ポリオールまたは糖をさらに含む。ある実施形態では、炭水化物は、スクロース、トレハロース、マンニトール、デキストラン、ソルビトール、イノシトール、グルコース、フルクトース、ラクトース、キシロース、マンノース、マルトース、ラフィノース、これらの組合せである。
ある実施形態では、製剤は、ポリマー、例えば、親水性ポリマーをさらに含む（ｆｕｒｔｈｅｒ ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ ｆｕｒｔｈｅｒ ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）。ある実施形態では、ポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、デキストラン、ヒドロキシルエチルデンプン（ＨＥＴＡ）、またはゼラチンである。
ある実施形態では、製剤は、防腐剤をさらに含む。ある実施形態では、防腐剤は、ベンジルアルコール、ｍ－クレゾール、またはフェノールである。
ある実施形態では、製剤中の高分子量（ＨＭＷ）種のレベルは、例えば、保存前に、あるいは４℃で少なくとも約１週間、４５℃で少なくとも約１週間、４℃で少なくとも約２週間、４５℃で少なくとも約２週間、４℃で少なくとも約３週間、４５℃で少なくとも約３週間、４℃で少なくとも約４週間または４５℃で少なくとも約４週間にわたる保存後に約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２％未満、もしくは１％未満である。ある実施形態では、ＨＭＷ種のレベルは、保存前に約２％未満である。ある実施形態では、ＨＭＷ種のレベルは、４℃で２週間にわたる保存後に約２％未満である。ある実施形態では、ＨＭＷ種のレベルは、４５℃で２週間にわたる保存後に約５％未満である。
ある実施形態では、製剤中の低分子量（ＬＭＷ）種のレベルは、例えば、保存前に、あるいは４℃で少なくとも約１週間、４５℃で少なくとも約１週間、４℃で少なくとも約２週間、４５℃で少なくとも約２週間、４℃で少なくとも約３週間、４５℃で少なくとも約３週間、４℃で少なくとも約４週間または４５℃で少なくとも約４週間にわたる保存後に約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２％未満、もしくは１％未満である。ある実施形態では、ＬＭＷ種のレベルは、保存前に約１％未満である。ある実施形態では、ＬＭＷ種のレベルは、４℃で２週間にわたる保存後に約１％未満である。ある実施形態では、ＬＭＷ種のレベルは、４５℃で２週間にわたる保存後に約２％未満である。
ある実施形態では、製剤中のＨＭＷおよびＬＭＷ種のレベルは、例えば、保存前に、あるいは４℃で少なくとも約１週間、４５℃で少なくとも約１週間、４℃で少なくとも約２週間、４５℃で少なくとも約２週間、４℃で少なくとも約３週間、４５℃で少なくとも約３週間、４℃で少なくとも約４週間または４５℃で少なくとも約４週間にわたる保存後に約８％未満、約７％未満、約６％未満、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２％未満もしくは１％未満である。ある実施形態では、ＨＭＷおよびＬＭＷ種のレベルは、保存前に約２％未満である。ある実施形態では、ＨＭＷおよびＬＭＷ種のレベルは、４℃で２週間にわたる保存後に約２％未満である。ある実施形態では、ＬＭＷ種のレベルは、４５℃で２週間にわたる保存後に約６％未満である。
ある実施形態では、製剤中の抗体分子の約９０％もしくはこれより多く、約９２％もしくはこれより多く、約９４％もしくはこれより多く、約９５％もしくはこれより多く、約９６％もしくはこれより多く、約９７％もしくはこれより多く、約９８％もしくはこれより多くまたは約９９％もしくはこれより多くが、例えば、保存前に、あるいは４℃で少なくとも約１週間、４５℃で少なくとも約１週間、４℃で少なくとも約２週間、４５℃で少なくとも約２週間、４℃で少なくとも約３週間、４５℃で少なくとも約３週間、４℃で少なくとも約４週間または４５℃で少なくとも約４週間にわたる保存後に単量体として存在する。ある実施形態では、製剤中の抗体分子の約９８％もしくはこれより多くが、保存前に単量体として存在する。ある実施形態では、製剤中の抗体分子の約９８％もしくはこれより多くが、４℃で２週間にわたる保存後に単量体として存在する。ある実施形態では、製剤中の抗体分子の約９４％もしくはこれより多くが、４５℃で２週間にわたる保存後に単量体として存在する。
ある実施形態では、単量体、ＨＭＷ種、またはＬＭＷ種のレベルは、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、例えば、サイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）により決定される。別の実施形態では、抗体分子の単量体の性質は、結合アッセイ、表面電荷アッセイ、バイオアッセイ、またはＨＭＷ種のＬＭＷ種に対する比により決定される。
ある実施形態では、製剤中の抗体分子の純度は、例えば、４℃で２週間にわたる保存後に、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％または少なくとも約９９％である。ある実施形態では、製剤中の抗体分子の純度は、例えば、４５℃で２週間にわたる保存後に、少なくとも約９０％、少なくとも約９２％、少なくとも約９４％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％または少なくとも約９９％である。ある実施形態では、抗体分子の純度（または不均一性）は、製剤中の無傷の重鎖および軽鎖（例えば、還元試料中の）または無傷の免疫グロブリン（例えば、非還元試料中の）を検出することによって決定される。
ある実施形態では、製剤中の抗体分子の純度（または不均一性）は、キャピラリー電気泳動－ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ－ＳＤＳ）により還元試料において決定される。ある実施形態では、製剤中の抗体分子の純度（または不均一性）は、ＣＥ－ＳＤＳにより非還元試料において決定される。ある実施形態では、製剤中の抗体分子の純度は、例えば、４℃で２週間にわたる保存後に、還元試料においてＣＥ－ＳＤＳによって決定された場合に、少なくとも約９８％である。ある実施形態では、製剤中の抗体分子の純度は、例えば、４５℃で２週間にわたる保存後に、還元試料においてＣＥ－ＳＤＳによって決定された場合に、少なくとも約９６％である。ある実施形態では、製剤中の抗体分子の純度は、例えば、４℃で２週間にわたる保存後に、非還元試料においてＣＥ－ＳＤＳによって決定された場合に、少なくとも約９７％である。ある実施形態では、製剤中の抗体分子の純度は、例えば、４５℃で２週間にわたる保存後に、非還元試料においてＣＥ－ＳＤＳによって決定された場合に、少なくとも約９２％である。
ある実施形態では、抗体分子の活性は、例えば、４℃または４５℃で、例えば、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間または少なくとも約３週間にわたる保存後に、約２５％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、もしくはそれ約２％未満低下する。ある実施形態では、抗体分子の活性は、４５℃で２週間にわたる保存後に、約２５％未満低下する。ある実施形態では、抗体分子の活性は、ヘマグルチニン（ＨＡ）結合アッセイ、例えば、ＨＡ結合ＥＬＩＳＡにより決定される。
ある実施形態では、製剤は、液体製剤（例えば、凍結または未凍結の液体製剤）である。ある実施形態では、製剤は、凍結した液体として保存される。別の実施形態では、製剤は、凍結乾燥製剤である。
ある実施形態では、製剤は、被験体におけるインフルエンザの処置または予防における使用のためのものである。ある実施形態では、製剤は、インフルエンザを有する被験体の処置における使用のためのものである。別の実施形態では、製剤は、被験体がインフルエンザを有することの予防における使用のためのものである。ある実施形態では、製剤は、静脈内投与のためのものである。
別の態様では、本開示は、本明細書で記載される製剤、例えば、本明細書で記載される医薬製剤を含むデバイス、例えば、注射デバイスを特色とする。
さらに別の態様では、本開示は、本明細書で記載される製剤、例えば、本明細書で記載される医薬製剤を含む、１つまたは複数の容器と、製剤の使用のための、例えば、被験体への製剤の投与のための、または被験体への投与のための溶液を作製するための指示とを含むキットを特色とする。
別の態様では、本開示は、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子または本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子を含む製剤（例えば、本明細書で記載される医薬製剤）を含む容器（例えば、バイアルまたは静脈内（ＩＶ）溶液バッグ）を特色とする。
ある実施形態では、容器は、バイアル、例えば、ガラスバイアルである。ある実施形態では、容器（例えば、バイアル）は、約１０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２０ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬ（例えば、約２５ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ）の抗体分子を含む。ある実施形態では、容器（例えば、バイアル）は、約１０ｍＬ～約６０ｍＬ、例えば、約２０ｍＬ～約４０ｍＬの製剤を含む。ある実施形態では、この容器（例えば、バイアル）は、例えば、抗体分子または製剤を保存するための第１の（または一次）容器である。
抗体分子または製剤は、使用前に第２の（または二次）容器内に移されてもよい。ある実施形態では、第２の（または二次）容器は、投与、例えば、静脈内投与に適切であるか、またはそれに適切な溶液を含む。ある実施形態では、第２の（または二次）容器は、静脈内投与に適切な溶液を含む。ある実施形態では、溶液は、食塩液を含み、任意選択で、デキストロースをさらに含む。ある実施形態では、溶液（例えば、食塩液）は、デキストロースを含まない。例えば、抗体分子の１用量に等しい量が、ＩＶ投与に適切な容器内に移されうる。ある実施形態では、１～１０個のバイアル（例えば、１～８個のバイアル、１～６個のバイアル、１～４個のバイアル、１～２個のバイアル、６～８個のバイアル、４～８個のバイアル、または２～８個のバイアル）の製剤が、例えば、デキストロースありまたはなしの食塩液を含有するＩＶ溶液バッグ内に移される（例えば、希釈される）。
ある実施形態では、容器は、ＩＶ投与に適切な容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）である。ある実施形態では、容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）内の抗体分子の量は、上記で記載した通り、１～１０個のバイアル（例えば、１～８個のバイアル、１～６個のバイアル、１～４個のバイアル、１～２個のバイアル、６～８個のバイアル、４～８個のバイアル、または２～８個のバイアル）の製剤中の抗体分子の量に等しい。ある実施形態では、容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）は、例えば、ＩＶ投与に適切な溶液（例えば、デキストロースありまたはなしの食塩液）中に、約２０００ｍｇ～約５０００ｍｇ、例えば、約２３００ｍｇ～約４６００ｍｇの抗体分子を含む。
ある実施形態では、ＩＶ投与に適切な容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）は、第２の（または二次）容器ではなく（例えば、第１の（または一次）容器であり、例えば、ここに抗体分子が保存される）、約５ｍｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、例えば、約８ｍｇ／ｍＬ～約１６ｍｇ／ｍＬの抗体分子を含む。ある実施形態では、容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）は、抗体分子を含む約１００ｍＬ～約４００ｍＬ（例えば、約２００ｍＬ～約３００ｍＬ）の溶液（例えば、ＩＶ投与に適した溶液）を含む。ある実施形態では、容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）は、約２０００ｍｇ～約５０００ｍｇ、例えば、約２０００ｍｇ～約４０００ｍｇまたは約２３００ｍｇ～約４６００ｍｇの抗体分子を含む。
別の態様では、本開示は、被験体への投与のための組成物（例えば、溶液）を調製する方法を特色とする。方法は、本明細書で記載される製剤を静脈内投与に適切な溶液と組み合わせることを含む。
ある実施形態では、溶液は、食塩液を含み、任意選択で、デキストロースをさらに含む。ある実施形態では、溶液は、デキストロースを含まない。ある実施形態では、約２０００ｍｇ～約５０００ｍｇの抗体分子が溶液と組み合わされる。別の実施形態では、約２３００ｍｇ～約４６００ｍｇの抗体分子が溶液と組み合わされる。なお別の実施形態では、約２０００ｍｇ～約４０００ｍｇの抗体分子が溶液と組み合わされる。ある実施形態では、製剤は、静脈内（ＩＶ）溶液バッグ内で溶液と組み合わされる。
さらに別の態様では、本開示は、インフルエンザを処置または予防する方法であって、インフルエンザを有するか、またはインフルエンザを有する危険性がある被験体に、本明細書で記載される製剤、例えば、本明細書で記載される医薬製剤を有効量で投与し、これにより、インフルエンザを処置または予防することを含む方法を特色とする。
ある態様では、本開示は、被験体におけるインフルエンザの処置または予防における使用のための、本明細書で記載される製剤、例えば、本明細書で記載される医薬製剤を特色とする。
抗ＨＡ抗体分子
多様な抗ＨＡ抗体分子、またはその調製物もしくは単離調製物が、本明細書で記載される製剤（例えば、医薬製剤）に含まれうる。
ある実施形態では、抗体分子は、以下の特性：
（ａ）抗体分子およびインフルエンザＡウイルス、例えば、群１株、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、もしくはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、Ｈ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５もしくはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４、またはＨ７Ｎ９、例えば、Ａ／Ａｎｈｕｉ／１／２０１３もしくはＡ／Ｓｈａｎｇｈａｉ／１／２０１３の混合物による、細胞培養物における、少なくとも１０、９、８、７、６、または５ラウンドの連続感染後のウイルス力価の回復不全により決定して、あらゆるエスケープ変異体を産生できない；
（ｂ）例えば、（ａ）に記載される方法により調べたときに、参照抗ＨＡ抗体分子、例えば、Ａｂ ６７－１１、ＦＩ６、ＦＩ２８、Ｃ１７９、Ｆ１０、ＣＲ９１１４、またはＣＲ６２６１よりもエスケープ変異体の産生が少ない；
（ｃ）少なくとも１、２、３、４、または５種の群１インフルエンザ亜型および少なくとも１、２、３、４、または５種の群２インフルエンザ亜型のＨＡに高アフィニティーで結合する；
（ｄ）少なくとも１、２、３、４、または５種の群１インフルエンザ亜型および少なくとも１、２、３、４、または５種の群２インフルエンザ亜型による感染を予防する；
（ｅ）ターゲティングされたＨＡの、融合性活性（ｆｕｓｏｇｅｎｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ）を阻害する；
（ｆ）例えば、群１ウイルスがＨ１、Ｈ５、またはＨ９ウイルスである場合、群１ウイルスによる感染を処置または予防する；および例えば、群２ウイルスがＨ３またはＨ７ウイルスである場合、群２ウイルスによる感染を処置または予防する；
（ｇ）インフルエンザＡ Ｈ１Ｎ１株、インフルエンザＡ Ｈ３Ｎ２株、またはこれらの両方による感染を処置または予防する；
（ｈ）５０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、または１ｍｇ／ｋｇで投与されたとき、例えば、ヒトまたはマウスにおいて、Ｈ１Ｎ１またはＨ３Ｎ２による感染の予防または処置に有効である；
（ｉ）インフルエンザＡ Ｈ５Ｎ１株、インフルエンザＡ Ｈ７Ｎ９株、またはこれらの両方による感染を処置または予防する；
（ｊ）５０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、または１ｍｇ／ｋｇで投与されたとき、例えば、ヒトまたはマウスにおいて、Ｈ５Ｎ１またはＨ７Ｎ９による感染の予防または処置に有効である；
（ｋ）インフルエンザＡウイルスの５０％中和に要求される抗体分子の濃度が、１０μｇ／ｍＬ未満である；
（ｌ）インフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０による感染を処置または予防する；
（ｍ）１０ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、または１ｍｇ／ｋｇで投与されたとき、例えば、ヒトまたはマウスにおいて、インフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０による感染の予防または処置に有効である；
（ｎ）インフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０ウイルスの５０％中和に要求される抗体分子の濃度が、１０μｇ／ｍＬ未満である；
（ｏ）被験体に対する二次感染（例えば、二次細菌感染）またはその影響を予防するか、または最小限に抑える；
（ｐ）５０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、または１ｍｇ／ｋｇで投与されたとき、被験体に対する二次感染（例えば、二次細菌感染）またはその影響を予防するため、または最小限に抑えるために有効である；
（ｑ）ヘマグルチニン三量体界面を含むかまたはこれからなるエピトープに結合する；および
（ｒ）例えば、本明細書で記載される方法、例えば、構造解析（例えば、Ｘ線結晶解析またはＮＭＲ分光法によるもの）または競合アッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡによるもの）により決定して、参照抗ＨＡ抗体分子、例えば、Ａｂ ６７－１１、ＦＩ６、ＦＩ２８、Ｃ１７９、Ｆ１０、ＣＲ９１１４、またはＣＲ６２６１が結合するもの以外のエピトープに結合する；または
（ｓ）例えば、本明細書で記載される方法（例えば、変異解析または結晶構造解析）により決定して、本明細書で開示される抗体のエピトープに結合する、例えば、本明細書で開示される抗体のものと重複するかまたはそれと同じエピトープを有する、のうちの１個または複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８個、または全て）を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、以下の特性：（ｉ）抗体分子が、少なくとも１、２、３、４、または５種の群１インフルエンザ亜型および少なくとも１、２、３、４、または５種の群２インフルエンザ亜型による感染を予防する；（ｉｉ）インフルエンザＡウイルスの５０％中和に要求される抗体分子の濃度が、１０μｇ／ｍＬ未満である；または（ｉｉｉ）抗体分子が、ヘマグルチニン三量体界面を含むかまたはこれからなるエピトープに結合する、のうちの１つ、２つ、または全てを有する。
ある実施形態では、抗体分子は、例えば、群１ウイルスがＨ１、Ｈ２、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１２、Ｈ１１、Ｈ１３、Ｈ１６、またはＨ１７ウイルスである場合、群１ウイルスによる感染を処置または予防し；例えば、群２ウイルスがＨ３、Ｈ４、Ｈ７、Ｈ１０、またはＨ１５ウイルスである場合、群２ウイルスによる感染を処置または予防する。ある実施形態では、抗体分子は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１種の群１インフルエンザ亜型および少なくとも１、２、３、４、５、または６種の群２インフルエンザ亜型による感染を予防する。ある実施形態では、抗体分子は、Ｈ１Ｎ１、Ｈ２Ｎ２、Ｈ５Ｎ１、またはＨ９Ｎ２のうちの１つまたは複数による感染を処置または予防し、かつ、Ｈ３Ｎ２、Ｈ７Ｎ７、またはＨ７Ｎ９のうちの１つまたは複数による感染も処置または予防する。
ある実施形態では、抗体分子は、群１のＨ１、例えば、Ｈ１ａまたはＨ１ｂクラスター由来の少なくとも１種の株と、群２のＨ３またはＨ７クラスター由来の少なくとも１種の株とに結合し、ある実施形態では、中和する。ある実施形態では、抗体分子は、群１のＨ１、例えば、Ｈ１ａまたはＨ１ｂクラスター由来の少なくとも１種の株と、少なくとも１種のインフルエンザＢ株、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０とに結合し、ある実施形態では、中和する。ある実施形態では、抗体分子は、群２のＨ３またはＨ７クラスター由来の少なくとも１種の株と、少なくとも１種のインフルエンザＢ株、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０とに結合し、ある実施形態では、中和する。ある実施形態では、抗体分子は、群１のＨ１、例えば、Ｈ１ａまたはＨ１ｂクラスター由来の少なくとも１種の株と、群２のＨ３またはＨ７クラスター由来の少なくとも１種の株と、少なくとも１種のインフルエンザＢ株、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０とに結合し、ある実施形態では、中和する。ある実施形態では、抗体分子は、１種または複数種のインフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０による感染症を処置または予防する。
ある実施形態では、抗体分子は、当該技術分野で以前に記載された抗ＨＡ抗体分子ではない。例えば、抗体分子は、Ａｂ ６７－１１（米国仮特許出願第６１／６４５，４５３号、米国出願公開第２０１３／０３０２３４８号および国際出願公開ＷＯ２０１３／１６９３７７）、ＦＩ６（ＦＩ６、本明細書で使用される場合、米国公開出願第２０１０／００８０８１３号または同第２０１１／０２７４７０２号、国際出願公開ＷＯ２０１３／０１１３４７、あるいはＣｏｒｔｉら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３３：８５０－８５６、２０１１における任意の具体的に開示されるＦＩ６配列を指す；図４）、ＦＩ２８（米国出願公開第２０１０／００８０８１３号）、Ｃ１７９（Ｏｋｕｎｏら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ． ６７：２５５２－１５５８、１９９３）、Ｆ１０（Ｓｕｉら、Ｎａｔ． Ｓｔｒｕｃｔ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．１６：２６５、２００９）、ＣＲ９１１４（Ｄｒｅｙｆｕｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３７（６１００）：１３４３－１３４８、２０１２）、またはＣＲ６２６１（Ｅｋｉｅｒｔら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２４：２４６－２５１、２００９）のうちの１つまたはそれより多くまたは全て以外である。
ある実施形態では、抗体分子は、ｉｎ ｖｉｔｒｏでＨ１Ｎ１およびＨ３Ｎ２による感染を中和する。別の実施形態では、抗体分子は、ｉｎ ｖｉｖｏでＨ１Ｎ１およびＨ３Ｎ２による感染を中和する。ある実施形態では、抗体分子は、ｉｎ ｖｉｔｒｏでＨ５Ｎ１による感染を中和する。別の実施形態では、抗体分子は、ｉｎ ｖｉｖｏでＨ５Ｎ１による感染を中和する。ある実施形態では、抗体分子は、ｉｎ ｖｉｔｒｏでＨ７Ｎ９による感染を中和する。別の実施形態では、抗体分子は、ｉｎ ｖｉｖｏでＨ７Ｎ９による感染を中和する。ある実施形態では、抗体分子は、ｉｎ ｖｉｔｒｏでインフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０による感染を中和する。別の実施形態では、抗体分子は、ｉｎ ｖｉｖｏでインフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０による感染を中和する。
別の実施形態では、インフルエンザＡウイルスの５０％中和に要求される抗体分子の濃度は、１０μｇ／ｍＬもしくはそれ未満、例えば、９μｇ／ｍＬもしくはそれ未満、８μｇ／ｍＬもしくはそれ未満、７μｇ／ｍＬもしくはそれ未満、６μｇ／ｍＬもしくはそれ未満または５μｇ／ｍＬもしくはそれ未満．別の実施形態では、インフルエンザＡウイルスの６０％中和、インフルエンザＡウイルスの５０％中和、またはインフルエンザＡウイルスの４０％中和に要求される抗体分子の濃度は、１０μｇ／ｍＬもしくはそれ未満、例えば、９μｇ／ｍＬもしくはそれ未満、８μｇ／ｍＬもしくはそれ未満、７μｇ／ｍＬもしくはそれ未満、６μｇ／ｍＬもしくはそれ未満または５μｇ／ｍＬもしくはそれ未満である。
さらに別の実施形態では、抗体分子は、例えば、５０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇまたはこれ未満で投与されたときに、例えば、ヒトまたはマウスにおいて、Ｈ１Ｎ１またはＨ３Ｎ２による感染の予防または処置に有効である。さらに別の実施形態では、抗体分子は、例えば、５０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇまたはこれ未満で投与されたとき、例えば、ヒトまたはマウスにおいて、Ｈ５Ｎ１またはＨ７Ｎ９による感染の予防または処置に有効である。別の実施形態では、抗体分子は、群１ウイルスがＨ１、Ｈ５、またはＨ９である場合、群１ウイルスの処置または予防に有効であり、別の実施形態では、抗ＨＡ抗体分子は、群２ウイルスがＨ３またはＨ７である場合、群２ウイルスの処置または予防に有効である。
別の実施形態では、インフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０の５０％中和に要求される抗体分子の濃度は、１０μｇ／ｍＬもしくはこれ未満、例えば、９μｇ／ｍＬもしくはこれ未満、８μｇ／ｍＬもしくはこれ未満、７μｇ／ｍＬもしくはこれ未満、６μｇ／ｍＬもしくはこれ未満、または５μｇ／ｍＬもしくはこれ未満である。別の実施形態では、インフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０の６０％中和、インフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０の５０％中和、もしくはインフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０の４０％中和に要求される抗体分子の濃度は、１０μｇ／ｍＬもしくはこれ未満、例えば、９μｇ／ｍＬもしくはこれ未満、８μｇ／ｍＬもしくはこれ未満、７μｇ／ｍＬもしくはこれ未満、６μｇ／ｍＬもしくはこれ未満、または５μｇ／ｍＬもしくはこれ未満である。
ある実施形態では、抗体分子は、以下の特性：（ｉ）抗体分子およびインフルエンザウイルス（例えば、インフルエンザＡウイルス、例えば、群１株、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、もしくはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５もしくはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４、またはインフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０）の混合物による、細胞培養物における、少なくとも１０、９、８、７、６、もしくは５ラウンドの連続感染後のウイルス力価の回復不全により決定して、あらゆるエスケープ変異体を産生できない；または（ｉｉ）例えば（ｉ）に記載される方法により調べたときに、参照抗ＨＡ抗体分子、例えば、Ａｂ ６７－１１、ＦＩ６、ＦＩ２８、Ｃ１７９、Ｆ１０、ＣＲ９１１４、またはＣＲ６２６１よりもエスケープ変異体の産生が少ない、の一方または両方を含む。
別の実施形態では、抗体分子は、全長の四量体抗体、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ断片、またはＦｄ断片である。別の実施形態では、抗体分子の重鎖はγ１重鎖であり、さらに別の実施形態では、抗体分子の軽鎖はκ軽鎖またはλ軽鎖である。さらに別の実施形態では、抗体分子は、ＩｇＧ１抗体である。
ある実施形態では、抗体分子は、以下の特性ａ）～ｆ）：ａ）Ｈ３ ＨＡ１残基Ｎ３８、Ｉ２７８、およびＤ２９１のうちの１つ、２つ、もしくは全てを含む；ｂ）Ｈ３ ＨＡ２残基Ｎ１２を含む；ｃ）Ｈ３ ＨＡ１残基Ｑ３２７、Ｔ３２８、およびＲ３２９のうちの１つ、２つ、もしくは全てを含まない；ｄ）Ｈ３ ＨＡ２残基Ｇ１、Ｌ２、Ｆ３、Ｇ４、およびＤ４６のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、もしくは全てを含まない；ｅ）Ｈ３ ＨＡ１残基Ｔ３１８、Ｒ３２１、およびＶ３２３のうちの１つ、２つ、もしくは全てを含む；またはｆ）Ｈ３ ＨＡ２残基Ａ７、Ｅ１１、Ｉ１８、Ｄ１９、Ｇ２０、Ｗ２１、Ｌ３８、Ｋ３９、Ｔ４１、Ｑ４２、Ａ４３、Ｉ４５、Ｉ４８、Ｎ４９、Ｌ５２、Ｎ５３、Ｉ５６、およびＥ５７のうちの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７個、もしくは全てを含む、のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または全てを有するエピトープに結合する。
ある実施形態では、抗体分子は、特性：ａ）およびｂ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ｃ）およびｄ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ａ）；およびｃ）またはｄ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ｂ）；およびｃ）またはｄ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ｃ）；およびａ）またはｂ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ｄ）；およびａ）またはｂ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ａ）、ｂ）、ｃ）およびｄ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、ｅ）およびｆ）を有する。
ある実施形態では、抗体分子は、Ｈ３に対するＫＤが１０－６ｎＭと等しいかまたはこれ未満であり、前記ＫＤは、ａ）Ｈ３ ＨＡ１残基Ｎ３８、Ｉ２７８、もしくはＤ２９１；ｂ）Ｈ３ ＨＡ２残基Ｎ１２；ｃ）Ｈ３ ＨＡ１残基Ｔ３１８、Ｒ３２１、もしくはＶ３２３；またはｄ）Ｈ３ ＨＡ２残基Ａ７、Ｅ１１、Ｉ１８、Ｄ１９、Ｇ２０、Ｗ２１、Ｌ３８、Ｋ３９、Ｔ４１、Ｑ４２、Ａ４３、Ｉ４５、Ｉ４８、Ｎ４９、Ｌ５２、Ｎ５３、Ｉ５６、もしくはＥ５７のうちのいずれかにおける変異（複数可）により、少なくとも２、５、１０、または１００倍増加する。ある実施形態では、抗体分子は、Ｈ３に対するＫＤが１０－６ｎＭと等しいかまたはこれ未満であり、前記ＫＤは、ｅ）Ｈ３ ＨＡ１残基Ｑ３２７、Ｔ３２８、もしくはＲ３２９；またはｆ）Ｈ３ ＨＡ２残基Ｇ１、Ｌ２、Ｆ３、Ｇ４、もしくはＤ４６のうちのいずれかにおける変異（複数可）により、２または５倍以下増加する。
ある実施形態では、抗体分子は、以下の特性ａａ）～ｆｆ）：ａａ）Ｈ１ ＨＡ１残基Ｈ３１、Ｎ２７９、およびＳ２９２のうちの１つ、２つ、または全てを含む；ｂｂ）Ｈ１ ＨＡ２残基Ｇ１２を含む；ｃｃ）Ｈ１ ＨＡ１残基Ｑ３２８およびＳ３２９の一方または両方を含まない；ｄｄ）Ｈ１ ＨＡ２残基Ｇ１、Ｌ２、Ｆ３、Ｇ４、およびＤ４６のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、または全てを含まない；ｅｅ）Ａｂ ０４４およびＦＩ６の両方が結合するＨ１ ＨＡ１残基Ｔ３１９、Ｒ３２２、およびＩ３２４のうちの１つ、２つ、または全てを含む；またはｆｆ）Ｈ１ ＨＡ２残基Ａ７、Ｅ１１、Ｉ１８、Ｄ１９、Ｇ２０、Ｗ２１、Ｑ３８、Ｋ３９、Ｔ４１、Ｑ４２、Ｎ４３、Ｉ４５、Ｉ４８、Ｔ４９、Ｖ５２、Ｎ５３、Ｉ５６、およびＥ５７のうちの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７個、または全てを含む、のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または全てを有するエピトープに結合する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ａａ）およびｂｂ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ｃｃ）およびｄｄ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ａａ）；およびｃｃ）またはｄｄ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ｂｂ）；およびｃｃ）またはｄｄ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ｃｃ）；およびａａ）またはｂｂ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ｄｄ）；およびａａ）またはｂｂ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ａａ）、ｂｂ）、ｃｃ）およびｄｄ）を有する。ある実施形態では、抗体分子は、特性：ａａ）、ｂｂ）、ｃｃ）、ｄｄ）、ｅｅ）およびｆｆ）を有する。
ある実施形態では、抗体分子は、Ｈ１に対するＫＤが１０－６ｎＭと等しいかまたはこれ未満であり、前記ＫＤは、ａａ）Ｈ１ ＨＡ１残基Ｈ３１、Ｎ２７９、およびＳ２９２；ｂｂ）Ｈ１ ＨＡ２残基Ｇ１２；ｃｃ）Ｈ１ ＨＡ１残基Ｔ３１９、Ｒ３２２、およびＩ３２４；またはｄｄ）Ｈ１ ＨＡ２残基Ａ７、Ｅ１１、Ｉ１８、Ｄ１９、Ｇ２０、Ｗ２１、Ｑ３８、Ｋ３９、Ｔ４１、Ｑ４２、Ｎ４３、Ｉ４５、Ｉ４８、Ｔ４９、Ｖ５２、Ｎ５３、Ｉ５６、およびＥ５７のうちのいずれかにおける変異（複数可）により、少なくとも２、５、１０、または１００倍増加する。ある実施形態では、抗体分子は、Ｈ１に対するＫＤが１０－６ｎＭと等しいかまたはこれ未満であり、前記ＫＤは、ｅｅ）Ｈ１ ＨＡ１残基Ｑ３２８およびＳ３２９；またはｆｆ）Ｈ１ ＨＡ２残基Ｇ１、Ｌ２、Ｆ３、Ｇ４、およびＤ４６のうちのいずれかにおける変異（複数可）により、２または５倍以下増加する。
ある実施形態では、抗体分子は、上記の通りの以下の特性：ａ）およびａａ）；ｂ）およびｂｂ）；ｃ）およびｃｃ）；またはｄ）およびｄｄ）のうちの１つ、２つ、３つまたは全てを有する。ある実施形態では、抗体分子は、上記の通りの特性ｃ）、ｃｃ）、ｄ）およびｄｄ）を有する。
ある実施形態では、抗体分子は、表３、表４Ａ、表４Ｂ、図２、図５または図７からの重鎖可変領域と少なくとも６０、６５、７０、７５、８０、８５、８７、９０、９５、９８または９９パーセントあるいはそれより大きな相同性を含む重鎖可変領域；および表３、表４Ａ、表４Ｂ、図３Ａ～３Ｂ、図６Ａ～６Ｂまたは図７からの軽鎖可変領域と少なくとも６０、６５、７０、７５、８０、８５、８７、９０、９５、９８または９９パーセントあるいはそれより大きな相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、重鎖可変領域２５（配列番号２５）、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する可変重鎖領域を含む。ある実施形態では、抗体分子は、軽鎖可変領域５２（配列番号５２）、１５５（配列番号１５５）または４５（配列番号４５）、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する可変軽鎖領域を含む。ある実施形態では、抗体分子は、重鎖可変領域２５（配列番号２５）、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する可変重鎖領域；および軽鎖可変領域５２（配列番号５２）、１５５（配列番号１５５）または４５（配列番号４５）、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する可変軽鎖領域を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、重鎖可変領域２５（配列番号２５）、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する可変重鎖領域からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のうちの１つ、２つまたは全てを含む重鎖可変領域を含む。ある実施形態では、抗体分子は、軽鎖可変領域５２（配列番号５２）、１５５（配列番号１５５）または４５（配列番号４５）、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のうちの１つ、２つまたは全てを含む軽鎖可変領域を含む。ある実施形態では、抗体分子は、重鎖可変領域２５（配列番号２５）、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する可変重鎖領域からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のうちの１つ、２つまたは全てを含む重鎖可変領域；および軽鎖可変領域５２（配列番号５２）、１５５（配列番号１５５）または４５（配列番号４５）、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する可変軽鎖領域からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のうちの１つ、２つまたは全てを含む軽鎖可変領域を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、図２または図５からの重鎖可変領域、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する可変重鎖領域を含む。ある実施形態では、抗体分子は、図３Ａ～３Ｂまたは図６Ａ～６Ｂからの軽鎖可変領域、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する可変軽鎖領域を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、図２または図５からの重鎖可変領域、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のちの１つ、２つまたは全てを含む。ある実施形態では、抗体分子は、図３Ａ～３Ｂまたは図６Ａ～６Ｂからの軽鎖可変領域、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のちの１つ、２つまたは全てを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、表３に開示の抗体由来のＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２およびＨＣ ＣＤＲ３のうちの１つ、２つまたは全て、ならびにＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２およびＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つ、２つまたは全て、あるいは本明細書に記載される通りの構造的または機能的に関連する配列を含む。
別の実施形態では、抗体分子は、軽鎖ＬＣ４５（配列番号４５）を含む。なお別の実施形態では、抗体は、軽鎖ＬＣ４５、および重鎖ＨＣ２５（配列番号２５）またはＨＣ２４（配列番号２４）を含む。ある実施形態では、抗体分子は、軽鎖ＬＣ４５（配列番号４５）および重鎖ＨＣ２５（配列番号２５）を含む。なお別の実施形態では、抗体分子は、軽鎖ＬＣ５２（配列番号５２）および重鎖ＨＣ２５（配列番号２５）を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）本明細書に開示される重鎖からの１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）、例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは本明細書に開示される重鎖と個別にもしくは集合的に、１、２、３、４または５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なるＦＲ配列；およびｂ）本明細書に開示される軽鎖からの１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）、例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは本明細書に開示される軽鎖と個別にもしくは集合的に、１、２、３、４または５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なるＦＲ配列、の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）本明細書で提供される重鎖コンセンサス配列、例えば、図２または図５で提供される重鎖コンセンサス配列、例えば、図２で提供される重鎖コンセンサス配列、配列番号１６１と少なくとも６０、７０、８０、８５、８７、９０、９５、９７、９８または９９、例えば、９０％相同な配列を含む重鎖免疫グロブリン可変ドメイン；および（ｂ）本明細書で提供される軽鎖コンセンサス配列、例えば、図３Ａ～３Ｂまたは図６で提供される軽鎖コンセンサス配列、例えば、図３Ａ～３Ｂで提供される軽鎖コンセンサス配列、配列番号６２と少なくとも６０、７０、８０、８５、８７、９０、９５、９７、９８または９９、例えば、９５％相同な配列を含む軽鎖免疫グロブリン可変ドメインを含む。
例えば、ある実施形態では、本明細書に開示される抗体分子は、（ａ）配列番号１６１の配列、または配列番号１６１と少なくとも８７％同一な配列を含む重鎖免疫グロブリン可変ドメイン；および（ｂ）配列番号６２の配列、または配列番号６２と少なくとも９５％同一な配列を含む軽鎖免疫グロブリン可変ドメインの一方または両方を含む。
別の実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号１６１の配列、または配列番号１６１と少なくとも８７％同一な配列を含む重鎖免疫グロブリン可変ドメイン；および（ｂ）配列番号６２の配列、または配列番号６２と少なくとも９５％同一な配列を含む軽鎖免疫グロブリン可変ドメインを含み、前記抗体分子は、（ｉ）抗体分子およびインフルエンザウイルス（例えば、インフルエンザＡウイルス、例えば、群１株、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、もしくはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５もしくはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４、またはインフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０）の混合物による、細胞培養物における、少なくとも１０、９、８、７、６、または５ラウンドの連続感染後のウイルス力価の回復不全により決定して、あらゆるエスケープ変異体を産生できない；かつ、（ｉｉ）例えば（ｉ）に記載される方法により調べたときに、参照抗ＨＡ抗体分子、例えば、Ａｂ ６７－１１、ＦＩ６、ＦＩ２８、Ｃ１７９、Ｆ１０、ＣＲ９１１４、またはＣＲ６２６１よりもエスケープ変異体の産生が少ない。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号１６１の配列、あるいは配列番号１６１と１、２、３、４、５、６、８、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６以下、例えば、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列を含む重鎖免疫グロブリン可変領域；および（ｂ）配列番号６２の配列、あるいは配列番号６２と１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列を含む軽鎖免疫グロブリン可変ドメインの一方または両方を含む。
ある実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変領域における１、２、３、４、５、６、８、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６アミノ酸差異、例えば、保存的アミノ酸差異は、重鎖免疫グロブリン可変ドメインのＦＲ領域にある。別の実施形態では、軽鎖免疫グロブリン可変ドメインにおける１、２、３、４または５アミノ酸差異、例えば、保存的アミノ酸差異は、軽鎖免疫グロブリン可変ドメインのＦＲ領域にある。ある実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変領域における、または軽鎖免疫グロブリン可変領域におけるアミノ酸差異は、保存的アミノ酸変化である。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）本明細書に開示される重鎖コンセンサス配列由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）、例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは個別にもしくは集合的に、本明細書に開示される重鎖可変領域コンセンサス配列と１、２、３、４または５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列；およびｂ）本明細書に開示される軽鎖コンセンサス配列由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）、例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは個別にもしくは集合的に、本明細書に開示される軽鎖可変領域コンセンサスと１、２、３、４または５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、例えば、変異解析または結晶構造解析により決定して、本明細書で開示される抗体のエピトープ、例えば、本明細書で開示される抗体のものと重複するかまたはそれと同じエピトープに結合する。
ある実施形態では、抗体分子は、基質、例えば、ＨＡへの結合について、参照抗体分子、例えば、本明細書で記載される抗体分子と競合する。
ＨＡは、群１株、例えば、ＨＡ１またはＨＡ５由来、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、もしくはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５もしくはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４由来でありうる。同じエピトープまたはその部分への結合は、ａ）変異解析（例えば、ＨＡへの結合、またはＨＡに対する結合アフィニティーは、残基が変異している場合に低下または消失する）；ｂ）例えば、それぞれの接点を決定するための、抗体分子およびＨＡの結晶構造ならびに参照抗体およびＨＡの結晶構造の解析、例えば、比較；ｃ）ＨＡ、例えば、ＨＡ１またはＨＡ５、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、もしくはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５もしくはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４由来のものへの結合についての、２つの抗体の競合；あるいはｄ）（ｃ）ならびに（ａ）および（ｂ）の一方または両方のうちの１つまたは複数によって示されうる。
抗体分子と参照抗体分子との間の競合は、抗体分子または参照抗体分子の、基質、例えば、ＨＡ、例えば、ＨＡ１またはＨＡ５、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、もしくはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５もしくはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４由来のものへの他方の結合を低下させる能力を評価することによって、決定することができる。結合する能力の低減は、当技術分野における方法によって評価することができる。結合する能力の低減は、例えば、ａ）ＢＩＡｃｏｒｅ解析、ｂ）ＥＬＩＳＡアッセイ、またはｃ）フローサイトメトリーのうちの１つまたは複数によって評価することができる。抗体分子は、参照抗体の結合が５０％またはこれを超えて低下するように参照抗体と競合しうる。
