JP7091246B2 - VII型コラーゲンα1アッセイ - Google Patents
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-
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Description
‐ストレプトアビジンで被覆された96ウェルプレート
‐ビオチン残基とペプチドの間に位置する任意選択のリンカーを伴う、N末端またはC末端ネオエピトープのアミノ酸配列に対応するビオチン化ペプチド、
‐サンドイッチイムノアッセイに使用するためのビオチン化二次抗体
‐N末端またはC末端ネオエピトープのアミノ酸配列に対応するキャリブレータペプチド
‐抗体HPR標識キット
‐抗体放射性標識キット
‐アッセイ視覚化キット
の少なくとも1つとを含む。
用語「抗体」は、最も広い意味で本発明に従って使用され、具体的には、所望の生物学的活性を示す限り、無傷のモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体および抗体フラグメントを包含する。
...PGPPGPPGRLV↓DTGPGAREKGE...
は、V1709-D1710ペプチド結合の間の部位でプロテアーゼによって切断された場合、記号「↓」で表されるように、N末端ネオエピトープH2N-DTGPGAREKGE...およびC末端ネオエピトープ...PGPPGPPGRLV-COOHを生成する。
理論的根拠
COPDを有する患者、特発性肺線維症(IPF)を有する患者および健常ドナーからの血清試料に関して質量分析を実施した。
モノクローナル抗体を、C末端ネオエピトープのアミノ酸配列GPPGPPGRLV-COOH(配列番号1)に対して惹起させた。
C7に対して惹起させたモノクローナル抗体を使用した競合ELISAを、以下の手順を用いて実施した。
COPD
COPDを有する68名の患者のコホートでは、健常ドナーと比較してC7の血清レベルが有意に上昇していた(図2)。
初期のびまん性全身性硬化症の20名の患者では、健常対照と比較してC7の血清レベルが有意に上昇していた(p=0.022)(図3)。全身性硬化症の初期段階は高い疾患活動性に関連するが、後期段階の患者は緩やかに進行する。初期びまん性疾患の患者群では、中間の進行速度(皮膚厚さの進行速度によって定義される)を有する亜集団が、対照と比較して有意に高いレベルを有していた(p=0.016)。
VII型コラーゲンα1のシグナルペプチドは、アミノ酸1‐16に見出される[12]。シグナルペプチドの切断によって形成されるN末端ネオエピトープ配列(17’.EAPRVRAQHR’26)を、BLASTを用いて分析し、VII型コラーゲンα1鎖にユニークであることが判明した。
したがって、N末端ネオエピトープのアミノ酸配列H2N-EAPRVRAQHR(配列番号4)に対するモノクローナル抗体を惹起させた。
モノクローナル抗体を使用した競合ELISAを、以下の手順を用いて実施した。
C7 ELISAを、全身性硬化症(SSc)を有する患者の第二のより大きなコホートで評価した。ヒト血清における評価の精度を改善するためにC7 ELISAを(前の例と比較して)再較正した。
また、本発明は以下の態様にも関する。
[1]
N末端またはC末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントと反応性の抗体であって、前記N末端またはC末端ネオエピトープに結合する抗体。
[2]
前記抗体がモノクローナル抗体である、[1]に記載の抗体。
[3]
前記N末端またはC末端ネオエピトープが、VII型コラーゲンα1の非コラーゲンアミノ末端ドメインに含まれるか、またはVII型コラーゲンα1の中央コラーゲン三重らせんドメインに含まれる、[1]または[2]に記載の抗体。
[4]
前記抗体が、アミノ酸配列GPPGPPGRLV-COOH(配列番号1)に含まれるC末端ネオエピトープに結合する、[1]から[3]に記載の抗体。
[5]
前記抗体が、アミノ酸配列PPGRLV-COOH(配列番号2)を含むC末端ネオエピトープに結合する、[1]から[3]に記載の抗体。
[6]
前記抗体が、伸長したアミノ酸配列GPPGPPGRLVX-COOH(配列番号3)を認識せずまたはこれに結合せず、ここで、XがVII型コラーゲンα1の配列の1つ以上のアミノ酸である、[4]または[5]に記載の抗体。
[7]
前記抗体が、アミノ酸配列H 2 N-EAPRVRAQHR(配列番号4)に含まれるN末端ネオエピトープに結合する、[1]から[3]に記載の抗体。
[8]
前記抗体が、アミノ酸配列H 2 N-EAPRVR(配列番号5)を含むN末端ネオエピトープに結合する、[1]から[3]に記載の抗体。
[9]
前記抗体が、伸長したアミノ酸配列H 2 N-XEAPRVRAQHR(配列番号6)を認識せずまたはこれに結合せず、ここで、XがVII型コラーゲンα1の配列の1つ以上のアミノ酸である、[7]または[8]に記載の抗体。
[10]
生物学的試料中で、N末端またはC末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントを検出するためのイムノアッセイの方法であって、前記N末端またはC末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1の前記フラグメントを含む前記生物学的試料を、[1]から[9]に記載の抗体と接触させることと、前記抗体の結合量を測定することとを含む、方法。
[11]
前記方法が、生体液中の前記N末端またはC末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントの量を定量化するために使用される、[10]に記載の方法。
[12]
前記生体液が、血清、血漿、気管支肺胞洗浄液、痰、呼気または尿である、[11]に記載の方法。
[13]
前記イムノアッセイが競合アッセイまたはサンドイッチアッセイである、[10]に記載の方法。
[14]
前記イムノアッセイがラジオイムノアッセイまたは酵素結合免疫吸着アッセイである、[10]に記載の方法。
[15]
前記方法によって測定されたN末端またはC末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントの量を、既知の疾患重症度の標準的なVII型コラーゲン関連疾患試料と相関させて、VII型コラーゲン関連疾患の重症度を評価することをさらに含む、[11]に記載の方法。
[16]
前記VII型コラーゲン関連疾患が慢性閉塞性肺疾患(COPD)または全身性硬化症である、[15]に記載の方法。
[17]
N末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントの前記N末端ネオエピトープのアミノ酸配列に対応するN末端アミノ酸配列を有するか、またはC末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントの前記C末端ネオエピトープのアミノ酸配列に対応するC末端アミノ酸配列を有する、ペプチド。
[18]
前記N末端ネオエピトープのアミノ酸配列がEAPRVRAQHR(配列番号4)またはEAPRVR(配列番号5)である、[17]に記載のペプチド。
[19]
前記C末端ネオエピトープのアミノ酸配列がGPPGPPGRLV(配列番号1)またはPPGRLV(配列番号2)である、[17]に記載のペプチド。
[20]
ビオチンに結合されている、[17]から[19]に記載のペプチド。
[21]
生物学的試料中でN末端またはC末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントの量を測定するためのアッセイキットであって、[1]から[9]のいずれかに記載の抗体と、
‐ストレプトアビジンで被覆された96ウェルプレート
‐ビオチン残基と前記ペプチドの間に位置する任意選択のリンカーを伴う、[17]から[19]に記載のビオチン化ペプチド、
‐サンドイッチイムノアッセイに使用するためのビオチン化二次抗体
‐[17]から[19]に記載のキャリブレータペプチド
‐抗体HPR標識キット
‐抗体放射性標識キット
‐アッセイ視覚化キット
の少なくとも1つとを含む、アッセイキット。
[22]
Lが任意選択のリンカーであるビオチン化ペプチド、ビオチン-L-GPPGPPGRLV(配列番号7)と、C末端配列GPPGPPGRLV-COOH(配列番号1)を含むキャリブレータペプチドとを含む、[20]に記載のアッセイキット。
[23]
Lが任意選択のリンカーであるビオチン化ペプチドEAPRVRAQHR-L-ビオチン(配列番号8)と、N末端配列H 2 N-EAPRVRAQHR(配列番号4)を含むキャリブレータペプチドとを含む、[20]に記載のアッセイキット。
[1]Chung,H.J.およびJ.Uitto.2010。VII型コラーゲン:栄養障害型表皮水疱症の原因となる係留線維タンパク質(Type VII collagen:the anchoring fibril protein at fault in dystrophic epidermolysis bullosa.)。Bermosa.DermatolClin.28:93-105。
[2]Chen,M.、G.H.Kim、L.PrakashおよびD.T.Woodley.2012。後天性表皮水疱症:係留線維コラーゲンに対する自己免疫(Epidermolysis bullosa acquisita:autoimmunity to anchoring fibril collagen.)。Autoimmunity 45:91-101。
[3]Hundorfean,G.、M.F.NeurathおよびC.Sitaru.2010。炎症性腸疾患におけるVII型コラーゲンに対する自己免疫(Autoimmunity against type VII collagen in inflammatory bowel disease.)。J.Cell Mol.Med.14:2393-2403。
[4]Gammon,W.R.、D.T.Woodley、K.C.DoleおよびR.A.Briggaman.1985。全身性エリテマトーデスの水疱性発疹における抗基底膜部抗体が後天性表皮水疱症の自己抗原を認識する証拠(Evidence that anti-basement membrane zone antibodies in bullous eruption of systemic lupus erythematosus recognize epidermolysis bullosa acquisita autoantigen.)。J.Invest Dermatol.84:472-476。
[5]Rudnicka,L.、J.Varga、A.M.Christiano、R.V.Iozzo、S.A.JimenezおよびJ.Uitto.1994。全身性硬化症の患者の皮膚におけるVII型コラーゲンの発現上昇。トランスフォーミング増殖因子βによる調節(Elevated expression of type VII collagen in the skin of patients with systemic sclerosis.Regulation by transforming growth factor-beta.)。J.Clin.Invest 93:1709-1715。
[6]Evans,M.J.、M.V.Fanucchi、L.A.Miller、M.A.Carlson、S.J.NishioおよびD.M.Hyde.2010。ハウスダストダニに暴露された乳児アカゲザルの気道基底膜部におけるVII型コラーゲン係留線維の減少(Reduction of collagen VII anchoring fibrils in the airway basement membrane zone of infant rhesus monkeys exposed to house dust mite.)。Am.J.Physiol Lung Cell Mol.Physiol 298:L543-L547。
[7]Chen,M.、L.S.Chan、X.Cai、E.A.O’Toole、J.C.SampleおよびD.T.Woodley.1997。後天性表皮水疱症における抗VII型コラーゲン自己抗体の迅速検出のためのELISAの開発(Development of an ELISA for rapid detection of anti-type VII collagen autoantibodies in epidermolysis bullosa acquisita.)。J.Invest Dermatol.108:68-72。
[8]Saleh,M.A.、K.Ishii、Y.J.Kim、A.Murakami、N.Ishii、T.Hashimoto、E.Schmidt、D.Zillikens、Y.Shilkata、K.Hashimotoら、2011。後天性表皮水疱症患者の診断および経時変化の分析のためのVII型コラーゲンELISAのNC1およびNC2ドメインの開発(Development of NC1 and NC2 domains of type VII collagen ELISA for the diagnosis and analysis of the time course of epidermolysis bullosa acquisita patients.)。J.Dermatol.Sci 62:169-175。
[9]Kim,J.H.、Y.H.Kim、S.Kim、E.B.Noh、S.E.Kim、A.Vorobyev、E.Schmidt、D.ZillikensおよびS.C.Kim.2013。後天性表皮水疱症の患者において酵素結合免疫吸着アッセイによって検出された抗VII型コラーゲン抗体の血清レベルは、皮膚病変の重症度と相関する(Serum levels of anti-type VII collagen antibodies detected by enzyme-linked immunosorbent assay in patients with epidermolysis bullosa acquisita are correlated with the severity of skin lesions.)。J.Eur.Acad Dermatol.Venereol.27:e224-e230。
[10]Recke,A.、C.Sitaru、G.Vidarsson、M.Evensen、M.T.Chiriac、R.J.LudwigおよびD.Zillikens.2010。VII型コラーゲンに対するIgGサブクラス自己抗体の病原性:真皮-表皮分離の誘導(Pathogenicity of IgG subclass autoantibodies to type VII collagen:induction of dermal-epidermal separation.)。J.Autoimmun.34:435-444。
[11]Sakai,L.Y.、D.R.Keene、N.P.MorrisおよびR.E.Burgeson.1986。VII型コラーゲンは係留線維の主要な構造成分である(Type VII collagen is a major structural component of anchoring fibrils.)。J.Cell Biol.103:1577-1586。
[12]Uniprot. http://www.uniprot.org/uniprot/Q02388.2015年にアクセスした。
<223>伸長したC末端ネオエピトープ
<223>XはVII型コラーゲンα1の配列の1つ以上のアミノ酸である
配列表6
<223>XはVII型コラーゲンα1の配列の1つ以上のアミノ酸である
<223>伸長したN末端ネオエピトープ
配列表7
<223>ビオチン残基とペプチドの間に位置する任意選択のリンカーを伴ってビオチン化
<223>C末端ネオエピトープ-N末端でビオチン化
配列表8
<223>N末端ネオエピトープ-C末端でビオチン化
<223>ビオチン残基とペプチドの間に位置する任意選択のリンカーを伴ってビオチン化
配列表9
<223>CGGリンカーに結合したKLH
<223>免疫化ペプチド
配列表10
<223>ビオチン化
<223>被覆物ペプチド
配列表11
<223>伸長したC末端配列
配列表12
<223>免疫化ペプチド
<223>KLH結合
配列表13
<223>被覆物ペプチド
<223>ビオチン化
Claims (11)
- VII型コラーゲンα1のプロテアーゼ切断により形成される、C末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントと反応性のモノクローナル抗体であって、
前記抗体が該C末端ネオエピトープに結合するものであり、ここで該C末端ネオエピトープは、アミノ酸配列GPPGPPGRLV-COOH(配列番号1)に含まれ、伸長したアミノ酸配列GPPGPPGRLVX-COOH(配列番号3)を認識せずまたはこれに結合せず、ここで、XがVII型コラーゲンα1の配列の1つ以上のアミノ酸である、
上記モノクローナル抗体。 - 前記抗体が、アミノ酸配列PPGRLV-COOH(配列番号2)を含むC末端ネオエピトープに結合する、請求項1に記載のモノクローナル抗体。
- 生物学的試料中で、C末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントを検出するためのイムノアッセイの方法であって、前記C末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1の前記フラグメントを含む前記生物学的試料を、請求項1または2に記載の抗体と接触させることと、前記抗体の結合量を測定することとを含む、方法。
- 前記方法が、生体液中の前記C末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントの量を定量化するために使用される、請求項3に記載の方法。
- 前記生体液が、血清、血漿、気管支肺胞洗浄液、痰、呼気または尿である、請求項4に記載の方法。
- 前記イムノアッセイが競合アッセイまたはサンドイッチアッセイである、請求項3に記載の方法。
- 前記イムノアッセイがラジオイムノアッセイまたは酵素結合免疫吸着アッセイである、請求項3に記載の方法。
- 前記方法によって測定されたC末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントの量を、既知の疾患重症度の標準的なVII型コラーゲン関連疾患試料と相関させて、VII型コラーゲン関連疾患の重症度を評価することをさらに含む、請求項4に記載の方法。
- 前記VII型コラーゲン関連疾患が慢性閉塞性肺疾患(COPD)または全身性硬化症である、請求項8に記載の方法。
- 生物学的試料中でC末端ネオエピトープを含むVII型コラーゲンα1のフラグメントの量を測定するためのアッセイキットであって、請求項1または2に記載の抗体と、
‐ストレプトアビジンで被覆された96ウェルプレート
‐ビオチン残基と前記ペプチドの間に位置する任意選択のリンカーを伴う、C末端ネオエピトープのアミノ酸配列に対応するビオチン化ペプチド、
‐サンドイッチイムノアッセイに使用するためのビオチン化二次抗体
‐C末端ネオエピトープのアミノ酸配列に対応するキャリブレータペプチド
‐抗体HPR標識キット
‐抗体放射性標識キット
‐アッセイ視覚化キット
の少なくとも1つとを含む、アッセイキット。 - Lが任意選択のリンカーであるビオチン化ペプチド、ビオチン-L-GPPGPPGRLV(配列番号7)と、C末端配列GPPGPPGRLV-COOH(配列番号1)を含むキャリブレータペプチドとを含む、請求項10に記載のアッセイキット。
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Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010520449A (ja) | 2007-03-02 | 2010-06-10 | アナマル メディカル アクチボラゲット | Ix型コラーゲン破壊の診断 |
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Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9012160B2 (en) * | 2008-06-16 | 2015-04-21 | Abraham Amir | Monitoring skin metabolism products for evaluating burn injury |
WO2010029546A2 (en) * | 2008-09-11 | 2010-03-18 | Ben Gurion University Of The Negev Research And Development Authority | Compositions and methods for treating s.pneumoniae infection |
US9657077B2 (en) * | 2011-02-11 | 2017-05-23 | Board Of Supervisors Of Louisiana State | Carcinoma homing peptide (CHP), its analogs, and methods of using |
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010520449A (ja) | 2007-03-02 | 2010-06-10 | アナマル メディカル アクチボラゲット | Ix型コラーゲン破壊の診断 |
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Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
Arthritis & Rheumatism,2005年,Vol.52, No.6,p.1746-1755 |
Connective Tissue,1997年,Vol.29,p.279-283 |
The Journal of Biological Chemistry,1989年,Vol.264, No.7,p.3822-3826 |
The Journal of Biological Chemistry,2002年,Vol.277, No.29,p.26372-26378 |
The Journal of Cell Biology,1986年,Vol.103,p.1577-1586 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20210293828A1 (en) | 2021-09-23 |
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