JP7006839B2 - 流路デバイスおよびそれを用いた試験装置、試験方法 - Google Patents
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Description
本発明は、流路デバイスおよびそれを用いた試験装置、試験方法に関する。
一般に、抗菌薬の有効性検査である薬剤感受性試験では、ウェルプレートを用いて微量液体希釈法により行われる（例えば、特許文献１参照）。例示的な微量液体希釈法では、異なる抗菌薬について２倍ずつの薬剤濃度希釈系列を準備し、１８時間程度の菌培養時間後、どの濃度までの薬剤中で細菌が増殖して白濁したかを評価し、抗菌薬の発育阻止濃度(有効薬剤濃度)を検査する。
一方、近年マクロに見た細菌の増殖ではなく、細菌一つ一つの分裂や形態変化を観察することによって、数時間で薬剤感受性検査を行う手法が提案されている。この手法では、１μｍ程度の細菌観察のため顕微鏡を用いるので、観察領域の上下方向の平行性、液高さ、複数ポイント同時観察性を有する集積型のマイクロ流路が用いられることがある。
しかし、従来のように集積型のマイクロ流路を用いた場合には、集積型のマイクロ流路への薬剤固定化技術が課題であり、菌液注入後、乾燥薬剤が溶出、拡散する速度の安定性、薬剤力価の保持に課題がある。
形態観察法では、検査結果となる細菌の形態変化が生じないうちに観察が終了することが望ましい。例えば、１～３時間程度で検査結果となる細菌の形態変化が生じる場合、観察時間スパンは３０分程度が望ましい。
しかし、市販のウェルプレートを用いて細菌の形態観察を行う場合、ウェルプレートに注入された菌液の体積（液体高さ）に応じて顕微鏡の焦点距離が変化するため、各ウェル一つ一つで焦点位置を変化させる必要が生じうる。このとき、例えば、位相差顕微鏡による観察を行うとき、対物レンズと位相差コンデンサの２つの部品を上下両方向からフォーカス合わせする必要があり、時間がかかる。
例えば、９６ウェルプレート（２４薬剤×４濃度）の場合、観察点が多く、観察を３０分程度で行うのも困難になる場合がある。
形態観察法では、検査結果となる細菌の形態変化が生じないうちに観察が終了することが望ましい。例えば、１～３時間程度で検査結果となる細菌の形態変化が生じる場合、観察時間スパンは３０分程度が望ましい。
しかし、市販のウェルプレートを用いて細菌の形態観察を行う場合、ウェルプレートに注入された菌液の体積（液体高さ）に応じて顕微鏡の焦点距離が変化するため、各ウェル一つ一つで焦点位置を変化させる必要が生じうる。このとき、例えば、位相差顕微鏡による観察を行うとき、対物レンズと位相差コンデンサの２つの部品を上下両方向からフォーカス合わせする必要があり、時間がかかる。
例えば、９６ウェルプレート（２４薬剤×４濃度）の場合、観察点が多く、観察を３０分程度で行うのも困難になる場合がある。
そこで、本発明の目的は、薬剤感受性試験を迅速に行うことを可能にする流路デバイスおよびそれを用いた試験装置、試験方法を提供することにある。
この明細書には、２０１９年４月２日に出願された日本国特許出願・特願２０１９－７０８３６の全ての内容が含まれる。
本発明の第１の態様は、ウェルを有するウェルプレート内に存在する検査液を観察するための流路デバイスであって、主面を有する板状の本体部と、前記本体部に設けられ、前記本体部の前記主面に対して垂直な方向に沿って延び、前記ウェル内に挿入するための挿入体と、を備え、前記挿入体は、前記ウェル内の検査液を吸い上げ可能な寸法を有する細孔を備え、前記本体部は、前記細孔に連通し、前記本体部の主面方向に沿って延びる観察流路と、を備える流路デバイスに関する。
本発明の第１の態様は、ウェルを有するウェルプレート内に存在する検査液を観察するための流路デバイスであって、主面を有する板状の本体部と、前記本体部に設けられ、前記本体部の前記主面に対して垂直な方向に沿って延び、前記ウェル内に挿入するための挿入体と、を備え、前記挿入体は、前記ウェル内の検査液を吸い上げ可能な寸法を有する細孔を備え、前記本体部は、前記細孔に連通し、前記本体部の主面方向に沿って延びる観察流路と、を備える流路デバイスに関する。
本発明の第２の態様は、光透過性を有するテーブルと、前記テーブルの下方に配置された光源と、前記テーブル上に位置決めされる試験容器の上方に配置された顕微鏡と、を備え、前記試験容器は、ウェルプレートと、前記ウェルプレートの上に配置された上記の流路デバイスとを備え、前記テーブルは、Ｘ軸方向およびＹ軸方向の少なくとも一方に移動自在とされる試験装置に関する。
本発明の第３の態様は、ウェルを有するウェルプレート内に存在する検査液を観察するための流路デバイスであって、主面を有する板状の本体部と、前記本体部に設けられ、前記ウェル内に挿入するための挿入体と、を備え、前記挿入体は、前記ウェル内の検査液を吸い上げ可能な寸法を有する細孔を備え、前記本体部は、主面方向に沿って延びる観察流路を備え、前記観察流路は前記細孔に連通する、流路デバイスを準備し、前記ウェル内で検査液を作る工程と、前記ウェルプレートの上に前記流路デバイスを重ね合わせ、前記挿入体を前記検査液中に没入する工程と、少なくとも前記観察流路に前記検査液を移動させる工程と、前記観察流路を顕微鏡で観察する工程と、を備える試験方法に関する。
本発明の第１の態様によれば、薬剤感受性試験を迅速に行うことを可能にする流路デバイスを提供できる。
本発明の第２の態様および第３の態様によれば、第１の態様の流路デバイスを用いることにより、市販のウェルプレートを用いた場合でも、薬剤感受性試験を迅速に行うことができる。
［薬剤感受性試験装置の構成］
以下、図面を参照して本発明の一実施形態について説明する。
図１は、薬剤感受性試験装置の概略を示す側面図、図２は、同じく正面図である。
符号１は、薬剤感受性試験装置のテーブルを示す。
このテーブル１は光透過性を有する素材で形成されている。テーブル１には、市販のウェルプレート２の上に、本実施形態の流路デバイス１０を重ね合わせた試験容器２０が、位置決めされた状態で載置されている。試験容器２０の上方には、光学顕微鏡７の対物レンズ７１が配置される。対物レンズ７１の下方の、薬剤感受性試験装置の基台４０の上面には、光源８が配置される。テーブル１は、平面上の直交座標系における、図１および図２のＸ軸方向およびＹ軸方向に移動自在である。
テーブル１の駆動機構は、テーブル１の下に設けられている。駆動機構は、テーブル１の下面に固定されたＸ軸方向移動手段５０と、基台４０の上面の上面に固定されたＹ軸方向移動手段６０とを備え、Ｙ軸方向移動手段６０の上にＸ軸方向移動手段５０が固定されている。Ｙ軸方向移動手段６０は、図２に示すように、Ｙ軸方向に延びる一対の第１ボールねじ６１と、第１ボールねじ６１の回転に応じてスライドする第１ナット６２と、第１ボールねじ６１を支持する第１支持体６３と、第１支持体６３に固定され第１ボールねじ６１を回転させる第１ステッピングモータ６４とを備えている。そして、第１支持体６３が、基台４０の上面に固定されている。Ｘ軸方向移動手段５０は、図１に示すように、Ｘ軸方向に延びる一対の第２ボールねじ５１と、第２ボールねじ５１の回転に応じてスライドする第２ナット５２と、第２ボールねじ５１を支持する第２支持体５３と、第２支持体５３に固定され第２ボールねじ５１を回転させる第２ステッピングモータ５４とを備えている。そして、第１ナット６２の上に、第２支持体５３が固定されている。
以下、図面を参照して本発明の一実施形態について説明する。
図１は、薬剤感受性試験装置の概略を示す側面図、図２は、同じく正面図である。
符号１は、薬剤感受性試験装置のテーブルを示す。
このテーブル１は光透過性を有する素材で形成されている。テーブル１には、市販のウェルプレート２の上に、本実施形態の流路デバイス１０を重ね合わせた試験容器２０が、位置決めされた状態で載置されている。試験容器２０の上方には、光学顕微鏡７の対物レンズ７１が配置される。対物レンズ７１の下方の、薬剤感受性試験装置の基台４０の上面には、光源８が配置される。テーブル１は、平面上の直交座標系における、図１および図２のＸ軸方向およびＹ軸方向に移動自在である。
テーブル１の駆動機構は、テーブル１の下に設けられている。駆動機構は、テーブル１の下面に固定されたＸ軸方向移動手段５０と、基台４０の上面の上面に固定されたＹ軸方向移動手段６０とを備え、Ｙ軸方向移動手段６０の上にＸ軸方向移動手段５０が固定されている。Ｙ軸方向移動手段６０は、図２に示すように、Ｙ軸方向に延びる一対の第１ボールねじ６１と、第１ボールねじ６１の回転に応じてスライドする第１ナット６２と、第１ボールねじ６１を支持する第１支持体６３と、第１支持体６３に固定され第１ボールねじ６１を回転させる第１ステッピングモータ６４とを備えている。そして、第１支持体６３が、基台４０の上面に固定されている。Ｘ軸方向移動手段５０は、図１に示すように、Ｘ軸方向に延びる一対の第２ボールねじ５１と、第２ボールねじ５１の回転に応じてスライドする第２ナット５２と、第２ボールねじ５１を支持する第２支持体５３と、第２支持体５３に固定され第２ボールねじ５１を回転させる第２ステッピングモータ５４とを備えている。そして、第１ナット６２の上に、第２支持体５３が固定されている。
［試験容器の構成］
図３は、試験容器２０の平面図、図４は、同じく側面図である。図３では、マイクロ流路１７、ウェル２１を部分的に省略して図示している。図４では、挿入体１４、フランジ１５、ウェル２１を部分的に省略して図示している。
試験容器２０は、一般に市販されるウェルプレート２の上に、本実施形態の流路デバイス１０を重ね合わせて構成されている。ウェルプレート２は、例えば９６ウェルプレート（２４薬剤×４濃度）であれば、縦横に８×１２の、９６個のウェル２１を有し、すべてのウェル２１において、細菌と抗菌薬とが混合されている。その混合液は、数時間を経て、検査対象の検査液となる。
図３は、試験容器２０の平面図、図４は、同じく側面図である。図３では、マイクロ流路１７、ウェル２１を部分的に省略して図示している。図４では、挿入体１４、フランジ１５、ウェル２１を部分的に省略して図示している。
試験容器２０は、一般に市販されるウェルプレート２の上に、本実施形態の流路デバイス１０を重ね合わせて構成されている。ウェルプレート２は、例えば９６ウェルプレート（２４薬剤×４濃度）であれば、縦横に８×１２の、９６個のウェル２１を有し、すべてのウェル２１において、細菌と抗菌薬とが混合されている。その混合液は、数時間を経て、検査対象の検査液となる。
［流路デバイスの構成］
つぎに、流路デバイス１０を説明する。
図５は、流路デバイス１０を説明するための概略を示す断面図、図６は、同じく平面図である。図５では、左側のウェル２１から連通する１つの流路に沿って断面をとっており、右側のウェル２１から連通する流路では、マイクロ流路１７の途中までしか図示していない。本実施形態では、試験を行うに際し、４つのウェル２１内の検査液の変化を、顕微鏡７（図１参照）により同時に観察が可能である。
流路デバイス１０は、光透過性を有する、厚さtが１ｍｍほどの、第１の板材１１および第２の板材１２を、上下に重ね合わせた本体部１３と、本体部１３に設けられた、直径Ｄ１が２ｍｍほどの挿入体１４とを備える。第１の板材１１の下面から挿入体１４の先端面までの長さＨは９ｍｍほどであり、流路デバイス１０をウェルプレート２の上に重ね合わせたとき、挿入体１４の先端が、ウェル２１内の検査液の中に没入するとともに、ウェルの２１底に着かないようになっている。なお、本実施形態では本体部１３は矢印Ａ方向と直交する上下面が主面となる。
符号１５は、直径Ｄがウェル２１の開口内径（７ｍｍ）よりも少し小さい５ｍｍほどのフランジである。フランジ１５は、流路デバイス１０をウェルプレート２の上に重ね合わせたとき、ウェル２１内に挿入され、流路デバイス１０とウェルプレート２との相対的な大きなずれを防止するものとなっている。
つぎに、流路デバイス１０を説明する。
図５は、流路デバイス１０を説明するための概略を示す断面図、図６は、同じく平面図である。図５では、左側のウェル２１から連通する１つの流路に沿って断面をとっており、右側のウェル２１から連通する流路では、マイクロ流路１７の途中までしか図示していない。本実施形態では、試験を行うに際し、４つのウェル２１内の検査液の変化を、顕微鏡７（図１参照）により同時に観察が可能である。
流路デバイス１０は、光透過性を有する、厚さtが１ｍｍほどの、第１の板材１１および第２の板材１２を、上下に重ね合わせた本体部１３と、本体部１３に設けられた、直径Ｄ１が２ｍｍほどの挿入体１４とを備える。第１の板材１１の下面から挿入体１４の先端面までの長さＨは９ｍｍほどであり、流路デバイス１０をウェルプレート２の上に重ね合わせたとき、挿入体１４の先端が、ウェル２１内の検査液の中に没入するとともに、ウェルの２１底に着かないようになっている。なお、本実施形態では本体部１３は矢印Ａ方向と直交する上下面が主面となる。
符号１５は、直径Ｄがウェル２１の開口内径（７ｍｍ）よりも少し小さい５ｍｍほどのフランジである。フランジ１５は、流路デバイス１０をウェルプレート２の上に重ね合わせたとき、ウェル２１内に挿入され、流路デバイス１０とウェルプレート２との相対的な大きなずれを防止するものとなっている。
挿入体１４とフランジ１５とは、図示は省略したが、ウェル２１の数と配置とに対応して設けられる。ウェルプレート２は、市販の９６ウェルプレート（２４薬剤×４濃度）であり、本体部１３の第１の板材１１には９６個の挿入体１４とフランジ１５とが設けられている。
すべての挿入体１４は、ウェル２１内の検査液を毛細管現象により吸い上げる細孔１６を備えている。この細孔１６は、フランジ１５と、第１の板材１１とを貫通している。細孔１６には、マイクロ流路１７が連通する。マイクロ流路１７は、第１の板材１１における第２の板材１２との接合面（第１の板材１１と第２の板材１２との界面）に形成されている。マイクロ流路１７は垂直に延びる排気孔１８を介して、流路デバイス１０の外部に連通する開口１９と連通している。マイクロ流路１７は、図６に示すように、本体部１３の主面方向に沿って延びて設けられ、観察流路１７ａと導入流路１７ｂとにより構成される。導入流路１７ｂにより細孔１６と観察流路１７ａとが繋がれる。そして、観察流路１７ａに排気孔１８が繋がれる。
本実施形態では、図５の矢印Ａ方向に、流路デバイス１０を寸法Ｈ１だけ下げて、ウェルプレート２の上に、流路デバイス１０を重ね合わせたとき、挿入体１４とフランジ１５とが、ウェル２１内に挿入され、挿入体１４が、ウェル２１の検査液の中に没入する。そして、挿入体１４の細孔１６を通して、毛細管現象により吸い上げた検査液が、排気孔１８に至るほどに吸い上げられ、検査液がマイクロ流路１７に満たされる。
したがって、市販のウェルプレート２を用いて細菌の形態観察を行う場合、ウェルプレート２の９６個のウェル２１内の検査液の体積（液体高さ）にバラつきがあったとしても、マイクロ流路１７内の検査液を観察することになるため、顕微鏡７の焦点距離が変化することはない。各ウェル２１一つ一つで焦点位置を変化させる必要がなく、例えば、位相差顕微鏡による観察を行うとき、対物レンズ、位相差コンデンサという上下両方向からの焦点合わせの必要がなくなり、焦点合わせに時間がかかることがない。
したがって、市販のウェルプレート２を用いて細菌の形態観察を行う場合、ウェルプレート２の９６個のウェル２１内の検査液の体積（液体高さ）にバラつきがあったとしても、マイクロ流路１７内の検査液を観察することになるため、顕微鏡７の焦点距離が変化することはない。各ウェル２１一つ一つで焦点位置を変化させる必要がなく、例えば、位相差顕微鏡による観察を行うとき、対物レンズ、位相差コンデンサという上下両方向からの焦点合わせの必要がなくなり、焦点合わせに時間がかかることがない。
図６は、４つのウェル２１内の検査液の変化を、顕微鏡７により同時に観察が可能な状態を示す。本実施形態では、ウェル２１の数に対応し、９６個の挿入体１４を備えるが、図６では、４つの挿入体１４についてのみ説明し、そのほかの挿入体１４については構成が同じであるので説明を省略する。
各挿入体１４は、それぞれ細孔１６を有し、各細孔１６に連通する４つのマイクロ流路１７の観察流路１７ａは、略水平面Ｓ内に並列に接近してまとめて配置される。観察流路１７ａがまとめられた略水平面Ｓは、検査液の観察部３０とされている。
観察部３０は、４つのマイクロ流路１７に導かれた検査液の変化を、顕微鏡７により同時に観察できるように、狭い範囲とされている。
流路デバイス１０は、各挿入体１４の先端から観察部３０に至るまでの流路長が、すべての挿入体１４において、等しく設定されている。
本実施形態では、４つのマイクロ流路１７に導かれた検査液の変化を、顕微鏡７により同時に観察できるようになっている。したがって、複数（本実施形態では４つ）の観察ポイントを顕微鏡７の１つの視野内に収めることができ、撮像回数を減らすことができる。また、複数の観察ポイントを顕微鏡７の１つの視野内に収めることにより、複数の観察ポイントの比較を容易にすることができる。
観察部３０は、４つのマイクロ流路１７に導かれた検査液の変化を、顕微鏡７により同時に観察できるように、狭い範囲とされている。
流路デバイス１０は、各挿入体１４の先端から観察部３０に至るまでの流路長が、すべての挿入体１４において、等しく設定されている。
本実施形態では、４つのマイクロ流路１７に導かれた検査液の変化を、顕微鏡７により同時に観察できるようになっている。したがって、複数（本実施形態では４つ）の観察ポイントを顕微鏡７の１つの視野内に収めることができ、撮像回数を減らすことができる。また、複数の観察ポイントを顕微鏡７の１つの視野内に収めることにより、複数の観察ポイントの比較を容易にすることができる。
細孔１６およびマイクロ流路１７の内径は、通常、１μｍ～１ｍｍの範囲内に設定される。この内径は、検査液の粘度などにより決められる。なかでも、観察流路１７ａの内径は、細菌の形態を観察しやすい観点から、５０μｍ以下であることが好ましい。観察流路１７ａは、細菌の形態を観察しやすい観点から、直線状であることが好ましい。観察部３０の長さＬは３ｍｍほどである。
従来のように集積型のマイクロ流路を用いた場合と比較し、薬剤拡散による濃度変化を無視することができる。市販の感受性試験用ウェルプレート２を用いて迅速検査を行うことができ、コスト面で有利であり、薬剤濃度などの信頼性を損なうことがない。
［試験方法］
つぎに、試験方法について説明する。
まず、ウェルプレート２のウェル２１において、細菌と抗菌薬とを混合し、その後、数時間を経て、その混合液を検査対象の検査液にする。
次いで、ウェルプレート２の上に流路デバイス１０を重ね合わせて、その流路デバイス１０の挿入体１４を検査液に没入させる。
次に、毛細管現象を利用して、検査液を、挿入体１４の細孔１６を通して、排気孔１８に至るほどに吸い上げ、検査液でマイクロ流路１７を満たす。
そして、ウェルプレート２の上に流路デバイス１０を重ね合わせた試験容器２０を、薬剤感受性試験装置のテーブル１の上に載置する。
次いで、第１の観察部３０が顕微鏡７の下方に位置するよう、テーブル１の駆動機構によりテーブル１を移動させ、顕微鏡７により、第１の観察部３０を撮像し、第１の観察部３０のマイクロ流路１７内の細菌を形態観察する。
その後、テーブル１を再度移動させ、同様にして、第２の観察部３０のマイクロ流路１７内の細菌を形態観察する。これを順次繰り返し、複数の観察部３０において、細菌を形態観察する。
つぎに、試験方法について説明する。
まず、ウェルプレート２のウェル２１において、細菌と抗菌薬とを混合し、その後、数時間を経て、その混合液を検査対象の検査液にする。
次いで、ウェルプレート２の上に流路デバイス１０を重ね合わせて、その流路デバイス１０の挿入体１４を検査液に没入させる。
次に、毛細管現象を利用して、検査液を、挿入体１４の細孔１６を通して、排気孔１８に至るほどに吸い上げ、検査液でマイクロ流路１７を満たす。
そして、ウェルプレート２の上に流路デバイス１０を重ね合わせた試験容器２０を、薬剤感受性試験装置のテーブル１の上に載置する。
次いで、第１の観察部３０が顕微鏡７の下方に位置するよう、テーブル１の駆動機構によりテーブル１を移動させ、顕微鏡７により、第１の観察部３０を撮像し、第１の観察部３０のマイクロ流路１７内の細菌を形態観察する。
その後、テーブル１を再度移動させ、同様にして、第２の観察部３０のマイクロ流路１７内の細菌を形態観察する。これを順次繰り返し、複数の観察部３０において、細菌を形態観察する。
［効果］
以上のように、本実施形態の流路デバイス１０は、市販のウェルプレート２の上に重ね合わせて使用できるため、形態観察のコストを低減することができる。
以上のように、本実施形態の流路デバイス１０は、市販のウェルプレート２の上に重ね合わせて使用できるため、形態観察のコストを低減することができる。
また、本実施形態の流路デバイス１０は、ウェルプレート２の上に重ね合わせることにより、ウェル２１内の検査液を、流路デバイス１０のマイクロ流路１７における観察部３０まで移動させ、観察部３０内の細菌を顕微鏡７により形態観察することができる。そのため、ウェル２１内の検査液を顕微鏡７により形態観察するのと異なり、検査液の体積（検査液面の高さ）のバラつきおよび検査液面の曲率という、焦点合わせに時間を要する要因がなく、細菌の形態観察に要する時間を短縮することができる。
また、本実施形態の流路デバイス１０は、観察部３０が略水平面Ｓにあるため、顕微鏡７で観察しやすくなっている。
さらに、マイクロ流路１７が第１の板材１１における第２の板材１２との接合面に形成されていることから、すべての観察部３０は、同じ高さ位置にある。そのため、顕微鏡７の焦点合わせの時間を短縮することができる。
さらに、マイクロ流路１７が第１の板材１１における第２の板材１２との接合面に形成されていることから、すべての観察部３０は、同じ高さ位置にある。そのため、顕微鏡７の焦点合わせの時間を短縮することができる。
特に、本実施形態の流路デバイス１０は、４つのマイクロ流路１７が並列に接近してまとめて配置される領域を観察部３０としているため、４つの観察ポイントを顕微鏡７の１つの視野内に収めることができ、撮像回数を減らすことができる。
本実施形態の流路デバイス１０は、マイクロ流路１７内で細菌と抗菌薬などの薬剤とを混合するものではないため、薬剤拡散による検査液の濃度変化がなく、検査の信頼性に優れている。
［他の実施形態］
上述した実施形態では、４つのマイクロ流路１７をまとめて配置して観察部３０としたが、まとめるマイクロ流路１７の数は、２つでも３つでもよいし、５つ以上でもよい。
ただし、上述した実施形態のように、まとめるマイクロ流路１７は、４個のウェル２１からとし、それら４個のウェルの中央部に、観察部３０を配置することが好ましい。その理由は、挿入体１４の先端から観察部３０までの流路長をすべての流路において等しくしやすく、検査液が観察部３０まで移動する時間を等しくできるからである。
一方、複数の観察ポイントを近接させることなく、各観察ポイントを離して配置してもよい。
上述した実施形態では、４つのマイクロ流路１７をまとめて配置して観察部３０としたが、まとめるマイクロ流路１７の数は、２つでも３つでもよいし、５つ以上でもよい。
ただし、上述した実施形態のように、まとめるマイクロ流路１７は、４個のウェル２１からとし、それら４個のウェルの中央部に、観察部３０を配置することが好ましい。その理由は、挿入体１４の先端から観察部３０までの流路長をすべての流路において等しくしやすく、検査液が観察部３０まで移動する時間を等しくできるからである。
一方、複数の観察ポイントを近接させることなく、各観察ポイントを離して配置してもよい。
また、上述した実施形態では、毛細管現象を利用して、検査液を観察部３０まで移動させたが、他の手段を利用してもよい。例えば、排気孔１８の開口１９がある第１空間と、ウェルプレート２の検査液の液面がある第２空間とに仕切り、第１空間の気圧を低くし、排気孔１８の開口１９に負圧をかけることにより、検査液を吸い上げるようにして観察部３０まで移動させてもよい。または、第２空間の気圧を高くし、検査液の液面を加圧することにより、検査液を押し出すようにして観察部３０まで移動させてもよい。または、その両方（第１空間の気圧を低くするとともに、第２空間の気圧を高くする）を利用してもよい。
なお、上述した実施形態は、あくまでも本発明の態様の例示であり、本発明の主旨を逸脱しない範囲において任意に変形および応用が可能である。
［態様］
上述した実施形態は、以下の態様の具体例であることが当業者により理解される。
上述した実施形態は、以下の態様の具体例であることが当業者により理解される。
（第１項）第１の態様に係る流路デバイス１０は、ウェル２１を有するウェルプレート２内に存在する検査液を観察するための流路デバイス１０であって、主面を有する板状の本体部１３と、前記本体部１３に設けられ、前記本体部１３の前記主面に対して垂直な方向に沿って延び、前記ウェル２１内に挿入するための挿入体１４と、を備え、前記挿入体１４は、前記ウェル２１内の検査液を吸い上げ可能な寸法を有する細孔１６を備え、前記本体部１３は、前記細孔１６に連通し、前記本体部１３の主面方向に沿って延びる観察流路１７ａと、を備えてよい。
第１項に記載の流路デバイス１０によれば、薬剤感受性試験を迅速に行うことを可能にする流路デバイスを提供できる。
（第２項）第１項に記載の流路デバイス１０であって、前記本体部１３は第１の板材１１と第２の板材１２とを備え、前記マイクロ流路１７は第１の板材１１と第２の板材１２との界面に形成されもよい。
第２項に記載の流路デバイスによれば、マイクロ流路１７の形成が簡単にできる。
（第３項）第３項に記載の流路デバイス１０であって、所定の領域に複数の観察流路１７ａを接近して配置して観察部３０とし、複数の挿入体１４の各々の先端から前記観察部３０に至るまでの流路長が等しくされてもよい。
第３項に記載の流路デバイス１０によれば、検査液が観察部３０まで移動する時間を等しくすることができる。
（第４項）第３項に記載の流路デバイス１０であって、前記観察部３０の前記複数の観察流路１７ａは並列配置されてもよい。
第４項に記載の流路デバイス１０によれば、複数の観察ポイントを顕微鏡７の１つの視野内に収めやすくできる。そのため、複数の観察ポイントの比較がより容易にできるようになる。
（第５項）第１項から第４項のいずれかに記載の流路デバイス１０であって、前記細孔１６が延びる方向と前記観察流路１７ａとが直交していてもよい。
第５項に記載の流路デバイス１０によれば、観察流路１７ａで検査液を保持しやすくできる。
（第６項）第２の態様に係る試験装置は、光透過性を有するテーブル１と、前記テーブル１の下方に配置された光源８と、前記テーブル１上に位置決めされる試験容器２０の上方に配置された顕微鏡７と、を備え、前記試験容器２０は、ウェルプレート２と、前記ウェルプレート２の上に配置された第１項から第５項のいずれかに記載の流路デバイス１０とを備え、前記テーブル１は、Ｘ軸方向およびＹ軸方向の少なくとも一方に移動自在とされてよい。
第６項に記載の試験装置によれば、第１項から第５項のいずれかの流路デバイス１０を用いることにより、市販のウェルプレート２を用いた場合でも、早く安定的に形態観察することができる。
（第７項）第３の態様に係る試験方法は、ウェル２１を有するウェルプレート２内に存在する検査液を観察するための流路デバイス１０であって、主面を有する板状の本体部１３と、前記本体部１３に設けられ、前記ウェル２１内に挿入するための挿入体１４と、を備え、前記挿入体１４は、前記ウェル２１内の検査液を吸い上げ可能な寸法を有する細孔１６を備え、前記本体部１３は、主面方向に沿って延びる観察流路１７ａを備え、前記観察流路１７ａは前記細孔１６に連通する、流路デバイス１０を準備し、前記ウェル２１内で検査液を作る工程と、前記ウェルプレート２の上に前記流路デバイス１０を重ね合わせ、前記挿入体１４を前記検査液中に没入する工程と、少なくとも前記観察流路１７ａに前記検査液を移動させる工程と、前記観察流路１７ａを顕微鏡７で観察する工程と、を備えてよい。
第７項に記載の試験方法によれば、流路デバイス１０を用いることにより、市販のウェルプレート２を用いた場合でも、早く安定的に形態観察することができる。
１ テーブル
２ ウェルプレート
７ 対物レンズ
８ 光源
１０ 流路デバイス
１１ 第１の板材
１２ 第２の板材
１３ 本体部
１４ 挿入体
１６ 細孔
１７ マイクロ流路
１８ 排気孔
１９ 開口
２０ 試験容器
２１ ウェル
３０ 観察部
２ ウェルプレート
７ 対物レンズ
８ 光源
１０ 流路デバイス
１１ 第１の板材
１２ 第２の板材
１３ 本体部
１４ 挿入体
１６ 細孔
１７ マイクロ流路
１８ 排気孔
１９ 開口
２０ 試験容器
２１ ウェル
３０ 観察部
Claims (7)
- ウェルを有するウェルプレート内に存在する検査液を観察するための流路デバイスであって、
主面を有する板状の本体部と、
前記本体部に設けられ、前記本体部の前記主面に対して垂直な方向に沿って延び、前記ウェル内に挿入するための挿入体と、を備え、
前記挿入体は、前記ウェル内の検査液を吸い上げ可能な寸法を有する細孔を備え、
前記本体部は、前記細孔に連通し、前記本体部の主面方向に沿って延びる観察流路と、を備える
流路デバイス。 - 請求項１に記載の流路デバイスであって、
前記本体部は第１の板材と第２の板材とを備え、前記観察流路は第１の板材と第２の板材との界面に形成されている流路デバイス。 - 請求項２に記載の流路デバイスであって、
所定の領域に複数の観察流路を接近して配置して観察部とし、
複数の挿入体の各々の先端から前記観察部に至るまでの流路長が等しくされている流路デバイス。 - 請求項３に記載の流路デバイスであって、
前記観察部の前記複数の観察流路は並列配置されている流路デバイス。 - 請求項１から４のいずれかに記載の流路デバイスであって、
前記細孔が延びる方向と前記観察流路とが直交する流路デバイス。 - 光透過性を有するテーブルと、前記テーブルの下方に配置された光源と、前記テーブル上に位置決めされる試験容器の上方に配置された顕微鏡と、を備え、
前記試験容器は、ウェルプレートと、前記ウェルプレートの上に配置された請求項１から５のいずれか１項に記載の流路デバイスとを備え、
前記テーブルは、Ｘ軸方向およびＹ軸方向の少なくとも一方に移動自在とされる、
試験装置。 - ウェルを有するウェルプレート内に存在する検査液を観察するための流路デバイスであって、
主面を有する板状の本体部と、
前記本体部に設けられ、前記ウェル内に挿入するための挿入体と、を備え、
前記挿入体は、前記ウェル内の検査液を吸い上げ可能な寸法を有する細孔を備え、
前記本体部は、主面方向に沿って延びる観察流路を備え、
前記観察流路は前記細孔に連通する、流路デバイスを準備し、
前記ウェル内で検査液を作る工程と、
前記ウェルプレートの上に前記流路デバイスを重ね合わせ、前記挿入体を前記検査液中に没入する工程と、
少なくとも前記観察流路に前記検査液を移動させる工程と、
前記観察流路を顕微鏡で観察する工程と、
を備える試験方法。
Applications Claiming Priority (3)
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