ある実施形態では、抗体分子は、参照抗体分子が結合するものと同じエピトープまたはその部分に結合する。ある実施形態では、抗体分子は、参照抗体分子が結合するものと同じエピトープまたはその部分に結合しない。
ある実施形態では、抗体分子は、Ａｂ ０４４の構造的特性または機能的特性を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、基質、例えば、ＨＡへの結合について、参照抗体分子、例えば、本明細書に記載の抗体分子と競合する。参照抗体分子は、ａ）ｉ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびにｉｉ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｄ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１４５）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントを含む抗体分子；ｂ）（ｉ）配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｉｉ）配列番号５２を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む抗体分子；あるいはｃ）Ａｂ ０４４であり得る。
ある実施形態では、抗体分子は、参照抗体分子、例えば、本明細書に開示される抗体分子と、ＨＡ上の同じエピトープまたはその部分に結合する。参照抗体分子は、ａ）ｉ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびにｉｉ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｄ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１４５）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントを含む抗体分子；ｂ）（ｉ）配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｉｉ）配列番号５２を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む抗体分子；あるいはｃ）Ａｂ ０４４であり得る。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号５２と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号５２と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含み、ここで、各ＨＣ ＣＤＲは配列番号２５の対応するＣＤＲと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、１または２の、例えば、保存的アミノ酸が異なり、各ＬＣ ＣＤＲは配列番号５２の対応するＣＤＲと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、１または２の、例えば、保存的アミノ酸が異なる。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８、もしくは９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号５２と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８、もしくは９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含み、抗体分子は、（ｉ）ＨＣ ＣＤＲ１における第１位のＳおよび第３位のＡを含むＨＣ ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＨＣ ＣＤＲ２における第２位のＶ、または第７位のＮおよび第１６位のＱのうちの一方または両方、例えば、一方を含むＨＣ ＣＤＲ２；（ｉｉｉ）第３位のＲ（および任意選択で第３位のＬ）を含むＨＣ ＣＤＲ３；（ｉｖ）ＬＣ ＣＤＲ１における第３位のＩ、または第６位のＤのうちの一方または両方、例えば、一方を含むＬＣ ＣＤＲ１；（ｖ）ＬＣ ＣＤＲ２における第２位のＧ、第４位のＹ、または第５位のＬのうちの１つ、２つ、または３つ、例えば、１つを含むＬＣ ＣＤＲ２；（ｖｉ）ＬＣ ＣＤＲ３における第９位のＳを含むＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または全てを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号２５（あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列番号５２（あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含む軽鎖可変領域セグメントを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｄ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１４５）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）Ａｂ ０４４のＬＣ ＣＤＲ１～３と集合的に１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０以下、例えば、１、２、３または４のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なるＬＣ ＣＤＲ１－３；およびｂ）Ａｂ ０４４のＨＣ ＣＤＲ１～３と集合的に１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０以下、例えば、１、２、３または４のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なるＨＣ ＣＤＲ１～３の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列番号５２を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列
Figure 0007104629000001
 （配列番号６８）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは２つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000002
 の両方が未変化であることを条件として、配列番号６８と１、２、もしくは３以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列
Figure 0007104629000003
 （配列番号６９）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000004
 が未変化であることを条件として、配列番号６９と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列
Figure 0007104629000005
 （配列番号７０）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000006
 が未変化であることを条件として、配列番号７０と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントと、（ｂ）配列
Figure 0007104629000007
 （配列番号１４５）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは２つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000008
 が未変化であることを条件として、配列番号１４５と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列
Figure 0007104629000009
 （配列番号７２）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000010
 のうちの１つ、２つ、もしくは全てが未変化であることを条件として、配列番号７２と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列
Figure 0007104629000011
 （配列番号７３）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは両方が未変化である、例えば、
Figure 0007104629000012
 が未変化であることを条件として、配列番号７３と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントとの、一方または両方を含む。ある実施形態では、軽鎖または重鎖のＣＤＲは、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む（例えば、そのＣＤＲ内の他の残基は変化していてもよいが、強調された残基または残基の組合せは未変化である）。例えば、ある実施形態では、重鎖ＣＤＲ２に関して、
Figure 0007104629000013
 が未変化である。
ある実施形態では、軽鎖のＣＤＲおよび重鎖のＣＤＲはそれぞれ、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、抗体分子における２つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、両方とも軽鎖にある。ある実施形態では、両方とも重鎖にある。ある実施形態では、重鎖における３つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、軽鎖における３つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖および軽鎖における６つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、以下の特性：（ａ）ＨＣ ＣＤＲ１内の
Figure 0007104629000014
 の両方が未変化である；（ｂ）ＨＣ ＣＤＲ２内の
Figure 0007104629000015
 が未変化である；（ｃ）ＨＣ ＣＤＲ３内の
Figure 0007104629000016
 が未変化である；（ｄ）ＬＣ ＣＤＲ１内の
Figure 0007104629000017
 の一方または両方が未変化である；（ｅ）ＬＣ ＣＤＲ２内の
Figure 0007104629000018
 のうちの１つ、２つ、または３つが未変化である；または（ｆ）ＬＣ ＣＤＲ３内の
Figure 0007104629000019
 が未変化である、のうちの１つまたは複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、または全て）を含む。ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）～（ｆ）から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つ全ての特性を含む。ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）から選択される１つまたは複数の特性を有する重鎖、ならびに（ｄ）、（ｅ）、および（ｆ）から選択される１つまたは複数の特性を有する軽鎖を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびに（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｄ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１４５）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）配列番号２５由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）を含み、例えば、抗体分子は、配列番号２５由来のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは個別にもしくは集合的に、１、２、３、４もしくは５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列を含む；およびｂ）配列番号５２由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）の一方または両方を含む。例えば、抗体分子は、配列番号５２由来のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは個別にもしくは集合的に、１、２、３、４もしくは５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列
Figure 0007104629000020
 （配列番号７４）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000021
 が未変化であることを条件として、配列番号７４と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ１；配列
Figure 0007104629000022
 （配列番号７５）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000023
 が未変化であるか、または変化している場合はＲ以外であることを条件として、配列番号７５と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ２；配列
Figure 0007104629000024
 （配列番号７６）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000025
 のうちの１つ、２つ、もしくは３つが未変化であるか、または
Figure 0007104629000026
 が変化している場合はそれがＧ以外であり、
Figure 0007104629000027
 が変化している場合はそれがＰ以外であり、または
Figure 0007104629000028
 が変化している場合はそれがＡ以外であることを条件として、配列番号７６と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ３；および、配列Ｗ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｔ－Ｌ－Ｔ－Ｖ－Ｓ－Ｓ（配列番号７７）（または、配列番号７７と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）またはＷ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｔ－Ｖ－Ｔ－Ｖ－Ｓ－Ｓ（配列番号１７１）（または、配列番号１７１と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ４のうちの１つまたは複数または全てをさらに含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントと、（ｂ）配列
Figure 0007104629000029
 （配列番号７８）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000030
 が未変化であることを条件として、配列番号７８と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ１；配列Ｗ－Ｙ－Ｑ－Ｑ－Ｋ－Ｐ－Ｇ－Ｋ－Ａ－Ｐ－Ｋ－Ｌ－Ｌ－Ｉ－Ｙ（配列番号７９）（または、配列番号７９と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ２；配列
Figure 0007104629000031
 （配列番号８０）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000032
 が未変化であるか、または変化している場合はＰ以外であることを条件として、配列番号８０と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ３；および、配列Ｆ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｋ－Ｖ－Ｅ－Ｉ－Ｋ（配列番号８１）（または、配列番号８１と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ４のうちの１つまたは複数または全てを含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントとを含む。ある実施形態では、軽鎖または重鎖のＦＲは、そのＦＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む（例えば、そのＦＲ内の他の残基は変化していてもよいが、強調された残基または残基の組合せは未変化である）。例えば、ある実施形態では、重鎖ＦＲ３に関して、
Figure 0007104629000033
 のうちの１つ、２つ、または３つが未変化である。
ある実施形態では、軽鎖のＦＲおよび重鎖のＦＲはそれぞれ、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、抗体分子における２つのＦＲが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、両方とも軽鎖にある。ある実施形態では、両方とも重鎖にある。ある実施形態では、重鎖におけるＦＲ２およびＦＲ３のぞれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖および軽鎖におけるＦＲ１およびＦＲ２のぞれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖ＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。ある実施形態では、軽鎖ＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。ある実施形態では、重鎖および軽鎖両方のＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。
ある実施形態では、重鎖可変領域セグメントのＦＲ１の配列は、
Figure 0007104629000034
 （配列番号７４）である。ある実施形態では、重鎖可変領域セグメントのＦＲ１の配列は、
Figure 0007104629000035
 （配列番号１８３）である。
別の実施形態では、抗体分子は、Ａｂ ０６９の構造的特性または機能的特性を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、基質、例えば、ＨＡへの結合について、参照抗体分子、例えば、本明細書に記載の抗体分子と競合する。参照抗体分子は、ａ）ｉ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびにｉｉ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｅ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１７２）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントを含む抗体分子；ｂ）（ｉ）配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｉｉ）配列番号１５５を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む抗体分子；あるいはｃ）Ａｂ ０６９であり得る。
ある実施形態では、抗体分子は、参照抗体分子、例えば、本明細書に開示される抗体分子と、ＨＡ上の同じエピトープまたはその部分に結合する。参照抗体分子は、ａ）ｉ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびにｉｉ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｅ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１７２）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントを含む抗体分子；ｂ）（ｉ）配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｉｉ）配列番号１５５を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む抗体分子；あるいはｃ）Ａｂ ０６９であり得る。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号１５５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号１５５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含み、ここで、各ＨＣ ＣＤＲは配列番号２５の対応するＣＤＲと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、１または２の、例えば、保存的アミノ酸が異なり、各ＬＣ ＣＤＲは配列番号１５５の対応するＣＤＲと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、１または２の、例えば、保存的アミノ酸が異なる。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８、もしくは９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号１５５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８、もしくは９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含み、抗体分子は、（ｉ）ＨＣ ＣＤＲ１における第１位のＳおよび第３位のＡを含むＨＣ ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＨＣ ＣＤＲ２における第２位のＶ、または第７位のＮおよび第１６位のＱのうちの一方または両方、例えば、一方を含むＨＣ ＣＤＲ２；（ｉｉｉ）第３位のＲ（および任意選択で第３位のＬ）を含むＨＣ ＣＤＲ３；（ｉｖ）ＬＣ ＣＤＲ１における第３位のＩ、または第６位のＥのうちの一方または両方、例えば、一方を含むＬＣ ＣＤＲ１；（ｖ）ＬＣ ＣＤＲ２における第２位のＧ、第４位のＹ、または第５位のＬのうちの１つ、２つ、または３つ、例えば、１つを含むＬＣ ＣＤＲ２；（ｖｉ）ＬＣ ＣＤＲ３における第９位のＳを含むＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または全てを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号２５（あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列番号１５５（あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列番号１５５を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｅ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１７２）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）Ａｂ ０６９のＬＣ ＣＤＲ１～３と集合的に１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０以下、例えば、１、２、３または４のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なるＬＣ ＣＤＲ１－３；およびｂ）Ａｂ ０６９のＨＣ ＣＤＲ１～３と集合的に１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０以下、例えば、１、２、３または４のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なるＨＣ ＣＤＲ１～３の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列
Figure 0007104629000036
 （配列番号６８）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは２つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000037
 の両方が未変化であることを条件として、配列番号６８と１、２、もしくは３以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列
Figure 0007104629000038
 （配列番号６９）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000039
 が未変化であることを条件として、配列番号６９と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列
Figure 0007104629000040
 （配列番号７０）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000041
 が未変化であることを条件として、配列番号７０と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントと、（ｂ）配列
Figure 0007104629000042
 （配列番号１７２）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは２つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000043
 が未変化であることを条件として、配列番号１７２と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列
Figure 0007104629000044
 （配列番号７２）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000045
 のうちの１つ、２つ、もしくは全てが未変化であることを条件として、配列番号７２と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列
Figure 0007104629000046
 （配列番号７３）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは両方が未変化である、例えば、
Figure 0007104629000047
 が未変化であることを条件として、配列番号７３と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントとの、一方または両方を含む。
ある実施形態では、軽鎖または重鎖のＣＤＲは、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む（例えば、そのＣＤＲ内の他の残基は変化していてもよいが、強調された残基または残基の組合せは未変化である）。ある実施形態では、軽鎖のＣＤＲおよび重鎖のＣＤＲはそれぞれ、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、抗体分子における２つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、両方とも軽鎖にある。ある実施形態では、両方とも重鎖にある。ある実施形態では、重鎖における３つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、軽鎖における３つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖および軽鎖における６つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、以下の特性：（ａ）ＨＣ ＣＤＲ１内の
Figure 0007104629000048
 の両方が未変化である；（ｂ）ＨＣ ＣＤＲ２内の
Figure 0007104629000049
 が未変化である；（ｃ）ＨＣ ＣＤＲ３内の
Figure 0007104629000050
 が未変化である；（ｄ）ＬＣ ＣＤＲ１内の
Figure 0007104629000051
 の一方または両方が未変化である；（ｅ）ＬＣ ＣＤＲ２内の
Figure 0007104629000052
 のうちの１つ、２つ、または３つが未変化である；または（ｆ）ＬＣ ＣＤＲ３内の
Figure 0007104629000053
 が未変化である、のうちの１つまたは複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、または全て）を含む。ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）～（ｆ）から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つ全ての特性を含む。ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）から選択される１つまたは複数の特性を有する重鎖、ならびに（ｄ）、（ｅ）、および（ｆ）から選択される１つまたは複数の特性を有する軽鎖を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびに（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｅ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１７２）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）配列番号２５由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）、例えば、配列番号２５由来のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは個別にもしくは集合的に、１、２、３、４もしくは５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列；およびｂ）配列番号１５５由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）、例えば、配列番号１５５由来のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは個別にもしくは集合的に、１、２、３、４もしくは５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列
Figure 0007104629000054
 （配列番号７４）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000055
 が未変化であることを条件として、配列番号７４と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ１；配列
Figure 0007104629000056
 （配列番号７５）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000057
 が未変化であるか、または変化している場合はＲ以外であることを条件として、配列番号７５と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ２；配列
Figure 0007104629000058
 （配列番号７６）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000059
 のうちの１つ、２つ、もしくは３つが未変化であるか、または
Figure 0007104629000060
 が変化している場合はそれがＧ以外であり、
Figure 0007104629000061
 が変化している場合はそれがＰ以外であり、または
Figure 0007104629000062
 が変化している場合はそれがＡ以外であることを条件として、配列番号７６と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ３のうちの１つまたは複数または全てをさらに含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントと、（ｂ）配列
Figure 0007104629000063
 （配列番号７８）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000064
 が未変化であることを条件として、配列番号７８と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ１；配列Ｗ－Ｙ－Ｑ－Ｑ－Ｋ－Ｐ－Ｇ－Ｋ－Ａ－Ｐ－Ｋ－Ｌ－Ｌ－Ｉ－Ｙ（配列番号７９）（または、配列番号７９と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ２；配列
Figure 0007104629000065
 （配列番号８０）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000066
 が未変化であるか、または変化している場合はＰ以外であることを条件として、配列番号８０と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ３；および、配列Ｆ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｋ－Ｖ－Ｅ－Ｉ－Ｋ（配列番号８１）（または、配列番号８１と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ４のうちの１つまたは複数または全てを含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントとを含む。
ある実施形態では、軽鎖または重鎖のＦＲは、そのＦＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む（例えば、そのＦＲ内の他の残基は変化していてもよいが、強調された残基または残基の組合せは未変化である）。例えば、ある実施形態では、重鎖ＦＲ３に関して、
Figure 0007104629000067
 のうちの１つ、２つ、または３つが未変化である。
ある実施形態では、軽鎖のＦＲおよび重鎖のＦＲはそれぞれ、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、抗体分子における２つのＦＲが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、両方とも軽鎖にある。ある実施形態では、両方とも重鎖にある。ある実施形態では、重鎖におけるＦＲ２およびＦＲ３のぞれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖および軽鎖におけるＦＲ１およびＦＲ２のぞれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖ＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。ある実施形態では、軽鎖ＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。ある実施形態では、重鎖および軽鎖両方のＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。
別の実施形態では、抗体分子は、Ａｂ ０３２の構造的特性または機能的特性を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、基質、例えば、ＨＡへの結合について、参照抗体分子、例えば、本明細書に記載の抗体分子と競合する。参照抗体分子は、ａ）ｉ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびにｉｉ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号７１）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントを含む抗体分子；ｂ）（ｉ）配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｉｉ）配列番号４５を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む抗体分子；あるいはｃ）Ａｂ ０３２であり得る。
ある実施形態では、抗体分子は、参照抗体分子、例えば、本明細書に開示される抗体分子と、ＨＡ上の同じエピトープまたはその部分に結合する。参照抗体分子は、ａ）ｉ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびにｉｉ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号７１）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントを含む抗体分子；ｂ）（ｉ）配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｉｉ）配列番号４５を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む抗体分子；あるいはｃ）Ａｂ ０３２であり得る。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；または配列番号４５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号４５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含み、ここで、各ＨＣ ＣＤＲは配列番号２５の対応するＣＤＲと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、１または２の、例えば、保存的アミノ酸が異なり、各ＬＣ ＣＤＲは配列番号４５の対応するＣＤＲと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、１または２の、例えば、保存的アミノ酸が異なる。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８、もしくは９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号４５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８、もしくは９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含み、抗体分子は、（ｉ）ＨＣ ＣＤＲ１における第１位のＳおよび第３位のＡを含むＨＣ ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＨＣ ＣＤＲ２における第２位のＶ、または第７位のＮおよび第１６位のＱのうちの一方または両方、例えば、一方を含むＨＣ ＣＤＲ２；（ｉｉｉ）第３位のＲ（および任意選択で第３位のＬ）を含むＨＣ ＣＤＲ３；（ｉｖ）第３位のＩを含むＬＣ ＣＤＲ１；（ｖ）ＬＣ ＣＤＲ２における第２位のＧ、第４位のＹ、または第５位のＬのうちの１つ、２つ、または３つ、例えば、１つを含むＬＣ ＣＤＲ２；（ｖｉ）ＬＣ ＣＤＲ３における第９位のＳを含むＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または全てを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号２５（あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列番号１５５（あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列番号１５５を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号７１）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）Ａｂ ０３２のＬＣ ＣＤＲ１～３と集合的に１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０以下、例えば、１、２、３または４のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なるＬＣ ＣＤＲ１－３；およびｂ）Ａｂ ０３２のＨＣ ＣＤＲ１～３と集合的に１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０以下、例えば、１、２、３または４のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なるＨＣ ＣＤＲ１～３の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列
Figure 0007104629000068
 （配列番号６８）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは２つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000069
 の両方が未変化であることを条件として、配列番号６８と１、２、もしくは３以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列
Figure 0007104629000070
 （配列番号６９）（または、例えば、強調された残基のうちの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000071
 が未変化であることを条件として、配列番号６９と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列
Figure 0007104629000072
 （配列番号７０）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000073
 が未変化であることを条件として、配列番号７０と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントと、（ｂ）配列
Figure 0007104629000074
 （配列番号７１）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは２つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000075
 が未変化であることを条件として、配列番号７１と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列
Figure 0007104629000076
 （配列番号７２）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000077
 のうちの１つ、２つ、もしくは全てが未変化であることを条件として、配列番号７２と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列
Figure 0007104629000078
 （配列番号７３）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは両方が未変化である、例えば、
Figure 0007104629000079
 が未変化であることを条件として、配列番号７３と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントとの、一方または両方を含む。
ある実施形態では、軽鎖または重鎖のＣＤＲは、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む（例えば、そのＣＤＲ内の他の残基は変化していてもよいが、強調された残基または残基の組合せは未変化である）。ある実施形態では、軽鎖のＣＤＲおよび重鎖のＣＤＲはそれぞれ、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、抗体分子における２つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、両方とも軽鎖にある。ある実施形態では、両方とも重鎖にある。ある実施形態では、重鎖における３つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、軽鎖における３つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖および軽鎖における６つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、以下の特性：（ａ）ＨＣ ＣＤＲ１内の
Figure 0007104629000080
 の両方が未変化である；（ｂ）ＨＣ ＣＤＲ２内の
Figure 0007104629000081
 が未変化である；（ｃ）ＨＣ ＣＤＲ３内の
Figure 0007104629000082
 が未変化である；（ｄ）ＬＣ ＣＤＲ１内の
Figure 0007104629000083
 が未変化である；（ｅ）ＬＣ ＣＤＲ２内の
Figure 0007104629000084
 のうちの１つ、２つ、または３つが未変化である；または（ｆ）ＬＣ ＣＤＲ３内の
Figure 0007104629000085
 が未変化である、のうちの１つまたは複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、または全て）を含む。ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）～（ｆ）から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つ全ての特性を含む。ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）から選択される１つまたは複数の特性を有する重鎖、ならびに（ｄ）、（ｅ）、および（ｆ）から選択される１つまたは複数の特性を有する軽鎖を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびに（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号７１）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）配列番号２５由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）を含み、例えば、抗体分子は、配列番号２５由来のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは個別にもしくは集合的に、１、２、３、４もしくは５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列を含む；およびｂ）配列番号４５由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）の一方または両方を含む。例えば、抗体分子は、配列番号４５由来のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは個別にもしくは集合的に、１、２、３、４もしくは５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列
Figure 0007104629000086
 （配列番号７４）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000087
 が未変化であることを条件として、配列番号７４と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ１；配列
Figure 0007104629000088
 （配列番号７５）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000089
 が未変化であるか、または変化している場合はＲ以外であることを条件として、配列番号７５と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ２；配列
Figure 0007104629000090
 （配列番号７６）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000091
 のうちの１つ、２つ、もしくは３つが未変化であるか、または
Figure 0007104629000092
 が変化している場合はそれがＧ以外であり、
Figure 0007104629000093
 が変化している場合はそれがＰ以外であり、または
Figure 0007104629000094
 が変化している場合はそれがＡ以外であることを条件として、配列番号７６と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ３；および、配列Ｗ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｔ－Ｌ－Ｔ－Ｖ－Ｓ－Ｓ（配列番号７７）（または、配列番号７７と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）またはＷ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｔ－Ｖ－Ｔ－Ｖ－Ｓ－Ｓ（配列番号１７１）（または、配列番号１７１と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ４のうちの１つまたは複数または全てをさらに含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントと、（ｂ）配列
Figure 0007104629000095
 （配列番号７８）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000096
 が未変化であることを条件として、配列番号７８と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ１；配列Ｗ－Ｙ－Ｑ－Ｑ－Ｋ－Ｐ－Ｇ－Ｋ－Ａ－Ｐ－Ｋ－Ｌ－Ｌ－Ｉ－Ｙ（配列番号７９）（または、配列番号７９と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ２；配列
Figure 0007104629000097
 （配列番号８０）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000098
 が未変化であるか、または変化している場合はＰ以外であることを条件として、配列番号８０と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ３；および、配列Ｆ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｋ－Ｖ－Ｅ－Ｉ－Ｋ（配列番号８１）（または、配列番号８１と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ４のうちの１つまたは複数または全てを含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントとを含む。
ある実施形態では、軽鎖または重鎖のＦＲは、そのＦＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む（例えば、そのＦＲ内の他の残基は変化していてもよいが、強調された残基または残基の組合せは未変化である）。例えば、ある実施形態では、重鎖ＦＲ３に関して、
Figure 0007104629000099
 のうちの１つ、２つ、または３つが未変化である。
ある実施形態では、軽鎖のＦＲおよび重鎖のＦＲはそれぞれ、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、抗体分子における２つのＦＲが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、両方とも軽鎖にある。ある実施形態では、両方とも重鎖にある。ある実施形態では、重鎖におけるＦＲ２およびＦＲ３のぞれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖および軽鎖におけるＦＲ１およびＦＲ２のぞれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖ＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。ある実施形態では、軽鎖ＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。ある実施形態では、重鎖および軽鎖両方のＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。
別の実施形態では、抗体分子は、Ａｂ ０３１の構造的特性または機能的特性を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、基質、例えば、ＨＡへの結合について、参照抗体分子、例えば、本明細書に記載の抗体分子と競合する。参照抗体分子は、ａ）ｉ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびにｉｉ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号７１）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントを含む抗体分子；ｂ）（ｉ）配列番号２４を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｉｉ）配列番号４５を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む抗体分子；あるいはｃ）Ａｂ ０３１であり得る。
ある実施形態では、抗体分子は、参照抗体分子、例えば、本明細書に開示される抗体分子と、ＨＡ上の同じエピトープまたはその部分に結合する。参照抗体分子は、ａ）ｉ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびにｉｉ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号７１）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントを含む抗体分子；ｂ）（ｉ）配列番号２４を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｉｉ）配列番号４５を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む抗体分子；あるいはｃ）Ａｂ ０３１であり得る。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２４と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号４５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２４と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号４５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含み、ここで、任意選択で、各ＨＣ ＣＤＲは配列番号２４の対応するＣＤＲと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、１または２の、例えば、保存的アミノ酸が異なり、各ＬＣ ＣＤＲは配列番号４５の対応するＣＤＲと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、１または２の、例えば、保存的アミノ酸が異なる。
ある実施形態では、抗体分子は、配列番号２５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８、もしくは９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および配列番号４５と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８、もしくは９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含み、抗体分子は、（ｉ）ＨＣ ＣＤＲ１における第１位のＳおよび第３位のＡを含むＨＣ ＣＤＲ１；（ｉｉ）ＨＣ ＣＤＲ２における第２位のＶ、または第７位のＮおよび第１６位のＱのうちの一方または両方、例えば、一方を含むＨＣ ＣＤＲ２；（ｉｉｉ）第３位のＲ（および任意選択で第３位のＬ）を含むＨＣ ＣＤＲ３；（ｉｖ）第３位のＩを含むＬＣ ＣＤＲ１；（ｖ）ＬＣ ＣＤＲ２における第２位のＧ、第４位のＹ、または第５位のＬのうちの１つ、２つ、または３つ、例えば、１つを含むＬＣ ＣＤＲ２；（ｖｉ）ＬＣ ＣＤＲ３における第９位のＳを含むＬＣ ＣＤＲ３のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または全てを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号２４（あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列番号４５（あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含む軽鎖可変領域セグメントを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号２４を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列番号４５を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号７１）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）（あるいはそれと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）Ａｂ ０３１のＬＣ ＣＤＲ１～３と集合的に１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０以下、例えば、１、２、３または４のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なるＬＣ ＣＤＲ１－３；およびｂ）Ａｂ ０３１のＨＣ ＣＤＲ１～３と集合的に１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０以下、例えば、１、２、３または４のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なるＨＣ ＣＤＲ１～３の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列
Figure 0007104629000100
 （配列番号６８）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは２つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000101
 の両方が未変化であることを条件として、配列番号６８と１、２、もしくは３以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列
Figure 0007104629000102
 （配列番号６９）（または、例えば、強調された残基のうちの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000103
 が未変化であることを条件として、配列番号６９と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列
Figure 0007104629000104
 （配列番号７０）（または、任意選択で、例えば、
Figure 0007104629000105
 が未変化であることを条件として、配列番号７０と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントと、（ｂ）配列
Figure 0007104629000106
 （配列番号７１）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは２つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000107
 が未変化であることを条件として、配列番号７１と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ１；配列
Figure 0007104629000108
 （配列番号７２）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つ、２つ、もしくは３つが未変化である、例えば、
Figure 0007104629000109
 のうちの１つ、２つ、もしくは全てが未変化であることを条件として、配列番号７２と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ２；配列
Figure 0007104629000110
 （配列番号７３）（または、任意選択で、強調された残基のうちの少なくとも１つもしくは両方が未変化である、例えば、
Figure 0007104629000111
 が未変化であることを条件として、配列番号７３と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメントとの、一方または両方を含む。
ある実施形態では、軽鎖または重鎖のＣＤＲは、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む（例えば、そのＣＤＲ内の他の残基は変化していてもよいが、強調された残基または残基の組合せは未変化である）。ある実施形態では、軽鎖のＣＤＲおよび重鎖のＣＤＲはそれぞれ、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、抗体分子における２つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、両方とも軽鎖にある。ある実施形態では、両方とも重鎖にある。ある実施形態では、重鎖における３つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、軽鎖における３つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖および軽鎖における６つのＣＤＲのそれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。
ある実施形態では、抗体分子は、以下の特性：（ａ）ＨＣ ＣＤＲ１内の
Figure 0007104629000112
 の両方が未変化である；（ｂ）ＨＣ ＣＤＲ２内の
Figure 0007104629000113
 が未変化である；（ｃ）ＨＣ ＣＤＲ３内の
Figure 0007104629000114
 が未変化である；（ｄ）ＬＣ ＣＤＲ１内の
Figure 0007104629000115
 が未変化である；（ｅ）ＬＣ ＣＤＲ２内の
Figure 0007104629000116
 のうちの１つ、２つ、または３つが未変化である；（ｆ）ＬＣ ＣＤＲ３内の
Figure 0007104629000117
 が未変化である、のうちの１つまたは複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、または全て）を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）～（ｆ）から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つ全ての特性を含む。ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）から選択される１つまたは複数の特性を有する重鎖、ならびに（ｄ）、（ｅ）、および（ｆ）から選択される１つまたは複数の特性を有する軽鎖を含む。この実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびに（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号７１）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域セグメント、の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）配列番号２４由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）を含み、例えば、抗体分子は、配列番号２４由来のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは個別にもしくは集合的に、１、２、３、４もしくは５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列を含む；およびｂ）配列番号４５由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）の一方または両方を含む。例えば、抗体分子は、配列番号４５由来のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３またはＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全て、あるいは個別にもしくは集合的に、１、２、３、４もしくは５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列
Figure 0007104629000118
 （配列番号８２）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000119
 が未変化であることを条件として、配列番号８２と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ１；配列
Figure 0007104629000120
 （配列番号７５）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000121
 が未変化であるか、または変化している場合はＲ以外であることを条件として、配列番号７５と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ２；配列
Figure 0007104629000122
 （配列番号７６）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000123
 のうちの１つ、２つ、もしくは３つが未変化であるか、または
Figure 0007104629000124
 が変化している場合はそれがＧ以外であり、
Figure 0007104629000125
 が変化している場合はそれがＰ以外であり、または
Figure 0007104629000126
 が変化している場合はそれがＡ以外であることを条件として、配列番号７６と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ３；および、配列Ｗ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｔ－Ｌ－Ｔ－Ｖ－Ｓ－Ｓ（配列番号７７）（または、配列番号７７と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）またはＷ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｔ－Ｖ－Ｔ－Ｖ－Ｓ－Ｓ（配列番号１７１）（または、配列番号１７１と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ４のうちの１つまたは複数または全てをさらに含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントと、（ａ）配列
Figure 0007104629000127
 （配列番号７８）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000128
 が未変化であることを条件として、配列番号７８と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ１；配列Ｗ－Ｙ－Ｑ－Ｑ－Ｋ－Ｐ－Ｇ－Ｋ－Ａ－Ｐ－Ｋ－Ｌ－Ｌ－Ｉ－Ｙ（配列番号７９）（または、配列番号７９と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ２；配列
Figure 0007104629000129
 （配列番号８０）（または、任意選択で、
Figure 0007104629000130
 が未変化であるか、または変化している場合はＰ以外であることを条件として、配列番号８０と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ３；および、配列Ｆ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｋ－Ｖ－Ｅ－Ｉ－Ｋ（配列番号８１）（または、配列番号８１と１、２、３、４、もしくは５以下、例えば、１もしくは２以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含むＦＲ４のうちの１つまたは複数または全てをさらに含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントとを含む。
ある実施形態では、軽鎖または重鎖のＦＲは、そのＦＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む（例えば、そのＦＲ内の他の残基は変化していてもよいが、強調された残基または残基の組合せは未変化である）。例えば、ある実施形態では、重鎖ＦＲ３に関して、
Figure 0007104629000131
 のうちの１つ、２つ、または３つが未変化である。
ある実施形態では、軽鎖のＦＲおよび重鎖のＦＲはそれぞれ、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、抗体分子における２つのＦＲが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、両方とも軽鎖にある。ある実施形態では、両方とも重鎖にある。ある実施形態では、重鎖におけるＦＲ２およびＦＲ３のぞれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つ、または強調された残基の組合せのうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖および軽鎖におけるＦＲ１およびＦＲ２のぞれぞれが、そのＣＤＲに関して、強調された残基のうちの１つを含む。ある実施形態では、重鎖ＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。ある実施形態では、軽鎖ＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。ある実施形態では、重鎖および軽鎖両方のＦＲ１～４中の強調された残基の全てが未変化である。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列
Figure 0007104629000132
 （配列番号８２）を含むＦＲ１；配列Ｗ－Ｖ－Ｒ－Ｑ－Ｐ－Ｐ－Ｇ－Ｋ－Ｇ－Ｌ－Ｅ－Ｗ－Ｖ－Ａ（配列番号７５）を含むＦＲ２；配列Ｒ－Ｆ－Ｔ－Ｉ－Ｓ－Ｒ－Ｄ－Ｎ－Ｓ－Ｋ－Ｎ－Ｔ－Ｌ－Ｙ－Ｌ－Ｑ－Ｍ－Ｎ－Ｓ－Ｌ－Ｒ－Ａ－Ｅ－Ｄ－Ｔ－Ａ－Ｖ－Ｙ－Ｙ－Ｃ－Ａ－Ｋ（配列番号７６）を含むＦＲ３；および配列Ｗ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｔ－Ｌ－Ｔ－Ｖ－Ｓ－Ｓ（配列番号７７）またはＷ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｔ－Ｖ－Ｔ－Ｖ－Ｓ－Ｓ（配列番号１７１）を含むＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全てを含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびに（ｂ）配列
Figure 0007104629000133
 （配列番号７８）を含むＦＲ１；配列Ｗ－Ｙ－Ｑ－Ｑ－Ｋ－Ｐ－Ｇ－Ｋ－Ａ－Ｐ－Ｋ－Ｌ－Ｌ－Ｉ－Ｙ（配列番号７９）を含むＦＲ２；配列Ｇ－Ｖ－Ｐ－Ｓ－Ｒ－Ｆ－Ｓ－Ｇ－Ｓ－Ｇ－Ｓ－Ｇ－Ｔ－Ｄ－Ｆ－Ｔ－Ｌ－Ｔ－Ｉ－Ｓ－Ｓ－Ｌ－Ｑ－Ｐ－Ｅ－Ｄ－Ｆ－Ａ－Ｔ－Ｙ－Ｙ－Ｃ（配列番号８０）を含むＦＲ３；および配列Ｆ－Ｇ－Ｑ－Ｇ－Ｔ－Ｋ－Ｖ－Ｅ－Ｉ－Ｋ（配列番号８１）を含むＦＲ４のうちの１つまたはそれより多くまたは全てを含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。
別の実施形態では、抗体分子は、（ａ）配列番号２４（あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）配列番号４５（あるいはそれと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なる配列）を含む軽鎖可変領域セグメントを含む。
別の実施形態では、抗体分子は、一方または両方本明細書に開示される重鎖可変領域および軽鎖可変領域の構造的特性または機能的特性を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、基質、例えば、ＨＡへの結合に関して、参照抗体分子、例えば、本明細書に記載の抗体分子と競合する。参照抗体分子は、ａ）表３、表４Ａ、表４Ｂ、図２、図５または図７からの重鎖可変領域；および表３、表４Ａ、表４Ｂ、図３Ａ～３Ｂ、図６Ａ～６Ｂまたは図７からの軽鎖可変領域由来の重鎖および軽鎖ＣＤＲを含む抗体分子；ｂ）（ｉ）表３、表４Ａ、表４Ｂ、図２、図５または図７からの重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｉｉ）表３、表４Ａ、表４Ｂ、図３Ａ～３Ｂ、図６Ａ～６Ｂまたは図７からの軽鎖可変領域セグメントを含む抗体分子；あるいはｃ）本明細書に開示される抗体であり得る。
ある実施形態では、抗体分子は、参照抗体分子、例えば、本明細書に開示される抗体分子と、ＨＡ上の同じエピトープまたはその部分に結合する。参照抗体分子は、ａ）表３、表４Ａ、表４Ｂ、図２、図５または図７からの重鎖可変領域；および表３、表４Ａ、表４Ｂ、図３Ａ～３Ｂ、図６Ａ～６Ｂまたは図７からの軽鎖可変領域由来の重鎖および軽鎖ＣＤＲを含む抗体分子；ｂ）（ｉ）表３、表４Ａ、表４Ｂ、図２、図５または図７からの重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｉｉ）表３、表４Ａ、表４Ｂ、図３Ａ～３Ｂ、図６Ａ～６Ｂまたは図７からの軽鎖可変領域セグメントを含む抗体分子；あるいはｃ）本明細書に開示される抗体であり得る。
ある実施形態では、抗体分子は、表３、表４Ａ、表４Ｂ、図２、図５または図７からの参照重鎖と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域；および表３、表４Ａ、表４Ｂ、図３Ａ～３Ｂ、図６Ａ～６Ｂまたは図７からの参照軽鎖と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域の一方または両方を含み、ここで、任意選択で、各ＨＣ ＣＤＲはその参照重鎖由来の対応するＨＣ ＣＤＲと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、１または２の、例えば、保存的アミノ酸が異なり、各ＬＣ ＣＤＲはその参照軽鎖由来の対応するＣＤＲと１、２、３、４または５以下のアミノ酸、例えば、１または２の、例えば、保存的アミノ酸が異なる。
ある実施形態では、抗体分子は、表３からの重鎖と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域および表３からの対応する軽鎖と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、表４Ａからの重鎖と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域、および表４Ａからの対応する軽鎖と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、表４Ｂからの重鎖と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む重鎖可変領域、および表４Ｂからの対応する軽鎖と少なくとも６０、７０、８０、８５、９０、９５、９８または９９パーセントの相同性を含む軽鎖可変領域を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、表３、表４Ａ、表４Ｂ、図２、図５または図７からの重鎖可変領域；および表３、表４Ａ、表４Ｂ、図３Ａ～３Ｂ、図６Ａ～６Ｂまたは図７からの軽鎖可変領域の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、表３からの重鎖可変領域および表３からの対応する軽鎖；表４Ａからの重鎖および表４Ａからの対応する軽鎖；あるいは表４Ｂからの重鎖および表４Ｂからの対応する軽鎖を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）表３、表４Ａ、表４Ｂ、図２、図５または図７の重鎖配列由来のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３（あるいは個別にもしくは集合的に、それと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なるＣＤＲ）を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびに（ｂ）表３、表４Ａ、表４Ｂ、図３Ａ～３Ｂ、図６Ａ～６Ｂまたは図７の軽鎖配列由来のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３（あるいは個別にもしくは集合的に、それと１、２、３、４または５以下、例えば、１または２のアミノ酸、例えば、保存的アミノ酸が異なるＣＤＲ）を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、表３の重鎖由来のＣＤＲおよび表３からの対応する軽鎖由来の軽鎖ＣＤＲの一方または両方を含む。ある実施形態では、抗体分子は、表４Ａの重鎖由来のＣＤＲおよび表４Ａからの対応する軽鎖由来の軽鎖ＣＤＲの一方または両方を含む。ある実施形態では、抗体分子は、表４Ｂの重鎖由来のＣＤＲおよび表４Ｂからの対応する軽鎖由来の軽鎖ＣＤＲの一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）図２、図５または図７の重鎖配列由来のＣＤＲ１、ＣＤＲ２；およびＣＤＲ３を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびに（ｂ）図３Ａ～３Ｂ、図６Ａ～６Ｂまたは図７の軽鎖配列由来のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。ある実施形態では、抗体分子は、（ａ）図２または図７からの重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および（ｂ）図３Ａ～３Ｂまたは図７からの軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントの一方または両方を含む。
ある実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変領域は、Ｎ末端にイソロイシン－アスパラギン酸（Ｉｌｅ－Ａｓｐ）ジペプチドをさらに含む。別の実施形態では、軽鎖免疫グロブリン可変領域は、Ｎ末端にＩｌｅ－Ａｓｐジペプチドをさらに含む。さらに別の実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変領域および軽鎖免疫グロブリン可変領域の両方、または本開示で特色とされる抗体は、Ｎ末端にＩｌｅ－Ａｓｐジペプチドをさらに含む。他の実施形態では、Ｉｌｅ－Ａｓｐジペプチドは、重鎖および軽鎖の一方または両方に存在しない。
ある実施形態では、抗体分子は、ａ）本明細書で開示される重鎖由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）（例えば、抗体分子は、本明細書で開示される重鎖由来のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、もしくはＦＲ４、または、個別にもしくは集合的に、１、２、３、４、もしくは５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列のうちの１つまたは複数または全てを含む）；およびｂ）本明細書で開示される軽鎖由来の１つまたは複数のフレームワーク領域（ＦＲ）（例えば、抗体分子は、本明細書で開示される軽鎖由来のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、もしくはＦＲ４、または、個別にもしくは集合的に、１、２、３、４、もしくは５以下のアミノ酸残基、例えば、保存的残基が異なる配列のうちの１つまたは複数または全てを含む）の一方または両方を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、
（ａ）配列Ｇ－Ｆ－Ｔ－Ｆ－［Ｓ／Ｔ］－［Ｓ／Ｔ］－Ｙ－［Ａ／Ｇ］－Ｍ－Ｈ（配列番号１８４）、または配列番号１８４と１もしくは２以下の残基が異なる配列を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－［Ｉ／Ｖ／Ｌ］－Ｓ－［Ｙ／Ｆ］－Ｄ－Ｇ－［Ｓ／Ｎ］－［Ｙ／Ｎ］－［Ｋ／Ｒ］－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号２）または配列番号２と１もしくは２以下の残基が異なる配列を含むＣＤＲ２；あるいは配列Ｄ－［Ｓ／Ｔ］－［Ｒ／Ｋ／Ｑ］－Ｌ－Ｒ－［Ｓ／Ｔ］－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－［Ｑ／Ｓ］－Ｇ－［Ｙ／Ｌ／Ｖ］－［Ｆ／Ｌ］－［Ｎ／Ｄ］－［Ｐ／Ｙ］（配列番号３）、または配列番号３と１もしくは２以下の残基が異なる配列を含むＣＤＲ３のうちの１つまたはそれより多くまたは全てを含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；および
（ｂ）配列[Ｋ／Ｒ］－Ｓ－Ｓ－Ｑ－［Ｓ／Ｔ］－［Ｖ／Ｌ／Ｉ］－［Ｔ／Ｓ］－［Ｙ／Ｆ／Ｗ］－［Ｎ／Ｓ／Ｄ］－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１８５）または配列番号１８５と１もしくは２以下の残基が異なる配列を含むか、あるいは配列[Ｋ／Ｒ］－Ｓ－Ｓ－Ｑ－［Ｓ／Ｔ］－［Ｖ／Ｌ／Ｉ］－［Ｔ／Ｓ］－［Ｙ／Ｆ／Ｗ］－［Ｎ／Ｓ／Ｄ／Ｑ／Ｒ／Ｅ］－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１８６）または配列番号１８６と１もしくは２以下の残基が異なる配列、あるいは[Ｋ／Ｒ］－Ｓ－Ｓ－Ｑ－［Ｓ／Ｔ］－［Ｖ／Ｌ／Ｉ］－［Ｔ／Ｓ］－［Ｙ／Ｆ／Ｗ］－［Ｎ／Ｓ／Ｄ／Ｅ］－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１８５）または配列番号１８６と１もしくは２以下の残基が異なる配列を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－［Ａ／Ｇ］－Ｓ－［Ｔ／Ａ／Ｙ／Ｈ／Ｋ／Ｄ］－［Ｒ／Ｌ］－Ｅ－［Ｓ／Ｔ］（配列番号５）または配列番号５と１もしくは２以下の残基が異なる配列を含むＣＤＲ２；あるいは配列Ｑ－Ｑ－［Ｙ／Ｈ］－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－［Ｔ／Ｓ］（配列番号６）または配列番号６と１もしくは２以下の残基が異なる配列を含むＣＤＲ３のうちの１つまたはそれより多くまたは全てを含む軽鎖可変領域セグメント；
を含み、
任選択で、以下を条件とする、
軽鎖可変領域セグメントが、配列Ｋ－Ｓ－Ｓ－Ｑ－Ｓ－Ｖ－Ｔ－Ｙ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号８３）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ａ－Ｓ－Ｔ－Ｒ－Ｅ－Ｓ（配列番号８４）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｙ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｔ（配列番号８５）を含むＣＤＲ３を含む場合、
重鎖可変領域セグメントは、以下のもの：（ａ）以下のもの：配列Ｓ－Ｙ－Ｇ－Ｍ－Ｈ（配列番号８６）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｉ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号８７）を含むＣＤＲ２；または配列Ｄ－Ｓ－Ｅ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号８８）を含むＣＤＲ３以外のＣＤＲ；あるいは（ｂ）ＦＲは以下のもの以外であり：Ｅ－Ｖ－Ｑ－Ｌ－Ｌ－Ｅ－Ｓ－Ｇ－Ｇ－Ｇ－Ｌ－Ｖ－Ｋ－Ｐ－Ｇ－Ｑ－Ｓ－Ｌ－Ｋ－Ｌ－Ｓ－Ｃ－Ａ－Ａ－Ｓ－Ｇ－Ｆ－Ｔ－Ｆ－Ｔ（配列番号８２）以外のＦＲ１；Ｗ－Ｖ－Ｒ－Ｑ－Ｐ－Ｐ－Ｇ－Ｋ－Ｇ－Ｌ－Ｅ－Ｗ－Ｖ－Ａ（配列番号７５）以外のＦＲ２；Ｒ－Ｆ－Ｔ－Ｉ－Ｓ－Ｒ－Ｄ－Ｎ－Ｓ－Ｋ－Ｎ－Ｔ－Ｌ－Ｙ－Ｌ－Ｑ－Ｍ－Ｎ－Ｓ－Ｌ－Ｒ－Ａ－Ｅ－Ｄ－Ｔ－Ａ－Ｖ－Ｙ－Ｙ－Ｃ－Ａ－Ｋ（配列番号７６）以外のＦＲ３；またはＷ－Ｇ－Ａ－Ｇ－Ｔ－Ｔ－Ｌ－Ｔ－Ｖ－Ｓ－Ｓ（配列番号８９）以外のＦＲ４；（ｃ）配列番号１８４の５位のアミノ残基がＳである、配列番号１８４の６位のアミノ酸残基がＴである、または配列番号１８４の８位のアミノ酸残基がＡであるＣＤＲ１；（ｄ）配列番号２の２位のアミノ残基がＶもしくはＬである、４位のアミノ酸がＦである、７位のアミノ酸がＮである、８位のアミノ酸がＹである、または９位のアミノ酸がＲであるＣＤＲ２；（ｅ）配列番号３の２位のアミノ残基がＴである、配列番号３の３位のアミノ酸残基がＲ、ＫまたはＱである、配列番号３の６位のアミノ酸残基がＴである、配列番号３の１５位のアミノ酸残基がＳである、配列番号３の１７位のアミノ酸残基がＬまたはＶである、配列番号３の１８位のアミノ酸残基がＬである、配列番号３の１９位のアミノ酸残基がＤである、または配列番号３の２０位のアミノ酸残基がＹであるＣＤＲ３；（ｆ）配列番号７の１１位のアミノ残基がＱである、または配列番号７の７位のアミノ酸残基がＴであるＦＲ１；（ｇ）配列番号１０の３位のアミノ残基がＱである、配列番号１０の５位のアミノ酸残基がＡである；配列番号１０の６位のアミノ酸残基がＭである、または配列番号１０の７位のアミノ酸残基がＶであるＦＲ４；あるいは（ｈ）それは、例えば、本明細書に開示される方法によって試験した場合に、参照抗ＨＡ抗体分子、例えば、Ａｂ ６７－１１、ＦＩ６、ＦＩ２８、Ｃ１７９、Ｆ１０、ＣＲ９１１４またはＣＲ６２６１よりも少ないエスケープ変異体を産生する、のうちの１つまたは複数を含み、また、以下のことを条件とする、重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントが、配列Ｓ－Ｙ－Ｇ－Ｍ－Ｈ（配列番号８６）を含むＣＤＲ１；配列Ｖ－Ｉ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号８７）を含むＣＤＲ２；および配列Ｄ－Ｓ－Ｅ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号８８）を含むＣＤＲ３を含む場合、軽鎖可変領域セグメントは、以下のもの：（ａ）以下のもの：ＣＤＲ１ ＫＳＳＱＳＶＴＹＮＹＫＮＹＬＡ（配列番号８３）；ＣＤＲ２ ＷＡＳＴＲＥＳ（配列番号８４）；またはＣＤＲ３ ＱＱＹＹＲＴＰＰＴ（配列番号８５）以外のＣＤＲ；（ｂ）以下のもの：配列ＥＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣ（配列番号９０）を含むＦＲ１；配列ＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹ（配列番号９１）を含むＦＲ２；配列ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣ（配列番号９２）を含むＦＲ３；または配列ＦＧＧＧＴＫＬＤＩＫ（配列番号９３）を含むＦＲ４以外のＦＲ；（ｃ）配列番号１８５の１位のアミノ残基がＲである、配列番号４の５位のアミノ残基がＴである、配列番号４の６位のアミノ残基がＬもしくはＩである、配列番号１８５の７位のアミノ残基がＳである、配列番号１８５の８位のアミノ残基がＦもしくはＷである、または配列番号１８５の９位のアミノ残基がＳもしくはＤであるＣＤＲ１；（ｄ）配列番号５の２位のアミノ残基がＧである、配列番号５の４位のアミノ残基がＡ、Ｙ、Ｈ、ＫまたはＤである、配列番号５の５位のアミノ残基がＬである、配列番号５の７位のアミノ残基がＴであるＣＤＲ２；（ｅ）配列番号６の３位のアミノ残基がＨである；配列番号６の９位のアミノ酸残基がＳであるＣＤＲ３；（ｆ）配列番号１１の１位のアミノ残基がＤである；配列番号１１の３位のアミノ残基がＱである、配列番号１１の９位のアミノ残基がＳである、配列番号１１の１０位のアミノ残基がＴである、配列番号１１の１１位のアミノ残基がＶである、配列番号１１の１２位のアミノ残基がＳである、配列番号１１の１３位のアミノ残基がＡである、配列番号１１の１４位のアミノ残基がＴである、配列番号１１の１５位のアミノ残基がＶもしくはＲである、配列番号１１の１７位のアミノ残基がＤである、配列番号１１の２０位のアミノ残基がＳである、配列番号１１の２２位のアミノ残基がＴ、Ｑ、ＤまたはＲであるＦＲ１；（ｇ）配列番号１２の８位のアミノ残基がＫである；または配列番号１２の９位のアミノ残基がＡであるＦＲ２；（ｈ）配列番号１３の４位のアミノ残基がＥもしくはＳである；配列番号１３の２４位のアミノ残基がＰである、配列番号１３の２７位のアミノ残基がＦ、ＫまたはＤである、配列番号１３の２９位のアミノ残基がＴであるＦＲ３；（ｉ）配列番号１４の３位のアミノ残基がＱ、Ｔ、ＳまたはＮである、配列番号１４の７位のアミノ残基がＶである、または配列番号１４の８位のアミノ残基がＥであるＦＲ４；あるいは（ｊ）それは、例えば、本明細書に開示される方法によって試験した場合に、参照抗ＨＡ抗体分子、例えば、Ａｂ ６７－１１、ＦＩ６、ＦＩ２８、Ｃ１７９、Ｆ１０、ＣＲ９１１４またはＣＲ６２６１よりも少ないエスケープ変異体を産生する、のうちの１つまたは複数を含み；そしてさらに以下のことを条件とする、軽鎖可変領域セグメントが、配列Ｋ－Ｓ－Ｓ－Ｑ－Ｓ－Ｖ－Ｔ－Ｆ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１４６）を含むＣＤＲ１；配列Ｗ－Ａ－Ｓ－Ａ－Ｒ－Ｅ－Ｓ（配列番号１４７）を含むＣＤＲ２；および配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｔ（配列番号１４８）を含むＣＤＲ３を含む場合、重鎖可変領域セグメントは、以下のもの：図４に記載されるＣＤＲ以外のＣＤＲ；または図４に記載されるＦＲ以外のＦＲのうち１つまたは複数を含む。
ある実施形態では、重鎖ＣＤＲ配列は、集合的に、列挙された配列と５、４、３、２、または１以下のアミノ酸残基が異なり、軽鎖ＣＤＲ配列は、集合的に、列挙された配列と５、４、３、２、または１以下のアミノ酸残基が異なる。
ある実施形態では、抗体分子は、
（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）または第３位においてそれと異なる配列（ＡからＧへの置換）を含むＨＣ ＣＤＲ１、
配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）、または第２位においてそれと異なる配列（ＶからＩへの置換）、第７残基においてそれと異なる配列（ＮからＳへの置換）、第８位においてそれと異なる配列（ＹからＮへの置換）、またはこれらの組合せを含むＨＣ ＣＤＲ２、
配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）、または第２位においてそれと異なる配列（ＳからＴへの置換）、第３位においてそれと異なる配列（ＲからＫへの置換）、第１５位においてそれと異なる配列（ＱからＳへの置換）、第１７位においてそれと異なる配列（ＹからＬへの置換）、第１８位においてそれと異なる配列（ＦからＬへの置換）、第１９位においてそれと異なる配列（ＮからＤへの置換）、第２０位においてそれと異なる配列（ＰからＹへの置換）、またはこれらの組合せを含むＨＣ ＣＤＲ３
を含む重鎖（ＨＣ）免疫グロブリン可変領域セグメントと、
（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号７１）、または第２位においてそれと異なる配列（ＳからＴへの置換）、第３位においてそれと異なる配列（ＩからＶへの置換）、第５位においてそれと異なる配列（ＦからＹへの置換）、第６位においてそれと異なる配列（ＮからＳまたはＮからＤへの置換）、第１２位においてそれと異なる配列（ＡからＧへの置換）、またはこれらの組合せを含むＬＣ ＣＤＲ１、
配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）、または第２位においてそれと異なる配列（ＧからＡへの置換）、第４位においてそれと異なる配列（ＹからＴへの置換）、第５位においてそれと異なる配列（ＬからＲへの置換）、またはこれらの組合せを含むＬＣ ＣＤＲ２、
配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）、または第３位においてそれと異なる配列（ＨからＹへの置換）、第９位においてそれと異なる配列（ＳからＴへの置換）、またはこれらの両方を含むＬＣ ＣＤＲ３
を含む軽鎖（ＬＣ）免疫グロブリン可変領域セグメントと
を含む。
ある実施形態では、ＨＣ ＣＤＲ１～３およびＬＣ ＣＤＲ１～３は、集合的に、配列番号６８～７３と０、１、または２アミノ酸が異なる配列を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、重本明細書に記載のヌクレオチド配列にコードされる鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。別の実施形態では、抗体分子は、本明細書に記載のヌクレオチド配列にコードされる軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。なお別の実施形態では、抗体分子は、本明細書に記載のヌクレオチド配列にコードされる重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントおよび本明細書に記載のヌクレオチド配列にコードされる軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む。
ある実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントは、重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントをコードするヌクレオチド配列を含む発現ベクターなどの組換えベクターから発現される。別の実施形態では、軽鎖免疫グロブリン可変セグメントは、軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントをコードするヌクレオチド配列を含む発現ベクターなどの組換えベクターから発現される。さらに別の実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントおよび軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントは、重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントをコードするヌクレオチド配列と、軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントをコードするヌクレオチド配列とを含む、発現ベクターなどの組換えベクターから発現される。
ある実施形態では、ヌクレオチド配列は、（ａ）ＣＤＲ１におけるＳ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）；ＣＤＲ２におけるＶ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）；およびＣＤＲ３におけるＤ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）のアミノ酸配列を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント；ならびに（ｂ）ＣＤＲ１におけるＱ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｄ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１４５）；ＣＤＲ２におけるＷ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）；およびＣＤＲ３におけるＱ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）のアミノ酸配列を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントをコードする。
ある実施形態では、重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントは、重鎖免疫グロブリン可変領域をコードする核酸配列を含む組換えベクターなど、本明細書で記載される組換えベクターを含有する細胞（例えば、宿主細胞）から発現される。別の実施形態では、軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントは、軽鎖免疫グロブリン可変領域をコードする核酸配列を含む組換えベクターなど、本明細書で記載される組換えベクターを含有する細胞（例えば、宿主細胞）から発現される。さらに別の実施形態では、細胞（例えば、宿主細胞）は、重鎖免疫グロブリン可変領域をコードする核酸配列と、軽鎖免疫グロブリン可変領域をコードする核酸配列とを含む組換えベクターを含有する。
ある実施形態では、抗体分子は、重鎖可変領域セグメントを発現するヌクレオチド配列および軽鎖可変領域セグメントを発現するヌクレオチド配列を含む細胞（例えば、宿主細胞）を用意するステップと、細胞内で核酸を発現させるステップとを含む方法によって作製される。
ある実施形態では、重鎖可変領域セグメントを発現するヌクレオチド配列および軽鎖可変領域セグメントを発現するヌクレオチド配列は、同じ組換えベクター（例えば、発現ベクター）上にある。別の実施形態では、重鎖可変領域セグメントを発現するヌクレオチド配列および軽鎖可変領域セグメントを発現するヌクレオチド配列は、別個の組換えベクター（例えば、発現ベクター）上にある。
ある実施形態では、抗体分子は、薬学的に許容されるキャリアを含有する医薬組成物中に存在する。ある実施形態では、医薬組成物は、本明細書で記載される容器内に存在する。
使用の方法
別の態様では、本開示は、被験体、例えば、ヒト被験体において、インフルエンザウイルス（例えば、インフルエンザＡウイルス、例えば、群１株、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、またはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５またはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４、またはインフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０）による感染症を処置または予防する方法を特徴付ける。方法は、本明細書に記載の製剤、例えば、本明細書に記載の医薬製剤を、それを必要とする被験体、例えば、ヒト被験体に投与するステップを含む。
ある実施形態では、インフルエンザＡウイルスは、Ｈ１、Ｈ５、Ｈ９、Ｈ３またはＨ７株、例えば、Ｈ１Ｎ１株、Ｈ３Ｎ２株、Ｈ５Ｎ１株またはＨ７Ｎ９株のインフルエンザＡウイルスである。
ある実施形態では、製剤は、約２０００ｍｇ～約５０００ｍｇ、例えば、約２３００ｍｇ～約４６００ｍｇ、約２０００ｍｇ～約２５００ｍｇ、約２５００ｍｇ～約３０００ｍｇ、約３０００ｍｇ～約３５００ｍｇ、約３５００ｍｇ～約４０００ｍｇ、約４０００ｍｇ～約４５００ｍｇ、約４５００～約５０００ｍｇの抗体分子の用量で投与される。ある実施形態では、製剤は、約２３００ｍｇまたは約４６００ｍｇの抗体分子の用量で投与される。ある実施形態では、製剤は、静脈内に、例えば、注入によって投与される。
ある実施形態では、投与は、インフルエンザ感染の症状もしくは顕在化の発生率もしくは重症度の低減、またはインフルエンザ感染の症状の発症もしくは顕在化の遅延（ｔｈｅ ｄｅｌａｙ ｏｒ ｏｎｓｅｔ ｏｆ ａ ｓｙｍｐｔｏｍ ｏｒ ｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎ）のうちの１つまたは複数をもたらすか、またはそれらと相関する。ある実施形態では、投与は、二次感染の症状もしくは顕在化の発生率もしくは重症度の低減、または二次感染の症状の発症もしくは顕在化の遅延のうちの１つまたは複数をもたらすか、またはそれらと相関する。
ある実施形態では、被験体、例えばヒト被験体は、投与されているか、または、方法は、第２のもしくはさらなる療法を施行すること、もしくは第２のもしくはさらなる療法の施行を推奨することを含む。ある実施形態では、抗体分子は、第２のまたはさらなる薬剤または療法と組み合わせて投与される。
ある実施形態では、第２のまたはさらなる療法は、ワクチンの投与、または抗ウイルス療法、例えば、抗ＮＡ療法または抗Ｍ２療法を含む。ある実施形態では、第２のまたはさらなる療法は、特定のインフルエンザＡ株による感染を予防するために患者の免疫系を刺激するための、ワクチン、例えば、本明細書で記載されるワクチン、またはインフルエンザペプチドの混合物（別称、カクテル）の投与を含む。ある実施形態では、第２のまたはさらなる薬剤は、抗ウイルス剤、鎮痛薬（ｐａｉｎ ｒｅｌｉｅｖｅｒ）、抗炎症薬、抗生剤、ステロイド剤、第２の治療抗体分子（例えば、抗ＨＡ抗体）、アジュバント、プロテアーゼ、またはグリコシダーゼ（例えば、シアリダーゼ）を投与することを含む。ある実施形態では、第２のまたはさらなる薬剤は、アシクロビル、リバビリン、アマンタジン、レマンチジン、ノイラミニダーゼ阻害剤（例えば、ザナミビル（Ｒｅｌｅｎｚａ（登録商標））、オセルタミビル（Ｔａｍｉｆｌｕ（登録商標））、ラニナミビル、ペラミビル）、またはリマンタジンを含む。
ある実施形態では、第２のまたはさらなる薬剤は、第２の抗体分子、例えば、Ａｂ ６７－１１（米国仮特許出願第６１／６４５，４５３号、米国出願公開第２０１３／０３０２３４８号および国際出願公開ＷＯ２０１３／１６９３７７）、ＦＩ６（米国出願公開第２０１０／００８０８１３号）、ＦＩ２８（米国出願公開第２０１０／００８０８１３号）、Ｃ１７９（Ｏｋｕｎｏら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ． ６７：２５５２－８，１９９３）、Ｆ１０（Ｓｕｉら、Ｎａｔ． Ｓｔｒｕｃｔ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １６：２６５，２００９）、ＣＲ９１１４（Ｄｒｅｙｆｕｓ ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３７：１３４３，２０１２）またはＣＲ６２６１（Ｅｋｉｅｒｔら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２４：２４６，２００９）を含む。このように、本明細書で記載される製剤（例えば、Ａｂ ０４４を含む製剤）は、これらの抗体のうちのいずれかと組み合わせて使用することができる。
ある実施形態では、第２のまたはさらなる薬剤は、第２のまたはさらなる抗体分子、例えば、抗ＨＡ抗体、例えば、本明細書で開示される抗ＨＡ抗体を含む。例えば、Ａｂ ０４４、Ａｂ ０６９、Ａｂ ０３２、およびＡｂ ０３１のうちの２つまたはこれより多くを投与することができる。例えば、Ａｂ ０４４をＡｂ ０６９またはＡｂ ０３２と組み合わせて投与することができる。
組合せの場合、２つの薬剤は、同じ投薬単位の一部として投与することもでき、または別個に投与することもできる。インフルエンザ感染と関連する症状の処置に有用な他の例示的な薬剤は、アセトアミノフェン、イブプロフェン、アスピリン、およびナプロキセンである。
ある実施形態では、製剤、例えば、医薬製剤は、インフルエンザ感染を患っているか、またはインフルエンザ感染しやすいヒト被験体に投与される。ある実施形態では、製剤、例えば、医薬製剤は、インフルエンザまたは特定のインフルエンザ亜型もしくは株への既知の曝露前に投与される。ある実施形態では、製剤、例えば、医薬製剤は、インフルエンザ感染の影響もしくは症状の顕在化の前、またはインフルエンザ感染の影響もしくは症状の１つもしくは複数の特定の影響の顕在化の前に投与される。ある実施形態では、製剤、例えば、医薬製剤は、インフルエンザまたは特定のインフルエンザ亜型もしくは株への既知の曝露後に投与される。ある実施形態では、製剤、例えば、医薬製剤は、インフルエンザ感染の影響もしくは症状の顕在化の後、またはインフルエンザ感染の影響もしくは症状の１つもしくは複数の特定の影響の顕在化の観察後に投与される。ある実施形態では、製剤、例えば、医薬製剤は、インフルエンザ感染の影響もしくは症状、例えば、炎症、発熱、悪心、体重減少、食欲不振、呼吸促迫、心拍数増加、高血圧、体の痛み、筋肉痛、眼痛、疲労、倦怠感、乾性咳、鼻汁、および／もしくは咽喉痛の顕在化に応じて、またはそれらを処置もしくは予防するために投与される。
ある実施形態では、方法は、例えば、本明細書で開示される方法を用いて、被験体、例えば、ヒト被験体を、インフルエンザウイルスについて試験するステップをさらに含む。ある実施形態では、投与は、インフルエンザの陽性試験に応じるものである。
なお別の態様では、本開示は、インフルエンザウイルス（例えば、インフルエンザＡウイルス、例えば、群１株、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、またはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５またはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４またはインフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０）に感染した被験体、例えば、ヒト被験体を、本明細書に記載の製剤、例えば、医薬製剤を投与することによって処置する方法を特徴付ける。例えば、インフルエンザＡウイルスは、Ｈ１、Ｈ５、Ｈ９、Ｈ３またはＨ７株、例えば、Ｈ１Ｎ１株、Ｈ３Ｎ２株、Ｈ５Ｎ１株またはＨ７Ｎ９株のインフルエンザＡウイルスである。
ある実施形態では、製剤、例えば、医薬製剤は、インフルエンザを予防するためにワクチンの代わりに投与される。別の実施形態では、製剤、例えば、医薬製剤は、インフルエンザを予防するためにワクチンと組み合わせて（それと同時または逐次的に）投与される。
さらに別の態様では、本開示は、生物学的試料中のインフルエンザ（例えば、インフルエンザＡまたはインフルエンザＢ）ビリオンを検出する方法であって、例えば、試料を、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子を含む製剤、例えば、医薬製剤に接触させ、次いで抗体分子の試料への結合を検出することによる方法を特色とする。ある実施形態では、インフルエンザウイルス（例えば、インフルエンザＡウイルスまたはインフルエンザＢウイルス）を検出する方法は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで実施される。
一態様では、本開示は、（ａ）患者由来の試料を用意し、（ｂ）試料を、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子を含む製剤、例えば、医薬製剤と接触させ、（ｃ）抗体分子が試料中のポリペプチドに結合するかどうかを決定する方法であって、抗体分子が試料中のポリペプチドに結合する場合、患者は、インフルエンザウイルス（例えば、インフルエンザＡウイルス、例えば、群１株、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、もしくはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５もしくはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４、またはインフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０）に感染していると決定される、方法を特色とする。ある実施形態では、患者は、インフルエンザウイルス（例えば、インフルエンザＡウイルス、例えば、群１の株、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、またはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５またはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４、またはインフルエンザＢウイルス、例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０）に感染していると決定されており、患者は、試験を実施した本明細書に開示される製剤または抗体分子をさらに投与される。
そうでないことが定義されない限りにおいて、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書で記載されるものと同様または同等の方法および材料が本発明の実践または試験において使用されうるが、適切な方法および材料を下記に記載する。本明細書で言及される全ての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照によりその全体が組み込まれる。矛盾がある場合は、定義を含め、本明細書が優先する。加えて、材料、方法、および例は例示に過ぎず、限定的であることを意図するものではない。
本開示で特色とされる１つまたは複数の実施形態の詳細は、添付の図面および下記の明細書本文に明示される。本開示で特色とされる他の特色、目的、および利点は、明細書本文および図面、ならびに特許請求の範囲から明らかである。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
抗ＨＡ抗体分子と、緩衝剤と、等張化剤とを含む製剤であって、該抗体分子が、
（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＨＣ ＣＤＲ１、
配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＨＣ ＣＤＲ２、および
配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＨＣ ＣＤＲ３
を含む重鎖（ＨＣ）免疫グロブリン可変領域セグメントと、
（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｄ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１４５）を含むＬＣ ＣＤＲ１、
配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＬＣ ＣＤＲ２、および
配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＬＣ ＣＤＲ３
を含む軽鎖（ＬＣ）免疫グロブリン可変領域セグメントと
を含む製剤。
（項目２）
前記抗体分子が、約５ｍｇ／ｍＬ～約１５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、項目１に記載の製剤。
（項目３）
前記抗体分子が、約１０ｍｇ／ｍＬ～約４０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、項目１または２に記載の製剤。
（項目４）
前記抗体分子が、約２０ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、項目１から３のいずれかに記載の製剤。
（項目５）
前記抗体分子が、約２５ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、項目１から４のいずれかに記載の製剤。
（項目６）
前記抗体分子が、約５０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、例えば、約５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、項目１から５のいずれかに記載の製剤。
（項目７）
前記抗体分子が、配列番号２５、または配列番号２５と１、２、３、４、もしくは５以下のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む、項目１から６のいずれかに記載の製剤。
（項目８）
前記抗体分子が、配列番号５２、または配列番号５２と１、２、３、４、もしくは５以下のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む、項目１から７のいずれかに記載の製剤。
（項目９）
前記抗体分子が、
（ａ）配列番号２５、または配列番号２５と１、２、３、４、もしくは５以下のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントと、
（ｂ）配列番号５２、または配列番号５２と１、２、３、４、もしくは５以下のアミノ酸が異なるアミノ酸配列を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントと
を含む、項目１から８のいずれかに記載の製剤。
（項目１０）
前記抗体分子が、配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントまたは配列番号５２を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む、項目１から９のいずれかに記載の製剤。
（項目１１）
前記抗体分子が、配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメントおよび配列番号５２を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含む、項目１から１０のいずれかに記載の製剤。
（項目１２）
前記緩衝剤が、約５ｍＭ～約１５０ｍＭの濃度で存在する、項目１から１１のいずれかに記載の製剤。
（項目１３）
前記緩衝剤が、約２０ｍＭ～約６０ｍＭの濃度で存在する、項目１から１２のいずれかに記載の製剤。
（項目１４）
前記緩衝剤が、約４０ｍＭの濃度で存在する、項目１から１３のいずれかに記載の製剤。
（項目１５）
前記緩衝剤が、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、またはクエン酸－リン酸緩衝液である、項目１から１４のいずれかに記載の製剤。
（項目１６）
前記緩衝剤が、クエン酸－リン酸ナトリウムを含む、項目１から１５のいずれかに記載の製剤。
（項目１７）
前記製剤が、約２０ｍＭ～約６０ｍＭの濃度のクエン酸－リン酸ナトリウムを含む、項目１から１６のいずれかに記載の製剤。
（項目１８）
前記製剤が、約４０ｍＭの濃度のクエン酸－リン酸ナトリウムを含む、項目１から１７のいずれかに記載の製剤。
（項目１９）
前記緩衝剤が、約５．５～約７のｐＨをもたらす、項目１から１８のいずれかに記載の製剤。
（項目２０）
前記緩衝剤が、クエン酸ナトリウムを含み、約６～約６．５のｐＨをもたらす、項目１から１９のいずれかに記載の製剤。
（項目２１）
前記等張化剤が、約１０ｍＭ～約５００ｍＭの濃度で存在する、項目１から２０のいずれかに記載の製剤。
（項目２２）
前記等張化剤が、約５０～約２００ｎＭの濃度で存在する、項目１から２１のいずれかに記載の製剤。
（項目２３）
前記等張化剤が、約１５０ｍＭの濃度で存在する、項目１から２２のいずれかに記載の製剤。
（項目２４）
前記等張化剤が、塩化ナトリウムを含む、項目１から２３のいずれかに記載の製剤。
（項目２５）
前記等張化剤が、塩化ナトリウムを含み、約１４０～約１６０ｍＭの濃度で存在する、項目１から２４のいずれかに記載の製剤。
（項目２６）
前記等張化剤が、約２５０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３５０ｍＯｓｍ／Ｌの張度（または重量オスモル濃度）をもたらす、項目１から２５のいずれかに記載の製剤。
（項目２７）
前記等張化剤が、塩化ナトリウムを含み、約２８０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３２０ｍＯｓｍ／Ｌの張度（または重量オスモル濃度）をもたらす、項目１から２６のいずれかに記載の製剤。
（項目２８）
前記製剤が、約５．５～約７のｐＨを有する、項目１から２７のいずれかに記載の製剤。
（項目２９）
前記製剤が、約６～約６．５のｐＨを有する、項目１から２８のいずれかに記載の製剤。
（項目３０）
（ａ）約１０～４０ｍｇ／ｍＬの濃度の前記抗ＨＡ抗体分子と、
（ｂ）約２０ｍＭ～６０ｍＭの濃度のクエン酸－リン酸ナトリウムと、
（ｃ）約７５～約１５０ｍＭの濃度の塩化ナトリウムと
を含み、
前記製剤のｐＨが約５．５～約６．５である、
項目１から２９のいずれかに記載の製剤。
（項目３１）
約２５ｍｇ／ｍＬの前記抗ＨＡ抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、および約１５０ｍＭ塩化ナトリウムを、約６のｐＨで含む、項目１から３０のいずれかに記載の製剤。
（項目３２）
界面活性剤をさらに含む、項目１から３１のいずれかに記載の製剤。
（項目３３）
前記界面活性剤が、約０．００５％～約０．１％の濃度で存在する、項目３２に記載の製剤。
（項目３４）
前記界面活性剤が、約０．０１％～約０．０５％の濃度で存在する、項目３２または３３に記載の製剤。
（項目３５）
前記界面活性剤が、約０．０２５％の濃度で存在する、項目３２から３４のいずれかに記載の製剤。
（項目３６）
前記界面活性剤が、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）である、項目３２から３５のいずれかに記載の製剤。
（項目３７）
前記界面活性剤が、ポリソルベート８０であり、約０．０１％および約０．０５％の濃度で存在する、項目３２から３６のいずれかに記載の製剤。
（項目３８）
（ａ）約１０～４０ｍｇ／ｍＬの濃度の前記抗ＨＡ抗体分子と、
（ｂ）約２０ｍＭ～６０ｍＭの濃度のクエン酸－リン酸ナトリウムと、
（ｃ）約７５ｍＭ～約１５０ｍＭの濃度の塩化ナトリウムと、
（ｄ）約０．０１％～約０．０５％の濃度のポリソルベート８０と
を含み、
前記製剤のｐＨが約５．５～約６．５である、
項目３２から３７のいずれかに記載の製剤。
（項目３９）
約２５ｍｇ／ｍＬの前記抗ＨＡ抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０２５％のポリソルベート８０を含み、前記製剤のｐＨが約６である、項目３２から３８のいずれかに記載の製剤。
（項目４０）
約２５ｍｇ／ｍＬの前記抗ＨＡ抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０２５％のポリソルベート８０を含み、前記製剤のｐＨが約６．５である、項目３２から３８のいずれかに記載の製剤。
（項目４１）
約２５ｍｇ／ｍＬの前記抗ＨＡ抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約７５ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０２５％のポリソルベート８０を含み、前記製剤のｐＨが約６．５である、項目３２から３８のいずれかに記載の製剤。
（項目４２）
安定剤をさらに含む、項目１から４１のいずれかに記載の製剤。
（項目４３）
前記安定剤が、約０．１％～約１０％の濃度で存在する、項目４２に記載の製剤。
（項目４４）
前記安定剤がアミノ酸である、項目４２または４３に記載の製剤。
（項目４５）
前記アミノ酸が、グリシン、ヒスチジン、アルギニン、メチオニン、プロリン、リシン、グルタミン酸、またはこれらの組合せである、項目４４に記載の製剤。
（項目４６）
約０．５％～約２％の濃度のグリシンを含む、項目１から４５のいずれかに記載の製剤。
（項目４７）
（ａ）約１０～約４０ｍｇ／ｍＬの濃度の前記抗ＨＡ抗体分子と、
（ｂ）約２０ｍＭ～６０ｍＭの濃度のクエン酸－リン酸ナトリウムと、
（ｃ）約７５ｍＭ～約１５０ｍＭの濃度の塩化ナトリウムと、
（ｄ）約０．０１％～約０．０４％の濃度のポリソルベート８０と、
（ｃ）約０．５％～約２％の濃度のグリシンと
を含み、
前記製剤のｐＨが約５．５～約６．５である、
項目１から４６のいずれかに記載の製剤。
（項目４８）
約２５ｍｇ／ｍＬの前記抗ＨＡ抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．０２５％のポリソルベート８０、および約１％のグリシンを含み、前記製剤のｐＨが約６である、項目１から４７のいずれかに記載の製剤。
（項目４９）
炭水化物をさらに含む、項目１から４８のいずれかに記載の製剤。
（項目５０）
前記炭水化物が、スクロース、トレハロース、マンニトール、デキストラン、ソルビトール、イノシトール、グルコース、フルクトース、ラクトース、キシロース、マンノース、マルトース、ラフィノース、これらの組合せである、項目４９に記載の製剤。
（項目５１）
ポリマーをさらに含む、項目１から５０のいずれかに記載の製剤。
（項目５２）
前記ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、デキストラン、ヒドロキシルエチルデンプン（ＨＥＴＡ）、またはゼラチンである、項目５１に記載の製剤。
（項目５３）
防腐剤をさらに含む、項目１から５２のいずれかに記載の製剤。
（項目５４）
前記防腐剤が、ベンジルアルコール、ｍ－クレゾール、またはフェノールである、項目５３に記載の製剤。
（項目５５）
前記製剤中の高分子量（ＨＭＷ）種のレベルが、保存前、または４℃で少なくとも約２週間もしくは４５℃で少なくとも約２週間にわたる保存後に約５％未満である、項目１から５４のいずれかに記載の製剤。
（項目５６）
前記製剤中の低分子量（ＬＭＷ）種のレベルが、保存前、または４℃で少なくとも約２週間もしくは４５℃で少なくとも約２週間にわたる保存後に約５％未満である、項目１から５５のいずれかに記載の製剤。
（項目５７）
前記製剤中のＨＭＷ種およびＬＭＷ種のレベルが、保存前、または４℃で少なくとも約２週間もしくは４５℃で少なくとも約２週間にわたる保存後に約８％未満である、項目１から５６のいずれかに記載の製剤。
（項目５８）
前記製剤中の前記抗ＨＡ抗体分子の約９０％またはこれより多くが、保存前、または４℃で少なくとも約２週間もしくは４５℃で少なくとも約２週間にわたる保存後に単量体として存在する、項目１から５７のいずれかに記載の製剤。
（項目５９）
単量体、ＨＭＷ種、またはＬＭＷ種のレベルが、サイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）により決定される、項目５５から５８のいずれかに記載の製剤。
（項目６０）
４℃で２回の２週間にわたる保存後の前記製剤中の前記抗ＨＡ抗体分子の純度が少なくとも約９６％である、項目１から５９のいずれかに記載の製剤。
（項目６１）
４５℃で２回の２週間にわたる保存後の前記製剤中の前記抗ＨＡ抗体分子の純度が少なくとも約９０％である、項目１から６０のいずれかに記載の製剤。
（項目６２）
前記抗ＨＡ抗体分子の純度が、キャピラリー電気泳動－ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ－ＳＤＳ）により決定される、項目６０または６１に記載の製剤。
（項目６３）
前記抗ＨＡ抗体分子の活性が、４５℃で少なくとも約２週間にわたる保存後に約２５％未満低下する、項目１から６２のいずれかに記載の製剤。
（項目６４）
前記抗ＨＡ抗体分子の活性が、ＨＡ結合アッセイにより決定される、項目６３に記載の製剤。
（項目６５）
前記製剤が液体製剤である、項目１から６４のいずれかに記載の製剤。
（項目６６）
前記製剤が凍結乾燥製剤である、項目１から６４のいずれかに記載の製剤。
（項目６７）
項目１から６６のいずれかに記載の製剤を含む容器。
（項目６８）
約１０ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬの前記抗体分子を含む、項目６７に記載の容器。
（項目６９）
約２５ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬの前記抗体分子を含む、項目６７または６８に記載の容器。
（項目７０）
約１０ｍＬ～約５０ｍＬの前記製剤を含む、項目６７から６９のいずれかに記載の容器。
（項目７１）
約２０ｍＬ～約４０ｍＬの前記製剤を含む、項目６７から７０のいずれかに記載の容器。
（項目７２）
バイアル、任意選択でガラスバイアルである、項目６７から７１のいずれかに記載の容器。
（項目７３）
項目１から６６のいずれかに記載の製剤を含むデバイス。
（項目７４）
項目１から６６のいずれかに記載の製剤を含む１つまたは複数の容器と、該製剤の使用のための指示とを含むキット。
（項目７５）
インフルエンザを処置または予防する方法であって、インフルエンザを有するか、またはインフルエンザを有する危険性がある被験体に、項目１から６６のいずれかに記載の製剤を有効量で投与し、これにより、インフルエンザを処置または予防することを含む方法。
（項目７６）
前記製剤が静脈内投与される、項目７５に記載の方法。
（項目７７）
インフルエンザの処置または予防における使用のための、項目１から６６のいずれかに記載の製剤。
（項目７８）
被験体への投与のための組成物を調製する方法であって、項目１から６６のいずれかに記載の製剤を静脈内投与に適切な溶液と組み合わせることを含む方法。
（項目７９）
前記溶液が、食塩液を含み、任意選択で、デキストロースをさらに含む、項目７８に記載の方法。
（項目８０）
２０００ｍｇ～５０００ｍｇの前記抗体分子が前記溶液と組み合わされる、項目７８または７９に記載の方法。
（項目８１）
２３００ｍｇ～４６００ｍｇの前記抗体分子が前記溶液と組み合わされる、項目７８から８０のいずれかに記載の方法。
（項目８２）
前記製剤が、静脈内（ＩＶ）溶液バッグ内で前記溶液と組み合わされる、項目７８から８１のいずれかに記載の方法。
（項目８３）
抗ＨＡ抗体分子を含む２００ｍＬ～３００ｍＬの溶液を含む容器であって、該溶液が静脈内投与に適切であり、該抗体分子が５ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在し、該抗体分子が、
（ａ）配列Ｓ－Ｙ－Ａ－Ｍ－Ｈ（配列番号６８）を含むＨＣ ＣＤＲ１、
配列Ｖ－Ｖ－Ｓ－Ｙ－Ｄ－Ｇ－Ｎ－Ｙ－Ｋ－Ｙ－Ｙ－Ａ－Ｄ－Ｓ－Ｖ－Ｑ－Ｇ（配列番号６９）を含むＨＣ ＣＤＲ２、および
配列Ｄ－Ｓ－Ｒ－Ｌ－Ｒ－Ｓ－Ｌ－Ｌ－Ｙ－Ｆ－Ｅ－Ｗ－Ｌ－Ｓ－Ｑ－Ｇ－Ｙ－Ｆ－Ｎ－Ｐ（配列番号７０）を含むＨＣ ＣＤＲ３
を含む重鎖（ＨＣ）免疫グロブリン可変領域セグメントと、
（ｂ）配列Ｑ－Ｓ－Ｉ－Ｔ－Ｆ－Ｄ－Ｙ－Ｋ－Ｎ－Ｙ－Ｌ－Ａ（配列番号１４５）を含むＬＣ ＣＤＲ１、
配列Ｗ－Ｇ－Ｓ－Ｙ－Ｌ－Ｅ－Ｓ（配列番号７２）を含むＬＣ ＣＤＲ２、および
配列Ｑ－Ｑ－Ｈ－Ｙ－Ｒ－Ｔ－Ｐ－Ｐ－Ｓ（配列番号７３）を含むＬＣ ＣＤＲ３
を含む軽鎖（ＬＣ）免疫グロブリン可変領域セグメントと
を含む、容器。
（項目８４）
前記抗体分子を含む２５０ｍＬの溶液を含む、項目８３に記載の容器。
（項目８５）
前記抗体分子が、８ｍｇ／ｍＬ～１６ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、項目８３または８４に記載の容器。
（項目８６）
前記抗体分子が、配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント、配列番号５２を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメント、またはこれらの両方を含む、項目８３から８５のいずれかに記載の容器。
（項目８７）
静脈内（ＩＶ）溶液バッグである、項目８３から８６のいずれかに記載の容器。
図１は、抗ＨＡ抗体Ａ１８の重鎖および軽鎖のアミノ酸配列（それぞれ、配列番号９４および９５）である。定常ドメイン配列はイタリック体によって指し示されている。ＣＤＲは下線によって指し示されている。
図２は、例示的な抗ＨＡ抗体の可変重鎖ドメイン配列である。示される配列に関する配列番号は以下の通りである：ＶＨ１５は配列番号１５である；ＶＨ１６は配列番号１６である；ＶＨ１７は配列番号１７である；ＶＨ１８は配列番号１８である；ＶＨ１９は配列番号１９である；ＶＨ２１は配列番号２１である；ＶＨ２２は配列番号２２である；ＶＨ２０は配列番号２０である；ＶＨ２３は配列番号２３である；ＶＨ２４は配列番号２４である；ＶＨ２５は配列番号２５である；ＶＨ２６は配列番号２６である；ＶＨ２７は配列番号２７である；およびＶＨ１６１は配列番号１６１である。
図３Ａ～３Ｂは、例示的な抗ＨＡ抗体の可変軽鎖ドメイン配列を描示する。示される配列に関する配列番号は以下の通りである：ＶＬ２８は配列番号２８である；ＶＬ２９は配列番号２９である；ＶＬ３０は配列番号３０である；ＶＬ３５は配列番号３５である；ＶＬ３１は配列番号３１である；ＶＬ３２は配列番号３２である；ＶＬ３３は配列番号３３である；ＶＬ３４－ＩＤは配列番号３４である；ＶＬ３６は配列番号３６である；ＶＬ４５は配列番号４５である；ＶＬ４６は配列番号４６である；ＶＬ３７は配列番号３７である；ＶＬ３８は配列番号３８である；ＶＬ３９は配列番号３９である；ＶＬ４０は配列番号４０である；ＶＬ４１は配列番号４１である；ＶＬ４２は配列番号４２である；ＶＬ４３は配列番号４３である；ＶＬ４４は配列番号４４である；ＶＬ４７は配列番号４７である；ＶＬ４８は配列番号４８である；ＶＬ４９は配列番号４９である；ＶＬ５０は配列番号５０である；ＶＬ５１は配列番号５１である；ＶＬ５２は配列番号５２である；ＶＬ５３は配列番号５３である；ＶＬ５４は配列番号５４である；ＶＬ５５は配列番号５５である；ＶＬ５６は配列番号５６である；ＶＬ５７は配列番号５７である；ＶＬ５８は配列番号５８である；ＶＬ５９は配列番号５９である；ＶＬ６０は配列番号６０である；ＶＬ６１は配列番号６１である；ＶＬ１５３は配列番号１５３である；ＶＬ１５４は配列番号１５４である；ＶＬ１５５は配列番号１５５である；ＶＬ１５６は配列番号１５６である；およびＶＬ６２は配列番号６２である。 図３Ａ～３Ｂは、例示的な抗ＨＡ抗体の可変軽鎖ドメイン配列を描示する。示される配列に関する配列番号は以下の通りである：ＶＬ２８は配列番号２８である；ＶＬ２９は配列番号２９である；ＶＬ３０は配列番号３０である；ＶＬ３５は配列番号３５である；ＶＬ３１は配列番号３１である；ＶＬ３２は配列番号３２である；ＶＬ３３は配列番号３３である；ＶＬ３４－ＩＤは配列番号３４である；ＶＬ３６は配列番号３６である；ＶＬ４５は配列番号４５である；ＶＬ４６は配列番号４６である；ＶＬ３７は配列番号３７である；ＶＬ３８は配列番号３８である；ＶＬ３９は配列番号３９である；ＶＬ４０は配列番号４０である；ＶＬ４１は配列番号４１である；ＶＬ４２は配列番号４２である；ＶＬ４３は配列番号４３である；ＶＬ４４は配列番号４４である；ＶＬ４７は配列番号４７である；ＶＬ４８は配列番号４８である；ＶＬ４９は配列番号４９である；ＶＬ５０は配列番号５０である；ＶＬ５１は配列番号５１である；ＶＬ５２は配列番号５２である；ＶＬ５３は配列番号５３である；ＶＬ５４は配列番号５４である；ＶＬ５５は配列番号５５である；ＶＬ５６は配列番号５６である；ＶＬ５７は配列番号５７である；ＶＬ５８は配列番号５８である；ＶＬ５９は配列番号５９である；ＶＬ６０は配列番号６０である；ＶＬ６１は配列番号６１である；ＶＬ１５３は配列番号１５３である；ＶＬ１５４は配列番号１５４である；ＶＬ１５５は配列番号１５５である；ＶＬ１５６は配列番号１５６である；およびＶＬ６２は配列番号６２である。
図４は、ＦＩ６（配列番号１７５）、ＦＩ３７０（配列番号１７６）、ＦＩ６バリアント１（配列番号１７７）、ＦＩ６バリアント３（配列番号１７８）、ＦＩ６／３７０（配列番号１７９）の重鎖可変領域のアミノ酸配列、およびＦＩ６（配列番号１８０）のカッパ軽鎖可変領域のアミノ酸配列を示す。
図５は、図２に示される通りの例示的な抗ＨＡ抗体の可変重鎖ドメイン配列であり、Ｎ末端ＩＤジペプチドを含む。示される配列に関する配列番号は以下の通りである：ＶＨ１５－ＩＤは配列番号９６である；ＶＨ１６－ＩＤは配列番号９７である；ＶＨ１７－ＩＤは配列番号９８である；ＶＨ１８－ＩＤは配列番号９９である；ＶＨ１９－ＩＤは配列番号１００である；ＶＨ２１－ＩＤは配列番号１０１である；ＶＨ２２－ＩＤは配列番号１０２である；ＶＨ２０－ＩＤは配列番号１０３である；ＶＨ２３－ＩＤは配列番号１０４である；ＶＨ２４－ＩＤは配列番号１０５である；ＶＨ２５－ＩＤは配列番号１０６である；ＶＨ２６－ＩＤは配列番号１０７である；ＶＨ２７－ＩＤは配列番号１０８である；およびＶＨ１６１－ＩＤは配列番号１０９である。
図６Ａ～６Ｂは、図３Ａ～３Ｂに示される通りの例示的な抗ＨＡ抗体の可変軽鎖ドメイン配列を描示し、Ｎ末端ＩＤジペプチドを含む。示される配列に関する配列番号は以下の通りである：ＶＬ２８－ＩＤは配列番号１１０である；ＶＬ２９－ＩＤは配列番号１１１である；ＶＬ３０－ＩＤは配列番号１１２である；ＶＬ３５－ＩＤは配列番号１１３である；ＶＬ３１－ＩＤは配列番号１１４である；ＶＬ３２－ＩＤは配列番号１１５である；ＶＬ３３－ＩＤは配列番号１１６である；ＶＬ３４－ＩＤは配列番号１１７である；ＶＬ３６－ＩＤは配列番号１１８である；ＶＬ４５－ＩＤは配列番号１１９である；ＶＬ４６－ＩＤは配列番号１２０である；ＶＬ３７－ＩＤは配列番号１２１である；ＶＬ３８－ＩＤは配列番号１２２である；ＶＬ３９－ＩＤは配列番号１２３である；ＶＬ４０－ＩＤは配列番号１２４である；ＶＬ４１－ＩＤは配列番号１２５である；ＶＬ４２－ＩＤは配列番号１２６である；ＶＬ４３－ＩＤは配列番号１２７である；ＶＬ４４－ＩＤは配列番号１２８である；ＶＬ４７－ＩＤは配列番号１２９である；ＶＬ４８－ＩＤは配列番号１３０である；ＶＬ４９－ＩＤは配列番号１３１である；ＶＬ５０－ＩＤは配列番号１３２である；ＶＬ５１－ＩＤは配列番号１３３である；ＶＬ５２－ＩＤは配列番号１３４である；ＶＬ５３－ＩＤは配列番号１３５である；ＶＬ５４－ＩＤは配列番号１３６である；ＶＬ５５－ＩＤは配列番号１３７である；ＶＬ５６－ＩＤは配列番号１３８である；ＶＬ５７－ＩＤは配列番号１３９である；ＶＬ５８－ＩＤは配列番号１４０である；ＶＬ５９－ＩＤは配列番号１４１である；ＶＬ６０－ＩＤは配列番号１４２である；ＶＬ６１－ＩＤは配列番号１４３である；ＶＬ１５３－ＩＤは配列番号１５７である；ＶＬ１５４－ＩＤは配列番号１５８である；ＶＬ１５５－ＩＤは配列番号１５９である；ＶＬ１５６－ＩＤは配列番号１６０である；およびＶＬ６２－ＩＤは配列番号１４４である。 図６Ａ～６Ｂは、図３Ａ～３Ｂに示される通りの例示的な抗ＨＡ抗体の可変軽鎖ドメイン配列を描示し、Ｎ末端ＩＤジペプチドを含む。示される配列に関する配列番号は以下の通りである：ＶＬ２８－ＩＤは配列番号１１０である；ＶＬ２９－ＩＤは配列番号１１１である；ＶＬ３０－ＩＤは配列番号１１２である；ＶＬ３５－ＩＤは配列番号１１３である；ＶＬ３１－ＩＤは配列番号１１４である；ＶＬ３２－ＩＤは配列番号１１５である；ＶＬ３３－ＩＤは配列番号１１６である；ＶＬ３４－ＩＤは配列番号１１７である；ＶＬ３６－ＩＤは配列番号１１８である；ＶＬ４５－ＩＤは配列番号１１９である；ＶＬ４６－ＩＤは配列番号１２０である；ＶＬ３７－ＩＤは配列番号１２１である；ＶＬ３８－ＩＤは配列番号１２２である；ＶＬ３９－ＩＤは配列番号１２３である；ＶＬ４０－ＩＤは配列番号１２４である；ＶＬ４１－ＩＤは配列番号１２５である；ＶＬ４２－ＩＤは配列番号１２６である；ＶＬ４３－ＩＤは配列番号１２７である；ＶＬ４４－ＩＤは配列番号１２８である；ＶＬ４７－ＩＤは配列番号１２９である；ＶＬ４８－ＩＤは配列番号１３０である；ＶＬ４９－ＩＤは配列番号１３１である；ＶＬ５０－ＩＤは配列番号１３２である；ＶＬ５１－ＩＤは配列番号１３３である；ＶＬ５２－ＩＤは配列番号１３４である；ＶＬ５３－ＩＤは配列番号１３５である；ＶＬ５４－ＩＤは配列番号１３６である；ＶＬ５５－ＩＤは配列番号１３７である；ＶＬ５６－ＩＤは配列番号１３８である；ＶＬ５７－ＩＤは配列番号１３９である；ＶＬ５８－ＩＤは配列番号１４０である；ＶＬ５９－ＩＤは配列番号１４１である；ＶＬ６０－ＩＤは配列番号１４２である；ＶＬ６１－ＩＤは配列番号１４３である；ＶＬ１５３－ＩＤは配列番号１５７である；ＶＬ１５４－ＩＤは配列番号１５８である；ＶＬ１５５－ＩＤは配列番号１５９である；ＶＬ１５６－ＩＤは配列番号１６０である；およびＶＬ６２－ＩＤは配列番号１４４である。
図７は、追加の例示的な抗ＨＡ抗体の可変軽鎖および重鎖配列を示す。示される配列に関する配列番号は以下の通りである：ＶＬ１６５は配列番号１６５である；ＶＬ１６６は配列番号１６６である；ＶＬ１６７は配列番号１６７である；ＶＬ１６８は配列番号１６８である；ＶＬ１６９は配列番号１６９である；ＶＨ１６４は配列番号１６４である；ＶＨ１６２は配列番号１６２である；ＶＨ１６３は配列番号１６３である。
図８Ａ～図８Ｇは、実施例２において調べた１４種の製剤試料の全てに関するＤＳＣプロファイルを示す。 図８Ａ～図８Ｇは、実施例２において調べた１４種の製剤試料の全てに関するＤＳＣプロファイルを示す。 図８Ａ～図８Ｇは、実施例２において調べた１４種の製剤試料の全てに関するＤＳＣプロファイルを示す。 図８Ａ～図８Ｇは、実施例２において調べた１４種の製剤試料の全てに関するＤＳＣプロファイルを示す。 図８Ａ～図８Ｇは、実施例２において調べた１４種の製剤試料の全てに関するＤＳＣプロファイルを示す。 図８Ａ～図８Ｇは、実施例２において調べた１４種の製剤試料の全てに関するＤＳＣプロファイルを示す。 図８Ａ～図８Ｇは、実施例２において調べた１４種の製剤試料の全てに関するＤＳＣプロファイルを示す。
図９は、代表的な還元ＣＥ－ＳＤＳ電気泳動図（製剤番号１、４５℃、２週間）を描示する。
図１０は、代表的な非還元ＣＥ－ＳＤＳ電気泳動図（製剤番号１、４５℃、２週間）を描示する。
図１１は、代表的なＳＥＣクロマトグラム（製剤番号１、４５℃、２週間）を描示する。
図１２は、代表的なＩＥＦゲル画像を描示する。
本開示は、少なくとも部分的にインフルエンザウイルス（例えば、インフルエンザＡおよびインフルエンザＢウイルス）の複数のヘマグルチニン亜型にわたり保存されるエピトープに結合することができる抗体分子のデザインおよび合成に基づく。例えば、本明細書で記載される抗体分子を含む製剤（例えば、医薬製剤）は、群１に属する少なくとも１種のインフルエンザＡ株および群２に属する１種のインフルエンザＡ株により引き起こされる疾患に対する広域スペクトル療法として、群１および群２の両方に属するウイルス（それぞれ少なくとも１種の亜型）の感染力を中和するのに有用である。理論により束縛されることを望まないが、本明細書で記載される製剤（例えば、医薬製剤）は、１つまたは複数の所望の特性、例えば、改善された安定性（例えば、劣化および／または凝集が少ないこと）および維持された効力（例えば、ＨＡ結合）を有するため、これらの製剤（例えば、医薬製剤）は、少なくとも部分的に、インフルエンザウイルスの処置または予防における使用に適切であると考えられる。
この抗体分子は、ウイルスの領域であって、ヒト免疫系にとって完全には利用できる訳でなく、したがって、より古典的なスクリーニング手法を介する抗体選択には適さない、ウイルスの領域を標的とするための、合理的な構造に基づく手法によりデザインした。広域スペクトル抗体分子のデザインおよび開発のための、この合理性に基づいた手法は、汎流行インフルエンザおよび季節性インフルエンザに対するより有効なワクチンの開発を可能にする。この手法は、変異してヒト適合性かつ高度に伝染性になりうる特異的なウイルス亜型（例えば、トリウイルス亜型）に対していつでも利用できるような、パンデミックワクチンの予備調製も可能にする。本明細書で記載される手法を用いるワクチン（例えば、季節性ワクチン）は、アジュバントを使用することなく、より強力な免疫応答を生じ、ウイルス株変異に対する広範な保護をもたらすことができる。
定義
本明細書で使用される「抗体分子」という用語は、抗原特異的結合をもたらすために、免疫グロブリン重鎖可変領域に由来する十分な配列および／または免疫グロブリン軽鎖可変領域に由来する十分な配列を含むポリペプチドを指す。これには、全長抗体のほか、抗原結合を支援するその断片、例えば、Ｆａｂ断片も含まれる。典型的に、抗体分子は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含む。抗体分子は、ヒト抗体、ヒト化抗体、ＣＤＲグラフト抗体、およびそれらの抗原結合断片を含む。ある実施形態では、抗体分子は、少なくとも１つの免疫グロブリン可変領域セグメント、例えば、免疫グロブリン可変ドメインをもたらすアミノ酸配列、または免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むタンパク質を含む。
抗体分子のＶＨまたはＶＬ鎖は、重鎖または軽鎖の定常領域の全てまたは一部をさらに含み、これにより、それぞれ、免疫グロブリンの重鎖または軽鎖を形成することができる。ある実施形態では、抗体分子は、２つの免疫グロブリン重鎖および２つの免疫グロブリン軽鎖の四量体である。
抗体分子は、重（または軽）鎖免疫グロブリン可変領域セグメントの一方または両方を含みうる。本明細書で使用される「重（または軽）鎖免疫グロブリン可変領域セグメント」という用語は、抗原に結合することが可能な、重（または軽）鎖免疫グロブリン可変領域の全体、またはその断片を指す。抗原に結合する重鎖または軽鎖セグメントの能力は、それぞれ軽鎖または重鎖と対合したセグメントを用いて測定される。一部の実施形態では、全長未満の可変領域である重鎖または軽鎖セグメントは、適切な鎖と対合すると、それぞれ、全長の鎖が軽鎖または重鎖と対合したときに見られるものの、少なくとも２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または９５％であるアフィニティーで結合する。
免疫グロブリン可変領域セグメントは、参照配列またはコンセンサス配列とは異なる場合がある。本明細書で使用される「異なる」とは、参照配列またはコンセンサス配列内の残基が、異なる残基、または存在しない残基、または挿入された残基のいずれかで置きかえられることを意味する。
抗体分子は、重（Ｈ）鎖可変領域（本明細書では、ＶＨと略記する）と、軽（Ｌ）鎖可変領域（本明細書では、ＶＬと略記する）とを含みうる。別の例では、抗体は、２つの重（Ｈ）鎖可変領域および２つの軽（Ｌ）鎖可変領域、またはこれらの抗体結合断片を含む。免疫グロブリンの軽鎖は、カッパ型である場合もラムダ型である場合もある。ある実施形態では、抗体分子は、グリコシル化されている。抗体分子は、抗体依存性細胞傷害および／または補体媒介性細胞傷害について機能的であってもよく、これらの活性の一方または両方について非機能的であってもよい。抗体分子は、無傷抗体またはその抗原結合断片でありうる。
抗体分子には、全長抗体の「抗原結合断片」、例えば、目的のＨＡ標的に特異的に結合する能力を保持する全長抗体の１つまたは複数の断片が含まれる。全長抗体の用語「抗原結合断片」内に包含される結合断片の例として、（ｉ）ＶＬドメイン、ＶＨドメイン、ＣＬドメイン、およびＣＨ１ドメインからなる一価断片である、Ｆａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域におけるジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片である、Ｆ（ａｂ’）またはＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨドメインおよびＣＨ１ドメインからなる、Ｆｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一のアームのＶＬドメインおよびＶＨドメインからなる、Ｆｖ断片；（ｖ）ＶＨドメインからなる、ｄＡｂ断片（Ｗａｒｄら、（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４－５４６）；および（ｖｉ）機能性を保持する単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメインであるＶＬおよびＶＨは別個の遺伝子によりコードされるが、ＶＬおよびＶＨは、組換え法を使用して、ＶＬおよびＶＨを単一タンパク質鎖にし、ＶＬ領域およびＶＨ領域が対合して単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる一価分子を形成することを可能にする合成リンカーにより、接続することができる。例えば、Ｂｉｒｄら（１９８８年）、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４２巻：４２３～４２６頁；およびＨｕｓｔｏｎら（１９８８年）、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ、８５巻：５８７９～５８８３頁を参照されたい。抗体分子はダイアボディを含む。
本明細書で使用される抗体とは、免疫グロブリンの構造的および機能的な特徴、特に抗原結合の特徴を含むポリペプチド、例えば、四量体または単鎖のポリペプチドを指す。典型的に、ヒト抗体は、２つの同一な軽鎖および２つの同一な重鎖を含む。各鎖は可変領域を含む。
可変重鎖（ＶＨ）領域および可変軽鎖（ＶＬ）領域は、「フレームワーク領域」（ＦＲ）と称する、より保存された領域を分散させた、「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）と称する超可変性領域へとさらに細分することができる。ヒト抗体は、フレームワーク領域ＦＲ１～ＦＲ４により隔てられた、３つのＶＨ ＣＤＲおよび３つのＶＬ ＣＤＲを有する。ＦＲおよびＣＤＲの範囲については、正確に規定されている（Ｋａｂａｔ， Ｅ． Ａ．ら（１９９１年）、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」、５版、Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ刊行物第９１－３２４２号；およびＣｈｏｔｈｉａ， Ｃ．ら（１９８７年）、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．、１９６巻：９０１～９１７頁を参照されたい）。本明細書では、Ｋａｂａｔの定義が使用される。各ＶＨおよび各ＶＬは、典型的に、アミノ末端から、カルボキシル末端へと、以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４で配置された、３つのＣＤＲと、４つのＦＲとから構成される。
免疫グロブリンの重鎖および軽鎖は、ジスルフィド結合によって接続され得る。重鎖定常領域は、典型的に、３つの定常ドメインであるＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３を含む。軽鎖定常領域は、典型的に、ＣＬドメインを含む。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、典型的に、免疫系の多様な細胞（例えば、エフェクター細胞）および古典的な補体系の第１成分（Ｃｌｑ）を含む、宿主組織または因子への抗体の結合を媒介する。
「免疫グロブリン」という用語は、生化学的に識別されうる多様な広範なクラスのポリペプチドを含む。当業者であれば、重鎖はガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、またはイプシロン（γ、μ、α、δ、ε）に分類され、それらの間にいくつかのサブクラス（例えば、γ１～γ４）があることを十分に理解する。抗体の「クラス」をそれぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、またはＩｇＥと決定するのは、この鎖の性質である。免疫グロブリンのサブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１などは十分に特徴付けられており、機能の特殊化を付与することが公知である。これらのクラスおよびアイソタイプのそれぞれの修飾バージョンは、本開示を鑑みれば当業者にとって容易に区別可能であり、したがって、本開示の範囲内である。免疫グロブリンの全てのクラスが明らかに本開示の範囲内である。軽鎖は、カッパまたはラムダ（κ、λ）のいずれかに分類される。各重鎖クラスは、カッパまたはラムダのいずれかの軽鎖と結合しうる。
適切な抗体は、モノクローナル抗体、単一特異性抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体、ヒト抗体、霊長類化抗体、キメラ抗体、二特異性抗体、ヒト化抗体、コンジュゲート抗体（例えば、他のタンパク質、放射性標識、または細胞毒にコンジュゲートまたは融合させた抗体）、小モジュラー免疫医薬（Ｓｍａｌｌ Ｍｏｄｕｌａｒ ＩｍｍｕｎｏＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）（「ＳＭＩＰ（商標）」）、単鎖抗体、ラクダ科（ｃａｍｅｌｏｉｄ）抗体、および抗体断片を含むがこれらに限定されない。
ある実施形態では、抗体はヒト化抗体である。ヒト化抗体とは、ヒトフレームワーク領域と、非ヒト、例えば、マウスもしくはラットの免疫グロブリンに由来する１つまたは複数のＣＤＲとを含む免疫グロブリンを指す。ＣＤＲを提供する免疫グロブリンは「ドナー」と称されることが多く、フレームワークをもたらすヒト免疫グロブリンは「アクセプター」と称されることが多いが、ある実施形態では、供給源の限定もプロセスの限定も暗示されない。典型的に、ヒト化抗体は、ヒト化軽鎖およびヒト化重鎖免疫グロブリンを含む。
「免疫グロブリンドメイン」とは、免疫グロブリン分子の可変ドメインまたは定常ドメインに由来するドメインを指す。免疫グロブリンドメインは、典型的に、約７つのβストランドから形成された２つのβシートおよび保存されたジスルフィド結合を含有する（例えば、Ａ． Ｆ． ＷｉｌｌｉａｍｓおよびＡ． Ｎ． Ｂａｒｃｌａｙ、（１９８８年）、Ａｎｎ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．、６巻：３８１～４０５頁を参照されたい）。
本明細書で使用される「免疫グロブリン可変ドメイン配列」とは、免疫グロブリン可変ドメインの構造を形成しうるアミノ酸配列を指す。例えば、配列は、天然に存在する可変ドメインのアミノ酸配列の全部または一部を含みうる。例えば、配列は、１つ、２つ、またはこれを超えるＮ末端アミノ酸またはＣ末端アミノ酸、内部アミノ酸を省略する場合もあり、１つまたはこれを超える挿入または追加の末端アミノ酸を含む場合もあり、他の変更を含む場合もある。ある実施形態では、免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むポリペプチドは、別の免疫グロブリン可変ドメイン配列と会合して、標的結合構造（または「抗原結合部位」）、例えば、標的抗原と相互作用する構造を形成することができる。
本明細書で使用される抗体という用語には、無傷のモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、単一ドメイン抗体（例えば、サメ単一ドメイン抗体（例えば、ＩｇＮＡＲまたはその断片））、少なくとも２つの無傷抗体から形成された多特異性抗体（例えば、二特異性抗体）、および抗体断片が、所望の生物学的活性を呈する限りにおいて含まれる。本明細書における使用のための抗体は、いずれの型（例えば、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、またはＩｇＭ）であってもよい。
抗体または抗体分子は、哺乳動物、例えば、齧歯動物、例えば、マウスもしくはラット、ウマ、ブタ、またはヤギに由来しうる。ある実施形態では、抗体または抗体分子は、組換え細胞を使用して産生される。一部の実施形態では、抗体または抗体分子は、例えば、ヒトの定常領域ドメインおよび／または可変領域ドメインを保有する、マウス、ラット、ウマ、ブタ、または他の種由来のキメラ抗体である。
本明細書で使用される結合剤とは、標的抗原、例えば、ＨＡに結合する、例えば、特異的に結合する、薬剤である。本発明の結合剤は、ＨＡへの特異的結合を支援するのに十分な、本明細書で開示される抗ＨＡ抗体分子との構造的関係を、そしてある実施形態では、本明細書で開示される抗ＨＡ抗体分子の他の機能的特性を共有する。ある実施形態では、結合剤は、本明細書で開示される抗体分子、例えば、有意な構造的相同性、例えば、ＣＤＲ配列を共有する抗体分子の、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、または９０％の結合アフィニティーを呈する。結合剤は、例えば、一部の抗体と同じく、天然に存在する場合もあり、合成である場合もある。ある実施形態では、結合剤は、ポリペプチド、例えば、抗体分子、例えば、抗体である。一部の結合剤は抗体分子であるが、他の分子、例えば、他のポリペプチドも、結合剤として機能することができる。ポリペプチド結合剤は、単量体であっても、多量体、例えば、二量体、三量体、または四量体であってもよく、鎖内結合または鎖間結合、例えば、ジスルフィド結合によって安定化されていてもよい。これらは、天然に存在するアミノ酸残基を含有しても、天然に存在しないアミノ酸残基を含有してもよい。ある実施形態では、結合剤は、本明細書で開示される抗体分子の１つもしくは複数のＣＤＲを提示するか、または本明細書で開示される抗体分子の構造を他の方法で模倣する、抗体分子または他のポリペプチドである。結合剤は、アプタマー（ａｐｔｏｍｅｒ）、核酸、または他の分子実体も含みうる。結合剤は、様々な方法で、例えば、免疫によって、合理的デザイン、ランダム構造のスクリーニング、またはこれらもしくは他の手法の組合せによって開発することができる。典型的に、結合剤は、本明細書で開示される抗体分子、例えば、有意な構造的相同性、例えば、ＣＤＲ配列を共有する抗体分子と、実質的に同じエピトープと接触をなすことにより作用する。結合剤は、アミノ酸、サッカライド、またはこれらの組合せと相互作用することができる。配列、例えば、本明細書で開示される重鎖ＣＤＲおよび／または軽鎖ＣＤＲのうちの１つもしくは複数、または完全なセットを提示するための足場として、抗体以外のポリペプチドを使用することができる。例示的な足場は、アドネクチン、ジンクフィンガーＤＮＡ結合タンパク質、プロテインＡ、リポクリン、アンキリン（ａｎｋｒｙｉｎ）コンセンサスリピートドメイン、チオレドキシン、アンチカリン、センチリン（ｃｅｎｔｙｒｉｎ）、アビマードメイン、ユビキチン、ペプチド模倣体、ステープルペプチド、システインノットミニタンパク質、およびＩｇＮＡＲを含む。一部の実施形態では、結合剤は、核酸、例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、もしくはこれらの混合物であるか、またはそれらを含む。ある実施形態では、結合剤、例えば、核酸は、二次構造、三次構造、または四次構造を示す。一部の実施形態では、結合剤、例えば、核酸は、本明細書で開示される抗体分子の構造を模倣する構造を形成する。
本明細書で使用される広域スペクトル結合剤、例えば、抗体分子は、複数の異なるＨＡ分子に結合し、任意選択で、異なるＨＡ分子を含むウイルスを中和する。ある実施形態では、結合剤は、第１のＨＡに結合し、インフルエンザＡ群１由来の第２のＨＡに結合し、任意選択で、第１または第２のＨＡ分子を含むウイルスを中和する。ある実施形態では、結合剤は、インフルエンザＡ群１ウイルス由来の第１のＨＡに結合し、インフルエンザＡ群２ウイルス由来の第２のＨＡに結合し、任意選択で、異なるＨＡ分子を含むウイルスを中和する。ある実施形態では、結合剤は、インフルエンザＡ群１または２ウイルス由来の第１のＨＡに結合し、インフルエンザＢウイルス由来のＨＡに結合し、任意選択で、異なるＨＡ分子を含むウイルスを中和する。ある実施形態では、結合剤は、例えば、異なる群に由来する少なくとも２つの異なるクレードまたはクラスターのウイルスに結合し、またある実施形態では、それらを中和する。ある実施形態では、結合剤は、本明細書で開示される群１および／または群２の全てまたは実質的に全ての株に結合し、またある実施形態では、それらを中和する。ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、群１のＨ１、例えば、Ｈ１ａまたはＨ１ｂクラスター由来の少なくとも１種の株と、群２のＨ３またはＨ７クラスター由来の少なくとも１種の株とに結合し、またある実施形態では、それらを中和する。ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、群１のＨ１、例えば、Ｈ１ａまたはＨ１ｂクラスター由来の少なくとも１種の株と、少なくとも１種のインフルエンザＢ株とに結合し、またある実施形態では、それらを中和する。ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、群２のＨ３またはＨ７クラスター由来の少なくとも１種の株と、少なくとも１種のインフルエンザＢ株とに結合し、またある実施形態では、それらを中和する。ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、群１のＨ１、例えば、Ｈ１ａまたはＨ１ｂクラスター由来の少なくとも１種の株と、群２のＨ３またはＨ７クラスター由来の少なくとも１種の株と、少なくとも１種のインフルエンザＢ株とに結合し、またある実施形態では、それらを中和する。一部の実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、特定の宿主、例えば、トリ、ラクダ、イヌ、ネコ、ジャコウネコ、ウマ、ヒト、マウス、ブタ、トラ、または他の哺乳動物もしくは鳥類に結合し、任意選択で、それらの感染を中和または媒介する。
本明細書で使用される「組合せ療法」という用語は、例えば、本明細書で開示される少なくとも１種の結合剤、例えば、抗体分子が、被験体、例えば、ヒト被験体に投与される、複数の薬剤の投与を指す。被験体への薬剤の導入は、異なる時点で行われてもよい。ある実施形態では、薬剤は、重複するレジメンで、または、被験体が両方の薬剤に同時に曝露されるように、または、被験体の応答がいずれかの薬剤の単独投与で見られるものよりも良好であるように投与される。
本明細書で使用される「エスケープ変異体」とは、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子による中和に対して耐性である、変異したインフルエンザ株である。ある実施形態では、エスケープ変異体は、結合剤、例えば、抗体分子による中和に耐性であるが、その親株は、結合剤、例えば、抗体分子により中和される。
本明細書で使用される「汎流行インフルエンザ」とは、変異による、またはインフルエンザＡの異なる株の再集合による株の出現による、インフルエンザ株のヒト適合に起因して生じる、新たなウイルス株を指す。結果として生じる汎流行株は、以前の株と顕著に異なり、ほとんどの人々は、既存の免疫をほとんどまたは全く有しない。症状および合併症は、季節性インフルエンザに典型的な症状および合併症より重度かつより高頻度でありうる。過去の汎流行インフルエンザウイルスの例は、例えば、２００９年のＨ１Ｎ１「ブタインフルエンザ」、１９５７～５８年のＨ２Ｎ２「アジアのインフルエンザ（Ａｓｉａｎ ｆｌｕ）」、および１９６８年のＨ３Ｎ２インフルエンザ株を含む。
天然の供給源から得られた抗体分子、例えば、抗体、免疫原、または一般にポリペプチドとの関連で、本明細書で使用される「精製された」および「単離された」という用語は、細胞内に存在する天然の供給源からの夾雑物質、例えば、天然の供給源からの細胞物質、例えば、細胞残屑、膜、オルガネラ、核酸の大部分、またはタンパク質を実質的に含まない、分子を指す。したがって、単離されたポリペプチド、例えば、抗体分子は、約３０％、２０％、１０％、５％、２％、または１％未満（乾燥重量による）の細胞物質および／または夾雑物質を有するポリペプチドの調製物を含む。「精製された」および「単離された」という用語は、化学的に合成された種、例えば、抗体分子、または免疫原との関連で使用される場合、分子の合成に関与する化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含まない種を指す。
本明細書で使用される結合剤、例えば、抗体分子の調製物は、本明細書で記載される結合剤、例えば、抗体分子の、複数の分子を含む。ある実施形態では、この結合剤、例えば、抗体分子は、重量または数により、調製物の、または調製物の有効成分の、少なくとも６０、７０、８０、９０、９５、９８、９９、９９．５、または９９．９％を構成する。ある実施形態では、この結合剤は、重量または数により、調製物の、または調製物の有効成分、もしくはポリペプチド成分、もしくは抗体分子の、少なくとも６０、７０、８０、９０、９５、９８、９９、９９．５、または９９．９％を構成する、抗体分子である。ある実施形態では、結合剤は抗体分子であり、調製物は、重量または数により、３０、２０、１０、５、２、１、または０．５％以下の夾雑物、例えば、抗体分子の供給源に由来するかもしくは抗体分子の調製で使用される反応物、溶媒、前駆体、または他の種、例えば、抗体分子を産生するために使用される細胞、反応混合物、または他の系に由来する種を含有する。
本明細書で使用される「感染を予防する」という用語は、インフルエンザへと曝露される前（例えば、１日間、２日間、１週間、２週間、３週間、もしくは１カ月間、またはこれを超えて（ｏｆ ｍｏｒｅ））に、先行して被験体に抗体を与える場合、被験体（例えば、ヒト）が、インフルエンザに感染する可能性が低いことを意味する。
本明細書で使用される「季節性インフルエンザ」とは、近年にヒト集団において循環している株と同一であるか、またはそれと密接に関連した株であり、したがって、ほとんどの人々が、それに対して少なくとも部分的に免疫がある。このような株は、重度の疾患を引き起こす可能性が低い。症状は、発熱、咳、鼻汁、および筋肉痛を含む場合があり、稀な事例では、肺炎などの合併症から死に至る場合がある。大流行は、毎年、通例は秋および冬、そして温暖な気候において、予測可能な季節的パターンの後に起こる。季節性インフルエンザに起因する感染は、一般には、流行性感冒（ｆｌｕ）と称される。
本明細書で使用される特異的結合とは、結合剤、例えば、抗体分子が、１０－５ｎＭと等しいかまたはこれ未満のＫＤで、その抗原に結合することを意味する。ある実施形態では、抗体は、１０－６、１０－７、１０－８、１０－９、１０－１０、１０－１１、もしくは１０－１２ｎＭと等しいかまたはこれ未満のＫＤで、その抗原に結合する。
本明細書で使用される「治療有効量」という用語は、被験体にとって好ましい転帰をもたらす、治療剤、例えば、結合剤、例えば、抗体分子の量を指す。ある実施形態では、治療有効量は、被験体の集団に投与されたとき、治療効果または利益、例えば、影響もしくは症状の減弱、またはそれらの顕在化の予防と統計的に相関しうる。ある実施形態では、治療有効量は、事前選択された、または妥当な、ベネフィット／リスク比ももたらす量である。ある実施形態では、治療有効量は、疾患、障害、もしくは状態の１つまたは複数の特色、症状、もしくは特徴の発生率および／または重症度を低減するため、および／またはそれらの発症を遅延させるために有効な量である。治療有効量は、１つまたは複数の単位用量を含みうる投与レジメンにおいて投与することができる。
本明細書で使用される「感染を処置する」という用語は、ある実施形態では、インフルエンザに感染しており、かつインフルエンザ（例えば、流行性感冒）の症状を経験する被験体（例えば、ヒト）が、抗体分子を投与した場合に、抗体を投与していない場合よりも重症な症状になりにくいこと、および／またはより急速に回復することを意味する。ある実施形態では、感染を処置する場合、被験体においてウイルスを検出するアッセイは、感染のための有効な処置の後では、より少数のウイルスを検出する。例えば、本明細書で記載される抗体分子などの抗体分子を使用する診断アッセイは、ウイルス感染の有効な処置のために、抗体分子を投与した後では、患者の生物学的試料中に、より少ないウイルスを検出するか、またはウイルスを検出しない。ＰＣＲ（例えば、ｑＰＣＲ）など、他のアッセイもまた、患者における処置をモニタリングし、患者におけるウイルス感染の処置後における存在、例えば、存在の減少（または非存在）を検出するのに使用することができる。処置は、例えば、特定の疾患、障害、および／または状態（例えば、インフルエンザ）の影響もしくは症状、特色、および／または原因の、１つまたは複数の顕在化を、部分的に、または完全に、緩和する場合もあり、軽快させる場合もあり、和らげる場合もあり、阻害する場合もあり、これらの重症度を低減し、かつ／または発生率を低減し、任意選択で、これらの発症を遅延させる場合もある。ある実施形態では、処置は、関連する疾患、障害、および／もしくは状態の徴候を呈さない被験体の処置、ならびに／または疾患、障害、および／もしくは状態の早期の徴候だけを呈する被験体の処置である。ある実施形態では、処置は、関連する疾患、障害、および／または状態の、１つまたは複数の確立した徴候を呈する被験体の処置である。ある実施形態では、処置は、インフルエンザを患うと診断された被験体の処置である。
２つの配列の間の「相同性」または「配列同一性」または「同一性」（本明細書では、それらの用語は互換的に使用される）の計算は、以下の通りに実施することができる。最適な比較を目的として、配列をアライメントする（例えば、最適なアライメントのために、第１および第２のアミノ酸配列または核酸配列の一方または両方に、ギャップを導入することができ、非相同配列は、比較を目的とする場合、無視することができる）。ギャップペナルティーを１２とし、ギャップ伸長ペナルティーを４とし、フレームシフトギャップペナルティーを５とする、Ｂｌｏｓｓｕｍ ６２スコアリング行列を用い、ＧＣＧソフトウェアパッケージ内のＧＡＰプログラムを使用して、最適なアライメントを最良スコアとして決定する。次いで、対応するアミノ酸位置またはヌクレオチド位置におけるアミノ酸残基またはヌクレオチドを比較する。第１の配列内の位置が、第２の配列内の対応する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドにより占有されていれば、分子は、この位置において同一である（本明細書で使用される場合、アミノ酸または核酸の「同一性」は、アミノ酸または核酸の「相同性」と同等である）。２つの配列の間の同一性パーセントとは、配列により共有される同一な位置の数の関数である。
製剤
本明細書で記載される結合剤、例えば、抗体分子は、例えば、インフルエンザの処置または予防のための、例えば、医薬組成物として製剤化することができる。
典型的に、医薬組成物は、薬学的に許容されるキャリアを含む。本明細書で使用される「薬学的に許容されるキャリア」は、生理学的に適合性である、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤、および吸収遅延剤などを含む。
「薬学的に許容される塩」とは、親化合物の所望の生物学的活性を保持し、所望されない毒性学的作用を一切与えない塩を指す（例えば、Ｂｅｒｇｅ， Ｓ．Ｍ．ら（１９７７年）、Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｓｃｉ．、６６巻：１～１９頁を参照されたい）。このような塩の例は、酸付加塩および塩基付加塩を含む。酸付加塩は、無毒の無機酸、例えば、塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸などのほか、無毒の有機酸、例えば、脂肪族のモノカルボン酸およびジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、芳香族酸、脂肪族および芳香族のスルホン酸などに由来するものを含む。塩基付加塩は、アルカリ土類金属、例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなどのほか、無毒の有機アミン、例えば、Ｎ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン、Ｎ－メチルグルカミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、プロカインなどに由来するものを含む。
本明細書で記載される抗体分子を含む組成物は、当技術分野で公知の方法に従って製剤化することができる。薬学的製剤化は十分に確立された技術であり、Ｇｅｎｎａｒｏ（編）、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ， Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ（２０００）（ＩＳＢＮ：０６８３３０６４７２）；Ａｎｓｅｌら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ、第７版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（１９９９）（ＩＳＢＮ：０６８３３０５７２７）；およびＫｉｂｂｅ（編）、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ、第３版（２０００）（ＩＳＢＮ：０９１７３３０９６Ｘ）にさらに記載される。
医薬組成物は、様々な形態でありうる。これらは、例えば、溶液（例えば、注射用溶液および注入用溶液）、分散物または懸濁物、錠剤、丸剤、粉末、リポソームおよび坐剤など、液体剤形、半固体剤形、および固体剤形を含む。形態は、投与および治療適用の意図される方式に依存し得る。典型的には、本明細書に記載の薬剤のための組成物は、注射用溶液または注入用溶液の形態でありうる。
このような組成物は、非経口方式（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内注射）によって投与することができる。本明細書で使用される「非経口投与」および「非経口投与された」という語句は、通例、注射による、限定せずに述べると、静脈内、筋肉内（ＩＭ）、動脈内、髄腔内、関節包内、眼窩内、心内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨内注射によるまたは注入による、を含む腸内投与および局所投与以外の投与方式を意味する。
医薬組成物は、滅菌注射用形態（例えば、皮下注射または静脈内注入に適切な形態）で提供されてもよい。ある実施形態では、医薬組成物は、注射または局所適用に適切な液体剤形で提供される。一部の実施形態では、医薬組成物は、乾燥形態で、例えば、粉末（例えば、凍結乾燥され、かつ／または滅菌された調製物）として提供される。医薬組成物は、安定性を増強する条件下で、例えば、窒素下または真空下で提供されてもよい。乾燥材料は、注射前に水性希釈剤（例えば、水、緩衝液、塩溶液など）を用いて復元されてもよい。
ある実施形態では、抗ＨＡ抗体を含有する医薬組成物は、鼻腔内投与される。別の実施形態では、抗ＨＡ抗体を含有する医薬組成物は、吸入により、例えば、経口または経鼻吸入により投与される。
ある実施形態では、医薬組成物は、例えば、液体、スプレー、またはエアロゾルとして、例えば、局所適用による、例えば、液体もしくは滴剤による、または吸入による、頬側、経口、または経鼻送達に適切である。ある実施形態では、医薬調製物は、例えば、吸入またはエアロゾルによる送達に適切な、複数の粒子を含む。ある実施形態では、平均粒子サイズは４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３ミクロンである。ある実施形態では、医薬調製物は、例えば、吸入またはエアロゾルによる送達に適切な、乾燥粉末として製剤化される。ある実施形態では、医薬調製物は、湿潤剤、例えば、水、食塩液、または生理的ｐＨを有する他の液体を含めることにより、湿式粉末として製剤化される。ある実施形態では、医薬調製物は、例えば、鼻腔または口腔への送達に適切な、滴剤として提供される。
ある実施形態では、医薬組成物は、送達デバイス、例えば、シリンジ、ドロッパーもしくはドロッパーボトル、吸入器、または定量デバイス、例えば、吸入器内に配置される。ある実施形態では、医薬組成物は、容器、例えば、静脈内（ＩＶ）溶液バッグ内に配置される。
ある実施形態では、医薬組成物は、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子の重鎖および抗ＨＡ抗体分子の軽鎖をコードするベクター、例えば、アデノウイルス随伴ウイルス（ＡＡＶ）系ベクターを含有する。ベクターを含有する組成物は、例えば、注射、例えば、ＩＭ注射により、患者などの被験体に投与することができる。例えば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターの制御下で抗ＨＡ抗体をコードする遺伝子は、体内で発現し、組換え抗ＨＡ抗体分子が循環中に導入される。例えば、Ｂａｌａｚｓら、Ｎａｔｕｒｅ、３０巻：４８１号：８１～８４頁、２０１１年を参照されたい。
医薬組成物は、滅菌であるものとし、製造条件下および保管条件下で安定であるものとすることが典型的である。医薬組成物は、それが投与のための規制基準および業界基準を満たすことを保証するために試験され得る。
組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、分散物、リポソーム、または高い薬物濃度に適する、他の秩序化構造として製剤化することができる。滅菌注射用溶液は、要求に応じて、上記で数え上げた成分のうちの１つまたは組み合わせと共に、適切な溶媒中に、要求される量で、本明細書に記載の薬剤を組み込むことに続く、濾過滅菌により調製することができる。一般に、分散物は、本明細書に記載の薬剤を、基本分散媒と、上記で数え上げた成分に由来する要求される他の成分とを含有する滅菌ビヒクルへと組み込むことにより調製する。滅菌注射用溶液を調製するための滅菌粉末の場合、調製の典型的な方法は、本明細書に記載の薬剤に、あらかじめ滅菌濾過されたその溶液に由来する、任意のさらなる所望の成分を加えた粉末をもたらす、真空乾燥および凍結乾燥である。溶液の適正な流動度は、例えば、レシチンなど、コーティングの使用により維持することができ、分散物の場合は、要求される粒子サイズの維持により維持することができ、界面活性剤の使用により維持することができる。注射用組成物の持続吸収は、組成物中に、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチンを組み入れることによりもたらすことができる。
医薬組成物は、バルクで、単回単位用量として、かつ／または複数の単回単位用量として、提供されてもよく、調製されてもよく、パッケージングされてもよく、かつ／または販売されてもよい。典型的に、バルク調製物は、少なくとも２、５、１０、２０、５０、または１００単位用量を含有する。単位用量とは、典型的に、単回の投与で患者に導入される量である。ある実施形態では、単位用量の一部分だけが導入される。ある実施形態では、小さな複数の、例えば、１．５、２、３、５、または１０回ほどの単位用量が投与される。有効成分の量は、一般に、被験体に投与される用量、および／または例えば、このような用量の２分の１もしくは３分の１など、このような用量の慣習的な割合に等しい。
結合剤、例えば、抗体分子の製剤は、例えば、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子と、バッファと、等張化剤とを含みうる。製剤のｐＨは、一般にｐＨ５．５～７．０である。
一部の実施形態では、製剤は、液体製剤である。一部の実施形態では、製剤は、液体として保存される。他の実施形態では、製剤は、凍結乾燥製剤である。ある特定の実施形態では、製剤は、液体として調製され、次いで、例えば、凍結乾燥または噴霧乾燥により乾燥され、その後保存される。乾燥された製剤は、乾燥化合物として、例えば、エアロゾルもしくは粉末として使用されてもよく、または、例えば、水、緩衝液、もしくは他の適切な液体を使用して、その元の濃度もしくは別の濃度に復元されてもよい。
「復元された」製剤とは、復元された製剤中にタンパク質が分散するように、凍結乾燥されたタンパク質製剤を希釈剤中に溶解させることにより調製されたものである。復元された製剤は、目的のタンパク質で処置される患者への投与（例えば、非経口投与）に適切であり、本発明のある特定の実施形態では、皮下投与に適切なものでありうる。本明細書における目的の「希釈剤」は、薬学的に許容される（ヒトへの投与に安全かつ無毒な）ものであり、復元された製剤の調製に有用である。例示的な希釈剤は、滅菌水、静菌注射用水（ＢＷＦＩ）、ｐＨ緩衝溶液（例えば、リン酸緩衝食塩液）、滅菌食塩溶液、リンゲル液、またはデキストロース溶液を含む。
「凍結乾燥保護剤」とは、目的のタンパク質と組み合わせると、凍結乾燥および後の保存に際し、タンパク質の化学的および／または物理的な不安定性を顕著に防止または低減する分子である。例示的な凍結乾燥保護剤は、スクロースまたはトレハロースなどの糖類；グルタミン酸一ナトリウムまたはヒスチジンなどのアミノ酸；ベタインなどのメチルアミン；硫酸マグネシウムなどのリオトロピック塩；三価アルコールまたは高級糖アルコール、例えば、グリセリン、エリスリトール、グリセロール、アラビトール、キシリトール、ソルビトール、およびマンニトールなどのポリオール；プロピレングリコール；ポリエチレングリコール；プルロニック；ならびにこれらの組合せを含む。典型的に凍結乾燥保護剤は、トレハロースまたはスクロースなどの非還元糖である。凍結乾燥保護剤は凍結乾燥前の製剤に「凍結防止量」で添加され、これは、凍結防止量の凍結乾燥保護剤の存在下では、タンパク質を凍結乾燥した後、凍結乾燥および保存に当たり、タンパク質がその物理的および化学的な安定性ならびに完全性を本質的に保持することを意味する。
「増量剤」とは、凍結乾燥された混合物に量（ｍａｓｓ）を加え、凍結乾燥されたケークの物理的構造に寄与する（例えば、開孔構造を維持する本質的に均一な凍結乾燥されたケークの生成を容易にする）化合物である。例示的な増量剤は、マンニトール、グリシン、ポリエチレングリコール、およびソルビトール（ｘｏｒｂｉｔｏｌ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＨＡ抗体分子の精製プロセスは、液体としての保存に適切な製剤中に、抗ＨＡ抗体分子を移動させることができるようにデザインされる。他の実施形態では、抗ＨＡ抗体分子の精製プロセスは、凍結した液体として長期保存され、その後に凍結乾燥される製剤中に、抗ＨＡ抗体分子を移動させることができるようにデザインされる。
一部の実施形態では、製剤は、特定の濃度のタンパク質と共に凍結乾燥される。凍結乾燥製剤は次いで、所望の濃度、一般には、凍結乾燥前の濃度と比較して同じまたはより高い濃度まで、元の製剤成分を再溶解するために、必要に応じて、適切な希釈剤（例えば、水）を用いて復元されうる。凍結乾燥製剤は、元々凍結乾燥された液体の体積と比べた、凍結乾燥物（ｌｙｏｐｈｉｌａｔｅ）に添加された水または希釈剤の量に応じて、元の濃度（例えば、凍結乾燥前）とは異なる濃度を有する製剤を生成するために、復元されてもよい。適切な製剤は、抗体完全性の１つまたは複数のパラメータをアッセイすることにより同定することができる。アッセイされるパラメータは、一般に、ＨＭＷ種の百分率またはＬＭＷ種の百分率である。
ＨＭＷ種またはＬＭＷ種の百分率は、製剤中の全タンパク質含有量の百分率として、または経時的な（例えば、保存中の）百分率増加の変化のいずれかとして決定される。許容される製剤中のＨＭＷ種の全百分率は、２℃～５０℃で（例えば、４℃～４５℃で、４℃～２５℃で、４℃～１５℃で、約４℃で、約２５℃で、または約４５℃で）少なくとも１週間、２週間、１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間、もしくは１年間にわたり、凍結乾燥物もしくは液体として保存した後に、ＨＭＷ種が１０％以下（例えば、５％以下、４％以下、３％以下、２％以下、または１％以下）であるか、または、２℃～５０℃で（例えば、４℃～４５℃で、４℃～２５℃で、４℃～１５℃で、約４℃で、約２５℃で、もしくは約４５℃で）少なくとも１週間、２週間、１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間、もしくは１年間にわたり、凍結乾燥物もしくは液体として保存した後に、ＬＭＷ種が約１０％以下である。ある実施形態では、ＨＭＷ種の全百分率は、５％以下である。別の実施形態では、ＨＭＷ種の全百分率は、３％以下である。「約」とは、言及される数値の±２０％を意味する。したがって、例えば、「約２０℃」は、１６℃～２４℃を意味する。
典型的に、安定性プロファイルは、冷凍された生成物では２℃～８℃、室温の生成物では２５℃において、１０％未満のＨＭＷ／ＬＭＷである。ＨＭＷ種またはＬＭＷ種は、凍結乾燥物として保存された製剤において、該凍結乾燥物が復元された後にアッセイされる。４５℃は、例えば、輸送中の生成物の移動中に生じうる、非保存条件への短期曝露に対する安定性を調べ、安定性を決定するために一般に使用される、加速条件である。
アッセイされるパラメータがＨＭＷ種またはＬＭＷ種の百分率変化である場合、保存後の一方または両方の種における全タンパク質のパーセントが、保存前（例えば、製剤の調製の際）の一方または両方の種における全タンパク質のパーセントと比較される。百分率の差違が決定される。概して、液体製剤中のＨＭＷ種またはＬＭＷ種におけるタンパク質の百分率の変化は、２℃～８℃（例えば、４℃）または２５℃で、約１週間、２週間、１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間、または１２カ月間、１８、または２４カ月間にわたる保存後に、１０％以下、例えば、約８％以下、約７％以下、約６％以下、約５％以下、約４％以下、または約３％以下である。ある実施形態では、ＨＭＷ種の増加は、１年当たり２％以下、典型的には１％以下である。「約」とは、言及される数値の±２０％を意味する。したがって、約１０％は８％～１２％を意味する。凍結乾燥された生成物として保存された製剤は、一般に、２℃～８℃（例えば、４℃）または２５℃で、約１週間、２週間、１カ月間、３カ月間、６カ月間、９カ月間、または１２カ月間、１８、または２４カ月間にわたる保存後の復元の後に、約５％未満、約４％未満、約３％未満、もしくは約２％未満のＨＭＷ種、または約５％未満、約４％未満、約３％未満、もしくは約２％未満のＬＭＷ種を有する。
抗ＨＡ抗体分子の製剤は、例えば、少なくとも２週間、少なくとも１カ月、少なくとも２カ月、少なくとも３カ月、少なくとも４カ月、少なくとも６カ月、少なくとも９カ月、少なくとも１年または少なくとも２年にわたって液体として保存することができる。抗ＨＡ抗体分子の製剤は、例えば、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年または少なくとも５年にわたって凍結乾燥物として保存することができる。ある実施形態では、製剤は凍結脂質の形態であるか、または凍結脂質として保存される。
製剤の成分および製剤中の抗ＨＡ抗体分子、例えば、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子の完全性をアッセイする方法に関連するさらなる詳細を、以下に提示する。
製剤中の抗ＨＡ抗体分子濃度は、一般に、約０．１ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの間、例えば、約０．５ｍｇ／ｍＬから約１００ｍｇ／ｍＬの間、約０．５ｍｇ／ｍＬから約１．０ｍｇ／ｍＬの間、約０．５ｍｇ／ｍＬから約４５ｍｇ／ｍＬの間、約１ｍｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍＬの間、約５ｍｇ／ｍＬから２０ｍｇ／ｍＬの間、約８ｍｇ／ｍＬから約１６ｍｇ／ｍＬの間、約１０ｍｇ／ｍＬから約４０ｍｇ／ｍＬの間、約１０ｍｇ／ｍＬから約５０ｍｇ／ｍＬの間、約２０ｍｇ／ｍＬから６０ｍｇ／ｍＬの間、約２５ｍｇ／ｍＬから５０ｍｇ／ｍＬの間、約５０ｍｇ／ｍＬから約１００ｍｇ／ｍＬの間、約１００ｍｇ／ｍＬから約２００ｍｇ／ｍＬの間または約２００ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの間である。範囲との関連では、「約」は、その範囲の言及される下限の数値の－２０％と、その範囲の言及される上限の数値の＋２０％とを意味する。範囲、例えば、約１０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬとの関連では、これは、８ｍｇ／ｍＬから１２０ｍｇ／ｍＬの間を意味する。一部の場合では、製剤中の抗体濃度は、例えば、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子、例えば、Ａｂ ０４４が、１ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／ｍＬの間、例えば、２ｍｇ／ｍＬから８０ｍｇ／ｍＬの間、５ｍｇ／ｍＬから６０ｍｇ／ｍＬの間、１０ｍｇ／ｍＬから５０ｍｇ／ｍＬの間、１５ｍｇ／ｍＬから４０ｍｇ／ｍＬの間、２０ｍｇ／ｍＬから３０ｍｇ／ｍＬの間でありうる。このような抗体製剤は、治療剤として使用することができる。したがって、製剤中の抗ＨＡ抗体分子の濃度は、処置されている被験体に忍容され、投与方法に適切な製剤の体積でかかる投与量をもたらすのに十分である。１つの非限定的な例では、体積制限が小さい（例えば、注射１回当たり約１ｍｌ～１．２ｍｌの）場合に、高い投与量を皮下に供給するためには、抗体の濃度は、一般に、少なくとも２５ｍｇ／ｍＬまたはこれを超える、例えば、１００ｍｇ／ｍＬまたはこれを超える、例えば、１００ｍｇ／ｍＬ～５００ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬ、または１００ｍｇ／ｍＬ～１５０ｍｇ／ｍＬである。このような高濃度は、例えば、適切な体積の希釈剤（例えば、注射用滅菌水、緩衝食塩液）中で凍結乾燥製剤を復元することにより、達成することができる。一部の場合では、復元された製剤は、２５ｍｇ／ｍＬから５００ｍｇ／ｍＬの間、例えば、約１００ｍｇ／ｍＬから５００ｍｇ／ｍＬの間（例えば、１００ｍｇ／ｍＬ、１２５ｍｇ／ｍＬ、１５０ｍｇ／ｍＬ、１７５ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍＬ、２５０ｍｇ／ｍＬ、２７５ｍｇ／ｍＬ、３００ｍｇ／ｍＬ、３５０ｍｇ／ｍＬ、３７５ｍｇ／ｍＬ、４００ｍｇ／ｍＬ、４２５ｍｇ／ｍＬ、４５０ｍｇ／ｍＬ、４７５ｍｇ／ｍＬから５００ｍｇ／ｍＬ）の濃度を有する。吸入による送達の場合、製剤は一般に、限定された体積で十分な用量の吸気用エアロゾルをもたらすために、いくらか濃縮されている（例えば、約２５ｍｇ／ｍＬから５００ｍｇ／ｍＬの間、例えば、約１００ｍｇ／ｍＬから５００ｍｇ／ｍＬの間）。一部の場合では、低濃度（例えば、約０．０５ｍｇ／ｍＬから１ｍｇ／ｍＬの間）が使用される。当技術分野では、送達される投与量を送達方法に適合させるための方法、例えば、ジェットネブライザまたは定量エアロゾルが公知である。
緩衝液
本明細書で記載される製剤のｐＨは、一般に、約ｐＨ５．０から約７．０の間、例えば、約ｐＨ５．５～約６．５、約ｐＨ５．５～約６．０、約ｐＨ６．０～約６．５、ｐＨ５．５、ｐＨ６．０、またはｐＨ６．５である。概して、溶液をｐＨ５．５～６．５に維持することができる緩衝液、例えば、約６．０のｐＫａを有する緩衝液が、製剤の調製のために使用される。適切な緩衝液は、限定せずに述べると、２－モルホリノエタンスルホン酸（ＭＥＳ）、ホスフェート、およびシトレート（例えば、クエン酸－リン酸ナトリウム）を含む。緩衝液の濃度は、約５ｍＭから約１００ｍＭの間、例えば、約２５ｍＭ～約５０ｍＭである。一部の場合では、クエン酸－リン酸ナトリウム緩衝液が、約４０ｎＭの濃度で使用される。例えば、約６．０以外、例えば、６．０未満の所望のｐＨに関しては、他の緩衝液は、ヒスチジン緩衝液、酢酸緩衝液、またはコハク酸緩衝液を含みうる。他の場合では、ヒスチジン緩衝液が、最大６０ｎＭ、例えば、約５ｍＭまたは約１０ｍＭの濃度で使用される。他の場合では、酢酸緩衝液またはコハク酸緩衝液が、約５ｍＭまたは約１０ｍＭの濃度で使用される。
等張化剤
等張化剤は当技術分野で公知であり、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、またはデキストロースを含む。
等張化剤は、一般に、約５０ｍＭ～約２００ｍＭの濃度で使用される。例えば、等張化剤は、約５０ｍＭ～約２００ｍＭ、例えば、約６０ｍＭ～約１９０ｍＭ、約７０ｍＭ～約１８０ｍＭ、約８０ｍＭ～約１７０ｍＭ、約９０ｍＭ～約１６０ｍＭ、約１００ｍＭ～約１５０ｍＭ、約１４５ｍＭ～約１５５ｍＭ、約１４０ｍＭ～約１６０ｍＭ、約１３５ｍＭ～約１６５ｍＭ、約１３０ｍＭ～約１７０ｍＭ、約１２０ｍＭ～約１８０ｍＭ、約１１０ｍＭ～約１９０ｍＭ、約１００ｍＭ～約２００ｍＭ、約５０ｍＭ～約１００ｍＭ、約１００ｍＭ～約１５０ｍＭまたは約１５０ｍＭ～約１２０ｍＭ、例えば、約２００ｍＭもしくはそれ未満、約１５０ｍＭもしくはそれ未満、約１００ｍＭもしくはそれ未満または約７５ｍＭもしくはそれ未満、例えば、約５０ｍＭ、約６０ｍＭ、約７０ｍＭ、約８０ｍＭ、約９０ｍＭ、約１００ｍＭ、約１１０ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１５０ｍＭ、約１６０ｍＭ、約１７０ｍＭ、約１８０ｍＭ、約１９０ｍＭまたは約２００ｍＭの濃度で使用され得る。
ある実施形態では、等張化剤は、約５０～約２００ｎＭ、約７５ｍＭ～約１５０ｍＭ、約１２０ｍＭ～約１８０ｍＭ、例えば、約１４０～約１６０ｍＭ、例えば、約１５０ｍＭの濃度で使用される。ある実施形態では、等張化剤は、塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、等張化剤は、塩化ナトリウムを含み、約１４０～約１６０ｍＭ、例えば、約１５０ｍＭの濃度で使用される。
製剤中で使用される等張化剤は、一般に、約２５０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２６０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３４０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２７０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３３０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２８０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３２０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２８５ｍＯｓｍ／Ｌ～約３１０ｍＯｓｍ／Ｌまたは約２９０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３００ｍＯｓｍ／Ｌ、例えば、約２５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２６０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２７０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２８０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２９０ｍＯｓｍ／Ｌ、約３００ｍＯｓｍ／Ｌ、約３１０ｍＯｓｍ／Ｌ、約３２０ｍＯｓｍ／Ｌ、約３３０ｍＯｓｍ／Ｌ、約３４０ｍＯｓｍ／Ｌまたは約３５０ｍＯｓｍ／Ｌの張性（またはオスモル濃度）をもたらし得る。
ある実施形態では、等張化剤は、約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約３４０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２５０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約３３０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２６０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約３２０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２７０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約３１０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２８０ｍＯｓｍ／ｋｇ～約３００ｍＯｓｍ／ｋｇまたは約２８５ｍＯｓｍ／ｋｇ～約２９５ｍＯｓｍ／ｋｇ、例えば、約２４０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２６０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２７０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２８０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２９０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ、約３１０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約３２０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約３３０ｍＯｓｍ／ｋｇまたは約３４０ｍＯｓｍ／ｋｇの張性（またはオスモル濃度）をもたらす。
「等張性（ｉｓｏｔｏｎｉｃ）」とは、目的の製剤が、ヒトの血液と本質的に同じ浸透圧を有することを意味する。等張性製剤は、一般に、例えば、約２５０～３５０ｍＯｓｍ／Ｌの浸透圧を有する。等浸透圧性（ｉｓｏｔｏｎｉｃｉｔｙ）は、例えば、蒸気圧または氷結型の浸透圧計を使用して測定することができる。
界面活性剤
ある特定の実施形態では、界面活性剤が製剤に含まれる。界面活性剤の例は、限定せずに述べると、非イオン性界面活性剤、例えば、ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、またはポリソルベート８５）；ポロクサマー（例えば、ポロクサマー１８８）；Ｔｒｉｔｏｎ（商標）；ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）；ラウリル（ｌａｕｒｅｌ）硫酸ナトリウム；オクチルグリコシドナトリウム；ラウリルスルホベタイン、ミリスチルスルホベタイン、リノレイルスルホベタイン、ステアリルスルホベタイン、ラウリルサルコシン、ミリスチルサルコシン、リノレイルサルコシン、ステアリルサルコシン、リノレイルベタイン、ミリスチルベタイン、セチルベタイン、ラウロアミドプロピルベタイン、コカミドプロピルベタイン、リノレアミドプロピルベタイン、ミリスタミドプロピルベタイン、パルミドプロピルベタイン、イソステアラミドプロピルベタイン（例えば、ラウロアミドプロピル）、ミリスタミドプロピルジメチルアミン、パルミドプロピルジメチルアミン、またはイソステアラミドプロピルジメチルアミン；メチルココイルタウリン酸ナトリウム、またはメチルオフェイルタウリン酸二ナトリウム（ｄｉｓｏｄｉｕｍ ｍｅｔｈｙｌ ｏｆｅｙｌ－ｔａｕｒａｔｅ）；およびＭｏｎａｑｕａｔ（商標）シリーズ（Ｍｏｎａ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｐａｔｅｒｓｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、ポリエチルグリコール、ポリプロピルグリコール、ならびにエチレングリコールおよびプロピレングリコールのコポリマー（例えば、プルロニック、ＰＦ６８）を含む。
添加される界面活性剤の量は、例えば、抗ＨＡ抗体分子製剤の凍結乾燥物の復元後、ＨＭＷ種またはＬＭＷ種のＳＥＣ－ＨＰＬＣを使用してアッセイした場合に許容されるレベルまで、復元されたタンパク質の凝集を低減し、かつ、微粒子の形成を最小限に抑えるようなものである。界面活性剤の添加はまた、抗ＨＡ抗体分子の凍結乾燥製剤の復元時間を低減し、かつ溶液の脱気を補助することも示されている。例えば、界面活性剤は、製剤（液体または凍結乾燥前）に、約０．００１％～０．５％、例えば、約０．００５％～０．０５％、約０．００５％～約０．２％、および約０．０１％～０．２％の量で存在してよい。
凍結保護剤
凍結保護剤は当技術分野で公知であり、例えば、スクロース、トレハロース、およびグリセロールを含む。生物系において低い毒性を呈する凍結保護剤が一般に使用される。凍結保護剤は、約０．５％～１５％、約０．５％～２％、約２％～５％、約５％～１０％、約１０％～１５％、および約５％（重量／体積）の濃度で製剤中に含まれる。
抗ＨＡ抗体分子製剤中の緩衝液として使用することができるヒスチジン緩衝液は、凍結保護剤特性を有し得る。本発明の一部の実施形態では、ヒスチジン緩衝液は、糖、例えば、スクロースなどの凍結保護剤と併せて使用される。本発明の製剤は、任意の実質的な量におけるヒスチジンの使用を具体的に除外する場合があり、例えば、製剤の緩衝液成分も凍結保護剤成分もヒスチジンではない。
製剤の粘度は一般に、製剤の投与経路と適合性である粘度である。一部の実施形態では、製剤の粘度は、１ｃＰから２ｃＰの間、または水と同様（約１ｃＰ）である。他の実施形態では、製剤の粘度は、約５ｃＰから約４０ｃＰの間である。具体的な実施形態では、製剤の粘度は、１ｃＰ、２ｃＰ、３ｃＰ、４ｃＰ、５ｃＰ、１０ｃＰ、１５ｃＰ、２０ｃＰ、２５ｃＰ、３０ｃＰ、３５ｃＰ、または４０ｃＰである。
製剤への添加
製剤は、滅菌溶液または滅菌凍結乾燥物として保存される。製剤中の微生物の作用の予防はまた、製剤中に少なくとも１種の抗菌剤および／または抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどを含めることによって達成することができる。一部の場合では、凍結乾燥物は、静菌水（例えば、０．９％のベンジルアルコールを含有する水）を用いて復元される。製剤中に防腐剤を含めることの検討事項は、具体的な製剤および送達方法と適合性である防腐剤を同定する方法と同様に当技術分野で公知である（例えば、Ｇｕｐｔａら（２００３年）、ＡＡＰＳ Ｐｈａｒｍ． Ｓｃｉ．、５巻：論文８、１～９頁を参照されたい）。「防腐剤」とは、復元された製剤中の細菌作用を本質的に低減し、これにより、例えば、複数回使用する復元製剤の生成を容易にするために、希釈剤に添加されうる化合物である。潜在的な防腐剤の例は、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム（アルキル基が長鎖化合物である塩化アルキルベンジルジメチルアンモニウムの混合物）、および塩化ベンゼトニウムを含む。他の種類の防腐剤は、芳香族アルコール、例えば、フェノール、ブチルアルコールおよびベンジルアルコール、アルキルパラベン、例えば、メチルパラベンまたはプロピルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３－ペンタノール、およびｍ－クレゾールを含む。
一部の場合では、製剤は等張性である。概して、溶液の容量オスモル濃度／張度に寄与する当技術分野で公知の任意の成分を、製剤に添加することができる（例えば、塩類、糖類、多価アルコール、またはこれらの組合せ）。等浸透圧は、一般に、塩基性製剤の成分（例えば、スクロース）を等張性濃度で使用すること、あるいは、さらなる成分、例えば、糖、マンニトール（ｍａｎｉｔｏｌ）もしくはソルビトールなどの多価アルコール、または塩化ナトリウムなどの塩を添加することによるかのいずれかで達成される。
一部の場合では、抗ＨＡ抗体分子製剤中には、例えば、等浸透圧を達成するため、または製剤の抗ＨＡ抗体分子の完全性を増加させるために、塩が使用される。使用に適切な塩類は、上記で論じられている。塩濃度は、０ｍＭ～約３００ｍＭとすることができる。一例では、塩は、製剤中１５０ｎＭの濃度で使用される。
ある特定の場合では、製剤は、界面劣化を減少させるために、Ｔｗｅｅｎ（例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０）と共に調製される。Ｔｗｅｅｎ濃度は、約０．００１％～約０．０５％とすることができる。一例では、Ｔｗｅｅｎ－８０は、製剤中０．０２５％の濃度において使用される。
ある特定の他の場合では、製剤は、グリシンと共に調製される。製剤中のグリシン濃度は、約０．０１％～約５％とすることができる。一例では、グリシンは、製剤中１％の濃度で使用される。別の例では、グリシンは、製剤中２％の濃度で使用される。一部の場合では、Ｔｗｅｅｎおよびアルギニンの両方が、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子製剤に添加される。
さらに他の場合では、製剤は、スクロース、ヒスチジン、またはアルギニンのうちの少なくとも１つと共に調製されてよい。スクロースが製剤中に含まれる場合、これは、約１％から約１０％の間の濃度まで添加されてよい。一例では、スクロースは、２％の濃度で製剤中に見出される。ヒスチジンが製剤中に含まれる場合、これは、約０．５％から約５％の間の濃度まで添加されてよい。一例では、ヒスチジンは、１％の濃度で製剤中に見出される。別の例では、ヒスチジンは、２％の濃度で製剤中に見出される。アルギニンが製剤中に含まれる場合、これは、約０．５％から約５％の間の濃度まで添加されてよい。一例では、アルギニンは、１％の濃度で製剤中に見出される。別の例では、アルギニンは、２％の濃度で製剤中に見出される。
例示的な製剤
例示的な抗ＨＡ抗体分子製剤を、表７に記載する。ある実施形態では、抗ＨＡ抗体分子製剤は、２５ｍｇ／ｍＬの本明細書に記載の抗ＨＡ抗体分子（例えば、Ａｂ ０４４）、４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２５％のＴｗｅｅｎ－８０を、ｐＨ６．０で含む。別の実施形態では、抗ＨＡ抗体分子製剤は、２５ｍｇ／ｍＬの本明細書に記載の抗ＨＡ抗体分子（例えば、Ａｂ ０４４）、４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２５％のＴｗｅｅｎ－８０を、ｐＨ６．．５で含む。別の実施形態では、抗ＨＡ抗体分子製剤は、２５ｍｇ／ｍＬの本明細書に記載の抗ＨＡ抗体分子（例えば、Ａｂ ０４４）、４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、１％のグリシン、７５ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２５％のＴｗｅｅｎ－８０を、ｐＨ６．５で含む。別の実施形態では、抗ＨＡ抗体分子製剤は、２５ｍｇ／ｍＬの本明細書に記載の抗ＨＡ抗体分子（例えば、Ａｂ ０４４）、４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウムを、ｐＨ６．０で含む。別の実施形態では、抗ＨＡ抗体分子製剤は、２５ｍｇ／ｍＬの本明細書に記載の抗ＨＡ抗体分子（例えば、Ａｂ ０４４）、４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、７５ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２５％のＴｗｅｅｎ－８０を、ｐＨ６．５で含む。
さらなる例示的な抗ＨＡ抗体分子製剤を、表５に記載する。
保存および調製法
液体
一部の場合では、抗体を含有する製剤は、液体として保存される。したがって、４℃または室温を含むこのような条件下で製剤が比較的安定であることが所望される。製剤の適切性を決定する１つの方法は、試料製剤を一定期間（例えば、１週間、２週間、または４週間）にわたり撹拌または保存（例えば、４℃、２５℃、または４５℃での）に供し、撹拌または保存後に蓄積するＬＭＷ種および／またはＨＭＷ種の量を決定し、これを、撹拌または保存手順前の試料中に存在するＬＭＷ種またはＨＭＷ種の量と比較することである。ＬＭＷ種またはＨＭＷ種の増加は、安定性の低下を指し示す。
凍結
一部の場合では、抗体を含有する製剤は、保存のために凍結される。したがって、凍結－解凍サイクル下を含むこのような条件下で製剤が比較的安定であることが所望される。製剤の適切性を決定する１つの方法は、凍結（例えば、－２０℃または－８０℃での）および解凍（例えば、３７℃の水浴における急速解凍または２℃～８℃における低速解凍による）の少なくとも２、例えば、３、４、５、８、１０、またはこれを超えるサイクルに試料製剤を供し、凍結－解凍サイクル後に蓄積するＬＭＷ種および／またはＨＭＷ種の量を決定し、これを、凍結－解凍手順前の試料中に存在するＬＭＷ種またはＨＭＷ種の量と比較することである。ＬＭＷ種またはＨＭＷ種の増加は、安定性の低下を指し示す。
凍結乾燥
製剤は、凍結乾燥後に保存されてもよい。したがって、凍結乾燥後の製剤のタンパク質成分の安定性について製剤を調べることは、製剤の適切性を決定するために有用である。その方法は、試料製剤が凍結の代わりに凍結乾燥され、その元の体積に復元され、ＬＭＷ種および／またはＨＭＷ種の存在について調べられることを除いては、凍結について上記で記載したものと同様である。凍結乾燥された試料製剤は、凍結乾燥されなかった対応する試料製剤と比較される。対応する試料と比較した、凍結乾燥された試料中のＬＭＷ種またはＨＭＷ種の増加は、凍結乾燥された試料における安定性の低下を指し示す。
概して、凍結乾燥プロトコールは、凍結乾燥器内への試料の充填、事前冷却期間、凍結、真空開始、一次乾燥温度へのランピング、一次乾燥、二次乾燥温度へのランピング、二次乾燥、および試料の密栓を含む。凍結乾燥プロトコールのために選択されうるさらなるパラメータは、真空（例えば、ミクロン単位）およびコンデンサー温度を含む。好適な温度に関するランピング速度は、約０．１℃／分～２℃／分、例えば、０．１℃／分～１．０℃／分、０．１℃／分～０．５℃／分、０．２℃／分～０．５℃／分、０．１℃／分、０．２℃／分、０．３℃／分、０．４℃／分、０．５℃／分、０．６℃／分、０．７℃／分、０．８℃／分、０．９℃／分、および１．０℃／分である。凍結乾燥サイクルのための凍結の間の好適な棚温は、一般に、約－５５℃～－５℃、－２５℃～－５℃、－２０℃～－５℃、－１５℃～－５℃、－１０Ｃ～－５℃、－１０℃、－１１℃、－１２℃、－１３℃、－１４℃、－１５℃、－１６℃、－１７℃、－１８℃、－１９℃、－２０℃、－２１℃、－２２℃、－２３℃、－２４℃または－２５℃である。棚温は一次乾燥と二次乾燥とで異なってもよく、例えば、一次乾燥は、二次乾燥よりも低い温度で実施され得る。非限定的な例では、一次乾燥を０℃で実行し、二次乾燥を２５℃で実行することができる。
一部の場合では、アニーリングプロトコールが凍結中および真空開始前に使用される。このような場合では、アニーリング時間を選択する必要があり、温度は一般に、組成物のガラス転移温度を超える。一般に、アニーリング時間は、約２～１５時間、約３～１２時間、約２～１０時間、約３～５時間、約３～４時間、約２時間、約３時間、約５時間、約８時間、約１０時間、約１２時間または約１５時間である。アニーリングの温度は、一般に、約－３５℃～約－５℃、例えば、約－２５℃～約－８℃、約－２０℃～約－１０℃、約－２５℃、約－２０℃、約－１５℃、約０℃または約－５℃である。一部の場合には、アニーリング温度は、一般に、－３５℃～５℃、例えば、２５℃～－８℃、－２０℃～－１０℃、－２５℃、－２０℃、－１５℃、０℃または５℃である。
一般に、凍結乾燥サイクルは、１０時間～１００時間、例えば、２０時間～８０時間、３０時間～６０時間、４０時間～６０時間、４５時間～５０時間、５０時間～６５時間で実施できる。
抗体製剤の保存のための温度範囲の非限定的な例は、約－２０℃～約５０℃、例えば、約－１５℃～約３０℃、約－１５℃～約２０℃、約５℃～約２５℃、約５℃～約２０℃、約５℃～約１５℃、約２℃～約１２℃、約２℃～約１０Ｃ、約２℃～約８℃、約２℃～約６℃、２Ｃ、３℃、４℃、５℃、６℃、７℃、８℃、１０℃、１５℃または２５℃である。保存温度にかかわらず、ある特定の場合では、試料は、保存中に一過的に生じうる温度変化、およびこのような組成物について予想されうる運搬条件下で安定である。
噴霧乾燥
一部の場合では、製剤は、噴霧乾燥され、次いで保存される。噴霧乾燥は、当技術分野で公知の方法を使用して行われ、液体または凍結噴霧乾燥を使用するように（例えば、Ｎｉｒｏ Ｉｎｃ．（Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）、Ｕｐｐｅｒｔｏｎ Ｐａｒｔｉｃｌｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｎｏｔｔｉｎｇｈａｍ、Ｅｎｇｌａｎｄ）、もしくはＢｕｃｈｉ（Ｂｒｉｎｋｍａｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．、Ｗｅｓｔｂｕｒｙ、ＮＹ）、または米国出願公開第２００３／００７２７１８号および同第２００３／００８２２７６号によるものなどの方法を使用して）改変することができる。
抗体分子の完全性の決定
ＬＭＷ種およびＨＭＷ種の蓄積は、抗体安定性の有用な尺度である。製剤中のＬＭＷまたはＨＭＷのいずれかの蓄積は、製剤の一部として保存されたタンパク質の不安定性を指し示す。ＨＰＬＣとあわせたサイズ排除クロマトグラフィーを使用して、ＬＭＷ種およびＨＭＷ種の存在を決定することができる。このような測定に適切なシステムは当技術分野で公知であり、例えば、ＨＰＬＣシステム（Ｗａｔｅｒｓ、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ）がある。当技術分野で公知の他のシステム、例えば、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（ＨＭＷ種およびＬＭＷ種をモニタリングするため）、抗体活性のバイオアッセイ、酵素結合免疫吸着アッセイ、精製された標的タンパク質（例えば、ＨＡ）に結合する能力、およびカチオン交換ＨＰＬＣ（ＣＥＸ－ＨＰＬＣ；バリアントを検出し、表面電荷をモニタリングするため）を使用して、製剤中の抗体の完全性を評価することができる。一例では、バイオアッセイは、生物学的活性を裏付けるために、異なる濃度の製剤化されたナノボディ分子の存在下でＨＡ依存性活性の阻害を調べる、細胞ベースのアッセイである。
製造品
本出願はまた、本明細書で記載される製剤を含み、かつ製剤の使用のための指示を提供する、製造品を提供する。製造品は、製剤を含有するのに適切な容器を含みうる。適切な容器は、限定せずに述べると、ボトル、バイアル、シリンジ、試験管、ネブライザ（例えば、超音波ネブライザまたは振動メッシュネブライザ）、ｉ．ｖ．溶液バッグ、または吸入器（例えば、定量吸入器（ＭＤＩ）または乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ））でありうる。容器は、ガラス、金属、またはプラスチック、例えば、ポリカーボネート、ポリスチレン、もしくはポリプロピレンなどの任意の適切な材料から形成されていてよい。概して、容器は、有意な量のタンパク質を製剤から吸収せず、かつ製剤の成分との反応性がない材料で作られている。一部の実施形態では、容器は、Ｗｅｓｔ ４４３２／５０ １３１９のシリコン処理された灰色のストッパーまたはＷｅｓｔ ４０２３ Ｄｕｒａｆｌｕｏｒストッパーを備えた透明ガラスバイアルである。一部の実施形態では、容器はシリンジである。具体的な実施形態では、製剤は、約２５ｍｇ／ｍＬの本明細書で記載される抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０２５％のポリソルベート８０を、約６のｐＨで、プレフィルドシリンジ内に含む。ある特定の実施形態では、シリンジは、オートインジェクターデバイスとあわせた使用に適切である。
ある実施形態では、容器は、製剤または抗体分子の保存に適切な容器、例えば、バイアルである。別の実施形態では、容器は、製剤または抗体分子の投与に適切な容器、例えば、静脈内（ＩＶ）バッグである。ある実施形態では、第１の容器（例えば、保存に適切なもの）内の抗体分子または製剤は、使用前に第２の容器（例えば、投与に適切なもの）に移される。ある実施形態では、移動は、抗体分子または製剤の希釈を含む。ある実施形態では、移動は、抗体分子または製剤の被験体への投与の４時間未満前、例えば、３、２、または１時間未満前に行われる。
ある実施形態では、投与に適切な容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）は、一次容器であり、投与（例えば、ＩＶ投与）のために使用できる状態である。例えば、１つの構成において、投与前に（例えば、投与と同じ日に）、抗体分子もしくは製剤を、例えば、バイアル（例えば、保存バイアル）からＩＶ溶液バッグに移すこと、または抗体分子もしくは製剤を、例えば、ＩＶ溶液中に希釈することは、典型的には必要でないか、またはその必要性はない。ある実施形態では、容器は、バイアル、例えば、ガラスバイアルである。ある実施形態では、容器（例えば、バイアル）は、約１０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、例えば、約２０ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬ（例えば、約２５ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ）の抗体分子を含む。ある実施形態では、容器（例えば、バイアル）は、約１０ｍＬ～約６０ｍＬ、例えば、約２０ｍＬ～約４０ｍＬの抗体分子または製剤を含む。ある実施形態では、この容器（例えば、バイアル）は、例えば、抗体分子または製剤を保存するための第１の（または一次）容器である。
抗体分子または製剤は、使用前に第２の容器内に移されてもよい。ある実施形態では、第２の容器は、投与、例えば、静脈内投与に適切であるか、またはそれに適切な溶液を含む。ある実施形態では、第２の容器は、静脈内投与に適切な溶液を含む。ある実施形態では、溶液は、食塩液を含み、任意選択で、デキストロースをさらに含む。ある実施形態では、溶液（例えば、食塩液）は、デキストロースを含まない。例えば、抗体分子の１用量に等しい量が、ＩＶ投与に適切な容器内に移されうる。ある実施形態では、１～１０個のバイアル（例えば、１～８個のバイアル、１～６個のバイアル、１～４個のバイアル、１～２個のバイアル、６～８個のバイアル、４～８個のバイアル、または２～８個のバイアル）の抗体分子または製剤が、例えば、デキストロースありまたはなしの食塩液を含有するＩＶ溶液バッグ内に希釈される。
ある実施形態では、容器は、ＩＶ投与に適切な容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）である。ある実施形態では、容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）内の抗体分子の量は、上記で記載した通り、１～１０個のバイアル（例えば、１～８個のバイアル、１～６個のバイアル、１～４個のバイアル、１～２個のバイアル、６～８個のバイアル、４～８個のバイアル、または２～８個のバイアル）の抗体分子に等しい。ある実施形態では、容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）は、約５００ｍｇ～約１６０００ｍｇ、例えば、約５００ｍｇ～約８０００ｍｇ、約５００ｍｇ～約５０００ｍｇ／ｍＬ、約１０００ｍｇ～約５０００ｍｇ、約２０００ｍｇ～約４０００ｍｇまたは約２３００ｍｇ～約４６００ｍｇ、例えば、約２３００ｍｇまたは約４６００ｍｇの抗体分子または製剤を含む。ある実施形態では、容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）は、さらに食塩水を含む。ある実施形態では、容器は、デキストロースをさらに含む。別の実施形態では、容器は、デキストロースを含まない。
ある実施形態では、ＩＶ投与に適切な容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）は、第２の（または二次）容器ではなく（例えば、第１の（または一次）容器であり、例えば、ここに抗体分子が保存される）、約５ｍｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、例えば、約８ｍｇ／ｍＬ～約１６ｍｇ／ｍＬの抗体分子を含む。ある実施形態では、容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）は、約１００ｍＬ～約４００ｍＬ、例えば、約２００ｍＬ～約３００ｍＬの抗体分子を含む。ある実施形態では、容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）は、約２０００ｍｇ～約５０００ｍｇ、例えば、約２３００ｍｇ～約４６００ｍｇの抗体分子を含む。
ある実施形態では、抗体分子は、容器（例えば、ＩＶ溶液バッグ）からＩＶラインを介して被験体に投与される。
本明細書では、投与（例えば、静脈内投与）のための組成物（例えば、溶液）または容器を調製する方法も開示される。ある実施形態では、方法は、本明細書で開示される抗体分子または製剤を、投与に適切な容器（例えば、静脈内（ＩＶ）溶液バッグ）に移すステップを含む。ある実施形態では、方法は、本明細書で開示される抗体分子または製剤を、投与に適切な溶液と接触させる、例えば、組み合わせる（例えば、混合または希釈する）ステップを含む。ある実施形態では、投与に適切な容器は、ＩＶ溶液バッグである。ある実施形態では、投与に適切な溶液は、ＩＶ溶液、例えば、デキストロースありまたはなしの食塩液である。ある実施形態では、約２０００ｍｇ～約５０００ｍｇの抗体分子が、溶液と接触させられる（例えば、合わせられる）。ある実施形態では、約２３００ｍｇ～約４６００ｍｇまたは約２０００ｍｇ～約４０００ｍｇの抗体分子が、溶液と接触させられる（例えば、合わせられる）。
ネブライザの例は、非限定的な例において、ジェットネブライザ、超音波ネブライザ、および振動メッシュネブライザを含む。これらのクラスは、液体からエアロゾルを作製するために異なる方法を使用する。概して、これらの製剤中のタンパク質の完全性を維持することができる任意のエアロゾル生成デバイスが、本明細書で記載される製剤の送達に適切である。
例えば、医薬品として被験体への投与のために使用される製剤は、無菌である必要がある。これは、当技術分野で公知の方法を使用して、例えば、液体の製剤化もしくは凍結乾燥および復元の前または後に滅菌濾過膜を通して濾過することにより、達成される。代替的に、構造を損傷しない場合は、製剤の成分をオートクレーブすることにより滅菌し、次いで、フィルターまたは放射線で滅菌された成分と組み合わせて、製剤を生成することができる。
ヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドおよびインフルエンザ
インフルエンザウイルスは、ネガティブセンスで、一本鎖の、セグメント化されたＲＮＡエンベロープウイルスである。２つの糖タンパク質、ヘマグルチニン（ＨＡ）ポリペプチドおよびノイラミニダーゼ（ＮＡ）ポリペプチドが、ウイルスエンベロープの外表面上に提示される。インフルエンザＡ亜型にはいくつかあり、Ｈ番号（ヘマグルチニンの型に関する）およびＮ番号（ノイラミニダーゼの型に関する）によって標識される。１７種の異なるＨ抗原（Ｈ１～Ｈ１７）および９種の異なるＮ抗原（Ｎ１～Ｎ９）が存在する。インフルエンザ株は、その株のＨＡポリペプチドおよびＮＡポリペプチド亜型の番号に基づく命名法により、例えば、Ｈ１Ｎ１、Ｈ１Ｎ２、Ｈ１Ｎ３、Ｈ１Ｎ４、Ｈ１Ｎ５などと同定される。
ＨＡは、宿主細胞へのウイルスの結合および侵入を媒介する主要なウイルス表面糖タンパク質であり、中和抗体応答の一次標的である。ＨＡは、３つの同一の単量体の三量体である。各単量体は、前駆体ＨＡ０として合成され、これがタンパク質分解によりプロセシングされて、２つのジスルフィド結合したポリペプチド鎖、ＨＡ１およびＨＡ２となる。このタンパク質の外部ドメインは、（ｉ）受容体結合活性および主要な抗原決定基を所有する球状頭部ドメイン、（ｉｉ）ヒンジ領域、および（ｉｉｉ）融合に極めて重要な配列である融合ペプチドが位置するステム領域を有する。ウイルス複製サイクルは、ビリオンがその表面ヘマグルチニンタンパク質を介して宿主細胞上のシアル酸付加グリカン受容体に付着し、エンドサイトーシスにより細胞に侵入すると開始される。エンドソーム内の酸性環境は、三量体のステム領域内に隠れた融合ペプチドを露出させる、ＨＡのコンフォメーション変化を誘導する。露出した融合ペプチドは、ウイルスおよび標的細胞の膜の融合を媒介し、細胞原形質内へのウイルスリボ核タンパク質の放出をもたらす。
インフルエンザＡヘマグルチニン亜型は、２つの主な群および４つのより小さなクレードに分けられており、これらは、クラスターにさらに分けられる。群１インフルエンザＡ株は、３つのクレード：（ｉ）Ｈ８、Ｈ９、およびＨ１２（「Ｈ９クラスター」）；（ｉｉ）Ｈ１、Ｈ２、Ｈ５、Ｈ６、およびＨ１７（「Ｈ１ａクラスター」）；ならびに（ｉｉｉ）Ｈ１１、Ｈ１３、およびＨ１６（「Ｈ１ｂクラスター」）に分けられる。群２株は、２つのクレード：（ｉ）Ｈ３、Ｈ４、およびＨ１４（「Ｈ３クラスター」）；ならびに（ｉｉ）Ｈ７、Ｈ１０、およびＨ１５（「Ｈ７クラスター」）に分けられる。Ｈ１ｂおよびＨ１ａクラスターは、併せてＨ１クラスターに分類される。異なるＨＡ亜型は、必ずしも強いアミノ酸配列同一性を共有するとは限らないが、それらの全体的な３Ｄ構造は類似している。
１７種のＨＡポリペプチド亜型のうち、３つ（Ｈ１、Ｈ２、およびＨ３）だけがヒト感染に適合している。これらの亜型は、アルファ２，６シアル酸付加グリカンに結合する能力を共通に有する。対照的に、それらのトリ対応物は、アルファ２，３シアル酸付加グリカンに優先的に結合する。ヒトに感染するように適合したＨＡポリペプチド（例えば、汎流行Ｈ１Ｎ１（１９１８年）およびＨ３Ｎ２（１９６７～６８年）インフルエンザ亜型由来のＨＡポリペプチド）は、α２，３シアル酸付加グリカンに優先的に結合するそれらのトリプロジェニターと比較して、α２，６シアル酸付加グリカンに優先的に結合する能力によって特徴付けられている（例えば、Ｓｋｅｈｅｌ ＆ Ｗｉｌｅｙ， Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｃｈｅｍ， ６９：５３１，２０００；Ｒｏｇｅｒｓ， ＆ Ｐａｕｌｓｏｎ， Ｖｉｒｏｌｏｇｙ， １２７：３６１，１９８３；Ｒｏｇｅｒｓら、Ｎａｔｕｒｅ， ３０４：７６，１９８３；Ｓａｕｔｅｒら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ３１：９６０９，１９９２を参照）。
さらに、ヒトの感染を媒介するＨＡポリペプチドは、コーントポロジーのグリカンにまさって、アンブレラトポロジーのグリカンに優先的に結合する（例えば、Ｕ．Ｓ．２０１１／０２０１５４７を参照されたい）。いずれかの特定の理論により束縛されることを望まないが、コーントポロジーのグリカンはα２，６シアル酸付加グリカンでありうるにもかかわらず、ヒト宿主に感染する能力は、特定の結合（ｌｉｎｋａｇｅ）のグリカンへの結合とさほど相関せず、特定のトポロジーのグリカンへの結合とより相関することが提唱されている。ヒトの感染を媒介するＨＡポリペプチドは、アンブレラトポロジーのグリカンに結合し、多くの場合、コーントポロジーのグリカンにまさってアンブレラトポロジーのグリカンに対する選好性を示すことが裏付けられている（例えば、２００９年１月２日に出願されたＵＳＳＮ １２／３４８，２６６、２００８年１１月１７日に出願されたＵＳＳＮ １２／３０１，１２６、２００８年１月３日に出願されたＵＳＳＮ ６１／０１８，７８３、２００８年１月３日に出願されたＵＳＳＮ １１／９６９，０４０、２００７年８月１４日に出願されたＵＳＳＮ １１／８９３，１７１、２００６年８月１４日に出願されたＵＳＳＮ ６０／８３７，８６８、８月１４日に出願されたＵＳＳＮ ６０／８３７，８６９および２００７年８月１４日に出願されたＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＵＳ０７／１８１６０を参照）。
成熟ＨＡポリペプチドは、（ｉ）主にＨＡ１ペプチドからなり、受容体（シアル酸付加糖タンパク質）結合領域を含有する球状ドメイン（別称、頭部ドメイン）、（ｉｉ）膜融合ペプチドが存在するストークドメイン（ＨＡ１およびＨＡ２）、および（ｉｉｉ）ヘマグルチニンをウイルスエンベロープへとアンカリングする膜貫通ドメイン（ＨＡ２）の、３つのドメインを含む。ＨＡ１およびＨＡ２ペプチドの界面にある一群のアミノ酸は、全てのインフルエンザ亜型にわたり高度に保存されている。カノニカルのアルファ－ヘリックスを含むＨＡ１／ＨＡ２膜近位領域（ＭＰＥＲ）も、インフルエンザ亜型にわたり高度に保存されている。
ＨＡポリペプチドは、ＨＡ受容体として公知である糖タンパク質受容体に結合することにより、細胞の表面と相互作用する。ＨＡ受容体へのＨＡポリペプチドの結合は、大部分は、ＨＡ受容体上のＮ結合型グリカンによって媒介される。インフルエンザウイルス粒子の表面上のＨＡポリペプチドは、細胞宿主の表面上のＨＡ受容体と会合したシアル酸付加グリカンを認識する。細胞機構によるウイルスタンパク質およびゲノムの複製後、新たなウイルス粒子が宿主から出芽して、近隣の細胞に感染する。
現在、インフルエンザを予防するため、例えば、インフルエンザウイルスの感染を予防するため、またはインフルエンザウイルスの感染の影響を最小限に抑えるために、被験体、例えば、ヒトにワクチンが投与されている。従前のワクチンは、多様なインフルエンザ株由来の抗原のカクテルを含有し、ヒトがそのウイルスに感染することを予防するためにヒトに投与されている。ＨＡは、インフルエンザＡ中和抗体の主な標的であり、ＨＡは、主としてＨＡポリペプチドの膜遠位受容体結合サブドメインに対して向けられる、抗体応答の選択圧によって推進される連続的進化を受ける。しかしながら、被験体は、カクテル中の抗原が由来した株と同一であるか、またはそれと密接に関連した株からしか保護されない。ヒトは、依然として、カクテル中に含まれなかった他のインフルエンザの株による感染に対して最も脆弱である。本明細書で提示される抗体の利点のうちの１つは、インフルエンザＡ、またある実施形態ではインフルエンザＢの複数の株にわたり保存されているＨＡのエピトープに結合する抗体の能力である。したがって、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体の投与は、より広域スペクトルのインフルエンザ（例えば、インフルエンザＡ、またある実施形態では、インフルエンザＢ）の感染およびそれに関連した状態（例えば、二次感染症、例えば、二次細菌感染症）から個体を保護するのにより有効である。さらに、抗体は、感染症が生じた後の被験体の処置において有効である。
エピトープ
ＨＡは、タンパク質分解によりプロセシングされた成熟サブユニットのホモ三量体として天然に存在する。三量体の各サブユニットは、前駆体として合成される。前駆体分子は、タンパク質分解によりプロセシングされて、２つのジスルフィド結合したポリペプチド鎖となり、成熟ＨＡポリペプチドを形成する。成熟ＨＡポリペプチドは、（１）分子の基部（ｂａｓｅ）から繊維状ステムを介し、グリカン受容体結合ドメインを含有する膜遠位頭部領域まで延び、繊維状領域に戻り切断部位で終わるコアＨＡ－１ドメインと、（２）ＨＡのステム領域および膜貫通ドメインを含むＨＡ－２ドメインとの、２つのドメインを含む。ＨＡ－１は、グリカン結合部位を含む。グリカン結合部位は、ＨＡ受容体へのＨＡの結合を媒介することに関与し得る。ＨＡ－２ドメインは、ＨＡ－１ドメインを提示させるよう作用する。ＨＡ三量体は、ＨＡ単量体のステムの３つの長いＨＡアルファ－ヘリックスの間の極性および非極性の相互作用によって安定化しうる。
全てのインフルエンザ亜型のＨＡ配列は、良好に保存されているＨＡ－１ドメインおよびＨＡ－２ドメインの界面内の一群のアミノ酸を共有する。カノニカルのα－ヘリックスを含むＨＡ－１／ＨＡ－２界面膜近位エピトープ領域（ＭＰＥＲ）、およびその近傍の残基もまた、広域スペクトルの亜型にわたり保存されている。（Ｅｋｉｅｒｔら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、３２４巻（５９２４号）：２４６頁、２００９年；Ｓｕｉら、Ｎａｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ、１６巻（３号）：２６５頁、２００９年）。
Ａｂ ０４４は、群１および群２由来のＨＡに対して高いアフィニティーを有する。これは、複数のインフルエンザ株にわたり広く保存されているコンフォメーションエピトープに結合する。異なる株／亜型由来のＨＡの直鎖状配列に沿って分布した多数のアミノ酸残基が、Ａｂ ０４４のコンフォメーションエピトープに寄与する。Ｈ３とのＡｂ０４４の相互作用をドッキング研究により解析し、Ａｂ ０４４が結合した（または結合しなかった）残基を同定した。
ＺＤＯＣＫを使用し、Ａｂ ０４４のＦｖを群ＩおよびＩＩ株のＨＡに対してドッキングした。ＳＷＩＳＳ ＭＯＤＥＬ相同性モデリングサーバを使用し、Ｈ１Ｎ１の解明された結晶構造を鋳型として保ち、ＨＡ抗原の構造をモデリングした。ＺＤＯＣＫは、ドッキングポーズをランク付けするための脱溶媒和および静電エネルギーの項（「ＺＲＡＮＫ」）と共に形の相補性を使用する。ドッキングポーズが天然の複合体から顕著に逸脱しないことを確実にするため、アラニンスキャニングによりマッピングされたエピトープおよびパラトープ残基は、結合界面に強制的に含まれる。
比較研究のため、ＦＩ６に結合する（または結合しない）アミノ酸を、２０１１年７月１８日に出願された公開米国特許出願第２０１１／０２７４７０２（Ａ１）号、Ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ Ａｎｔｉ－Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ａ Ｖｉｒｕｓ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆから得た。
ＺＤＯＣＫは、高速フーリエ変換ベースのタンパク質ドッキングプログラムである。これは、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ Ｍｅｄｉｃａｌ ＳｃｈｏｏｌにおいてＺｈｉｐｉｎｇ Ｗｅｎｇにより開発された。ＺＤＯＣＫでは、２つのＰＤＢファイルが入力され、出力は、それらの複合体の予測される構造である。このプログラムは、２つのタンパク質間の並進空間および回転空間における全ての可能な結合方式を検索し、それぞれをエネルギースコアリング関数によって評価する。タンパク質の構造はデジタル信号に変換され、コンピュータ処理時間を低減するために高速フーリエ変換技法が使用される。ＺＤＯＣＫは、Ｐｉｅｒｃｅ ＢＧ， Ｈｏｕｒａｉ Ｙ， Ｗｅｎｇ Ｚ．（２０１１）Ａｃｃｅｌｅｒａｔｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｏｃｋｉｎｇ ｉｎ ＺＤＯＣＫ Ｕｓｉｎｇ ａｎ Ａｄｖａｎｃｅｄ ３Ｄ Ｃｏｎｖｏｌｕｔｉｏｎ Ｌｉｂｒａｒｙ． ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ６（９）；ｅ２４６５７， Ｐｉｅｒｃｅ Ｂ， Ｔｏｎｇ Ｗ， Ｗｅｎｇ Ｚ．（２００５）Ｍ－ＺＤＯＣＫ：Ａ Ｇｒｉｄ－ｂａｓｅｄ Ａｐｐｒｏａｃｈ ｆｏｒ Ｃｎ Ｓｙｍｍｅｔｒｉｃ Ｍｕｌｔｉｍｅｒ Ｄｏｃｋｉｎｇ． Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ２１（８）：１４７２－１４７６；Ｍｉｎｔｓｅｒｉｓ Ｊ， Ｐｉｅｒｃｅ Ｂ， Ｗｉｅｈｅ Ｋ， Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｒ， Ｃｈｅｎ Ｒ， Ｗｅｎｇ Ｚ．（２００７）Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｎｇ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｐａｉｒ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌｓ ｉｎｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｏｍｐｌｅｘ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ． Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ６９（３）：５１１－５２０；およびＣｈｅｎ Ｒ， Ｌｉ Ｌ， Ｗｅｎｇ Ｚ．（２００３）ＺＤＯＣＫ：Ａｎ Ｉｎｉｔｉａｌ－ｓｔａｇｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｏｃｋｉｎｇ Ａｌｇｏｒｉｔｈｍ． Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ５２（１）：８０－７において議論されている。
ＳＷＩＳＳ－ＭＯＤＥＬは、完全に自動化されたタンパク質構造相同性モデリングサーバである。これは、ＥｘＰＡＳｙウェブサーバを介して、またはＤｅｅｐＶｉｅｗプログラム（Ｓｗｉｓｓ Ｐｄｂ－Ｖｉｅｗｅｒ）からアクセス可能である。Ｓｗｉｓｓ－Ｍｏｄｅｌは、Ａｒｎｏｌｄ Ｋ．、Ｂｏｒｄｏｌｉ Ｌ．、Ｋｏｐｐ Ｊ．、およびＳｃｈｗｅｄｅ Ｔ．（２００６年）、Ｔｈｅ ＳＷＩＳＳ－ＭＯＤＥＬ Ｗｏｒｋｓｐａｃｅ： Ａ ｗｅｂ－ｂａｓｅｄ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｈｏｍｏｌｏｇｙ ｍｏｄｅｌｌｉｎｇ． Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ、２２巻、１９５～２０１頁；Ｋｉｅｆｅｒ Ｆ、Ａｒｎｏｌｄ Ｋ、Ｋｕｅｎｚｌｉ Ｍ、Ｂｏｒｄｏｌｉ Ｌ、Ｓｃｈｗｅｄｅ Ｔ（２００９年）、Ｔｈｅ ＳＷＩＳＳ－ＭＯＤＥＬ Ｒｅｐｏｓｉｔｏｒｙ ａｎｄ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ． Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、３７巻、Ｄ３８７～Ｄ３９２頁；およびＰｅｉｔｓｃｈ， Ｍ． Ｃ．（１９９５年）、Ｐｒｏｔｅｉｎ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｂｙ Ｅ－ｍａｉｌ Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１３巻：６５８～６６０頁で論じられている。
Ａｂ ０４４に結合するＨ３残基およびＦＩ６に結合するＨ３残基を下記で論じる。
Ｈ３ ＨＡ１
Ｈ３ ＨＡ１のアミノ酸配列を、配列番号１７３として下記に提示する。破線の四角内に示された残基Ｎ３８、Ｉ２７８、およびＤ２９１には、Ａｂ ０４４が結合するが、ＦＩ６は結合せず；点線の四角内に示された残基Ｑ３２７、Ｔ３２８、およびＲ３２９には、ＦＩ６が結合するが、Ａｂ ０４４は結合せず；実線の四角内に示された残基Ｔ３１８、Ｒ３２１、およびＶ３２３には、Ａｂ ０４４およびＦＩ６の両方が結合する。
Figure 0007104629000134
Ｈ３ ＨＡ２
Ｈ３ ＨＡ２１のアミノ酸配列を、配列番号１７４として下記に提示する。破線の四角内に示された残基Ｎ１２には、Ａｂ ０４４が結合するが、ＦＩ６は結合せず；点線の四角内に示された残基Ｇ１、Ｌ２、Ｆ３、Ｇ４、およびＤ４６には、ＦＩ６が結合するが、Ａｂ ０４４は結合せず；実線の四角内に示された残基Ａ７、Ｅ１１、Ｉ１８、Ｄ１９、Ｇ２０、Ｗ２１、Ｌ３８、Ｋ３９、Ｔ４１、Ｑ４２、Ａ４３、Ｉ４５、Ｉ４８、Ｎ４９、Ｌ５２、Ｎ５３、Ｉ５６、およびＥ５７には、Ａｂ ０４４およびＦＩ６の両方が結合する。
Figure 0007104629000135
Ａｂ ０４４に結合するＨ１残基およびＦＩ６に結合するＨ１残基を下記で論じる。
Ｈ１ ＨＡ１
Ｈ１ ＨＡ１のアミノ酸配列を、配列番号１８１として下記に提示する。破線の四角内に示された残基Ｈ３１、Ｎ２７９、およびＳ２９２には、Ａｂ ０４４が結合するが、ＦＩ６は結合しない。点線の四角内に示された残基Ｑ３２８およびＳ３２９には、ＦＩ６が結合するが、Ａｂ ０４４は結合しない。実線の四角内に示された残基Ｔ３１９、Ｒ３２２、およびＩ３２４には、Ａｂ ０４４およびＦＩ６の両方が結合する。
Figure 0007104629000136
 Ｈ１ ＨＡ２
Ｈ１ ＨＡ２のアミノ酸配列を、配列番号１８２として下記に提示する。破線の四角内に示された残基Ｇ１２には、Ａｂ ０４４が結合するが、ＦＩ６は結合しない。点線の四角内に示された残基Ｇ１、Ｌ２、Ｆ３、Ｇ４、およびＤ４６には、ＦＩ６が結合するが、Ａｂ ０４４は結合しない。実線の四角内に示された残基Ａ７、Ｅ１１、Ｉ１８、Ｄ１９、Ｇ２０、Ｗ２１、Ｑ３８、Ｋ３９、Ｔ４１、Ｑ４２、Ｎ４３、Ｉ４５、Ｉ４８、Ｔ４９、Ｖ５２、Ｎ５３、Ｉ５６、およびＥ５７には、Ａｂ ０４４およびＦＩ６の両方が結合する。
Figure 0007104629000137
国際出願公開第ＷＯ２０１３／１７０１３９号の図２６には、Ａｂ０４４のエピトープの一部であるがＦＩ６のエピトープの一部ではないと予測されるアミノ酸残基が強調されている（すなわち、強調されたアミノ酸はＡｂ０４４のエピトープに固有である）、Ｈ３ ＨＡの３次元表現が示されている。国際出願公開第ＷＯ２０１３／１７０１３９号の図２７には、ＦＩ６のエピトープの一部であるがＡｂ０４４のエピトープの一部であるとは予測されないアミノ酸残基が強調されている、Ｈ３ ＨＡの３次元表現が示されている。国際出願公開第ＷＯ２０１３／１７０１３９号の内容は、参照によりその全体が組み込まれる。
結合剤、例えば、抗ＨＡ抗体分子
本明細書で記載される製剤（例えば、医薬品製剤）は、本明細書で記載される結合剤、例えば、抗体分子を含む。
本明細書で記載される結合剤、特に抗体分子は、群１由来および群２由来の両方のインフルエンザＡウイルスに結合することができ、ある実施形態では、インフルエンザＢウイルスにも結合する。例えば、本明細書で記載される抗体分子は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１種の群１由来株におけるＨＡポリペプチドに結合することができ、少なくとも１、２、３、４、５、または６種の群２由来株におけるＨＡポリペプチドに結合することもできる。別の例では、本明細書で記載される抗体分子は、群１の少なくとも１、２、または３つのクレードに由来するインフルエンザ株におけるＨＡポリペプチドに結合することができ、群２の一方または両方のクレードに由来するインフルエンザ株におけるＨＡポリペプチドに結合することもできる。本明細書で記載される抗体分子は、細胞侵入を阻害し、したがって、感染プロセスの早期ステップを標的とする。
本明細書で開示される結合剤、特に抗体分子は、季節性インフルエンザ株または汎流行インフルエンザ株による感染を処置または予防するのに有効でありうる。本明細書で記載される結合剤、特に抗体分子は、インフルエンザＡウイルスの群１もしくは群２株、またはある実施形態ではインフルエンザＢウイルス株を予防または処置するそれらの能力によって特徴付けることができる。本明細書で開示される結合剤、特に抗体分子は、群１の１つまたは複数の株、群２の１つまたは複数の株、そしてまた、インフルエンザＢウイルスの１つまたは複数の株による感染を予防または処置するのに有効である。
結合剤、特に抗体分子は、被験体が曝露されたのと同じ日に投与した場合、あるいは、例えば、感染の１日後、２日後、３日後、４日後、もしくはこれより後に、または患者が最初の症状を経験した際に投与した場合、感染を処置するのに有効でありうる。
株
本明細書で記載される抗体分子は、群１の１つまたは複数のインフルエンザ株、群２の１つまたは複数のインフルエンザ株、そしてまた１つまたは複数のインフルエンザＢ株、およびこれらの株における特異的な分離株を処置するのに有効である。ある特定の抗体分子は、他の分離株よりも、ある特定の分離株の処置に対してより有効でありうる。例示的なインフルエンザ株および分離株を、下記の表１に記載する。
Figure 0007104629000138
Figure 0007104629000139
アフィニティーはまた、インフルエンザＡウイルスの所与の群１もしくは群２株またはインフルエンザＢウイルス株の特定の分離株に関するものでありうる。例示的な分離株は、上記の表１に提示した通りである。
阻害の機構
具体的な機構に限定されるものではないが、ＨＡ特異性抗体は、多数の方法、例えば、宿主細胞の表面タンパク質上のシアル酸残基へのウイルスの付着を遮断することにより、エンドソームにおける融合活性を引き起こすＨＡの構造転移に干渉することにより、または付着およびウイルス－細胞の融合を同時に阻害することにより、感染を阻害することができる。
ある実施形態では、本明細書で開示される抗体分子は、ＨＡ三量体界面におけるエピトープに結合する。三量体界面における構造変化は、ウイルス膜とエンドサイトーシス膜（ｅｎｄｏｃｙｔｉｃ ｍｅｍｂｒａｎｅ）との融合に重要であり、本明細書で記載される抗体分子は、感染のこの極めて重要なステップに干渉する。ＨＡの、融合性活性を測定するためのアッセイは、当技術分野で公知である。例えば、１つの融合アッセイは、細胞－細胞の融合事象において生じるシンシチウム形成を測定する。インフルエンザウイルス株ＨＡを発現および提示する細胞がこのアッセイに使用されうる。これらの細胞における膜アンカー型ヘマグルチニンは、低いｐＨ（例えば、ｐＨ５）への短い（例えば、３分間の）曝露によって融合コンフォメーションに変換するよう誘導される。２～３時間のインキュベーション期間が続き、これが細胞を回復させ、融合してシンシチウムを形成させる。これらの融合産物の可視化を補助するために核染色が使用される場合があり、それらの数は融合活性の標準規格として使用される。候補抗ＨＡ抗体を低ｐＨ処理の前または後のいずれかで添加して、融合プロセスのどの段階で抗体が干渉するかを決定することができる。
別の種類の融合アッセイは、内容物の混合をモニタリングする。内容物の混合を測定するためには、宿主細胞（例えば、赤血球）に色素（例えば、ルシファーイエロー）を負荷して、融合誘導条件（例えば、６未満のｐＨまたは５未満のｐＨなどの低いｐＨ）への曝露後に、ＨＡが結合した宿主細胞の内容物がＨＡ発現細胞に送達されえたかどうかを決定する。色素が宿主細胞の内容物と混合しなければ、融合が阻害されているという結論を下すことができる。例えば、Ｋｅｍｂｌｅら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ．、６６巻：４９４０～４９５０頁、１９９２年を参照されたい。
別の例では、融合アッセイは、脂質の混合をモニタリングすることによって実施される。脂質混合アッセイは、宿主細胞（例えば、赤血球）を蛍光色素（例えば、Ｒ１８（オクタデシルローダミン））または色素ペア（例えば、ＣＰＴ－ＰＣ／ＤＡＢＳ－ＰＣ）（蛍光共鳴エネルギー移動の場合）で標識し、宿主細胞およびＨＡ発現細胞を融合誘導条件に曝露し、蛍光脱消光（ＦＤＱ：ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｄｅｑｕｅｎｃｈｉｎｇ）についてアッセイすることにより実施することができる。脂質混合は、ウイルスエンベロープへの標識の希釈および結果的な脱消光をもたらす。脱消光の遅れまたは脱消光がないことは、膜融合の阻害を指し示す。例えば、Ｋｅｍｂｌｅら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ．、６６巻：４９４０～４９５０頁、１９９２年；およびＣａｒｒら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．、９４巻：１４３０６～１４３１３頁、１９９７年を参照されたい。
エスケープ変異体
ある実施形態では、インフルエンザ株が、本明細書で記載される製剤（例えば、医薬品製剤）と接触したときにエスケープ変異体を生成することは、あるとしても稀である。
エスケープ変異体は、当技術分野で公知の方法によって同定することができる。例えば、製剤（例えば、医薬品製剤）は、製剤（例えば、医薬品製剤）への長期または繰り返しの曝露下で細胞がウイルスに感染したとき、エスケープ変異体を生成しない。
１つの例示的な方法は、感染率を５０％低下させることが知られる濃度での抗体の存在下で、細胞（例えば、ＭＤＣＫ細胞）を固定量のインフルエンザＡウイルス粒子に感染させることを含む。各継代後に回収されたウイルス子孫が、同じかまたはより高い濃度の抗体の存在下で新鮮な細胞培養物に感染させるために使用される。これらの条件下における複数サイクルの感染の後、例えば、１５サイクル、１２サイクル、１１サイクル、１０サイクル、９サイクル、８サイクル、７サイクル、６サイクル、または５サイクルの感染の後、２０回のウイルスプラークの選別から抽出されたＨＡヌクレオチド配列を、ウイルス分離株を抗体による中和に対して耐性にする変異（エスケープ変異体）の富化について評価する。複数ラウンドの選択の後、例えば、１１ラウンド、１０ラウンド、または９ラウンドの選択の後に、抗体に対する感受性が低減した変異体が検出されなければ、抗体は、エスケープ変異に対して耐性であると決定される（例えば、Ｔｈｒｏｓｂｙら（２００８年）、ＰＬｏＳ Ｏｎｅ、３巻、ｅ３９４２頁を参照されたい）。
別の例では、中和抗体の最小阻止濃度（ＭＩＣ）を測定するアッセイを使用して、エスケープ変異体を同定することができる。抗体分子のＭＩＣとは、ウイルスと混合してインフルエンザによる細胞培養物の感染を防止することができる抗体分子の最低濃度である。エスケープ変異体がウイルス集団内で生じれば、耐性変異を保有するウイルス粒子の割合がその集団内で増加したために、抗体選択圧下における繁殖のラウンド増加と共に特定の抗体のＭＩＣが増加することが観察される。インフルエンザエスケープ変異体が本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子に応じて進化することは、あるとしても稀であり、したがってＭＩＣは、時間の経過とともに同じ状態を保つ。
エスケープ変異体の発生をモニタリングするために適切な別のアッセイは、細胞変性効果（ＣＰＥ：Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ Ｅｆｆｅｃｔ）アッセイである。ＣＰＥアッセイは、インフルエンザ株を中和する（例えば、インフルエンザ株による感染を予防する）抗体の能力をモニタリングする。ＣＰＥアッセイは、ウイルスを中和するために細胞培養物に要求される抗体の最小濃度を提示する。エスケープ変異体が生じれば、抗体がウイルスを中和する有効性が低くなるため、特定の抗体のＣＰＥは、時間の経過とともに増加する。ウイルス株が本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子に応じてエスケープ変異体を生成することは、あるとしても稀であり、したがってＣＰＥは、時間の経過とともに本質的に同じ状態を保つ。
定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）を使用して、エスケープ変異体の発生をモニタリングすることもできる。ｑＰＣＲは、インフルエンザ株を中和する（例えば、インフルエンザ株による感染を予防する）抗体の能力をモニタリングするために有用である。抗体がウイルスを有効に中和する場合、細胞培養物試料に対して実施されるｑＰＣＲは、ウイルスゲノム核酸の存在を検出しない。エスケープ変異体が生じれば、時間の経過とともに、ｑＰＣＲは、ますます多くのウイルスゲノム核酸を増幅する。エスケープ変異体が本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子に応じて発生することは、あるとしても稀であり、したがって、時間が経過した後でさえ、ｑＰＣＲがウイルスゲノム核酸を検出することがあるとしても極めて稀である。
結合およびアフィニティー
ある実施形態では、本明細書で記載される結合剤、特に抗体分子は、以下の、群１インフルエンザ株由来の少なくとも１つのＨＡポリペプチド（例えば、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１２、Ｈ１１、Ｈ１３、Ｈ１６、またはＨ１７ポリペプチド）；群２インフルエンザ株由来の少なくとも１つのＨＡポリペプチド（例えば、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ１４、Ｈ７、Ｈ１０、またはＨ１５ポリペプチド）；およびインフルエンザＢ株由来の少なくとも１つのＨＡポリペプチドのうちの２つまたはこれより多くに結合する。
ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、群１インフルエンザ株由来のＨＡ（例えば、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１２、Ｈ１１、Ｈ１３、Ｈ１６、またはＨ１７ポリペプチド）に対するＫＤが、１０－６、１０－７、１０－８、１０－９、１０－１０、１０－１１、もしくは１０－１２ｎＭと等しいかまたはこれ未満である。ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、群２インフルエンザ株由来のＨＡ（例えば、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ１４、Ｈ７、Ｈ１０、またはＨ１５ポリペプチド）に対するＫＤが、１０－６、１０－７、１０－８、１０－９、１０－１０、１０－１１、もしくは１０－１２ｎＭと等しいかまたはこれ未満である。ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、インフルエンザＢのＨＡに対するＫＤが、１０－６、１０－７、１０－８、１０－９、１０－１０、１０－１１、もしくは１０－１２ｎＭと等しいかまたはこれ未満である。
ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、ａ）第１のＫＤ（群１インフルエンザ株由来のＨＡ、例えば、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１２、Ｈ１１、Ｈ１３、Ｈ１６またはＨ１７ポリペプチドに対するアフィニティーを表す）と、ｂ）第２のＫＤ（群２インフルエンザ株由来のＨＡ、例えば、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ１４、Ｈ７、Ｈ１０またはＨ１５ポリペプチドに対するアフィニティーを表す）とを有し、第１および第２のＫＤは、両方とも１０－８ｎＭと等しいかまたはこれ未満；および互いの１０もしくは１００倍以内の、一方または両方である。
ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、ａ）第１のＫＤ（Ｈ１、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、もしくはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５もしくはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４由来のＨ１に対するアフィニティーを表す）と、ｂ）第２のＫＤ（Ｈ３ポリペプチド、例えば、Ｈ３Ｎ２株、例えば、Ａ／Ｂｒｉｓｂａｎｅ／５９／２００７由来のＨ３に対するアフィニティーを表す）とを有し、第１および第２のＫＤは、両方とも１０－８ｎＭと等しいかまたはこれ未満；および互いの１０もしくは１００倍以内の、一方または両方である。
ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、ａ）第１のＫＤ（Ｈ１、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、もしくはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５もしくはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４由来のＨ１に対するアフィニティーを表す）と、ｂ）第２のＫＤ（Ｈ３ポリペプチド、例えば、Ｈ３Ｎ２株、例えば、Ａ／Ｂｒｉｓｂａｎｅ／５９／２００７由来のＨ３に対するアフィニティーを表す）とを有し、第１および第２のＫＤは、両方とも１０－８ｎＭと等しいかまたはこれ未満；および互いの１０もしくは１００倍以内の、一方または両方である。
ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、ａ）第１のＫＤ（群１インフルエンザ株由来のＨＡ、例えば、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１２、Ｈ１１、Ｈ１３、Ｈ１６またはＨ１７ポリペプチドに対するアフィニティー、および／あるいは群２インフルエンザ株由来のＨＡ、例えば、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ１４、Ｈ７、Ｈ１０またはＨ１５ポリペプチドに対するアフィニティーを表す）と、ｂ）第２のＫＤ（例えば、Ｂ／Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ／１／２０１０由来のインフルエンザＢのＨＡに対するアフィニティーを表す）とを有し、第１および第２のＫＤは、両方とも１０－８ｎＭと等しいかまたはこれ未満；および互いの１０もしくは１００倍以内の、一方または両方である。
ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、ａ）第１のＫＤ（群１インフルエンザ株由来のＨＡ、例えば、Ｈ１、例えば、Ｈ１Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｓｏｕｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ／１／１９１８、Ａ／Ｐｕｅｒｔｏ Ｒｉｃｏ／０８／１９３４、もしくはＡ／Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ／０４／２００９、またはＨ５Ｎ１株、例えば、Ａ／Ｉｎｄｏｎｅｓｉａ／５／２００５もしくはＡ／Ｖｉｅｔｎａｍ／１２０３／２００４由来のＨ１に対するアフィニティー、および／あるいは群２インフルエンザ株由来のＨＡ、例えば、Ｈ３Ｎ２株由来、例えば、Ａ／Ｂｒｉｓｂａｎｅ／５９／２００７由来のＨ３ポリペプチドに対するアフィニティーを表す）と、ｂ）第２のＫＤ（インフルエンザＢのＨＡに対するアフィニティー）とを有し、第１および第２のＫＤは、両方とも１０－８ｎＭと等しいかまたはこれ未満；および互いの１０もしくは１００倍以内の、一方または両方である。
ある実施形態では、抗体分子は、群１インフルエンザ株由来の少なくとも１つのＨＡポリペプチドに、参照抗ＨＡ抗体より高いアフィニティーで結合し、群２インフルエンザ株由来の少なくとも１つのＨＡポリペプチドに、参照抗ＨＡ抗体より高いアフィニティーで結合する。別の実施形態では、抗体分子は、インフルエンザＡ株由来の少なくとも１つのＨＡポリペプチドに、参照抗ＨＡ抗体より高いアフィニティーで結合し、インフルエンザＢ株由来の少なくとも１つのＨＡポリペプチドに、参照抗ＨＡ抗体より高いアフィニティーで結合する。例示的な参照ＨＡ抗体は、Ａｂ ６７－１１（米国仮特許出願第６１／６４５，４５３号、米国出願公開第２０１３／０３０２３４８号および国際出願公開ＷＯ２０１３／１６９３７７）、ＦＩ６（ＦＩ６、本明細書で使用される場合、米国公開出願第２０１０／００８０８１３号、米国公開出願第２０１１／０２７４７０２号、ＷＯ２０１３／０１１３４７またはＣｏｒｔｉら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３３：８５０－８５６，２０１１（２０１１年７月２８日にオンラインで公開）における任意の具体的に開示されるＦＩ６配列を指す；図４）、ＦＩ２８（米国公開出願第２０１０／００８０８１３号）およびＣ１７９（Ｏｋｕｎｏら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ． ６７：２５５２－１５５８，１９９３）、Ｆ１０（Ｓｕｉら、Ｎａｔ． Ｓｔｒｕｃｔ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １６：２６５，２００９）、ＣＲ９１１４（Ｄｒｅｙｆｕｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ．２０１２；３３７（６１００）：１３４３－１３４８；２０１２年８月９日にオンラインで公開）およびＣＲ６２６１（Ｅｋｉｅｒｔら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２４：２４６－２５１，２００９）を含む。
アフィニティー、または相対アフィニティー、またはアビディティー（ａｖｉｄｉｔｉｙ）は、ＥＬＩＳＡアッセイ（酵素結合免疫吸着アッセイ）、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）アッセイによるもの）、またはＫｉｎＥｘＡ（登録商標）アッセイ（Ｓａｐｉｄｙｎｅ，Ｉｎｃ．）によるなどの、当技術分野で公知の方法により測定することができる。相対結合アフィニティーは、本明細書では、ＥＬＩＳＡアッセイに従って表される。本明細書で使用される、群１のＨＡに、群２のＨＡに、およびインフルエンザＢのＨＡに「高アフィニティー」で結合する抗ＨＡ抗体は、ＥＬＩＳＡにより測定して２００ｐＭ未満であるかまたはこれと等しい、例えば、１００ｐＭ未満であるかまたはこれと等しいＫｄで、群１のＨＡに結合することができ、ＥＬＩＳＡにより測定して２００ｐＭ未満であるかまたはこれと等しい、例えば、１００ｐＭ未満であるかまたはこれと等しいＫｄで、群２のＨＡに結合することができ、かつ、ＥＬＩＳＡにより測定して２００ｐＭ未満であるかまたはこれと等しい、例えば、１００ｐＭ未満であるかまたはこれと等しいＫｄで、インフルエンザＢのＨＡに結合することができる。
例示的な抗ＨＡ抗体分子
本明細書では、表２に示される１つまたは複数のＣＤＲ配列および１つまたは複数のフレームワーク（ＦＲ）配列を有する抗体が提示される。
Figure 0007104629000140
ある実施形態では、抗ＨＡ抗体は、下記の表３に定義される重鎖および／または軽鎖を含む。表３の可変重鎖および軽鎖アミノ酸配列は、それぞれ図２、図３、または図７に提示されている。
Figure 0007104629000141
Figure 0007104629000142
Figure 0007104629000143
Ａｂ Ａ１８は、場合によって、本明細書では、Ａｂ ０１８としても知られる。
ある実施形態では、抗ＨＡ抗体は、下記の表４Ａに定義される重鎖、および／または下記の表４Ａに定義される軽鎖を含む。
Figure 0007104629000144
Figure 0007104629000145
ある実施形態では、本明細書で記載される抗体分子は、表４Ａに定義される重鎖配列および表４Ａに定義される軽鎖配列を含む。
ある実施形態では、本明細書で記載される抗体分子は、本明細書、例えば、表４Ａで定義される重鎖配列を含み、ここで、ジペプチドがＮ末端に融合している。典型的に、ジペプチドは、イソロイシン－アスパラギン酸（Ｉｌｅ－Ａｓｐ）である。別の実施形態では、本明細書で記載される抗体分子は、本明細書、例えば、表４Ａで定義される軽鎖配列を含み、ここで、ジペプチドがＮ末端に融合している。典型的に、ジペプチドは、Ｉｌｅ－Ａｓｐである。さらに別の実施形態では、本明細書で記載される抗体分子は、Ｎ末端のＩｌｅ－Ａｓｐジペプチドを含む重鎖と、Ｉｌｅ－Ａｓｐジペプチドを含む軽鎖とを含む。重鎖ポリペプチドまたは軽鎖ポリペプチドのプロペプチド配列において、Ｉｌｅ－Ａｓｐジペプチドは、シグナル配列とＦＲ１との間に存在する。Ｎ末端にＩｌｅ－Ａｓｐジペプチドを含む重鎖および軽鎖の可変配列を、表４Ｂに同定する。
Figure 0007104629000146
Figure 0007104629000147
別の実施形態では、本明細書に記載の抗体分子は、当該技術分野で公知の抗体以外である。例えば、抗体は、Ａｂ６７－１１（米国仮特許出願第６１／６４５，４５３号、米国出願公開第２０１３／０３０２３４８号および国際出願公開ＷＯ ２０１３／１６９３７７）、ＦＩ６（ＦＩ６、本明細書において使用される場合、米国出願公開第２０１０／００８０８１３号、米国出願公開第２０１１／０２７４７０２号、ＷＯ２０１３／０１１３４７またはＣｏｒｔｉら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３３：８５０－８５６， ２０１１（２０１１年７月２８日にオンラインで公開）における任意の具体的に開示されるＦＩ６配列を指す；図１２Ａ～１２Ｃ）、ＦＩ２８（米国出願公開第２０１０／００８０８１３号）、Ｃ１７９（Ｏｋｕｎｏ ら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ． ６７：２５５２，１９９３）、Ｆ１０（Ｓｕｉら、Ｎａｔ． Ｓｔｒｕｃｔ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １６：２６５，２００９）、ＣＲ９１１４（Ｄｒｅｙｆｕｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３７：１３４３，２０１２）またはＣＲ６２６１（Ｅｋｉｅｒｔら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２４：２４６，２００９）でない。ある実施形態では、本明細書に記載の抗体分子は、Ａｂ６７－１１（米国仮特許出願第６１／６４５，４５３号、米国出願公開第２０１３／０３０２３４８号および国際出願公開ＷＯ２０１３／１６９３７７）以外である。
バリアント
ある実施形態では、本明細書に記載の抗体分子は、本明細書に開示される重鎖、例えば、表３、表４Ａ、表４Ｂ、図２、図５または図７からのもの、例えば、配列番号１６１のコンセンサス配列と少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同な、あるいは少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一な可変重鎖免疫グロブリンドメインを有し、本明細書に開示される軽鎖、例えば、表３、表４Ａ、表４Ｂ、図３Ａ～３Ｂ、図６Ａ～６Ｂまたは図７からのもの、例えば、配列番号６２のコンセンサス配列と少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同な、あるいは少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一な可変軽鎖免疫グロブリンドメインを有する。コンセンサス配列は、コンピュータ処理によりデザインされた数百個のＶＨ／ＶＬの組合せの生化学的および生物物理学的特性の解析を介して決定した。コンセンサス配列は、所望の生化学的および生物物理学的データを含む複数の配列をアライメントしたとき、各アミノ酸がその部位で最も高頻度に生じるものである、アミノ酸配列を表す。
例示的な抗ＨＡ結合抗体は、本明細書に開示される特定の抗体の１つまたは複数のＣＤＲ、例えば、３つ全てのＨＣ ＣＤＲおよび／または３つ全てのＬＣ ＣＤＲ、あるいはそのような抗体と、合計で、少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同な、あるいは少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一なＣＤＲを有する。
ある実施形態では、Ｈ１およびＨ２の超可変ループは、本明細書で記載される抗体のものと同じカノニカル構造を有する。ある実施形態では、Ｌ１およびＬ２の超可変ループは、本明細書で記載される抗体のカノニカル構造と同じカノニカル構造を有する。
ある実施形態では、ＨＣおよび／またはＬＣ可変ドメイン配列のアミノ酸配列は、本明細書に記載の抗体のＨＣおよび／またはＬＣ可変ドメインのアミノ酸配列と少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同であるか、あるいは少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一である。ＨＣおよび／またはＬＣ可変ドメイン配列のアミノ酸配列は、本明細書で記載される抗体の対応する配列と、少なくとも１つのアミノ酸、しかし１０、８、６、５、４、３、または２以下のアミノ酸が異なりうる。例えば、差違は、主に、または完全に、フレームワーク領域内にあってもよい。
ある特定の実施形態では、アミノ酸の差違は、保存的アミノ酸差違（例えば、保存的アミノ酸置換）である。「保存的」アミノ酸置換とは、アミノ酸残基を、類似の側鎖を含むアミノ酸残基で置きかえたアミノ酸置換である。当技術分野では、類似の側鎖を含むアミノ酸残基のファミリーが規定されている。これらのファミリーは、例えば、塩基性側鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ－分枝型側鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）、および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を伴うアミノ酸を含む。
ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列のアミノ酸配列は、本明細書で記載される核酸配列と高度のストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする核酸配列、または本明細書で記載される可変ドメインもしくはアミノ酸配列をコードする核酸配列によってコードされうる。ある実施形態では、ＨＣおよび／またはＬＣ可変ドメインの１つまたは複数のフレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３および／またはＦＲ４）のアミノ酸配列は、本明細書に記載の抗体のＨＣおよびＬＣ可変ドメインの対応するフレームワーク領域と少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同であるか、あるいは少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一である。ある実施形態では、１つまたは複数の重鎖または軽鎖フレームワーク領域（例えば、ＨＣのＦＲ１、ＦＲ２およびＦＲ３）は、ヒト生殖系列抗体由来の対応するフレームワーク領域の配列と少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同であるか、あるいは少なくとも８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９２％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一である。
結合剤の生成
本明細書で記載される方法により生成された結合剤、例えば、抗体分子をコードする核酸（例えば、遺伝子）は、配列決定することができ、核酸の全てまたは一部は、核酸の全てまたは一部を発現するベクターにクローニングすることができる。例えば、核酸は、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ断片、またはＦｄ断片などの抗体をコードする遺伝子の断片を含みうる。
本開示はまた、本明細書で記載される、抗体またはその断片をコードする核酸を含む宿主細胞を提示する。宿主細胞は、例えば、原核細胞または真核細胞、例えば、哺乳動物細胞、または酵母細胞、例えば、Ｐｉｃｈｉａ（例えば、Ｐｏｗｅｒｓら（２００１年）、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ、２５１巻：１２３～３５頁を参照されたい）、Ｈａｎｓｅｕｌａ、またはＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓでありうる。
抗体分子、特に全長抗体分子、例えば、ＩｇＧは、哺乳動物細胞内で産生することができる。組換え発現のための例示的な哺乳動物の宿主細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（例えば、ＫａｕｆｍａｎおよびＳｈａｒｐ（１９８２年）、Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．、１５９巻：６０１～６２１頁に記載されているＤＨＦＲ選択用マーカーと共に使用される、ＵｒｌａｕｂおよびＣｈａｓｉｎ（１９８０年）、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ、７７巻：４２１６～４２２０頁に記載されているｄｈｆｒ－ＣＨＯ細胞を含む）、リンパ球細胞株、例えば、ＮＳ０骨髄腫細胞およびＳＰ２細胞、ＣＯＳ細胞、Ｋ５６２細胞、ならびに、トランスジェニック動物、例えばトランスジェニック哺乳動物由来の細胞を含む。例えば、細胞は、乳腺上皮細胞である。
免疫グロブリンドメインをコードする核酸配列に加えて、組換え発現ベクターは、さらなる核酸配列、例えば宿主細胞におけるベクターの複製を調節する配列（例えば、複製起点）、および選択用マーカー遺伝子を保有しうる。選択用マーカー遺伝子は、ベクターが導入されている宿主細胞の選択を容易にする（例えば、米国特許第４，３９９，２１６号、同第４，６３４，６６５号、および同第５，１７９，０１７号を参照されたい）。例示的な選択用マーカー遺伝子は、ジヒドロ葉酸レダクターゼ（ＤＨＦＲ）遺伝子（メトトレキサート選択／増幅でｄｈｆｒ－宿主細胞において使用するため）、およびｎｅｏ遺伝子（Ｇ４１８選択のため）を含む。
抗体分子（例えば、全長抗体またはその抗原結合部分）の組換え発現のための例示的なシステムにおいて、抗体重鎖および抗体軽鎖の両方をコードする組換え発現ベクターは、リン酸カルシウム媒介トランスフェクションによってｄｈｆｒ－ＣＨＯ細胞に導入される。組換え発現ベクター内において、抗体の重鎖遺伝子および軽鎖遺伝子はそれぞれ、遺伝子の高レベルの転写を推進するように、エンハンサー／プロモーター調節エレメント（例えば、ＳＶ４０、ＣＭＶ、アデノウイルスなどに由来するもの、例えばＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメントまたはＳＶ４０エンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメント）に作用的に連結している。組換え発現ベクターはＤＨＦＲ遺伝子も保有し、このため、メトトレキサート選択／増幅を使用してベクターがトランスフェクトされたＣＨＯ細胞の選択を行うことが可能になる。選択された形質転換体の宿主細胞は、抗体重鎖および軽鎖の発現を可能にするように培養され、培養培地から無傷抗体分子が回収される。組換え発現ベクターを調製するため、宿主細胞にトランスフェクトするため、形質転換体を選択するため、宿主細胞を培養するため、そして培養培地から抗体を回収するために、標準的な分子生物学技法が使用される。例えば、一部の抗体は、プロテインＡまたはプロテインＧを用いたアフィニティークロマトグラフィーによって単離することができる。例えば、精製された抗体は、当技術分野で公知であるタンパク質濃縮技法を使用して、約１００ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬまで濃縮することができる。
トランスジェニック動物によって抗体分子を産生することもできる。例えば、米国特許第５，８４９，９９２号は、トランスジェニック哺乳動物の乳腺において抗体分子を発現するための方法を記載する。乳特異的プロモーターと、目的の抗体分子、例えば、本明細書で記載される抗体をコードする核酸配列と、分泌のためのシグナル配列とを含む導入遺伝子が構築される。このようなトランスジェニック哺乳動物の雌により生成された乳は、その中に分泌された、目的の抗体、例えば、本明細書で記載される抗体を含む。抗体分子は、乳から精製される場合もあり、または、一部の用途では直接使用される場合もある。
抗体分子は、抗体重鎖および抗体軽鎖をコードする核酸を含有するベクターの投与後にｉｎ ｖｉｖｏで発現させることもできる。次いで、ベクター媒介遺伝子移入を使用して、循環中への抗ＨＡ抗体の分泌を操作する。例えば、本明細書で記載される抗ＨＡ抗体重鎖および抗ＨＡ抗体軽鎖を、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）系ベクターにクローニングし、抗ＨＡ抗体重鎖および抗ＨＡ抗体軽鎖のそれぞれを、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターなどのプロモーターの制御下におく。被験体、例えば患者、例えば、ヒト患者への、例えば筋肉内注射によるベクターの投与は、抗ＨＡ抗体の発現、および循環中への分泌をもたらす。
結合剤の改変
本明細書で記載される結合剤、例えば、抗体分子は、多数の特性を有するように、例えば、変更された、例えば延長された半減期を有するように、検出可能な部分、例えば標識と会合するように、例えば共有結合するように、毒素と会合するように、例えば共有結合するように、または、他の特性、例えば変更された免疫機能を有するように、改変することができる。
抗体分子は、修飾、例えば、Ｆｃ機能を変更して、例えば、Ｆｃ受容体との、またはＣ１ｑとの、またはこれらの両方との相互作用を減少させるかまたは除去する、修飾を含みうる。一例では、ヒトＩｇＧ１定常領域は、１つまたは複数の残基において変異していてもよい。
Ｆｃドメインを含む一部の抗体分子では、抗体産生系は、Ｆｃ領域がグリコシル化されている抗体分子を合成するようにデザインされていてもよい。Ｆｃドメインは、アスパラギン２９７に対応する残基を適切にグリコシル化する哺乳動物の発現系において生成されうる。Ｆｃドメインはまた、他の真核生物の翻訳後修飾も含みうる。
他の適切なＦｃドメイン修飾は、ＷＯ２００４／０２９２０７に記載されているものを含む。例えば、Ｆｃドメインは、ＸｍＡｂ（登録商標）Ｆｃ（Ｘｅｎｃｏｒ、Ｍｏｎｒｏｖｉａ、ＣＡ）であってもよい。Ｆｃドメイン、またはその断片は、ＷＯ０５／０６３８１５に記載されているドメインおよび断片など、Ｆｃγ受容体（ＦｃγＲ）結合領域内に置換を有しうる。一部の実施形態では、Ｆｃドメイン、またはその断片は、ＷＯ０５０４７３２７に記載されているドメインおよび断片など、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）結合領域内に置換を有する。他の実施形態では、Ｆｃドメインは、単鎖もしくはその断片、またはその修飾バージョン、例えば、ＷＯ２００８１４３９５４に記載されているものである。他の適切なＦｃ修飾は、当技術分野で公知であり、記載されている。
抗体分子は、例えば、循環中、例えば、血液、血清、リンパ、気管支肺胞洗浄液、もしくは他の組織における、その安定化および／または保持を、例えば、少なくとも１．５、２、５、１０、または５０倍改善する部分を含んで、改変することができる。
例えば、本明細書で記載される方法により作出された抗体分子は、ポリマー、例えば、実質的に非抗原性のポリマー、例えば、ポリアルキレンオキシドまたはポリエチレンオキシドと会合していてもよい。適切なポリマーは、実質的に重量により様々である。約２００～約３５，０００ダルトン（または約１，０００～約１５，０００、および２，０００～約１２，５００）の範囲の数平均分子量を含むポリマーを使用することができる。
例えば、本明細書で記載される方法により作出された抗体分子は、水溶性ポリマー、例えば、親水性ポリビニルポリマー、例えば、ポリビニルアルコールまたはポリビニルピロリドンとコンジュゲートさせることができる。このようなポリマーの非限定的なリストは、ポリアルキレンオキシドホモポリマー、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリプロピレングリコール、ポリオキシエチレン化ポリオール、これらのコポリマーおよびこれらのブロックコポリマーを含むが、ブロックコポリマーの水溶性が維持されることを条件とする。さらなる有用なポリマーは、ポリオキシアルキレン、例えば、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン、およびポリオキシエチレンとポリオキシプロピレンとのブロックコポリマー（プルロニック）；ポリメタクリレート；カルボマー；ホモ多糖およびヘテロ多糖、例えば、ラクトース、アミロペクチン、デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、アミロース、デキストラン硫酸、デキストラン、デキストリン、グリコーゲン、または酸ムコ多糖の多糖サブユニット、例えば、ヒアルロン酸を含む、サッカライド単量体のＤ－マンノース、Ｄ－ガラクトースおよびＬ－ガラクトース、フコース、フルクトース、Ｄ－キシロース、Ｌ－アラビノース、Ｄ－グルクロン酸、シアル酸、Ｄ－ガラクツロン酸、Ｄ－マンヌロン酸（例えば、ポリマンヌロン酸、またはアルギン酸）、Ｄ－グルコサミン、Ｄ－ガラクトサミン、Ｄ－グルコース、およびノイラミン酸を含む分枝状または非分枝状の多糖；ポリソルビトールおよびポリマンニトールなどの糖アルコールのポリマー；ヘパリンまたはヘパランを含む。
本明細書で開示される結合剤、例えば、抗体分子は、別の実体または部分と（例えば、細胞傷害性もしくは細胞増殖抑制性の部分、標識または検出可能な部分、または治療部分と）コンジュゲートさせることができる（ｃａｎ ｂｙ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ）。例示的な部分は、細胞傷害剤または細胞増殖抑制剤、例えば、治療剤、薬物、放射線を放出する化合物、植物由来、真菌由来、もしくは細菌由来の分子、または生物学的タンパク質（例えば、タンパク質毒素）もしくは生物学的粒子（例えば、例えば、ウイルスコートタンパク質を介する、組換えウイルス粒子）、検出用薬剤；医薬品、および／または抗体もしくは抗体部分の、別の分子（ストレプトアビジンのコア領域またはポリヒスチジンタグなど）との会合を媒介しうるタンパク質もしくはペプチドを含む。本明細書で開示される結合剤、例えば、抗体分子は、任意の適切な方法（例えば、化学的カップリング、遺伝子融合、共有結合、非共有結合的会合、または他の方法）により、１つまたは複数の他の分子実体へと機能的に連結することができる。
本明細書で開示される結合剤、例えば、抗体分子は、検出可能な部分、例えば、標識または造影剤とコンジュゲートさせることができる。このような部分は、酵素（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ベータ－ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ、アセチルコリンエステラーゼ、グルコースオキシダーゼなど）、放射性標識（例えば、３Ｈ、１４Ｃ、１５Ｎ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉなど）、ハプテン、蛍光標識（例えば、ＦＩＴＣ、ローダミン、ランタニドリン光体、フルオレセイン、イソチオシアン酸フルオレセイン、ローダミン、５－ジメチルアミン－１－ナフタレンスルホニルクロリド、フィコエリトリンなど）、リン光分子、化学発光分子、発色団、発光分子、フォトアフィニティー分子、有色粒子、またはアフィニティーリガンド、例えば、ビオチン、二次レポーターにより認識される所定のポリペプチドエピトープ（例えば、ロイシンジッパー対配列、または二次抗体のための結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ）を含みうる。一部の実施形態では、部分、例えば、検出可能な部分、例えば、標識には、潜在的な立体障害を低減するように、多様な長さのスペーサーアームが結合している。
ある実施形態では、本明細書で開示される結合剤、例えば、抗体分子は、検出用酵素で誘導体化され、かつ、酵素が、検出可能な反応生成物を生成させるのに使用する、さらなる試薬を添加することにより検出される。例えば、検出可能な作用物質である、西洋ワサビペルオキシダーゼが存在する場合、過酸化水素およびジアミノベンジジンの添加は、検出可能である、有色の反応生成物をもたらす。結合剤、例えば、本明細書に開示の抗体分子はまた、補欠分子族（例えば、ストレプトアビジン／ビオチンおよびアビジン／ビオチン）によっても誘導体化させることができる。例えば、抗体を、ビオチンで誘導体化させ、アビジンまたはストレプトアビジンの結合の間接的測定を介して検出することができる。
ある実施形態では、部分は、とりわけ、常磁性イオンおよびＮＭＲ検出用物質を含む。例えば、一部の実施形態では、常磁性イオンは、クロム（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、鉄（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩ）、コバルト（ＩＩ）、ニッケル（ＩＩ）、銅（ＩＩ）、ネオジム（ＩＩＩ）、サマリウム（ＩＩＩ）、イッテルビウム（ＩＩＩ）、ガドリニウム（ＩＩＩ）、バナジウム（ＩＩ）、テルビウム（ＩＩＩ）、ジスプロシウム（ＩＩＩ）、ホルミウム（ＩＩＩ）、エルビウム（ＩＩＩ）、ランタン（ＩＩＩ）、金（ＩＩＩ）、鉛（ＩＩ）、および／またはビスマス（ＩＩＩ）のうちの１つまたは複数である。
本明細書で開示される結合剤、例えば、抗体分子は、治療剤、例えば、抗ウイルス活性、抗炎症活性、または細胞傷害活性などを含む薬剤と会合するように、例えば、コンジュゲートするように、修飾することができる。一部の実施形態では、治療剤は、インフルエンザ感染の症状または原因を処置することができる（例えば、例えば、抗ウイルス活性、鎮痛活性、抗炎症活性、免疫調節活性、睡眠誘導活性など）。
処置方法および投与
本開示で特色とされる結合剤、例えば、抗体分子、またはその製剤は、被験体、例えば、インフルエンザウイルスに感染した、または感染する危険性がある被験体、例えば、ヒト被験体を処置するために、使用することができる。
任意のヒトが、インフルエンザウイルスによる感染の処置または予防のために本明細書で開示される抗体分子を受ける候補である。免疫不全状態の（ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ）個体などの感染の危険性が高いヒト、およびインフルエンザウイルスへの曝露の危険性が高いヒトが、抗体分子による処置を受けるのに特に適している。免疫不全状態の個体は、高齢者（６５歳およびこれより高齢）および小児（例えば、６カ月～１８歳）、ならびに慢性の医学的状態を有する人々を含む。曝露の危険性が高い人々は、ヘルスケア（ｈｅａｔｈ ｃａｒｅ）従事者、教師、および緊急時対応要員（例えば、消防士、警察官）を含む。
本明細書で記載される抗体分子はまた、二次感染（例えば、二次細菌感染）、またはインフルエンザに関連する二次感染を含む危険性、または被験体に対するその何らかの影響（例えば、症状または合併症）を予防または低減する（例えば、最小限に抑える）ために使用することができる。日和見性の二次細菌感染症（例えば、二次細菌性肺炎、例えば、主にＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅによるもの）は、季節性インフルエンザ感染および汎流行インフルエンザ感染に関連する全体的な罹患率および死亡率に有意に寄与する。本明細書で記載される抗体分子は、被験体における二次的な日和見感染症（例えば、細菌感染症）からの合併症を予防または低減する（例えば、最小限に抑える）ために使用することができる。
抗体分子は、被験体、例えば、ヒト被験体に、様々な方法によって投与することができる。多くの用途で、投与経路は、静脈内注射もしくは注入、皮下注射、または筋肉内注射のうちの１つである。抗体分子は固定用量として投与してもよく、ｍｇ／ｋｇ用量で投与してもよい。抗体分子は、静脈内（ＩＶ）投与してもよく、皮下（ＳＣ）投与してもよい。例えば、抗体分子は、約５０～６００ｍｇの固定単位用量で、例えば、４週毎にＩＶ投与してもよく、約５０～１００ｍｇ（例えば、７５ｍｇ）の固定単位用量で、例えば、少なくとも１週間に１回（例えば、１週間に２回）ＳＣ投与してもよい。ある実施形態では、抗体分子は、５０ｍｇ～１００００ｍｇ、例えば、１０００ｍｇ～５０００ｍｇ、２０００ｍｇ～５０００ｍｇ、２０００ｍｇ～３０００ｍｇ、２３００～４６００ｍｇまたは４０００ｍｇ～５０００ｍｇ、例えば、５０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２０ｍｇ、１３０ｍｇ、１４０ｍｇ、１５０ｍｇ、１６０ｍｇ、１８０ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１１００ｍｇ、１２００ｍｇ、１３００ｍｇ、１４００ｍｇ、１５００ｍｇ、１６００ｍｇ、１７００ｍｇ、１８００ｍｇ、１９００ｍｇ、２０００ｍｇ、２１００ｍｇ、２２００ｍｇ、２３００ｍｇ、２４００ｍｇ、２５００ｍｇ、２６００ｍｇ、２７００ｍｇ、２８００ｍｇ、２９００ｍｇ、３０００ｍｇ、３１００ｍｇ、３２００ｍｇ、３３００ｍｇ、３４００ｍｇ、３５００ｍｇ、３６００ｍｇ、３７００ｍｇ、３８００ｍｇ、３９００ｍｇ、４０００ｍｇ、４１００ｍｇ、４２００ｍｇ、４３００ｍｇ、４４００ｍｇ、４５００ｍｇまたはこれより多くの固定単位用量でＩＶ投与される。ＩＶ用量の投与は、１週間あたり１回もしくは２回もしくは３回またはこれより多くてもよく、２、３、４、もしくは５週間毎に１回またはこれより低い頻度であってもよい。
ある実施形態では、抗体分子は、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、もしくは１２０ｍｇ、またはこれより多い固定単位用量でＳＣ投与される。ＳＣ用量の投与は、１週間あたり１回もしくは２回もしくは３回またはこれより多くてもよく、２、３、４、もしくは５週間毎に１回またはこれより低い頻度であってもよい。
本明細書で開示される抗ＨＡ抗体分子は、吸入によって、例えば、鼻腔内によってまたは経口吸入によって、例えば、５０ｍｇ、６０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２０ｍｇ、１３０ｍｇ、１４０ｍｇ、１５０ｍｇ、１６０ｍｇ、１８０ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、もしくは６００ｍｇ、またはこれより多い固定単位用量で投与することもできる。
ある実施形態では、抗ＨＡ抗体は、ベクター媒介遺伝子移入を介して、例えば、抗ＨＡ抗体の重鎖および軽鎖をコードするベクターの送達を介して被験体に投与され、抗体は、体内で重鎖遺伝子および軽鎖遺伝子から発現される。例えば、重鎖および軽鎖をコードする核酸を自己相補的ＡＡＶベクターなどのＡＡＶベクター内でクローニングすることができ、このｓｃＡＡＶベクターはＩＭ注射などの注射によりヒトに投与され、抗体が発現されヒトの循環中に分泌される。
抗体分子は、約１から５０ｍｇ／ｋｇの間、例えば、約１から１０ｍｇ／ｋｇの間、約１から２５ｍｇ／ｋｇの間または約２５から５０ｍｇ／ｋｇの間、例えば、約５０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、もしくはそれ未満の用量でボーラスで投与することもできる。修飾用量範囲として、典型的に４週間毎または月に１回の投与のために、約３０００ｍｇ／被験体、約１５００ｍｇ／被験体、約１０００ｍｇ／被験体、約６００ｍｇ／被験体、約５００ｍｇ／被験体、約４００ｍｇ／被験体、約３００ｍｇ／被験体、約２５０ｍｇ／被験体、約２００ｍｇ／被験体または約１５０ｍｇ／被験体未満である用量が挙げられる。抗体分子は、例えば、３～５週間毎、例えば、第４週毎（ｅｖｅｒｙ ｆｏｕｒｔｈ ｗｅｅｋ）、または毎月投与してもよい。
投薬は、抗体の過去の投与での患者のクリアランス速度に従って調整してもよい。例えば、患者は、患者の身体における抗体のレベルが所定のレベル未満に低下するまで、第２のまたは後続の用量を投与されない場合がある。ある実施形態では、患者由来の試料（例えば、血漿、血清、血液、尿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））が抗体の存在についてアッセイされ、抗体のレベルが所定のレベルを超える場合、患者には第２のまたは後続の用量が投与されない。患者の身体における抗体のレベルが所定のレベル未満であれば、第２のまたは後続の用量が患者に投与される。抗体レベルが高過ぎる（所定のレベルを超える）と決定された患者は、１日もしくは２日もしくは３日、または１週間後に再度調べてよく、患者試料中の抗体のレベルが所定のレベル未満に低下していれば、患者に第２のまたは後続の用量の抗体を投与してもよい。
ある特定の実施形態では、抗体は、埋込物、およびマイクロカプセル化送達システムを含む制御放出製剤など、薬物を、急速な放出に対して保護するキャリアと共に調製することができる。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの、生体分解性ポリマー、生体適合性ポリマーを使用することができる。このような製剤を調製するための多くの方法は、特許になっているか、または、一般に、公知である。例えば、Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ（Ｄｒｕｇｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、第２版、Ｊ． Ｒｏｂｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｖ． Ｈ． Ｌ． Ｌｅｅ編、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９８７を参照されたい。
医薬組成物は、医用デバイスを用いて投与することができる。例えば、医薬組成物は、米国特許第５，３９９，１６３号、同第５，３８３，８５１号、同第５，３１２，３３５号、同第５，０６４，４１３号、同第４，９４１，８８０号、同第４，７９０，８２４号、または同第４，５９６，５５６号で開示されているデバイスなどの無針皮下注射デバイスを用いて投与することができる。周知の埋込物およびモジュールの例は、例えば、制御された速度で薬を投薬する（ｄｉｓｐｅｎｓｉｎｇ）ための植え込み式微量注入ポンプを開示する米国特許第４，４８７，６０３号；皮膚を介して医薬を投与するための治療デバイスを開示する米国特許第４，４８６，１９４号；精確な注入速度で薬を送達するための薬注入ポンプを開示する米国特許第４，４４７，２３３号；連続した薬物送達のための可変流量の植え込み式注入器具を開示する米国特許第４，４４７，２２４号；マルチチャンバコンパートメントを含む浸透圧式薬物送達システムを開示する米国特許第４，４３９，１９６号；および浸透圧式薬物送達系を開示する米国特許第４，４７５，１９６号で論じられている。当然ながら、このような埋込物、送達システム、およびモジュールは他にも多くのものが公知である。
ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、口腔、経口、または鼻腔送達により、例えば、液体、スプレー、またはエアロゾルとして、例えば、局所適用により、例えば、液体もしくは滴剤により、または吸入により投与される。
本明細書で記載される抗体分子は、ウイルス感染または感染の症状の処置のために、１つまたは複数のさらなる治療剤、例えば、第２の薬物と共に投与してもよい。抗体分子および１つもしくは複数の第２のまたはさらなる薬剤は、併せて同じ製剤に製剤化されてもよく、あるいは、別個の製剤において製剤化されてもよく、患者に同時に投与してもよく、いずれの順序で逐次的に投与してもよい。
投薬計画は、治療応答またはコンビナトリアルな治療効果などの所望の応答をもたらすように調整される。一般に、被験体に両方の薬剤を生体利用可能な数量で提供するために、抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤の用量の任意の組合せを（別個か共製剤化されたものかを問わず）使用することができる。
本明細書で使用される投薬単位または「固定用量」とは、処置される被験体のための単位投与量として適する、物理的に個別の単位であって、各単位が、要求される医薬キャリアを随伴させて、および任意選択で別の薬剤を随伴させて、所望の治療効果をもたらすように計算された、所定数量の活性化合物を含有する単位を指す。
医薬組成物は、「治療有効量」の本明細書で記載される薬剤を含みうる。ある実施形態では、抗体分子が第２のまたはさらなる薬剤と組み合わせて投与される場合、このような有効量は、投与される第１の薬剤および第２のまたはさらなる薬剤のコンビナトリアル効果に基づいて決定されうる。薬剤の治療有効量はまた、個体の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに化合物が、個体において所望の応答、例えば、少なくとも１つの感染パラメータの軽快、または悪寒、発熱、咽喉痛、筋肉痛、頭痛、咳、脱力感、疲労、および全身違和感などの感染の少なくとも１つの症状の軽快を誘発する能力などの因子に従い変動しうる。治療有効量はまた、組成物の任意の毒性作用または有害作用を、治療的に有益な効果が凌駕するときの量でもある。
ある実施形態では、例えば、医薬調製物として提供された、結合剤、例えば、抗体分子の投与は、以下の経路：経口、静脈内、筋肉内、動脈内、皮下、脳室内、経皮、皮間（ｉｎｔｅｒｄｅｒｍａｌ）、直腸、膣内、腹腔内、局所（液体、粉末、軟膏、クリーム、スプレー、または滴剤による）、粘膜、鼻、口腔、腸、舌下；気管内点滴注入、気管支点滴注入、および／もしくは吸入；ならびに／または経口スプレー、鼻スプレー、および／もしくはエアロゾルのうちの１つによるものである。
組合せ処置および例示的な第２のまたはさらなる薬剤
例えば、製剤（例えば、医薬製剤）として提供された、結合剤、例えば、抗体分子は、単独で投与してもよく、あるいは、１つまたは複数の他の療法、例えば、第２のまたはさらなる治療剤の投与と組み合わせて投与してもよい。
ある実施形態では、組合せは、必要とされる抗体分子または他の療法の用量の低下をもたらすことができ、これにより、ある実施形態では、副作用を低減することができる。ある実施形態では、組合せは、一方または両方の薬剤の送達または有効性の増強をもたらしうる。薬剤または療法は、同時に（例えば、患者に投与される単一の製剤として、または同時に投与される２つの別個の製剤として）投与してもよく、いずれの順序で逐次的に投与してもよい。
このような第２のまたはさらなる薬剤は、ワクチン、抗ウイルス剤、および／またはさらなる抗体を含む。典型的な実施形態では、第２のまたはさらなる薬剤は、結合剤、例えば、抗体分子と共製剤化されないが、他の実施形態では、これと共製剤化される。
ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子、および第２のまたはさらなる薬剤は、以下の、一方の治療レベルまたは治療効果が他方と重複すること；両方が検出可能なレベルで同時に存在すること；あるいは、治療効果が、結合剤、例えば、抗体分子、または第２のもしくはさらなる薬剤のいずれかの非存在下で見られる治療効果より高いことのうちの１つまたは複数が達成されるように投与される。ある実施形態では、各薬剤は、その薬剤について決定された用量およびタイムスケジュールにおいて投与される。
第２のまたはさらなる薬剤は、例えば、インフルエンザの処置または予防のためのものでありうる。例えば、本明細書で提示される結合剤、例えば、抗体分子、例えば、治療抗体は、患者の免疫系を刺激して特定のインフルエンザＡの株による感染を予防するために、ワクチン、例えば、本明細書で記載されるワクチン、またはインフルエンザペプチドの混合物（別称、カクテル）と組み合わせて投与することができる。他の例では、第２のまたはさらなる薬剤は、抗ウイルス剤（例えば、抗ＮＡ剤または抗Ｍ２剤）、鎮痛剤、抗炎症剤、抗生剤、ステロイド剤、第２の治療抗体分子（例えば、抗ＨＡ抗体）、アジュバント、プロテアーゼ、またはグリコシダーゼ（例えば、シアリダーゼ）などである。
例示的な抗ウイルス剤は、例えば、ワクチン、ノイラミニダーゼ阻害剤、またはヌクレオシド類似体を含む。例示的な抗ウイルス剤は、例えば、ジドブジン、ガンシクロビル（ｇａｎｇｃｙｃｌｏｖｉｒ）、ビダラビン、イドクスウリジン、トリフルリジン、ホスカルネット、アシクロビル、リバビリン、アマンタジン、レマンチジン、サキナビル、インジナビル、リトナビル、アルファ－インターフェロンおよび他のインターフェロン、ノイラミニダーゼ阻害剤（例えば、ザナミビル（Ｒｅｌｅｎｚａ（登録商標））、オセルタミビル（Ｔａｍｉｆｌｕ（登録商標））、ラニナミビル、ペラミビル）、リマンタジンを含みうる。例示的な第２の抗体分子は、例えば、Ａｂ ６７－１１（米国仮特許出願第６１／６４５，４５３号、米国出願公開第２０１３／０３０２３４８号および国際出願公開ＷＯ２０１３／１６９３７７）、ＦＩ６（米国出願公開第２０１０／００８０８１３号）、ＦＩ２８（米国出願公開第２０１０／００８０８１３号）、Ｃ１７９（Ｏｋｕｎｏら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ． ６７：２５５２－８，１９９３）、Ｆ１０（Ｓｕｉら、Ｎａｔ． Ｓｔｒｕｃｔ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １６：２６５，２００９）、ＣＲ９１１４（Ｄｒｅｙｆｕｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３７：１３４３，２０１２）またはＣＲ６２６１（例えば、Ｅｋｉｅｒｔら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２４：２４６，２００９を参照）を含む。したがって、Ａｂ ０４４をこれらの抗体のうちのいずれかと組み合わせて使用してもよい。他の実施形態では、２つまたはこれを超える結合剤、例えば、本明細書で開示される抗体分子を組み合わせて投与してもよく、例えば、Ａｂ ０４４をＡｂ ０３２と組み合わせて投与してもよい。組合せの場合、２つの薬剤は、同じ投薬単位の一部として投与することもでき、別個に投与することもできる。インフルエンザ感染と関連する症状の処置に有用な他の例示的な薬剤は、アセトアミノフェン、イブプロフェン、アスピリン、およびナプロキセンである。
ある実施形態では、抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤は共製剤として提供され、この共製剤が被験体に投与される。例えば、共製剤の投与の少なくとも２４時間前または後に、別個に抗体製剤の１用量を投与し、次いで第２のまたはさらなる薬剤を含有する製剤の１用量を投与することが、さらに可能である。別の実現形態では、抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤は別個の製剤として提供され、投与のステップは、抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤を逐次的に投与することを含む。逐次的投与は、同じ日に（例えば、互いの１時間以内、または少なくとも３、６、もしくは１２時間おいて）提供されてもよく、異なる日に提供されてもよい。
ある実施形態では、抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤は、それぞれ、時間的な隔たりがある複数の用量として投与される。抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤は一般に、それぞれ、レジメンに従い投与される。一方または両方のレジメンは、規則的な周期性を有しうる。抗体分子のレジメンは、第２のまたはさらなる薬剤のレジメンとは異なる周期性を有してもよく、例えば、一方を他方より高頻度で投与してもよい。一実現形態では、抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤の一方は、毎週１回投与され、他方は、毎月１回投与される。別の実現形態では、抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤の一方は、連続して、例えば、３０分間を超えるが１、２、４、または１２時間未満の期間にわたって投与され、他方は、ボーラスとして投与される。ある実施形態では、逐次的投与が施行される。１つの薬剤および別の薬剤の投与間の時間は、数分、数時間、数日、または数週とすることができる。本明細書で記載される抗体分子の使用はまた、別の療法の投与量を低減するため、例えば、投与されている別の薬剤に関連した副作用を低減するために使用されてもよい。したがって、組合せは、抗体分子の非存在下で使用される投与量より少なくとも１０、２０、３０、または５０％低い投与量で第２のまたはさらなる薬剤を投与することを含みうる。抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤は、任意の適切な方法により、例えば、皮下、筋肉内、または静脈内に投与することができる。
一部の実施形態では、抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤のそれぞれは、それぞれが単剤療法のために処方される用量と同じ用量で投与される。他の実施形態では、抗体分子は、単独で投与される場合に有効性のために要求される量と等しいかまたはこれ未満の投与量で投与される。同様に、第２のまたはさらなる薬剤は、単独で投与される場合に有効性のために要求される量と等しいかまたはこれ未満の投与量で投与されうる。
一部の場合では、本明細書で記載される製剤、例えば、本明細書で記載される抗体分子を含有する製剤は、１つもしくは複数の第２のもしくはさらなる薬剤を含むか、または、１つもしくは複数の第２のもしくはさらなる薬剤を含有する製剤と組み合わせて投与される。
ある実施形態では、例えば、医薬調製物として提供された、結合剤、例えば、抗体分子は、複数の粒子、例えば、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３ミクロンの平均粒子サイズを含む粒子の、吸入またはエアロゾル送達によって投与される。
ある実施形態では、製剤は、免疫原またはワクチンと組み合わせて使用される（例えば、投与される）。例示的な免疫原およびワクチンは国際出願公開第ＷＯ２０１３／１７０１３９号に記載されており、その内容は、参照によりその全体が組み込まれる。
キット
例えば、本明細書で記載される方法により作出された、本明細書で開示される製剤（例えば、医薬製剤）は、キットで提供される（例えば、パッケージングされる）場合がある。キットは、１つまたは複数の他の構成要素、例えば、容器、バッファまたは他の希釈剤、送達デバイスなどを含みうる。
ある実施形態では、キットは、例えば、インフルエンザウイルスによる感染の処置または予防のため、製剤（例えば、医薬製剤）を被験体に投与するための材料を含む。例えば、キットは、（ａ）抗体分子を含む製剤（例えば、医薬製剤）を含有する容器、任意選択で（ｂ）第２の治療剤を含有する容器、および任意選択で（ｃ）情報資料のうちの１つまたは複数または全てを含みうる。
別の実施形態では、キットは、診断アッセイにおいて抗体分子を使用するための、例えば、生物学的試料中のＨＡの検出のための材料を含む。例えば、キットは、（ａ）抗体分子を含む製剤（例えば、医薬製剤）を含有する容器、任意選択で（ｂ）抗体を検出するための、例えば、ＥＬＩＳＡまたは免疫組織化学アッセイで使用するための、例えば、検出可能な部分で標識した、試薬を含有する容器、および任意選択で（ｃ）情報資料のうちの１つまたは複数または全てを含みうる。別の実施形態では、キットは、製剤、例えば、検出可能な部分を含む結合剤（例えば、抗体分子）を含む。
ある実施形態では、キットは、固体基材、例えば、ビーズ、ディップスティック、アレイなどを含み、この上に、製剤、例えば、結合剤（例えば、抗体分子）が配置される。
情報資料は、本明細書で記載される方法および／または治療利益もしくは診断アッセイのための薬剤の使用に関する説明資料、指導用資料、マーケティング資料、または他の資料でありうる。
キットの情報資料は、その形態において限定されない。ある実施形態では、情報資料は、抗体の産生、濃度、有効期限、バッチまたは生産場所情報などに関する情報を含みうる。ある実施形態では、情報資料は、例えば、適切な用量、剤形、または投与方式（例えば、本明細書で記載される用量、剤形、または投与方式）において、感染、例えば、ウイルス感染または二次感染（例えば、二次細菌感染）を有する被験体を処置するために、製剤または抗体分子を投与する方法に関する。
別の実施形態では、情報資料は、診断アッセイのために、例えば、生物学的試料中のインフルエンザウイルスの存在を検出するために、製剤または抗体分子を使用するための方法に関する。
情報は、印刷されたテキスト、コンピュータ可読資料、ビデオ記録、もしくは音声記録、または実際の資料へのリンクもしくはアドレスを提示する情報を含む様々なフォーマットで提示することができる。
結合剤（例えば、抗体分子）に加えて、キット内の製剤は、溶媒もしくはバッファ、安定化剤、または防腐剤などの他の成分を含みうる。結合剤（例えば、抗体分子）は、任意の形態、例えば、液体、乾燥または凍結乾燥された形態で提供され、実質的に純粋かつ／または無菌でありうる。薬剤が液体溶液において提供される場合、この液体溶液は、典型的には水性溶液である。薬剤が乾燥形態で提供される場合、復元は一般に、適切な溶媒の添加によるものである。溶媒、例えば、滅菌水または滅菌緩衝液は、任意選択で、キット内に提供されてもよい。
キットは、結合剤を含有する製剤のための１つまたは複数の容器を含みうる。ある実施形態では、キットは、製剤および情報資料のために、別個の容器、仕切り、またはコンパートメントを含有する。例えば、製剤は、ボトル、バイアル、またはシリンジ内に含有されていてよく、情報資料は、プラスチックスリーブまたはパケット内に含有されていてよい。別の実施形態では、キットの別個の要素は、単一の分かれていない容器内に含有される。例えば、製剤は、ラベルの形態の情報資料が付着しているボトル、バイアル、またはシリンジ内に含有される。ある実施形態では、キットは、結合剤（例えば、抗体分子）の１つまたは複数の単位剤形（例えば、本明細書で記載される剤形）をそれぞれが含有する、複数（例えば、パック）の個別容器を含む。容器は、組合せ単位投与量、例えば、抗体分子および第２のまたはさらなる薬剤の両方を、例えば、所望の比で含む単位を含みうる。例えば、キットは、例えば、単一の組合せ単位用量をそれぞれが含有する、複数のシリンジ、アンプル、ホイルパケット、ブリスターパック、または医用デバイスを含みうる。キットの容器は、気密性、防水性（例えば、水分変化または蒸発に対して不透過性）、かつ／または遮光性でありうる。
ある実施形態では、キットは２つの容器を含み、そのうち一方は、製剤（例えば、医薬製剤）を含有し、他方は、アジュバントを含有する。ある実施形態では、キットは２つの容器を含み、そのうち一方は、製剤（例えば、医薬製剤）を凍結乾燥された粉末として含有し、他方は、製剤（例えば、医薬製剤）を再懸濁させるための液体を含有する。ある実施形態では、キットは、製剤の使用のための指示をさらに含む。キットは、医薬品または生物学的製品の製造、使用、および販売を規制する政府機関により要求される通知を含有する場合があり、この通知は、ヒトへの投与に関して製剤の製造、使用、および／または販売が承認されていることを指し示すものである。製剤は、密封容器において供給されてもよい。製剤は、液体として提供される場合もあり、例えば、水または食塩液の添加により、被験体への投与に適切な濃度まで復元されうる、凍結乾燥された粉末として提供される場合もある。
キットは、任意選択で、製剤の投与に適切なデバイス、例えば、シリンジまたは粒子もしくはエアロゾルを送達するためのデバイス、例えば、吸入器、噴霧デバイス、もしくはドロッパー、または他の適切な送達デバイスを含む。デバイスは、薬剤の一方または両方が事前充填した状態で提供されてもよく、空であるが充填に適切であってもよい。
診断法
本明細書で提示される結合剤、例えば、抗体分子は、生物学的試料、例えば、患者試料、例えば、流体試料、例えば、血液、血清、唾液、粘液、もしくは尿試料、または組織試料、例えば、生検中の、インフルエンザの存在を同定するために有用である。
ある実施形態では、患者試料を、本明細書で開示される結合剤、例えば、抗体分子と接触させ、結合を検出する。結合は、いくつかの検出フォーマットおよび検出手段を用いて、例えば、抗原捕捉アッセイ、例えば、ＥＬＩＳＡアッセイもしくはウェスタンブロット、または免疫組織化学アッセイを用いて、検出することができる。ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、例えば、不溶性マトリックス、例えば、ビーズまたは他の基材、およびＨＡの結合を検出するために使用される検出分子とカップリングした状態で提供される。
結合剤、例えば、抗体分子の、ＨＡへの結合は、検出可能な部分を含む試薬、例えば、結合剤、例えば、抗体分子に結合する試薬、例えば、抗体を用いて、検出することができる。ある実施形態では、結合剤、例えば、抗体分子は、検出可能な部分を有する。好適な検出可能な部分として、酵素（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ベータ－ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ、アセチルコリンエステラーゼ、グルコースオキシダーゼなど）、放射性標識（例えば、３Ｈ、１４Ｃ、１５Ｎ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ）、ハプテン、蛍光標識（例えば、ＦＩＴＣ、ローダミン、ランタニドリン光体、フルオレセイン、イソチオシアン酸フルオレセイン、ローダミン、５－ジメチルアミン－１－ナフタレンスルホニルクロリド、フィコエリトリンなど）、リン光分子、化学発光分子、発色団、発光分子、フォトアフィニティー分子、有色粒子、またはアフィニティーリガンド、例えば、ビオチン、二次レポーターにより認識される所定のポリペプチドエピトープ（例えば、ロイシンジッパー対配列、または二次抗体のための結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ）が挙げられる。一部の実施形態では、標識には、潜在的な立体障害を低減するように、多様な長さのスペーサーアームが結合している。
ある実施形態では、本明細書で記載される方法によって（ｂｅ ａ ｍｅｔｈｏｄ）、インフルエンザウイルスの存在についてヒトを調べ、試験が陽性であれば、本明細書で提示される結合剤、例えば、抗体分子、例えば、抗体が投与される。
本明細書で提示される結合剤、例えば、抗体分子、例えば、抗体は、細胞学アッセイのために、例えば、細胞内のＨＡを同定するために、使用することができる。このアッセイは、比色アッセイでありうる。正常な（感染していない）個体由来の生物学的試料が対照として使用される。診断アッセイはｉｎ ｖｉｔｒｏで実施されてもよい。
診断アッセイはまた、培養物中の細胞の感染、例えば、培養物中の哺乳動物細胞の感染を決定するために実施されてもよい。抗体分子は、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイにおいて使用されてもよい。
本明細書で開示される抗体分子は広域スペクトルのＨＡ亜型に結合するため、本明細書で開示される診断アッセイは、様々な顕著に異なるインフルエンザ株に感染した患者においてインフルエンザウイルスの存在を検出することができる。亜型特異的抗体、または他のアッセイ（例えば、ＲＦＬＰ（制限断片長多型）、ＰＣＲ（ポリメラーゼ連鎖反応）、ＲＴ－ＰＣＲ（逆転写ポリメラーゼ連鎖反応）、ノーザンブロット、サザンブロット、またはＤＮＡ配列決定）を用いて患者試料をさらに調べ、特定のウイルス株をさらに決定してもよい。
ある実施形態では、インフルエンザＡに感染していると決定された患者は、感染を処置するために、本明細書で開示される抗体分子をさらに投与されうる。
固体基材、例えば、ビーズ、ディップスティック、アレイなども提供され、この上に、結合剤、例えば、抗体分子が配置される。
以下の実施例により本開示をさらに例示するが、実施例はさらなる限定と解釈されてはならない。
本明細書で記載される抗ＨＡ抗体分子は、国際公開第ＷＯ２０１３／１７０１３９号、米国特許第８，８７７，２００号、米国特許第９，０９６，６５７号、および米国特許出願公開第２０１３／０３０２３４９号においても開示されている。前述の刊行物の内容は、参照によりそれらの全体が組み込まれる。
Figure 0007104629000148
Figure 0007104629000149
Figure 0007104629000150
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Figure 0007104629000152
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Figure 0007104629000163
Figure 0007104629000164
（実施例１）
抗ＨＡ抗体のデザイン
ウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）を標的とするヒト抗体（ＩｇＧ）をコンピュータ処理によりデザインした。ＨＡは、宿主細胞表面受容体へのウイルス結合、およびウイルスエンベロープへの細胞膜融合を媒介し、ウイルス侵入をもたらす。本明細書で記載される抗体分子は、ＨＡの、融合性活性を遮断するようにデザインした。
全ての抗体構築物は、ヒトＩｇＧ１構造（γ１重鎖およびκ軽鎖）に基づいた。ＶＨ（可変重ドメイン）およびＶＬ（可変軽ドメイン）内の点変異をコンピュータ処理によりデザインした。これらの変異は、ＣＤＲ（相補性決定領域）の内部または外部に位置する。変異は、例えば、抗原結合特性を修飾するように（例えば、より強いまたはより弱い結合アフィニティーのため）、または構造を安定化させるように、または発現特性を改善したりするようにデザインした。
Ａ１８と呼ばれる１つの抗体の重鎖および軽鎖配列を図１に提示する。
例示的なコンピュータ処理によりデザインされた抗体に関する重鎖および軽鎖の対合は、上記の「発明を実施するための形態」の表３に示されている。
抗体Ａｂ Ａ１８、Ａｂ ０３１、Ａｂ ０３２、Ａｂ ０４４、Ａｂ ０１４、およびＡｂ ０２８のそれぞれに関する可変重鎖および可変軽鎖のＤＮＡ配列を下記に提示する。
Figure 0007104629000165
Figure 0007104629000166
Figure 0007104629000167
上記の配列のそれぞれは、５’末端にＡＴＣＧＡＴヌクレオチド配列を含むように修飾することができ、これは、アミノ末端にＩｌｅ－Ａｓｐを含む可変重鎖または軽鎖ポリペプチドをコードする。
（実施例２）
初期製剤研究
この実施例は、本明細書で記載される例示的な抗ＨＡ抗体分子、例えば、Ａｂ ０４４に関する、初期製剤研究の結果を要約する。
手順
４０ｍＭのリン酸ナトリウム－クエン酸緩衝液を含み、ｐＨ値が異なり、かつ組成の異なる１４種の製剤マトリックスを調製した。抗体試料を、一連の、プロテインＡアフィニティークロマトグラフィー、アニオン交換クロマトグラフィー、およびカチオン交換クロマトグラフィーによって調製した。限外濾過／透析濾過を使用し、精製された試料を適切な溶液中で製剤化した。３０ｍＭのリン酸ナトリウム、８．６ｍＭのクエン酸、５０ｍＭのヒスチジン、９０ｍＭのＮａＣｌ（ｐＨ６．０）中に抗体を１０ｍｇ／ｍＬで含む４．０ｍＬのアリコートを、３０Ｋ ＭＷＣＯ Ａｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌフィルターに移し、３６００ＲＰＭで３０分間にわたり遠心分離した。さらに、１０ｍｇ／ｍＬの濃度の抗体２．０ｍＬを、３０Ｋ ＭＷＣＯ Ａｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌフィルターそれぞれに添加し、３６００ＲＰＭで４０分間にわたり遠心分離した。各Ａｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌフィルター内の溶液体積は約５００μＬに低減した。フィルター毎に４．０ｍｌの製剤マトリックスのアリコートを添加し（４０ｍＭのリン酸ナトリウム／クエン酸緩衝液を含む製剤成分については表５を参照されたい）、３６００ＲＰＭで４０分間にわたり遠心分離した。各Ａｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌフィルター内の溶液体積は約５００μＬに低減した。さらに、フィルター毎に４．０ｍｌの製剤マトリックスを添加し、フィルターを３６００ＲＰＭで４５分間にわたり遠心分離した。各Ａｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌフィルター内の溶液体積は約４００μＬに低減した。２回の緩衝液交換の完了後、最終的な溶液は、元の溶液組成物の１．５％未満を含有したと仮定することができる。タンパク質が膜に失われたり析出したりしなかったと仮定して、約１５０ｍｇ／ｍｌの理論上の濃度で、最終的な残余分体積は、６．０ｍＬからおよそ４００μＬに低減した。
次いで、残余分を０．２２μＭの膜に通して濾過した。Ａ２８０およびＤＳＣを行って、それぞれ、各製剤中のタンパク質濃度および抗体のコンフォメーション安定性を測定した。また、各試料を４つの部分に分けてガラスバイアルに入れた。最初の３つのアリコートは６５μＬの溶液を有する。残りの試料は第４のアリコート中に存在し、試料体積は６５～３５０μＬの範囲であった。最初の３つのアリコートは、それぞれ５℃、４５℃、および－７０℃で保存し、第４の部分は５℃で保存した。最初の３つのアリコートを７日目に引きあげ、－７０℃で凍結させ、解析のためにドライアイス上で輸送した。これらの試料をサイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）で解析した。結果を表６に要約する。外観試験は、最初の３つのアリコートの全てについて１日目および７日目に行ったが、輸送前に解凍しなかった－７０℃試料は７日目に行った。試料は全て、目視可能な粒子がなく透明に見えた。第４のアリコートは、後の解析のために５℃で保存した。
結果および考察
表５は、製剤情報、タンパク質濃度、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）ピーク温度、および緩衝液交換後の最終体積を示し、一方、表６は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）の結果を要約する。
Figure 0007104629000168
図８Ａ～図８Ｇは、１４種の製剤試料の全てに関するＤＳＣプロファイルを示す。ＤＳＣにより製剤間の有意差が観察された。低ｐＨ試料（ｐＨ５～５．５）については、フロントショルダーが約７０℃において製剤番号５、７、１２、および１３で明らかに観察され、温度の増加に伴い、より低いｐＨにおける抗ＨＡ抗体分子がより早く変性したことが指し示された。
表６は、３つの温度で保存された１４種の製剤に関する濃縮ステップの全体的なタンパク質回収率およびサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）結果の概要を示す。濃縮ステップ（目標１００ｍｇ／ｍｌ）の回収率は、プロセスの開始時および終了時のタンパク質の量に基づいて計算した。ＳＥＣ分析の結果は、ＨＡ抗体単量体を含有するメインピークのほか、凝集物および分解産物からなる高分子量（ＨＭＷ）種および低分子量（ＬＭＷ）種を含有するピークとして表される。データは、４２個全ての被験試料が、２～８℃で保存したとき、９８％を超えるメインピーク％として表される、極めて大きな割合の単量体種からなることを示す。しかしながら、高分子量種％（％ＨＭＷＳ）、および／または低分子種％（％ＬＭＷＳ）は、４５℃で１週間にわたり保存した際の製剤の一部（番号１、３、４、９、１０、１１、１２、および１４）において、残りの製剤緩衝液と比較してより増加した。結果は、ストレス誘導性の凝集および劣化のレベルが、製剤緩衝液に応じて変動することを指し示した。
Figure 0007104629000169
この初期評価は、抗体が、１０６ｍｇ／ｍｌまで製剤化することができ、かつ２～８℃で広範にわたるｐＨおよび緩衝液組成の範囲内で安定であることを指し示す。ストレス無負荷の試料からの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）データ、ならびにストレス負荷およびストレス無負荷の試料に対するＳＥＣ－ＨＰＬＣデータは、製剤間の差違を明らかにした。注目すべきことに、製剤番号３、すなわち３８．６ｍＭのリン酸ナトリウム－クエン酸、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、ｐＨ６．０、０．０５％のＴｗｅｅｎ－８０の試料は、１０６ｍｇ／ｍｌの濃度に達し、ＤＳＣによるフロントショルダー（ｆｒｏｎｔ ｓｈｏｕｌｄ）をもたらさず、熱ストレス時にＳＥＣ－ＨＰＬＣにより＞９８％の単量体を維持した。
（実施例３）
抗体薬物生成物のための安定な製剤の開発
この実施例は、本明細書で記載される例示的な抗ＨＡ抗体分子、例えば、Ａｂ ０４４の、２５ｍｇ／ｍｌでの製剤開発研究を要約する。短期熱ストレス負荷安定性研究、凍結／解凍研究、および撹拌研究を実施して、所望の製剤をスクリーニング選別した。
５つの製剤を２５ｍｇ／ｍＬの濃度で調製した。２週間にわたり４℃および４５℃、１および３サイクルの凍結／解凍、ならびにｃＰ Ｃｏｌｅ－Ｐａｒｍｅｒによる３０ＲＰＭの速度で１６時間にわたる撹拌を含む異なる保存条件のために、各製剤をいくつかの部分に分けた。外観解析、ＳＥＣ解析、ＣＥ－ＳＤＳ解析、Ａ２８０解析、ＩＥＦ解析、および効力解析を行って、これらの試料の安定性を評価した。表７は、５つの製剤の組成を列挙する。抗体分子は、最大３回の凍結／解凍サイクルおよび一晩の撹拌にわたり安定であったことが見出された。５つの製剤の中では、製剤１および４が最も安定であった。Ｔｗｅｅｎ－８０の潜在的な長期的利益に基づき、抗体分子のための最終的な製剤として製剤１を選択した。
Figure 0007104629000170
製剤化手順の概要
クエン酸（ＪＴ Ｂａｋｅｒ、ロットＫ４２４６６）１００ｍＭ、リン酸二ナトリウム七水和物（Ｆｉｓｈｅｒ、ロット１２５７２０）１００ｍＭ、およびＮａＣｌ（ＪＴ Ｂａｋｅｒ、ロットＬ１０４７２）１．０Ｎを調製した。ｐＨ計により決定された適正な比でクエン酸１００ｍＭおよびリン酸二ナトリウム七水和物１００ｍＭを混合することにより、ｐＨ６．０緩衝液（１００ｍＭ）を調製した。また、ｐＨ計により決定された適正な比でクエン酸１００ｍＭおよびリン酸二ナトリウム七水和物１００ｍＭを混合することにより、ｐＨ６．５緩衝液（１００ｍＭ）も調製した。表８に従い、Ｔｗｅｅｎ－８０を含まない５つの製剤を調製し、メスシリンダー中で水を適量（ＱＳ）用いて１２５ｍＬの最終体積にした。
Figure 0007104629000171
１２５ｍＬの製剤緩衝液を調製した後、５ＮのＮａＯＨまたは５ＮのＨＣｌにより、ｐＨ値をｐＨ６．０または６．５にさらに調整した。抗体バルク原薬（ＢＤＳ）（４．５ｍｇ／ｍＬ、２２９．２ｍＬ）を、一連の、プロテインＡアフィニティークロマトグラフィー、アニオン交換クロマトグラフィー、およびカチオン交換クロマトグラフィーによって調製した。限外濾過／透析濾過を使用し、精製された試料を適切な溶液中で製剤化した。
Ａｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａｃｅｌ ３０ＫロットＲ２ＡＡ６４９４８（最大ｍＬ＝１５ｍＬ）の限外濾過管を使用して、緩衝液交換／濃縮を実施した。目標値を２５ｍｇ／ｍＬとし、Ａ２８０結果に従って試料体積を調整した。表９は、製剤試料の回収を列挙する。製剤番号１および番号４は組み合わせた。
Figure 0007104629000172
組み合わせた製剤試料番号１および番号４を、それぞれ、製剤番号１および製剤番号４として等しい部分（ｅｑｕａｌ ｐｏｒｔｉｏｎ）に分けた。希釈したＴｗｅｅｎ－８０（ＪＴ Ｂａｋｅｒ、ロットＨ３５６１４）（３％）を、Ｔｗｅｅｎ－８０が０．０２５％の濃度に達するように、製剤番号４を除く試料に加えた。Ｔ＝０、撹拌、１サイクルの凍結／解凍、３サイクルの凍結／解凍、および２週間にわたり４５℃の、異なる条件での試験のために、各製剤試料を複数の部分に分けた。
結果
研究中、試料は全て、沈殿物または目視可能な粒子がなく無色であった。表１０は、Ａ２８０結果を列挙する。異なる条件における保存後のタンパク質濃度は、同じままであった。
Figure 0007104629000173
表１１は、還元試料についてのキャピラリー電気泳動－ＳＤＳ（ＣＥ－ＳＤＳ）結果を列挙する。還元ＣＥ－ＳＤＳ結果に基づけば、抗体分子は、凍結／解凍および撹拌を経て安定であった。異なる条件における保存後の組み合わせた（重鎖および軽鎖の）メインピーク面積％が列挙されている。製剤番号１および番号４は、他の３つの製剤と比較して改善した安定性を示した。図９は、還元試料についてのＣＥ－ＳＤＳの代表的な電気泳動図を示す。
Figure 0007104629000174
表１２は、非還元試料についてのＣＥ－ＳＤＳ結果を列挙する。異なる条件におけるＩｇＧについてのメインピーク面積％が列挙されている。非還元ＣＥ－ＳＤＳに基づけば、抗体分子は、凍結／解凍および撹拌を経て安定であった。製剤番号１および番号４は、２週間にわたり４℃での保存と４５℃での保存との間の純度％の差違により裏付けられるように、他の３つの製剤よりも良好な安定性を維持したようであった。図１０は、非還元試料についてのＣＥ－ＳＤＳの代表的な電気泳動図を示す。
Figure 0007104629000175
表１３は、２週間にわたり４℃および４５℃で保存した試料からの、単量体ピーク、高分子量（ＨＭＷ）ピーク、および低分子量（ＬＭＷ）ピークに関するピーク面積％として、ＳＥＣ－ＨＰＬＣ結果を列挙する。異なる製剤について、４℃および４５℃におけるピーク面積％の差違も列挙されている。製剤番号２および番号３は、４５℃におけるストレス負荷の際に最も大きな変化を示した。図１１は、代表的なＳＥＣクロマトグラムを示す。
Figure 0007104629000176
表１４は、ｔ＝０試料および凍結／解凍（Ｆ／Ｔ）サイクルまたは撹拌後のＳＥＣからの単量体ピーク面積％を列挙する。撹拌、１サイクルのＦ／Ｔ、または３サイクルのＦ／Ｔ後の異なる製剤に関し、最小の変化が観察された。
Figure 0007104629000177
等電点電気泳動（ＩＥＦ）を行って、全ての試料を解析した。全ての試料に関し、約９．０の等電点（ｐＩ）で主要なバンドが観察された。４５℃試料で劣化がより多く観察された（より多くの酸性のバンドが目視により認められた）。全ての製剤の中で有意差は観察されなかった。図１２は、代表的なＩＥＦゲル画像を示す。
非還元ＣＥ－ＳＤＳおよびＳＥＣの結果に基づき、製剤番号３のｔ＝０およびｔ＝２週間４５℃の試料を、ヘマグルチニン（ＨＡ）結合ＥＬＩＳＡにより効力を測定するために選択したが、これは、この製剤緩衝液中の抗体分子が４５℃で２週間にわたる保存の後に最も大きな変化を有したためであった。結果を、表１５に要約する。このデータは、アッセイの精度を考慮すると、ｔ＝０試料とストレス負荷試料との間で、効力（活性％）の有意な変化を指し示さなかった。したがって、全ての被験製剤において４５℃で２週間にわたるストレスの際に抗体分子の効力に変化なしという、同様の結論を下すことは妥当である。
Figure 0007104629000178
結果は、抗体分子が、最大３回の凍結／解凍サイクルおよび一晩の撹拌で安定であったことを指し示す。５つの製剤の中では、製剤１および４が最も安定であった。Ｔｗｅｅｎ－８０の潜在的な長期的利益に基づき、抗体分子のための最終製剤として製剤１を選択した。この製剤は、４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０２５％のポリソルベート８０を含有し、ｐＨ６．０である。
（実施例４）
ヒトチャレンジモデルにおけるＶＩＳ４１０の母集団薬物動態およびウイルス動的モデリング
第１相の健常なボランティアおよび第２ａ相ヒトインフルエンザチャレンジ試験からのデータを組み込み、ＶＩＳ４１０臨床プログラム（例えば、本明細書で記載される製剤を使用するもの）を支援する、母集団薬物動態（ｐｏｐＰＫ：ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ）およびインフルエンザウイルス動的モデルを開発した。ＶＩＳ４１０は、本明細書では、Ａｂ ０４４としても知られる。
方法
第１相試験（Ｎ＝３０、単回ＩＶ用量２～５０ｍｇ／ｋｇ）および第２ａ相試験（Ｎ＝３３、２３００および４６００ｍｇの単回ＩＶ用量）からの鼻腔および血清のＰＫデータを使用して、ｐｏｐＰＫモデルを開発した。第２ａ相試験において、ボランティアには、弱毒化したインフルエンザＡ（Ｈ１Ｎ１）株を鼻腔内に接種し、接種の２４時間後にプラセボまたはＶＩＳ４１０を施した。頻回の鼻腔ウイルス負荷（ｑＰＣＲおよびＴＣＩＤ５０）、血清および鼻腔ＰＫを測定した。薬力学解析は、治療を意図した（ＩＴＴ：ｉｎｔｅｎｔ－ｔｏ－ｔｒｅａｔ）感染した被験体のウイルス負荷データ：プラセボ（ｎ＝７）、２３００ｍｇ（ｎ＝２２）、４６００ｍｇ（ｎ＝４）を含んだ。全ての解析はＮＯＮＭＥＭ ７．３において実施し、ｑＰＣＲおよびＴＣＩＤ５０５０を別個にモデリングし、ＢＬＱデータはＭ３法を使用して取り扱い、予測性能はＮＰＤＥを（Ｒで）使用して評価した。
結果
３コンパートメントモデルにより、鼻腔コンパートメントと中心コンパートメントとの間のＶＩＳ４１０の一次分布を伴うＰＫが適切に説明された（平均（％ＲＳＥ）ＣＬＤ血清から鼻腔０．０４（１９．５％）ｍＬ／ｈ；および鼻腔から血清１．９５（１７．１％）ｍＬ／ｈ）。体重は、ｐｏｐＰＫモデルにおいて保持された唯一の共変数であった。調べた他の共変数は、性別、年齢、および感染状態を含んだが、これらの影響はなかった。ｑＰＣＲにより、プラセボ（ｐ＜０．０５）と比較してウイルス負荷ＡＵＣの９２％の低減が、２３００ｍｇ用量において観察された。プラセボおよびＩＴＴ被験体におけるウイルス動力学は、ウイルス、標的上皮細胞、非産生性および産生性の感染細胞を含む改変されたウイルス動的モデルによって十分に特徴付けられた；ｍＡｂ薬物作用を、Ｅｍａｘ関数（平均（％ＲＳＥ）ＥＣ５０ ｑＰＣＲ＝１．９６（１３）μｇ／ｍＬおよびＥＣ５０ ＴＣＩＤ５０＝１８．４（２．６）μｇ／ｍＬ）により、鼻腔コンパートメント内の膜融合を阻害するものとしてモデリングした。
要約すると、ＶＩＳ４１０は、Ｈ１Ｎ１ヒトチャレンジモデルにおいて、一般にＩｇＧ１ ｍＡｂに典型的なＰＫ、およびプラセボと比較して強力な抗ウイルス活性を裏付けた。ＶＩＳ４１０の作用機構に基づいてｍＡｂの鼻腔濃度をインフルエンザウイルス動力学に結びつける、半機械論的な（ｓｅｍｉ－ｍｅｃｈａｎｉｓｔｉｃ）ｐｏｐＰＫモデルの開発に成功した。このモデルは、ウイルス負荷に対する影響と共に血清および鼻腔ＰＫを説明するものであり、様々な集団にわたる将来の臨床開発のための用量選択を支援するためにこれを使用した。この手法は、インフルエンザウイルス感染に対してターゲティングされる他のｍＡｂに拡大適用することができる。
さらなる例は、国際出願公開第ＷＯ２０１３／１７０１３９号、米国特許第８，８７７，２００号、米国特許第９，０９６，６５７号、および米国特許出願公開第２０１３／０３０２３４９号において開示されている。前述の刊行物の内容は、参照によりそれらの全体が組み込まれる。
参照による組込み
本明細書で言及される全ての刊行物、特許、および特許出願は、各個別の刊行物、特許または特許出願が、参照により組み込まれることが、具体的、かつ、個別に指し示された場合と同じ程度に、参照によりそれらの全体において本明細書に組み込まれる。矛盾がある場合は、本明細書におけるあらゆる定義を含め、本出願が優先する。
均等物
当業者は、単なる日常的な実験を使用することで、本明細書で記載される本発明の具体的な実施形態の多くの均等物を認識するか、または確認することができる。このような均等物は、続く特許請求の範囲に包含されることが意図される。

Claims (21)

  1. 抗ＨＡ抗体分子と、緩衝剤と、等張化剤とを含む製剤であって、該抗体分子が、配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント、および配列番号５２を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含み、
    該抗体分子が、約５ｍｇ／ｍＬ～約１５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在し、
    該緩衝剤が、約２０ｍＭ～約６０ｍＭの濃度のクエン酸－リン酸ナトリウムを含み、
    該等張化剤が、塩化ナトリウムを含み、約５０～約２００ｎＭの濃度で存在し、
    該製剤が、６～６．５のｐＨを有する、
    製剤。
  2. 前記抗体分子が、
    （ｉ）約９０ｍｇ／ｍＬ～約１１０ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ～約４０ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ（例えば、約２５ｍｇ／ｍＬ）、約５０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１５０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬまたは約１００ｍｇ／ｍＬ～約１２０ｍｇ／ｍＬ（例えば、約１００ｍｇ／ｍＬ）の濃度で存在する、
    （ｉｉ）γ１重鎖およびκ軽鎖を含む、
    （ｉｉｉ）重鎖定常領域および／または軽鎖定常領域を含む、かつ／または
    （ｉｖ）ＩｇＧ１抗体である、
    請求項１に記載の製剤。
  3. 前記製剤が、約４０ｍＭの濃度のクエン酸－リン酸ナトリウムを含む、請求項１または２に記載の製剤。
  4. 前記塩化ナトリウムが、
    （ｉ）約１５０ｍＭの濃度で存在する、
    （ｉｉ）約１４０～約１６０ｍＭの濃度で存在する、
    （ｉｉｉ）約２５０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３５０ｍＯｓｍ／Ｌの張度（または重量オスモル濃度）をもたらす、かつ／または
    （ｉｖ）約２８０ｍＯｓｍ／Ｌ～約３２０ｍＯｓｍ／Ｌの張度（または重量オスモル濃度）をもたらす、
    請求項１から３のいずれかに記載の製剤。
  5. 約１００ｍｇ／ｍＬの前記抗ＨＡ抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、および約１５０ｍＭ塩化ナトリウムを、約６のｐＨで含む、請求項１から４のいずれかに記載の製剤。
  6. 界面活性剤をさらに含み、必要に応じて、該界面活性剤が、
    （ｉ）約０．００５％～約０．１％の濃度で存在する、
    （ｉｉ）約０．０１％～約０．０５％の濃度で存在する、
    （ｉｉｉ）約０．０２５％の濃度で存在する、または
    （ｉｖ）ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）であり、必要に応じて、約０．０１％および約０．０５％の濃度で存在する、
    請求項１から５のいずれかに記載の製剤。
  7. （ｉ）約１００ｍｇ／ｍＬの前記抗ＨＡ抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０２５％のポリソルベート８０を含み、前記製剤のｐＨが約６である、
    （ｉｉ）約１００ｍｇ／ｍＬの前記抗ＨＡ抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０２５％のポリソルベート８０を含み、前記製剤のｐＨが約６．５である、または
    （ｉｉｉ）約１００ｍｇ／ｍＬの前記抗ＨＡ抗体分子、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウム、約７５ｍＭの塩化ナトリウム、および約０．０２５％のポリソルベート８０を含み、前記製剤のｐＨが約６．５である、
    請求項６に記載の製剤。
  8. （ｉ）安定剤をさらに含み、必要に応じて、
    （ａ）該安定剤が、約０．１％～約１０％の濃度で存在する、かつ／または
    （ｂ）該安定剤がアミノ酸であり、必要に応じて、該アミノ酸が、グリシン、ヒスチジン、アルギニン、メチオニン、プロリン、リシン、グルタミン酸、またはこれらの組合せである、
    （ｉｉ）炭水化物をさらに含み、必要に応じて、該炭水化物が、スクロース、トレハロース、マンニトール、デキストラン、ソルビトール、イノシトール、グルコース、フルクトース、ラクトース、キシロース、マンノース、マルトース、ラフィノース、これらの組合せである、
    （ｉｉｉ）ポリマーをさらに含み、必要に応じて、該ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、デキストラン、ヒドロキシルエチルデンプン（ＨＥＴＡ）、またはゼラチンである、かつ／または
    （ｉｖ）防腐剤をさらに含み、必要に応じて、該防腐剤が、ベンジルアルコール、ｍ－クレゾール、またはフェノールである、
    請求項１から７のいずれかに記載の製剤。
  9. （ｉ）約０．５％～約２％の濃度のグリシンを含む、または
    （ｉｉ）約１００ｍｇ／ｍＬの前記抗ＨＡ抗体分子と、約４０ｍＭのクエン酸－リン酸ナトリウムと、約１５０ｍＭの塩化ナトリウムと、約０．０２５％のポリソルベート８０と、約１％のグリシンとを含み、前記製剤のｐＨが約６である、
    請求項１から８のいずれかに記載の製剤。
  10. （ｉ）前記製剤中の高分子量（ＨＭＷ）種のレベルが、保存前、または４℃で少なくとも約２週間もしくは４５℃で少なくとも約２週間にわたる保存後に約５％未満である、
    （ｉｉ）前記製剤中の低分子量（ＬＭＷ）種のレベルが、保存前、または４℃で少なくとも約２週間もしくは４５℃で少なくとも約２週間にわたる保存後に約５％未満である、
    （ｉｉｉ）前記製剤中のＨＭＷ種およびＬＭＷ種のレベルが、保存前、または４℃で少なくとも約２週間もしくは４５℃で少なくとも約２週間にわたる保存後に約８％未満である、かつ／または
    （ｉｖ）前記製剤中の前記抗ＨＡ抗体分子の約９０％またはこれより多くが、保存前、または４℃で少なくとも約２週間もしくは４５℃で少なくとも約２週間にわたる保存後に単量体として存在し、
    必要に応じて、単量体、ＨＭＷ種、またはＬＭＷ種のレベルが、サイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）により決定される、
    請求項１から９のいずれかに記載の製剤。
  11. （ｉ）４℃で２回の２週間にわたる保存後の前記製剤中の前記抗ＨＡ抗体分子の純度が少なくとも約９６％である、かつ／または
    （ｉｉ）４５℃で２回の２週間にわたる保存後の前記製剤中の前記抗ＨＡ抗体分子の純度が少なくとも約９０％であり、
    必要に応じて、該抗ＨＡ抗体分子の純度が、キャピラリー電気泳動－ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ－ＳＤＳ）により決定される、
    請求項１から１０のいずれかに記載の製剤。
  12. 前記抗ＨＡ抗体分子の活性が、４５℃で少なくとも約２週間にわたる保存後に約２５％未満低下し、必要に応じて、該抗ＨＡ抗体分子の活性が、ＨＡ結合アッセイにより決定される、請求項１から１１のいずれかに記載の製剤。
  13. 前記製剤が液体製剤または凍結乾燥製剤である、請求項１から１２のいずれかに記載の製剤。
  14. 請求項１から１３のいずれかに記載の製剤を含む容器であって、必要に応じて、
    （ｉ）約２５ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬの前記抗体分子を含む、
    （ｉｉ）約２５ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬの前記抗体分子を含む、
    （ｉｉｉ）約９０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬの前記抗体分子を含む、
    （ｉｖ）約２５ｍＬ～約５０ｍＬの前記製剤を含む、
    （ｖ）約２５ｍＬ～約４０ｍＬの前記製剤を含む、かつ／または
    （ｖｉ）該容器が、バイアル、任意選択でガラスバイアルである、
    容器。
  15. 請求項１から１３のいずれかに記載の製剤を含むデバイス。
  16. 請求項１から１３のいずれかに記載の製剤を含む１つまたは複数の容器と、該製剤の使用のための指示とを含むキット。
  17. 被験体におけるインフルエンザを処置または予防するための医薬の製造における、請求項１から１３のいずれかに記載の製剤の使用であって、必要に応じて、該製剤が静脈内投与されるものである、使用。
  18. 被験体への投与のための組成物を調製する方法であって、請求項１から１３のいずれかに記載の製剤を静脈内投与に適切な溶液と組み合わせることを含み、必要に応じて、
    （ｉ）該溶液が、食塩液を含み、任意選択で、デキストロースをさらに含む、
    （ｉｉ）２０００ｍｇ～５０００ｍｇの前記抗体分子が該溶液と組み合わされる、
    （ｉｉｉ）２３００ｍｇ～４６００ｍｇの前記抗体分子が該溶液と組み合わされる、かつ／または
    （ｉｖ）該製剤が、静脈内（ＩＶ）溶液バッグ内で該溶液と組み合わされる、
    方法。
  19. 抗ＨＡ抗体分子と、緩衝剤と、等張化剤とを含む２００ｍＬ～３００ｍＬの溶液を含む容器であって、該溶液が静脈内投与に適切であり、該抗体分子が５ｍｇ／ｍＬ～１５０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在し、該抗体分子が、配列番号２５を含む重鎖免疫グロブリン可変領域セグメント、および配列番号５２を含む軽鎖免疫グロブリン可変領域セグメントを含み、
    該緩衝剤が、約２０ｍＭ～約６０ｍＭの濃度のクエン酸－リン酸ナトリウムを含み、
    該等張化剤が、塩化ナトリウムを含み、約５０～約２００ｎＭの濃度で存在し、
    該溶液が、６～６．５のｐＨを有し、
    必要に応じて、
    （ｉ）該容器が、２５０ｍＬの該溶液を含む、
    （ｉｉ）該抗体分子が、９０ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、かつ/または
    （ｉｉｉ）該容器が、静脈内（ＩＶ）溶液バッグである、
    容器。
  20. 前記抗体分子が２５ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１９に記載の容器。
  21. 被験体におけるインフルエンザを処置または予防するのに使用するための請求項１から１３のいずれかに記載の製剤であって、必要に応じて、前記製剤が静脈内投与されるものである、製剤。
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