JP6994729B1 - 変形性関節症又は靭帯若しくは腱の治療製剤、及びその製造方法。 - Google Patents
変形性関節症又は靭帯若しくは腱の治療製剤、及びその製造方法。 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6994729B1 JP6994729B1 JP2021528833A JP2021528833A JP6994729B1 JP 6994729 B1 JP6994729 B1 JP 6994729B1 JP 2021528833 A JP2021528833 A JP 2021528833A JP 2021528833 A JP2021528833 A JP 2021528833A JP 6994729 B1 JP6994729 B1 JP 6994729B1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- adrc
- filtrate
- cells
- osteoarthritis
- adipose tissue
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Virology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
[1]凍結融解処理によって破砕した、脂肪組織由来幹細胞破砕液の濾液を有効成分として含有する、変形性関節症又は靭帯若しくは腱損傷の治療製剤。
[2]前記濾液がHMGB1、Annexin A6及びHSP70からなる群から選ばれる少なくとも1種のタンパク質を含む、[1]に記載の変形性関節症又は靭帯若しくは腱損傷の治療製剤。
[3]さらに脂肪組織由来幹細胞を含有する、[1]又は[2]に記載の変形性関節症又は靭帯若しくは腱損傷の治療製剤。
[4]変形性関節症が変形性膝関節症である、[1]~[3]のいずれか1項に記載の変形性関節症又は靭帯若しくは腱損傷の治療製剤。
[5]以下の工程を含む、変形性関節症又は靭帯若しくは腱損傷の治療製剤の製造方法。
(1)脂肪組織由来幹細胞を凍結融解処理によって破砕する工程。
(2)工程(1)で得られた破砕液、又は前記破砕液を遠心処理して得られた上清をフィルター処理し、濾液を得る工程。
(3)工程(2)で得られた濾液を製剤化する工程。
変形性関節症は、関節を構成する骨の間にある軟骨が劣化により関節に痛みや腫れが生じ、最終的には関節の変形をきたす変形性疾患であり、全身のあらゆる関節で起こり得る。特に体重の負荷が大きい関節で起こりやすく、具体的には、頸部、腰、足の親指、股関節、膝関節などで変形性関節症が起こりやすい。なお、本発明の治療製剤は、特に変形性膝関節症に対して好適に用いられる。
「幹細胞」とは、自己複製能及び多分化能を有する未熟な細胞を意味する。幹細胞には、分化能力に応じて、体性幹細胞、胚性幹細胞、多能性幹細胞が挙げられる。
本発明において「脂肪組織由来幹細胞(ADRC)」は、多能性を維持している限りにおいて、当該体性幹細胞の培養(継代培養を含む)により得られる細胞も「脂肪組織由来幹細胞(ADRC)」に該当するものとする。通常、ADRCは、生体から分離された脂肪組織を出発材料とし、細胞集団(脂肪組織に由来する、ADRC以外の細胞を含む)を構成する細胞として「単離された状態」に調製される。ここでの「単離された状態」とは、その本来の環境(即ち生体の一部を構成した状態)から取り出された状態、即ち人為的操作によって本来の存在状態と異なる状態で存在していることを意味する。
脂肪組織は美容整形の際の脂肪吸引手術により吸引される組織片や、外科手術などの際に生体から切除される組織に含まれる切除脂肪組織から調製することができる。脂肪組織由来幹細胞は太い血管の周囲に存在するため脂肪吸引液よりも切除脂肪組織から多く得ることができる。一方、脂肪吸引液から幹細胞を調製したほうが、手術跡が小さく済みドナーの負担が小さい。
細胞集団は続いて遠心処理に供される。遠心処理による沈渣を沈降細胞集団(本明細書では「SVF画分」とも言う)として回収する。遠心処理の条件は、細胞の種類や量によって異なるが、例えば1~10分間、800~1500rpmが好ましい。なお、遠心処理に先立ち、酵素処理後の細胞集団を濾過等に供し、その中に含まれる酵素未消化組織等を除去しておくことがより好ましい。
SVF画分にはADRCの他、他の細胞成分(内皮細胞、間質細胞、血球系細胞、これらの前駆細胞等)が含まれるため、以下の選択培養を行い、SVF画分から不要な細胞成分を除去し、得られた細胞をADRCとして本発明に用いることが好ましい。
本発明においては、上記(3)の操作の代わりに又は上記(3)の操作の後に以下の低血清培養を行い、得られた細胞をADRCとして本発明に用いてもよい。
本発明の治療製剤は、脂肪組織由来幹細胞を破砕処理した破砕液を濾過して得られた濾液(ADRC濾液と言うこともある)を有効成分として含有する。
本発明の発明者らは、脂肪組織由来幹細胞それ自体ではなく、前記幹細胞の破砕処理後の濾液に、変形性関節症、又は靭帯若しくは腱の損傷を治癒する効果があることを見出した。
本発明における治療製剤は、以下の工程により製造することができる。ADRCの培養方法、破砕処理方法、フィルター濾過方法は前述した。
(1)脂肪組織由来幹細胞を破砕する工程。
(2)工程(1)で得られた破砕液、又は前記破砕液を遠心処理して得られた上清をフィルター処理し、濾液を得る工程。
(3)工程(2)で得られた濾液を製剤化する工程。
(a)脂肪組織由来幹細胞
(b)脂肪組織由来幹細胞を破砕処理して得られた破砕液
(c)(b)の破砕液を遠心処理して得られた上清
本発明の治療製剤の投与量は、使用目的、対象疾患、適用対象(レシピエント)の性別、年齢、体重、患部の状態等を考慮して適宜調製することができる。単回投与のときは2週間、連続的又は定期的に複数回投与することにしてもよい。複数回投与する際の投与間隔は特に限定されず、例えば1週間~2週間である。また、投与回数も特に限定されない。投与回数としては2回~10回が好ましい。
ヒト脂肪幹細胞(ロンザ社)を用いて、本明細書で述べた方法により濾液を調製した。具体的には、前記ヒト脂肪幹細胞を用いてメッセンプロRS培地で培養しADRCを増殖させた。なお、用いた培地の上清を培養上清とした。PBSを用いて濃度調製後(1×106個/ml)、-30℃で一晩おき,凍結させた。凍結した細胞液を4℃の冷蔵庫に一晩おき、融解させた。このようにして細胞を破砕後、遠心分離(290×g、5分)し、上清を回収した。次に、上清をセルロースアセテート膜のフィルター(ポアサイズ0.2μm)で濾過し、ADRC濾液(凍結融解)とした。凍結融解処理は、同じ方法で3回行い、その都度、後述する方法により各成分を計測した。
(1)で濃度調製 (1×106個/ml)したADRCを超音波処理(250W出力、10秒間の破砕と20秒間の休止を10分間繰り返す)(コスモバイオ社のBIORUPTOR(UCD-250)を使用)した後、遠心処理(290×g、5分)した。遠心処理後の上清をセルロースアセテート膜のフィルター(ポアサイズ0.2μm)で濾過し、ADRC濾液(超音波破砕)とした。
ADRC濾液は前述する方法で調製した、1×106個/mlのものを使用した。
(3.1)HMGB1の定量方法
HMGB1 ELISA Kit ARG81351(Arigo Biolaboratories Corporation)(以下この項において「Kit」という。)を使用して濾液中の含有量を計測した。
(1)Kit内のマイクロプレートにStandard、zero controlと濾液を1well当たり50μl 入れた。
(2)(1)にAssay Bufferを1well当たり50μlずつ入れ、シールをして4℃で1晩置いた。
(3)well内の液を捨て、冷やした350μl の1×Wash Bufferをwellに入れ、3回洗浄した。
(4)100μlの1×HRP-antibody conjugateをwellに入れ、シールをして37℃で1時間置いた。
(5)(3)を繰り返した。
(6)100μlの1×TMB substrate をwellに入れ、室温で10分置いた。
(7)50μlの1×Stop solution をwellに入れた。
(8)マイクロプレートリーダーで450nmの波長で吸光度を測定した。
(9)Standardの測定結果より、検量線を引き、検量線の数式に濾液の吸光度値を代入し、濃度を求めた。
Human Annexin A6 (ANXA6) ELISA Kit EK12650(Signalway Antibody)(以下この項において「Kit」という。)を使用して濾液中の含有量を計測した。
(1)Kit内のマイクロプレートにStandardと濾液を1well当たり100μl 入れた。
(2)シールをして37℃で2時間置いた。
(3)well内の液を捨てた。
(4)100μlのDetection Reagent A working solutionをwellに入れ、シールをして37℃で1時間置いた。
(5)well内の液を捨て、300μl の1×Wash Solutionをwellに入れ、3回洗った。
(6)100μlのDetection Reagent B working solutionをwellに入れ、シールをして37℃で1時間置いた。
(7)(5)の操作を5回繰り返した。
(8)90μlのSubstrate Solutionをwellに入れ、37℃で15~25分置いた。
(9)50μlのStop Solution をwellに入れた。
(10)マイクロプレートリーダーで450nmの波長で吸光度を測定した。
(11)Standardの測定結果より、検量線を引き、検量線の数式に濾液の吸光度値を代入し、濃度を求めた。
Human HSP70 ELISA Kit BMS2087(invitrogen)(以下この項において「Kit」という。)を使用して濾液中の含有量を計測した。
(1)Kit内のマイクロプレートに50μlのSample Diluentと50μlの濾液をwellに入れた。Standard dilutionはKitに添付の説明書に従い調製した。
(2)粘着フィルムで覆い、室温で2時間置いた。
(3)well内の液を捨て、400μlのWash Bufferをwellに入れ、6回洗った。
(4)100μlのBiotin-Conjugateを加え、粘着フィルムで覆い室温で1時間置いた。
(5)well内の液を捨て400μlのWash Bufferをwellに入れ、6回洗った。
(6)100μlのStreptavidin-HRPをwellに入れ、粘着フィルムで覆い室温に30分置いた。
(7)well内の液を捨て400μlのWash Bufferをwellに入れ、6回洗った。
(8)100μlのTMB Substrate Solutionをwellに入れ、室温で30分置いた。
(9)100μlのStop Solution をwellに入れた。
(10)マイクロプレートリーダーで450nmの波長で吸光度を測定した。
(11)Standardの測定結果より、検量線を引き、検量線の数式に濾液の吸光度値を代入し、濃度を求めた。
ADRC濾液を添加することによるADRC活性の効果を検討した。
(1)6ウェルプレート(BD Falcon社)にヒトADRCs(ロンザ社)を播種し((1.5~2.0 x 105細胞/ウェル)、CO2 5%、37℃で培養した。培地にはMesenPRO(Thermo Fisher)を使用した。
(2)コンフルになったことを確認し(2日後)、上清を除去した。
(3)2ウェルに50%生食を添加した培地、2ウェルに50%のADRC濾液(凍結融解)(1×106個/mL濃度の濾液を使用)を添加した培地を入れ、培養を継続し、24h後に上清を除去した。
(4)冷やしたPBSをウェルに入れ、洗い、PBSを除去した。
(5)Lysis Buffer5mLにprotease inhibitor 50μL添加したものを準備した。
(6)冷やした(5)を0.2mL /well入れた。
(7)スクレーパーを使い、ウルトラフリー(Merck)に回収し、4℃で10~15分置いた。
(8)遠心器(1200g 4min)にかけ、測定液を回収した。
(9)MILLIPLEX MAP Multi-Pathway Magnetic Bead 9-Plex - Cell Signaling Multiplex Assay(Merck)を使用し、測定液中のシグナル(median fluorescent intensity (MFI))を測定した。
Isoflurane 麻酔下 SLc:SD 雄性ラット(7 週齢)の右膝関節内側側副靭帯及び内側半月板を切除した(MMT)(以下、半月板損傷モデルともいう)。
本発明のADRC濾液(凍結融解)を所定量含む治療製剤の投与後一定期間経過した、半月板損傷モデルの左右の足にかかる体重を、Incapacitance Analogesia Meter(Model:57210)を用いて測定し、その差を計算した。具体的には、ホルダーにモデル動物を入れ、2枚のセンサープレートの上に置いた。モデル動物は痛みのある肢に体重がかからないような体勢をとる。動物が左右の後肢にかけている体重を2枚のセンサーで別々に測定することで、痛みのある肢をかばっている状態を数値化する。正常モデル動物であれば、片方の肢をかばう必要がないので、両方の後肢に均等に体重がかかるため、左右の荷重差は0である。ラットの一方の後肢の組織を傷つけると、センサーにかかる体重配分に変化が生じ、損傷した後肢にかかる重量が小さくなるため、左右の荷重差は大きくなる。
本発明のADRC濾液(凍結融解)を所定量含む治療製剤の投与後一定期間経過した、半月板損傷モデルの膝骨のCT画像を3D画像解析ソフトAZE(キヤノンメディカルシステムズ)によって断面画像を切り出し、骨硬化度を確認した。
本発明のADRC濾液(凍結融解)を所定量含む治療製剤の投与後一定期間経過した、半月板損傷モデルの右膝を含めた大腿骨、脛骨を摘出して下記手順で病理組織を作成した。
1.ミクロトームを用いて厚さ4μmのパラフィン切片を作製した。
2.パラフィン切片を以下の手順によりHE染色した。
(1)脱パラフィン後水洗した。
(2)ヘマトキシリン液につけて、5分置いた。
(3)20分間水洗した。
(4)エオジンアルコールにつけて、3分置いた。
(5)脱水、透徹し、封入した。
凍結融解破砕をしたADRC濾液、超音波破砕をしたADRC濾液と、ADRCを培養した上清(培養上清)中のHMGB1、AnnexinA6及びHSP70の含有量を前述した定量法に従い定量した。結果を図5~7に示す。損傷部位の修復促進や軟骨保護に寄与すると考えられているHMGB1及びHSP70と、炎症緩和に寄与すると考えられているAnnexinA6が、培養上清に比べ、ADRC破砕後の濾液中に大量に含まれていることが分かった。また、超音波破砕したADRC濾液に、凍結融解破砕をしたADRC濾液よりも多量のAnnexinA6が含まれていた。なお、濾液又は培養上清1ml当たりのHMGB1、AnnexinA6及びHSP70の含有量は、濾液又は培養上清1ml当たりのタンパク質の量で除して、厳密な比較を可能にした。
前述した方法に従い、ADRC濾液添加によるADRC活性の効果を検討した結果を図8に示す。ADRCに、ADRC濾液を添加することにより、8つの細胞シグナルの分泌が促進された。これらの物質が、毛細血管の血流増加、抗炎症作用の向上、及びADRC細胞の活性化又は増殖を促進すると考えられるため、これら効果を高める手段として、本発明の濾液とADRCを接触する状態を形成させることが有効であることが示唆された。より具体的には、本発明の治療製剤を投与する際には、ADRCの併用投与、あるいは本発明の治療製剤中にADRCを含むと、より効果的に膝組織損傷部位の修復を行うことができると考えられる。
右膝半月板損傷モデルを用い、右膝に下記試料を50μl注入した。注入後2週間での左右の膝荷重差試験を行った(各n=4)。
ADRC注入群:5×104個のADRC
濾液(凍結融解)注入群:5×104個相当のADRCの濾液(1×106個/mlの濃度の濾液を使用)
濾液(凍結融解)+ADRC注入群:5×104個相当のADRCの濾液(1×106個/mlの濃度の濾液を使用)と5×104個のADRC
右膝半月板損傷モデルを用い、試験3と同様に右膝に試料を50μl注入した。注入後2週間での、モデル動物の膝骨のCT画像を3D画像解析した(n=1)。
右膝半月板損傷モデルを用い、試験3と同様に右膝に試料を50μl注入した。注入後2週間での、モデル動物右膝半月板損傷モデルの右膝について、先述した方法にて染色して病理組織学的検査を行った(n=1)。
2 関節軟骨
3 軟骨下骨
4 骨硬化部
5 矢状面から見た脛骨の中央付近に断面位置
6 上脛骨骨端部のエッジと軟骨下骨化硬化部分を含めた領域
7 軟骨遊離体
8 軟骨が露出している箇所
Claims (5)
- 凍結融解処理によって破砕した、脂肪組織由来幹細胞破砕液の濾液を有効成分として含有する、変形性関節症又は靭帯若しくは腱損傷の治療製剤。
- 前記濾液がHMGB1、Annexin A6及びHSP70からなる群から選ばれる少なくとも1種のタンパク質を含む、請求項1に記載の変形性関節症又は靭帯若しくは腱損傷の治療製剤。
- さらに脂肪組織由来幹細胞を含有する、請求項1又は2に記載の変形性関節症又は靭帯若しくは腱損傷の治療製剤。
- 変形性関節症が変形性膝関節症である、請求項1~3のいずれか1項に記載の変形性関節症又は靭帯若しくは腱損傷の治療製剤。
- 以下の工程を含む、変形性関節症又は靭帯若しくは腱損傷の治療製剤の製造方法。
(1)脂肪組織由来幹細胞を凍結融解処理によって破砕する工程。
(2)工程(1)で得られた破砕液、又は前記破砕液を遠心処理して得られた上清をフィルター処理し、濾液を得る工程。
(3)工程(2)で得られた濾液を製剤化する工程。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/JP2021/006770 WO2022180661A1 (ja) | 2021-02-24 | 2021-02-24 | 変形性関節症又は靭帯若しくは腱の治療製剤、及びその製造方法。 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP6994729B1 true JP6994729B1 (ja) | 2022-02-10 |
JPWO2022180661A1 JPWO2022180661A1 (ja) | 2022-09-01 |
Family
ID=80856374
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021528833A Active JP6994729B1 (ja) | 2021-02-24 | 2021-02-24 | 変形性関節症又は靭帯若しくは腱の治療製剤、及びその製造方法。 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6994729B1 (ja) |
WO (1) | WO2022180661A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2024005133A1 (ja) * | 2022-06-30 | 2024-01-04 | 国立大学法人大阪大学 | 半月板の治療薬 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019142831A (ja) * | 2018-02-23 | 2019-08-29 | 国立大学法人旭川医科大学 | 勃起不全治療剤 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110856752A (zh) * | 2018-08-23 | 2020-03-03 | 青岛西凯生物技术有限公司 | 一种自体脂肪干细胞+prp治疗骨性关节炎的实验方法 |
-
2021
- 2021-02-24 JP JP2021528833A patent/JP6994729B1/ja active Active
- 2021-02-24 WO PCT/JP2021/006770 patent/WO2022180661A1/ja active Application Filing
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019142831A (ja) * | 2018-02-23 | 2019-08-29 | 国立大学法人旭川医科大学 | 勃起不全治療剤 |
Non-Patent Citations (14)
Title |
---|
Cytotherapy, Vol.21 No.5, 2019, p.S83-S84(Abstract Number: 277) |
CYTOTHERAPY, VOL.21 NO.5, 2019, P.S83-S84(ABSTRACT NUMBER: 277), JPN7021003379, ISSN: 0004619923 * |
J Pharmacol Exp Ther., Vol.370, p.772-785 |
J PHARMACOL EXP THER., VOL.370, P.772-785, JPN6021033141, ISSN: 0004619921 * |
Journal of Extracellular Vesicles, Vol.8 Supplement 1, 2019, p.216-217(Abstract Number: PF08.06.) |
JOURNAL OF EXTRACELLULAR VESICLES, VOL.8 SUPPLEMENT 1, 2019, P.216-217(ABSTRACT NUMBER: PF08.06.), JPN6021033140, ISSN: 0004619920 * |
Stem Cell Research & Therapy, 2020, Vol.11, Article ID; 521(p.1-15) |
STEM CELL RESEARCH & THERAPY, 2020, VOL.11, ARTICLE ID; 521(P.1-15), JPN6021033142, ISSN: 0004619922 * |
日本消化器病学会雑誌, Vol.115臨時増刊号, 2018, p.A711(Abstract Number: 消P-87) |
日本消化器病学会雑誌, VOL.115臨時増刊号, 2018, P.A711(ABSTRACT NUMBER: 消P-87), JPN6021033147, ISSN: 0004619925 * |
日本消化器病学会雑誌, Vol.116臨時増刊号, 2019, p.A87 Abstract Number: PD1-10 |
日本消化器病学会雑誌, VOL.116臨時増刊号, 2019, P.A87 ABSTRACT NUMBER: PD1-10, JPN6021033151, ISSN: 0004619926 * |
日本関節病学会誌, Vol.32 No.3, 2013, p.290(Abstract Number: 1-D-9) |
日本関節病学会誌, VOL.32 NO.3, 2013, P.290(ABSTRACT NUMBER: 1-D-9), JPN7021003380, ISSN: 0004619924 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2024005133A1 (ja) * | 2022-06-30 | 2024-01-04 | 国立大学法人大阪大学 | 半月板の治療薬 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2022180661A1 (ja) | 2022-09-01 |
JPWO2022180661A1 (ja) | 2022-09-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5240715B2 (ja) | 脂肪組織由来多分化能幹細胞を含有する細胞製剤 | |
Lange-Consiglio et al. | Investigating the efficacy of amnion-derived compared with bone marrow–derived mesenchymal stromal cells in equine tendon and ligament injuries | |
JP6995752B2 (ja) | 細胞拡大培養方法及び治療用組成物 | |
KR20140040696A (ko) | 간엽줄기세포 및 면역조절 t 세포를 유효성분으로 포함하는 면역질환의 예방 또는 치료용 세포치료제 조성물 | |
US9650608B2 (en) | Activating adipose-derived stem cells for transplantation | |
Landau et al. | proposed methods to improve the survival of adipose tissue in autologous fat grafting | |
CN107073041A (zh) | 糖尿病性皮肤溃疡治疗的多功能性干细胞 | |
JP2020172536A (ja) | 創傷治癒のための幹細胞 | |
JP2023060125A (ja) | 表皮水疱症の治療剤 | |
JP2022529022A (ja) | 出産組織由来の生成物並びにその調製及び使用 | |
KR20160105363A (ko) | 건 또는 인대 손상 치유를 위한 자가 및 동종의 지방유래 중간엽줄기세포 조성물 및 이의 제조방법 | |
KR20170108325A (ko) | 성체줄기세포의 연골세포 분화용 조성물 및 분화 방법 | |
JP6994729B1 (ja) | 変形性関節症又は靭帯若しくは腱の治療製剤、及びその製造方法。 | |
JP2019142831A (ja) | 勃起不全治療剤 | |
US20180344775A1 (en) | Therapeutic agent for liver disease containing stromal cells derived from adipose tissue and method for producing the same | |
AU2010306868B2 (en) | Stem cells for musculoskeletal tissue repair | |
AU2016244319B2 (en) | Cell free preparation and uses thereof | |
WO2022018897A1 (ja) | 皮膚保護剤 | |
AU2013204930C1 (en) | Therapeutics using multiple injections of cells | |
WO2024009990A1 (ja) | 放射線障害防護剤 | |
WO2020111249A1 (ja) | 末梢血流障害の治療剤 | |
KR102094733B1 (ko) | 닭 골수 유래 골·연골전구세포 배양액을 유효성분으로 포함하는 연골 분화 유도용 조성물 | |
JP2022120698A (ja) | 間葉系幹細胞を含む細胞集団を含有する軟部組織再生用医薬組成物 | |
JP2023002772A (ja) | 脂肪細胞および細胞分泌物を使用する治療 | |
CA3213442A1 (en) | Process for manufacture of a composition for the treatment of osteoarthritis in a subject |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210703 |
|
A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20210703 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210825 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210923 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20211019 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211112 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20211126 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20211205 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6994729 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313117 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |