JP7033122B2 - ケージドハプテンを使用するホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるタンパク質近接アッセイ - Google Patents
ケージドハプテンを使用するホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるタンパク質近接アッセイ Download PDFInfo
- Publication number
- JP7033122B2 JP7033122B2 JP2019511411A JP2019511411A JP7033122B2 JP 7033122 B2 JP7033122 B2 JP 7033122B2 JP 2019511411 A JP2019511411 A JP 2019511411A JP 2019511411 A JP2019511411 A JP 2019511411A JP 7033122 B2 JP7033122 B2 JP 7033122B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- hapten
- target
- antibody
- carbon atoms
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title description 120
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title description 116
- 238000003556 assay Methods 0.000 title description 31
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 claims description 203
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 157
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 157
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 151
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 128
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 123
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 100
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 claims description 88
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 84
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 68
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 67
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 53
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 46
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 44
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 42
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 claims description 41
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 claims description 41
- FFRYUAVNPBUEIC-UHFFFAOYSA-N quinoxalin-2-ol Chemical compound C1=CC=CC2=NC(O)=CN=C21 FFRYUAVNPBUEIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 35
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 27
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 claims description 26
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 claims description 26
- -1 acyl azide Chemical class 0.000 claims description 25
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 25
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 23
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 23
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 21
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 21
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims description 20
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 19
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N urea group Chemical group NC(=O)N XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 18
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims description 18
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 claims description 17
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 16
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 16
- MZRUFMBFIKGOAL-UHFFFAOYSA-N 5-nitro-1h-pyrazole Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=NN1 MZRUFMBFIKGOAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 14
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 claims description 14
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 claims description 13
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 13
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 claims description 13
- 125000003563 glycoside group Chemical group 0.000 claims description 13
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 13
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 claims description 11
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 239000004332 silver Substances 0.000 claims description 11
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 10
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 9
- OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 9-ethyl-3-carbazolamine Chemical compound NC1=CC=C2N(CC)C3=CC=CC=C3C2=C1 OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 8
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 8
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- WKXVETMYCFRGET-UHFFFAOYSA-N 1,3-thiazole-2-sulfonamide Chemical compound NS(=O)(=O)C1=NC=CS1 WKXVETMYCFRGET-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims description 7
- HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 3,3'-diaminobenzidine Chemical compound C1=C(N)C(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C(N)=C1 HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N benzo-alpha-pyrone Natural products C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940080817 rotenone Drugs 0.000 claims description 5
- JUVIOZPCNVVQFO-UHFFFAOYSA-N rotenone Natural products O1C2=C3CC(C(C)=C)OC3=CC=C2C(=O)C2C1COC1=C2C=C(OC)C(OC)=C1 JUVIOZPCNVVQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 108700023418 Amidases Proteins 0.000 claims description 4
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 4
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 4
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 4
- 102000004459 Nitroreductase Human genes 0.000 claims description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 4
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 4
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 4
- 102000005262 Sulfatase Human genes 0.000 claims description 4
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 claims description 4
- 102000005922 amidase Human genes 0.000 claims description 4
- 150000004775 coumarins Chemical class 0.000 claims description 4
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 4
- 108020001162 nitroreductase Proteins 0.000 claims description 4
- 108060007951 sulfatase Proteins 0.000 claims description 4
- DDVSFIUKWUTKES-UHFFFAOYSA-N 1-bromo-2-(chloromethyl)benzene Chemical compound ClCC1=CC=CC=C1Br DDVSFIUKWUTKES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N Digoxigenin Natural products C1CC(C2C(C3(C)CCC(O)CC3CC2)CC2O)(O)C2(C)C1C1=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 claims description 3
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 claims description 3
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 claims description 3
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 claims description 3
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 claims description 3
- QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N digitoxigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C11OC1CC2C1=CC(=O)OC1 QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N digoxigenin Chemical compound C1([C@@H]2[C@@]3([C@@](CC2)(O)[C@H]2[C@@H]([C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC2)C[C@H]3O)C)=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N 0.000 claims description 3
- 150000002429 hydrazines Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 claims description 3
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 claims description 3
- MHKBMNACOMRIAW-UHFFFAOYSA-N 2,3-dinitrophenol Chemical compound OC1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1[N+]([O-])=O MHKBMNACOMRIAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 claims description 2
- 125000003647 acryloyl group Chemical group O=C([*])C([H])=C([H])[H] 0.000 claims description 2
- 150000001350 alkyl halides Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000001541 aziridines Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000004054 benzoquinones Chemical class 0.000 claims description 2
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical class C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000005179 haloacetyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- PYLWMHQQBFSUBP-UHFFFAOYSA-N monofluorobenzene Chemical group FC1=CC=CC=C1 PYLWMHQQBFSUBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000004999 nitroaryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000006501 nitrophenyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000003217 pyrazoles Chemical class 0.000 claims description 2
- YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N sulfuryl dichloride Chemical compound ClS(Cl)(=O)=O YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 150000001907 coumarones Chemical class 0.000 claims 2
- LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N glyoxal Chemical compound O=CC=O LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N Phenytoin Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C1(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000001502 aryl halides Chemical class 0.000 claims 1
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 claims 1
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 claims 1
- 229940015043 glyoxal Drugs 0.000 claims 1
- 150000002916 oxazoles Chemical class 0.000 claims 1
- 150000003557 thiazoles Chemical class 0.000 claims 1
- 150000003585 thioureas Chemical class 0.000 claims 1
- 150000003672 ureas Chemical class 0.000 claims 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 153
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 150
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 46
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 44
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 40
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 34
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 32
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 32
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 32
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 32
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 31
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 30
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 27
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 26
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 26
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 26
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 26
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 25
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 22
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 22
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 18
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 18
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 18
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 17
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 16
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 16
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 16
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 15
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 15
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 15
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 15
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 15
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 13
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 12
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 12
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 12
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 12
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 12
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 11
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 11
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 11
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 11
- 239000013636 protein dimer Substances 0.000 description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 10
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 10
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 10
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 10
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 10
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 10
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 10
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 10
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 9
- 238000012197 amplification kit Methods 0.000 description 9
- 125000006575 electron-withdrawing group Chemical group 0.000 description 9
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 9
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 8
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 8
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 8
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 8
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 8
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 8
- WZUVPPKBWHMQCE-XJKSGUPXSA-N (+)-haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2C[C@]2(O)[C@H]1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-XJKSGUPXSA-N 0.000 description 7
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 7
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 7
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 7
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 7
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 7
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RGHHSNMVTDWUBI-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzaldehyde Chemical class OC1=CC=C(C=O)C=C1 RGHHSNMVTDWUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 6
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 6
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 6
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 6
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 6
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 6
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZCQWOFVYLHDMMC-UHFFFAOYSA-N Oxazole Chemical compound C1=COC=N1 ZCQWOFVYLHDMMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 5
- 125000003396 thiol group Chemical class [H]S* 0.000 description 5
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 4
- 0 *Cc1ccccc1 Chemical compound *Cc1ccccc1 0.000 description 4
- LUBJCRLGQSPQNN-UHFFFAOYSA-N 1-Phenylurea Chemical compound NC(=O)NC1=CC=CC=C1 LUBJCRLGQSPQNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Natural products OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 4
- XJMXIWNOKIEIMX-UHFFFAOYSA-N bromo chloro 1h-indol-2-yl phosphate Chemical compound C1=CC=C2NC(OP(=O)(OBr)OCl)=CC2=C1 XJMXIWNOKIEIMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 4
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 4
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 4
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 4
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 4
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 4
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 4
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- JPXMTWWFLBLUCD-UHFFFAOYSA-N nitro blue tetrazolium(2+) Chemical compound COC1=CC(C=2C=C(OC)C(=CC=2)[N+]=2N(N=C(N=2)C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)[N+]([O-])=O)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 JPXMTWWFLBLUCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 4
- 239000001047 purple dye Substances 0.000 description 4
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 4
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 4
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 4
- WCILBWLDYPEMNA-UHFFFAOYSA-N 3-(2,5-dioxopyrrol-3-yl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC(=O)NC1=O WCILBWLDYPEMNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical group OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101100123850 Caenorhabditis elegans her-1 gene Proteins 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000277331 Salmonidae Species 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 3
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 3
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 3
- 239000000994 contrast dye Substances 0.000 description 3
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 3
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N dithioerythritol Chemical compound SC[C@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 3
- GYTMUNSNMBRSEW-UHFFFAOYSA-N hydrogen carbonate;1h-imidazol-1-ium Chemical compound OC(O)=O.C1=CNC=N1 GYTMUNSNMBRSEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 3
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 238000004776 molecular orbital Methods 0.000 description 3
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000010384 proximity ligation assay Methods 0.000 description 3
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 3
- AOCSUUGBCMTKJH-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-(2-aminoethyl)carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCCN AOCSUUGBCMTKJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- QGKMIGUHVLGJBR-UHFFFAOYSA-M (4z)-1-(3-methylbutyl)-4-[[1-(3-methylbutyl)quinolin-1-ium-4-yl]methylidene]quinoline;iodide Chemical compound [I-].C12=CC=CC=C2N(CCC(C)C)C=CC1=CC1=CC=[N+](CCC(C)C)C2=CC=CC=C12 QGKMIGUHVLGJBR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IANQTJSKSUMEQM-UHFFFAOYSA-N 1-benzofuran Chemical compound C1=CC=C2OC=CC2=C1 IANQTJSKSUMEQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LVSPDZAGCBEQAV-UHFFFAOYSA-N 4-chloronaphthalen-1-ol Chemical compound C1=CC=C2C(O)=CC=C(Cl)C2=C1 LVSPDZAGCBEQAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IFBHRQDFSNCLOZ-IIRVCBMXSA-N 4-nitrophenyl-α-d-galactoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 IFBHRQDFSNCLOZ-IIRVCBMXSA-N 0.000 description 2
- JLDSMZIBHYTPPR-UHFFFAOYSA-N Alexa Fluor 405 Chemical compound CC[NH+](CC)CC.CC[NH+](CC)CC.CC[NH+](CC)CC.C12=C3C=4C=CC2=C(S([O-])(=O)=O)C=C(S([O-])(=O)=O)C1=CC=C3C(S(=O)(=O)[O-])=CC=4OCC(=O)N(CC1)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JLDSMZIBHYTPPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WEJVZSAYICGDCK-UHFFFAOYSA-N Alexa Fluor 430 Chemical compound CC[NH+](CC)CC.CC1(C)C=C(CS([O-])(=O)=O)C2=CC=3C(C(F)(F)F)=CC(=O)OC=3C=C2N1CCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O WEJVZSAYICGDCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHVNXSBKJGAXKU-UHFFFAOYSA-N Alexa Fluor 532 Chemical compound [H+].[H+].CC1(C)C(C)NC(C(=C2OC3=C(C=4C(C(C(C)N=4)(C)C)=CC3=3)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=C1C=C2C=3C(C=C1)=CC=C1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O WHVNXSBKJGAXKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAINTDRBUHCDPZ-UHFFFAOYSA-M Alexa Fluor 546 Chemical compound [H+].[Na+].CC1CC(C)(C)NC(C(=C2OC3=C(C4=NC(C)(C)CC(C)C4=CC3=3)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=C1C=C2C=3C(C(=C(Cl)C=1Cl)C(O)=O)=C(Cl)C=1SCC(=O)NCCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O ZAINTDRBUHCDPZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- IGAZHQIYONOHQN-UHFFFAOYSA-N Alexa Fluor 555 Chemical compound C=12C=CC(=N)C(S(O)(=O)=O)=C2OC2=C(S(O)(=O)=O)C(N)=CC=C2C=1C1=CC=C(C(O)=O)C=C1C(O)=O IGAZHQIYONOHQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000224489 Amoeba Species 0.000 description 2
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 2
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 2
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 2
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 2
- 241000701024 Human betaherpesvirus 5 Species 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- 241000341655 Human papillomavirus type 16 Species 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 108010013563 Lipoprotein Lipase Proteins 0.000 description 2
- 102000043296 Lipoprotein lipases Human genes 0.000 description 2
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100407308 Mus musculus Pdcd1lg2 gene Proteins 0.000 description 2
- FULZLIGZKMKICU-UHFFFAOYSA-N N-phenylthiourea Chemical compound NC(=S)NC1=CC=CC=C1 FULZLIGZKMKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004711 Nucleic Acid Probes Proteins 0.000 description 2
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 2
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 2
- 241000223960 Plasmodium falciparum Species 0.000 description 2
- 108700030875 Programmed Cell Death 1 Ligand 2 Proteins 0.000 description 2
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 description 2
- KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N Pyrazine Chemical compound C1=CN=CC=N1 KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N Pyrazole Chemical compound C=1C=NNC=1 WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 2
- 241001061127 Thione Species 0.000 description 2
- YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N Thiophene Chemical compound C=1C=CSC=1 YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000012556 adjustment buffer Substances 0.000 description 2
- WLDHEUZGFKACJH-UHFFFAOYSA-K amaranth Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].C12=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(O)=C1N=NC1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C2=CC=CC=C12 WLDHEUZGFKACJH-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- IYYIVELXUANFED-UHFFFAOYSA-N bromo(trimethyl)silane Chemical compound C[Si](C)(C)Br IYYIVELXUANFED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 2
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 description 2
- 230000001149 cognitive effect Effects 0.000 description 2
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 229960000956 coumarin Drugs 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 2
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229940125532 enzyme inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 2
- 150000002466 imines Chemical class 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 2
- 244000000056 intracellular parasite Species 0.000 description 2
- JORABGDXCIBAFL-UHFFFAOYSA-M iodonitrotetrazolium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1N1[N+](C=2C=CC(I)=CC=2)=NC(C=2C=CC=CC=2)=N1 JORABGDXCIBAFL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 2
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000010309 neoplastic transformation Effects 0.000 description 2
- GYHFUZHODSMOHU-UHFFFAOYSA-N nonanal Chemical compound CCCCCCCCC=O GYHFUZHODSMOHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002853 nucleic acid probe Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 150000002924 oxiranes Chemical class 0.000 description 2
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 2
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M phosphonate Chemical compound [O-]P(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- QLNJFJADRCOGBJ-UHFFFAOYSA-N propionamide Chemical compound CCC(N)=O QLNJFJADRCOGBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 2
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- COBXDAOIDYGHGK-UHFFFAOYSA-N syringaldehyde Natural products COC1=CC=C(C=O)C(OC)=C1O COBXDAOIDYGHGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QOFZZTBWWJNFCA-UHFFFAOYSA-N texas red-X Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(=O)(=O)NCCCCCC(=O)O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 QOFZZTBWWJNFCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 2
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 2
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-triazine Chemical compound C1=CN=NN=C1 JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QHZVYZZRMVDSRK-UHFFFAOYSA-N 1,3-oxazole-2-sulfonamide Chemical compound NS(=O)(=O)C1=NC=CO1 QHZVYZZRMVDSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YNXICDMQCQPQEW-UHFFFAOYSA-N 1-naphthyl dihydrogen phosphate Chemical compound C1=CC=C2C(OP(O)(=O)O)=CC=CC2=C1 YNXICDMQCQPQEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JNGRENQDBKMCCR-UHFFFAOYSA-N 2-(3-amino-6-iminoxanthen-9-yl)benzoic acid;hydrochloride Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[NH2+])C=C2OC2=CC(N)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O JNGRENQDBKMCCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MGADZUXDNSDTHW-UHFFFAOYSA-N 2H-pyran Chemical compound C1OC=CC=C1 MGADZUXDNSDTHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BCHZICNRHXRCHY-UHFFFAOYSA-N 2h-oxazine Chemical compound N1OC=CC=C1 BCHZICNRHXRCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGIJRRREJXSQJR-UHFFFAOYSA-N 2h-thiazine Chemical compound N1SC=CC=C1 AGIJRRREJXSQJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QMDFJHAAWUGVKQ-UHFFFAOYSA-N 2h-thiopyran Chemical compound C1SC=CC=C1 QMDFJHAAWUGVKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOLORTLGFDVFDW-UHFFFAOYSA-N 3-(1h-benzimidazol-2-yl)-7-(diethylamino)chromen-2-one Chemical compound C1=CC=C2NC(C3=CC4=CC=C(C=C4OC3=O)N(CC)CC)=NC2=C1 GOLORTLGFDVFDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NMOWGWOAPRKWIR-UHFFFAOYSA-N 3-oxo-4h-quinoxaline-2-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2NC(=O)C(C(=O)O)=NC2=C1 NMOWGWOAPRKWIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WCDLCPLAAKUJNY-UHFFFAOYSA-N 4-[4-[3-(1h-pyrazol-4-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-6-yl]phenyl]morpholine Chemical compound C1COCCN1C1=CC=C(C2=CN3N=CC(=C3N=C2)C2=CNN=C2)C=C1 WCDLCPLAAKUJNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WCKQPPQRFNHPRJ-UHFFFAOYSA-N 4-[[4-(dimethylamino)phenyl]diazenyl]benzoic acid Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1N=NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 WCKQPPQRFNHPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IGHBXJSNZCFXNK-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-7-nitrobenzofurazan Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)C2=NON=C12 IGHBXJSNZCFXNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 1
- HZWPJAZIRZFCGX-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-2,6-dimethoxybenzaldehyde Chemical compound COC1=CC(O)=CC(OC)=C1C=O HZWPJAZIRZFCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-L 4-nitrophenyl phosphate(2-) Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(OP([O-])([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- STBGWNRZMPCVTG-UHFFFAOYSA-N 4h-thiopyran Chemical compound C1C=CSC=C1 STBGWNRZMPCVTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-galactoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CNC2=CC=C(Br)C(Cl)=C12 OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N 0.000 description 1
- JXCKZXHCJOVIAV-UHFFFAOYSA-N 6-[(5-bromo-4-chloro-1h-indol-3-yl)oxy]-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid;cyclohexanamine Chemical compound [NH3+]C1CCCCC1.O1C(C([O-])=O)C(O)C(O)C(O)C1OC1=CNC2=CC=C(Br)C(Cl)=C12 JXCKZXHCJOVIAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFNMUZCFSDMZPQ-GHXNOFRVSA-N 7-[(z)-3-methyl-4-(4-methyl-5-oxo-2h-furan-2-yl)but-2-enoxy]chromen-2-one Chemical compound C=1C=C2C=CC(=O)OC2=CC=1OC/C=C(/C)CC1OC(=O)C(C)=C1 CFNMUZCFSDMZPQ-GHXNOFRVSA-N 0.000 description 1
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 239000012109 Alexa Fluor 568 Substances 0.000 description 1
- 239000012110 Alexa Fluor 594 Substances 0.000 description 1
- 239000012111 Alexa Fluor 610 Substances 0.000 description 1
- 239000012112 Alexa Fluor 633 Substances 0.000 description 1
- 239000012113 Alexa Fluor 635 Substances 0.000 description 1
- 239000012114 Alexa Fluor 647 Substances 0.000 description 1
- 239000012115 Alexa Fluor 660 Substances 0.000 description 1
- 239000012116 Alexa Fluor 680 Substances 0.000 description 1
- 239000012117 Alexa Fluor 700 Substances 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- 241000341665 Alphapapillomavirus 3 Species 0.000 description 1
- 241000388169 Alphapapillomavirus 7 Species 0.000 description 1
- 208000034723 Amelia Diseases 0.000 description 1
- 102100025665 Angiopoietin-related protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 238000006677 Appel reaction Methods 0.000 description 1
- 208000002109 Argyria Diseases 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 208000004736 B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 102100021631 B-cell lymphoma 6 protein Human genes 0.000 description 1
- 108091012583 BCL2 Proteins 0.000 description 1
- 102100035755 BRD4-interacting chromatin-remodeling complex-associated protein Human genes 0.000 description 1
- 241000223836 Babesia Species 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 206010008805 Chromosomal abnormalities Diseases 0.000 description 1
- 208000031639 Chromosome Deletion Diseases 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100029362 Cone-rod homeobox protein Human genes 0.000 description 1
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 1
- 241000223936 Cryptosporidium parvum Species 0.000 description 1
- 108010058546 Cyclin D1 Proteins 0.000 description 1
- 102000009512 Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor p15 Human genes 0.000 description 1
- 108010009356 Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor p15 Proteins 0.000 description 1
- 102000009508 Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor p16 Human genes 0.000 description 1
- 108010009392 Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor p16 Proteins 0.000 description 1
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 1
- 102100028843 DNA mismatch repair protein Mlh1 Human genes 0.000 description 1
- 102100028849 DNA mismatch repair protein Mlh3 Human genes 0.000 description 1
- 102100034157 DNA mismatch repair protein Msh2 Human genes 0.000 description 1
- 102100037700 DNA mismatch repair protein Msh3 Human genes 0.000 description 1
- 102100021147 DNA mismatch repair protein Msh6 Human genes 0.000 description 1
- 102100033587 DNA topoisomerase 2-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- XWKHECGJHWMWTB-UHFFFAOYSA-N DY-480XL Chemical compound O=C1OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=C1C=CC1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=[N+]1CCCCCC(O)=O XWKHECGJHWMWTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PDKDKIZVZVKGTP-UHFFFAOYSA-N DY-485XL Chemical compound O=C1OC2=CC(N(CCCCCC(O)=O)CC)=CC=C2C=C1C1=CC=[N+](CCCS([O-])(=O)=O)C=C1 PDKDKIZVZVKGTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ITOJDWVAIOLCMZ-UHFFFAOYSA-N DY-520XL Chemical compound O=C1OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=C1C=CC1=CC=[N+](CCCCCC(O)=O)C=C1S([O-])(=O)=O ITOJDWVAIOLCMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100039563 ETS translocation variant 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000006586 Ectromelia Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000988559 Enterovirus A Species 0.000 description 1
- 241000988556 Enterovirus B Species 0.000 description 1
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 description 1
- 241000991586 Enterovirus D Species 0.000 description 1
- 241000272186 Falco columbarius Species 0.000 description 1
- 102100030334 Friend leukemia integration 1 transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 102100024165 G1/S-specific cyclin-D1 Human genes 0.000 description 1
- 241000224467 Giardia intestinalis Species 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000693093 Homo sapiens Angiopoietin-related protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000971234 Homo sapiens B-cell lymphoma 6 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000802816 Homo sapiens BRD4-interacting chromatin-remodeling complex-associated protein Proteins 0.000 description 1
- 101000919370 Homo sapiens Cone-rod homeobox protein Proteins 0.000 description 1
- 101000577867 Homo sapiens DNA mismatch repair protein Mlh3 Proteins 0.000 description 1
- 101001134036 Homo sapiens DNA mismatch repair protein Msh2 Proteins 0.000 description 1
- 101001027762 Homo sapiens DNA mismatch repair protein Msh3 Proteins 0.000 description 1
- 101000968658 Homo sapiens DNA mismatch repair protein Msh6 Proteins 0.000 description 1
- 101000813729 Homo sapiens ETS translocation variant 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001062996 Homo sapiens Friend leukemia integration 1 transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 101000979046 Homo sapiens Lysosomal alpha-mannosidase Proteins 0.000 description 1
- 101000916644 Homo sapiens Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000955263 Homo sapiens Multiple epidermal growth factor-like domains protein 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000738901 Homo sapiens PMS1 protein homolog 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000613490 Homo sapiens Paired box protein Pax-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000601661 Homo sapiens Paired box protein Pax-7 Proteins 0.000 description 1
- 101001056707 Homo sapiens Proepiregulin Proteins 0.000 description 1
- 101000585703 Homo sapiens Protein L-Myc Proteins 0.000 description 1
- 101000893493 Homo sapiens Protein flightless-1 homolog Proteins 0.000 description 1
- 101000999322 Homo sapiens Putative insulin-like growth factor 2 antisense gene protein Proteins 0.000 description 1
- 101000798015 Homo sapiens RAC-beta serine/threonine-protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 101000974043 Homo sapiens Ribosome biogenesis protein NOP53 Proteins 0.000 description 1
- 101000823271 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase ABL2 Proteins 0.000 description 1
- 101000760183 Homo sapiens Zinc finger protein 44 Proteins 0.000 description 1
- 101000782448 Homo sapiens Zinc finger protein 443 Proteins 0.000 description 1
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 1
- 241000701085 Human alphaherpesvirus 3 Species 0.000 description 1
- 241001479210 Human astrovirus Species 0.000 description 1
- 241001455656 Human betaherpesvirus 6B Species 0.000 description 1
- 241000701041 Human betaherpesvirus 7 Species 0.000 description 1
- 241000046923 Human bocavirus Species 0.000 description 1
- 241000711467 Human coronavirus 229E Species 0.000 description 1
- 241001109669 Human coronavirus HKU1 Species 0.000 description 1
- 241000482741 Human coronavirus NL63 Species 0.000 description 1
- 241001428935 Human coronavirus OC43 Species 0.000 description 1
- 241001247785 Human erythrovirus V9 Species 0.000 description 1
- 241001502974 Human gammaherpesvirus 8 Species 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 241000713340 Human immunodeficiency virus 2 Species 0.000 description 1
- 241000620571 Human mastadenovirus A Species 0.000 description 1
- 241001545456 Human mastadenovirus B Species 0.000 description 1
- 241000620147 Human mastadenovirus C Species 0.000 description 1
- 241000886679 Human mastadenovirus D Species 0.000 description 1
- 241000886703 Human mastadenovirus E Species 0.000 description 1
- 241000886705 Human mastadenovirus F Species 0.000 description 1
- 241000342334 Human metapneumovirus Species 0.000 description 1
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 1
- 241001327056 Human papillomavirus RTRX7 Species 0.000 description 1
- 241000340975 Human papillomavirus type 10 Species 0.000 description 1
- 241001198654 Human papillomavirus type 101 Species 0.000 description 1
- 241000403133 Human papillomavirus type 103 Species 0.000 description 1
- 241001379779 Human papillomavirus type 107 Species 0.000 description 1
- 241001524010 Human papillomavirus type 24 Species 0.000 description 1
- 241000341648 Human papillomavirus type 26 Species 0.000 description 1
- 241000341649 Human papillomavirus type 32 Species 0.000 description 1
- 241000341650 Human papillomavirus type 34 Species 0.000 description 1
- 241000701608 Human papillomavirus type 4 Species 0.000 description 1
- 241000701825 Human papillomavirus type 41 Species 0.000 description 1
- 241000123697 Human papillomavirus type 48 Species 0.000 description 1
- 241000701605 Human papillomavirus type 49 Species 0.000 description 1
- 241000341810 Human papillomavirus type 5 Species 0.000 description 1
- 241000123698 Human papillomavirus type 50 Species 0.000 description 1
- 241000341651 Human papillomavirus type 53 Species 0.000 description 1
- 241000669191 Human papillomavirus type 54 Species 0.000 description 1
- 241000123720 Human papillomavirus type 60 Species 0.000 description 1
- 241001135973 Human papillomavirus type 63 Species 0.000 description 1
- 241000701589 Human papillomavirus type 6b Species 0.000 description 1
- 241000701639 Human papillomavirus type 7 Species 0.000 description 1
- 241000514350 Human papillomavirus type 71 Species 0.000 description 1
- 241000701632 Human papillomavirus type 9 Species 0.000 description 1
- 241000341666 Human papillomavirus type 90 Species 0.000 description 1
- 241001549703 Human papillomavirus type 92 Species 0.000 description 1
- 241001034796 Human papillomavirus type 96 Species 0.000 description 1
- 241000857784 Human parvovirus 4 Species 0.000 description 1
- 241000702617 Human parvovirus B19 Species 0.000 description 1
- 241000829111 Human polyomavirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000726041 Human respirovirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000712003 Human respirovirus 3 Species 0.000 description 1
- 241001559187 Human rubulavirus 2 Species 0.000 description 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 1
- XJTQJERLRPWUGL-UHFFFAOYSA-N ICc1ccccc1 Chemical compound ICc1ccccc1 XJTQJERLRPWUGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000037982 Immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008036 Immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 241000222722 Leishmania <genus> Species 0.000 description 1
- 206010024503 Limb reduction defect Diseases 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 102100023231 Lysosomal alpha-mannosidase Human genes 0.000 description 1
- 229910015837 MSH2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102100028198 Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Human genes 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108010074346 Mismatch Repair Endonuclease PMS2 Proteins 0.000 description 1
- 102100037480 Mismatch repair endonuclease PMS2 Human genes 0.000 description 1
- 102100039005 Multiple epidermal growth factor-like domains protein 6 Human genes 0.000 description 1
- 241000358374 Mupapillomavirus 1 Species 0.000 description 1
- 101100381525 Mus musculus Bcl6 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108010026664 MutL Protein Homolog 1 Proteins 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-UHFFFAOYSA-N O-phosphoryl-L-serine Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102100037482 PMS1 protein homolog 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010011536 PTEN Phosphohydrolase Proteins 0.000 description 1
- 102000014160 PTEN Phosphohydrolase Human genes 0.000 description 1
- 102100040891 Paired box protein Pax-3 Human genes 0.000 description 1
- 102100037503 Paired box protein Pax-7 Human genes 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 108010010522 Phycobilisomes Proteins 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 102100025498 Proepiregulin Human genes 0.000 description 1
- 101710180319 Protease 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100030128 Protein L-Myc Human genes 0.000 description 1
- 102100036485 Putative insulin-like growth factor 2 antisense gene protein Human genes 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GMRIOMQGYOXUCH-UHFFFAOYSA-N QSY35 succinimidyl ester Chemical compound C12=NON=C2C([N+](=O)[O-])=CC=C1NC(C=C1)=CC=C1CC(=O)ON1C(=O)CCC1=O GMRIOMQGYOXUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDJDTKYGKHEMFF-UHFFFAOYSA-M QSY7 succinimidyl ester Chemical compound [Cl-].C=1C=C2C(C=3C(=CC=CC=3)S(=O)(=O)N3CCC(CC3)C(=O)ON3C(CCC3=O)=O)=C3C=C\C(=[N+](\C)C=4C=CC=CC=4)C=C3OC2=CC=1N(C)C1=CC=CC=C1 BDJDTKYGKHEMFF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100032315 RAC-beta serine/threonine-protein kinase Human genes 0.000 description 1
- 102100022399 Ribosome biogenesis protein NOP53 Human genes 0.000 description 1
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010068771 Soft tissue neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 208000000389 T-cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000028530 T-cell lymphoblastic leukemia/lymphoma Diseases 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M Thiocyanate anion Chemical compound [S-]C#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101710137710 Thioesterase 1/protease 1/lysophospholipase L1 Proteins 0.000 description 1
- 241000223996 Toxoplasma Species 0.000 description 1
- 108010091356 Tumor Protein p73 Proteins 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 102100030018 Tumor protein p73 Human genes 0.000 description 1
- 108010046308 Type II DNA Topoisomerases Proteins 0.000 description 1
- 102100022651 Tyrosine-protein kinase ABL2 Human genes 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 102100024660 Zinc finger protein 44 Human genes 0.000 description 1
- 102100035883 Zinc finger protein 443 Human genes 0.000 description 1
- MGPYJVWEJNTXLC-UHFFFAOYSA-N [6-[6-[2-cyanoethoxy-[di(propan-2-yl)amino]phosphanyl]oxyhexylcarbamoyl]-6'-(2,2-dimethylpropanoyloxy)-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-3'-yl] 2,2-dimethylpropanoate Chemical compound C12=CC=C(OC(=O)C(C)(C)C)C=C2OC2=CC(OC(=O)C(C)(C)C)=CC=C2C11OC(=O)C2=CC=C(C(=O)NCCCCCCOP(N(C(C)C)C(C)C)OCCC#N)C=C21 MGPYJVWEJNTXLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical class C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N aldrithiol Chemical group C=1C=CC=NC=1SSC1=CC=CC=N1 HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004414 alkyl thio group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001454 anthracenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005110 aryl thio group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000005667 attractant Substances 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 125000001743 benzylic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000298 carbocyanine Substances 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000001364 causal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- BPHHNXJPFPEJOF-UHFFFAOYSA-J chembl296966 Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)C1=CC(S([O-])(=O)=O)=C(N)C2=C(O)C(N=NC3=CC=C(C=C3OC)C=3C=C(C(=CC=3)N=NC=3C(=C4C(N)=C(C=C(C4=CC=3)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)O)OC)=CC=C21 BPHHNXJPFPEJOF-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 238000000701 chemical imaging Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- KRVSOGSZCMJSLX-UHFFFAOYSA-L chromic acid Substances O[Cr](O)(=O)=O KRVSOGSZCMJSLX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000008711 chromosomal rearrangement Effects 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- IBAHLNWTOIHLKE-UHFFFAOYSA-N cyano cyanate Chemical compound N#COC#N IBAHLNWTOIHLKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000392 cycloalkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000000368 destabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229950006137 dexfosfoserine Drugs 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000012954 diazonium Substances 0.000 description 1
- 150000001989 diazonium salts Chemical class 0.000 description 1
- LGTLXDJOAJDFLR-UHFFFAOYSA-N diethyl chlorophosphate Chemical compound CCOP(Cl)(=O)OCC LGTLXDJOAJDFLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- KPBGWWXVWRSIAY-UHFFFAOYSA-L disodium;2',4',5',7'-tetraiodo-6-isothiocyanato-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-3',6'-diolate Chemical compound [Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=C(N=C=S)C=C2C21C1=CC(I)=C([O-])C(I)=C1OC1=C(I)C([O-])=C(I)C=C21 KPBGWWXVWRSIAY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 238000012137 double-staining Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700021358 erbB-1 Genes Proteins 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 150000002240 furans Chemical class 0.000 description 1
- AWJWCTOOIBYHON-UHFFFAOYSA-N furo[3,4-b]pyrazine-5,7-dione Chemical compound C1=CN=C2C(=O)OC(=O)C2=N1 AWJWCTOOIBYHON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940085435 giardia lamblia Drugs 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 230000005283 ground state Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 125000004438 haloalkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 125000004475 heteroaralkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N hydrogen thiocyanate Natural products SC#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008863 intramolecular interaction Effects 0.000 description 1
- CTAPFRYPJLPFDF-UHFFFAOYSA-N isoxazole Chemical compound C=1C=NOC=1 CTAPFRYPJLPFDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 229930013686 lignan Natural products 0.000 description 1
- 150000005692 lignans Chemical class 0.000 description 1
- 235000009408 lignans Nutrition 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- DLBFLQKQABVKGT-UHFFFAOYSA-L lucifer yellow dye Chemical compound [Li+].[Li+].[O-]S(=O)(=O)C1=CC(C(N(C(=O)NN)C2=O)=O)=C3C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC3=C1N DLBFLQKQABVKGT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000891 luminescent agent Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 229960002523 mercuric chloride Drugs 0.000 description 1
- LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L mercury dichloride Chemical compound Cl[Hg]Cl LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- LGRLWUINFJPLSH-UHFFFAOYSA-N methanide Chemical compound [CH3-] LGRLWUINFJPLSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- DWCZIOOZPIDHAB-UHFFFAOYSA-L methyl green Chemical compound [Cl-].[Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC=C1C(C=1C=CC(=CC=1)[N+](C)(C)C)=C1C=CC(=[N+](C)C)C=C1 DWCZIOOZPIDHAB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M methylene blue Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 230000004001 molecular interaction Effects 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- GWVCIJWBGGVDJJ-UHFFFAOYSA-N n-(4-aminophenyl)sulfonyl-n-(3-methoxypyrazin-2-yl)acetamide Chemical compound COC1=NC=CN=C1N(C(C)=O)S(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 GWVCIJWBGGVDJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 150000002790 naphthalenes Chemical class 0.000 description 1
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- SBOJXQVPLKSXOG-UHFFFAOYSA-N o-amino-hydroxylamine Chemical compound NON SBOJXQVPLKSXOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GLZWNFNQMJAZGY-UHFFFAOYSA-N octaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO GLZWNFNQMJAZGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000012285 osmium tetroxide Substances 0.000 description 1
- 229910000489 osmium tetroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004866 oxadiazoles Chemical class 0.000 description 1
- 150000004893 oxazines Chemical class 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- VYNDHICBIRRPFP-UHFFFAOYSA-N pacific blue Chemical compound FC1=C(O)C(F)=C2OC(=O)C(C(=O)O)=CC2=C1 VYNDHICBIRRPFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- NTGBUUXKGAZMSE-UHFFFAOYSA-N phenyl n-[4-[4-(4-methoxyphenyl)piperazin-1-yl]phenyl]carbamate Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1N1CCN(C=2C=CC(NC(=O)OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)CC1 NTGBUUXKGAZMSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- FDIKHVQUPVCJFA-UHFFFAOYSA-N phosphohistidine Chemical compound OP(=O)(O)NC(C(=O)O)CC1=CN=CN1 FDIKHVQUPVCJFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N phosphoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- USRGIUJOYOXOQJ-GBXIJSLDSA-N phosphothreonine Chemical compound OP(=O)(O)O[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O USRGIUJOYOXOQJ-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- DCWXELXMIBXGTH-UHFFFAOYSA-N phosphotyrosine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(OP(O)(O)=O)C=C1 DCWXELXMIBXGTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002306 phycobilisome Anatomy 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- QWYZFXLSWMXLDM-UHFFFAOYSA-M pinacyanol iodide Chemical compound [I-].C1=CC2=CC=CC=C2N(CC)C1=CC=CC1=CC=C(C=CC=C2)C2=[N+]1CC QWYZFXLSWMXLDM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000002331 protein detection Methods 0.000 description 1
- 230000009822 protein phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 150000003220 pyrenes Chemical class 0.000 description 1
- PBMFSQRYOILNGV-UHFFFAOYSA-N pyridazine Chemical compound C1=CC=NN=C1 PBMFSQRYOILNGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013062 quality control Sample Substances 0.000 description 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 102000027426 receptor tyrosine kinases Human genes 0.000 description 1
- 108091008598 receptor tyrosine kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- XLXOKMFKGASILN-UHFFFAOYSA-N rhodamine red-X Chemical compound C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=C(S(=O)(=O)NCCCCCC(O)=O)C=C1S([O-])(=O)=O XLXOKMFKGASILN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 230000007781 signaling event Effects 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- RPENMORRBUTCPR-UHFFFAOYSA-M sodium;1-hydroxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].ON1C(=O)CC(S([O-])(=O)=O)C1=O RPENMORRBUTCPR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 125000004646 sulfenyl group Chemical group S(*)* 0.000 description 1
- 125000000475 sulfinyl group Chemical group [*:2]S([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000000020 sulfo group Chemical group O=S(=O)([*])O[H] 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- HKYHBMLIEAMWRO-UHFFFAOYSA-N sy002454 Chemical compound OC(=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=NN1 HKYHBMLIEAMWRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 206010042863 synovial sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- KCDXJAYRVLXPFO-UHFFFAOYSA-N syringaldehyde Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC(OC)=C1O KCDXJAYRVLXPFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- RUPAXCPQAAOIPB-UHFFFAOYSA-N tert-butyl formate Chemical compound CC(C)(C)OC=O RUPAXCPQAAOIPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium bromide Chemical compound [Br-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ABZLKHKQJHEPAX-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine Chemical compound C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C([O-])=O ABZLKHKQJHEPAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUUHXGOJWVMBDY-UHFFFAOYSA-L tetrazolium blue Chemical compound [Cl-].[Cl-].COC1=CC(C=2C=C(OC)C(=CC=2)[N+]=2N(N=C(N=2)C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 MUUHXGOJWVMBDY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- RONADMZTCCPLEF-UHFFFAOYSA-M tetrazolium violet Chemical compound [Cl-].C1=CC=CC=C1C(N=[N+]1C=2C3=CC=CC=C3C=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 RONADMZTCCPLEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002813 thiocarbonyl group Chemical group *C(*)=S 0.000 description 1
- ATGUDZODTABURZ-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-ylideneazanium;chloride Chemical compound Cl.N=C1CCCS1 ATGUDZODTABURZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930192474 thiophene Natural products 0.000 description 1
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 1
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 125000005152 trihalomethanesulfonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 238000001429 visible spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 125000001834 xanthenyl group Chemical class C1=CC=CC=2OC3=CC=CC=C3C(C12)* 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
- C07F9/65583—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system each of the hetero rings containing nitrogen as ring hetero atom
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
- G01N33/542—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with steric inhibition or signal modification, e.g. fluorescent quenching
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Description
本出願は、2016年2月29日に出願された米国仮特許出願第62/301,489号の利益を主張する2016年8月26日に出願された国際出願番号PCT/US2016/049153の出願日及び2015年8月28日に出願された米国仮特許出願第62/211,590号の出願日の利益を主張し、それらの開示は、その全体が参照により本明細書に援用される。
本開示は、化学及び診断の分野における産業上の利用可能を有する。
[式中、
Yは、カルボニル反応基、アミン反応基又はチオール反応基から選択され;
Xは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Aは、結合であるか、又は、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
「ケージング基」は、酵素基質及び任意選択的に脱離基を含み、脱離基部分は、いくつかの非制限的な実施態様では、置換又は無置換の5、6又は7員の芳香環又は複素環式環を含みうる。]
を有するケージドハプテンである。
[式中、
R1は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
R2は、酵素基質、-アルキル-酵素基質、又は-O-アルキル-酵素基質である。]
を有する。
[式中、R2は、リン酸基、エステル基、アミド基、硫酸基、グリコシド基、尿素基、-アルキル-ホスフェート基、-O-アルキル-ホスフェート基及びニトロ基からなる群より選択される。]を有する。いくつかの実施態様では、各R1基は異なる。
[式中、R2は、リン酸基、エステル基、アミド基、硫酸基、グリコシド基、尿素基、-アルキル-ホスフェート基、-O-アルキル-ホスフェート基及びニトロ基からなる群より選択される。]を有する。いくつかの実施態様では、各R1基は異なる。
[式中、R2は、リン酸基、エステル基、アミド基、硫酸基、グリコシド基、尿素基、-アルキル-ホスフェート基、-O-アルキル-ホスフェート基及びニトロ基からなる群より選択される。]を有する。
[式中、d及びeは、各々独立して4から18の範囲の整数であり;Qは、結合、O、S又はN(Rc)(Rd)であり;Ra及びRbは、独立してH、C1-C4アルキル基、F、Cl又はN(Rc)(Rd)であり;Rc及びRdは、独立してCH3又はHである。]の構造を有する。いくつかの実施態様では、d及びeは、各々独立して1から24の範囲の整数である。
[式中、
「ハプテン」はハプテンであり;
Yは、カルボニル反応基、アミン反応基又はチオール反応基から選択され;
Xは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Aは、結合であるか、又は、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
「ケージング基」は、酵素基質及び任意選択的に脱離基を含み、脱離基部分は、置換又は無置換の5、6又は7員の芳香環又は複素環式環を含む。]
を有する。
[式中、
「抗体」は抗体であり;
「ハプテン」はハプテンであり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり、
Aは、結合であるか、又は、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
「ケージング基」は、ハロゲン、1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;及び1から4個の炭素原子を有する分岐又は非分岐状で置換又は無置換のアルキル基からなる群より選択される部分で置換されていてもよい5、6又は7員の芳香環又は複素環式環であり、
qは0又は1であり、且つ
nは1から25の範囲の整数である。]
の構造を有する。
[式中、
R1は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;且つ
R2は、酵素基質、-アルキル-酵素基質、又は-O-アルキル-酵素基質である。]
を有する。
[式中、R2は、リン酸基、エステル基、アミド基、硫酸基、グリコシド基、尿素基、-アルキル-ホスフェート基、-O-アルキル-ホスフェート基及びニトロ基からなる群より選択される。]を有する。いくつかの実施態様では、各R1基は異なる。
[式中、R2は、リン酸基、エステル基、アミド基、硫酸基、グリコシド基、尿素基、-アルキル-ホスフェート基、-O-アルキル-ホスフェート基及びニトロ基からなる群より選択される。]を有する。いくつかの実施態様では、R1基は異なる。
[式中、R2は、リン酸基、エステル基、アミド基、硫酸基、グリコシド基、尿素基、-アルキル-ホスフェート基、-O-アルキル-ホスフェート基及びニトロ基からなる群より選択される。]を有する。いくつかの実施態様では、各R1基は異なる。
[式中、
「ハプテン」はハプテンであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Yは、カルボニル反応基、アミン反応基又はチオール反応基から選択され;
Xは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
各R1は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R3は酵素基質であり;
qは0又は1であり;
sは0、又は1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
を有するケージドハプテン化合物である。
[式中、d及びeは、各々独立して4から18の範囲の整数であり;Qは、結合、O、S又はN(Rc)(Rd)であり;Ra及びRbは、独立してH、C1-C4アルキル基、F、Cl又はN(Rc)(Rd)であり;Rc及びRdは、独立してCH3又はHである。]の構造を有する。いくつかの実施態様では、d及びeは、各々独立して1から24の範囲の整数である。
本明細書で使用される場合、単数形「一つの(a)」、「一つの(an)」、及び「その(the)」は、文脈から判断して明らかにそうでないと分かる以外は、複数の指示物を含む。同様に、「又は(or)」という単語も、文脈が明らかに他を示さない限りは「及び」を含むことが意図される。用語「含む(includes)」は、「A又はBを含む」が、A、B、又はA及びBを含むことを意味するように、包括的に定義される。
本開示の一態様は、図1Bで説明されるような「ケージドハプテン」である。当業者が理解するように、ハプテンは、抗ハプテン抗体が生じる小分子である。「ケージドハプテン」は、適切な抗ハプテン抗体がもはや分子を認識せず、結合事象が生じないように修飾された構造のハプテンである。実際には、ハプテンの同定は「マスク化」又は「保護」である。本明細書で開示されるケージドハプテンは、それぞれのハプテン、すなわち非ケージド又は非マスク化ハプテンが酵素処理によって放出され、ネイティブハプテンを生成するように、酵素開裂ケージを考慮して設計されている(例えば、酵素処理を介したケージドハプテンの非マスク化を説明している図2を参照のこと)。したがって、適切な酵素の存在下で、ケージドハプテンは非マスク化され、抗ハプテン抗体はそれに結合しない。
[式中、
Xは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Yは、別の基と共有結合を形成することができる反応基であり;
「ハプテン」及び「ケージング基」は、本明細書に記載される通りであり、
qは0又は1である。]
の構造を有する。
[式中、Y、X、「ハプテン」、A、q、「脱離基」及び「酵素基質」のそれぞれは、本明細書で規定される通りである。]で説明されるような(i)脱離基部分、及び(ii)酵素基質部分を含んでなる酵素開裂部分である。
[式中、Y、X、「ハプテン」、A、q及び「酵素基質」のそれぞれは、本明細書で規定される通りである。]のようにハプテンに直接的に又は間接的に結合する酵素基質を含む。
[式中、
「ハプテン」は本明細書に規定される通りであり;
Yは、カルボニル反応基、アミン反応基又はチオール反応基から選択され;
Xは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
各R1は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
R3は酵素基質であり;
qは0又は1であり;且つ
sは0、又は1から4の範囲の整数である。]
[式中、
Yは、カルボニル反応基、アミン反応基又はチオール反応基から選択され;
Xは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換されていてもよいアルキル基、又は置換されていてもよい-O-アルキル基であり;
各R1は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
R3は酵素基質であり;
「ハプテン」は本明細書に規定される通りであり;
qは0又は1であり;
sは0、又は1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
の構造を有する
[式中、
Yは、カルボニル反応基、アミン反応基又はチオール反応基から選択され;
Xは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R3は酵素基質であり;
「ハプテン」は本明細書に規定される通りであり;
qは0又は1であり;且つ
tは0又は1である。]
の構造を有する
[式中、
各R1は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択される。]
の構造を有する。
に説明するように、ケージング基をハプテンに結合させる基にパラで位置する。
[式中、d及びeは、各々独立して4から18の範囲の整数であり;Qは、結合、O、S又はN(Rc)(Rd)であり;Ra及びRbは、独立してH、C1-C4アルキル基、F、Cl又はN(Rc)(Rd)であり;Rc及びRdは、独立してCH3又はHである。]の構造を有する。いくつかの実施態様では、d及びeは、各々独立して1から24の範囲の整数である。
[式中、d及びeは、各々独立して1から24の範囲の整数であり;Qは、結合、O、S又はN(Rc)(Rd)であり;Rc及びRdは、独立してCH3又はHである]に示される構造を有する。他の実施態様では、QはOである。
[式中、d及びeは、各々独立して1から24の範囲の整数である。]に示される構造を有する。いくつかの実施態様では、dは2であり、eは2から24の範囲の整数である。
[式中、d及びeは、各々独立して2から15の範囲の整数であり;Qは、結合であり、O、S又はN(Rc)(Rd)であり;Ra及びRbは、独立してH、C1-C4アルキル基、F、Cl又はN(Rc)(Rd)であり;Rc及びRdは、独立してCH3又はHである。]の構造を有する。ある実施態様では、d及びeは、各々独立して1から12の範囲の整数である。
ケージドハプテンは、当業者に周知の任意の方法に従って合成されうる。例えば、ケージング基は、置換4-ヒドロキシベンズアルデヒドで出発して調製されうる。置換4-ヒドロキシベンズアルデヒドのヒドロキシル基は、リン酸基で置換され、その後、アルデヒドが還元され、結果として得られるベンジルアルコールがアッペル反応を通じてハロゲンで置換される。ケージング基は、その後、塩基性条件下で、ハロゲン置換ケージング基とハプテンの反応により、問題のハプテンに組み込まれうる(ハプテンが多数の求核基を含有する場合、ケージングのための所望の位置を選択するための保護化学を必要としうる)。ケージング基の保護されたリン酸基は、その後、臭化トリメチルシリルを使用して脱保護され、続いて、ケージドハプテンを反応基(すなわちマレイミド)と反応させて、抗体とのコンジュゲーションを容易にしうる。
合成材料及び方法Empower 3(Waters)で走査するWaters Acquity QDa(ESI)でMSデータを回収した。Empower 3(Waters)で走査するWaters XBridgeカラムを使用したWaters Alliance e2695で分析HPLCを実施した。Empower 3(Waters)で走査するWaters Sunfireカラム(Prep C18 OBD 10μm 50×250mm)を備えたWaters 2535で分取HPLCを実施した。Biotage KP-Silカラムを使用したBiotage Isolera Oneで分取クロマトグラフィークロマトグラフィーを実施した。全ての化学物質は、市場の供給業者から購入し、別途記載のない限り受領したままの状態で使用した。
本開示は、ケージドハプテンを含む新規のコンジュゲートを提供する。いくつかの実施態様では、ケージドハプテンは、特異的結合実体、例えば抗体又は核酸プローブにコンジュゲートしている。他の実施態様では、ケージドハプテンは、式(IV):
[式中、
「抗体」及び「ハプテン」は本明細書に規定される通りであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群基より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Qは0又は1であり;
nは1から25の範囲の整数であり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基である。]のように抗体にコンジュゲートしている。いくつかの実施態様では、Zは、式(IIIA)、(IIIB)又は(IIIC)のいずれかの構造を有する基を含む。
[式中、
「抗体」は、本明細書に規定される通りであり;
「ハプテン」は、本明細書に規定される通りであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり、
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
各R1は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
R3は酵素基質であり;
nは1から25の範囲の整数であり;
qは0又は1であり、且つ
sは0、又は1から4の範囲の整数である。]
のいずれかの構造を有する。
[式中、
「抗体」は本明細書に規定される通りであり;
「ハプテン」は本明細書に規定される通りであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり、
各R1は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R3は酵素基質であり;
nは1から25の範囲の整数であり;
qは0又は1であり;
sは0、又は1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
の構造を有する
本開示のコンジュゲートは、当業者に周知の任意の方法に従って合成することができる。
合成に続き、コンジュゲートは、例えばサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)により生成され、その後、例えばゲル電気泳動及び/又は紫外可視により特性化される。
いくつかの実施態様では、検出試薬は、ケージドハプテンコンジュゲート、又はケージドハプテンコンジュゲートと標的の複合体を検出することを可能にするために利用される。いくつかの実施態様では、用いられる検出試薬は、任意のケージドハプテン-コンジュゲートのケージドハプテンに相当するそれぞれの非マスク化ハプテンに特異的である。したがって、用語「それぞれの非マスク化ハプテン」又は「非マスク化ハプテン」は、適切な非マスキング酵素で「非ケージ」されて、「ネイティブ」ハプテン、すなわち、ケージドハプテンの酵素基質部分と反応する非マスキング酵素を示したケージドハプテンを指す。「非ケージ化」又は「非マスク化」の工程は、本明細書でこれ以降に記載され、少なくとも図2に示される。本明細書に記載されるように、検出試薬はまた、シグナルを増加させるように設計された成分、例えばシグナル増幅成分又はシグナル増幅キットも含みうる。
本明細書でより詳細に記載されるように、本開示は、互いに近接したタンパク質ダイマー又はタンパク質の検出を可能にする。タンパク質-タンパク質相互作用の非限定的な例は、互いを伴うHer1/2/3/4タンパク質;PD-L1を伴うPD-1;及び/又は関連するリガンド(AREG、EREG)のいずれかを伴うPD-L2、EGFR(Her1)を含む。
本開示のアッセイ及び方法は自動化されてもよく、標本処理装置と組み合わされてもよい。標本処理装置は、Ventana Medical Systems、Inc.により販売されているBENCHMARK XT装置及びSYMPHONY装置などの自動装置とすることができる。Ventana Medical Systems、Inc.は、自動分析を実行するためのシステム及び方法を開示している、米国特許第5650327号、第5654200号、第6296809号、第6352861号、第6827901号及び第6943029号、並びに米国特許出願公開第20030211630号及び第20040052685号を含めた複数の米国特許の譲受人であり、これらの各々は、全体が参照により本明細書に援用される。あるいは、標本を手動で処理することもできる。
対比染色は、標的の構造が顕微鏡下でより容易に視覚化され得るように、一又は複数の標的を検出するための薬剤で既に染色した後の試料を後処理する方法である。例えば、対比染料をカバースリッピングの前に任意選択的に使用し、免疫組織化学染色をより明瞭にする。対比染料は、一次染料と色が異なる。多くの対比染料、例えばヘマトキシリン、エオシン、メチルグリーン、メチレンブルー、ギムザ、アルシアンブルー、及びニュークリアファストレッド(Nuclear Fast Red)がよく知られている。DAPI(4’,6-ジアミジノ-2-フェニルインドール)は、使用されうる蛍光性染料である。
本開示の実施態様のすべて又は特定の態様は、コンピュータ解析及び/又は画像解析システムによって自動化され、容易にされ得る。いくつかのアプリケーションでは、正確な色又は蛍光性の比率が測定される。いくつかの実施態様では、画像解析のために光学顕微鏡法が利用される。特定の本開示の実施態様は、デジタル画像を取得することを伴う。これは、デジタルカメラを顕微鏡に連結することにより行うことができる。染色した試料から得られたデジタル画像は、画像解析ソフトウェアを用いて解析する。色又は蛍光性は、いくつかの異なる方法で測定することができる。たとえば、色は、赤、青、緑の値;色相、彩度、強度の値として、及び/又はスペクトルイメージングカメラを使用して特定の波長又は波長の範囲を測定することによって測定することができる。また、試料を定性的及び半定量的に評価することができる。定性的評価は、染色強度を評価すること、陽性染色細胞及び染色に関与する細胞内区画を同定すること、試料全体又はスライドの品質を評価することを含む。試験試料に対して別々の評価が行われるため、この解析は、試料が異常な状態を表すかどうかを決定するための既知の平均値との比較を含み得る。
いくつかの実施態様では、本開示のケージされたハプテンコンジュゲートは、「検出キット」の一部として利用されうる。一般に、検出キットは、一又は複数のケージドハプテンコンジュゲート及び一又は複数のケージドハプテンコンジュゲートを検出するための検出試薬を含みうる。いくつかの実施態様では、キットは式(IVC)又は(IVD)のいずれかのケージドハプテンコンジュゲートを含む。
試料は、生物学的成分を含み、一般に一又は複数の目的の標的分子を含むと思われる。標的分子は、細胞の表面上に存在し得、細胞は、懸濁液中又は組織切片中に存在し得る。標的分子はまた、細胞内に存在し得、プローブによる細胞溶解又は細胞侵入の際に検出され得る。当業者は、試料中の標的分子を検出する方法が使用される試料及びプローブの種類に応じて変化することを理解するであろう。試料を収集し調製する方法は、当技術分野で既知である。
2-ヒドロキシキノキサリン(HQ)ハプテンを、アルカリホスファターゼ(AP)により放出することができるケージング基、すなわち、ホスファターゼ酵素基質部分を含むケージング基で修飾した。二次抗種抗体(ヤギ-抗-ウサギ及びヤギ-抗-マウス)を、ケージドハプテン(cHQ)又はAPのいずれかで個別に標識した。したがって、ウサギ及びマウス一次抗体の任意の対を試験し、それらの互いとの近接性を決定することができた。以下に規定され、抗体とのコンジュゲーション(cHQ-MAL)のためのマレイミド(MAL)反応基を用いたケージドHQの調製を記載するスキーム1Aで説明される方法に従って、ケージドHQを合成した。
化合物2. EtOAc(25mL)に2,6-ジメトキシ-4-ヒドロキシベンズアルデヒド(5.00g、27.4mmol)及びトリエチルアミン(4.17g、5.74mL、41.2mmol)が入った溶液を氷浴中で撹拌しながら0℃に冷却した。ジエチルクロロホスフェート(4.73g、27.4mmol)をその後5分間にわたって滴下した。反応物を室温まで温め、続いて室温(「rt」)で約6時間撹拌した(HPLCをチェックし、反応が約90%超完了したことを確認)。反応混合物を、1MのHCl(100mL)の添加によりクエンチし、有機層を分離し、回収した。追加量のEtOAc(100mL)を添加し、1MのHCl(2×100mL)、飽和NaHCO3(3×100mL)及びブライン(100mL)で有機物を抽出した。有機層をMgSO4で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去し、明褐色の粘性油状物として化合物2を得た(7.95g、収率91%)。
実施例1のケージドハプテン-抗体コンジュゲートのケージング基が、抗-ハプテン抗体がそれぞれのネイティブ(すなわち、非マスク化)ハプテンに結合することを妨げたことを確認するため、cHQコンジュゲートを単一IHC検出により試験した。図5はIHC染色スキームを図示しており、cHQにコンジュゲートしている二次抗体、すなわちcHQケージドハプテン-抗体コンジュゲート(103A)を用いて、単抗原(114)を検出した。cHQケージドハプテン-抗体コンジュゲート(103A)の導入に続いて、AP酵素(すなわちフリーの非コンジュゲートAP)(113)を導入し、ケージドハプテン-抗体コンジュゲートのハプテンを非マスクした。得られた非マスク化ハプテン(103B)は、抗-ハプテン抗体(115)により認識することができた。いくつかの実施態様では、抗-ハプテン抗体(115)は、一又は複数の酵素にコンジュゲートしている(図5は、3のHRP酵素への結合を図示する。)。
数多くの既知の陽性及び推定陰性系を調査し、開示されるコンジュゲートがタンパク質近接性を測定することを可能にする能力を試験した。E-カドヘリン及びベータ-カテニンは通常セルにおいて互いに近接していることを生物学が示しているため、これらのタンパク質を既知の陽性系として選択した。Her2/ベータ-カテニン及びEGFR/ベータ-カテニンを、同一セルコンパートメントに存在する(共局在化)が、互いに相互作用することが予想されていない(近接していない)タンパク質の対として選択し、したがって、任意の近接アッセイにおいてシグナルを生成しないはずである。また、一のウサギ及び一のマウス一次抗体が抗種二次検出の使用を可能にするために存在するように、抗体対を選択した。
異なる検出可能なシグナル(例えば色)を提供する異なるHRP系を試験した。例えば、図11A及び11Bは、銀(11A)及びチラミド-TAMRA(11B)を用いた検出を説明する。これらの系はどちらも試料中の近接タンパク質標的を検出することができた。
図12は、一つの総タンパク(標的2、AP-Yellow)及び近接タンパク質シグナル(標的1+標的2、HRP-Silver)の多重検出の概略図である。任意のタイプのHRP検出系を使用して、近接性シグナルを示すことができ、任意のAP検出系(例えばナフトールホスフェート/Fast Red、BCIP/NBT、キノンメチド(QM)-色素原)を使用して総タンパクを視覚化することができる。
リガンドPD-L1のその受容体PD-1への結合は、T細胞の活性化又は阻害を調節する。腫瘍細胞は、この相互作用を使用し、免疫系を回避しうる。PD-L1/PD-1複合体の検出は、いずれかのタンパク質のそれ自体による簡易測定よりも、主要内の免疫チェックポイントの阻止状態をよりよく示すことができる。
図19は、PD-L1及びPD-1に関するケージドハプテン近接性シグナルと扁桃腺組織中の別のバイオマーカーの後続の検出とを組み合わせる例を図示する。この場合、PD-L1/PD-1相互作用に関与したCD8細胞を視覚化するアッセイを生成するために、PD-L1/PD1複合体の後にCD8を検出した。多重化のために、先に記載したように、PD-1及びPD-L1の近接性を最初に検出した。先に結合した原色の溶出を助けるために、スライドを8分間にわたって90℃に加熱した。ウサギ抗-CD8(SP57)(Ventana、p/n 790-4460)をスライドに適用し、37℃で16分間インキュベートした。UltraMap Rb AP(Ventana、p/n 760-4314)、その後DISCOVERY Yellow色素原を使用して、抗-CD8を検出した。Hematoxylin II(Ventana、p/n 790-2208)及びBluing Reagent(Ventana、p/n 760-2037)を用いてスライドを対比染色した。
ケージドハプテン近接アッセイを使用して、BT-474細胞株のFFPE事例を試験した。完全に自動化されたDISCOVERY ULTRA機器で事例を試験した。DISCOVERY EZ Prep(Ventana、p/n 950-100)又はDISCOVERY Wash(Ventana、p/n 950-510)の脱パラフィン化溶液を使用して、スライドを脱パラフィン化した。DISCOVERY CC1(Ventana、p/n 950-124)を使用して、95℃で、64分間にわたり、スライド上で熱誘導エピトープ回収を実行した。その後、DISCOVERY阻害剤(Ventana、p/n 760-4840)をスライドに適用し、試料中の任意の内因性のペルオキシダーゼをクエンチした。ウサギ抗-Her2(4B5)(Ventana、p/n 790-2991)を、マウス抗-Her3(SPM738)(Spring、p/n E19260)で、32分間にわたり37℃で共にインキュベートした。その後、30μg/mLのヤギ抗-マウスアルカリホスファターゼ コンジュゲートをスライドに適用し、12分間インキュベートした。スライドを洗い流し、ケージドハプテンヤギ抗-ウサギコンジュゲートの20μg/mLの溶液を16分間にわたってスライドに適用した。インキュベーション後、500mMのトリスバッファー溶液pH10.0及び490mMのMgCl2溶液をスライドに適用し、ケージドハプテンの脱ケージ化を可能にした。HQの脱ケージ化後、マウス-抗-HQ HRP(Ventana、p/n 760-4820)コンジュゲートをスライドに適用し、非ケージドHQを結合した。いくつかの場合において、Amp HQチラミド増幅キット(Ventana、p/n 760-052)を使用して、シグナル強度を増加させるのに役立てた。近接したタンパク質を、Chromomap DABキット(Ventana、p/n 760-159)を使用して視覚化し、続いて、Hematoxylin II(Ventana、p/n 790-2208)及びBluing Reagent(Ventana、p/n 760-2037)で対比染色した。
数多くの既知の陽性及び推定陰性系を調査し、開示されるコンジュゲートがタンパク質近接性を測定することを可能にする能力を試験した。E-カドヘリン及びベータ-カテニンは通常セルにおいて互いに近接していることを生物学が示しているため、これらのタンパク質を既知の陽性系として選択した。また、一つのウサギ及び一つのマウス一次抗体が抗種二次検出の使用を可能にするために存在するように、抗体対を選択した。
ケージドハプテン-抗体コンジュゲートのケージング基が存在し、抗-ハプテン抗体がそれぞれのネイティブ(すなわち、非マスク化)ハプテンへの結合をブロックすることを確認するため、cHQ コンジュゲートを単一IHC検出により試験した。非常に低レベルの非ケージ化事象を検出するために、非常に高い発現レベルを有するバイオマーカーを、非常に高い発現レベルを有するFFPE試料上で選択した(例えば、扁桃腺組織上のラムダタンパク質及びSKBR3細胞株上のHer2タンパク質)。図3はIHC染色スキームを図示しており、cNPにコンジュゲートしている二次抗体、すなわちcNPケージドハプテン-抗体コンジュゲート(105)を用いて、単抗原(101)を検出した。cNPケージドハプテン-抗体コンジュゲート(105)の導入後、抗-ハプテン抗体(109)を導入した。いくつかの実施態様では、抗-ハプテン抗体(109)は、一又は複数の酵素にコンジュゲートしている(図3は、3のHRP酵素への結合を図示する。)。
出願人は、式(IE)及び(IF)の特定のケージドハプテンが、式(IC)又は(ID)のケージドハプテンと比較して、安定性を増強させたことを発見した。例えば、図25を参照すると、化合物8、13a及び13bが、化合物14と比較して、予想外に安定性を増強させたことが発見された。化合物8と化合物14との間にあるように、且つあらゆる特定の理論に縛られることを望むものではないが、脱離基と酵素基質との間に-O-アルキル基を添加することは、ケージドハプテンの安定性を増加させると考えられる。実際、化合物14について約65日目に測定した場合、脱ケージ化割合は約20%であったのに対し、化合物8の脱ケージ化割合は10%未満であった。化合物13a及び13bについて、それらはアリール脱離基を含まず、約65日後の脱ケージ化割合はそれぞれ約4.5%及び約2.5%であった。これらの脱ケージ化の量の差異は数桁もないかもしれないが、偽陽性の結果がその後の医療従事者により提供される患者ケアを著しく妨げる可能性がある診断業界では、さらに小さな差異が重要である。
<さらなる実施態様>
[実施態様1]
第一の標的が第二の標的に近接しているかを決定するために試料を分析するための方法であって、
(a)試料を第二の非マスキング酵素-抗体コンジュゲートと接触させ、第二の標的-非マスキング酵素-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(b)試料を第一のケージドハプテン-抗体コンジュゲートと接触させ、第一の標的-ケージドハプテン-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(c)第一の標的-ケージドハプテン-抗体コンジュゲート複合体のケージドハプテンを非マスク化し、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(d)試料を第一の検出試薬と接触させ、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体又は第一の標的を標識すること;及び
(e)標識された第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体又は標識された第一の標的を検出すること
を含み、
第一のケージドハプテン-抗体コンジュゲートが、式(IVC)又は(IVD):
[式中、
「抗体」は抗体であり;
「ハプテン」はハプテンであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり、
各R 1 は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル) 2 基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R 3 は酵素基質であり;
nは1から25の範囲の整数であり;
qは0又は1であり;
sは1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
の構造を有する、方法。
[実施態様2]
第一の検出試薬が(i)第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体複合体を第一の酵素で標識するように第一の酵素にコンジュゲートしている二次抗体であって、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体複合体の非マスク化ハプテンに特異的な二次抗体;及び(ii)第一の酵素の第一の基質を含む、実施態様1に記載の方法。
[実施態様3]
第一の基質が発色性基質又は蛍光性基質である、実施態様2に記載の方法。
[実施態様4]
第一の検出試薬が、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体の非マスク化酵素を複数の第一のレポーター部分で標識するための増幅成分を含む、実施態様1に記載の方法。
[実施態様5]
複数の第一のレポーター部分がハプテンである、実施態様4に記載の方法。
[実施態様6]
第一の検出試薬が、それぞれ第二のレポーター部分にコンジュゲートしている二次抗体であって、複数の第一のレポーター部分に特異的な二次抗体をさらに含む、実施態様5に記載の方法。
[実施態様7]
第二のレポーター部分が増幅酵素又はフルオロフォアからなる群より選択される、実施態様5に記載の方法。
[実施態様8]
第二のレポーター部分が増幅酵素であり、第一の検出試薬が増幅酵素の第一の発色性基質又は蛍光性基質をさらに含む、実施態様7に記載の方法。
[実施態様9]
試料を第二の標的-非マスキング酵素-抗体コンジュゲート複合体の非マスキング酵素に特異的な第二の基質と接触させることと、第二の基質と非マスキング酵素との間の反応の生成物に相当するシグナルを検出することとをさらに含む、実施態様1に記載の方法。
[実施態様10]
第一の標的が第二の標的に近接しているかを決定するために試料を分析するための方法であって、
(a)試料を第二の非マスキング酵素-抗体コンジュゲートと接触させ、第二の標的-非マスキング酵素-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(b)試料を第一のケージドハプテン-抗体コンジュゲートと接触させ、第一の標的-ケージドハプテン-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(c)第一の標的-ケージドハプテン-抗体コンジュゲート複合体のケージドハプテンを非マスク化し、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(d)シグナル増幅工程を実施し、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体を複数のレポーター部分で標識すること;及び
(e)複数のレポーター部分を検出すること
を含み、
第一のケージドハプテン-抗体コンジュゲートが、式(IVC)又は(IVD):
[式中、
「抗体」は抗体であり;
「ハプテン」はハプテンであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり、
各R 1 は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル) 2 基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R 3 は酵素基質であり;
nは1から25の範囲の整数であり;
qは0又は1であり;
sは1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
の構造を有する、方法。
[実施態様11]
複数のレポーター部分がハプテンであり、それぞれ第二のレポーター部分にコンジュゲートしている二次抗体であって、複数の第一のレポーター部分に特異的な二次抗体を導入することをさらに含む、実施態様10に記載の方法。
[実施態様12]
第二のレポーター部分が増幅酵素であり、増幅酵素の発色性基質又は蛍光性基質を導入することをさらに含む、実施態様11に記載の方法。
[実施態様13]
試料中の標的の総量を検出することをさらに含む、実施態様10に記載の方法。
[実施態様14]
第一の標的が第二の標的に近接しているかを決定するために試料を分析するための方法であって、
(a)試料を第二の非マスキング酵素-抗体コンジュゲートと接触させ、第二の標的-非マスキング酵素-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(b)試料を第一のケージドハプテン-抗体コンジュゲートと接触させ、第一の標的-ケージドハプテン-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(c)第二の標的-非マスキング酵素-抗体コンジュゲート複合体の非マスキング酵素が第一の標的-ケージドハプテン-抗体コンジュゲート複合体の酵素基質部分と反応するように、脱ケージ化工程を実施し、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(d)試料を第一の検出試薬と接触させ、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体又は第一の標的を標識すること;及び
(e)標識された第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体又は標識された第一の標的を検出すること
を含み、
第一のケージドハプテン-抗体コンジュゲートが、式(IVC)又は(IVD):
[式中、
「抗体」は抗体であり;
「ハプテン」はハプテンであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり、
各R 1 は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル) 2 基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R 3 は酵素基質であり;
nは1から25の範囲の整数であり;
qは0又は1であり;
sは1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
の構造を有する、方法。
[実施態様15]
脱ケージ化工程が試料の温度を変化させることを含む、実施態様14に記載の方法。
[実施態様16]
脱ケージ化工程が試料のpHを変更することを含む、実施態様14に記載の方法。
[実施態様17]
脱ケージ化工程が一又は複数の洗浄工程を導入することを含む、実施態様14に記載の方法。
[実施態様18]
脱ケージ化工程が非マスキング酵素の補助因子を添加することを含む、実施態様14に記載の方法。
[実施態様19]
試料中の標的の総量を検出することをさらに含む、実施態様14に記載の方法。
[実施態様20]
第一の標的が第二の標的に近接しているかを決定するために試料を分析するための方法であって、
(a)試料を第一の標的に特異的なケージドハプテン-抗体コンジュゲートと接触させ、第一の標的-ケージドハプテン-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(b)試料を第二の標的に特異的な非マスキング酵素-抗体コンジュゲートと接触させ、第二の標的-非マスキング酵素-抗体コンジュゲート複合体を形成することであって、非マスキング酵素-抗体コンジュゲートの非マスキング酵素がケージドハプテン-抗体コンジュゲートの酵素基質部分と反応することができるように選択され、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(c)試料を第一の検出試薬と接触させ、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体又は第一の標的を標識すること;及び
(d)標識された第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体又は標識された第一の標的を検出すること
を含み、
第一のケージドハプテン-抗体コンジュゲートが、式(IVC)又は(IVD):
[式中、
「抗体」は抗体であり;
「ハプテン」はハプテンであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり、
各R 1 は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル) 2 基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R 3 は酵素基質であり;
nは1から25の範囲の整数であり;
qは0又は1であり;
sは1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
の構造を有する、方法。
[実施態様21]
ケージドハプテン-抗体コンジュゲートのケージドハプテン部分が、DCC、ビオチン、ニトロピラゾール、チアゾールスルホンアミド、ベンゾフラザン、及び2-ヒドロキシキノキサリンからなる群より選択されるハプテンに由来する、実施態様20に記載の方法。
[実施態様22]
非マスキング酵素-抗体コンジュゲートの非マスキング酵素が、アルカリホスファターゼ、B-グルコシダーゼ、B-ガラクトシダーゼ、B-グルクロニダーゼ、リパーゼ、スルファターゼ、アミダーゼ、プロテアーゼ、ニトロレダクターゼ、ベータ-ラクタマーゼ&ノイラミニダーゼ、及びウレアーゼからなる群より選択される、実施態様20に記載の方法。
[実施態様23]
第一の検出試薬が(i)第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体複合体を第一の酵素で標識するように第一の酵素にコンジュゲートしている二次抗体であって、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体複合体の非マスク化ハプテンに特異的な二次抗体;及び(ii)第一の発色性基質又は蛍光性基質を含む、実施態様20に記載の方法。
[実施態様24]
第一の酵素が非マスキング酵素とは異なる、実施態様23に記載の方法。
[実施態様25]
第一の酵素がペルオキシダーゼである、実施態様24に記載の方法。
[実施態様26]
第一の発色性基質が、3,3’-ジアミノベンジジン(DAB)、3-アミノ-9-エチルカルバゾール(AEC)、HRP-Silver、及びチラミド-色素原からなる群より選択される、実施態様23に記載の方法。
[実施態様27]
試料を第二の標的-非マスキング酵素-抗体コンジュゲート複合体の非マスキング酵素に特異的な第二の発色性基質又は蛍光性基質と接触させることをさらに含み、第一の発色性基質と第二の発色性基質が異なる、実施態様26に記載の方法。
[実施態様28]
第一の検出試薬が、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体に導入される標識の数を増幅させるための成分を含む、実施態様20に記載の方法。
[実施態様29]
第一の標的がPD-1又はPD-L1の一方であり、第二の標的がPD-1又はPD-L1のもう一方である、実施態様20に記載の方法。
[実施態様30]
第一の標的が第二の標的に近接しているかを決定するために試料を分析するための方法であって、
(a)試料をケージドハプテン-抗体コンジュゲート又は非マスキング酵素-抗体コンジュゲートの一方を含む第一の検出プローブと接触させること;
(b)試料をケージドハプテン-抗体コンジュゲート又は非マスキング酵素-抗体コンジュゲートのもう一方を含む第二の検出プローブと接触させること;
(c)試料を少なくとも第一の検出試薬と接触させ、形成された非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート標的複合体を標識すること;及び
(d)標識された非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート標的複合体からシグナルを検出すること
を含み、
第一のケージドハプテン-抗体コンジュゲートが、式(IVC)又は(IVD):
[式中、
「抗体」は抗体であり;
「ハプテン」はハプテンであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり、
各R 1 は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル) 2 基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R 3 は酵素基質であり;
nは1から25の範囲の整数であり;
qは0又は1であり;
sは1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
の構造を有する、方法。
[実施態様31]
試料中の標的の総量を検出する工程をさらに含む、実施態様30に記載の方法。
[実施態様32]
第一の検出試薬が、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体の非マスク化酵素を複数の第一のレポーター部分で標識するための増幅成分を含む、実施態様30に記載の方法。
[実施態様33]
複数の第一のレポーター部分がハプテンである、実施態様32に記載の方法。
[実施態様34]
第一の検出試薬が、それぞれ第二のレポーター部分にコンジュゲートしている二次抗体であって、複数の第一のレポーター部分に特異的な二次抗体をさらに含む、実施態様33に記載の方法。
[実施態様35]
第二のレポーター部分が増幅酵素又はフルオロフォアからなる群より選択される、実施態様34に記載の方法。
[実施態様36]
第二のレポーター部分が増幅酵素であり、第一の検出試薬が増幅酵素の第一の発色性基質又は蛍光性基質をさらに含む、実施態様34に記載の方法。
[実施態様37]
脱ケージ化工程をさらに含む、実施態様30に記載の方法。
[実施態様38]
式(IE)又は(IF):
[式中、
「ハプテン」はハプテンであり;
Yは、カルボニル反応基、アミン反応基又はチオール反応基から選択され;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Xは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
各R 1 は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O--エチル、-O-n-プロピル、-O--イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル) 2 基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R 3 は酵素基質であり;
qは0又は1であり;
sは0、又は1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
を有するケージドハプテン。
[実施態様39]
酵素基質が、リン酸基、エステル基、アミド基、硫酸基、グリコシド基、尿素基及びニトロ基からなる群より選択される、実施態様38に記載のケージドハプテン。
[実施態様40]
各R 1 基が異なる、実施態様38に記載のケージドハプテン。
[実施態様41]
Xが式(IIIA):
[式中、d及びeは、各々独立して4から18の範囲の整数であり;Qは、結合、O、S又はN(R c )(R d )であり;R a 及びR b は、独立してH、C 1 -C 4 アルキル基、F、Cl又はN( Rc )(R d )であり;R c 及びR d は、独立してCH 3 又はHである。]の構造を有する、実施態様38に記載のケージドハプテン。いくつかの実施態様では、d及びeは、各々独立して1から24の範囲の整数である。
[実施態様42]
tが1であり、Vが-CH 2 -である、実施態様38に記載のケージドハプテン。
[実施態様43]
tが1であり、Vが-O-CH 2 -である、実施態様38に記載のケージドハプテン。
[実施態様44]
tが1であり、Vが-C(R 3 ) 2 [式中、R 3 はC 1 -C 4 アルキル基である。]である、実施態様38に記載のケージドハプテン。
[実施態様45]
tが1であり、Vが-O-C(R 3 ) 2 [式中、R 3 はC 1 -C 4 アルキル基である。]である、実施態様38に記載のケージドハプテン。
[実施態様46]
sが2であり、R 1 が-O-CH 3 -であり、tが1であり、Vが-CH 2 -である、実施態様38に記載のケージドハプテン。
Claims (21)
- 式(IE)又は(IF):
[式中、
「ハプテン」は、ピラゾール類、ニトロフェニル化合物、ベンゾフラザン類、ベンゾフラン類、トリテルペン類、尿素類、チオウレア類、ロテノン及びロテノン誘導体、オキサゾール、チアゾール類、クマリン及びクマリン誘導体、ニトロアリール類、シクロリグナン類、ビオチン、ジゴキシゲニン、フルオレセイン、2-ヒドロキシキノキサリン及びジ-ニトロフェノールから選択されるハプテンであり;
Yは、ヒドラジン、ヒドラジン誘導体、アミン、活性エステル、イソチオシアネート類、イソシアネート類、アシルアジド類、スルホニルクロリド類、アルデヒド類、グリオキサル類、エポキシド類、オキシラン類、カーボネート類、ハロゲン化アリール類、イミドエステル類、無水物、非重合性Michael受容体、ハロアセチル基、ハロゲン化アルキル、マレイミド類、アジリジン類、アクリロイル基、ビニルスルホン類、ベンゾキノン類、フルオロベンゼン基、及びEllman試薬で活性化されたジスルフィド基又はチオール類から選択され;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Xは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
各R1は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O-エチル、-O-n-プロピル、-O-イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R3は酵素基質であり;
qは0又は1であり;
sは0、又は1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
を有するケージドハプテン。 - ハプテンは、7-(ジエチルアミノ)クマリン-3-カルボン酸(DCC)、ビオチン、ニトロピラゾール、チアゾールスルホンアミド、ベンゾフラザン及び2-ヒドロキシキノキサリンからなる群から選択される、請求項1に記載のケージドハプテン。
- 酵素基質が、リン酸基、エステル基、アミド基、硫酸基、グリコシド基、尿素基及びニトロ基からなる群より選択される、請求項1又は2に記載のケージドハプテン。
- 各R1基が異なる、請求項1又は2に記載のケージドハプテン。
- tが1であり、Vが-CH2-であるか、
tが1であり、Vが-O-CH2-であるか、
tが1であり、Vが-C(R3)2[式中、R3はC1-C4アルキル基である。]であるか、又は
tが1であり、Vが-O-C(R3)2[式中、R3はC1-C4アルキル基である。]である、
請求項1又は2に記載のケージドハプテン。 - sが2であり、R1が-O-CH3-であり、tが1であり、Vが-CH2-である、請求項1又は2に記載のケージドハプテン。
- 式(IVC)又は(IVD):
[式中、
「抗体」は抗体であり;
「ハプテン」はハプテンであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり、
各R1は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O-エチル、-O-n-プロピル、-O-イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル)2基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R3は酵素基質であり;
nは1から25の範囲の整数であり;
qは0又は1であり;
sは1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
の構造を有する、ケージドハプテン-抗体コンジュゲート。 - 式(IVC)又は(IVD):
[式中、
「抗体」は抗体であり;
「ハプテン」はハプテンであり;
Aは、1から15個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり;
Wは、5、6、又は7員の置換又は無置換の芳香族又は複素環式基であり;
Zは、結合であるか、又は、1から30個の炭素原子を有し、O、N、若しくはSからなる群より選択される一又は複数のヘテロ原子を有してもよい、分岐又は非分岐状で置換又は無置換の飽和又は不飽和脂肪族基を含む基であり、
各R 1 は、H、F、Cl、Br、I、-O-メチル、-O-エチル、-O-n-プロピル、-O-イソプロピル;-O-n-ブチル、-O-sec-ブチル、又は-O-イソ-ブチル;1から4個の炭素原子を有する-S-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-O-アルキル基;1から4個の炭素原子を有する-N(H)-アルキル基;1から6個の炭素原子を有する-N-(アルキル) 2 基;1から4個の炭素原子を有し、N又はSで置換されていてもよいアルキル基;シアノ基;及びカルボキシル基から独立して選択され;
Vは、結合、1から4個の炭素原子を有する置換若しくは無置換のアルキル基、又は置換若しくは無置換の-O-アルキル基であり;
R 3 は酵素基質であり;
nは1から25の範囲の整数であり;
qは0又は1であり;
sは1から4の範囲の整数であり;且つ
tは0又は1である。]
の構造を有し、
ハプテンは、7-(ジエチルアミノ)クマリン-3-カルボン酸(DCC)、ビオチン、ニトロピラゾール、チアゾールスルホンアミド、ベンゾフラザン及び2-ヒドロキシキノキサリンからなる群から選択される、ケージドハプテン-抗体コンジュゲート。 - 酵素基質が、リン酸基、エステル基、アミド基、硫酸基、グリコシド基、尿素基及びニトロ基からなる群より選択される、請求項9又は10に記載のケージドハプテン-抗体コンジュゲート。
- 抗体が、請求項1から8のいずれか一項に記載のケージドハプテンにコンジュゲートされている、 請求項9に記載のケージドハプテン-抗体コンジュゲート。
- 第一の標的が第二の標的に近接しているかを決定するために試料を分析するための方法であって、
(a)試料を、第一の標的に特異的である、請求項9から12のいずれか一項に記載のケージドハプテン-抗体コンジュゲートと接触させ、第一の標的-ケージドハプテン-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(b)試料を第二の標的に特異的な非マスキング酵素-抗体コンジュゲートと接触させ、第二の標的-非マスキング酵素-抗体コンジュゲート複合体を形成することであって、非マスキング酵素-抗体コンジュゲートの非マスキング酵素がケージドハプテン-抗体コンジュゲートの酵素基質部分と反応することができるように選択され、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体を形成する、試料を第二の標的に特異的な非マスキング酵素-抗体コンジュゲートと接触させ、第二の標的-非マスキング酵素-抗体コンジュゲート複合体を形成すること;
(c)試料を第一の検出試薬と接触させ、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体又は第一の標的を標識すること;及び
(d)標識された第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体又は標識された第一の標的を検出すること
を含む、方法。 - 非マスキング酵素-抗体コンジュゲートの非マスキング酵素が、アルカリホスファターゼ、B-グルコシダーゼ、B-ガラクトシダーゼ、B-グルクロニダーゼ、リパーゼ、スルファターゼ、アミダーゼ、プロテアーゼ、ニトロレダクターゼ、ベータ-ラクタマーゼ&ノイラミニダーゼ、及びウレアーゼからなる群より選択される、請求項13に記載の方法。
- 第一の検出試薬が(i)第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体複合体を第一の酵素で標識するように第一の酵素にコンジュゲートしている二次抗体であって、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体複合体の非マスク化ハプテンに特異的な二次抗体;及び(ii)第一の発色性基質又は蛍光性基質を含む、請求項13に記載の方法。
- 第一の酵素が非マスキング酵素とは異なる、請求項15に記載の方法。
- 第一の酵素がペルオキシダーゼである、請求項16に記載の方法。
- 第一の発色性基質が、3,3’-ジアミノベンジジン(DAB)、3-アミノ-9-エチルカルバゾール(AEC)、HRP-Silver、及びチラミド-色素原からなる群より選択される、請求項15に記載の方法。
- 試料を第二の標的-非マスキング酵素-抗体コンジュゲート複合体の非マスキング酵素に特異的な第二の発色性基質又は蛍光性基質と接触させることをさらに含み、第一の発色性基質と第二の発色性基質が異なる、請求項18に記載の方法。
- 第一の検出試薬が、第一の標的-非マスク化ハプテン-抗体コンジュゲート複合体に導入される標識の数を増幅させるための成分を含む、請求項13に記載の方法。
- 第一の標的がPD-1又はPD-L1の一方であり、第二の標的がPD-1又はPD-L1のもう一方である、請求項13に記載の方法。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201562211590P | 2015-08-28 | 2015-08-28 | |
US201662301489P | 2016-02-29 | 2016-02-29 | |
USPCT/US2016/049153 | 2016-08-26 | ||
PCT/US2016/049153 WO2017040349A1 (en) | 2015-08-28 | 2016-08-26 | Protein proximity assay in formalin fixed paffafin embedded tissue using caged haptens |
PCT/US2017/048687 WO2018039605A1 (en) | 2015-08-28 | 2017-08-25 | Protein proximity assay in formalin fixed paraffin embedded tissue using caged haptens |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019532275A JP2019532275A (ja) | 2019-11-07 |
JP2019532275A5 JP2019532275A5 (ja) | 2020-09-24 |
JP7033122B2 true JP7033122B2 (ja) | 2022-03-09 |
Family
ID=58188142
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018510803A Active JP6880001B2 (ja) | 2015-08-28 | 2016-08-26 | ケージドハプテンを使用するホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるタンパク質近接アッセイ |
JP2019511411A Active JP7033122B2 (ja) | 2015-08-28 | 2017-08-25 | ケージドハプテンを使用するホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるタンパク質近接アッセイ |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018510803A Active JP6880001B2 (ja) | 2015-08-28 | 2016-08-26 | ケージドハプテンを使用するホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるタンパク質近接アッセイ |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US11053266B2 (ja) |
EP (1) | EP3341734B1 (ja) |
JP (2) | JP6880001B2 (ja) |
CN (3) | CN107923915B (ja) |
AU (3) | AU2016316846B2 (ja) |
CA (1) | CA2996798A1 (ja) |
WO (2) | WO2017040349A1 (ja) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6880001B2 (ja) * | 2015-08-28 | 2021-06-02 | ヴェンタナ メディカル システムズ, インク. | ケージドハプテンを使用するホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるタンパク質近接アッセイ |
CN110632040B (zh) * | 2019-05-10 | 2022-03-29 | 长沙理工大学 | 一种血清中前列腺特异性抗原的分析方法 |
CN115552248A (zh) * | 2020-05-07 | 2022-12-30 | 文塔纳医疗系统公司 | 用于评价肿瘤样品中egfr和egfr配体表达的组织化学系统和方法 |
WO2022152777A1 (en) * | 2021-01-15 | 2022-07-21 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Storage stable caged haptens |
CN114994329A (zh) * | 2022-04-28 | 2022-09-02 | 杭州广科安德生物科技有限公司 | 一种检测肿瘤组织中p185蛋白与p95蛋白表达水平的方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003247944A (ja) | 1988-07-08 | 2003-09-05 | Promega Biosciences Inc | 蛍光性ベンゾチアゾール誘導体の製法及び用途 |
WO2015153401A1 (en) | 2014-04-04 | 2015-10-08 | Merck Sharp & Dohme Corp | Phosphate based linkers for intracellular delivery of drug conjugates |
JP2016512324A (ja) | 2013-03-12 | 2016-04-25 | ヴェンタナ メディカル システムズ, インク. | 標的物をinsitu検出するための近接アッセイ |
WO2016083364A1 (en) | 2014-11-25 | 2016-06-02 | Ventana Medical Systems, Inc. | Proximity assays using chemical ligation and hapten transfer |
JP6880001B2 (ja) | 2015-08-28 | 2021-06-02 | ヴェンタナ メディカル システムズ, インク. | ケージドハプテンを使用するホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるタンパク質近接アッセイ |
Family Cites Families (29)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2730523A (en) * | 1952-08-16 | 1956-01-10 | Eastman Kodak Co | 5-nitrothiazoleazo-n-fluoroalkyl-aniline compounds |
US5196306A (en) | 1989-03-29 | 1993-03-23 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Method for the detection or quantitation of an analyte using an analyte dependent enzyme activation system |
US5180828A (en) * | 1990-02-09 | 1993-01-19 | Molecular Devices Corporation | Chromophoric reagents for incorporation of biotin or other haptens into macromolecules |
US5595707A (en) | 1990-03-02 | 1997-01-21 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automated biological reaction apparatus |
GB9517060D0 (en) * | 1995-08-17 | 1995-10-25 | Ciba Geigy Ag | Acylated oligopeptide derivatives |
US20030235877A1 (en) * | 1996-04-30 | 2003-12-25 | La Region Wallone | Conjugates of haptens to beta-lactam derivatives and their use for detecting and/or quantifying haptens in solution and device for implementation thereof |
US6582962B1 (en) | 1998-02-27 | 2003-06-24 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automated molecular pathology apparatus having independent slide heaters |
US20030211630A1 (en) | 1998-02-27 | 2003-11-13 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automated molecular pathology apparatus having independent slide heaters |
US6296809B1 (en) | 1998-02-27 | 2001-10-02 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automated molecular pathology apparatus having independent slide heaters |
US20060040319A1 (en) * | 2000-01-14 | 2006-02-23 | Tom Muir | Multiple sensor-containing active modified polypeptides, preparation and uses thereof |
CA2456590A1 (en) * | 2001-08-07 | 2003-02-20 | Merck & Co., Inc. | Biological assay detection method |
CA2824093C (en) * | 2004-03-23 | 2016-10-25 | Complex Biosystems Gmbh | Polymeric prodrug with a self-immolative linker |
DK1877101T3 (en) | 2005-04-28 | 2017-01-09 | Ventana Med Syst Inc | ENZYMES CONJUGATED TO ANTIBODIES THROUGH A PEG hetero LINKER |
JP5199880B2 (ja) | 2005-11-23 | 2013-05-15 | ベンタナ・メデイカル・システムズ・インコーポレーテツド | 分子コンジュゲート |
ES2465465T3 (es) | 2006-11-01 | 2014-06-05 | Ventana Medical Systems, Inc. | Haptenos, conjugados de haptenos, composiciones de los mismos y método para su preparación y uso |
EP2109689A4 (en) * | 2007-02-07 | 2010-02-10 | Perscitus Biosciences Llc | DETECTION OF THE PROXIMITY OF A MOLECULE |
CA2687178C (en) | 2007-05-23 | 2014-02-04 | Ventana Medical Systems, Inc. | Polymeric carriers for immunohistochemistry and in situ hybridization |
US20100159446A1 (en) * | 2007-07-27 | 2010-06-24 | Haff Lawrence A | Detection Assays and Use Thereof |
AU2009282760B2 (en) | 2008-08-22 | 2013-08-15 | Ventana Medical Systems, Inc. | Method for chromogenic detection of two or more target molecules in a single sample |
CN104020554B (zh) | 2009-10-19 | 2017-08-08 | 文塔纳医疗系统公司 | 成像系统和技术 |
JP5685601B2 (ja) | 2009-11-27 | 2015-03-18 | エコール・ポリテクニーク・フェデラル・ドゥ・ローザンヌ (ウ・ペ・エフ・エル)Ecole Polytechnique Federalede Lausanne (Epfl) | ナノ流体バイオセンサ及び溶液中における生体分子の相互作用の迅速測定のためのその活用及び方法 |
KR101554795B1 (ko) | 2010-12-30 | 2015-09-21 | 벤타나 메디컬 시스템즈, 인코포레이티드 | 피리미딘 유사체를 이용하는 색원체의 증강된 침적 |
US8852599B2 (en) * | 2011-05-26 | 2014-10-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Immunoconjugates, compositions for making them, and methods of making and use |
AU2012306572B2 (en) | 2011-09-09 | 2015-04-23 | Ventana Medical Systems, Inc. | Imaging systems, cassettes, and methods of using the same |
US10041950B2 (en) | 2012-03-27 | 2018-08-07 | Ventana Medical Systems, Inc. | Signaling conjugates and methods of use |
CN103513039B (zh) * | 2013-07-10 | 2015-12-23 | 广州美格生物科技有限公司 | 一种利用定向肽库检测蛋白质与其他分子相互作用的方法 |
US10241115B2 (en) * | 2013-12-10 | 2019-03-26 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Immunohistochemical proximity assay for PD-1 positive cells and PD-ligand positive cells in tumor tissue |
WO2015124703A1 (en) * | 2014-02-24 | 2015-08-27 | Ventana Medical Systems, Inc. | Quinone methide analog signal amplification |
EP3037820A1 (en) * | 2014-12-27 | 2016-06-29 | Miltenyi Biotec GmbH | Cell detection methods and reagents having a releasable labelling moiety |
-
2016
- 2016-08-26 JP JP2018510803A patent/JP6880001B2/ja active Active
- 2016-08-26 EP EP16842723.5A patent/EP3341734B1/en active Active
- 2016-08-26 CN CN201680049897.4A patent/CN107923915B/zh active Active
- 2016-08-26 WO PCT/US2016/049153 patent/WO2017040349A1/en unknown
- 2016-08-26 CA CA2996798A patent/CA2996798A1/en active Pending
- 2016-08-26 AU AU2016316846A patent/AU2016316846B2/en active Active
-
2017
- 2017-08-25 WO PCT/US2017/048687 patent/WO2018039605A1/en unknown
- 2017-08-25 CN CN201780060757.1A patent/CN109791144B/zh active Active
- 2017-08-25 CN CN202310341013.4A patent/CN116338167A/zh active Pending
- 2017-08-25 JP JP2019511411A patent/JP7033122B2/ja active Active
-
2018
- 2018-02-28 US US15/907,479 patent/US11053266B2/en active Active
-
2019
- 2019-02-25 US US16/284,098 patent/US11345719B2/en active Active
-
2021
- 2021-01-15 US US17/149,911 patent/US20210221833A1/en active Pending
- 2021-06-11 US US17/345,072 patent/US20210309680A1/en active Pending
- 2021-08-19 AU AU2021218128A patent/AU2021218128B2/en active Active
- 2021-10-16 US US17/503,303 patent/US20220089622A1/en active Pending
-
2023
- 2023-03-17 AU AU2023201682A patent/AU2023201682B2/en active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003247944A (ja) | 1988-07-08 | 2003-09-05 | Promega Biosciences Inc | 蛍光性ベンゾチアゾール誘導体の製法及び用途 |
JP2016512324A (ja) | 2013-03-12 | 2016-04-25 | ヴェンタナ メディカル システムズ, インク. | 標的物をinsitu検出するための近接アッセイ |
WO2015153401A1 (en) | 2014-04-04 | 2015-10-08 | Merck Sharp & Dohme Corp | Phosphate based linkers for intracellular delivery of drug conjugates |
WO2016083364A1 (en) | 2014-11-25 | 2016-06-02 | Ventana Medical Systems, Inc. | Proximity assays using chemical ligation and hapten transfer |
JP6880001B2 (ja) | 2015-08-28 | 2021-06-02 | ヴェンタナ メディカル システムズ, インク. | ケージドハプテンを使用するホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるタンパク質近接アッセイ |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN116338167A (zh) | 2023-06-27 |
CN109791144A (zh) | 2019-05-21 |
US20210221833A1 (en) | 2021-07-22 |
US11345719B2 (en) | 2022-05-31 |
JP2018528425A (ja) | 2018-09-27 |
US11053266B2 (en) | 2021-07-06 |
AU2021218128B2 (en) | 2022-12-22 |
US20220089622A1 (en) | 2022-03-24 |
CN109791144B (zh) | 2023-04-18 |
WO2018039605A1 (en) | 2018-03-01 |
JP2019532275A (ja) | 2019-11-07 |
US20210309680A1 (en) | 2021-10-07 |
US20190233447A1 (en) | 2019-08-01 |
CN107923915A (zh) | 2018-04-17 |
EP3341734B1 (en) | 2024-08-07 |
JP6880001B2 (ja) | 2021-06-02 |
AU2021218128A1 (en) | 2021-09-09 |
US20180186821A1 (en) | 2018-07-05 |
EP3341734A1 (en) | 2018-07-04 |
CA2996798A1 (en) | 2017-03-09 |
AU2023201682A1 (en) | 2023-04-13 |
CN107923915B (zh) | 2021-05-04 |
AU2016316846A1 (en) | 2018-02-22 |
EP3341734A4 (en) | 2019-02-06 |
WO2017040349A1 (en) | 2017-03-09 |
AU2023201682B2 (en) | 2023-12-07 |
AU2016316846B2 (en) | 2021-07-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7394895B2 (ja) | マルチ色素キノンメチド及びチラミドコンジュゲートによる発色性ihc及びish染色のための新規の色 | |
JP7033122B2 (ja) | ケージドハプテンを使用するホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるタンパク質近接アッセイ | |
JP2019532012A (ja) | Ihc及びishアッセイにおけるシグナル増幅のためのクリックケミストリーの応用 | |
JP2023538753A (ja) | 検出可能な部分を含むコンジュゲート | |
US20230151361A1 (en) | Peptide nucleic acid conjugates | |
US20240002428A1 (en) | Storage stable caged haptens | |
EP3504549A1 (en) | Protein proximity assay in formalin fixed paraffin embedded tissue using caged haptens |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200811 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200811 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20210726 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210803 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211027 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220201 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220225 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7033122 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |